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Este estudo transversal, realizado em um hospital oncológico em Goiânia, objetivou caracterizar a prevalência da colonização oral e suscetibilidade antimicrobiana de Pseudomonas spp. isoladas da saliva de profissionais da saúde. Micro-organismos foram submetidos a testes bioquímicos, perfil de sensibilidade e detecção fenotípica. Dos 76 participantes colonizados por bastonetes Gram negativos, 12 (15,8%) albergavam Pseudomonas spp. Todos os isolados, P. aeruginosa (75,0%), P. stutzeri (16,7%) e P. fluorescens (8,3%), foram resistentes à cefoxitina e, portanto, possíveis produtores de AmpC. Os resultados são clinicamente relevantes e enfatizam a importância da vigilância para minimizar a disseminação e a multirresistência bacteriana. This cross-sectional study, performed in an oncology hospital in Goiania, aimed to characterize the prevalence of oral colonization and antimicrobial susceptibility of Pseudomonas spp. isolated from the saliva of healthcare workers. Microorganisms were subjected to biochemical tests, susceptibility profile, and phenotypic detection. Of 76 participants colonized with Gram negative bacilli, 12 (15.8%) harbored Pseudomonas spp. Of all isolates, P. aeruginosa (75.0%), P. stutzeri (16.7%), and P. fluorescens (8.3%), were resistant to cefoxitin, and therefore likely to be AmpC producers. The results are clinically relevant and emphasize the importance of surveillance to minimize bacterial dissemination and multiresistance.

An attempt was made to evaluate microbiological quality of horticultural crops grown organically. Three species of vegetables were used, lettuce (Lactuva sativa), radish (Raphanus sativus) and spinach (Tetragonia expansa), grown organically, in fertile soil. Six different treatments were applied: mineral fertilizer, chicken, cow, and pig manure, chicken litter and cow manure, in association with a liquid foliar biofertilizer. These crops were handled according to correct agronomic practices for growing crops organically for commercial purposes. Samples were examined for the Most Probable Number (MPN/g/mL) of total and fecal coliforms and to detect the presence of Escherichia coli and Salmonella spp. All analyzed samples were considered acceptable for consumption, as Salmonella spp. was not detected. However, 63.3%, 50.0%, and 23.3% of the samples of lettuce, radish and spinach, respectively, contained >10² total coliforms/g of product. None of the samples of spinach or radish presented >10² fecal coliforms/g, and only 6.6% of lettuce samples contained >10² fecal coliforms/g. The presence of E. coli was confirmed in one sample of spinach, cultivated with cow manure. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a qualidade microbiológica de hortaliças orgânicas produzidas sob diferentes condições. Três espécies de vegetais, alface (Lactuva sativa), rabanete (Raphanus sativus) e espinafre (Tetragonia expansa), foram cultivadas no sistema orgânico, em solo fertilizado com seis tratamentos diferentes: adubo mineral, estercos de galinha, bovino e suíno, cama de frango e esterco bovino associado com biofertilizante líquido de aplicação foliar. O cultivo das hortaliças foi feito de acordo com as práticas agronômicas recomendadas para o sistema orgânico em escala comercial. Das hortaliças cultivadas, foram coletadas amostras para a determinação do Número Mais Provável de coliformes totais e termotolerantes e detecção da presença de Escherichia coli e Salmonella spp. Todas as amostras analisadas foram consideradas apropriadas para o consumo humano, de acordo com a legislação brasileira em vigor, uma vez que, em nenhuma delas foi detectada a presença de Salmonella spp. Entretanto, 63,3%, 50,0% e 23,3%, respectivamente, das amostras de alface, rabanete e espinafre apresentaram contagens de coliformes totais >100/g. Em nenhuma das amostras de rabanete e espinafre o nível de coliformes termotolerantes foi >100/g e em somente 6,6% das amostras de alface foi maior que 100/g. E. coli foi detectada em uma amostra de espinafre produzido em solo fertilizado com esterco bovino.

Condições crônicas associadas à inflamação, como obesidade (OB), diabetes mellitus (DM) e tuberculose (TB), são problemas sérios de saúde pública. A epidemia de OB está aumentando em todo o mundo; e a prevalência de OB entre adultos quase dobrou em entre 1980 e 2017. Como o DM está associado à OB, a prevalência de diabetes também aumentou no mesmo período, chegando a 9% da população adulta em todo o mundo, totalizando 422 milhões de pessoas. Estudos vem demonstrando o DM como fator de risco para o desenvolvimento de tuberculose, levantando a hipótese da existência de associação entre OB, DM e a TB. Já foi mostrado que as proporções de subpopulações de monócitos circulantes se alteram durante a OB, DM e a TB, no entanto, nenhum trabalho avaliou as subpopulações de monócitos na OB grave/DM e se existirem características que podem estar associada à maior susceptibilidade à TB. Na primeira parte deste trabalho demonstramos, em um estudo de corte transversal, com indivíduos com OB grave (IMC acima de 35kg/m2) portadores (OBDM) ou não (OB) de DM (n=50 indivíduos por grupo) que a população não-clássica de monócitos de indivíduos OBDM apresenta características similares às dos monócitos dos indivíduos com TB pulmonar ativa, e que monócitos de indivíduos OBDM e com TB são mais susceptíveis à infecção por Mycobacterium tuberculosis (Mtb), o que sugere que a semelhança fenotípica e a susceptibilidade dos monócitos possam ser fatores que contribuem para a associação entre tuberculose e obesidade. Uma vez que os monócitos/macrófagos se alteram na obesidade e essas mudanças interferem na habilidade de controlar Mtb, decidimos avaliar se o desenvolvimento de obesidade poderia alterar a capacidade de resgatar a resposta imune específica após a vacinação com M. bovis BCG. Logo, na segunda parte deste trabalho, avaliamos se a obesidade interfere na resposta à vacina BCG, vacinando camundongos C57BL/6 jovens e induzindo a obesidade por dieta hipercalórica e analisando a resposta imune após o desafio com Mtb. A obesidade induzida após a vacinação com BCG não interferiu no resgate de linfócitos TCD4+IFNγ+ após o desafio com Mtb. No entanto, essa resposta ao Mtb foi reduzida. Estes resultados sugerem que a vacinação de animais não obesos induz respostas imunes vacinais que não se alteram com as modificações metabólicas induzidas pela obesidade. Chronic conditions associated with inflammation, such as obesity (OB), diabetes mellitus (DM) and tuberculosis (TB), are serious public health problems. The OB epidemic is increasing worldwide; and the prevalence of adult obesity nearly doubled between 1980 and 2017. Since DM is associated with diabetes, the prevalence of diabetes also increased over the same period, reaching 9% of the adult population worldwide, totaling 422 million people. Studies have been demonstrating DM as a risk factor for the development of tuberculosis, raising the hypothesis of an association between OB, DM and TB. Circulating monocyte subpopulation proportions have been shown to change during OB, DM, and TB, however no studies have evaluated monocyte subpopulations in severe OB / DM and if there are characteristics that may be associated with increased susceptibility to TB. In the first part of this study we demonstrated, in a cross-sectional study, with individuals with severe OB (BMI over 35kg / m2) with or without OB (DM) (n = 50 individuals per group) that the population did not of monocytes from OBDM individuals presents similar characteristics to monocytes from individuals with active pulmonary TB, and monocytes from OBDM and TB individuals are more susceptible to Mycobacterium tuberculosis (Mtb) infection. This suggests that phenotypic similarity and susceptibility of monocytes may be factors contributing to the association between tuberculosis and obesity. Since monocytes/macrophages change in obesity and these changes interfere with the ability to control Mtb, we decided to assess whether the development of obesity could alter the ability to rescue the specific immune response following M. bovis BCG vaccination. Thus, in the second part of this paper, we evaluated whether obesity interferes with BCG vaccine response by vaccinating young C57BL / 6 mice and inducing obesity by hypercaloric diet and by analyzing the immune response after Mtb challenge. Obesity induced after BCG vaccination did not interfere with TCD4 + IFNγ + lymphocyte rescue after Mtb challenge. However, this response to Mtb has been reduced. These results suggest that vaccination of non-obese animals induces vaccine immune responses that do not change with obesity induced metabolic changes. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

Mycobacterium tuberculosis é o agente etiológico da tuberculose (TB), que provocou em 2015, 10,4 milhões de novos casos e 1,8 milhões de mortes registrados mundialmente. Para conseguir evadir as barreiras de defesa do hospedeiro, a bactéria evoluiu criando mecanismos que modulam ou modificam o ambiente no qual ela está inserida, sendo a secreção de moléculas bioativas uma estratégia eficiente para isso. Dentre as moléculas bioativas produzidas por M. tuberculosis, as proteases desempenham papel crucial para o sucesso da infecção, pois estão envolvidas em diversos processos biológicos importantes para a bactéria, tais como replicação do DNA, proliferação celular, processamento de antígeno, entre outros. Deste modo, as proteases se apresentam como alvo para novas drogas anti-TB ou como possíveis antígenos vacinais. Com isso, o foco deste trabalho foi clonar e expressar o produto do gene Rv2467, uma suposta protease com atividade aminopeptidase de M. tuberculosis. Para tanto foi realizado o desenho dos oligonucleotídeos iniciadores para amplificar o gene Rv2467 por Reação da Polimerase em Cadeia (PCR) que foi clonado no vetor pGEM-T easy. O inserto correspondendo ao gene Rv2467 foi retirado do vetor de clonagem e inserido no vetor de expressão pET-28a. A proteína recombinante foi expressa a partir do plasmídeo recombinante pET-28a/Rv2467 em Escherichia coli BL21 (DE3) pLysS através de indução com IPTG. A proteína recombinante, apresentando o tamanho esperado de 94 KDa, foi expressa e submetida ao processo de purificação por cromatografia de afinidade ao níquel. A purificação parcial da proteína recombinante somente foi possível de forma desnaturada, sendo que as tentativas de obtê-la de forma nativa para testar atividade resultaram improdutivas. O baixo rendimento de purificação da proteína recombinante levou a suspeitar da possível perda da cauda de histidina e, para tanto, realizou-se um Western Blotting com anticorpo anti-histidina. Ao ver a revelação na membrana verificou-se que o anticorpo não reconheceu a proteína Rv2467 o que impossibilitou obter a proteína pura não podendo seguir para futuros testes de caracterização. Além de testes para obter a proteína em sua forma nativa foi escrito um manuscrito científico de revisão da literatura sobre proteases de Mycobacterium tuberculosis envolvidas no mecanismo de virulência. Mycobacterium tuberculosis is the etiological agent of tuberculosis (TB), which is responsible in 2015 for 10.4 million new cases and 1.8 million casualties registered worldwide. To be able to avoid the defense barriers of the host, the bacteria evolved mechanisms to modulate or change the environment it is in, thereby, the secretion of bioactive molecules is an efficient strategy to do so. Among the bioactive molecules produced by M. tuberculosis, proteases have a crucial role to a successful infection, as they are involved in several important biological processes of the bacteria, such as DNA replication, cell proliferation and antigen processing. Thus, proteases are good targets for the development of new anti-TB drugs or as possible vaccine antigens. This work aimed to clone and express the gene Rv2467, a putative protease with aminopeptidase activity from M. tuberculosis. To achieve this goal, oligonucleotides design were made to amplify the gene Rv2467 by Polimerase Chain Reaction (PCR), which was cloned in the pGEM-T easy vector. The clone Rv2467 gene was then transfere to the expression vector pET-28a. The recombinant protein was expressed from the recombinant plasmid pET-28a/Rv2467 in Escherichia coli BL21 (DE3) pLysS through induction with IPTG. The recombinant protein, with the expected size of 94KDa, was expressed and subjected to the purification process by nickel affinity chromatography. The recombinant protein was partially purified only in its denatured form. The low yield of purified recombinant protein raised the possibility of histidine tail loss. To verify that, Western Blotting with anti-histidine antibody was made and it was verified that the antibody did not recognize the target Rv2467 protein, which made it impossible to acquire the pure protein, not allowing further characterization tests. Additionally, a literature review was performed about Mycobacterium tuberculosis proteases that are involved in virulence mechanisms to make a manuscript to be submitted to a scientific journal Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq

A listeriose é uma infecção bacteriana, provocada por Listeria monocytogenes, uma bactéria transmitida principalmente pela ingestão de alimentos contaminados. É o principal agente responsável pelas infecções alimentares com baixa taxa de morbidade, porém quando a infecção ocorre em imunodeprimidos os índices de mortalidade são elevados, representando um importante problema de saúde pública. Os métodos disponíveis para a identificação da presença de Listeria monocytogenes incluem o isolamento da bactéria através de cultivo convencional, que consiste em um método laborioso, demorado e de baixa sensibilidade e métodos moleculares e/ou imunológicos, normalmente complexos, de custo elevado, requerendo equipamentos e pessoal treinado. Portanto, a busca por métodos alternativos, rápidos, sensíveis e específicos para a detecção da presença de Listeria monocytogenes em alimentos, é útil e necessária para prevenção da infecção e de grande valia para reduzir a taxa de mortalidade nos imunodeprimidos, bem como, viabilizar a vigilância epidemiológica desta enfermidade. Os objetivos do trabalho foram: Desenvolver teste imunocromatográfico de fluxo lateral para identificação de L. monocytogenes em alimentos; Avaliar o desempenho do teste imunocromatográfico de fluxo lateral utilizando amostras de alimentos naturalmente e artificialmente contaminados com L. monocytogenes. Como agente de detecção, foi impregnado à fibra de vidro o monoclonal MAb-2D12 anti-internalina-A conjugado ao ouro coloidal. Como agente de captura, foi sensibilizado, em papel de nitrocelulose, a linha teste com anticorpo policlonal anti-internalina-B, e na linha controle com proteína A, para validar a atividade do agente de detecção. Inóculos de cepas padrões de Listeria monocytogenes foram utilizados para avaliação da detecção Listeria no teste proposto. Como controle negativo, utilizamos cepas de Listeria innocua, Enterobacter sp. e Bacillus cereus. Foi obtido positividade em protótipos de testes rápidos sensibilizados com policlonal anti-InlB. Observou-se positividade em amostras contendo meio de cultura e a bactéria recém cultivada, validando a metodologia empregada no desenvolvimento do teste. A capacidade de detecção do teste foi de 2x10 4 UFC/mL. Listeriosis is a bacterial infection caused by Listeria monocytogenes, a bacterium transmitted mainly by the ingestion of contaminated food. It is the main responsible for food infections with low morbidity rate, but when contamination occurs in immunosuppressed the mortality rates are high, representing an important public health problem. Methods available for identification of the presence of Listeria monocytogenes include isolation of the bacterium through conventional culture, laborious, time-consuming and low sensitivity method, and usually complex and costly molecular and / or immunological methods requiring trained personnel and equipment. Therefore, the search for rapid, sensitive and specific methods for detecting the presence of Listeria monocytogenes in foods is useful and necessary for infection prevention and great value to reduce the mortality rate in the immunocompromised as well as to enable the epidemiological surveillance of this disease. The objectives of the study were: To develop lateral flow immunochromatographic test for the identification of L. monocytogenes in foods; To evaluate the performance of the lateral flow immunochromatographic test using food samples naturally and artificially contaminated with L. monocytogenes. As the detection agent, were impregnated glass fiber with anti-internalin-A MAb-2D12 conjugated to colloidal gold. As a capture agent, were sensitized, on nitrocellulose paper, the test line with polyclonal anti-internalin-B antibody, and in the control line with protein A, to validate the activity of the detection agent. Inoculations of standard strains of Listeria monocytogenes were used for evaluation of the Listeria detection in the proposed test. As a negative control, we used strains of Listeria innocua, Enterobacter sp. and Bacillus cereus. Positivity was obtained in prototypes of rapid tests sensitized with Polyclonal Anti-InlB. Positivity was observed in samples containing culture medium and newly cultured bacteria, validating the methodology used in the development of the test. The detection capacity of the test at D concentration is 2x10 4 CFU / mL. Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq

Objetos contaminados por micro-organismos são denominados fômites. Vários estudos relacionam fômites como fontes de disseminação de micro-organismos. Este estudo objetivou isolar e identificar Bastonetes Gram Negativos (BGN) de uma linha de transporte público coletivo da cidade de Goiânia – GO, caracterizar por métodos fenotípicos e genotípicos o perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos e analisar o perfil de macrorrestrição dos isolados. As amostras das superfícies das barras fixas dos ônibus e as catracas das plataformas e terminais da linha Leste-Oeste foram coletadas com swab e enviadas para o Laboratório de Bacteriologia Aplicada do IPTSP-UFG. Após o cultivo dos BGN, as espécies foram identificadas por PCR e submetidas ao Teste de Suscetibilidade aos Antimicrobianos (TSA). O DNA plasmidial das cepas resistentes aos betalactâmicos foi extraído para a pesquisa dos genes codificadores de betalactamases por PCR. O perfil de macrorrestrição das cepas de P. mirabilis foi realizado por PFGE utilizando a enzima XbaI. Foram coletados 852 swabs representando uma prevalência de 46,0% de BGN nas superfícies avaliadas. As espécies identificadas foram: A. baumannii (40,8 %), H. alvei (30,9 %), P. mirabilis (26,1 %) e E. coli (2,2 %). O TSA revelou 31 (7,9 %) isolados multidroga resistentes. Foram detectados os genes blaTEM e o gene blaCTX. Observamos a presença de oito clusters e três clones entre as espécies P. mirabilis. Este estudo comprova que as superfícies presentes no sistema de transporte público coletivo podem ser fontes de BGN multidroga resistentes e que essas bactérias possuem potencial de dispersar e permanecer em diferentes ambientes comunitários. Objects contaminated with microorganisms are denominated fomites. A number of studies have reported fomites as sources of microorganism dissemination. This study aimed to isolate and identify Gram Negative Bacilli (GNB) from a collective public transport line in the city of Goiânia, GO, to characterize by phenotypic and genotypic methods in the antimicrobial susceptibility profile and to analyze the macrorrestricity profile of the isolated. As samples of the fixed bars surfaces of the buses and ratchets of the platforms and terminals of “Leste-Oeste” line were collected with swab and sent to the Laboratory of Applied Bacteriology of the IPTSP-UFG. After the GNB culture, as species were identified by PCR and submitted to the Antimicrobial Susceptibility Test (AST). The plasmid DNA of the strains resistant to beta-lactams was extracted for the search of genes encoding beta-lactamases by PCR. The macrorrestriction profile of P. mirabilis strains was performed by PFGE using the XbaI enzyme. A total of 852 swabs were collected representing a prevalence of 46.0% of GNB in the evaluated surfaces. The species identified were A. baumannii (40.8%), H. alvei (30.9%), P. mirabilis (26.1%) and E. coli (2.2%). The AST revealed 31 (7.9%) multidrug resistant isolates. The blaTEM and blaCTX genes were detected. We observed a presence of eight clusters and three clones among the species P. mirabilis. This study proves that the surfaces present in the collective public transport system can be sources of resistant multi-drug GNB and these bacteria have the potential of dispersion and permanence in different community environments. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

A ingestão de alimentos contaminados por bactérias do gênero Campylobacter resultam em campilobacteriose em humanos. Esta é uma das causas mais comuns de diarreia nos Estados Unidos e União Europeia. Um dos maiores reservatórios deste micro-organismo são produtos avícolas, sendo sua carne, crua ou mal cozida, a principal fonte de contaminação para o homem. As espécies mais prevalentes envolvidas nas infecções são Campylobacter jejuni, Campylobacter coli e Campylobacter lari que podem contaminar as carcaças durante o abate e a manipulação de frangos. O objetivo desse estudo foi determinar a prevalência de Campylobacter termotolerantes em carcaças de frango refrigeradas e posteriormente congeladas comercializadas no município de Goiânia, Goiás. Com o apoio do Departamento de Vigilância Sanitária Municipal e Agência Goiana de Defesa Agropecuária, foram coletadas, entre os meses de maio e setembro de 2015, 40 amostras de carcaças refrigeradas e congeladas em abatedouros em Goiás e seus pontos de venda em Goiânia. A metodologia para isolamento e identificação obedeceu às normas da International Organization for Standardization 10272- 1:2006. Para identificação molecular, foi realizada a técnica da Reação em Cadeia da Polimerase para detecção dos genes hipO (Campylobacter jejuni) e glyA (Campylobacter coli e Campylobacter lari). Foi encontrada prevalência de 17.5 % (n=7) de contaminação de carcaças por Campylobacter spp.. Dentre as 24 amostras coletadas em abatedouros, 12,5 % (n=3) estavam contaminadas. Já entre as 16 coletadas em pontos de venda, 25,0 % (n=4) apresentaram positividade para a bactéria. Não foi detectado Campylobacter lari nas amostras avaliadas. Os resultados evidenciam que a bactéria permanece viável em todas as etapas da cadeia produtiva de frangos, representando um risco para a ocorrência de surtos de gastroenterites. A presença da bactéria em frangos aponta para a necessidade de educação de criadores de aves e comerciantes quanto ao risco à saúde pública que estes produtos representam. É necessária sensibilização para melhorar a gestão, além da realização de medidas preventivas e corretivas no sistema de produção e comercialização destes produtos. Além disso, a prevalência encontrada no presente estudo reforça a necessidade do estabelecimento de padrões legais que determinem a pesquisa do micro-organismo neste tipo de alimento. The ingestion of foods contaminated with Campylobacter spp. results in campylobacteriosis in humans. This disease is the main cause of diarrhea in the United States and European Union. The most common reservoirs of this microorganism are chickens and the consumption of their meat, raw or undercooked, is the main source of contamination to humans. The most prevalent species involved in infections are Campylobacter jejuni, Campylobacter coli and Campylobacter lari that can contaminate carcasses during the slaughter and handling of chickens. The aim of this study was to determine the prevalence of thermotolerant Campylobacter in chilled and later frozen chicken carcasses commercialized in the city of Goiânia, Goiás. With the support of the Municipal Sanitary Surveillance Department and the Goiás Agency for Agricultural and Farming Defense, forty cooled and frozen carcasses samples were collected in abattoirs and its retail outlets, from May to September/2015. The microbiological analysis was performed according to the methods of the International Organization for Standardization 10272-1:2006. For molecular identification, the Polymerase Chain Reaction technique was performed to detect the hipO (Campylobacter jejuni) and glyA genes (Campylobacter coli and Campylobacter lari). It was found a contamination prevalence of 17.5 % (n=7) of Campylobacter spp.. Between the 24 samples collected from slaughterhouses, 12.5% (n = 3) were contaminated. Among the 16 collected in points of sale, 25.0% (n = 4) presented positivity for the bacterium. Campylobacter lari was not detected in the evaluated samples. The results show that the bacteria remains viable at all stages of the chicken production chain, representing a risk for outbreaks of gastroenteritis. The presence of bacteria in chicken from market reinforces the need for education of poultry farmers and traders regarding the public health risk that these products represent. Awareness raising is needed to improve management, as well as preventive and corrective measures in the production and marketing of these products. In addition, the prevalence found in the present study reinforces the need to establish legal standards that determine the research of the microorganism in this type of food. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

A pesquisa foi feita com o objetivo de investigar a presença de Salmonella sp. em suabes de cloaca e nos ovos de patas oriundos de 38 criações informais e de 38 feiras livres, além de detectar anticorpos anti-Samonella Gallinarum e Pullorum em soro sanguíneo destas aves, no Estado de Goiás e no Distrito Federal. Para determinação do perfil produtivo e sanitário destas propriedades que criavam patos foram aplicados 38 questionários compostos por 12 perguntas fechadas. Mediante as informações obtidas pelas respostas dos questionários aplicados durante as visitas, foi observado que as propriedades das regiões estudadas não apresentavam manejo produtivo e sanitário adequados. Foram colhidas 324 amostras de sangue total que foram utilizadas na prova Sorológica de Aglutinação Rápida em Placa (SAR), para detecção de anticorpos anti-Salmonella Pullorum e Gallinarum. Nesta prova 117/324 (36,1%) dos soros sanguíneos foram sororreagentes. Foram colhidas 324 suabes cloacais de patos e 912 ovos em 38 propriedades e 38 feiras, que foram subdivididos de acordo com a estrutura em pool, dando origem a 228 amostras de casca, 228 de albúmen e 228 de gemas, totalizando 684 amostras. Os suabes cloacais e ovos foram analisados por bacteriologia convencional para pesquisa de Salmonella sp. Foram obtidos 38 isolados, sendo 36 em ovos 36/684 (5,3%), onde os sorovares foram Salmonella Heidelberg, Schwarzengrund, forma antigênica O:9,12 e Salmonella Typhimurium e dois isolados de suabes de cloaca 02/324 (0,62%), sendo identificados os sorovares Salmonella Typhimurium e Hadar. A distribuição percentual dos sorovares isolados foi: 32/38 (84,2%) Salmonella Schwarzengrund, 3/38 (7,9%) Salmonella Typhimurium, 1/38 (2,6%) a forma antigênica O:9,12, 1/38 (2,6%) Salmonella Heidelberg e 1/38 (2,6%) Salmonella Hadar. Os 36 isolados de ovos e os dois de suabes cloacais foram submetidos aos testes de suscetibilidade a 15 antimicrobianos, nos quais se obteve a seguinte distribuição de resistência: 29/38 (76,3%,) às sulfonamidas, 14/38 (36,9%) à enroflaxacina, 10/38 (26,3%) à amoxicilina, 7/38 (18,4%) à ampicilina, 7/38 (18,4%) à gentamicina, 6/38 (15,8%) ao cotrimoxazol, 6/38 (15,8%) à cefalotina, 6/38 (15,8%) ao trimetoprim, 03/38 (7,9%) ao ceftiofur, 05/38 (13,1%) a neomicina, 5/38 (13,1%) à tetraciclina, 5/38 (13,1%) à fosfomicina, 3/38 (7,9%) ao cloranfenicol, 2/38 (5,3%) à ciprofloxacina e 0/38 (0%) ao florfenicol. Os 36 isolados de Salmonella foram ainda submetidos a prova de PCR em tempo real, onde foram detectados os seguintes genes: rfbJ 33/35 (94,3%), o gene Int1 foi de 07/35 (20%) e o gene Sul1 foi de 06/35 (17,1%). Portanto, foi detectada a circulação de Salmonella em patos e seus ovos nas criações informais e feiras no Estado de Goiás e no Distrito Federal, assim como a confirmação de resistência aos antimicrobianos e detecção de genes de resistência. Estas informações são importantes para determinação de risco, tanto para sanidade avícola quanto para saúde pública. The survey was conducted in order to investigate the presence of Salmonella sp. in swabs of cloaca and duck eggs coming from 38 informal breeding sites and 38 markets, and to detect anti-Salmonella Gallinarum and Pullorum antibodies in blood serum of these birds, in the State of Goiás and the Federal Distrito. To determine the productive and sanitary profile of the farms where ducks are raised, we applied 38 questionnaires consisting of 12 closed questions. Through the information obtained by the responses to the questionnaires during the visits, we observed that the farms of the studied regions did not present adequate productive and sanitary management. We collected 324 whole blood samples were used in the test Serological Rapid Agglutination plate (SAR) to detect anti-Salmonella pullorum antibodies. In this test 117/324 (36.1%) blood sera were seropositive. We harvested 324 cloacal swabs from ducks and 912 eggs from 38 farms and 38 markets. The samples were subdivided according to the structure in pools, producing 228 eggshell samples, 228 albumen samples and 228 yolk samples, totaling 684 samples. Cloacal swabs and eggs were analyzed by conventional bacteriology for Salmonella sp. We obtained 38 isolates, 36 from eggs in 36/684 (5.3%), and the serovars were Salmonella Heidelberg, Schwarzengrund, antigenic form O: 9.12, and Salmonella typhimurium, and two isolates from cloaca swabs 02/324 (0.62%). The identified serovars were Salmonella Typhimurium and Hadar. The 36 isolates from eggs and two from cloacal swabs were submitted to susceptibility test to 15 antimicrobials, from which we obtained the following distribution of resistance: 29/38 (76.3%) to sulfonomide, 14/38 (36, 9%) to enroflaxacin, 10/38 (26.3%) to amoxicillin, 7/38 (18.4%) to ampicillin, 7/38 (18.4%) to gentamicin, 6/38 (15.8%) to cotrimoxazole, 6/38 (15.8%) to cephalothin, 6/38 (15.8%) to trimethoprim, 03/38 (7.9%) to ceftiofur, 05/38 (13.1 %) to neomycin, 5/38 (13.1%) to tetracycline, 5/38 (13.1%) to fosfomycin, 3/38 (7.9%) to chloramphenicol, 2/38 (5.3%) to ciprofloxacin, and 0/38 (0%) to florfenicol. The percentage distribution of the isolated serovars was: 32/38 (84.2%) Salmonella Schwarzengrund, 3/38 (7.9%) Salmonella Typhimurium, 1/38 (2.6%) the antigen form: 9.12, 1/38 (2.6%) Salmonella Heidelberg, and 1/38 (2.6%) Salmonella Hadar. The 36 isolates of Salmonella were also submitted to proof of real-time polymerase chain reaction (real-time PCR) on which the following genes were detected: 33/35 (94.3%) for rfbJ, 07/35 (20%) for Int1 gene, and 06/35 (17,1%) for Sul1 gene. Therefore, we verified circulation of Salmonella in ducks and their eggs in informal rearing farms in the state of Goiás and in the Federal District, we also confirmed the antimicrobial resistance and detected resistance genes. This information is important for determining risk for both poultry and public health. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq

Staphylococcus aureus é um importante agente de infecções relacionadas com a assistência à saúde e à comunidade. As superfícies ambientais, especialmente as que estão em frequente contato com as mãos, podem atuar como reservatórios de microorganismos, funcionando como fômites na disseminação microbiana. No sistema de transporte coletivo, superfícies de contato com as mãos podem operar como veículos de transmissão, auxiliando na dispersão de S. aureus na comunidade. O objetivo do estudo foi determinar a prevalência de S. aureus e S. aureus resistente a meticilina (MRSA) em ônibus, terminais e plataformas da maior linha de carregamento do sistema de transporte público do município de Goiânia-GO, analisar o perfil de suscetibilidade e de virulência e avaliar a similaridade genética entre os S. aureus isolados. Foram coletados 852 swabs das barras fixas verticais e horizontais dos 90 ônibus circulantes na linha Leste-Oeste, além das catracas de todas as plataformas e terminais ao longo da linha. O isolamento de estafilococos foi realizado por técnicas padronizadas e a identificação da espécie, pela detecção do gene femA. Os S. aureus identificados foram submetidos a testes de suscetibilidade a antimicrobianos, PCR convencional para detecção dos genes Meca e lukS-F, multiplex PCR para detecção de genes para fatores de virulência, tipagem de SCCmec e PFGE. A prevalência de contaminação das barras fixas e das catracas por S. aureus foi de 17,7% (151/852). MRSA foi detectado em 0,5% das amostras. O fenótipo conhecido como iMLSB foi detectado em 41,0% (62/151) dos isolados. Vários perfis de virulência foram detectados em 43 isolados (28,5%). A análise de PFGE revelou grande diversidade genética de cepas circulantes, inclusive MRSA semelhante ao USA300 e outro ao USA800. Os resultados sugerem que os S. aureus e MRSA, possuindo perfis de suscetibilidade e virulência diferenciados, estão inseridos na comunidade, podendo ser transmitidos entre indivíduos por intermédio de fômites, colocando a população usuária do serviço em risco. Staphylococcus aureus is an important agent of health care and community infections. Environmental surfaces, especially those in frequent contact with the hands, can serve as reservoirs of microorganisms, working as fomites in microbial spread. In the public transportation system, contact surfaces with hands can act as transmission vehicles, assisting the dispersion of S. aureus in the community. The aim of this study was to determine the prevalence of S. aureus and methicillin resistant S. aureus (MRSA) in buses, terminals and platforms of a larger route of the public transportation system in the city of Goiânia-GO, to determine the susceptibility and virulence profiles and assess the genetic similarity among S. aureus isolates. We collected 852 swabs fromhandrails of buses and ratchets of platforms and terminals that compose the East-West line. The isolation of staphylococci was done by standard techniques and species identification by detection of the femA gene. S. aureus identified were submitted to antimicrobial susceptibility testing, conventional PCR for detection of mecA and lukS-Fgenes, multiplex PCR to detect virulence factors genes, SCCmec typing and PFGE to assess the genetic similarity among strains. The contamination prevalence of handrails and ratchets by S. aureus was 17.7% (151/852). MRSA was detected in 0,5% of samples. The phenotype known as iMLSB was detected in 41.0% (62/151) of the isolates. Several virulence profiles were detected in 43 (28.5%)isolates, PFGE analysis revealed extensive genetic diversity of circulating strains, including MRSA strains similar to USA300 and USA800. The results suggest that S. aureus and MRSA strains, showing different susceptibility and virulence profiles are circulating in the community. They may be transmitted between individuals through fomites, putting the user population of the service at risk.

Nutrição Enteral é definida como administração de alimentos, para fins especiais, por meio de sondas ou via oral. Pode ser industrializada ou manipulada, e de acordo com as necessidades nutricionais, de forma exclusiva ou parcial, na substituição ou complementação da alimentação oral em pacientes. Empregada em hospitais, ambulatórios ou domicílios, com o objetivo de manutenção dos tecidos, órgãos ou sistemas. Elas constituem um excelente meio para crescimento microbiano, devido à sua composição rica em nutrientes e ao tempo de exposição à temperatura ambiente durante a administração. A contaminação microbiana das fórmulas enterais pode ocorrer em diversas etapas, sendo que um momento crítico é a manipulação. Assim, esta pesquisa avaliou a qualidade higienicossanitária no processamento de dietas enterais e as adequações físico-funcionais da Unidade de Dietas Especiais, em um hospital público de Goiânia, Goiás. Trata-se de um delineamento observacional analítico, realizado em três etapas distintas: julho e novembro de 2015, e janeiro de 2016. Foi aplicado uma lista de verificação prevista na Resolução da Diretoria Colegiada n°63/2000, para diagnóstico situacional e sanitário do local. Foram realizadas análises microbiológicas da água, da dieta em pó e reconstituída segundo padrões da Resolução da Diretoria Colegiada n°12/2001 de acordo com metodologia da American Public Health Association. Pesquisou-se também, a presença de Staphylococcus aureus e Escherichia coli em mãos e fossas nasais dos manipuladores envolvidos no preparo das dietas. Para análise estatística, quanto às variáveis qualitativas e discretas, utilizou-se do Teste Q Cochran, enquanto que, para as variáveis quantitativas utilizou-se o Teste de Friedmann. Quanto a dieta reconstituída, houve contagem de coliformes a 35 °C em 78% das amostras, mas não confirmou E. coli e contagem de Estafilococos coagulase positiva em nenhuma etapa. Quanto a dieta em pó e água de preparo, em todas as etapas, não houveram contaminações por micro-organismos patogênicos. Detectou-se presença de S. aureus e E. coli em mãos (10% para ambos micro-organismos) e fossas nasais (10% e 41%, respectivamente) dos manipuladores pesquisados. Considerando a lista de verificação para inspeção do preparo de dietas na UDE, o índice médio de conformidade dos blocos avaliados foi de 64,9%, 62,7% e 74,6% nas etapas do estudo, respectivamente. O perfil higienicossanitário foi parcialmente insatisfatório. Os principais problemas identificados foram dietas enterais reconstituídas fora dos padrões microbiológicos para coliformes a 35 ºC, porém sem presença de micro-organismos patogênicos. Observou-se perfil microbiológico inadequado de mãos e fossas nasais de alguns manipuladores e baixos índices de conformidade em alguns blocos, indicando necessidade de readequação da estrutura física, melhor registro de controle de qualidade das dietas manipuladas e reavaliação das práticas de higiene dos manipuladores, uma vez que este pode ser apontado como um dos fatores preponderantes na transmissão de enfermidades, e responsáveis por surtos de origem alimentar. Enteral administration is defined as foods for special purposes, by means of probes or orally. It can be industrialized, or manipulated, and according to the nutritional needs, solely or partially, to replace or supplement for oral feeding for patients. Used in hospitals, clinics or homes, with the aim of maintaining tissues, organs or systems. They are an excellent medium for microbial growth, due to its composition rich in nutrients and exposure time at room temperature for administration. Microbial contamination of enteral formulas can occur in several stages, with a critical moment is the manipulation. Thus, this research assessed the hygienic sanitary quality processing of enteral diets and physical and functional adaptations of the Special Diet unit in a public hospital in Goiânia, Goiás. This is an analytical observational design, carried out in three distinct stages: July and November 2015 and January 2016. A checklist has been applied provided the Board of the Resolution n° 63/2000, for situational diagnosis and health of the place. Microbiological analyzes of water were performed, diet powder and reconstituted according to the standards of the Collegiate Board Resolution n° 12/2001 according to the methodology of the American Public Health Association. It also investigated the presence of Staphylococcus aureus and Escherichia coli in hands and nostrils of the handlers involved in the preparation of diets. For statistical analysis, for the qualitative and discrete variables, we used the Q Test Cochran, while for the quantitative variables we used the Friedmann test. The reconstituted diet was coliforms at 35 °C in 78% of samples, but not confirmed E. coli and coagulase positive Staphylococci counts at any stage. The powder preparation diet and water at all stages, there were no contamination by pathogenic micro-organisms. It detected the presence of S. aureus and E. coli in hands (10% for both micro-organisms) and nasal cavity (10% and 41%, respectively) of the surveyed handlers. Considering the checklist for inspection preparation of diets in the UDE, the average rate of compliance of blocks evaluated was 64.9%, 62.7% and 74.6% in the stages of the study, respectively. The hygienic sanitary profile was partially unsatisfactory. The main problems identified were enteral feedings reconstituted outside the microbiological standards for coliforms at 35 °C, but without the presence of pathogenic micro-organisms. There was inadequate microbiological profile of hands and nostrils of some manipulators and low compliance rates in some blocks, indicating a need for readjusting the physical structure, better quality control record of the manipulated diets and reassessment of the handlers hygiene practices, since this can be seen as one of the important factors in the transmission of diseases, and responsible for foodborne outbreaks. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

O processamento de polpas constitui uma possibilidade para utilização de frutos por povos tradicionais como os quilombolas, inseridos em um contexto no qual frutos nativos são pouco consumidos. Para tanto, a qualidade higienicossanitária é fundamental na produção de um alimento seguro. O objetivo deste estudo foi avaliar o processamento e as condições higienicossanitárias de frutos e polpas de frutas em comunidade quilombola. A pesquisa foi realizada na Comunidade dos Remanescentes do Quilombo do Pombal, Goiás, Brasil. Para avaliação das condições físico-funcionais foi aplicada lista de verificação antes e após a realização de adequações estruturais, capacitações e implementação do Manual de Boas Práticas e Procedimentos Operacionais Padronizados. Os dados foram categorizados de acordo com o percentual de adequação. Foram realizadas análises microbiológicas de 32 amostras incluindo, frutos do Cerrado encontrados na comunidade e frutos e suas polpas em diferentes etapas do fluxograma. Foram elencados os perigos e Pontos Críticos de Controle no fluxograma de produção. O diagnóstico físico-funcional realizado indicou média de conformidade dos blocos de 30,18%, sendo classificado no Grupo 3, insatisfatório. Após intervenções, verificou-se 62,13% de conformidade, com classificação no Grupo 2, regular (p

S. aureus é um importante patógeno de origem alimentar com capacidade de produção de toxinas extracelulares e resistência antimicrobiana. Entre os alimentos envolvidos em intoxicação alimentar estafilocócica, destaca-se o queijo, principalmente quando fabricado em condições higienicossanitárias impróprias. Os objetivos deste estudo foram caracterizar S. aureus isolados de queijo Minas frescal artesanal e industrializado, determinar o perfil de suscetibilidade a antimicrobianos, bem como determinar a similaridade genética entre os isolados. Os isolados foram também testados para genes de enterotoxinas estafilocócicas (SE) e outros fatores de virulência. Foram analisadas 56 amostras de queijo Minas frescal de fabricação artesanal e dez de fabricação industrial comercializados em feiras livres e supermercados de Goiânia-GO, coletadas entre junho e agosto de 2014. S. aureus foi confirmado em 19 amostras (33,9) de queijo artesanal através da detecção do gene femA, onde 29 isolados foram obtidos. Estes isolados foram submetidos ao teste de susceptibilidade aos antimicrobianos e classificados em nove diferentes perfis (A - I). Treze isolados (44,8%) foram resistentes à penicilina e três (10,3%) à tetracilina, sendo dois (7,4%) resistentes a ambos. A técnica de multiplex PCR foi realizada para a detecção de genes de virulência que codificam a produção de hemolisinas (Hla e Hlb), TSST-1, toxinas esfoliativas (ETa e ETb) e enterotoxinas (EEA - EEE, EEG - EEJ, EEM - EEO). Genes que codificam as toxinas TSST-1 e esfoliativa não foram detectados. Todos os isolados amplificaram para o gene hla e 14 (48,3%) para o gene hlb. O gene seh foi o mais frequentemente detectado (n=11; 37,9%), seguido do gene seo (n=3; 10,3%), genes seg, sem, sen (n=2; 6,9%) e os genes sec e sei (n=1; 3,4%). Um isolado (3,4%) amplificou genes para quatro enterotoxinas e outro (3,4%) para seis. A comparação dos 29 isolados de S. aureus feita por PFGE revelou 18 padrões de bandas diferentes de DNA agrupados em cinco clusters. A genotipagem demonstrou alta similaridade genética entre os isolados. Isolados idênticos foram obtidos de amostras diferentes e uma mesma amostra apresentou mais de um isolado geneticamente diferente. Identificou-se até quatro diferentes isolados da mesma amostra. A alta prevalência de S. aureus nas amostras de queijo Minas Frescal, bem como a detecção de genes para produção de toxinas, alertam para a necessidade de reduzir os níveis de contaminação neste tipo de queijo através de monitoramento e controle da produção e comércio do produto. Staphylococcus aureus is an important foodborne pathogen, able to produce extracellular toxins and to express antimicrobial resistance. Among the foods involved in staphylococcal food poisoning, stands out the cheese, especially when manufactured under improper hygienic and sanitary conditions. The objectives of this study were to characterize Staphylococcus aureus isolated from artisanal and industrialized Minas frescal cheeses, to determine their antimicrobial susceptibility profile as well as the genetic similarity among the isolates. The isolates were also tested for staphylococcal enterotoxins (SE) genes and other virulence factors. Fifty-six artisanal raw milk cheeses sold at street fairs and 10 industrialized cheeses commercialized in supermarkets of Goiânia, Goiás were analyzed between June and August 2014. S. aureus was confirmed in 19 samples (33.9%) of artisanal cheese by detection of femA gene, in which 29 isolates were obtained. These isolates were submitted to the antimicrobial susceptibility test and classified into nine different profiles (A - I). Thirteen isolates (44.8%) were resistant to penicillin and three (10.3%) to tetracycline, with two (7.4%) resistant to both. The Multiplex PCR technique was performed to detect virulence genes that code for the production of hemolysins (Hla and Hlb), toxic shock syndrome toxin (TSST-1), exfoliative toxins (ETa and ETb) and enterotoxins (SEA - SEE, SEG - SEJ, SEM - SEO). Genes encoding TSST-1 and exfoliative toxins were not detected. All the isolates amplified for the hla gene and 14 (48.3%) for the hbl gene. The seh gene was the most frequently detected (n=11, 37.9%) followed by seo gene (n = 3; 10.3%), seg, sem and sen genes (n = 2, 6.9%) and sec and sei genes (n = 1, 3.4%). In one isolate (3.4%), four enterotoxins genes were detected, and in another, six (3.4%). The comparison performed by Pulsed Field Gel Electrophoresis technique revealed 18 different DNA banding patterns which were grouped into five clusters. The genotyping found high genetic similarity among the isolates. Identical isolates were obtained from different samples and one sample showed more than one genetically different isolate. It was identified up to four different isolates from the same sample. The high prevalence of S. aureus in a widely consumed product like Minas fresh cheese, as well as the detection of toxin encoding genes identified in this study, warns of the necessity to reduce the contamination levels in this type of cheese through monitoring and controling the production and trade of the product.

Campilobacteriose tem sido frequentemente relatada como principal causadora de doenças gastroentéricas na Europa e América do Norte. No Brasil, a escassez de dados em relação à notificação dessa enfermidade dificulta uma comparação com outros países e a tomada de decisões quanto a políticas de combate à bactéria causadora. Devido a relatos de alta incidência de Campylobacter spp. em carnes, principalmente em carcaças de frango e derivados, este estudo teve como objetivo o isolamento e identificação dessa bactéria em linguiças de frango do tipo frescal obtidas no município de Aparecida de Goiânia, no estado de Goiás. Foram coletadas 34 amostras do produto no período de julho a outubro de 2014, cada uma delas foi dividida em duas partes totalizado 68 subamostras, metade delas foram imediatamente analisadas, na condição fresca/refrigerada, e metade foi submetida ao congelamento para posterior análise. Em 11,75% das amostras frescas pesquisadas, isolou-se Campylobacter coli e Campylobacter lari. Não foi observado resultado positivo para Campylobacter spp. nas linguiças congeladas. Trabalhou-se também, com simples e dupla concentração do meio de enriquecimento, recuperando três amostras positivas no meio simples e uma amostra positiva no meio em dupla concentração. Foi observada 100% de resistência frente às bases antibióticas testadas. Recomenda-se mais estudos desta natureza, ampliando a abrangência quanto aos produtos avícolas e com maior número de amostras, pois acredita-se que poderão avaliar a prevalência deste importante micro-organismo em produtos de origem animal no estado de Goiás. Tais investigações poderão contribuir com informações importantes para o Programa Nacional de Monitoramento da Prevalência e da Resistência Bacteriana em Frango, estabelecido em 2008 pela Agência Nacional de Vigilância Sanitária do Ministério da Saúde. Campylobacteriosis have been related as main cause of gastroenteric diseases in Europe and North America. In Brazil, the lack of data about this disease hinders a comparison with other countries and difficult the decision making to combat the causative bacterium. Due high incidence of Campylobacter spp. in meat, main in poultry carcasses and by-products, this study aimed isolate and identify this bacteria in chicken fresh sausage sampled in Aparecida de Goiânia, in Goiás state. Thirty-four samples were collected in the period from July to October, each one were subdivided in 68 sub-samples, half of sub-samples were analyzed immediately, in fresh/chilled condition, and the other half were frozen for further analysis. In 11.65% of fresh samples were isolated Campylobacter coli and Campylobacter lari. For the frozen samples, no positive results were observed. Worked also with simple and double concentration of enrichment medium, recovering three positive samples in the simple one and a positive sample in the double. It was observed 100% resistance against the antimicrobial bases tested. It is recommended more studies of this nature, broadening the scope as to poultry products and greater number of samples; therefore, it is believed that they may evaluated the prevalence of this important microorganism in animal products in the Goiás state. Such investigations may provide important information for the National Program for Monitoring Prevalence and Bacterial Resistance in Chicken, established in 2008 by the National Agency of Sanitary Surveillance of the Ministry of Health. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

A hemodiálise é um tratamento primordial para pacientes renais crônicos em fase terminal. Nesta terapia, a água é utilizada para produção da solução de diálise e para reutilização de dialisadores, e por isso sua qualidade microbiológica deve ser garantida, uma vez que excessivos níveis de bactérias são responsáveis por sintomas como febre, calafrios, hipotensão e choque, podendo levar até mesmo à morte dos pacientes. Sendo assim, este trabalho objetivou avaliar a qualidade microbiológica da água utilizada em centros de hemodiálise e caracterizar bactérias patogênicas isoladas desta água. Durante os meses de maio e junho de 2014, foram coletadas, em duas etapas, amostras de água de quatro pontos de coleta em 12 centros de hemodiálise das cidades de Goiânia-GO e Aparecida de Goiânia-GO. O protocolo microbiológico seguiu os parâmetros da Resolução da Diretoria Colegiada nº 11/2014, além da pesquisa de coliformes termotolerantes, Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa, de acordo com American Public Health Association. As cepas de bactérias patogênicas foram caracterizadas fenotípica e genotipicamente, por meio do antibiograma e Pulsed Field Gel Electrophoresis. Das 96 amostras de água coletadas, 7,3 % apresentaram-se contaminadas por coliformes totais, 1,1 % por coliformes termotolerantes, 18,7 % por bactérias heterotróficas e 10,4 % por P. aeruginosa, estando esta última presente em 6 centros de hemodiálise. Não foram encontradas cepas de E. coli. Todas as cepas de P. aeruginosa apresentaram perfil de resistência ao cefepime e uma cepa foi resistente também ao aztreonam e piperacilina-tazobactam. A análise genotípica revelou oito perfis eletroforéticos diferentes e mostrou a persistência de clones de uma mesma bactéria na primeira e segunda coleta em um mesmo centro de hemodiálise. Pode-se concluir que a água utilizada nas unidades de tratamento dialítico apresenta condições higiênicossanitárias insatisfatórias e que as cepas de bactérias patogênicas apresentam perfil de resistência à antibióticos utilizados em seu controle e alta diversidade genética, revelando o risco potencial à saúde dos pacientes submetidos à hemodiálise. Hemodialysis is a primary treatment for chronic renal patients in the terminal phase. In this therapy, the water is used for the dialysis solution production and dialyzers reuse, and therefore the microbiological quality should be guaranteed, once excessive levels of bacteria are responsible for symptoms such as fever, chills, hypotension and shock, and may even lead to death of patients. Thus, this study aimed to evaluate the water microbiological quality used in hemodialysis centers and characterize isolated pathogenic bacteria from this water. During the months of May and June 2014, were collected in two stages, water samples from four collection points in 12 hemodialysis centers of the cities of Goiania-GO and Aparecida de Goiânia-GO. The protocol followed the microbiological parameters of Board Resolution No. 11/2014, in addition to fecal coliforms, Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa research, according to the American Public Health Association. The strains of pathogenic bacteria were characterized phenotypic and genotypically through the antibiogram and Pulsed Field Gel Electrophoresis. Of the 96 water samples, 7.3% were classified contaminated with total coliforms, 1.1% by fecal coliforms, 18.7% by heterotrophic bacteria and 10.4% by P. aeruginosa, the latter being present in 6 hemodialysis centers. E. coli strains were not isolated in the water samples studied. All P. aeruginosa strains were resistant to cefepime and only one strain was also resistant to aztreonam and piperacillin-tazobactam. Genotypic analysis revealed eight different electrophoretic profiles and showed the persistence of the same bacteria clones in the two phases of collection in a hemodialysis center. It can be concluded that the water used in dialysis units has unsatisfactory hygienic and sanitary conditions and pathogenic bacteria strains have antibiotic resistance pattern used in your control and high genetic diversity, revealing the potential health risk to patients undergoing hemodialysis. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

Por ser manipulado durante toda a cadeia produtiva, o produto derivado do açaí pode conter elevada carga microbiana, o que favorece a contaminação do alimento. Este trabalho objetivou avaliar a composição centesimal e a qualidade microbiológica de açaí na tigela comercializado na cidade de Goiânia, bem como o impacto da capacitação em Boas Práticas de Fabricação. Estudo conduzido em três etapas foi realizado em 23 estabelecimentos. Na primeira e terceira etapa foram coletadas duas amostras com 300 mL de açaí na tigela, preparado com polpa de açaí, xarope de guaraná e banana e a outra com polpa de açaí, xarope de guaraná e morango. Foram coletados, também, swabs de superfícies de mãos e fossas nasais de 34 manipuladores envolvidos no preparo do açaí e aplicou-se o checklist baseado na RDC nº 216/2004, para avaliar as condições físico-funcionais dos estabelecimentos. Na segunda etapa foi realizada a capacitação em Boas Práticas de Fabricação com aplicação de pré e pós-teste. O protocolo microbiológico baseou-se na RDC nº 12/2001 e na American Public Health Association. A composição centesimal foi determinada segundo o método estabelecido pela Association of Official Analytical Chemists. Das 46 amostras coletadas na primeira etapa, 15,2% apresentaram contagem superior ao limite máximo para coliformes a 45 ºC; 26% para coliformes a 35 ºC; 78,2% para estafilococos coagulase positiva e 100% para aeróbios mesófilos. Na terceira etapa, 21,7% apresentaram contagem superior ao permitido para coliformes a 45 ºC; 8,6% para coliformes a 35 ºC; 6,5% para estafilococos coagulase positiva e 73,9% para aeróbios mesófilos. Quanto aos manipuladores, antes da intervenção foi detectada a contaminação por E. coli nas superfícies das mãos de um manipulador, sendo esse resultado o mesmo após a capacitação. Quanto às fossas nasais, a presença desta bactéria reduziu de cinco para nenhum manipulador contaminado. Para S. aureus, um manipulador estava com as superfícies das mãos contaminadas na primeira etapa, sendo este número aumentado para três na segunda. Ao analisar as fossas nasais, cinco manipuladores albergavam S. aureus antes da capacitação e sete após a intervenção. No checklist, dentre os 12 itens verificados, somente três apresentaram melhorias com relação à porcentagem de conformidade de uma etapa para a outra: matérias-primas, ingredientes e embalagens, documentação e registro e responsabilidade. Em relação à capacitação, a média de acerto no pré-teste foi de 86,8%, e no pós-teste 97%. Quanto à composição centesimal, não houve diferença de atributos nutricionais em relação ao tipo de fruta adicionada na preparação do açaí na tigela. Conclui-se que a maioria das amostras coletadas apresentou condições higiênicossanitárias inadequadas, evidenciando a necessidade de implantação de um eficiente sistema de controle de qualidade nas áreas de manipulação de alimentos, a fim de garantir a segurança higiênicossanitária do produto final. Why be manipulated during the entire production chain, the product derived from acai may contain a high microbial load, which favors contamination of food. This study aimed to analyze the chemical composition and microbiological quality of acai in the bowl sold in the city of Goiânia and the impact of training on Good Manufacturing Practices. Study conducted in three stages was conducted in 23 stores. In the first and third step two samples with 300 mL of acai in the bowl were collected, prepared with acai pulp, guarana syrup and banana and another with acai pulp, guarana syrup and strawberry. Were also collected swabs from surfaces of hands and nasal cavities of 34 handlers involved in the preparation of acai and applied the checklist based on RDC 216/2004, to assess the physical and functional conditions of the establishments. In the second stage, training in Good Manufacturing Practices with applicable pre and post test was performed. The microbiological protocol was based on the RDC 12/2001 and the American Public Health Association. The chemical composition was determined by the method established by the Association of Official Analytical Chemists. Of the 46 samples collected in the first stage, 15.2 % had more than the maximum limit for coliform count at 45 ºC, 26% for coliforms at 35 ºC, 78.2 % for coagulase positive staphylococcus and 100% aerobic mesophilic. In the third stage, 21.7% had greater than allowed for coliform count at 45 °C, 8.6% for coliforms at 35 ºC, 6.5% for coagulase positive staphylococcus and 73.9% for mesophilic aerobic. As the handlers before intervention contamination was detected by E. coli on the surfaces of the hands of a handler and this result was the same after training. As to the nasal cavities, the presence of this bacterium reduced from five to no handler contaminated. For S.,aureus, a handler was with surfaces contaminated in the first stage hands, and the number increased to three in the second. By analyzing the nostrils five handlers harboring S. aureus prior to training seven after the intervention. In the checklist, among the 12 items checked, only three showed improvement with respect to the percentage of compliance from one stage to another: raw materials, ingredients and packaging, documentation and registration and accountability. Regarding training, the average accuracy in the pretest was 86.8%, and 97% post-test. As to composition, there was no difference in nutritional attributes in relation to the type of fruit added in the preparation of acai in the bowl. It is concluded that most of the samples collected showed inadequate sanitary higienic conditions, highlighting the need to implement an effective system of quality control in the areas of food handling, to ensure the safety of the final product. Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG

A obesidade é uma doença crônica relacionada à ingestão alimentar excessiva e pouco saudável que altera a microbiota intestinal. Objetivos: Avaliar os efeitos da administração de próbióticos como terapia complementar à intervenção dietética sobre marcadores bioquímicos, a composição corporal, lipopolissacarídeo bacterianoe atividadedas enzimas antioxidantes de mulheres com excesso de peso. Material e métodos: Ensaio clínico randomizado duplo-cego, placebo controlado com duração de dois meses, composto por 43 mulheres adultas com excesso de peso randomizadas em grupo placebo (GP n=22): 200mg de maltodextrina/dia e grupo suplementado (GS n=21): 2x1010 UFC de probióticos/dia (Lactobacillus acidophilluse casei; Lactococcus lactis; Bifidobacterium bifidum e lactis). Ambos os grupos receberam prescrição dietética normocalórica. A composição corporal foi avaliada pelo índice de massa corporal, circunferência da cintura e absorciometria radiológica de feixe duplo. Amostras de sangue foram coletadas para avaliação do perfil lipídico, hemoglobina glicada, enzimas hepáticas, uréia, creatinina, ácido úrico, lipopolissacarídeo bacteriano,superóxido dismutase,catalase e glutationa peroxidase .Para a análise da diferença entre os grupos foi realizado o teste t de Studentou Mann Whitney, e para a análise intragrupo, o teste t pareado ou Wilcoxon, adotando como nível de significância p

As Doenças Transmitidas por Alimentos se destacam como problema de saúde pública, e as residências estão entre os principais locais de ocorrência. Em muitos domicílios o empregado doméstico ocupa o cargo de manipulador de alimentos, sendo o responsável direto pela sanidade dos alimentos servidos à mesa. O objetivo deste trabalho foi analisar as práticas de manipulação de alimentos e as respostas a um questionário sobre estas práticas por trabalhadores domésticos em seu ambiente profissional. Para tanto, observou-se as técnicas de higiene aplicadas por 35 empregados domésticos durante o preparo de uma refeição, em seguida foram questionados quanto a seus hábitos ao manipular alimentos no trabalho. Os instrumentos utilizados na coleta de dados foram uma lista de verificação de Boas Práticas de Manipulação de Alimentos e um questionário sobre hábitos de higiene ao manipular alimentos. Foram calculados os indicadores descritivos da amostra: média, mediana e desvio padrão. A associação entre respostas ao questionário e atitudes durante a observação foram calculadas por coeficiente Kappa e teste qui-quadrado de Pearson (α=0,05). O tempo médio de observação do preparo da refeição em cada residência foi de 46 minutos, enquanto a aplicação do questionário exigiu em média 15 minutos para cada sujeito responde-lo. A observação da manipulação de alimentos destes indivíduos demonstrou que 64% das suas atitudes foram adequadas, enquanto em suas respostas ao questionário informaram ter o hábito de realizar 70% dos procedimentos adequados. Foi possível constatar que a higiene pessoal foi a área com menor adequação (40%), enquanto as respostas ao questionário indicaram a higiene ambiental como a com maiores inadequações (56%). A higienização de mãos foi destaque entre os procedimentos inadequados durante a observação, aproximadamente 85% da amostra cometeu a falha. Outro ponto que chama atenção é o uso de pano de prato, prática comum nas cozinhas para 80% dos sujeitos. Verificou-se uma associação positiva entre escolaridade e as práticas observadas quanto ao cuidado com a data de validade de produtos alimentícios e ao descongelamento adequado dos alimentos. Já as respostas ao questionário estiveram associadas com a escolaridade em cinco itens relativos a vestimentas adequadas no preparo de refeições, armazenamento e higienização adequados dos alimentos. As análises estatísticas comprovaram que as práticas de higiene aplicadas no preparo das refeições não estavam associadas às respostas fornecidas. Conclui-se que a manipulação dos alimentos por empregados domésticos expõe os comensais à contaminação por Doenças Transmitidas por Alimentos, e que há uma divergência entre a aplicação dos procedimentos de higiene no preparo de alimentos e as respostas quanto as suas práticas. The Foodborne Diseases stand out as a public health problem, and the residences are among the main sites of occurrence. In many residences the household employee holds the position of food handler, being directly responsible for the health of the food served at the table. The aim of this study was to analyze the practices of food handling and responses to a questionnaire on these practices by domestic workers in their professional environment. Therefore, it was observed hygiene techniques applied for 35 domestic workers during the preparation of a meal, and then were asked about their habits when handling food at work. The instruments used to collect data were a checklist of practice of food safety and a questionnaire about the topic. We calculated descriptive indicators of the sample mean, median and standard deviation. The association between the questionnaire responses and attitudes during observation were calculated by Kappa coefficient and chi-square test (α = .05). The mean observation time of the preparation of the meal in each residence was 46 minutes, while the questionnaire required an average of 15 minutes for each subject answers it. The observation of food handling these individuals showed that 64% of their attitudes were adequate, while in their responses to the questionnaire reported having the habit of performing 70% of procedures. It was found that personal hygiene was the area with lower fitness (40%), while the responses to the questionnaire indicated environmental hygiene as with larger mismatches (56%). The cleaning of hands was prominent among the inadequate procedures during the observation, approximately 85% of the sample committed the fault. Another point that stands out is the use of dish cloth, a practice common in kitchens for 80% of subjects. There was a positive association between education and care practices as observed with the expiration date of food products and defrost foods properly. Already the questionnaire responses were associated with schooling in five items concerning appropriate attire in meal preparation, cleaning and proper storage of food. Statistical analyzes showed that hygiene practices applied in the preparation of the meals were not associated with the answers provided. We conclude that the handling of food for domestic workers exposes diners to contamination by Foodborne Diseases, and that there is a difference between the application of food safety practices in food preparation and answers regarding their practices. Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq

Klebsiella pneumoniae produtora de carbapenemase é uma enterobactéria, comumente associada à resistência aos múltiplos antimicrobianos. A presença deste fenótipo de multirresistência consiste em um importante desafio do ponto de vista epidemiológico, quanto ao manejo terapêutico e ao controle de infecção. Um estudo observacional retrospectivo foi conduzido em um hospital público terciário em Goiânia, Go, Brasil, no período entre 2006 e 2011, para investigar os fenótipos de carbapenemases, a atividade in vitro da tigeciclina e polimixina B e determinar os fatores de risco associados à infecção ou colonização por K. pneumoniae produtora de carbapenemase. A presença de serina carbapenemase foi detectada por meio do teste de Hodge modificado e disco combinado com ácido borônico; metalo-β-lactamases – MβL por sinergismo de disco duplo com imipenem e EDTA; β-lactamases de espectro estendido – ESBL, através do disco combinado com cefotaxima e ceftazidima com e sem ácido clavulânico e AmpC plasmidial por disco combinado com ácido borônico e cefoxitina. A atividade in vitro da tigeciclina e polimixina B foi avaliada através do método de microdiluição em caldo e dos antimicrobianos não β-lactâmicos por disco-difusão e sistema semiautomatizado. A associação entre fatores de risco independentes e colonização ou infecção foi determinada através de regressão logística. A resistência aos carbapenêmicos foi verificada em 8,06% do total de K. pneumoniae e a atividade de carbapenemase em 6,90%. Dentre os isolados produtores de carbapenemases, 77,78% foram considerados β-lactamase tipo KPC, 37,04% demonstraram a produção simultânea de AmpC plasmidial e KPC, 29,63% associação com MβL ou ESBL e KPC, 11,11% MβL/ESBL/KPC e 7,41% MβL/ESBL/KPC/AmpC plasmidial. Altas taxas de resistência aos antimicrobianos não β-lactâmicos foram observadas, variando de 61,10% - 74,70% para fluoroquinolonas e 52,10% - 54,30% para aminoglicosídeos. A polimixina B apresentou baixa atividade in vitro contra estes isolados (35,70%) e a tigeciclina foi o único antimicrobiano que inibiu 75,0% dos mesmos. Os fatores de risco independentes para K. pneumoniae produtora de carbapenemase foram a internação prévia prolongada (p = 0,031), uso prévio de carbapenêmicos (p = 0,041) e exposição a mais de três antimicrobianos (p = 0,034). A detecção de isolados produtores de carbapenemase multirresistentes e o conhecimento dos diferentes mecanismos de resistência podem resultar em significante impacto nos resultados terapêuticos e estratégias de controle de infecção e prevenção. Carbapenemase-producing Klebsiella pneumoniae is an enterobacteria, commonly associated with resistance to multiple antibiotics. The presence of multidrug resistance phenotype is an important challenge in the epidemiological point of view, regarding the therapeutic management and infection control. A retrospective observational study was conducted in a tertiary-care hospital in Goiânia, Brazil, in the period of 2006 to 2011 to investigate the carbapenemases phenotypes, the in vitro activity of tigecycline and polymyxin B and determine the risk factors associated with infection or colonization by carbapenemase-producing K. pneumoniae. The serine-carbapenemase production was detected by modified Hodge test and combined disk test with boronic acid; metallo-β-lactamases - MβL by double-disk synergy test with imipenem and EDTA; extended spectrum β-lactamases - ESBL by combined disk with cefotaxime and ceftazidime with and without clavulanate, and plasmid AmpC type by combined disk with boronic acid and cefoxitin. The in vitro activity of tigecycline and polymyxin B against the enzyme-producing isolates was assessed using the broth microdilution method and for not β-lactam antimicrobials by disk diffusion and semi-automated system. The association between independent risk factors and colonization or infection by carbapenemase-producing K. pneumoniae was determined by logistic regression analysis. The carbapenem resistance was found in 8.06% of all isolates K. pneumoniae and 6.90% were carbapenemase producers. Among carbapenemases producers isolates, 77.78% were KPC type β-lactamase, 37.04% demonstrated the simultaneous production of plasmid AmpC β-lactamase and KPC, 29.63% associated with MβL or ESBL and KPC, 11.11% MβL/ESBL/KPC and 7.41% MβL/ESBL/KPC/plasmid AmpC. High percentages of not β-lactams antimicrobial resistance were observed, ranging from 61.10% - 74.70% to fluoroquinolones and 52.10% - 54.30% to aminoglycosides. Polymyxin B showed limited activity against the carbapenemase-producing K. pneumoniae (35.70%) and tigecycline was the only antimicrobial that inhibited 75.0% of these multidrug-resistant strains. The independent risk factors for K. pneumoniae carbapenemase producers were prolonged hospitalization (p = 0.031), previous use of carbapenems (p = 0.041) and exposure to more than three antimicrobials (p = 0.034). The detection of multidrug- resistant carbapenemase-producing isolates and the knowledge of different resistance mechanisms can result in significant impact on the treatment outcomes and strategies for infection control and prevention.

A tuberculose é uma doença infecciosa re-emergente que permanece como um dos maiores problemas de saúde pública mundial. Embora exista a vacina BCG que é eficiente contra formas graves de TB na infância, em adultos a eficácia é variável (0 a 85%). Nesse contexto existe a necessidade do desenvolvimento de novas vacinas para controlar a disseminação da TB. O presente trabalho teve como objetivo desenvolver uma nova proteína de fusão recombinante (Ag85C-MPT51-HspX) de M. tuberculosis a partir da clonagem molecular, expressão em E. coli com uma cauda de histidina e purificação através de cromatografia de troca iônica. A proteína de fusão foi construída com sucesso expressa em E. coli BL21 e purificada. Ensaios em camundongos foram realizados para avaliar a imunogenicidade da proteína recombinante de fusão Ag85C-MPT51-HspX de M. tuberculosis. Os camundongos foram imunizados três vezes com a proteína Ag85C-MPT51-HspX formulada com CpG-DNA encapsulada em lipossoma, CpG-DNA encapsulado em lipossoma, lipossoma ou salina como controle negativo e a resposta imune humoral e celular foi avaliada . A imunização com a formulação vacinal induziu a produção de altos títulos de anticorpos específicos anti-proteína de fusão Ag85C-MPT51-HspX (IgG1 =3,08±0,04; IgG2a=3,10±0,03), bem como, favoreceu o aumento de células T CD4+IFN-γ (2,14%±0,17), CD4+TNF-α (2,16%±0,34) específicas. A avaliação do reconhecimento desta proteína de fusão tanto por IgM quanto IgG humana sérica permitiu discriminar pacientes com tuberculose ativa de controles saudáveis, demonstrando a antigenicidade desta molécula em humanos. Conclui-se que a proteína CMX poderá ser testada tanto como vacina, assim como para o desenvolvimento de testes de diagnóstico para a tuberculose. Tuberculosis is a re-emerging infectious disease that remains a major public health problem worldwide. Although there is the BCG vaccine that is effective against severe forms of childhood TB, in adults its efficacy is variable (0-85%). In this context there is a need to develop new vaccines to control the spread of TB. This thesis proposes the development of a new recombinant fusion M. tuberculosis protein (Ag85C-MPT51-HspX) by molecular cloning, expression in E. coli with a histidine tag and purified by ion exchange chromatography. The fusion protein was constructed successfully, expressed in E. coli BL21 and purified. Tests in mice were performed to evaluate the immunogenicity of the recombinant fusion protein Ag85C-MPT51-HspX of M. tuberculosis. Mice were immunized three times with the protein Ag85C-MPT51-HspX formulated with CpG-DNA encapsulated in liposomes, CpG-DNA encapsulated in liposomes, liposome or saline as negative control and the humoral and cellular immune response was evaluated. The immunization with the vaccine formulation induced the production of high titers of specific anti-fusion protein Ag85C-MPT51-HspX IgG1 = 3.08 ± 0.04; IgG2a = 3.10 ± 0.03) and, favored the increase of specific CD4+ IFN-γ (2.14% ± 0.17), CD4+ TNF-α (2.16 ± 0.34%). The recognizing of this protein by seric IgG and IgM discriminated patients with active TB infection from healthy individuals. We conclude that CMX protein has potential to be used for the development of vaccine against M. tuberculosis as well also for TB diagnostic kits. Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq