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Objetivo Estimar la dosis génica en el gen de la distrofina a mujeres a riesgo de ser portadoras de deleciones. Sitio de realización INISA y Escuela de Biología, Universidad de Costa Rica. Materiales y métodos Se obtuvo ADN de 15 mujeres, emparentadas por línea materna con pacientes afectados con DMD o BMD causadas por deleciones en el gen de la distrofina, y que por lo tanto podrían ser portadoras de esas mutaciones, para amplificar de 7 a 9 regiones del gen por medio de PCR-múltiplex. Para estimar la dosis génica, se marcó uno de los imprimadores (el F) de cada par con el fluorocromo 6-FAM; los productos de amplificación se separaron y se cuantificaron por electroforesis capilar fluorescente. Resultados Todas las posibles portadoras mostraron dosis génicas como las de mujeres sin deleciones. Conclusiones El resultado indica que todos los pacientes son producto de mutaciones de novo, lo que es inesperado, pues datos de otros países muestran que ese es el caso de a sólo 113 de los pacientes. Además, la evaluación ofrece mejores elementos de juicio para brindar consejo genético. Objective To quantitate gene doses at the dystrophin locus in women at risk of being carriers of deletions. Place where the work was performed: INISA and Escuela de Biología, Universidad de Costa Rica. Materiais and methods. Fifteen women were identified in a previous study to be at increased risk of being carriers of deletions at the dystrophin gene -they are first-degree relativas of patients suffering from DMD/BMD which owe their affection to deletions at the gene. DNAs of these women were used to amplify 7 to 9 regions of the gene by PCR-multiplex. To estímate gene doses the Fprimer of each pair was labeled with 6-FAM and the amplification products were separated and quantitated by fluorescent capillar electrophoresis. Results None of the 15 putative carriers showed evidence of carrying the deletions that affect the index patients in their families. Conclusions All index patients in the families of the carriers analyzed are affected by de novo mutations, an unexpected result according to data of other countries. The data add another, very valuable criterion to offer genetic counseling to the putative carriers.

Objetivo Iniciar los estudios genético moleculares sobre las distrofinopatías en Costa Rica. Materiales y Métodos Treinta y un pacientes varones, diagnosticados con distrofia muscular, que podrían ser distrofinopáticos fueron reevaluados clínicamente. Veintitrés mostraron un fenotipo de DMD y dos de BMD. Seis no mostraron síntomas definitivos de distrofinopatías. ADN de los pacientes fue analizado mediante PCR-múltiplex en búsqueda de deleciones en el gen de la distrofina. También se realizó un diagnóstico prenatal a una portadora obligada. Resultados Diez pacientes presentaron deleciones: en uno abarca 23 exones (del 23 al 25), en dos ocho exones (del 45 al 52 y del 12 al 19), en otro siete exones (del 60 al 66), en dos seis exones (del 45 al 50); en cuatro pacientes la deleción comprende un único exón: el 52 en dos de ellos, el 19 y el 44. Los seis pacientes con diagnóstico dudoso no mostraron deleciones. Un hijo de la portadora obligada, afectado con DMD tiene una deleción de 37 exones (del 6 al 42), mientras que el feto no la tiene. Conclusión El traslape de síntomas entre las distintas distrofias musculares, la falta de pruebas diagnósticos de laboratorio y de especialistas en el diagnóstico diferencial evidencian la necesidad de implementar métodos diagnósticos más discriminantes en Costa Rica. La identificación de pacientes con deleciones permite buscar estas mutaciones en las mujeres con posible riesgo de ser portadoras y que así reciban mejor consejo genético. Objective To introduce molecular-genetic methods to the study of dystrophinopathies in Costa Rica. Materials and methods Thirty-one male patients diagnosed with muscular dystrophy, which could be affected with a dystrophinopathy, were clinically re-examined. Twenty-three had DMD, and two BMD and six showed no clear-cut symptoms of a dystrophinopathy. DNA samples were screened by multiplex PCR for deletions in the dystrophin gene. A prenatal diagnosis was made upon request from an obligate carrier. Results Ten patients showed deletions: one has a deletion of 23 exons (3-25); two have deletions of eight exons (one 45-52, the other 12-19); another has a deletion of 7 exons (60-66); two have a deletion of 6 exons (both 45-50). The four remaining patients showed single-exon deletions: exon 52 (two patients), exon 19 and exon 44. The older son of the obligate carrier, affected with DMD, showed a deletion of 36 exons (6-42), whereas the fetus has no deletion. None of the patients with unclear diagnosis had deletions. Conclusion The overiap of symptoms observed among different muscular dystrophies, the lack of available laboratory tests and the scarcity of physicians trained in Medical Genetics, evidence the need to implement more discriminatory diagnostic methods in Costa Rica. The identification of patients with deletions allows the search for the same mutations in women at risk of being carriers and to offer them a more accurate genetic counseling.