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Nas recentes décadas, a microglia foi descoberta como tendo um papel central no desenvolvimento de dor crónica neuropática após lesões no sistema nervoso periférico. É universalmente aceite que a lesão de um nervo periférico causa a ativação da microglia na medula espinal, a qual contribui para uma sensação de dor aumentada e, eventualmente, estado de dor crónica. A contribuição da microglia para a dor crónica que surge após lesões do sistema nervoso central, como a medula espinal, tem sido menos estudada, mas há evidência a suportar a contribuição microglial para a dor neuropática central. Nesta revisão sistemática, focamo-nos na ativação da microglia após lesões da medula espinal e como está ligada à emergência e manutenção de dor crónica neuropática que surge após lesões da medula espinal. Descobrimos que o número de estudos que usam modelos animais de lesão da medula espinal que abordam a atividade microglial é ainda pequeno, comparado com os que usam modelos de lesão de nervo periférico. Muitos mecanismos e interações celulares estão ainda para ser totalmente compreendidos, mas estudos demonstram uma correlação entre a densidade e atividade da microglia na medula espinal, tanto na proximidade da lesão e no tecido espinal íntegro, assim como no cérebro. Alterações de atividade microglial surgem com várias alterações moleculares, incluindo a expressão de recetores e ativação de mecanismos de sinalização. Quanto à dor neuropática periférica, a microglia parece ser uma importante interveniente e poderá tornar-se um alvo terapêutico no futuro. In recent decades microglia have been found to have a central role in the development of chronic neuropathic pain after injury to the peripheral nervous system. It is widely accepted that peripheral nerve injury triggers microglial activation in the spinal cord, which contributes to heightened pain sensation and eventually chronic pain states. The contribution of microglia to chronic pain arising after injury to the central nervous system, such as spinal cord injury (SCI), has been less studied, but there is evidence supporting microglial contribution to central neuropathic pain. In this systematic review, we focused on post-SCI microglial activation and how it is linked to emergence and maintenance of chronic neuropathic pain arising after SCI. We found that the number of studies using animal SCI models addressing microglial activity is still small, compared with the ones using peripheral nerve injury models. Many mechanisms and cellular interactions are yet to be fully understood, but studies demonstrate a correlation between the density and activity of microglia in the spinal cord, both in the vicinity of the injury and in the spared spinal tissue, as well as in the brain. Changes in microglial activity come with several molecular changes, including expression of receptors and activation of signalling pathways. As with peripheral neuropathic pain, microglia seem to be important players and might become a therapeutic target in the future.

Introdução: A hipertensão pulmonar (PH) é uma condição progressiva que afeta a vasculatura pulmonar, mas cujo principal fator de prognóstico é a função ventricular direita. É definida como uma elevação da pressão média da artéria pulmonar acima de 20 mmHg em repouso. A PH grupo 1 - hipertensão arterial pulmonar (PAH) - é um tipo de PH que beneficia primariamente de tratamento dirigido. Vários modelos de ratinho e rato são usados na investigação da PAH, mas a translação para ensaios clínicos geralmente falha. Recentemente, cada vez mais estudos têm usado também o modelo de ligação da artéria pulmonar (PAB) - um modelo de disfunção/insuficiência ventricular direita sem PH. Esta revisão visa descrever os principais achados de estudos que testam intervenções em modelos de PH e PAB, simultaneamente. Métodos: os artigos foram pesquisados nas seguintes bases de dados: Scopus, Web of Science e Pubmed, sem restrições de tempo ou linguagem. Os critérios de inclusão consistiram em intervenções farmacológicas com intuito terapêutico testadas num grupo de animais PAB e, pelo menos, num modelo de PH. Critérios de exclusão foram intervenções agudas; modelos genéticos e estudos sem dados para os grupos PAB e, pelo menos, outro modelo de PH. Resultados: vários fármacos melhoraram tanto a hemodinâmica pulmonar em modelos de PH como atenuaram a disfunção e hipertrofia do ventrículo direito resultante de PAB, em ratinhos e ratos. De uma forma geral, os modelos de PH e PAB concordaram na maioria dos resultados (concordância de 73,1%) para fármacos que não antagonistas dos recetores da endotelina e inibidores da fosfodiesterase 5. A pressão sistólica no ventrículo direito (RVSP) foi o parâmetro com mais discordâncias entre os dois tipos de modelos. Apenas o dicloroacetato melhorou a RVSP em animais sujeitos a PAB, enquanto 14 em 19 fármacos reduziram a RVSP em modelos de PAH. Os resultados da fibrose do ventrículo direito, pelo contrário, foram no mesmo sentido com todos os 12 fármacos. O macitentan, sildenafil e tadalafil melhoraram a maioria dos parâmetros avaliados em modelos de PAH, mas quase nenhum em modelos de PAB: o macitentan foi a exceção, melhorando dois - o índice de Fulton e a TAPSE. A dapaglifozina foi o único fármaco que não mostrou melhorias em nenhum dos parâmetros selecionados. Conclusão: esta revisão mostrou que vários fármacos em investigação para PAH exercem cardioproteção em modelos animais - pelo que têm potencial para também a exercerem em seres humanos - tal como oferecem benefícios na hemodinâmica e remodelagem da circulação pulmonar. Contudo, os resultados de estudos isolados devem ser interpretados com cuidado, já que pequenas diferenças na metodologia podem resultar em importantes diferenças nos resultados. Desta forma, para melhorar o potencial de translação de fármacos nesta área, os investigadores deverão testá-los em vários modelos, incluindo PAB, e otimizar a indução dos modelos para que estes se assemelhem com a doença humana. Introduction : Pulmonary hypertension (PH) is a progressive condition that affects pulmonary vessels, but its main prognostic factor is right ventricle (RV) function. It is defined as an elevation of mean pulmonary arterial pressure above 20 mmHg at rest. PH group 1 - pulmonary arterial hypertension (PAH) - is a type of disease that primarily benefits from targeted treatment. Many mice/rat models are used for research in PAH, but results fail to translate in clinical trials. Recently, more and more studies are also using pulmonary arterial banding (PAB) - a model of RV disfunction/failure without PH. This review aims to summarize studies that test interventions on PAB and other PH models concomitantly. Methods: articles were searched in Scopus, Web of Science and PubMed, without time or language limitation. Inclusion criteria consisted of pharmacological therapeutical interventions, tested on a PAB and in a PAH animal model. Exclusion criteria were acute interventions, genetic models, and studies without data for PAB group and, at least, one other PH model. Results: multiple tested drugs both improved pulmonary vascular haemodynamics on PH models and ameliorated RV structure and function after PAB, in rats and mice. PH models and PAB frequently exhibited similar results (73,1% concordance) with drugs other than ERA and PDE5i. RV systolic pressure (RVSP) accounted for most differences between PH models and PAB. Only dichloroacetate improved it in PAB animals, whereas 14 out of 19 drugs/combination of drugs improved RVSP in PH models. Results on RV fibrosis, on the other hand, all agreed (12 drugs). Macitentan, sildenafil and tadalafil improved most parameters in PH models, but almost none in PAB animals: only macitentan ameliorated two - Fulton index and TAPSE. Dapagliflozin was the only drug that improved no parameters. Conclusion: this review showed that many drugs currently under research for PAH have a cardioprotective effect on animals that may translate to humans, as well as pulmonary vascular hemodynamics and remodelling benefits. However, results of isolated studies should be interpreted with caution, as small differences in the methodology can lead to noticeable changes in the results. To improve the translational potential of drugs in this field, researchers should test them in multiple models, including PAB, while optimizing induction methods for human disease translation.

Objetivo: Acredita-se que as alterações no microbioma influenciem a patofisiologia de doenças metabólicas tais como a síndrome metabólica ou a diabetes mellitus tipo 2. A possível relação entre a diabetes gestacional e os microorganismos tem ganhado visibilidade, com bastantes estudos a explorar tal associação. Esta revisão sistemática com meta-análise visa resumir a evidência relativa às diferenças na composição da microbiota de diferentes localizações corporais de mulheres grávidas que desenvolveram diabetes gestacional e respetiva descendência, em comparação com gestações saudáveis. Resultados: Nas meta-análises foram incluídos 21 estudos. No intestino, o local de onde foi recolhida uma maior quantidade de informação, não foram encontradas diferenças estatisticamente significativas, entre os grupos, na abundância relativa média dos filos predominantes. Apenas o filo Verrucomicrobia apresentou maior abundância relativa no grupo controlo, com uma diferença média padronizada de -0.51 95% CI [-0.87,-0.15], embora houvesse uma heterogeneidade de 68%, que exige que a interpretação deste resultado seja efetuada com cautela. Bifidobacterium e Alistipes distinguiram-se pela sua maior abundância relativa no grupo controlo, -0.31 IC 95% [-0.50,-0.11] e -0.28 IC 95% [-0.53, -0.02], respetivamente. O género Roseburia revelou ser mais abundante nas diabéticas (0.29 95% CI [0.08, 0.51]) comparativamente com o controlo. No mecónio, não foram encontradas diferenças estatisticamente significativas nos filos nem nos géneros descritos na microbiota, cujos estudos revelaram heterogeneidade considerável. Pelo contrário, a microbiota placentária revelou baixa heterogeneidade. Nas diabéticas, os Firmicutes apresentaram um aumento da diferença média padrão das abundâncias relativas de 0.56 [0.20, 0.92], enquanto que o filo Proteobacteria apresentou maior abundância relativa nas gestações saudáveis (-0.34 [-0.62, -0.05]). Em relação aos géneros, Faecalibacterium, Bacteroides e Lachnospiraceae uncl. perspetivaram-se como mais abundantes no grupo com diabetes gestacional, com diferenças médias de 0.44 [0.05, 0.83], 0.40 [0.11, 0.70] e 0.32 [0.03, 0.61], respetivamente, sempre com 95% Cl. Conclusão: Embora a diabetes gestacional possa correlacionar-se com o microbioma, a evidência quantitativa insuficiente condiciona as conclusões. A padronização dos procedimentos poderá ser benéfica para entender o impacto desta patologia no microbioma e vice-versa. Background: Metabolic diseases, such as metabolic syndrome or type 2 diabetes mellitus, are thought to be influenced by changes in the microbiome. The possible link between diabetes during pregnancy and the microorganisms in the body has become more important, with many studies attempting to uncover this relationship. This systematic review with meta-analysis aims to summarize the evidence relative to the differences in the microbiota composition of different body sites in pregnant women that developed gestational diabetes and their offspring compared to healthy gestations. Results: Twenty-one studies were used for the meta-analyses. The gut was the body site with more quantitative evidence provided. Neither of the most reported phyla presented differences in relative abundance between groups. Only Verrucomicrobia presented a higher relative abundance in the control group, with a standardized mean difference of -0.51 95% CI [-0.87,-0.15], although there was a heterogeneity of 68%, demanding caution when interpreting this result. Regarding genera, Bifidobacterium and Alistipes were observed in higher abundance in control, -0.31 95% CI [-0.50,-0.11] and -0.28 95% CI [-0.53, -0.02], respectively. Conversely, Roseburia appears more abundant in the diabetic group (0.29 95% CI [0.08, 0.51]). Concerning meconium, no statistically significant differences were found in the evaluated phyla or genera. Furthermore, the levels of heterogeneity among studies tend to be considerable. Oppositely, placental microbiota presented low heterogeneity. Firmicutes presented an increase in the diseased group with a standard mean difference of 0.56 [0.20, 0.92], while Proteobacteria had a higher abundance in control (-0.34 [-0.62, -0.05]). Regarding genera, Faecalibacterium, Bacteroides, and Lachnospiraceae uncl. were more abundant in the gestational diabetes group, with mean differences of 0.44 [0.05, 0.83], 0.40 [0.11, 0.70], and 0.32 [0.03, 0.61], respectively, always with 95% Cl. Conclusion: Although this metabolic condition may have some microbial associations, insufficient quantitative evidence impacts the conclusions. Standardization of procedures could be beneficial to fully understand the impact of gestational diabetes on the microbiome and vice-versa.

Estudos recentes sugerem que os níveis de folato durante a gravidez poderão desempenhar um papel na programação fetal de doenças metabólicas. Deste modo, esta revisão sistemática pretende sumariar e sistematizar a atual evidência sobre a relação existente entre níveis maternos de folato durante a gravidez e a programação metabólica da descendência, em estudos animais e humanos. Foi efetuada uma pesquisa nas bases de dados PubMed, Web of Science e Scopus para identificar estudos realizados em animais fêmeas ou mulheres grávidas que investigassem a associação entre a exposição materna a folatos e pelo menos uma variável relacionada com síndrome metabólica na descendência após o nascimento (peso, pressão arterial, parâmetros de regulação da glicose e níveis de triglicerídeos e colesterol de lipoproteínas de alta densidade (HDL-C)). A qualidade dos estudos incluídos foi avaliada com as ferramentas de risco de viés SYRCLE para estudos animais e as ferramentas de avaliação NHLBI para estudos observacionais e ensaios controlados randomizados. Dos 10 estudos "good" ou "fair" que investigaram a exposição a níveis excessivos de folato durante o período perigestacional, 7 estudos animais e 1 estudo humano demonstraram uma associação positiva com o desenvolvimento de outcomes metabólicos na descendência. Por outro lado, 6 dos 7 estudos humanos "good" ou "fair" incluídos compararam a exposição a níveis adequados versus níveis baixos de folato, e demonstraram uma ausência de associação (n=3) ou um efeito protetor (n=3) relativamente ao dismetabolismo da descendência. Concluindo, em estudos animais há forte evidência que a ingestão materna excessiva de folato em fases precoces do desenvolvimento possa programar disfunção metabólica. Apesar de existir escassa evidência humana relativamente à exposição materna excessiva de folatos, estudos humanos sugerem que níveis adequados de folato durante a gravidez não são prejudiciais à função metabólica da descendência. There is emerging evidence suggesting that folate status during pregnancy may play a role in fetal programming of metabolic disease. Therefore, this systematic review aims to summarize and systematize the current evidence surrounding the relationship between maternal folate status during pregnancy and offspring metabolic programming, focusing on both animal and human studies. PubMed, Web of Science and Scopus databases were searched in order to identify studies conducted on pregnant women/animals studying the association between maternal folate exposure and at least one metabolic syndrome outcome in offspring after birth (weight, blood pressure, glucose regulation parameters, triglycerides and high-density lipoprotein cholesterol (HDL-C) levels). The quality of included studies was assessed using SYRCLE Risk of Bias Tools for animal studies and NHLBI Study Quality Assessment Tools for observational studies and randomized controlled trials. Among the 10 "good" or "fair" studies that investigated excessive folate exposure during the perigestational period, 7 animal studies and 1 human study reported a positive association with development of metabolic outcomes in offspring. On the other hand, 6 of the 7 "good" or "fair" included human studies compared adequate versus low folate exposure, showing a lack of association (n=3) or a protective effect (n=3) regarding offspring's dysmetabolism. In conclusion, there is strong evidence from animal trials suggesting that excessive folate intake in early phases of development programs for metabolic dysfunction. While human evidence regarding excessive maternal folate exposure is currently scarce, human studies suggest that folate adequacy in pregnancy is not detrimental for metabolic function of the offspring.

Neurogenic detrusor overactivity (NDO) is a severe lower urinary tract disorder, characterized by urinary urgency, retention, and incontinence, as a result of a neurologic lesion that results in damage in neuronal pathways controlling micturition. The purpose of this review is to provide a comprehensive framework of the currently used animal models for the investigation of this disorder, focusing on the molecular mechanisms of NDO. An electronic search was performed with PubMed and Scopus for literature describing animal models of NDO used in the last 10 years. The search retrieved 648 articles, of which reviews and non-original articles were excluded. After careful selection, 51 studies were included for analysis. Spinal cord injury (SCI) was the most frequently used model to study NDO, followed by animal models of neurodegenerative disorders, meningomyelocele, and stroke. Rats were the most commonly used animal, particularly females. Most studies evaluated bladder function through urodynamic methods, with awake cystometry being particularly preferred. Several molecular mechanisms have been identified, including changes in inflammatory processes, regulation of cell survival, and neuronal receptors. In the NDO bladder, inflammatory markers, apoptosis-related factors, and ischemia- and fibrosis-related molecules were found to be upregulated. Purinergic, cholinergic, and adrenergic receptors were downregulated, as most neuronal markers. In neuronal tissue, neurotrophic factors, apoptosis-related factors, and ischemia-associated molecules are increased, as well as markers of microglial and astrocytes at lesion sites. Animal models of NDO have been crucial for understanding the pathophysiology of lower urinary tract (LUT) dysfunction. Despite the heterogeneity of animal models for NDO onset, most studies rely on traumatic SCI models rather than other NDO driven pathologies, which may result in some issues when translating pre-clinical observations to clinical settings other than SCI.

Objetivo: A ventriculostomia endoscópica do terceiro ventrículo é um procedimento cirúrgico que pode levar a complicações e requer um planeamento pré-operatório detalhado. Este estudo teve como objetivo providenciar uma melhor compreensão da anatomia do terceiro ventrículo e da localização de estruturas importantes, de maneira a promover a segurança e o sucesso da técnica. Métodos: Os investigadores mediram as coordenadas estereotáxicas de seis pontos de interesse relativamente a um ponto de referência estereotáxico predefinido em 23 hemisférios cerebrais cadavéricos, 200 ressonâncias magnéticas cranioencefálicas e 24 ressonâncias magnéticas cranioencefálicas de indivíduos com hidrocefalia. Resultados: Diferenças estatisticamente significativas entre géneros foram encontradas em ressonâncias magnéticas de indivíduos saudáveis. Adicionalmente, foram encontradas diferenças estatisticamente significativas entre ressonâncias magnéticas de indivíduos saudáveis e tanto cérebros cadavéricos como ressonâncias magnéticas de indivíduos com hidrocefalia, apesar de a sua magnitude ser reduzida e clinicamente irrelevante. Alguns pontos estereotáxicos localizaram-se mais posterior e inferiormente em cérebros cadavéricos, em particular o recesso infundibular e a artéria basilar. Todos os pontos estereotáxicos estudados revelaram uma posição mais posterior em cérebros com hidrocefalia. Conclusões: O estudo descreve estruturas periventriculares em cérebros cadavéricos e ressonâncias magnéticas de indivíduos saudáveis e indivíduos com hidrocefalia, o que pode ser um auxílio para neurocirurgiões no planeamento de abordagens cirúrgicas ao terceiro ventrículo. Assim, o estudo contribui para um melhor entendimento da ventriculostomia endoscópica do terceiro ventrículo e fornece informação para uma melhoria da sua segurança e eficácia. Os resultados apoiam também a prática em cérebros cadavéricos enquanto fonte de informação de valor e para o estudo e treino de neurocirurgiões menos familiarizados com a técnica. Purpose: Endoscopic third ventriculostomy (ETV) is a surgical procedure that can lead to complications and requires detailed preoperative planning. This study aimed to provide a more accurate understanding of the anatomy of the third ventricle and the location of important structures to improve the safety and success of ETV. Methods: The researchers measured the stereotactic coordinates of six points of interest relative to a predefined stereotactic reference point in 23 cadaver brain hemispheres, 200 normal brain magnetic resonance imaging (MRI) scans, and 24 hydrocephalic brain MRI scans. The measurements were statistically analyzed, and comparisons were made. Results: We found some statistically significant differences between genders in MRIs from healthy subjects. We also found statistically significant differences between MRIs from healthy subjects and both cadaver brains and MRIs with hydrocephalus, though their magnitude is very small and not clinically relevant. Some stereotactic points were more posteriorly and inferiorly located in cadaver brains, particularly the infundibular recess and the basilar artery. It was found that all stereotactic points studied were more posteriorly located in brains with hydrocephalus. Conclusions: The study describes periventricular structures in cadaver brains and MRI scans from healthy and hydrocephalic subjects, which can guide neurosurgeons in planning surgical approaches to the third ventricle. Overall, the study contributes to understanding ETV and provides insights for improving its safety and efficacy. The findings also support that practicing on cadaveric brains can still provide valuable information and is valid for study and training of neurosurgeons unfamiliar with the ETV technique.

O cancro esofágico é um importante problema de saúde, sendo o sétimo cancro mais incidente na população. Devido ao diagnóstico muitas vezes tardio e à falta de tratamentos eficazes, a sobrevida global em 5 anos é de apenas 10%. Portanto, entender a etiologia e os mecanismos que conduzem ao desenvolvimento deste cancro podem melhorar a abordagem dos pacientes, aumentando a possibilidade de alcançar um melhor resultado clínico. Recentemente, o microbioma esofágico foi estudado como um fator etiológico para o cancro do esófago. No entanto, o número de estudos que abordam esta questão é baixo e a heterogeneidade no desenho do estudo e na análise dos dados tem dificultado a obtenção de achados consistentes. Neste trabalho, pretendemos rever a literatura atual sobre a avaliação do papel da microbiota no desenvolvimento de cancro esofágico. Analisámos a composição da microbiota normal e as alterações encontradas em lesões pré-malignas, nomeadamente esófago de Barrett, esofagite e diferentes graus de displasia, bem como cancro do esófago. Além disso, explorámos como fatores ambientais podem modificar a microbiota e contribuir para o desenvolvimento dessa neoplasia. Por fim, identificámos aspetos críticos a serem aprimorados em estudos futuros com o objetivo de melhorar a compreensão do papel do microbioma esofágico no cancro esofágico. Esophageal cancer is a major health problem, being the seventh most incident cancer. Due to the often-late diagnosis and lack of efficient treatments, the overall 5-year survival is as low as 10%. Therefore, understanding the etiology and the mechanisms that drive the development of this type of cancer could improve the management of patients, increasing the chance of achieving a better clinical outcome. Recently, the microbiome has been studied as a putative etiological factor for esophageal cancer. Nevertheless, the number of studies tackling this issue is low and the heterogeneity in the study design and data analysis has hindered consistent findings. In this work, we reviewed the current literature on the evaluation of the role of the microbiota in the development of esophageal cancer. We analyzed the composition of the normal microbiota and the alterations found in precursor lesions, namely Barrett's esophagus, and dysplasia, as well as in esophageal cancer. Additionally, we explored how other environmental factors can modify the microbiota and contribute to the development of this neoplasia. Finally, we identify critical aspects to be improved in future studies with the aim of refining the interpretation of the relationship between the microbiome and esophageal cancer.

Estima-se que a mortalidade por cancro do pâncreas irá aumentar nas próximas décadas. Este cancro agressivo tem um mau prognóstico devido ao diagnóstico tardio e resistência ao tratamento. Evidência crescente indica que as interações entre o hospedeiro e o microbioma desempenham um papel fulcral no desenvolvimento do cancro do pâncreas, sugerindo que utilizar o microbioma pode oferecer oportunidades promissoras para diagnóstico e tratamento. Nesta revisão, abordamos as associações entre o cancro do pâncreas e os microbiomas intratumoral, intestinal e oral. Exploramos também os mecanismos pelos quais os microrganismos influenciam o desenvolvimento do cancro e a resposta ao tratamento. Discutimos ainda os potenciais e limitações de usar o microbioma como alvo para intervenções terapêuticas, de forma a melhorar o prognóstico dos pacientes com cancro do pâncreas. Pancreatic cancer mortality is expected to rise in the next decades. This aggressive malignancy has a dismal prognosis due to late diagnosis and resistance to treatment. Growing evidence indicates that host-microbiome interactions play an integral role in pancreatic cancer development, suggesting that harnessing the microbiome might offer promising opportunities for diagnostic and therapeutic interventions. Herein, we review the associations between pancreatic cancer and the intratumoral, gut and oral microbiomes. We also explore the mechanisms by which microbes influence cancer development and response to treatment. We further discuss the potentials and limitations of using the microbiome as target for therapeutic interventions, in order to improve pancreatic cancer patient outcomes.

Pain is a complex phenomenon that is influence by psychosocial variables. Placebo can be included in the later factors that affect pain. The effectiveness of mindfulness-based interventions (MBI) in pain have been demonstrated by experimental studies and systematic reviews but the mechanisms of actions are just starting to be established. It remains to be evaluated in a systematic manner if the expectations of individuals experiencing pain are evaluated during MBI and if placebo effects can be manipulated in experimental settings. To evaluate the literature analyzing placebo effects in MBI for pain, we performed a systematic review based on a search conducted at the databases Pubmed, Web of Science and SCOPUS, between August and November of 2022. According to a defined mesh of search ("placebo" AND "pain" AND "mindfulness"), and inclusion/exclusion criterion a total of 17 studies were analyzed. From 22 papers initially included, 5 studies were excluded because they did not consider expectations or placebo effects in the studies, which already indicated that these variables are frequently discussed but not properly considered in the experimental design. From the 17 studies considered, 6 only analyzed the placebo effects of the pharmacological intervention used in the study and not of the MBI per se. The results of the few studies that were devoted to placebo effects of the MBI indicate that placebo and expectations play a role in the MBI effects in pain. The results indicate that MBI have a much larger effect on pain that placebo, suggesting that MBI may act by a placebo effect but there are other factors involved. Additional research in this fascinating and challenging field is necessary to fully understand the connection of MBI and placebo/expectations and their effects in pain relief. Pain is a complex phenomenon that is influence by psychosocial variables. Placebo can be included in the later factors that affect pain. The effectiveness of mindfulness-based interventions (MBI) in pain have been demonstrated by experimental studies and systematic reviews but the mechanisms of actions are just starting to be established. It remains to be evaluated in a systematic manner if the expectations of individuals experiencing pain are evaluated during MBI and if placebo effects can be manipulated in experimental settings. To evaluate the literature analyzing placebo effects in MBI for pain, we performed a systematic review based on a search conducted at the databases Pubmed, Web of Science and SCOPUS, between August and November of 2022. According to a defined mesh of search ("placebo" AND "pain" AND "mindfulness"), and inclusion/exclusion criterion a total of 17 studies were analyzed. From 22 papers initially included, 5 studies were excluded because they did not consider expectations or placebo effects in the studies, which already indicated that these variables are frequently discussed but not properly considered in the experimental design. From the 17 studies considered, 6 only analyzed the placebo effects of the pharmacological intervention used in the study and not of the MBI per se. The results of the few studies that were devoted to placebo effects of the MBI indicate that placebo and expectations play a role in the MBI effects in pain. The results indicate that MBI have a much larger effect on pain that placebo, suggesting that MBI may act by a placebo effect but there are other factors involved. Additional research in this fascinating and challenging field is necessary to fully understand the connection of MBI and placebo/expectations and their effects in pain relief.

Os antipsicóticos atípicos são fármacos amplamente prescritos para o tratamento da esquizofrenia, doença bipolar e outras doenças mentais com características psicóticas. Embora o uso de antipsicóticos atípicos esteja associado a efeitos benéficos nestes doentes, eles estão também associados a efeitos laterais metabólicos de relevo - o chamado síndrome metabólico - que é definido pela presença de anormalidades metabólicas como o aumento do perímetro abdominal, dislipidemia, hiperglicemia em jejum e hipertensão arterial, o que aumenta o risco de diabetes mellitus tipo 2 e de doença cardiovascular. Nesta revisão, descreveremos os mecanismos moleculares e celulares envolvidos nos efeitos metabólicos dos antipsicóticos atípicos. Estes mecanismos são complexos, pois os antipsicóticos atípicos têm como alvo muitos receptores, outras proteínas e influenciam significativamente a atividade de muitas hormonas e neuromoduladores. Adicionalmente estes mecanismos envolvem praticamente todos os órgãos metabólicos relevantes, nomeadamente o fígado, o pâncreas, o tecido adiposo, o músculo esquelético e o intestino, bem como o sistema nervoso central e periférico. É necessário um melhor conhecimento dos alvos moleculares dos antipsicóticos atípicos relacionados com os seus efeitos metabólicos e dos mecanismos responsáveis pelas diferenças clínicas, de forma a desenvolver novos fármacos com menos efeitos laterais e desenvolver terapêutica adjuvante para os doentes que necessitam de medicação antipsicótica. Atypical antipsychotics (AAPs) are commonly prescribed drugs for treating schizophrenia, bipolar disorder and other mental diseases characterized by psychotic features. Although the use of AAPs is associated with beneficial effects in these patients, they are also associated with relevant metabolic side effects - the so-called metabolic syndrome (MetS) - which is defined by the presence of metabolic abnormalities such as large waist circumference, dyslipidemia, fasting hyperglycemia and elevated blood pressure, which increase the risk for development of type 2 diabetes (T2D) and cardiovascular disease. In this review, we will describe the molecular and cellular mechanisms involved in the metabolic effects of AAPs. These mechanisms are complex, as AAPs target many receptors and other proteins, and significantly affect the activities of many hormones and neuromodulators. Additionally, these mechanisms involve practically all the relevant metabolic organs, namely the liver, pancreas, adipose tissue, skeletal muscle and intestine, and the central and peripheral nervous system as well. A better knowledge of the molecular targets linking AAPs with MetS and of the mechanisms responsible for clinical differences among AAPs is necessary in order to develop novel AAPs with less adverse effects, and to develop adjuvant therapies to patients receiving antipsychotic medication.

Objetivos A gastrite atrófica crónica pode contribuir para o fenótipo de pólipos gástricos (PGs) na polipose adenomatosa familiar (PAF). Como a prevalência da infeção por Helicobacter-pylori (HP) em Portugal pode atingir 85%, o nosso objetivo é caracterizar GPs numa coorte de pacientes portugueses. Materiais/métodos Cinquenta e três pacientes com PAF acompanhados no nosso hospital em Consulta de Alto Risco de Tumores Digestivos (1992 - 2022) foram selecionados retrospetivamente. Trinta e dois pacientes eram do sexo masculino (60,4%) e a idade média foi de 52 anos (variação: 26-87). As características clinicopatológicas, com particular ênfase nos exames endoscópicos digestivos altos periódicos, foram estudadas. Para análise estatística foi utilizado IBM SPSS (27.0). Resultados A nossa série abrangeu 96 GPs, incluindo 58 (60,4%) pólipos de glândulas fúndicas (PFGs) sem displasia (n=34) ou com displasia (n=24), 35 (36,5%) adenomas do tipo intestinal e três adenomas do tipo foveolar (3,1%). A maioria dos pacientes com PAF (n=30, 56,6%) desenvolveu PGs endoscopicamente visíveis, incluindo PGs em 13 pacientes (24,5%), adenomas gástricos em 7 pacientes (13,2%) e adenomas com PGs em 10 pacientes (18,9%). Adenomas de glândulas pilóricas não foram identificados. Os adenomas do tipo intestinal ocorreram predominantemente no estômago distal (66,7%, p=0,024), foram >7mm em 9/15 dos casos (60%, p=0,03) e mais frequentemente associados a adenomas duodenais (86,7%, p 7 mm) e/ou adenomas duodenais. Objectives Chronic atrophic gastritis may contribute to gastric polyps (GPs) phenotype in familial adenomatous polyposis (FAP). As the prevalence of Helicobacter-pylori (HP) infection in Portugal is up to 85%, we aim to characterize GPs in a series of Portuguese patients. Materials/methods Fifty-three FAP patients followed up at our hospital in High-Risk Consultation of Digestive Tumors (1992 - 2022) were retrospectively selected. Thirty-two patients were males (60.4%) and the medium age was 52 (range: 26-87). Clinicopathological features, with particular emphasis on periodic upper endoscopic examinations, were studied. IBM SPSS (27.0) was used for statistical analysis. Results Our series encompassed 96 GPs, including 58 (60.4%) fundic gland polyps (FGPs) without dysplasia (n=34) or with dysplasia (n=24), 35 (36.5%) intestinal-type adenomas and three foveolar-type adenomas (3.1%). The majority of FAP patients (n=30, 56.6%) developed endoscopically visible GPs, including FGPs in 13 patients (24.5%), gastric adenomas in seven patients (13.2%) and adenomas with FGPs in 10 patients (18.9%). Pyloric gland adenomas were not identified. Intestinal-type adenomas occurred predominantly in the distal stomach (66.7%, p=0.024), were >7mm in 9/15 cases (60%, p=0.03) and more frequently associated with duodenal adenomas (86.7%, p7mm) and/or duodenal adenomas.

Introdução: A doença óssea associada à Fibrose Quística (FQ) cursa com redução da massa óssea e consequente aumento do risco de fraturas de baixo impacto, com importantes condicionantes na qualidade de vida e longevidade destes doentes. Entre as múltiplas causas de perda de massa óssea nos doentes com FQ, as recorrentes exacerbações infeciosas correlacionam-se com o aumento da degradação óssea. Em estudos prévios, identificamos que a infeção crónica induzia a produção de fatores solúveis com ação catabólica no osso, como a proteína Amilóide A. Baseado nestas observações, formulamos a hipótese que estado inflamatório sustentado provocado pela infeção crónica nos doentes com FQ contribui para a redução da massa óssea. Neste trabalho, averiguamos o potencial da proteína Amilóide A e de outros mediadores imunológicos servirem como biomarcadores para monitorizar a massa óssea em doentes com FQ. Métodos: Neste estudo transversal, os níveis séricos de vários marcadores de homeostasia óssea, citocinas e quimiocinas foram medidos e correlacionados com a densidade mineral óssea (DMO) na coluna lombar ou no fémur de vinte e seis adultos com FQ que são seguidos no Centro de Referência para a FQ do Centro Hospitalar Universitário de São João. Resultados: De acordo com a última densitometria óssea realizada, verificamos treze doentes (50% dos participantes) possuíam um Z score na coluna lombar ou no fémur menor que -1, apresentando, portanto, osteopenia secundária à FQ. Os níveis plasmáticos de SAA não diferiram entre os doentes com osteopenia secundária à FQ e os doentes com FQ com normal massa óssea. Porém, os níveis de SAA correlacionaram-se negativamente com a função pulmonar (indicada pela percentagem esperada de volume expiratório forçado no primeiro segundo, %FEV1). Adicionalmente, a %FEV1 correlacionou-se positivamente com a DMO. Nos doentes com FQ, a DMO correlacionou-se positivamente com os níveis de IL1b e negativamente com os níveis de osteoprotegerina e mediadores imunológicos como MCP-3, M-CSF e TNFa. Conclusões: Este estudo demonstrou que um estado inflamatório persistente dos indivíduos com FQ correlacionou-se com alterações na massa óssea. Adicionalmente, identificamos potenciais moléculas para monitorizar a perda de massa óssea nestes doentes. Tal alicerça a realização de futuros estudos para estabelecer o impacto destas moléculas no metabolismo ósseo nos indivíduos com FQ. Background: Cystic Fibrosis (CF) Bone Disease (CFBD), accompanied by bone mass reduction, is a common but not well-understood complication in adult patients, with devastating consequences to their quality of life and longevity. Amongst the possible etiologies for CFBD, recurrent infective exacerbations correlate with increased bone degradation. We previously found in the murine model that soluble bone catabolic mediators, such as Serum Amyloid A (SAA), increase in response to infection. Therefore, we hypothesize that sustained inflammatory status induced by chronic infections substantially contributes to decreased bone mass. Here, we aimed to understand whether SAA or other immune mediators may be used as novel biomarkers to monitor bone mass in CF patients. Methods: This was a transversal observational study at a single CF care center consisting of twenty-six adult CF patients. Circulating levels of several bone turnover biomarkers, cytokines and chemokines were measured in the plasma and correlated with bone mineral density (BMD). Results: We found that SAA were increased in CF patients with normal and low BMD and did not correlate with BMD in lumbar spine and femur. Circulating SAA levels in CF patients positively correlated with pulmonary function (as measured by the percentage of predicted forced expiratory volume, %FEV1). On the other hand, BMD positively correlated with %FEV1 and IL1 and negatively with osteoprotegerin and immune mediators such as MCP-3, M-CSF, TNF. Conclusions: This pilot study showed that the persistent inflammatory status of CF patients correlates with decreased bone mass. Furthermore, we identified potential candidates to monitor bone loss in these patients, laying the ground for future investigations on the mechanisms that modulate the impact of these immune mediators on bone metabolism.

A neuropatia induzida pela quimioterapia (Chemotherapy-induced neuropathy; CIN) é um efeito secundário comum da terapêutica de neoplasias, sendo frequentemente acompanhada de dor. O paclitaxel, um dos citostáticos mais comuns, gera uma lesão nervosa periférica bem estabelecida, que se pode reproduzir/replicar usando modelos animais. Em linha com os nossos estudos anteriores sobre CIN induzida por paclitaxel, realizámos uma revisão sistemática da literatura, analisando a estrutura e os objetivos dos estudos em animais que usam CIN induzida por paclitaxel, para identificar os mecanismos em estudo, bem como a representatividade e reprodutibilidade dos estudos. Selecionámos estudos publicados na Pubmed e no Scopus entre 1 de janeiro de 2018 e 3 de dezembro de 2022. De acordo com uma terminologia de pesquisa, foram analisados 70 estudos originais. Os mecanismos em estudo incidiram sobretudo na neuroinflamação à periferia (nervo ciático e gânglios raquidianos). A maioria dos estudos utilizou ratos Sprague-Dawley, machos, para induzir CIN induzida por paclitaxel, com doses baixas de paclitaxel, com uma duração entre 14 e 28 dias. Os testes comportamentais nociceptivos avaliaram sobretudo a modalidade mecânica. A qualidade metodológica geral foi considerada moderada e o risco de viés foi classificado como pouco claro. Esta revisão sistemática indica que existem várias falhas no desenho experimental que podem comprometer a reprodutibilidade dos estudos em modelos animais de CIN. Além disso, ao criar um modelo experimental com animais, é importante considerar as implicações clínicas do mesmo. Apesar do número crescente de estudos experimentais de CIN induzida por paclitaxel, alguns trabalhos revelam estrutura e qualidade científica que merecem análise. Palavras-Chave: Quimioterapia; modelos animais; reprodutibilidade; translação clínica Chemotherapy-induced neuropathy (CIN) is a common side effect of cancer therapy and is frequently accompanied by pain. Paclitaxel, one of the most common cytostatic drugs, generates a well-described peripheral nerve injury, which may be experimen-tally mimicked in animal models. In line with our previous studies in paclitax-el-induced CIN models, we conducted a systematic review analyzing the structure and aims of animal studies using paclitaxel-induced CIN to analyze the design and structure of the studies in order to discuss their putative representativity and repro-ducibility and identify the mechanisms under investigation. We elected studies pub-lished in Pubmed and Scopus between 1 January 2018 and 3 December 2022. Ac-cording to a defined mesh of search, 70 original studies were screened. The mecha-nisms under study were mainly neuroinflammation at the periphery. Most studies used male Sprague-Dawley rats to induce paclitaxel-induced CIN at low doses of paclitaxel, and the analyses studies focused at 14-28 days of CIN. Mechanical noci-ceptive tests were preferred in the behavioral evaluation. The overall methodological quality was considered moderate, and the risk of bias was considered unclear. This review supports the perception that there are several flaws in the experimental design that frustrate the reproducibility of studies. In addition, clinical considerations should be considered when designing animal experiments, such as sex and age rep-resentativity. In this way the increasing number of experimental studies describing the mechanisms of CIN and repurposing drugs or developing new molecules for paclitaxel-induced CIN may increase their translation.

The role of epigenetics in chronic pain at the supraspinal level is yet to be fully characterized. DNA histone methylation is crucially regulated by de novo methyltransferases (DNMT1-3) and ten-eleven translocation dioxygenases (TET1-3). Evidence has shown that methylation markers are altered in different CNS regions related to nociception, namely the dorsal root ganglia, the spinal cord, and different brain areas. Decreased global methylation was found in the DRG, the prefrontal cortex, and the amygdala, which was associated with decreased DNMT1/3a expression. In contrast, increased methylation levels and mRNA levels of TET1 and TET3 were linked to augmented pain hypersensitivity and allodynia in inflammatory and neuropathic pain models. Since epigenetic mechanisms may be responsible for the regulation and coordination of various transcriptional modifications described in chronic pain states, with this study, we aimed to evaluate the functional role of TET1-3 and DNMT1/3a genes in neuropathic pain in several brain areas. In a spared nerve injury rat model of neuropathic pain, 21 days after surgery, we found increased TET1 expression in the medial prefrontal cortex and decreased expression in the caudate-putamen and the amygdala; TET2 was upregulated in the medial thalamus; TET3 mRNA levels were reduced in the medial prefrontal cortex and the caudate-putamen; and DNMT1 was downregulated in the caudate-putamen and the medial thalamus. No statistically significant changes in expression were observed with DNMT3a. Our results suggest a complex functional role for these genes in different brain areas in the context of neuropathic pain. The notion of DNA methylation and hydroxymethylation being cell-type specific and not tissue specific, as well as the possibility of chronologically differential gene expression after the establishment of neuropathic or inflammatory pain models, ought to be addressed in future studies.

Introdução: A rinite alérgica (RA) tem vindo a ser apontada como uma causa de disfunção olfativa. Para além dos sintomas clássicos, a RA também foi associada a alterações do padrão normal de sono, diminuição do desempenho cognitivo e maior probabilidade de depressão e ansiedade. Apesar dos mecanismos subjacentes a estas associações permanecerem indeterminados, a via olfativa tem sido proposta como possível ligação entre a inflamação nasal crónica e a ocorrência de alterações no sistema nervoso central. Assim, este trabalho tem como objetivo investigar a influência da RA na atividade da sinaptofisina na via olfativa e no córtex pré-frontal (CPF), por imuno-histoquímica, num modelo animal de RA. Pretendemos ainda avaliar a influência da RA na função olfativa e em comportamentos de agressividade, em ratos com RA. Métodos: Foi replicado um modelo de RA em ratos machos Wistar, por sensibilização com a ovalbumina (OVA). Após os testes olfativos e comportamentais, estudamos a estrutura sináptica do bolbo olfativo (BO), núcleo olfativo anterior (NOA), CPir e CPF, através da deteção da marcação de sinaptofisina (Syn) por imunofluorescência. Resultados: Verificou-se uma diminuição significativa da marcação de Syn na camada glomerular (CG) do BO e no CPF, em ratos com RA. Além disso, a avaliação olfativa revelou disfunção olfativa significativa no grupo da RA. Os testes comportamentais demonstraram um predomínio de comportamentos defensivos em ratos com RA. Conclusões: Neste trabalho verificou-se que a RA influencia a atividade da Syn na via olfativa e no CPF, levando a diminuição da função olfativa e alterando o comportamento de agressividade dos ratos com RA. Palavras-chave: Rinite alérgica, sinaptofisina, hiposmia, agressividade, bolbo olfativo, córtex pré-frontal. ABSTRACT Introduction: Allergic rhinitis (AR) has been pointed out as a cause of olfactory dysfunction. In addition to the classic symptoms, AR has also been associated with alterations in the normal sleep pattern, decreased cognitive performance and increased likelihood of depression and anxiety. Although the mechanisms underlying these associations remain undetermined, the olfactory pathway has been proposed as a possible link between chronic nasal inflammation and the occurrence of changes in the central nervous system. Thus, this study aims to investigate the influence of AR on synaptophysin activity in the olfactory pathway and prefrontal cortex, by immunohistochemistry, in an animal model of AR. We also aimed to evaluate the influence of AR on olfactory function and aggressive behaviors in mice with AR. Methods: An AR model was replicated in male Wistar rats by sensitization with ovalbumin. After olfactory and behavioral tests, we studied the synaptic structure of the olfactory bulb, anterior olfactory nucleus, piriform cortex, and prefrontal cortex, by detecting synaptophysin (Syn) labeling by immunofluorescence. Results: There was a significant decrease in Syn labeling in the glomerular layer of the olfactory bulb and in the prefrontal cortex, in rats with AR. Moreover, olfactory evaluation revealed significant olfactory dysfunction in the AR group. Behavioral tests showed a predominance of defensive behaviors in AR rats. Conclusions: In this study we found that AR influences the activity of Syn in the olfactory pathway and CPF, leading to decreased olfactory function and altering the aggressive behavior of rats with AR. Keywords: Allergic rhinitis, synaptophysin, hyposmia, aggressive behavior, olfactory bulb, prefrontal cortex.

The lateral habenula (LHb) and the ventral tegmental area (VTA), which form interconnected circuits, have important roles in the crucial control of sensory and cognitive motifs. Signaling in the LHb-VTA pathway can be exacerbated during pain conditions by a hyperactivity of LHb glutamatergic neurons to inhibit local VTA DAergic cells. However, it is still unclear whether and how this circuit is endogenously engaged in pain-related cognitive dysfunctions. To answer this question, we modulated this pathway by expressing halorhodopsin in LHb neurons of adult male rats, and then selectively inhibited the axonal projections from these neurons to the VTA during a working memory (WM) task. Behavioral performance was assessed after the onset of an inflammatory pain model. We evaluated the impact of the inflammatory pain in the VTA synapses by performing immunohistochemical characterization of specific markers for GABAergic (GAD65/67) and dopaminergic neurons (dopamine transporter (DAT), dopamine D2 receptor (D2r) and tyrosine hydroxylase (TH)). Our results revealed that inhibition of LHb terminals in the VTA during the WM delay-period elicits a partial recovery of the performance of pain animals (in higher complexity challenges); this performance was not accompanied by a reduction of nociceptive responses. Finally, we found evidence that the pain-affected animals exhibit VTA structural changes, namely with an upregulation of GAD65/67, and a downregulation of DAT and D2r. These results demonstrate a role of LHb neurons and highlight their responsibility in the stability of the local VTA network, which regulates signaling in frontal areas necessary to support WM processes.

Introdução O Professor Doutor Amândio Joaquim Tavares, nascido em Valpaços em 1900, foi uma figura que marcou o panorama da Medicina e do ensino universitário nacional. Esta dissertação tem como objetivo rever e homenagear o seu legado. Material e Métodos A pesquisa bibliográfica desta monografia tem como base os documentos obtidos na Biblioteca da FMUP, bem como no repositório temático online da Universidade do Porto. Foram realizadas entrevistas às três netas do Professor Doutor Amândio Joaquim Tavares: a Professora Doutora Purificação Tavares, Maria Cândida Tavares e Maria do Carmo Tavares. Documentos e fotografias foram cedidos pela família, que ajudaram a complementar toda a informação sobre o seu percurso de vida. Resultados Formado na Faculdade de Medicina da Universidade do Porto, com uma média de 20 valores, especializou-se em Anatomia Patológica. Em 1932 assumiu a regência da Unidade Curricular de Anatomia Patológica. Foi o primeiro diretor de serviço desta área no Hospital de S. João, em 1956. Foi nomeado Reitor da Universidade do Porto entre os anos de 1946 a 1961, tendo sido a pessoa que por mais tempo exerceu este cargo na história da Universidade do Porto. Durante este período liderou a evolução e crescimento da Universidade do Porto. Discussão A carreira e vida do Professor Doutor Amândio Tavares influenciou o curso da história da cidade do Porto, tendo tido um impacto no crescimento da Faculdade de Medicina, no Hospital de S. João, e principalmente na Universidade do Porto. A instituição que é a Universidade do Porto como a conhecemos hoje, tem os seus alicerces assentes nas bases criadas pelo Professor, através de reformas e expansões feitas na altura em que foi Reitor. A sua dedicação constante e o seu trabalho são reconhecidos e transparecem a sua influência, tendo culminado com a nomeação de Reitor Honorário. Conclusão O Professor deixou um legado inigualável, reconhecido pelos seus pares e todos os que trabalharam sob a sua influência. É, e será sempre recordado, como uma referência de liderança, ensino e humanidade na cidade Invicta. Introduction Professor Amândio Joaquim Tavares, born in Valpaços in 1900, was a figure that marked the panorama of the history of Medicine and university education. This dissertation aims to review and honor his legacy. Material and Methods The bibliographic research of this dissertation is based on the documents obtained from the FMUP Library, as well as on the online thematic repository of the University of Porto. Interviews were conducted with the three granddaughters of Professor Amândio Joaquim Tavares: Professor Purificação Tavares, Maria Cândida Tavares and Maria do Carmo Tavares. Documents and photographs were provided by the family, who helped to supplement all the information about his life path. Findings Graduated from the Faculty of Medicine of the University of Porto, with an average of 20 values, he specialized in Pathological Anatomy. In 1932 he took over the regency of the Curricular Unit of Pathological Anatomy. He was the first chief of the department of this area at Hospital de São João in 1956. He was appointed Dean of the University of Porto between 1946 and 1961, and was the person who held this position for the longest in the history of the University of Porto. During this period he led the evolution and growth of the University of Porto. Discussion The career and life of Professor Amândio Tavares influenced the course of the history of the city of Porto, having had an impact on the growth of the Faculty of Medicine, at the Hospital de S. João, and especially at the University of Porto. The institution that is the University of Porto as we know it today, has its foundations based on the bases created by this person, through reforms and expansions made at the time he was Dean. His constant dedication and work are well recognized and transpires his influence, culminating in the appointment of Honorary Dean. Conclusion The Professor left a legacy hardly equal, recognized by his peers and all who worked under his influence. It is, and will always be remembered, as a reference of leadership, teaching and humanity in the city of Porto.

Uma das descobertas mais notáveis nas áreas da imunologia e das neurociências foi a da interação bidirecional entre o sistema imunitário e o sistema nervoso central. Esta interação é estritamente regulada para manter a homeostasia em condições fisiológicas. A disrupção desta interação está associada a vários distúrbios neuropsiquiátricos. A maioria dos estudos que abordam o impacto de uma alteração do sistema imunitário em perturbações comportamentais concentram-se em respostas pró-inflamatórias agudas. No entanto, as infeções crónicas são altamente prevalentes e estão associadas a uma alteração do perfil de citocinas que persiste ao longo do tempo. Estudos que abordam o impacto das infeções micobacterianas no comportamento do tipo depressivo apresentam resultados discordantes, e o tema necessita de ser mais analisado. De modo a compreender o efeito das infeções crónicas no sistema nervoso central, avaliámos o impacto da infeção por Mycobacterium avium. Uma vez que o perfil da produção de citocinas varia consoante as estirpes de murganho usada, foram analisadas três estirpes de murganho (Balb/c, C57BL/6 e CD-1). Utilizámos murganhos fêmeas e o modelo de infeção crónica periférica. Os nossos resultados mostram que a infeção crónica periférica por M. avium induz alterações não só no sistema imunitário periférico, mas também no sistema nervoso central, nomeadamente no hipocampo. Curiosamente, estas alterações dos perfis de citocinas são diferentes consoante a estirpe de murganho. Estes perfis alterados de expressão de citocinas não são acompanhados por alterações na proliferação de células do hipocampo, nem alterações na plasticidade neuronal. Consequentemente, em nenhuma das estirpes de murganho, a infeção teve impacto no comportamento locomotor, do tipo ansioso e depressivo. Estes resultados mostram que as alterações induzidas pela infeção no perfil das citocinas, tanto na periferia como no hipocampo, são insuficientes para alterar o comportamento e a plasticidade do hipocampo. One of the most remarkable findings in the immunology and neuroscience fields was the discovery of the bidirectional interaction between the immune and the central nervous systems. This interplay is tightly regulated to maintain homeostasis in physiological conditions. Disruption in this interplay has been suggested to be associated with several neuropsychiatric disorders. Most studies addressing the impact of an immune system disruption on behavioral alterations focus on acute pro-inflammatory responses. However, chronic infections are highly prevalent and associated with an altered cytokine milieu that persists over time. Studies addressing the potential impact of mycobacterial infections on depressive-like behavior originated discordant results and the subject need to be further address. To promote our understanding on the effect of chronic infections on the central nervous system, we evaluated the impact of Mycobacterium avium infection. Since the profile of cytokines produce vary depending on the mouse strains, three mouse strains were analyzed (Balb/c, C57BL/6 and CD-1). We used female mice and the model of peripheral chronic infection. Our results show that M. avium peripheral chronic infection induces alterations not just in the peripheral immune system but also in the central nervous system, namely in the hippocampus. Interestingly these cytokine alterations vary between mouse strains. These altered cytokine profiles are not accompanied by hippocampal cell proliferation or neuronal plasticity changes. Accordingly, no differences were observed in locomotor, anxious and depressive-like behavior independently on the mouse strains used. These results show that the infection-induced alterations in the cytokine profile, both in the periphery and the hippocampus, are insufficient to alter behavior and hippocampal plasticity.

A hiperalgesia induzida por opióides (OIH) constitui um efeito paradoxal dos opióides cuja real ocorrência na clínica não é consensual. Neste contexto, realizámos uma revisão crítica da literatura médica, a qual demonstra evidência direta e indireta a favor da sua ocorrência. Expomos aqui, portanto, fatores farmacológicos e centrados no doente que justificam a existência de grande variabilidade clínica, bem como estratégias terapêuticas anti-OIH, as quais incluem a prescrição de substâncias opioides alternativas, redução na sua dose e/ou acrescento de medicação adjuvante. Constatamos que as cascatas de sinalização intracelular desencadeadas pela ativação do receptor µ-opioide (MOR) exercem, simultaneamente efeitos neuronais contraditórios. As recentes descobertas relativas aos mecanismos celulares envolvidos na OIH e à neurobiologia do MOR, incluindo o papel do splicing alternativo e da heteromerização deste recetor, justificam que diversos graus de desregulação opioidérgica causem desde hiperalgesia de baixa intensidade até manifestação intensa de OIH, constituindo "doença". Tal conhecimento reforça a adoção de uma nova perspectiva clínica e consciencialização da comunidade clínica para a relevância da OIH. Opioid-induced hyperalgesia (OIH) is a paradoxical effect of opioids that is not consensually recognized in clinical settings. We conducted a revision of clinical studies that show direct and indirect evidence of OIH. We discuss patient and drug-centered factors of variability in OIH manifestations and how the strategies to counter OIH, which include opioid switching, reduction in opioid dose and addition of adjuvant medication, rely on mechanisms suggesting the µ-opioid receptor (MOR) signals through opposite co-active pathways. We further discuss how recent findings on the cellular mechanisms involved in OIH, in addition to the neurobiology of MOR, including the growing information on the functional role of alternative splicing and heteromerization, may justify observable degrees of opioidergic dysregulation leading to mild hyperalgesia to full-scale OIH "disease". These findings call for a new perspective and awareness of OIH from a clinical point of view.

Os trofoblastos extravilositários são as principais células envolvidas na placentação. O aspartame é um adoçante artificial com um uso disseminado e é completamente hidrolisado no trato gastrointestinal em fenilalanina, ácido aspártico e metanol. Nos roedores, a ingestão de aspartame durante a gravidez associou-se a uma redução dos pesos da placenta e do feto, contudo, o efeito do aspartame na placentação a um nível celular nunca foi estudado. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do aspartame e dos seus metabolitos nas características de trofoblastos extravilositários. Para tal, expôs-se células HTR-8/SVneo ao aspartame (0.001, 0.01, 0.1, 0.5 e 1 mM), L-fenilalanina (0.14 e 0.5 mM), L-aspartato (0.82, 2.8 e 10 mM) ou metanol (0.14 e 0.8 mM). O aspartame teve um efeito anti-proliferativo e diminuiu a atividade mitocondrial, a captação de glicose a aumentou o número de células na fase S do ciclo celular. O L-aspartato reduziu significativamente a captação de glicose e o conteúdo proteico da cultura. A L-fenilalanina teve um efeito anti-proliferativo e aumentou a atividade mitocondrial. O metanol teve efeitos ainda mais marcados nas células HTR8/SVneo do que o aspartame. Nomeadamente, demonstrou um efeito anti-proliferativo, diminuiu a captação de glicose, a capacidade migratória e o número de células na fase G2/M e induziu stress oxidativo em concentrações correspondentes aos níveis sanguíneos observados com o percentil 99 da ingestão diária máxima recomendada de aspartame. De forma geral, estes resultados mostram que o aspartame e os seus metabolitos podem afetar os trofoblastos extravilositários e apoiam a conclusão de que o efeito do aspartame na placenta deve ser mais bem avaliado. Extravillous trophoblasts (EVTs) are the main cell type involved in placentation. Aspartame is an artificial sweetener with a widespread use, and this compound is completely hydrolyzed in the gastrointestinal tract into phenylalanine, aspartic acid, and methanol. In rodents, aspartame ingestion during pregnancy was found to cause a reduction in placental and fetal weights, but its effect in placentation at a cellular level has not been studied. In this work, we aimed to study the effects of aspartame and its metabolites on placentation-related characteristics of EVTs. For this, we exposed HTR-8/SVneo cells to aspartame (0.001, 0.01, 0.1, 0.5 and 1 mM), L-phenylalanine (0.14 and 0.5 mM), L-aspartic acid (0.82, 2.8 and 10 mM) or methanol (0.14 and 0.8 mM) for 24 h. Aspartame had an antiproliferative effect, decreased mitochondrial activity and glucose cellular uptake and increased the number of cells arrested in S phase. L-aspartic acid significantly reduced glucose uptake and the culture protein content. L-phenylalanine had an antiproliferative effect and increased mitochondrial activity. Interestingly, methanol exerted even more marked effects on HTR8/SVneo cells than aspartame. Namely, it showed an antiproliferative effect, decreased glucose uptake, the migratory ability and the number of cells in the G2/M phase and increased oxidative stress levels, in concentrations corresponding to the blood levels after the 99th percentile of projected daily ingestion of aspartame. Overall, our results demonstrate that aspartame and its metabolites can affect EVTs and support the conclusion that the effect of aspartame in the placenta should be further evaluated.

O Selénio (Se) é essencial para a síntese de selenoproteínas, sendo, por isso, importante nas funções imune e tiroideia, e na defesa contra agentes antioxidantes. Alguns estudos mostraram que baixos níveis de Se podem estar associados ao desenvolvimento de Distúrbios Hipertensivos da Gravidez (HDPs). No entanto, há ainda falta de evidência científica que suporte a suplementação com Se em grávidas ou em mulheres em idade fértil. Neste contexto, este trabalho pretendeu rever sistematicamente a mais recente literatura referente à associação entre níveis de Se e HDPs. Realizámos uma revisão sistemática (protocol number: CRD42022310424) com literatura publicada na última década. Foi feita uma pesquisa nas bases de dados PubMed, Scopus e Web of Science, em registos de ensaios clínicos, e na grey literature por estudos em que quantificaram níveis de Se em grávidas normotensas e hipertensas (suplementadas ou não com Se). A qualidade dos estudos foi avaliada utilizando as ferramentas de avaliação de qualidade do National Heart, Lung, and Blood Pressure Institute. Dos 30 estudos incluídos, a maioria (n=19, 61% dos estudos "good" ou "fair"), reportaram uma associação negativa entre níveis de Se e HDPs, e alguns estudos (n=11, 39% dos estudos "good" ou "fair") não encontraram associação. Embora a evidência obtida não seja suficiente para argumentar claramente em favor da suplementação com Se na gravidez como fator protetor contra o desenvolvimento de HDPs, há uma quantidade relevante de evidência com qualidade que sugere que baixos níveis de Se se podem associar à ocorrência destas patologias. Esta revisão realça a necessidade de se desenvolverem mais ensaios controlados randomizados de boa qualidade que possam fornecer evidências claras relativas aos benefícios da suplementação com Se durante a gravidez para prevenir HDPs, ou como tratamento adjuvante para estas patologias. Selenium (Se) is essential for selenoprotein synthesis, being thus important for immune and thyroid function, and for antioxidant defence. Some studies have shown that low levels of Se may associate with Hypertensive Disorders of Pregnancy (HDPs). Nevertheless, evidence supporting Se supplementation in pregnant or childbearing-age women is still lacking. In this context, this work aimed to systematically review the most recent scientific evidence associating Se levels in pregnant women and HDPs. We performed a systematic review (protocol number: CRD42022310424) with literature of the last decade. PubMed, Scopus, Web of Science, registers, and grey literature were searched to identify studies reporting measurement of Se levels in normotensive and hypertensive pregnant women (supplemented or not with Se). Study quality was assessed using the National Heart, Lung, and Blood Pressure Institute Study Quality Assessment Tools. Among the 30 included studies, a majority (n=19, 61% of good or fair studies) reported a negative association between Se and HDPs, and some studies (n=11, 39% of good or fair studies) reported a lack of association. Although gathered evidence is not enough to clearly argue in favour of Se supplementation in pregnancy as a protective factor against HDPs, there is an important amount of quality evidence suggesting that low Se levels may associate with the occurrence of these conditions. This review emphasizes the need for further well-designed randomized controlled trials that may provide contundant evidence regarding the benefits of Se supplementation during pregnancy to prevent HDPs, or as adjuvant treatment for these conditions.

Diabetes Mellitus é uma doença metabólica, que apresenta elevada prevalência a nível mundial, e é caraterizada pela hiperglicemia crónica, levando ao desenvolvimento de complicações. São, particularmente, estas complicações que causam elevada mortalidade em pacientes diabéticos. Este trabalho foca-se nas úlceras do pé diabético (DFUs), que são uma das complicações mais comuns da diabetes mellitus do tipo 2 (T2DM) e causam morbilidade, mortalidade e custos de saúde significativos. A cicatrização das DFUs é prejudicada pela desregulação de quase todas a fases deste processo, devido ao meio hiperglicémico presente. Embora existam atualmente terapias para gerir um doente com DFU, estas acabam por ser insuficientes. No presente trabalho, a angiogénese é destacada como parte da fase proliferativa, que, quando diminuída, desempenha um papel importante na cicatrização prejudicada de DFU e de outras feridas crónicas. Portanto, a busca por novas estratégias terapêuticas visando a angiogénese é de grande interesse. Aqui, fornecemos uma visão geral de alvos moleculares com potencial terapêutico e terapias que atuam na angiogénese. E para isto, foi realizada uma pesquisa nas bases de dados PubMed e Scopus de artigos publicados entre 2018 a 2021, com o objetivo de verificar a angiogénese como alvo terapêutico para DFU. Fatores de crescimento, microRNAs e vias de sinalização foram investigados como alvos moleculares, e a pressão negativa, oxigenoterapia hiperbárica e o uso de nanomedicina foram explorados como terapias. Diabetes Mellitus is a metabolic disease that has a high prevalence worldwide and is characterized by chronic hyperglycemia leading to the development of complications. In particular, it is these complications that result in huge mortality rates in diabetic patients. This work focuses on diabetic foot ulcers (DFUs), which are one of the most common complications of type 2 diabetes mellitus (T2DM) and cause significant morbidity, mortality, and healthcare costs. The healing of DFUs is hindered by deregulation of nearly all phases of this process due to the hyperglycemic environment. Although therapies currently exist to treat a patient with DFU, they are proving inadequate. In the present work, angiogenesis is highlighted as part of the proliferative phase, which, when diminished, plays an important role in the impaired healing of DFU and other chronic wounds. Therefore, the search for new therapeutic strategies targeting angiogenesis is of great interest. Here, we provide an overview of molecular targets with therapeutic potential and therapies that act on angiogenesis. To this end, a search of papers from the PubMed and Scopus databases from 2018 to 2021 was performed to review angiogenesis as a therapeutic target for DFU. Growth factors, microRNAs, and signaling pathways were investigated as molecular targets, and negative pressure, hyperbaric oxygen therapy, and the use of nanomedicine were explored as therapies.

A fibromialgia é uma das causas mais comuns de dor crónica generalizada. Tem um impacto enorme na qualidade de vida, nomeadamente porque aparece mais cedo na vida do que maior parte das condições de dor crónica. Além disso, fatores de stress cognitivo-emocional, como a depressão e a ansiedade, são uma característica comum em pacientes com fibromialgia. Os mecanismos neurobiológicos subjacentes à fibromialgia permanecem maioritariamente desconhecidos. Entre os tratamentos não-farmacológicos, a terapia cognitivo-comportamental tem sido utilizada durante a última década, nomeadamente com a inscrição dos pacientes em programas de redução do stress baseado em mindfulness (MBSR) e intervenções baseadas em mindfulness (MBI). Realizamos uma pesquisa para avaliar a existência de evidência científica para o uso de MBI na fibromialgia. Adicionalmente, analisamos criticamente a literatura considerando o desenho dos estudos, para apontar perspetivas futuras na investigação em MBI para pacientes com fibromialgia. Concluímos que, apesar da escassez de estudos longitudinais bem estruturados, existem resultados promissores a mostrar que as MBI são eficazes em reduzir os componentes emocionais negativos da doença. Estudos com desenhos bem estruturados devem incluir, por exemplo, controlos ativos, avaliação da eficácia sustentada, investigação dos mecanismos neurobiológicos subservientes e relatórios de possíveis efeitos adversos. A investigação em intervenções de mindfulness na fibromialgia precisa de ser aperfeiçoada para fornecer dados sólidos. Fibromyalgia is one of the most common causes of widespread chronic pain. It has a huge impact on the quality of life, namely because it appears earlier in life than most of the chronic pain conditions. Furthermore, emotional-cognitive distress factors, such as depression and anxiety, are a common feature in patients with fibromyalgia The neurobiological mechanisms underlying fibromyalgia remain mostly unknown. Among non-pharmacological treatments, cognitive-behavioral therapy has been used during the last decade, namely with the enrolment of patients in programs of mindfulness-based stress reduction (MBSR) and in mindfulness based interventions (MBI). We conducted a survey to evaluate the existence of scientific evidence for the use of MBI in fibromyalgia. We also critically analyzed the literature considering the design of the studies to point future perspectives in the research in MBI for patients with fibromyalgia. We conclude that despite the sparsity of well structured longitudinal studies, there are some promising results showing that the MBI are effective in reducing the negative emotional components of the disease. Well-structured design of studies should include, for example, active controls, evaluation of sustained effectiveness, investigation of the subserving neurobiological mechanisms and reports of possible adverse effects. Research in Mindfulness interventions in fibromyalgia needs to be improved to provide solid data.

Introdução O Professor Norberto Teixeira dos Santos (1932-1999) foi Médico Pediatra, Professor Catedrático da Faculdade de Medicina da Universidade de Porto, impulsionador na criação da Pediatria Social e na formação da Faculdade de Ciências da Nutrição. Exigente a nível pessoal e profissional, o Serviço de Pediatria do Hospital São João deve-lhe muito do prestígio nacional e internacional. Materiais e Métodos A informação foi recolhida através de entrevistas realizadas à família e a personalidades que tiveram o privilégio de trabalhar com o Professor Norberto. Foi ainda efetuada pesquisa bibliográfica na Biblioteca da FMUP e no Arquivo do Museu da História da Medicina "Maximiano Lemos", para além de artigos em várias revistas, direta ou indiretamente relacionados com o Professor. Resultados Licenciou-se em Medicina pela Faculdade Medicina de Lisboa, onde fez também a especialidade de Pediatria. Recém Especialista e como médico militar vai para Moçambique. Apesar das dificuldades, nada o desmotiva e consegue conciliar a ação militar (em dois largos períodos) com a atividade assistencial e universitária na área da Pediatria. Discussão A vivência em dois continentes tão diferentes e com realidades tão distintas cedo o despertaram para os problemas da malnutrição, vacinação e, portanto, da Nutrição e da Pediatria Social. A capacidade de gestão foi aprimorada e posta em ação em todos os Serviços por onde passou. Recém-chegado a Portugal assume a cátedra da Pediatria da FMUP e a direção do Serviço de Pediatria do Hospital São João. Envolve-se na formação da Faculdade de Ciências da Nutrição e na formação da Secção de Pediatria Social da Sociedade Portuguesa de Pediatria. Conclusão Norberto Teixeira dos Santos é um exemplo de empenhamento cívico e de elevado profissionalismo, dedicação e abnegação no exercício de excelência da sua atividade profissional. A sua vida é reflexo da consciência social do seu tempo. Médico Pediatra, Professor Catedrático de Pediatria na Universidade do Porto soube aliar a investigação científica com a atividade pedagógica, ação cultural e responsabilidade cívica. Introduction The Professor Norberto Teixeira dos Santos (1932-1999) was Pediatrician, Professor at the Faculty of Medicine of the University of Porto, promoter in the creation of Social Pediatrics and the formation of the Faculty of Nutrition Sciences. Demanding on a personal and professional level, the Pediatrics Service owes him the national and international prestige. Materials and methods The information was obtained from interviews to the family and personalities who had the privilege of working with Professor Norberto. It was also carried out a bibliographic research in the FMUP Library and in the Archive of the Museum of History of Medicine "Maximiano Lemos", in addition to articles in various magazines, directly or indirectly related to the Professor. Results He graduated in Medicine by the Faculty of Medicine of Lisbon, where he also did specialty of Pediatrics. The newly specialist and military doctor goes to Mozambique. Despite the difficulties, nothing discourages him and he manages to reconcile military action (in two long periods) with the assistance and university activity in the area of Pediatrics. Discussion Living in two continents that are so different and with such different realities soon this reality awakened him to the problems of malnutrition, vaccination and, therefore, Nutrition and Social Pediatrics. The management capacity was improved and put into action in all the Services he passed. When he arrives in Portugal, he assumes the chair of Pediatrics at FMUP and the Direction of the Pediatrics Service at Hospital São João. He gets involved in the training of the Faculty of Nutrition Sciences, in the training of the Social Pediatrics Section of the Portuguese Society of Pediatrics. Conclusion Norberto Teixeira Santos is an example of civic commitment and high professionalism, dedication and selflessness in the exercise of excellence in his professional activity. His life reflects the social conscience of his time. As Pediatrician, Professor of Pediatrics at the University of Porto, he knew how to combine scientific research with pedagogical activity, cultural action and civic responsibility.

Introdução: O trauma na infância constitui o maior fator de risco para o desenvolvimento de disfunções sociais na idade adulta, comumente associado com o desenvolvimento de diferentes patologias psiquiátricas. Entre estas, a perturbação de ansiedade social (PAS) é uma doença altamente prevalente, mas com uma etiologia pouco clara. O objetivo deste estudo passa pela revisão da literatura, numa tentativa de demonstrar relações específicas entre os diferentes tipos de trauma na infância (emocional, físico, sexual) com a presença de PAS na idade adulta. Métodos: Foi realizada uma pesquisa na PubMed de artigos em português ou inglês, sem limite de data de publicação, acerca da relação entre traumas e a PAS. Resultado: Foi detetada uma elevada prevalência de historial de trauma na infância e presença de PAS na idade adulta. Os resultados corroboraram que o trauma é um fator de risco para o desenvolvimento de patologias de ansiedade. No entanto, apenas o trauma emocional demonstrou consistentemente uma associação significativa específica com a PAS. Discussão: O trauma emocional na infância, através da interação com diversos fatores, como a vitimização entre pares e experiências sociais negativas, pode levar ao aparecimento de cognições negativas e crenças disfuncionais, que são ferramentas fundamentais para o desenvolvimento e manutenção da PAS. Desta forma, o trauma emocional pode ser interpretado como um fator de risco distal específico para o desenvolvimento de PAS. Background: Childhood trauma is the major risk factor to the development of social disfunctions in adulthood, commonly associated with the development of different psychiatric pathologies. Among these, social anxiety disorder (SAD) is a disease highly prevalent, but with an unclear aetiology. The objective of this study is a literature review, in an attempt to demonstrate specific associations between different kinds of trauma in childhood (emotional, physical, sexual) and the presence of SAD in adulthood. Method: A search was conducted in PubMed of studies in portuguese or english, with no publication date limitations. Results: A high prevalence of history of trauma in childhood and the presence of SAD in adulthood was detected. The results corroborate that trauma is a risk factor to the development of anxiety disorders. However, only emotional trauma consistently demonstrated a significant and specific association with SAD. Conclusions: Through interactions with multiple factors like peer victimization and negative social experiences, emotional trauma in childhood could lead to the appearance of negative cognitions and dysfunctional beliefs, which are fundamental to the development and maintenance of SAD. Thus, emotional trauma could be interpreted as a specific distal risk factor to the development of SAD.

Objetivos: O objetivo do rastreio pré-natal é detetar alterações no número ou estrutura dos cromossomas ou variantes genéticas patogénicas que causem doença. As técnicas de QF-PCR (Quantitative Fluorescent Polymerase Chain Reaction) e MLPA (Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification) têm sido usadas para a deteção rápida de aneuploidias cromossómicas. O cariótipo e o array-CGH (Array-comparative Genomic Hybridisation) são frequentemente usados como segundo teste. O objetivo deste estudo observacional retrospetivo foi avaliar os resultados da aplicação de métodos quantitativos MLPA e QF-PCR para a deteção rápida de aneuploidias cromossómicas no diagnóstico pré-natal e comparar o rendimento com as outras técnicas, nomeadamente o cariótipo e o array-CGH. Desenho do estudo: Entre janeiro de 2000 e janeiro de 2021, 3696 amostras foram recebidas para teste de diagnóstico pré-natal. As amostras foram estudadas utilizando, em primeiro lugar, MLPA ou QF-PCR para uma deteção rápida de aneuploidias nos cromossomas 13, 18, 21, X e Y, e, numa segunda fase, com cariótipo, array-CGH ou ambos. Foram recolhidos dados relativos à indicação de referenciação. Os resultados do MLPA ou do QF-PCR foram classificados como normais, anormais ou inconclusivos. Os resultados do cariótipo e da array-CGH foram classificados como não disponíveis ou disponíveis e esperados ou não esperados. Resultados: Dos 3696 casos identificados, 3659 foram avaliados. A indicação mais comum para os testes de diagnóstico foi um rastreio bioquímico positivo (31,4%), seguido de anomalias ecográficas (16,8%), idade materna avançada (15,9%) e a translucência da nuca aumentada (14,0%). 90,1% (3295/3659) dos resultados do MLPA ou QF-PCR foram normais e 9,9% (364/3659) apresentaram um resultado alterado. Depois do teste molecular, 3123 casos (85.4%) foram analisados apenas por cariótipo e 337 (9,2%) isoladamente por array-CGH. 79 (2.2%) das amostras foram testadas tanto pelo cariótipo como por array-CGH. Nenhum teste adicional foi realizado em 120 (3,3%) amostras. 93,3% (3414/3659) dos resultados do MLPA/QF-PCR foram concordantes com o resultado do teste subsequente. Foram detetados quatro resultados falsos negativos pelas técnicas moleculares devido a contaminação materna na amostra fetal. Conclusões: Os resultados descritos estão de acordo com os reportados na literatura e destacam a importância das técnicas rápidas de diagnóstico molecular para a deteção de alterações cromossómicas num�\xA9ricas. O cariótipo e o array-CGH desempenham um papel importante para o estudo mais aprofundado de casos específicos, especialmente quando os resultados dos testes moleculares quantitativos rápidos são normais. Objectives: The aim of prenatal screening is to detect alterations in the number or structure of chromosomes or pathogenic genetic variants that are the cause of disease. Quantitative Fluorescent Polymerase Chain Reaction and Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification have been used for the rapid detection of aneuploidies. Karyotyping and array-comparative genomic hybridisation (array-CGH) are often used as second test. The aim of this retrospective observational study was to evaluate the results of the application of MLPA and QF-PCR quantitative methods for the rapid detection of chromosomal aneuploidies in prenatal diagnosis and to compare the diagnostics yield with the other techniques, namely karyotype and array-CGH. Study Design: Between January 2000 and January 2021, 3696 samples were received for prenatal diagnostic testing. Samples were studied using firstly MLPA or QF-PCR for a rapid detection of aneuploidies in chromosomes 13, 18, 21, X and Y, and on a second step with karyotype, array-CGH or both. Data concerning indication for referral was collected. MLPA or QF-PCR results were categorised as normal, abnormal, or inconclusive. The karyotype and array-CGH results were classified as non-available or available and expected or not expected. Results: Of the 3696 cases identified, 3659 were evaluated. The most common indication for diagnostic testing was a positive biochemical screening (31.4%), followed by ultrasound abnormalities (16.8%), advanced maternal age (15.9%) and increased nuchal translucency (14.0%). 90.1% (3295/3659) of the MLPA or QF-PCR results were normal and 9.9% (364/3659) showed an altered result. After the rapid molecular testing, 3123 cases (85.4%) were analysed by karyotype alone and 337 (9.2%) by an isolated array-CGH. 79 (2.2%) samples were tested by both karyotype and array-CGH. No other test was performed in 120 (3.3%) samples. 93.3% (3414/3659) of the MLPA/QF-PCR results were compatible with the subsequent test. Four false negative results were detected due to maternal cell contamination. Conclusions: These findings are in accordance with previous results reported in the literature and highlight the importance of the rapid molecular diagnostic tests for numerical chromosomal alterations. Karyotype and array-CGH play an important role for the further study of specific cases, especially when rapid quantitative molecular tests results are normal.

A instabilidade de microssatélites (IMS) é um fenótipo molecular que surge devido a um mecanismo de reparação do ADN alterado. Em cancro colorretal (CCR), um mecanismo de reparação do ADN alterado/IMS está associado a várias características clínicas e histopatológicas, influencia o prognóstico e é um fator preditivo de resposta ao tratamento. Na prática clínica, a IMS é identificada pela técnica de imunohistoquímica e/ou PCR multiplex. O antigénio Thomsen-Friedenreich (TF) foi previamente apresentado como biomarcador para a identificação de cancro gástrico com IMS. Por conseguinte, neste estudo, pretendeu-se avaliar uma possível associação entre a expressão do antigénio TF e a presença de IMS em CCR. Adicionalmente, foi avaliada a relação entre a expressão do antigénio TF e outras características clínicopatológicas, nomeadamente a sobrevida dos doentes. Avaliou-se a expressão do antigénio TF numa série de 25 CCR com IMS e 71 CCR com estabilidade de microsatélites. Não foi observada qualquer associação entre a expressão do antigénio TF e a presença de IMS em CCR. A análise de sobrevida revelou que os doentes com CCR com IMS apresentaram uma melhor sobrevida quando o antigénio TF foi expresso. Esta associação é promissora, uma vez que indica o possível uso do antigénio TF como biomarcador de melhor prognóstico em CCR com IMS que deve ser validada numa série de CCR independente e de maior dimensão. Microsatellite instability (MSI) is a molecular phenotype due to a deficient DNA mismatch repair (dMMR). In colorectal cancer (CRC), dMMR/MSI is associated with several clinical and histopathological features, influences prognosis and is a predictive factor of response to therapy. In the daily practice, dMMR/MSI profile is identified by immunohistochemistry and/or multiplex PCR. The Thomsen-Friedenreich (TF) antigen was previously found to be a potential single marker to identify MSI-high gastric cancers. Therefore, in this study we aimed at disclosing a possible association between TF expression and MSI status in CRC. Further, we evaluated the relationship between TF expression and other clinicopathological features, including patients' survival. We evaluated the expression of the TF antigen in a cohort of 25 MSI-high and 71 microsatellite stable (MSS) CRCs. No association was observed between the expression of the TF antigen and MSI-high status in CRC. The survival analysis revealed that patients with MSI-high CRC showed improved survival when the TF antigen was expressed. This finding holds promise as it indicates the potential use of the TF antigen as a biomarker of better prognosis in MSI-high CRCs that should be validated in an independent and larger CRC cohort.

Introdução: O recetor Toll-like 4 (TLR4) é um recetor de reconhecimento de padrões envolvido no reconhecimento de padrões moleculares associados a agentes patogénicos (PAMPs), mas é também considerado um recetor de "deteção de perigo" pois reconhece moléculas endógenas derivadas do hospedeiro chamadas padrões moleculares associados a danos (DAMPs). O papel do TLR4 nas doenças reumáticas tem-se tornando evidente, bem como o seu potencial papel como opção terapêutica. Evidências científicas também sugerem um papel dos TLR4 nas condições de dor crónica. Assim, neste estudo, avaliámos se a administração sistémica de um antagonista de TLR4 (TLR4-A1) poderia ser eficaz na redução da nocicepção e degradação da cartilagem na osteoartrose (OA) experimental. Para além disso, como o fator de transcrição de ativação (ATF) -3 serve como um regulador negativo para a resposta inflamatória estimulada por TLR4, também avaliámos o efeito do TLR4-A1 na expressão de ATF-3 em neurónios aferentes primários ao nível dos gânglios dorsais raquidianos (DRG). Métodos: A OA foi induzida em ratos Wistar adultos através de uma injeção intra-articular de 2 mg de mono-iodoacetato de sódio (MIA) no joelho esquerdo. A partir do dia 14 até aos 28 dias após a indução de OA, os animais receberam uma injeção intraperitoneal de TLR4-A1 (1 mg) ou de veículo. A nocicepção induzida pelo movimento e carga foi avaliada em todos os animais, em vários momentos, pelos testes Knee-Bend e CatWalk, antes e após a administração de TLR4-A1 ou veículo. A imunofluorescência para TLR4 e ATF-3 foi realizada nos DRGs L3-L5. As articulações do joelho foram processadas para avaliação histopatológica. Resultados: A administração de TLR4-A1 reduziu significativamente a nocicepção induzida pelo movimento em animais OA, particularmente no teste do Knee-Bend. Para além disso, o aumento na expressão de ATF-3 observado em DRG de animais OA foi significativamente reduzido pelo TLR4-A1. Nenhum efeito, no entanto, foi observado na perda de cartilagem nem na expressão citoplasmática neuronal de TLR4 após a administração do antagonista. Conclusão: A administração do antagonista do TLR4 possivelmente interrompe a cascata de sinalização do TLR4, diminuindo o ambiente neurotóxico na articulação e, consequentemente, a expressão do ATF-3, provocando assim uma melhoria dos sintomas álgicos. Introduction: Toll-like receptor 4 (TLR4) is a pattern recognition receptor involved in the recognition of pathogen-associated molecular patterns (PAMPs) but also a "danger-sensing" receptor that recognizes host-derived endogenous molecules called damage-associated molecular patterns (DAMPs). The role of TLR4 in rheumatic diseases is becoming evident, as well as its potential role as a therapeutic option. Moreover, increasing evidence also suggests a role for TLR4 in the chronic pain states. Thus, in this study, we evaluated whether a systemic administration of an antagonist of TLR4 (TLR4-A1) could be effective on decreasing nociception and cartilage degradation in experimental osteoarthritis (OA). Furthermore, as the activation transcription factor (ATF)-3 serves as a negative regulator for TLR4-stimulated inflammatory response we also evaluated the effect of TLR4-A1 on ATF-3 expression in primary afferent neurons at the dorsal root ganglia (DRG) level. Methods: OA was induced in adult Wistar rats through an intra-articular injection of 2mg of sodium mono-iodoacetate (MIA) into the left knee. From days 14 to 28 after OA induction, animals received an intraperitoneal injection of either TLR4-A1 (1mg) or vehicle. Movement- and loading- induced nociception was evaluated in all animals, by the Knee-Bend and CatWalk tests, before and after TLR4-A1 or vehicle administration, at several time-points. Immunofluorescence for TLR4 and ATF-3 was performed in L3-L5 DRGs. Knee joints were processed for histopathological evaluation. Results: Administration of TLR4-A1 markedly reduced movement-induced nociception on OA animals, particularly in the Knee-Bend test. Moreover, the increase in ATF-3 expression observed in DRG of OA animals was significantly reduced by TLR4-A1. No effect, however, was observed in cartilage loss nor on the neuronal cytoplasmic expression of TLR4 upon antagonist administration. Conclusion: The TLR4 antagonist administration possibly interrupts the TLR4 signaling cascade, decreasing the neurotoxic environment at the joint, and as a consequence the ATF-3 expression, improving the pain symptoms.

A diabetes mellitus gestacional (DMG) é uma complicação metabólica que se associa a múltiplas complicações na gravidez. Nos últimos anos, a exposição a metais pesados tem aumentado e alguns estudos sugerem que esta exposição pode modificar o risco de DMG. O objetivo desta revisão é sistematizar o conhecimento atual sobre a associação entre metais pesados e DMG. A expressão ((heavy metal) OR (heavy metal exposure) OR (environmental exposure)) AND ((gestational diabetes) OR (gestational diabetes mellitus) OR (GDM)) foi pesquisada nas bases de dados da Pubmed, Web of Science e Scopus em Março de 2021 sem qualquer restrição de tempo ou língua. Foram excluídos os estudos que não avaliaram a exposição a metais pesados, DMG como outcome e estudos em animais. Inicialmente foram obtidos 847 artigos, 26 dos quais cumpriam os critérios de inclusão. 13 destes artigos eram coortes prospetivos, 7 eram estudos observacionais de casos e controlos, 3 eram estudos observacionais transversais, 2 eram coortes retrospetivos e 1 era um estudo semi-ecológico. Além disso, 16 artigos investigaram apenas um tipo de metal pesado. O cádmio (Cd), arsénio (As), antimónio (Sb), o tálio (Tl) e o mercúrio (Hg) foram os metais pesados mais investigados. O interesse científico sobre os metais pesados como potenciais fatores de risco para o desenvolvimento de DMG parece estar a aumentar. Apesar de serem necessários mais estudos, o Cd, o As, o Sb e o Tl foram os metais que apresentaram evidencia mais robusta sobre uma associação positiva com o risco para o desenvolvimento de DMG. Gestational diabetes mellitus (GDM) constitutes a metabolic complication which is associated with multiple adverse pregnancy outcomes. Humans' exposure to heavy metals has increased in recent years and studies have suggested that they may modify the risk of GDM. The aim of this review is to provide a comprehensive overview of published evidence on the association between heavy metals and GDM. The expression ((heavy metal) OR (heavy metal exposure) OR (environmental exposure)) AND ((gestational diabetes) OR (gestational diabetes mellitus) OR (GDM)) was searched in PubMed, Web of Science and Scopus databases in March 2021 without any time or language restriction. Studies that didn´t focus on heavy metals effects, didn´t assess GDM as an outcome or were performed in animals were excluded. Of the initial 847 papers, 26 fulfilled the inclusion criteria. 13 articles were prospective cohort studies, 7 were case-control studies, 3 were cross-sectional studies, 2 were retrospective cohort studies and 1 was a semi-ecological study. Moreover, a total of 16 studies measured only one type of heavy metal. Cadmium (Cd), arsenic (As), lead (Pb), antimony (Sb), thallium (Tl) and mercury (Hg) were the mainly evaluated heavy metals. The scientific interest in heavy metals as a potential risk factor for GDM seems to be growing. Although more studies with higher standardization are required, Cd, As, Sb and Tl showed the most robust evidence suggesting a positive association with the risk of GDM.

Introdução: A Cardiomiopatia Séptica (CMS) é uma situação clínica de prevalência crescente, com uma alta mortalidade e escassas opções terapêuticas. Apesar da intensa atividade da investigação experimental, a translação de novas terapêuticas neste cenário clínico tem sido limitada pela existência de importantes diferenças interespécies. Nesse sentido, o estudo da CMS humana é necessário para ultrapassar as limitações dos presentes modelos experimentais. Os microARN (miR) são importantes reguladores do transcriptoma e função miocárdicos. Neste trabalho, investigámos o transcriptoma e o targetoma de pequenos ARN miocárdicos na CMS humana. Métodos: Amostras post mortem de miocárdio humano foram obtidas de pacientes com choque séptico (n=53) e controlos não sépticos (n=15). A sequenciação de pequenos ARN (Illumina) foi realizada numa subpopulação (Ctrl, n=8; Sépsis, n=16) para a obtenção do perfil de expressão de miR na CMS humana. Os resultados da análise de expressão diferencial foram confirmados por PCR quantitativo. A associação entre os níveis de expressão dos miR e o marcador de lesão miocárdica (concentração plasmática de troponina ante mortem) foi avaliada. A predição do targetoma foi realizada para identificar novas interações miR-mRNA na CMS. Um modelo experimental de murganho foi usado para a posterior validação do gene alvo no tecido miocárdico (immunoblotting). Resultados: A assinatura transcriptómica de microARN na CMS humana foi identificada e validada com sucesso. Vários miR com conhecidas funções pró-inflamatórias (miR-21, miR-146b e miR-223) estão sobreexpressos na CMS humana. No entanto, encontramos também miR com funções desconhecidas na CMS, alguns sobreexpressos (família miR-320 e miR-185) e outros subexpressos (miR-135a). De forma importante, a expressão de alguns miR correlacionou-se positiva ou negativamente com a lesão miocárdica, sendo capazes, em conjunto, de prever a variação de troponina na população séptica. Para além disso, a análise do targetoma identificou um alvo mRNA comum a praticamente todos os miR sobreexpressos na CMS, o Disrupted-in-schizophrenia 1 (DISC1), conhecido pelo papel central na regulação do metabolismo oxidativo mitocondrial. A subexpressão miocárdico do DISC1 foi validada num modelo experimental de sépsis. Conclusão: O nosso grupo identificou o perfil de expressão de microARN na CMS humana, fornecendo novos caminhos de investiga�\xA7ão e potenciais novos alvos terapêuticos. Adicionalmente, a análise do targetoma mostrou que o DISC1, um gene previamente associado a patologia psiquiátrica, pode ter um papel importante nas disfunções mitocondrial e miocárdica induzidas pela sépsis. Background: Septic cardiomyopathy (SCM) is an increasingly prevalent clinical situation with high mortality and scarce treatment options. Despite intense experimental research activity, translation of novel therapies in this clinical scenario has been hindered by important interspecies differences. Therefore, the study of human SCM samples is needed to overcome limitations of current experimental models. MicroRNAs (miRs) are key regulators of the myocardial transcriptome and function. Herein, we investigated the myocardial small RNA transcriptome and targetome in human SCM. Methods: Human postmortem myocardial samples were obtained from septic shock (n=53) and nonseptic control patients (n=15). Small RNA sequencing (Illumina) was performed in a subpopulation (Ctrl, n=8; Sepsis, n=16) to obtain the miR expression profile in human SCM. Results from differentially expression analysis were confirmed by quantitative PCR. The association between miR expression levels and myocardial injury surrogate (antemortem troponin plasma concentration) was assessed. Targetome prediction was performed to uncover novel miR-mRNA interactions in SCM. An experimental mouse model was used for posterior validation of target gene downregulation in myocardial tissue (immunoblotting). Results: MicroRNA transcriptomic signature in human SCM was successfully identified and validated. Several miRs with known proinflammatory function were confirmed to be upregulated in human SCM (miR-21, miR-146b, miR-223). However, miRs unknown to play a role in SCM were also found to be upregulated (miR-320 family, miR-185) and downregulated (miR-135a-5p). Importantly, expression of some miRs correlated positively or negatively with myocardial injury, being able to predict troponin variation in the septic population. Moreover, targetome analysis identified a common mRNA target to the upregulated miRs in SCM, Disrupted-in-schizophrenia 1 (DISC1), a key player in the regulation of mitochondrial oxidative metabolism. An experimental mouse model of sepsis was used to validate DISC1 myocardial downregulation. Conclusion: We identified the microRNA expression signature in human SCM providing novel research avenues and potential novel therapeutic targets. Additionally, targetome analysis uncovered DISC1, a gene previously associated with psychiatric disease, as a possible important player in sepsis-induced mitochondrial and myocardial dysfunction.

O envolvimento de mecanismos epigenéticos na dor crónica a nível supra-espinal não se encontra totalmente caracterizado. A metilação do DNA de histonas é regulada de modo crucial por metiltransférases de novo (DNMT1-3) e por dioxigénases da translocação dez-onze (TET1-3). Estudos têm demonstrado que os marcadores de 5mC se encontram alterados em diferentes regiões do SNC relacionadas com a nocicepção, nomeadamente gânglios da raiz dorsal (DRG), medula espinal e diversas áreas cerebrais. Redução global da metilação foi encontrada nos gânglios da raiz dorsal, amígdala e córtex pré-frontal associada a diminuição da expressão de DNMT1/ 3a; igualmente, níveis aumentados de 5hmC e expressão genética de TET1 e TET3 foram associados a hipersensibilidade aumentada à dor e alodínia em modelos inflamatórios e neuropáticos de dor crónica. Como alterações epigenéticas podem ser também responsáveis pela coordenação e regulação das várias modificações transcricionais já descritas no contexto de dor crónica, neste trabalho, procuramos avaliar o papel funcional dos genes TET1-3 e DNMT1/ 3a em ratos com dor neuropática em diferentes áreas do cérebro. Num modelo spared nerve injury (SNI) de dor neuropática, 21 dias após cirurgia, encontramos expressão aumentada de TET1 no córtex pré-frontal medial e expressão diminuída no caudado-putamen e amígdala; TET2 revelou-se sobre-regulada no tálamo medial; os níveis de mRNA de TET3 mostraram encontrar-se reduzidos no córtex pré-frontal medial e caudado-putamen e DNMT1 demonstrou expressão reduzida no caudado-putamen e tálamo medial. Não foram observadas diferenças estatisticamente significativas na expressão genética do gene DNMT3a. Os resultados do nosso estudo sugerem um papel funcional complexo destes diferentes genes em diversas regiões cerebrais no contexto de dor neuropática. A noção de que a metilação e hidroximetilação do DNA podem ter especificidade celular e não apenas tecidular e a possibilidade de expressão genética variável cronologicamente após o estabelecimento de modelos de dor neuropática e/ ou inflamatória necessitarão de esclarecimento cabal em estudos futuros. The role of epigenetics in chronic pain at the supraspinal level is yet to be fully characterised. DNA histone methylation is crucially regulated by de novo methyltransferases (DNMT1-3) and ten-eleven translocation dioxygenases (TET1-3). Evidence has shown that 5mC markers are altered in different CNS regions related to nociception, namely the dorsal root ganglia, spinal cord, and diverse brain areas. Decreased global methylation was found in the DRG, prefrontal cortex and amygdala, associated with decreased DNMT1/3a expression; and increased 5hmC levels as well as mRNA levels of TET1 and TET3 were found linked to augmented pain hypersensitivity and allodynia in inflammatory and neuropathic pain models. Since epigenetic mechanisms may be responsible for the regulation and coordination of various transcriptional modifications described in chronic pain states, with this study, we aimed to evaluate the functional role of TET1-3 and DNMT1/3a genes in neuropathic pain in several brain areas. In a spared nerve injury rat model of neuropathic pain, 21 days after surgery, we found increased TET1 expression in the medial prefrontal cortex and decreased expression in the caudate-putamen and amygdala; TET2 was upregulated in the medial thalamus; TET3 mRNA levels were reduced in the medial prefrontal cortex and caudate-putamen; DNMT1 was downregulated in the caudate-putamen and medial thalamus. No statistically significant changes in expression were observed with DNMT3a. Our results suggest a complex functional role of these genes in different brain areas in the context of neuropathic pain. The notion of DNA methylation and hydroxymethylation being cell type-specific and not tissue-specific, and the possibility of chronologically differential gene expression after the establishment of neuropathic or inflammatory pain models ought to be addressed in future studies.

Introdução A Termografia Médica, dotada da capacidade de avaliar de forma não invasiva a termorregulação tecidular, confere a possibilidade de construir uma imagem corporal, permitindo fazer inferências sobre processos fisiológicos e patológicos que se desenvolvem à sua superfície ou que tenham tradução nela. As suas aplicações em Cirurgia Plástica são muito diversas, estando neste artigo sumariadas algumas áreas onde esta técnica tem conquistado uma atenção crescente. Métodos Foi realizada uma pesquisa na literatura via PubMed em setembro de 2020, bem como uma breve revisão nas referências dos estudos incluídos, a fim de encontrar outras citações relevantes. A estratégia de pesquisa foi sensível aos resumos e corpo de texto, usando a seguinte query: "((thermography) and (plastic surgery)) and ((burns) or (skin lesions) or (flap surgery))". Resultados A presente revisão da literatura demonstrou as aplicações da Termografia Médica em Cirurgia Plástica, mais concretamente no âmbito do diagnóstico de lesões cutâneas de malignidade incerta, na avaliação da profundidade de queimaduras e, finalmente, na seleção pré-operatória de perfurantes para retalhos livres em reconstrução mamária e na sua monitorização intra e pós-operatória. Conclusão A Termografia moderna é, atualmente, um método não-invasivo, credível e útil na prática clínica de Cirurgia Plástica. Introduction Medical Thermography, provided with the ability to non-invasively assess tissue thermoregulation, gives the possibility to create a body image, allowing inferences to be made about physiological and pathological processes that develop on skin surface. Its applications in Plastic Surgery are broad, being some areas where this technique has gained increasing attention summarized in this paper. Methods A literature search on PubMed was conducted in September 2020, as well as a scan of the included studies' reference lists in order to search for additional relevant citations. The search strategy was sensitive to texts and abstracts, using the following query: "((thermography) and (plastic surgery)) and ((burns) or (skin lesions) or (flap surgery))". Results The present literature review displayed the applications of medical thermography in Plastic Surgery, more specifically in the context of the diagnosis of skin lesions of uncertain malignancy, in the assessment of burn depth and, finally, in the preoperative selection of perforators for free flaps in breast reconstruction and its intra and postoperative monitoring. Conclusion Modern Thermography is now a reliable, valuable non-invasive tool in Plastic Surgery clinical practice.

A compartimentalização da água no miocárdio é essencial para manter uma função cardíaca adequada. A balanço hídrico miocárdio é mantido através de uma interação complexa entre a filtração microvascular, a hidratação intersticial, a captação de água pelos cardiomiócitos e a sua remoção pela circulação linfática. Apesar da existência de múltiplos mecanismos compensatórios, a falência de um ou mais deste componentes resulta frequentemente em edema, definido como a acumulação de água intersticial e intracelular. A formação de edema miocárdico perturba o aparelho contrátil cardiomiocitário e as conexões intercelulares, dificulta o uptake de oxigénio e limita a drenagem de produtos do metabolismo celular e mediadores inflamatórios, levando, em última instância, à diminuição da performance miocárdica. Da mesma forma, os avanços na imagiologia cardíaca levaram ao reconhecimento do edema miocárdico como um achado clinicamente relevante e com implicações prognósticas em várias situações clínicas. A presente revisão tem como objetivo sumarizar o conhecimento atual da fisiologia do equilíbrio hídrico miocárdio, avaliar as consequências funcionais e clínicas da sua perturbação e explorar potenciais novas vias terapêuticas dirigidas ao edema miocárdico. The compartmentalization of water within the myocardium is essential to maintain normal cardiac function. Myocardial fluid balance is achieved by a complex interaction between microvascular filtration, interstitial hydration, cardiomyocyte water uptake and lymphatic removal. Despite the existence of multiple compensatory mechanisms, failure in one or more of these components frequently results in edema, defined as the accumulation of interstitial and intracellular water. Myocardial edema has been shown to disrupt cardiomyocyte contractile apparatus and intercellular connections, hamper oxygen uptake and reduce the washout of waste products and inflammatory mediators, ultimately impairing myocardial performance. Accordingly, advances in cardiac imaging led to the recognition of myocardial edema as a clinically relevant finding with prognostic implications in several clinical situations. The present review aims to summarize the current knowledge on the physiology of myocardial fluid balance, evaluating the functional and clinical consequences of its perturbation and exploring potential novel therapeutic avenues targeting myocardial edema.

O sistema colinérgico cerebral pode sofrer alterações funcionais e estruturais tanto em doentes epiléticos como nos modelos da doença. Contudo, a relação causal entre essas alterações e epilepsia ainda não se encontra estabelecida. Neste estudo, tentamos examinar o modo como a inibição da plasticidade colinérgica relacionada com epilepsia se pode refletir na suscetibilidade a crises epiléticas e/ou desenvolvimento de epilepsia crónica, assim como as suas consequências neurológicas. Assim sendo, foram administradas injeções intra-hipocampais com baixas doses de 192-IgG-saporina (SAP) em ratos Wistar adultos de modo a produzir uma moderada, mas significativa perda de neurónios colinérgicos na região septohippocampal, e suprimir a sua plasticidade. Os animais foram depois tratados com ácido caínico de modo a induzir status epilepticus, levando a posterior desenvolvimento de epilepsia crónica. Foi descoberto que o tratamento prévio com SAP se associa a um maior período de latência até ao início do estado de mal e a uma menor taxa de mortalidade, sugerindo que a elevada atividade das células colinérgicas septais pode potenciar crises epiléticas. Meses mais tarde, verificou-se que, em comparação com os ratos previamente tratados com SAP, uma maior percentagem de ratos com conexões colinérgicas septohipocampais intactas desenvolveram crises espontâneas. O tratamento com ácido caínico induziu perda de 40-50% dos neurónios hipocampais e este efeito não foi melhorado com depleção colinérgica prévia. Para além disso, os défices cognitivos induzidos por ácido caínico foram detetados tanto no grupo tratado com SAP como no grupo controlo. Estes dados sugerem que a plasticidade colinérgica induzida por crises epiléticas pode, de facto, aumentar a suscetibilidade a crises e contribuir para processos epileptogénicos. Os dados obtidos não suportam a hipótese de que a hipertrofia neuronal colinérgica relacionada com epilepsia pode potenciar perda celular hipocampal e as suas respetivas limitações comportamentais. Numa subsequente parte do projeto, decidimos estudar o efeito do modelo de epilepsia com ácido caínico na população GABAérgica do septo medial e banda diagonal de Broca (MS/DB). Usamos técnicas de imunohistoquímica para identificar neurónios marcados com parvalbumina, sendo esta co-expressa nos neurónios GABAérgicos do septo medial. Foi detetada uma diminuição de 35% nesta população neuronal, o que pode justificar alguns dos achados clínicos encontrados em animais epiléticos, como défices de formação de memória e aprendizagem. Estabelecemos também uma interação funcional entre os sistemas GABAérgicos e colinérgicos ao demonstrar a existência de co-localização entre varicosidades colinérgicas e neurites e pericários imunorreativos para parvalbumina, tanto em animais tratados com ácido caínico, como animais controlo. A densidade das varicosidades das fibras colinérgicas no septo medial encontra-se aumentada 45% nos animais epiléticos, sugerindo um aumento do aporte colinérgico para as células GABAérgicas septohipocampais. Isto pode ser explicado por um mecanismo compensatório devido à perda de neurónios GABAérgicos, ou pode ser um fator que contribui para a disrupção da via septohipocampal e, subsequentemente, para a epileptogénese. The brain cholinergic system may undergo structural and functional alterations both in human epilepsy and in respective animal models, but the causal relationships between these alterations and epilepsy remain to be established. In this study, we attempted to examine how the inhibition of epilepsy-related cholinergic plasticity may be reflected in seizure susceptibility and/or in the development of chronic epilepsy and its neurological consequences. For this purpose, adult Wistar rats received intrahippocampal injections of low doses of 192 IgG-saporin (SAP) to produce a moderate, but significant loss of septohippocampal cholinergic cells and to suppress their plasticity. Then, animals were treated with kainic acid to induce status epilepticus, which leads to the development of chronic epilepsy later in life. It was found that SAP-pretreatment was associated with longer latency to the onset of status epilepticus and with reduced mortality rate, suggesting that increased activity of septal cholinergic cells may potentiate seizures. Interestingly, months later, a greater percentage of rats with intact septohippocampal cholinergic connections showed spontaneous seizures, when compared to SAP-pretreated rats. Treatment with kainic acid produced death of 40-50% of hippocampal neurons and this effect was not ameliorated by prior cholinergic depletion. Moreover, the kainate induced cognitive deficits were detected in both SAP-pretreated and sham-pretreated groups. These data suggest that seizure-induced plasticity of cholinergic cells may indeed enhance seizure susceptibility and contribute to epileptogenic processes. They do not support the hypothesis that epilepsy-related hypertrophy of cholinergic neurons may potentiate hippocampal cell loss and respective behavioral impairments. In a subsequent part of our project, we studied the effects of epilepsy on GABAergic neurons of the medial septum. Immunohistochemistry techniques were used to identify cells stained for parvalbumin known to be co-expressed by septal GABAergic neurons. We found a 35% reduction in this neuronal population, which can justify some of the clinical findings in epileptic individuals, like learning and memory impairments. Also, we established a functional interaction between the GABAergic and cholinergic systems by showing that cholinergic fiber varicosities are co-localized with perikarya and neurites immunoreactive for parvalbumin in both KA-treated and control animals. Notably, the density of cholinergic fiber varicosities in the medial septum was increased by 45% in epileptic animals, suggesting enhanced cholinergic drive upon septohippocampal GABAergic cells, which can be explained as a compensatory mechanism for the decrease of GABAergic neurons, or as a contributing factor for septohipocampal pathway disruption and, ultimately, epileptogenesis.

Uma grande parte da variabilidade do nosso genoma pode ser atribuída a variações do número de cópias do ADN, nomeadamente deleções e duplicações. A presença destas variações no cromossoma 1, o maior cromossoma humano, é uma causa conhecida de morbilidade. Este estudo tem como objetivo contribuir para o mapa de doenças associadas ao cromossoma 1, através da análise de pacientes com rearranjos neste cromossoma. Foi feita uma seleção transversal, a partir da base de dados do Departamento de Genética da Faculdade de Medicina da Universidade do Porto, dos pacientes que realizaram estudo genético por array-CGH e que obtiveram como resultado alterações do no cromossoma 1 consideradas patogénicas ou provavelmente patogénicas. Foram avaliados os dados clínicos destes pacientes. As alterações genéticas encontradas foram pesquisadas em bases de dados nacionais e internacionais de referência assim como na literatura para classificação e para permitir o estabelecimento de uma correlação entre o genótipo e o fenótipo. De um total de 2516 pacientes incluídos na base de dados, identificámos 24 (0.95%) com variantes no cromossoma 1, 9 patogénicas e 15 provavelmente patogénicas. Estas corresponderam a 6,1% (24/392) do total de variantes patogénicas e provavelmente patogénicas incluídas na base de dados. A região 1q21.1 foi a região com mais alterações genéticas associadas, tanto deleções como duplicações, sendo que algumas destas alterações se estendiam até à região 1q21.2. Este estudo permitiu fortalecer a associação entre alterações genéticas do número de cópias no cromossoma 1 e doenças do neurodesenvolvimento, assim como dismorfismos craniofaciais. Adicionalmente, permitiu reforçar a ideia de que nem sempre será fácil interpretar estas variantes e estabelecer uma associação entre o genótipo e o fenótipo, uma vez que existe um largo espectro entre o que é considerado benigno e o que é claramente patogénico. Copy number variants (CNVs) are a major contribution to genome variability, and the presence of CNVs on chromosome 1 is a known cause of morbidity. The main objective of this study was to contribute for chromosome 1 disease map, through the analysis of patients with chromosome 1 CNVs. A cross-sectional study was performed using the array comparative genomic hybridization (array-CGH) database of the Genetic Department of the Faculty of Medicine. Patients with pathogenic (P) or probably pathogenic (VOUS-PP) CNVs on chromosome 1 were selected for the study. Clinical information was collected for all patients. Databases and related literature were used for genotype-phenotype correlation. From a total of 2516 patients included in the database we identified 24 patients (0.95%) with P (9 patients) or VOUS-PP (15 patients) CNVs on chromosome 1. These CNVs account for 6.1% (24/392 CNVs) of the total P/VOUS-PP CNVs in the database. Most common CNVs found were on 1q21.1-1q21.2 region. This study reinforces the association between chromosome 1 CNVs and neurodevelopmental disorders and craniofacial dysmorphisms. Additionally, it also strengthened the idea that CNVs interpretation is not always a linear task due to the broad spectrum of variants that can be identified between benign and clearly pathogenic CNVs.

Introduction: Anatomical knowledge of the floor of the third ventricle (FTV) is essential in avoiding surgical complications during endoscopic third ventriculostomy. The purpose of this study was to characterize the morphometry of FTV and related arteries, particularly the basilar artery (BA), as well as the factors that influence it. Materials and Methods: Twenty-six formalin-fixed adult brains and two-hundred adult brain MRIs were studied focusing on FTV and related arteries. Dimensions of interest were measured using image analysis software. Morphometric data obtained was statistically analyzed. Results: Distances between FTV, intermammillary sulcus (IMS), infundibulum, BA bifurcation, and posterior communicating arteries (PCoAs) were described on the cadavers and the MRIs. Distance between right and left PCoAs was greater at their anterior extremity (p < 0.001). Right PCoA was longer (p = 0.016). BA was lateralized in 58.4% of cases and its caliber was larger in males (p < 0.001). The distance from BA apex to FTV was inversely correlated with BA diameter (p < 0.001) and age (p = 0.004). Distance from IMS to infundibulum and the distance between both PCoAs were greater in MRI series when compared to cadaver series (p < 0.001). Conclusions: A quantitative description of the morphometry of the region of the FTV and related vessels was obtained, helping neurosurgeons in planning their surgical approach. The distance from BA apex to FTV was shorter in individuals with larger BA caliber and in older subjects. MRI studies were qualitatively superior to cadaveric studies in evaluating the anatomy of this region.

Heart Failure (HF) is a devastating disease with an increasing incidence that is associated with multiple comorbidities. Cognitive impairment (CI) is one of the most common coexisting chronic conditions in HF. Despite this strong association, the underlying pathophysiological mechanisms remain unknown, especially in HF with Preserved Ejection Fraction (HFpEF). We evaluated the effects of HFpEF on microglia and astrocyte activation and neuroinflammation in the hippocampal formation, a fundamental brain region in cognitive functions. The study was conducted on ZSF1‐Lean and ZSF1‐Obese rats, a metabolic risk-related HFpEF animal model. Animals were evaluated periodically through echocardiography. The numerical density of GFAP- and CD11b-immunoreactive cells in hippocampal formation were estimated using stereological procedures. Cytokine mRNA relative expression was measured. 30 week-old ZSF1-Obese rats showed an elevated left ventricular (LV) end-diastolic pressure, a higher LV mass and a higher E/E' ratio than ZSF1-Lean rats but similar ejection fraction, confirming the cardiac HFpEF phenotype in ZSF1-Obese rats. The numerical density of GFAP- and CD11b-positive cells in all of the hippocampal formation subfields were identical between groups. Although ZSF1-Obese and ZSF1-Lean rats showed no significant differences in IL-1β, IL-6 and COX-2 gene expression, expression of TNF-α was significantly increased in ZSF1-Obese rats. Our results suggest that in ZSF1‐Obese rats, an experimental model of HFpEF, there is no induction of microglial or astrocyte activation in the hippocampal formation, although there was a glial shift towards a pro-inflammatory phenotype.

Apesar das suas limitações inerentes, a investigação usando modelos pré-clínicos de nascimento prematuro tem contribuído muito, juntamente com os estudos neuropatológicos em humanos, para os avanços na compreensão da lesão cerebral em crianças prematuras. Aqui, tentamos perceber se as consequências do nascimento prematuro no neurodesenvolvimento e comportamento, avaliadas usando um modelo inflamatório de hipóxia / isquemia transitória pré-natal (TSHI), são diferentes daquelas observadas após o nascimento prematuro efectivo induzido por mifepristone (modelo não inflamatório). Ratos fêmeas Wistar grávidas foram injetadas com mifepristone, tendo as crias nascido no dia embrionário 21 (grupo ED21), ou laparotomizadas no 18º dia de gestação para oclusão das artérias uterinas durante 60 minutos. As crias de ratos foram testadas no período pós-natal para caracterização dos marcos de desenvolvimento e, após o desmame, foram testadas comportamentalmente para a ansiedade e para aprendizagem espacial e memória. Um mês depois, os cérebros foram processados para quantificação de células imunorreativas de doublecortina (DCX) e neuropeptídeo Y (NPY) e varicosidades colinérgicas no hipocampo. Os ratos ED21 não diferiram dos controlos no que diz respeito aos marcos do desenvolvimento neonatal, ansiedade, funções de aprendizagem e memória e parâmetros neuroquímicos. Por outro lado, em ratos TSHI, houve atraso do desenvolvimento dos reflexos neonatais, redução dos níveis de ansiedade e a aprendizagem e memória espacial foram afectadas; no hipocampo, houve aumento da densidade das células DCX e NPY e diminuição da densidade das varicosidades colinérgicas. Estes resultados sugerem que o nascimento prematuro, por si só, não induz mudanças significativas no desenvolvimento neonatal e no resultado neurológico do adulto e que os estímulos nocivos externos parecem ser importantes fatores contribuintes das lesões observadas em cérebros prematuros. Despite their inherent limitations, investigations using preclinical models of preterm birth have much contributed, together with human neuropathological studies, for advances in our understanding of brain injury in premature infants. Here, we addressed the question of whether the neurodevelopmental and behavioral consequences of preterm birth evaluated using an inflammatory, prenatal transient hypoxia/ischemia (TSHI) model would differ from those observed after actual preterm birth induced by mifepristone (non-inflammatory model). Pregnant Wistar rats were either injected with mifepristone, and pups were delivered on embryonic day 21 (ED21 group), or laparotomized on the 18th day of gestation for 60 minutes of uterine artery occlusion. Rat pups were tested postnatally for characterization of developmental milestones and, after weaning, they were behaviorally tested for anxiety and for spatial learning and memory. One month later, brains were processed for quantification of doublecortin (DCX)- and neuropeptide Y (NPY)-immunoreactive cells, and cholinergic varicosities in the hippocampus. ED21 rats did not differ from controls with respect to neonatal developmental milestones, anxiety, learning and memory functions, and neurochemical parameters. Conversely, in TSHI rats the development of neonatal reflexes was delayed, the levels of anxiety were reduced and spatial learning and memory was impaired; in the hippocampus, the density of DCX and NPY cells was increased and the density of cholinergic varicosities was reduced. These results suggest that preterm birth, by itself, does not induce significant changes in neonatal developmental and adult neurologic outcome and that external noxae seem to be important contributing factors of the lesions observed in premature brains.

OBJETIVO: O objetivo deste trabalho foi estudar a anatomia da região operculo-insular, nomeadamente do sulco lateral (fissura de Silvius) e dos opérculos e a relação com os ramos da artéria cerebral média (ACM). PACIENTES E MÉTODOS: O comprimento dos três ramos do sulco lateral e a espessura dos opérculos foram medidos em vinte hemisférios cerebrais de adultos, fixados numa solução de formaldeído. O padrão de ramificação e a origem dos ramos corticais da ACM foram caracterizados. Os dados obtidos foram analisados estatisticamente. RESULTADOS: O ramo posterior foi o mais longo dos ramos do sulco lateral (p