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International audience; Brettanomyces bruxellensis is a unicellular fungus of increasing industrial and scientific interest over the past 15 years. Previous studies revealed high genotypic diversity amongst B. bruxellensis strains as well as strain-dependent phenotypic characteristics. Genomic assemblies revealed that some strains harbour triploid genomes and based upon prior genotyping it was inferred that a triploid population was widely dispersed across Australian wine regions. We performed an intraspecific diversity genotypic survey of 1488 B. bruxellensis isolates from 29 countries, 5 continents and 9 different fermentation niches. Using microsatellite analysis in combination with different statistical approaches, we demonstrate that the studied population is structured according to ploidy level, substrate of isolation and geographical origin of the strains, underlying the relative importance of each factor. We found that geographical origin has a different contribution to the population structure according to the substrate of origin, suggesting an anthropic influence on the spatial biodiversity of this microorganism of industrial interest. The observed clustering was correlated to variable stress response, as strains from different groups displayed variation in tolerance to the wine preservative sulfur dioxide (SO2). The potential contribution of the triploid state for adaptation to industrial fermentations and dissemination of the species B. bruxellensis is discussed.

Precedenti indagini, rivolte alla valorizzazione ed alla diffusione di pratiche enologiche basate su un ridotto uso di coadiuvanti tecnologici attraverso l’impiego di fermentazione alcoliche spontanee gestite in modo da eliminare e/o ridurre l’uso delle colture microbiche commerciali su Aglianico di Taurasi (AV), hanno permesso di isolare da mosto in fermentazione colonie di lieviti che sono state successivamente purificate e conservate in ceppoteca. Analisi microscopiche condotte sugli isolati di lievito hanno messo in evidenza la presenza di batteri endogeni presenti all’interno delle cellule del lievito. L’obiettivo di questo studio è stato rivolto all’identificazione delle specie coinvolte nell’interazione intracellulare lievito-batterio e la loro visualizzazione utilizzando appropriate sonde molecolari fluorescenti in grado di permettere la localizzazione dei batteri endogeni. Attraverso l’applicazione della tecnica FISH (Fluorescence In Situ Hybridization) in combinazione con la microscopia confocale a scansione laser (CLSM) sono state visualizzate le cellule batteriche all’interno del lievito-ospite. I risultati ottenuti, hanno permesso di identificare la specie coinvolte e di visualizzare l’interazione intracellulare tra Issatchenkia terricola e Staphylococcus sp. che rappresenta un caso particolare di endosimbiosi tra lieviti e batteri. La natura dell’ interazione rimane sconosciuta, così come i meccanismi di invasione delle cellule di I. terricola e le modalità di trasmissione durante la riproduzione asessuata del lievito. Attraverso il protocollo della tecnica FISH, opportunamente modificato, è stato possibile visualizzare con successo Staphylococcus sp. cellule all’interno di I. terricola mediante ibridazione con sonda generica per eubatteri EUB338. Ulteriori osservazioni, con sonde specifiche, sono necessarie per confermare il meccanismo di trasmissione dei batteri endogeni dai lieviti, dalle cellule madri alla figlia. Il rapporto intracellulare tra I. terricola e Staphylococcus sp. rappresenta un singolare fenomeno di relazione simbiotica tra eucarioti e procarioti, questa associazione potrebbe avere un enorme impatto sullo studio e la comprensione di questo ruolo dei microrganismi nella fermentazione spontanea del vino.

BACKGROUND: Since processing technology and storage may influence the sensory and nutritional value as well as the shelf life of pomegranate juice (PJ), mild technologies based on microfiltration may be a promising alternative to heat treatments for fruit juice preservation. In this study, physicochemical and microbiological properties of raw (RPJ), microfiltered (MPJ) and cloudy pasteurized (PPJ) PJ were compared over a period of 4weeks. RESULTS: Data demonstrated that microfiltration was comparable to pasteurization in guaranteeing microbiological stability of the juice, avoiding spoilage of the final product. After treatment, PPJ showed the highest amounts of gallic acid (GA) and ellagic acid derivatives (EAs). During storage, the amount of ellagitannins, EAs and GA similarly decreased in all types of juice. Trends towards variations of monomeric anthocyanins in MPJ and variations of polymeric and copigmented anthocyanins in both MPJ and PPJ were found over storage. CONCLUSION: The optimization of pretreatments and filtration parameters can lead to the industrial scale-up of microfiltration technology for the development of high-quality non-heat-treated PJ. © 2017 Society of Chemical Industry.