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Summary Objectives Norepinephrine is usually used in emergency situations such as in intensive care units (ICUs) for the restoration of blood pressure. The objective was to study the stability of highly-concentrated solutions of norepinephrine at 0.50 mg/mL and 1.16 mg/mL, diluted in glucose 5% (G5%) in polypropylene syringes, protected or not from light, up to 48 h. Materials and methods Chemical stability was analysed by high-performance liquid chromatography coupled to photodiode array detection at each time of the analysis. The method was validated according to the International Conference on Harmonisation Q2(R1). Physical stability was evaluated by visual and subvisual inspection. Three syringes for each condition were prepared. At each time of the analysis, three samples were analysed for each syringe. pH values were evaluated at each moment of the analysis. Results Solutions of norepinephrine at 0.50 and 1.16 mg/mL, diluted in G5%, with or without protection from light, retained more than 95.0% of the initial concentration after a 48-hour storage at 20–25 °C. No visual and subvisual modification occured during the stability study. No degradation product appearing during the stressed degradation was observed during the study but an additional peak with a relative retention at 0.66 was observed and constant. This peak was identified as 5-hydroxymethylfurfural, a degradation product of glucose. Conclusion Norepinephrine diluted in G5% at 0.50 mg/mL and 1.16 mg/mL was physically and chemically stable over a period of 48 hours at room temperature. These stability data of highly concentrated solutions provide additional knowledge to assist intensive care services in daily practice.

The optimal technique for determining the chemical compositions of archaeological purple pigments and dyes from molluscan sources is the high-performance liquid chromatography (HPLC) method. This technique has been applied to the qualitative and quantitative multi-component fingerprinting of purple pigments extracted from various Mediterranean Muricidae molluscs, commonly known as Murex sea snails. The results on modern and archaeological purple pigments show that the colourants in these samples belong to three related chemical groups: indigoids, indirubinoids, and isatinoids. Discoveries on archaeological artifacts from the ancient Near East made by this laboratory include: decoding the ancient optimal method of purple-dyeing; detection of the purple pigment painted on a 2500-year old King Darius I marble jar; identifying 2000-year old biblical Argaman and Tekhelet dyeings from Masada. La meilleure méthode pour déterminer la composition chimique des pigments et des teintures archéologiques pourpres issus de mollusques est la chromatographie en phase liquide haute performance. On a utilisé cette technique pour l’analyse qualitative et quantitative des différents éléments constituant la signature de la pourpre extraite des différentes variétés de mollusques du type Muricidae rencontrées en Méditerranée, plus communément connues sous le nom de Murex. Les résultats montrent que les colorants rentrant dans la composition de la pourpre appartiennent à trois classes chimiques : les indigoïdes, les indirubinoïdes et les isatinoïdes. Au nombre des découvertes réalisées par notre laboratoire sur des objets archéologiques provenant du Proche-Orient, on retiendra la mise en évidence du procédé antique optimal pour obtenir la teinte pourpre ; la découverte d’un pigment pourpre sur une jarre royale de marbre vieille de 2500 ans et datant de l’époque du roi perse Darius Ier ; l’identification de l’Argaman et du Tekhelet bibliques vieux de 2000 ans et provenant de Masada. Η βέλτιστη τεχνική για τον καθορισμό της χημικής σύνθεσης αρχαιολογικών πορφυρών χρωστικών ουσιών και βαφών από μαλάκια είναι η μέθοδος της υγρής χρωματογραφίας υψηλής απόδοσης. Η τεχνική αυτή έχει εφαρμοστεί για την ποιοτική και ποσοτική ανάλυση πορφυρών χρωστικών ουσιών που προέρχονται από διάφορα μεσογειακά μαλάκια Muricidae, που είναι ευρέως γνωστά ως murex. Τα αποτελέσματα σε σύγχρονες και αρχαιολογικές πορφυρές βαφές δείχνουν ότι οι χρωστικές ουσίες στα δείγματα αυτά ανήκουν σε τρία συσχετιζόμενα χημικά σύνολα: τα σχετικά με τη βαθυγάλανη, την ερυθρή και την κόκκινη βαφή. Οι ανακαλύψεις σε αρχαιολογικά αντικείμενα από την αρχαία Εγγύς Ανατολή που έγιναν σε αυτό το εργαστήριο περιλαμβάνουν: την αποκωδικοποίηση της αρχαίας βέλτισης μεθόδου για την πορφυρή βαφή· την ανίχνευση πορφυράς χρωστικής ουσίας πάνω σε ένα μαρμάρινο αγγείο του βασιλιά Δαρείου Α΄ ηλικίας 2500 ετών· την ταύτιση των βιβλικών βαφών Αργκαμάν και Τεκελέτ, ηλικίας 2000 ετών, από τη Μάσαδα.

HVAC, refrigeration, and water heating accounted for approximately 22 quads of primary energy consumed in the United States in 2018, according to US EIA. Most of HVAC&R industry still relies on vapor compression and heat-driven technologies. The development of highly efficient technologies that would significantly improve both COP and annual energy savings is an open challenge for the new decade. Among the novel technologies, the Chemical Looping Heat Pump (CLHP) combined with a reverse fuel cell has been modeled with estimates of a COP increase of over 20% relative to a conventional vapor compression (VC) cycle. However, limitations of simplified modeling efforts necessitate the development of a comprehensive mechanistic model to predict several physical phenomena for varying operating conditions and more accurately estimate performance. In this work, a charge-sensitive mechanistic modeling approach is utilized to predict the performance of the CLHP system. A thermodynamic model is coupled with a discretized fuel cell model to estimate the energy savings potential. A moving boundary model is adopted to assess the steady-state heat transfer rate in the heat exchanger. Sensitivity analyses are used to identify the system behaviors and performance.

The genus Eryngium L., (Apiaceae, Saniculoideae) comprises more than 250 flowering plant species, which are commonly used as medicinal plants in different countries. Only eight species are growing in Tunisia: E. barrelieri Boiss., E. campestre L., E. dichotomum Desf., E. glomeratum Lamk., E. ilicifolium Lamk., E. maritimum L., E. tricuspidatum L. et E. triquetrum Vahl. These species are used in traditional medicine and there are relatively few papers on the phytochemical investigations of most of them. This study was performed on all Eryngium species growing in Tunisia in order to evaluate their chemical variability using GC-FID and GC-MS analyses and their biological activities, mainly antimicrobial against multiresistant microorganisms and extended spectrum beta-lactamase producing bacteria (ESBL), and also phototoxic and cytotoxic effects.All investigated species showed considerable antimicrobial effect with MIC value ranging between 1,25 and 0,07 mg/mL and important cytotoxic activity against J774 tumoral cells with IC50 from 24,4 to 0,32 µg/mL. Phototoxic investigation demonstrated a significant photoactive inhibitory effects against tested pathogenic microorganisms.GC–MS analysis of the most active crude extracts (petroleum ether extracts) revealed their high content of antimicrobial agents particularly oxygenated sesquiterpenes such as spathulenol, ledol, α-bisabolol and cubenol, and hydrocarbon sesquiterpenes such as β-bisabolene and copaene; and cytotoxic components such as falcarinol.The chemical investigation and bio-guided isolation of active compounds of the selected crude extract of E. triquetrum roots were performed using column chromatography, centrifugal partition chromatography (CPC) and preparative high-performance liquid chromatography (HPLC). among purified components, two bioactive polyacetylenes, panaxydiol and falcarinol, showed a great antimicrobial activity mainly against multiresistant and ESBL producing Pseudomonas aeruginosa with MIC value up to 0,25 ng/ml and a mostly bactericidal effect.; Le genre Eryngium L. (Apiaceae, Saniculoideae) comprend plus de 250 espèces utilisées en médecine traditionnelle à travers le monde. En Tunisie il existe seulement huit espèces : E. barrelieri Boiss., E. campestre L., E. dichotomum Desf., E. glomeratum Lamk., E. ilicifolium Lamk., E. maritimum L., E. tricuspidatum L. et E. triquetrum Vahl. ; ces espèces sont en majorité peu étudiées du point de vue phytochimique. La présente étude a été effectuée sur la totalité des Eryngium qui poussent en Tunisie dans le but d’évaluer leurs activités biologiques, essentiellement antimicrobienne contre des microorganismes multirésistants et producteurs de béta-lactamases à spectres étendus (BLSE), mais aussi phototoxique et cytotoxique ainsi que la variabilité chimique par analyse par GC-FID et GC-MS des extraits les plus actifs.Toutes les espèces étudiées étaient dotées d’un pouvoir antimicrobien (1,25 à 0,07 mg/mL) et cytotoxique (24,4 à 0,32 µg/mL) considérable. Le criblage de l’activité phototoxique a permis de mettre en évidence la richesse de ces plantes en composés photoréactifs antimicrobiens potentiellement intéressants pour leur efficacité d’action et l’élargissement du spectre d’activité antimicrobienne.L’analyse des extraits actifs apolaires a permis d’étudier la variabilité chimique entre les différentes espèces et la mise en évidence de la présence majoritaire de composés antimicrobiens notamment des sesquiterpènes oxygénés tels que le spathulénol, le lédol, l’α-bisabolol et le cubénol, et des sesquiterpènes hydrocarbonés comme le β-bisabolène et le copaène ; et cytotoxiques tel que le falcarinol.Une étude phytochimique approfondie a été réalisée sur les racines d’E. triquetrum afin d’extraire, isoler par des essais bio-guidés et identifier les composés actifs. Le fractionnement a été optimisé par des chromatographies sur colonnes, CPC et CLHP. Parmi les composés identifiés deux polyacétylènes, le panaxydiol et le falcarinol, ont montré un fort pouvoir antimicrobien et une spécificité d’action notamment contre les souches de Pseudomonas aeruginosa BLSE et multirésistantes, avec des CMI allant jusqu’à 0,25 ng/mL et une activité en majorité bactéricide.

Proteins are widely used in formulation in the pharmaceutical field and play a major role in biological functions. It is well known that protein adsorption on solid surface is always observed for a long-term storage, which will result in a reduced dose of active compound or a loss of biological activity. In some cases, only short time of contact are sufficient to drastically modify the protein conformation: for instance, insulin losses 52% of its biological activity after 5 minutes contacting with glass surface, as well as a loss of 30% of cetrorelix is observed after 2 hours. Among all parameters, the time frame of the denaturation process is strongly related to the protein stability and surface properties. The understanding of protein adsorption has therefore become a crucial issue in the pharmaceutical industry.To gain a better understanding of proteins’ behavior on the surface, adsorbed protein quantification and its conformation should be studied. The objective of our research in a first will be to understand proteins’ behaviors on various surfaces which composed a classical prefilled syringe.The main goal of this PhD project is to understand the behaviors of several model proteins like bovine serum albumin (BSA), lysozyme (LSZ) and myoglobin (MGB) in contact with the surfaces of prefilled syringes such as glass and elastomer. We propose to use the high performance liquid chromatography (HPLC) to quantify the amount of protein adsorbed on a flat surface by determining the depletion of the proteins in solution. Fourier transform infrared-attenuated total reflection (FTIR-ATR) spectroscopy was as well as employed to follow the structural changes of adsorbed BSA on solid surface. [...]; Protéines sont largement utilisés dans la formulation dans le domaine pharmaceutique et de jouer un rôle important dans les fonctions biologiques. Il est bien connu que l'adsorption de protéines sur la surface solide est toujours observé pour un stockage à long terme, ce qui entraînera une réduction de la dose de substance active ou une perte de l'activité biologique. Dans certains cas, une courte période de contact avec la surface est suffisante pour modifier fortement la conformation des protéines : par exemple, l'insuline pertes 52% de son activité biologique après 5 minutes de contact avec la surface de verre, ainsi qu'une perte de 30% d’activité biologique du cétrorélix est observé après 2 heures de contact. Parmi tous les paramètres, la dénaturation des protéines est fortement liée à sa stabilité des propriétés de surface. La compréhension de l'adsorption de protéines est devenue une question cruciale dans l'industrie pharmaceutique.Pour mieux comprendre le comportement des protéines à la surface, la quantification des protéines adsorbées et sa conformation devrait être étudiée. L'objectif de notre recherche sera de comprendre les comportements des protéines sur différents surfaces de seringue pré - remplie classique.Le principal objectif de ce projet est de comprendre le comportement de plusieurs modèles de protéines comme la sérum d’albumine bovine (BSA), le lysozyme (LSZ) et la myoglobine (MGB) en contact avec des surfaces de seringues pré-remplie comme le verre et l’élastomère. Nous proposons d'utiliser la chromatographie liquide à haute performance (HPLC) pour la quantification de protéine adsorbée sur une surface plane en déterminant la déplétion des protéines en solution. La réflexion totale atténuée infrarouge à transformée de fourier (FTIR-ATR) spectroscopie est utilisée de suivre les changements structurels des protéines adsorbées sur des surfaces solides. [...]

Trigonelline and sucrose are two coffee aroma precursors. Contents of these compounds are higher in Coffea arabica than in Coffea canephora green beans and this could be the main explanation for consumers' preference for C. arabica coffee. This is the first evaluation of sucrose and trigonelline contents involving 14 species and six new taxa not yet botanically characterised. Trigonelline and sucrose contents varied between species from 0.39% to 1.77% dry matter basis (dmb) and from 3.8% to 10.7% dmb, respectively. C. canephora could be improved through both compounds by crosses with Coffea eugenioides.

L41 is a sample of Victor Loret's collection from the Egyptologic Institute (Lyon II University, Pr. J.-C. Goyon). It was recovered from excavations at Dashour in 1894-1 895 by the archaeologist J. de Morgan. It comes from a flask of princess Sat-mer-hout's funeral endowment (XIIth dynasty). As written, it may be a ritual fragance or, at least, an artificial composition. This material was analysed by HPLC (High Performance Liquid Chromatography) with a double detection (PDA/ fluorimetry) and the result show a mixture of two natural plant resins : a diterpenic pine resin and a triterpenic one to frankincense (Burseraceae family, Boswellia genus)., L'échantillon L41 provient de la collection Victor Loret de l'Institut d'Egyptologie (Université Lyon II, Pr J.-C. Goyon). Il a été prélevé lors des fouilles que l'archéologue J. de Morgan effectua sur le site de Dashour dans les années 1 894 et 1 895. Ce prélèvement est issu de la dotation funéraire de la princesse Sat-mer-hout (XIIème dynastie) ; la suscrip- tion du flacon d'où fut tiré L41 évoque la possibilité d'un parfum rituel ou du moins d'une composition artificielle. L'analyse du matériau menée par Chromatographie Liquide à Haute Performance (CLHP) équipée d'une double détection barrette de photodiodes/fluorimétrie met en évidence l'existence d'un mélange d'au moins deux résines végétales l'une diterpénique appartenant à la famille des Pinacées, l'autre de nature triterpénique correspondant à de l'oliban (encens véritable, famille des Burséracées)., Mathe Carole, Archier Paul, Culioli Gérald, Vieillescazes Catherine. Caractérisation chimique d'une résine naturelle en Égypte ancienne : application à un exemple de la collection Victor Loret.. In: Revue d'Archéométrie, n°27, 2003. pp. 43-47.

Stilbenes are phenolic compounds of plant secondary metabolism, whosedistribution within the plant kingdom is limited to species that have acquired during theevolution the ability to synthesize these molecules. Their impacts and their biologicalactivities such as neuroprotective, anticarcinogenic, antioxidant effects have already touchedseveral topics. It is in this context that the purpose of our work arose. First, we have isolatedand identified these molecules in some species of the sedge family. Phytochemical studieswere performed using a set of analytical and preparative strategies by means of analytical andpreparative HPLC and CPC (Centrifugal Partition Chromatography) for obtaining puremolecules and LC-Mass and NMR for identification of compound isolated. In a second step,we investigated the in vitro biological properties of these products such as antioxidantactivities by three methods (ORAC, DPPH and MCA) and their effect on neuronalcytotoxicity induced by β-amyloid peptide with PC12 cells. We isolated a new molecule, forthe first time, carexinol A, that showed strong anti-amyloid activity. The last part of this thesisrefers to the analysis and determination of stilbenes in Tunisian wines including Sidi Zahiawine that gave the best results., Les stilbènes sont des composés phénoliques issus du métabolisme secondairevégétal, dont la distribution au sein du règne végétal est limitée aux espèces qui ont acquis aucours de l’évolution la capacité à synthétiser ces molécules. Leurs impacts et leurs activitésbiologiques tels que les effets neuroprotecteurs, anticancérigènes, antioxydants ont déjàconcerné plusieurs sujets d’étude. C’est dans ce contexte que l’objectif de notre travail a prisnaissance. Dans un premier temps, nous avons isolé et identifié ces molécules chez quelquesespèces de la famille des Cypéracées. Cette étude phytochimique a été réalisée en utilisant unensemble de stratégies analytiques et préparatives faisant appel à la CLHP analytique etpréparative et la CPC (Chromatographie de Partage Centrifuge) pour l’obtention desmolécules pures et à la LC-Masse et la RMN pour l’identification des composées isolés. Dansun second temps, nous avons étudié les activités biologiques in vitro de ces produits telles queles activités antioxydantes par trois méthodes (ORAC, DPPH et MCA) et l’effet de cesstilbènes sur la cytotoxicité neuronale induite par le peptide β-amyloïde avec des cellulesPC12. Nous avons isolé une nouvelle molécule, le carexinol A, pour la première fois, qui amontré une forte activité anti-amyloïde. La dernière partie de cette thèse fait état de l’analyseet du dosage des stilbènes dans des vins tunisiens dont le vin Sidi Zahia qui a donné lesmeilleurs résultats.

Canthaxanthin (4,4(prm1)-diketo-(beta)-carotene) is produced as the major carotenoid pigment by orange- and dark-pink-pigmented bacteriochlorophyll-containing Bradyrhizobium strains isolated from stem nodules of Aeschynomene species. These two new pigmentation groups differ from the well-studied strain BTAi1, which accumulates spirilloxanthin as the sole carotenoid.

The lack of innovative therapies in human chemotherapy incites the scientific community to be interested in new sources of bioactive compounds. We can quote the secondary metabolites of plants, to which belong hydroxy pentacyclic triterpene acids (HPTAs) and more particularly Ursolic (UA), Oleanolic (OA) and Betulinic Acids(BA). These molecules are the subjetc of numerous studies which tend to demonstrate their properties: anti-infective, anticancer, antiproliferatives, anti-inflammatory and hepatoprotectrive. The main obstacle to their use in therapeutic purposes stays the insolubility of these AHPTs in the water. Thus the objective of this work was to increase their hydrosolubility. At first, in agreement with the recommendations and/or the existing standards, we demonstrated that the antibacterial spectra of UA and OA are limited to Gram-positive bacteria. No HPTA showed antifungal activity. Only the BA showed an interesting antiviral activity on human Cytomegalovirus (hCMV); no antiviral activity was on Poliovirus. Finally, the BA, but even more UA showed an anticancer activity against cellular model of chronic myeloid leukemia (CML). Secondly, we proceeded to the manufacturing and to the study of complexes between HPTAs and cyclodextrines. We retained gamma-cyclodextrine (gamma-CD), which presented the advantage to complex the 3 AHPTs with a constant of "average" to "raised". These HPTAs:gamma-CD complexes were characterized by using diverse techniques: chromatographic, thermal and spectrometric. We concluded in the obtaining of inclusion complexes which allowed increasing the solubility of the HPTAs. In a last part, we estimated the biological activities of the HPTAs:gamma-CD complexes. The results show that the UA:gamma-CD and OA:gamma-CD complexes remain active against Gram-positive bacteria (but with a weaker efficiency); whereas the BA:gamma-CD complex shows to be active on certain bacteria. The BA:gamma-CD complex, and in a surprising way the UA:gamma-CD complex presents an antiviral activity against the hCMV. Finally, the decrease of the cytotoxicity linked to the complexation of the HPTAs believes the interest of UA and of BA on CML cells, Le manque de thérapies innovantes en chimiothérapie humaine incite la communauté scientifique à s'intéresser à de nouvelles sources de composés bioactifs. Nous pouvons citer les métabolites secondaires de plantes, auxquels appartiennent les acides hydroxy pentacycliques triterpénoiques (AHPTs) et plus particulièrement les Acides Ursolique (AU), Oléanolique (AO) et Bétulinique (AB). Ces molécules font l'objet de nombreuses études qui tendent à démontrer leurs propriétés : anti-infectieuses, anticancéreuses, antiprolifératives, anti-inflammatoires, hépatoprotectrices. Le principal obstacle à leur utilisation à des fins thérapeutiques, reste l'insolubilité de ces AHPTs dans l'eau. L'objectif de ce travail a donc été d'augmenter leur hydrosolubilité. Dans un premier temps, en accord avec les recommandations et/ou normes existantes, nous avons démontré que le spectre d'activité antibactérienne de l'AU et de l'AO se limitait aux bactéries à Gram positif. Aucun AHPT n'a montré d'activité antifongique. Seul l'AB a montré une activité intéressante sur le Cytomégalovirus humain (hCMV) ; aucune activité antivirale n'ayant été retrouvée sur le Poliovirus. Enfin, l'AB, mais encore plus l'AU ont montré une activité anticancéreuse à l'encontre de cellules modèles de leucémie myéloïde chronique (LMC). Dans un deuxième temps, nous avons procédé à la fabrication et à l'étude de complexes entre les AHPTs et des cyclodextrines. Nous avons retenu la gamma-cyclodextrine (gamma-CD), qui présentait l'avantage de complexer les 3 AHPTs avec une constante de formation « moyenne » à « élevée ». Ces complexes AHPTs :gamma-CD ont été caractérisés en utilisant diverses techniques : chromatographiques, thermiques et spectrométriques. Nous avons conclu à l'obtention de complexes d'inclusion qui ont permis d'augmenter la solubilité des AHPTs. Dans une dernière partie, nous avons évalué les activités biologiques des complexes AHPTs : gamma-CD. Les résultats montrent que les complexes AU : gamma-CD et AO : gamma-CD restent actifs à l'encontre des bactéries à Gram positif (mais avec une efficacité plus faible) ; tandis que le complexe AB : gamma-CD se révèle être actif sur certaines bactéries. Le complexe AB : gamma-CD, et de façon surprenante le complexe AU : gamma-CD présentent une activité antivirale à l'encontre du hCMV. Enfin, la diminution de la cytotoxicité liée à la complexation des AHPTs accroit l'intérêt des molécules d'AU et d'AB sur les cellules de LMC

Les roténoïdes, composés dérivés de la voie du métabolisme phénylpropanoïde, sont en grande partie accumulés dans les feuilles de "Tephrosia vogelii$. Des cultures de suspensions cellulaires hétérotrophes et photomixotrophes de cette plante tropicale ont été obtenues. Les lignées cellulaires sont toutes deux capables de produire des roténoïdes, mais une production spéciale est observée dans chaque type de culture cellulaire. La lignée cellulaire photomixotrophe accumulait de la roténone et de la dégueline, et la lignée cellulaire hétérotrophe produisait essentiellement de la dégueline et de la téphrosine. (Résumé d'auteur)

The main objective of this work is based on the search and the development of new antibacterial compounds able to interact with a bacterial wall. The proposed compounds are of polycationic nature, elaborated on calixarene structure or an aromatic platform and containing guanidinium functions in various number and position. Some of them were developed as water-soluble prodrugs of the quinolone: nalidixic acid. The chapter I talk about introduction and a bibliographical study on calixarenes and their applications in biology. The chapter II presents the results obtained for the synthesis, the characterization of the partially substituted analogues of the tétra-para (guanidinoéthyl) calix[4]arene. The objective of this part is to understand the role and the importance of the number and the positioning of the guanidines functions on the calixarene core. In chapter III, are presented the various steps leading to the synthesis, the characterization and the evaluation by HPLC ways of new water-soluble prodrugs. The work is centered on a set of ionic derivatives of calix[4]arenes carriers of nalidixic acid. The prodrug behavior was demonstrated for one of them. The chapter IV presents the syntheses and characterizations of star-like poly-ionic structures are described, based on a benzene core, including a variable number of para (guanidinoéthyl) phényléther subunits. The chapter V is dedicated to the results of the biological evaluations of all the structure synthetized. For some compounds, viability and cellular toxicity were evaluated on eukaryotic cells. We show that many of the new prepared derivatives, prodrugs or not, present very interesting anti-bacterial activities; L'objet de ce travail repose sur la recherche, le développement de nouveaux composés antibactériens, devant, selon le concept initial, interagir avec la paroi bactérienne. Ces derniers sont de nature polycationique, intégrant sur une structure calixarènique tridimensionnelle ou aromatique plan, des fonctions guanidiniums en nombre variable. Certains ont été développés en tant que prodrogues hydrosolubles, capables de libérer in vivo un principe actif (acide nalidixique). Le chapitre I porte sur introduction, l'étude bibliographique des calixarènes et leurs applications en biologie. Dans chapitre II, nous présentons les résultats (synthèse et caractérisation) obtenus pour les parents partiellement substitués du tétra-para-(guanidinoéthyl)calix[4]arène. Le but de ces synthèses est d'appréhender le rôle, l'importance du nombre et le positionnement des fonctions guanidines sur le calixarène. Nous abordons au chapitre III, les différentes étapes de synthèse, de caractérisation et l'évaluation par CLHP de nouvelles prodrogues hydrosolubles. Le comportement de prodrogue potentiel est ainsi démontré pour l'un d'entre eux. Dans le quatrième chapitre sont décrites les synthèses et caractérisations de nouvelles structures poly-ioniques, intégrant un motif central de type benzène, porteur d'un nombre variable de motifs latéraux para-(guanidinoéthyl)phényléther, et conçues comme une alternative aux calixarènes précédemment développés. Le chapitre V est dédié aux résultats des évaluations biologiques de l'ensemble de ces composés. Nous montrons que plusieurs des dérivés préparés, prodrogues ou non, présentent une activité anti-bactérienne très intéressante

The main objective of this work is based on the search and the development of new antibacterial compounds able to interact with a bacterial wall. The proposed compounds are of polycationic nature, elaborated on calixarene structure or an aromatic platform and containing guanidinium functions in various number and position. Some of them were developed as water-soluble prodrugs of the quinolone: nalidixic acid. The chapter I talk about introduction and a bibliographical study on calixarenes and their applications in biology. The chapter II presents the results obtained for the synthesis, the characterization of the partially substituted analogues of the tétra-para (guanidinoéthyl) calix[4]arene. The objective of this part is to understand the role and the importance of the number and the positioning of the guanidines functions on the calixarene core. In chapter III, are presented the various steps leading to the synthesis, the characterization and the evaluation by HPLC ways of new water-soluble prodrugs. The work is centered on a set of ionic derivatives of calix[4]arenes carriers of nalidixic acid. The prodrug behavior was demonstrated for one of them. The chapter IV presents the syntheses and characterizations of star-like poly-ionic structures are described, based on a benzene core, including a variable number of para (guanidinoéthyl) phényléther subunits. The chapter V is dedicated to the results of the biological evaluations of all the structure synthetized. For some compounds, viability and cellular toxicity were evaluated on eukaryotic cells. We show that many of the new prepared derivatives, prodrugs or not, present very interesting anti-bacterial activities, L'objet de ce travail repose sur la recherche, le développement de nouveaux composés antibactériens, devant, selon le concept initial, interagir avec la paroi bactérienne. Ces derniers sont de nature polycationique, intégrant sur une structure calixarènique tridimensionnelle ou aromatique plan, des fonctions guanidiniums en nombre variable. Certains ont été développés en tant que prodrogues hydrosolubles, capables de libérer in vivo un principe actif (acide nalidixique). Le chapitre I porte sur introduction, l'étude bibliographique des calixarènes et leurs applications en biologie. Dans chapitre II, nous présentons les résultats (synthèse et caractérisation) obtenus pour les parents partiellement substitués du tétra-para-(guanidinoéthyl)calix[4]arène. Le but de ces synthèses est d'appréhender le rôle, l'importance du nombre et le positionnement des fonctions guanidines sur le calixarène. Nous abordons au chapitre III, les différentes étapes de synthèse, de caractérisation et l'évaluation par CLHP de nouvelles prodrogues hydrosolubles. Le comportement de prodrogue potentiel est ainsi démontré pour l'un d'entre eux. Dans le quatrième chapitre sont décrites les synthèses et caractérisations de nouvelles structures poly-ioniques, intégrant un motif central de type benzène, porteur d'un nombre variable de motifs latéraux para-(guanidinoéthyl)phényléther, et conçues comme une alternative aux calixarènes précédemment développés. Le chapitre V est dédié aux résultats des évaluations biologiques de l'ensemble de ces composés. Nous montrons que plusieurs des dérivés préparés, prodrogues ou non, présentent une activité anti-bactérienne très intéressante

Before the advent of synthetic dyes, textiles were colored primarily with extracts of plants, many of which, in the case of yellow colors, were flavonoids. One important Asian yellow dye source was buds from the pagoda tree (Sophora japonica). Using reversed phase HPLC to separate the flavonoid components of plants and of dyed textiles, and UV/Visible and mass spectrometry to detect and identify them, we have shown that the buds of pagoda trees (Sophora japonica) contain an enzyme that converts light-stable rutin, the 3-O-rutinoside of quercetin, to light-unstable quercetin. This work provides an explanation for why 3-O-substituted, rather than unsubstituted, 3-hydroxyflavones, are generally, in our experience, found in extracts of historical textiles; it also shows how, i.e., by heat inactivation of glycosidases, 3-O-substituted hydroxyflavones could have been selected for. Some other dyeproducing plants, e.g., Reseda luteola and Flaveria haumanii, also appear to contain glycosidases. The need for proper processing of dyestuffs, e.g., by heat treatment, was probably recognized by dyers in ancient times, even if the processes were not understood., Analyses et discussion sur la composition chimique et les solidités lumière relatives de plantes à colorants jaunes flavonoïdes d'importance historique.

The contamination of corn with fumonisin produced by Fusarium species represents an important risk for humans and animals. The incidence of Fusarium spp. and contamination by fumonisin B1 (FB1) were studied in field samples from 70 fields of corn during the 2005 and 2006 preharvest seasons in the province of Samsun, Turkey. Fusarium was the predominant genus isolated from the field samples, with F. verticillioides, F. proliferatum and F. subglutinans being the most commonly isolated species. The occurrence of Fusarium spp. varied each year, from 97.14% to 78.57% in 2005 and 2006, respectively. The widespread occurrence of FB1 was also observed across the Samsun province. All corn samples infected with F. verticillioides, F. proliferatum and F. subglutinans tested positive for FB1, but none were infected with FB2. Levels of FB1 ranged from 0.28 to 8.48 mg kg-1 in 2005 and from 0.11 to 2.77 mg kg-1 in 2006. The concentration of FB1 was lower than 2 mg kg-1 in 63.6% of the samples, 28.8% contained from 2 mg kg-1 to 5 mg kg-1, while 7.6% contained more than 5 mg kg-1. Our study shows that corn contamination with both Fusarium and FB1 was present throughout the Samsun province, but it was strongly dependent on environmental and seasonal conditions. However, there was no Fusarium contamination in certain native white-type and popcorn-type cultivars in 2005 and 2006., La contamination du maïs par la fumonisine produite par des espèces de Fusarium présente un risque important pour les humains et les animaux. L’incidence des espèces de Fusarium et la contamination par la fumonisine B1 (FB1) ont été étudiées durant la saison précédant la récolte en 2005 et 2006 dans des échantillons provenant de 70 champs de maïs de la province de Samsun, en Turquie. Fusarium était le genre prédominant dans les échantillons de champ, F. verticillioides, F. proliferatum et F. subglutinans étant les espèces les plus communément isolées. La présence d’espèces de Fusarium variait d’une année à l’autre, passant de 97,14 % à 78,57 % en 2005 et 2006, respectivement. La présence très répandue de FB1 a également été observée dans la province de Samsun. Tous les échantillons de maïs infectés par F. verticillioides, F. proliferatum et F. subglutinans étaient contaminés par la FB1, mais aucun n’était contaminé par la FB2. Le niveau d’infection par la FB1 variait entre 0,28 et 8,48 mg kg-1 en 2005 et entre 0,11 et 2,77 mg kg-1 en 2006. La concentration de FB1 était inférieure à 2 mg kg-1 dans 63,6 % des échantillons, 28,8 % en contenait de 2 mg kg-1 à 5 mg kg-1, alors que 7,6 % en contenait plus de 5 mg kg-1. Notre étude montre que la contamination du maïs par le Fusarium et la FB1 est répandue à travers la province de Samsun, mais qu’elle dépend fortement des conditions environnementales et saisonnières. Toutefois, certains cultivars indigènes de types blanc et popcorn n’étaient pas contaminés par le Fusarium en 2005 et 2006.

The main object of the thesis concerns the development of a trapping method for quantitative analysis of carcinogenic - or likely to be - metal ions in urine, allowing to avoid sample transport in a liquid form. Among the metal ions a trace levels, we have been particularly interested in cobalt and nickel species. The approach presented here is based on solid/liquid extraction of metal ions by complexation on mesoporous organic-inorganic hybrid materials with large specific surface areas. The selected adsorbents are silica gels functionalised with dithiocarbamate groups. After their preparation by post-synthesis grafting using new siloxydithiocarbamate precursors, the functionalized silica gels have been characterized by various physico-chemical techniques and their behaviour in solution has been investigated. It shows that interactions between dithiocarbamate moieties and the silica surface can lead to a loss of grafted groups in the external solution, especially for extended periods in aqueous medium. However, these hybrids have been successfully used for quantitative sequestration of CoII and NiII from dilute solutions (1 to 500 µg L-1), within the pH range likely to be encountered in urinary environment. This study has also involved the development of an analytical method for the simultaneous and quantitative determination of these elements in solution. This was based on high performance liquid chromatography for which the best results were obtained using the switching column technique. Adsorption operations have proven to be very fast, which has allowed operating effectively in the implementation of cartridges through which the samples have been percolated. Efforts have also been made to define the optimal conditions for desorption, which was then applied to the quantitative analysis of analytes previously accumulated in the cartridge.; L'objectif principal de la thèse concerne la mise au point d'une méthode de piégeage et d'analyse quantitative de métaux cancérogènes ou susceptibles de l'être dans les urines, en permettant de s'affranchir du transport de l'échantillon sous forme liquide. Parmi les éléments traces métalliques (ETM), nous nous sommes intéressés plus particulièrement aux espèces du cobalt et du nickel. L'approche présentée repose sur l'extraction solide/liquide des ions métalliques par complexation sur des matériaux mésoporeux hybrides organo-minéraux à grande surface spécifique. Les matériaux adsorbant sélectionnés sont des silices fonctionnalisées par des groupements dithiocarbamate. Après avoir préparé ces supports par greffage au moyen de nouveaux précurseurs siloxydithiocarbamate, les matériaux fonctionnels ont été caractérisés par diverses techniques physico-chimiques et leur comportement en solution a été étudié. Il en ressort que les interactions entre ces fonctions dithiocarbamate et la surface de la silice peuvent conduire à une perte des greffons en milieu aqueux surtout pour des séjours prolongés en solution. Néanmoins, ces solides ont pu être exploités avec succès pour l'immobilisation quantitative des espèces CoII et NiII à partir de solutions diluées (de 1 à 500 µg.L-1), et ce dans la gamme de pH susceptible d'être rencontrée en milieu urinaire. Cette étude a nécessité la mise au point d'une méthode analytique de routine pour la détermination simultanée et quantitative de ces éléments en solution. Il s'agit de la chromatographie haute performance pour laquelle les meilleurs résultats ont été obtenus au moyen la technique dite de commutation de colonne. Les opérations d'adsorption se sont révélées être rapides, ce qui a permis d'opérer efficacement lors de la mise en oeuvre de cartouches au travers desquelles les échantillons ont été percolés. Des efforts ont également été consentis de manière à définir les conditions optimales de désorption en vue de l'analyse quantitative des analytes précédemment accumulés.

The main object of the thesis concerns the development of a trapping method for quantitative analysis of carcinogenic - or likely to be - metal ions in urine, allowing to avoid sample transport in a liquid form. Among the metal ions a trace levels, we have been particularly interested in cobalt and nickel species. The approach presented here is based on solid/liquid extraction of metal ions by complexation on mesoporous organic-inorganic hybrid materials with large specific surface areas. The selected adsorbents are silica gels functionalised with dithiocarbamate groups. After their preparation by post-synthesis grafting using new siloxydithiocarbamate precursors, the functionalized silica gels have been characterized by various physico-chemical techniques and their behaviour in solution has been investigated. It shows that interactions between dithiocarbamate moieties and the silica surface can lead to a loss of grafted groups in the external solution, especially for extended periods in aqueous medium. However, these hybrids have been successfully used for quantitative sequestration of CoII and NiII from dilute solutions (1 to 500 µg L-1), within the pH range likely to be encountered in urinary environment. This study has also involved the development of an analytical method for the simultaneous and quantitative determination of these elements in solution. This was based on high performance liquid chromatography for which the best results were obtained using the switching column technique. Adsorption operations have proven to be very fast, which has allowed operating effectively in the implementation of cartridges through which the samples have been percolated. Efforts have also been made to define the optimal conditions for desorption, which was then applied to the quantitative analysis of analytes previously accumulated in the cartridge., L'objectif principal de la thèse concerne la mise au point d'une méthode de piégeage et d'analyse quantitative de métaux cancérogènes ou susceptibles de l'être dans les urines, en permettant de s'affranchir du transport de l'échantillon sous forme liquide. Parmi les éléments traces métalliques (ETM), nous nous sommes intéressés plus particulièrement aux espèces du cobalt et du nickel. L'approche présentée repose sur l'extraction solide/liquide des ions métalliques par complexation sur des matériaux mésoporeux hybrides organo-minéraux à grande surface spécifique. Les matériaux adsorbant sélectionnés sont des silices fonctionnalisées par des groupements dithiocarbamate. Après avoir préparé ces supports par greffage au moyen de nouveaux précurseurs siloxydithiocarbamate, les matériaux fonctionnels ont été caractérisés par diverses techniques physico-chimiques et leur comportement en solution a été étudié. Il en ressort que les interactions entre ces fonctions dithiocarbamate et la surface de la silice peuvent conduire à une perte des greffons en milieu aqueux surtout pour des séjours prolongés en solution. Néanmoins, ces solides ont pu être exploités avec succès pour l'immobilisation quantitative des espèces CoII et NiII à partir de solutions diluées (de 1 à 500 µg.L-1), et ce dans la gamme de pH susceptible d'être rencontrée en milieu urinaire. Cette étude a nécessité la mise au point d'une méthode analytique de routine pour la détermination simultanée et quantitative de ces éléments en solution. Il s'agit de la chromatographie haute performance pour laquelle les meilleurs résultats ont été obtenus au moyen la technique dite de commutation de colonne. Les opérations d'adsorption se sont révélées être rapides, ce qui a permis d'opérer efficacement lors de la mise en oeuvre de cartouches au travers desquelles les échantillons ont été percolés. Des efforts ont également été consentis de manière à définir les conditions optimales de désorption en vue de l'analyse quantitative des analytes précédemment accumulés.

The separation of enantiomers is of a great interest in the pharmaceutical, chemical and food fields. Aptamers have been used by the Department of Molecular Pharmacochemistry (DPM) as new target-specific chiral selectors. These oligonucleotides, RNA or DNA, selected by SELEX (Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment), have the ability to bind their target molecules with an affinity equal (or superior) to that retrieved with the antibodies. The aim of this work is to study the enantioselective properties of RNA and DNA aptamers by micro-HPLC and CE. A chiral stationary phase L-RNA aptamer anti-D-histidine was designed using an immobilization strategy based on the biotin-streptavidin link. A novel covalent strategy for the immobilization of the aptamers was developed to enlarge the conditions of use and to improve the stability of these aptamers columns. The use of these new chiral selectors was then spread in an analysis by CE. The first study was accomplished using an L-RNA aptamer anti-D-arginine characterized by a very weak constant of dissociation (Kd = 330 nM) and a very high enantioselectivity (α = 12000). This study allowed to appreciate the special characteristics of this aptamer and to extend its use in an enantioselective competitive assay. An enantiomeric impurity as low as 0,01% was achieved. A similar assay, where a direct contact between the aptamer and its enantiomer target is favoured, allowed to increase the method sensitivity and could allow to reduce the detection limit thanks to the use of a fluorescence detection., La séparation d'énantiomères est d'un grand intérêt pour les industries pharmaceutiques, chimiques et agroalimentaires. Les aptamères sont utilisés au sein du Département de Pharmacochimie Moléculaire (DPM) en tant que nouveaux sélecteurs chiraux spécifiques d'une cible prédéterminée. Il s'agit d'oligonucléotides, en série ADN et ARN, générés par la procédure SELEX (Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment), ayant la capacité à fixer leurs molécules cibles avec une affinité égale voir supérieure à celle des anticorps. Ce travail a pour objectif d'étudier les propriétés énantiosélectives des aptamères, en série ADN et ARN, par micro-CLHP et EC. Une phase stationnaire chirale aptamère L-ARN anti-D-histidine a été créée en utilisant une stratégie d'immobilisation biotine-streptavidine dans le but d'étudier les propriétés énantiosélectives de cet oligonucléotide récemment isolé. Une nouvelle stratégie d'immobilisation covalente de l'aptamère a été développée afin d'élargir les conditions d'utilisation et d'améliorer la stabilité de ces colonnes aptamères. L'utilisation de ces nouveaux sélecteurs chiraux a ensuite été étendue à une analyse par EC. La première étude a été réalisée sur un aptamère test L-ARN anti-D-arginine caractérisé par de très fortes affinité (Kd = 330 nM) et énantiosélectivité (α = 12000). Ce travail a permis d'apprécier les caractéristiques exceptionnelles de cet aptamère et d'envisager son utilisation dans un essai énantiosélectif par compétition. Une impureté énantiomérique de 0,01% a ainsi été détectée. Un essai similaire, où un contact direct entre l'aptamère et son énantiomère cible est favorisé, a permis d'augmenter la sensibilité de la méthode et pourrait permettre d'abaisser la limite de détection grâce à l'utilisation d'une détection par fluorescence.