Search

Caprine arthritis encephalitis is a lentiviral disease that leads to considerable losses in goat farming. In the acute phase of viral infection, though antiviral antibodies are produced by the host?s immune system, they are not sufficient to be detected by serological tests. Acute infections begin with an incubation period, during which the viral genome replicates and host innate responses are initiated. Matrix metalloproteinases (MMPs) are enzymes that play an important role in the physiological and pathological processes of tissue remodeling. The present study aimed to evaluate the expression of MMPs and their activity in the blood serum of male goats experimentally infected with caprine arthritis encephalitis virus (CAEV). Five dairy male goats, aged 3-4 years, were intravenously inoculated with CAEV Cork strain (titer: 105-6 TCID50/mL) after being tested negative for CAEV thrice at consecutive intervals of 30 days using western blot analysis and nested-PCR. The study included three stages: S1 or pre-infection stage; S2 or seroconversion stage, corresponding to the occurrence of first seroconversion; and S3 or post-seroconversion stage, corresponding to 23 weeks after seroconversion. Zymography was performed for the samples using gelatin zymography gels (12.5%), which were subjected to electrophoresis at 170V, 1A, and 300W for 50-70 min. The density of MMP-2 was found to be lower at S1 (1456.20 pixels) than that at S2 and S3 (1943.80 and 2104.40 pixels, respectively) (P < 0.05); and the density of MMP-9 was found to be lower at S3 (133.60 pixels) than that at S1 and S2 (359.60 and 370.60 pixels, respectively). The density of proMMP-2 was low at S1 and S3 (130.45 and 145.20 pixels, respectively). On the other hand, the density of proMMP-9 was statistically different between S1 and S3 (89.22 vs. 415.60 pixels). Both proMMP-2 and proMMP-9 were absent at S2. Thus, MMP-2 and MMP-9 exhibited opposite behaviors depending on the stage of infection. As the greatest activity of MMP-2 was detected at stage S3, we suggest that MMP-2 can be used as a biomarker for complementary diagnosis of acute CAEV infection. In addition, the presence of proMMP-13 can be used to indicate active viral infection. [Estudo de metaloproteinases no sangue de caprinos experimentalmente infectados pelo vírus da artrite encefalite caprina]. Resumo: A encefalite por artrite caprina é uma doença lentiviral que leva a perdas consideráveis na criação de caprinos. Na fase aguda da infecção viral, embora os anticorpos antivirais sejam produzidos pelo sistema imunológico do hospedeiro, eles não são suficientes para serem detectados por testes sorológicos. As infecções agudas começam com um período de incubação, durante o qual o genoma viral se replica e as respostas inatas do hospedeiro são iniciadas. As metaloproteinases da matriz (MMPs) são enzimas que desempenham um papel importante nos processos fisiológicos e patológicos da remodelação tecidual. O presente estudo teve como objetivo avaliar a expressão de MMPs e sua atividade no soro sanguíneo de reprodutores caprinos infectados experimentalmente pelo vírus da encefalite por artrite caprina (CAEV). Cinco machos caprinos, com idades entre 3-4 anos, foram inoculadas por via intravenosa com a cepa de CAEV Cork (título: 105-6 TCID50/mL) após serem testados negativamente para CAEV três vezes em intervalos consecutivos de 30 dias usando a análise de western blot e nested-PCR. O estudo incluiu três etapas: estágio S1 ou pré-infecção; S2 ou estágio de soroconversão, correspondente à ocorrência de primeira soroconversão; e S3 ou pós-soroconversão, correspondendo a 23 semanas após a soroconversão. A zimografia foi realizada para as amostras utilizando gel de gelatina (12,5%), que foram submetidos à eletroforese em 170V, 1A e 300W por 50-70 min. Verificou-se que a densidade de MMP-2 era menor em S1 (1456,20 pixels) do que em S2 e S3 (1943,80 e 2104,40 pixels, respectivamente) (P < 0,05); e a densidade de MMP-9 foi menor em S3 (133,60 pixels) do que em S1 e S2 (359,60 e 370,60 pixels, respectivamente). A densidade do proMMP-2 era baixa em S1 e S3 (130,45 e 145,20 pixels, respectivamente). Por outro lado, a densidade do proMMP-9 foi estatisticamente diferente entre S1 e S3 (89,22 vs. 415,60 pixels). ProMMP-2 e proMMP-9 estavam ausentes no S2. Assim, MMP-2 e MMP-9 exibiram comportamentos opostos, dependendo do estágio da infecção. Como a maior atividade da MMP-2 foi detectada no estágio S3, sugerimos que a MMP-2 possa ser usada como biomarcador para o diagnóstico complementar de infecção aguda por CAEV. Além disso, a presença de proMMP-13 pode ser usada para indicar infecção viral ativa. Made available in DSpace on 2020-11-30T09:01:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CNPC-2020-Art-41.pdf: 795513 bytes, checksum: c5c55a25d61ebeb980af344e5028b757 (MD5) Previous issue date: 2020

Resumo: A Micoplasmose é de origem bacteriana causada pelo Mycoplasma spp. que em caprinos ocasiona a Agalaxia Contagiosa pela espécie M. agalactiae. Ela causa diminuição ou parada total de produção de leite e tem, ainda, como sinais clínicos artrite, ceratoconjuntivite, pleuropneumonia, septicemia e problemas reprodutivos levando a grandes perdas econômicas na caprinocultura. A Artrite Encefalite Caprina (CAE) é uma doença infectocontagiosa, causada por um vírus classificado na família Retroviridae, gênero Lentivirus, sendo denominado de Lentivírus de Pequenos Ruminantes (LVPR), responsável por causar problemas articulares, pneumonia, encefalite e mastite. O presente trabalho teve como objetivo realizar um levantamento sorológico e estudar uma possível correlação entre as duas doenças, bem como analisar os fatores de risco que possam estar relacionados entre as enfermidades, nas duas mesorregiões mais representativas em caprinocultura do Estado do Rio Grande do Norte (Central Potiguar e Oeste Potiguar). As técnicas utilizadas foram os testes sorológicos ELISA para a Agalaxia contagiosa e Western Blotting para a CAE. As amostras provenientes do banco de soros da EMBRAPA foram colhidas de 538 animais, sendo 228 da mesorregião Central Potiguar e 310 da Oeste Potiguar. A soroprevalência de M. agalactiae em rebanhos do Rio Grande do Norte foi de 7,8% (42/538). Em relação às propriedades obteve-se o percentual de 25,9% (14/54) de positivos em ambas as regiões do estado. No caso da CAE foram detectados 3,9% (21/538) de animais soropositivos, e 42,6% (23/54) das propriedades foram diagnosticadas com a doença. As variáveis relacionadas aos fatores de risco somente o sexo e categoria animal obtiveram significância (P0,05). Com isso, concluiu-se que não houve correlação entre as doenças, uma vez que em nenhum animal foi encontrado anticorpos para ambas as doenças, contudo salienta-se que as enfermidades estão amplamente distribuídas entre as regiões do estado e requer medidas sanitárias e capacitação de técnicos e criadores na tentativa de diminuir a prevalência da CAE e Agalaxia Contagiosa no Rio Grande do Norte. Abstract: Mycoplasmosis is of bacterial origin caused by Mycoplasma spp. which in goats causes Contagious Agalaxia by the species M. agalactiae. It causes decrease or total stoppage of milk production and also has as clinical signs arthritis, keratoconjunctivitis, pleuropneumonia, septicemia and reproductive problems leading to great economic losses in goat breeding. Caprine Arthritis Encephalitis (CAE) is an infectious disease caused by a virus classified in the family Retroviridae, genus Lentivirus. It is called Small Ruminant Lentivirus (LVPR), responsible for causing joint problems, pneumonia, encephalitis and mastitis. The present study had as objective to perform a serological survey and to study a possible correlation between the two diseases, as well as to analyze the risk factors that may be related among the diseases, in the two most representative in goat breeding mesoregions of the State of Rio Grande do Norte (Central Potiguar and Oeste Potiguar). The techniques used were the ELISA serological tests for Contagious Agalaxia and Western Blotting for CAE. The samples coming from the flock of sera of the EMBRAPA were collected from 538 animals, 228 of the Central Potiguar mesoregion and 310 of the Oeste Potiguar. The seroprevalence of M. agalactiae in flocks of Rio Grande do Norte was 7.8% (42/538). In relation to the properties, the percentage of 25.9% (14/54) of positives was obtained in both regions of the state. In the case of CAE, 3.9% (21/538) of seropositive animals were detected, and 42.6% (23/54) of the properties were diagnosed with the disease. The variables related to the risk factors only the sex and the animal category obtained significance (P0.05). Therefore, it was concluded that there was no correlation between the diseases, since no animal was found for antibodies to both diseases, however, it is emphasized that the diseases are widely distributed among the regions of the state and require sanitary measures and capacity building technicians and breeders in an attempt to reduce the prevalence of CAE and Contagious Agalaxia in Rio Grande do Norte. Made available in DSpace on 2019-09-19T00:36:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CNPCUPA4.pdf: 1052381 bytes, checksum: 7c7f1cb09a172807f2dd10f92c547de8 (MD5) Previous issue date: 2019 Dissertação (Mestrado em Zootecnia) - Universidade Estadual Vale do Acaraú, Sobral. Orientador: Raymundo Rizaldo Pinheiro (CNPC); Coorientação: Alice Andrioli (CNPC).

Small ruminant lentiviruses, caprine arthritis encephalitis virus, and Maedi-Visna virus cause diseases that result in significant productive losses, mostly in dairy animals. These viruses belong to the Retroviridae family, Lentivirus genus, and constitute a heterogeneous group, which may generate implications for the diagnosis and control of small ruminant lentiviruses. Losses caused by them are associated with reproductive failure, short productive life, and decreased milk production by the infected animals. In addition, these viruses may reduce milk quality, affecting the production of dairy products such as cheese. Small ruminant lentiviruses lead to indirect losses, decreasing herd value and forcing the development of epidemiological trade barriers for animal germplasm. Control of small ruminant lentiviruses is important to promote optimal milk production and to reduce costs with medicine and technical assistance. This control may vary in caprine and ovine populations of each country, according to seroprevalence, variety of breeds, and peculiarities of the practiced management. [Lentiviroses de pequenos ruminantes: perdas produtivas e econômicas, consequências da doença]. Resumo: Os lentivírus de pequenos ruminantes, o vírus da artrite encefalite caprina e o vírus Maedi-Visna causam enfermidades que ocasionam perdas produtivas significativas, principalmente em animais com aptidão leiteira. Esses vírus pertencem à família Retroviridae e ao gênero Lentivirus e formam um grupo genético heterogêneo, o que pode ocasionar implicações para o diagnóstico e o controle dos lentivírus de pequenos ruminantes. As perdas causadas pelos lentivírus de pequenos ruminantes estão relacionadas com falhas reprodutivas, vida produtiva curta e diminuição da produção leiteira dos animais infectados. Além disso, esses vírus podem promover a redução da qualidade do leite, afetando a produção de laticínios, tal como o queijo. Os lentivírus de pequenos ruminantes levam a perdas indiretas, reduzindo o valor dos rebanhos e forçando o desenvolvimento de barreiras comerciais epidemiológicas para germoplasma animal. O controle dos lentivírus de pequenos ruminantes é importante para promover uma maior produção de leite e reduzir os custos com medicamentos e assistência técnica. Esse controle pode variar de acordo com a população caprina e ovina de cada país em termos de soroprevalência, variedade de raças e particularidades do manejo adotado Made available in DSpace on 2017-12-13T23:28:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CNPC2017Small.pdf: 1670203 bytes, checksum: 5d9c7dcc05716a34e4a1afee7e3668d5 (MD5) Previous issue date: 2017-12-13 [ALICE ANDRIOLI PINHEIRO].

Background: Contagious agalactia is an infectious disease caused by Mycoplasma agalactiae (M. agalactiae) that occurs in small ruminants leading to productive and economic losses. Due to the similarity of clinical signs presented in Caprine Arthritis Encephalitis (CAE), which is a viral disease, a differential diagnosis is important. Therefore, this study aimed to investigate the presence of anti-Mycoplasma agalactiae antibodies in dairy goat flocks in Ceará State and possible correlation with CAE. Materials, Methods & Results: The research was performed in four mesoregions in Ceará State (Metropolitan Region of FortalezaMRF; Northeast Ceará - NeC; North Ceará - NC; Sertões in Ceará - SC), from which 16 productions located in 10 cities with the highest representativeness for goat milk production within the State or mesoregion were sampled. A total of 417 females and 69 males (486 animals) of breeds with dairy production aptitude, pure or crossbreed, maintained in semi-intensive or intensive systems, were tested. Blood serum was obtained by venipuncture of the jugular vein with vacuum pressure syringe followed by centrifugation at 1,500 g for 10min. Antibodies against the caprine arthritis encephalitis virus (CAEV) were detected with micro technique of agarose gel immunodiffusion (AGID) and Western Blot (WB). The anti-Mycoplasma agalactiae antibodies were detected with commercial kit of enzymatic immunoassay (IDEXX Laboratories). Seroprevalence of M. agalactiae in dairy goat flocks in Ceará State was 0.62% (3/486). From the total of 16 visited productions, 18.75% (3/16) had seropositive animals for M. agalactiae located in MRF, NC and SC mesoregions. CAE was diagnosed in 56.25% (9/16) of productions with AGID and in 81.25% (13/16) with WB. In addition, 5.2% (25/486) of animals were seropositive for CAE with AGID and 16.6% (80/486) with WB. Animals that reacted positive for M. agalactiae were all females of pure breed with milk production aptitude in distinct mesoregions submitted to intensive rearing system. None of these animals was positive in neither test (AGID or WB) for CAE. Therefore, no correlation of results obtained in diagnosis of M. agalactiae by ELISA and CAEV by AGID or WB (P < 0.05) was identified. However, two out of three productions that were positive for M. agalactiae presented positive results for CAEV with frequencies of 10% and 20%. Discussion: Seroprevalence of M. agalactiae in Ceará State was low in comparison with other Brazilian states and even other countries. However, the presence of the pathogen in more than one mesoregion indicates that the disease occurs in different locations within the State. Therefore, flocks in Ceará are susceptible to the infection, which may be favored by uncontrolled commerce that occurs with deficient surveillance, associated with the importation of animals to improve flock genetic quality. The presence of the pathogen in dairy goats may contribute to significant losses in the local production. On the other hand, CAE was diagnosed in nearly all productions proving the dissemination of this lentivirus infection among dairy goat flocks in Ceará State. Although an association between these diseases was not identified, the presence of a retrovirus in the organism may favor co-infection with another micro-organism, promoting the deficiency in the immune system of the host. In conclusion, M. agalactiae is present in different mesoregions of the Ceará State and control measures should be adopted in short term to prevent pathogen dissemination and, consequently reduce economic and productive losses in the local dairy goat production. No correlation was identified between the prevalence of infection by CAEV and M. agalactiae in this study. [Mycoplasma agalactiae in dairy goat flocks bred in Ceará State of Ceará in association with Caprine Arthritis Encephalitis Virus]. Made available in DSpace on 2018-02-27T00:42:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CNPC2018Mycoplasma.pdf: 384799 bytes, checksum: 41ca4219fc4691d2ffc562158295282c (MD5) Previous issue date: 2018-02-26 [ALICE ANDRIOLI PINHEIRO].

Resumo: O objetivo deste estudo foi determinar a soroprevalência de lentivírus de pequenos ruminantes (LVPR) e identificar os fatores de risco para a ocorrência de caprinos e ovinos soropositivos no semiárido do Estado da Paraíba. Foram utilizados 1.733 animais, sendo 1.274 caprinos procedentes de 62 Unidades de Produção (UPs) e 459 ovinos provenientes de 32 UPs. Para o diagnóstico sorológico da infecção por lentivírus foi utilizado o teste de imunodifusão em gel de ágar (IDGA). Dos 1.274 caprinos analisados 15 (1,18%) foram soropositivos, enquanto que todos os 459 ovinos foram soronegativos. Das 62 propriedades caprinas analisadas oito (12,9%) apresentaram pelo menos um animal soropositivo. Os fatores de risco para a ocorrência de caprinos soropositivos foram área da propriedade (odds ratio = 3,28; p = 0,044), ausência de capacitação dos produtores (odds ratio = 8,29; p = 0,042) e uso de monta natural não controlada (odds ratio = 6,78; p = 0,012). Conclui-se que a infecção por lentivírus de pequenos ruminantes, demonstrada pela detecção de anticorpos, está disseminada em rebanhos caprinos do semiá­rido paraibano, e sugere-se o incentivo à capacitação contínua dos produtores, manutenção de reprodutores negativos ao LVPR e utilização de inseminação artificial com o intuito de evitar o contato físico entre macho e fêmeas. [Epidemiological characterization and risk factors associated with lentivirus infection in small ruminants in the semiarid of Paraíba State, Northeastern Brazil]. Abstract: The aim of this survey was to determine the seroprevalence of small ruminant lentivirus (SRLV) and to identify risk factors for the occurrence of seropositive goats and sheep in the semiarid region of Paraiba State. It were used 1,733 animals, being 1,274 goats from 62 Production Units (PU) and 459 sheep from 38 PU. For the serological diagnosis of lentivirus infection the agar gel immunodiffusion test (AGID) was used. Of the 1,274 goats 15 (1.18%) were seropositive, and all 459 sheep were seronegative. Of the 62 goat herds eight (12.9%) presented at least one seropositive animal. Risk factors for the occurrence of seropositive goats were area of the property ?35 ha (odds ratio = 3.28; p=0.044), not training of producers (odds ratio = 8.29; p=0.042) and use of uncontrolled natural mating (odds ratio = 6.78; p=0.012). It is concluded that lentivirus infection detected by serology is spread in goat flocks in the semiarid of the State of Paraíba, and it is suggested to encourage the continous capacitation of owners, maintenance of reproducers negative for SRLV and use of artificial insemination aiming to avoid the physical contact among male and females. Made available in DSpace on 2017-11-08T09:33:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 cnpc2017Caracterizacao.pdf: 362653 bytes, checksum: aacac53ca95fb8f457f64ac0173fdada (MD5) Previous issue date: 2017-11-07 Título em inglês: Epidemiological characterization and risk factors associated with lentivirus infection in small ruminants in the semiarid of Paraíba State, Northeastern Brazil.

Made available in DSpace on 2014-09-30T18:18:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-04-01Bitstream added on 2014-10-01T14:03:35Z : No. of bitstreams: 1 S0102-09352014000200014.pdf: 1430988 bytes, checksum: ab5146a04db176f51f6cb1cef5ee68aa (MD5) A artrite-encefalite caprina (CAE) é diagnosticada rotineiramente pela técnica de imunodifusão em gel de agarose (IDGA), que é considerada pouco sensível. Objetivou-se com este estudo padronizar testes de Elisa-i e Western Blot (WB) para diagnóstico precoce de anticorpos em caprinos contra CAEV e comparar os resultados obtidos nesses testes com a prova de IDGA. Para a padronização dos testes Elisa-i e WB, utilizaram-se diferentes concentrações e diluições de antígeno, soros e conjugado. No Elisa-i, adotaram-se microplacas rígidas com 96 poços, sendo a combinação de concentração de 0,5µg/poço de antígeno e diluições de 1:100 de soro e 1:1500 de conjugado a que apresentou melhor resultado. No WB foram utilizadas membranas de nitrocelulose, definindo-se as diluições de 1:50 de soro e 1:15000 de conjugado. Para avaliar o desempenho das técnicas, 222 amostras de soro caprino foram testadas e os dados obtidos foram comparados com o IDGA. A sensibilidade e a especificidade do Elisa-i/IDGA, WB/IDGA e WB/Elisa-i foram de 70% e 91%, 100% e 72,6%, 84,6% e 76,5%, concomitantemente. O índice Kappa desses testes foi de 0,35, 0,2 e 0,36, respectivamente. As técnicas de Elisa-i e WB apresentaram-se mais sensíveis que a IDGA, podendo ser utilizadas como ferramentas para o diagnóstico precoce da CAE. Caprine arthritis-encephalitis (CAE) is routinely diagnosed with the Agarose Gel Immunodiffusion (AGID) technique, which is considered to have low sensitivity. The objective of this study was to standardize testing i-Elisa and Western Blot for early detection of antibodies against CAEV in goats and compare the results obtained in these tests with proof of AGID. For standardization of i-Elisa and WB, different concentrations and dilutions of antigen, sera and conjugate were used. In the i-Elisa, rigid microplate with 96 wells was adopted, and the combination that showed the best result was a concentration of 0.5µg/ well of antigen and dilutions of the serum of 1:100 and conjugate of 1:1500. In the WB nitrocellulose membranes were used, and the dilutions of the serum were defined at 1:50 and conjugate at 1:15000. To evaluate the performance of the techniques, 222 goat serum samples were tested and the data were compared with the AGID. The sensitivity and specificity of Elisa-i/IDGA, WB/AGID and WB/Elisa-i were 70% and 91%, 100% and 72.6%, 84.6% and 76.5%, concomitantly. The Kappa index of these tests was 0.35, 0.2 and 0.36, respectively. The i-Elisa and WB techniques were more sensitive than the AGID and can be used as tools for early diagnosis of CAE. Universidade Estadual do Ceará Faculdade de Veterinária Universidade Estadual Paulista Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária Embrapa Caprinos e Ovinos Universidade Estadual Vale do Acaraú Universidade Federal da Bahia Escola de Medicina Veterinária e Zootecnia Agência de Defesa Agropecuária do Estado do Ceará Universidade Estadual Paulista

Caprine arthritis encephalitis causes considerable losses in goat production. The main form of the caprine arthritis encephalitis virus transmission is through the ingestion of colostrum or milk from infected females. However, some transmissions cannot be explained in this manner. Therefore, this study aimed to evaluate transplacental transmission of caprine arthritis encephalitis virus. Blood samples were collected from 283 newborn kids of Anglo-Nubian and Saanen breeds born from seropositive and seronegative goats. Samples were collected immediately after birth and analyzed with agarose gel immunodiffusion and western blot. All samples were negative in the agarose gel immunodiffusion. However, the western blot test demonstrated that four kids were born positive for caprine arthritis encephalitis virus. This result indicates that although in a low frequency (1.4%), there is a possibility of transplacental transmission of small ruminant lentivirus. [Estudo da transmissão do vírus da artrite-encefalite caprina em cabritos neonatos]. Resumo: A artrite encefalite caprina causa perdas consideráveis para a produção caprina. A principal forma de transmissão do vírus da artrite encefalite caprina é a ingestão de colostro ou leite de fêmeas infectadas. No entanto, algumas transmissões não podem ser explicadas por esta via. Dessa forma, este estudo teve como objetivo avaliar a transmissão do vírus da artrite encefalite caprina por via transplacentária (vertical). Foram realizadas coletas de sangue em 283 crias recém-nascidas das raças Anglo-Nubiana e Saanen, provenientes de progenitores soropositivos e soronegativos. As amostras foram coletadas logo após o nascimento e analisadas pelas técnicas de imunodifusão em gel de agarose e western blot. No teste de imunodifusão em gel de agarose, nenhum cabrito foi detectado reagente. Porém, no teste de western blot, quatro cabritos nasceram soropositivos. Esse resultado indica que, apesar de baixa frequência (1,4%), existe a possibilidade de transmissão via transplacentária do lentivírus de pequenos ruminantes. Made available in DSpace on 2018-02-02T17:27:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CNPC2017Evaluationofofcaprine.pdf: 180290 bytes, checksum: f9050563abc6f01ce75b13bfee03e141 (MD5) Previous issue date: 2018-02-02 [ALICE ANDRIOLI PINHEIRO].

Resumo: Lentivírus de pequenos ruminantes (LV) é o termo genérico utilizado para designar os vírus da artrite encefalite caprina e Maedi-Visna, os quais pertencem à família Retroviridae, subfamília Orthoretrovirinae, gênero Lentivirus. Tais vírus infectam caprinos e ovinos, causando enfermidades de curso lento com lesões inflamatórias, crônicas e degenerativas que podem atingir vários órgãos, provocando caquexia e morte. Os animais infectados eliminam o vírus sobretudo por meio de secreções e excreções e transmitem-no especialmente em situações de estreito contato. Não há tratamento até o momento. O controle é baseado na criação segregada, no manejo e no sacrifício dos positivos. Esse agente infeccioso já foi relatado em várias partes do mundo, sendo responsável por perdas econômicas significativas. Por o agente ter sido verificado em vários estados do Brasil e por não existirem dados soroepidemiológicos nas mesorregiões sudeste e sudoeste piauiense, esta pesquisa teve por objetivo realizar inquérito sorológico para investigar a ocorrência de anticorpos para o LV em ovinos e caprinos nas microrregiões do Alto Médio Canindé, Picos e Floriano, no Piauí. Para tanto, foram coletadas 1.280 e 1.360 amostras de soro caprino e ovino, respectivamente, oriundos de 20 municípios, distribuídos nas três microrregiões, sendo o número de amostras proporcional ao rebanho efetivo de cada município. As amostras de soro foram analisadas utilizando o teste de imunodifusão em gel de agarose (IDGA). Nenhum dos soros pesquisados reagiu positivamente, constatando-se soroprevalência nula. Ressalta-se a importância da implantação de um rigoroso programa de controle para que se possa evitar a introdução e/ou a disseminação desse agente infeccioso nessas microrregiões. [Serological investigation of lentiviruses of small ruminants in the microregions of Alto Médio Canindé, Picos and Floriano, Piauí state, Brazil]. Abstract: Small ruminant lentiviruses (LV) is the generic term for the caprine arthritis-encephalitis and ­­Maedi-Visna viruses, which belong to the Retroviridae family, Orthoretrovirinae subfamily, Lentivirus genus. The virus infects goats and sheep, causing slow course of disease with inflammatory, chronic and degenerative lesions, which can reach several organs, provoking cachexia and death. Infected animals eliminate the virus mainly through secretions and excretions and transmit it especially in close contact situations. There is no treatment to date. The control is based on segregated creation, management and sacrifice of the positive. This infectious agent has been reported in various parts of the world and is responsible for significant economic losses. It was verified in several states of Brazil and there are seroepidemiological data in southeast and southwest mesoregions of Piauí, Brazil. This research aimed to perform serological survey to investigate the occurrence of antibodies to LV in sheep and goats, in the regions of Alto Médio Canindé, Picos and Floriano. So, 1,280 and 1,360 serum goats and sheep samples, respectively, were collected, coming from 20 municipalities, distributed in the 3 microregions. The number of samples was proportional to the actual herd of each municipality. The samples were analyzed using the agar gel immunodiffusion test. None of the surveyed sera reacted positively, though there is a null seroprevalence. It was emphasized the importance of implementing a rigorous control program in order to prevent the introduction and spread of this infectious agent in these microregions. Made available in DSpace on 2017-09-24T00:12:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CNPC2017Investigacao.pdf: 492965 bytes, checksum: fcca8044cb473dcdb30ea9b2d857fc14 (MD5) Previous issue date: 2017-09-22

[Evaluation of Solvent Toxicity of Plant Extract with Antiviral Action in Refrigerated Goat Semen]. Background: Caprine Arthritis Encephalitis Virus have been detected in sperm of breeding goats causing economic losses. In order to control the virus, researches aiming to identify natural extracts with potential antiviral effects are performed. However, aqueous or ethanolic extracts must be diluted in dimethyl sulfoxide (DMSO), which is a substance with unknown effects in sperm quality when present in diluting media. Therefore, this study aimed to evaluate sperm viability of refrigerated caprine semen diluted in media containing DMSO. This was performed to provide data that aid in researches involving the use of this component with natural extracts that may inactivate the caprine lentivirus in sperm. Materials, Methods & Results: The experiment was performed at the Laboratory of Seminal Technology in Embrapa Goats and Sheep in the city of Sobral, Brazil. Sperm viability was assessed in caprine semen refrigerated in two dilution media with crescent concentrations of DMSO. Sperm samples of five goats seronegative for the caprine lentivirus were pooled and diluted in minimal essential medium (MEM) enriched with glucose at 0.01 M added of crescent concentrations of DMSO (0%, 1.5%, 1.75%, 2.0%, 2.25% and 2.5%). The same breeders provided the pool of sperm to test Tris added 2.5% of egg yolk and the same concentrations of DMSO previously mentioned. Treatments were refrigerated at 7°C and evaluated up until four h after DMSO addition. Individual progressive motility (MIP), sperm vigor (V), percentage of spermatozoa reactive to hypoosmotic test (HO) and morphologically normal (NOR) were evaluated. IPM, vigor and NOR remained within normal standards for the caprine species in all treatments test. Percentage results of spermatozoa reactive to hypoosmotic was higher in Tris yolk with values ranging between 34.66% to 46.33%. Sperm vigor was positively correlated (r = 0.85) with IPM in the MEM diluted pool of sperm. In Tris yolk, vigor and hypoosmotic test correlated moderately (r = 0.63, r = 0.54, respectively) with IPM. Tris yolk medium added DMSO presented the highest percentage of reactivity to hypoosmotic test in all treatments when compared to MEM added DMSO. Discussion: The fact that DMSO is easily homogenized in water, ethylic alcohol and most organic solvents favors its use in diluting natural extracts. These components are a possible source of products that inactivate caprine arthritis encephalitis virus in sperm, which is the key to promoting the safe use of genetic material of infected breeders, in addition to commercial use of germplasm. In this study, there was no interference of DMSO in the analyzed parameters when added in a maximum concentration of 2.5% to MEM and Tris yolk, which is in accordance with standard values for goats. In addition, Tris yolk may promote greater protection to the membrane of sperm cells, which was demonstrated by hypoosmotic test. This medium could be ideal to be used in new methodologies that incorporate DMSO. In conclusion, DMSO added to dilution media Tris yolk and MEM did not interfere with the quality of refrigerated caprine sperm, which maintained viability. These results indicate that this substance did not present harmful effects to the genetic material, promoting the use as solvent of extracts from plant compounds with potential anti-viral effect. The information in this study may aid new research performed in this area. Made available in DSpace on 2017-09-24T00:13:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CNPC2017Avaliacaodatoxicidade.pdf: 871218 bytes, checksum: 550cd83a809dce0b578c932c43ccdc49 (MD5) Previous issue date: 2017-09-22 [ALICE ANDRIOLI PINHEIRO].

Submitted by Guilherme Lemeszenski (guilherme@nead.unesp.br) on 2013-08-22T18:44:16Z No. of bitstreams: 1 S1808-16572012000400006.pdf: 279652 bytes, checksum: 8f2bb95ab7fa262bfc622fcfc7685599 (MD5) Made available in DSpace on 2013-08-22T18:44:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 S1808-16572012000400006.pdf: 279652 bytes, checksum: 8f2bb95ab7fa262bfc622fcfc7685599 (MD5) Previous issue date: 2012-12-01 Made available in DSpace on 2013-09-30T19:32:18Z (GMT). No. of bitstreams: 2 S1808-16572012000400006.pdf: 279652 bytes, checksum: 8f2bb95ab7fa262bfc622fcfc7685599 (MD5) S1808-16572012000400006.pdf.txt: 35128 bytes, checksum: 213c5ae33ee7023a1493c8ad987d8c39 (MD5) Previous issue date: 2012-12-01 Submitted by Vitor Silverio Rodrigues (vitorsrodrigues@reitoria.unesp.br) on 2014-05-20T15:08:48Z No. of bitstreams: 2 S1808-16572012000400006.pdf: 279652 bytes, checksum: 8f2bb95ab7fa262bfc622fcfc7685599 (MD5) S1808-16572012000400006.pdf.txt: 35128 bytes, checksum: 213c5ae33ee7023a1493c8ad987d8c39 (MD5) Made available in DSpace on 2014-05-20T15:08:48Z (GMT). No. of bitstreams: 2 S1808-16572012000400006.pdf: 279652 bytes, checksum: 8f2bb95ab7fa262bfc622fcfc7685599 (MD5) S1808-16572012000400006.pdf.txt: 35128 bytes, checksum: 213c5ae33ee7023a1493c8ad987d8c39 (MD5) Previous issue date: 2012-12-01 Objetivou-se estudar a influência da artrite encefalite caprina no hemograma de cabras durante a lactação. Para tanto, 38 matrizes F1 Anglo-Nubiana x Saanen, com idade entre 14 e 38 meses e escore corporal entre dois e três, foram previamente testadas por IDGA e Western Blot para a divisão em grupo soropositivo (n = 19) e soronegativo (n = 19). Os grupos foram mantidos em piquetes distintos, sem contato físico, recebendo o mesmo manejo nutricional e sanitário. O sangue foi coletado por venipunção da jugular, mensalmente, desde o parto até o fim da lactação. Foram determinados os valores do eritrograma e do leucograma. em dados momentos, os soropositivos apresentaram alterações morfológicas nas hemácias, com diminuição significativa do VCM, aumento significativo do HCM e CHCM. Não houve diferença significativa entre grupos na contagem de hemácias e volume globular. Os valores absolutos de monócitos e eosinófilos dos soropositivos, em algumas ocasiões, encontraram-se significativamente superiores aos dos soronegativos e acima da faixa de normalidade para a espécie caprina. The objective was to study the influence of caprine arthritis encephalitis in the blood count of goats during lactation. To this end, 38 F1 Anglo-Nubian x Saanen reproductive female goats, aged 14 to 38 months and body condition score between 2 and 3, were first tested by AGID and Western Blot, and divided into either a seropositive group (n = 19) or a seronegative group (n = 19). The groups were kept in separate paddocks, without physical contact, receiving the same nutritional and health management. The blood of these animals was collected by jugular venipuncture, monthly, from the partum period until the end of lactation, and their erythrogram and leukogram values were determined. At given moments, the seropositive animals showed morphological changes in red blood cells, with significant decrease in MCV, coupled with a significant increase of MCH and MCHC. There was no significant difference between the groups in the values of red blood cells and packed cell volume. The absolute values of monocytes and eosinophils of the seropositive animals, at certain moments, were significantly higher than the seronegative ones and above the normal range for goats. Universidade Estadual do Ceará Laboratório de Virologia Universidade Estadual Paulista Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (EMBRAPA) Caprinos e Ovinos Departamento de Sanidade Animal Laboratório de Patologia Clínica e de Virologia Universidade Estadual Paulista Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias

Resumo: Objetivou-se determinar as perdas econômicas decorrentes da Artrite-Encefalite Caprina, em parâmetros físico-químicos e de CCS do leite de cabras mestiças, criadas sob as condições ambientais do semiárido Cearense. A avaliação foi conduzida na Fazenda Experimental ? Santa Rita, pertencente à Embrapa Caprinos e Ovinos, em Sobral, CE. Foram utilizadas 40 cabras ½ Anglo-Nubiana x ½ Saanen. A produção leiteira foi verificada através de pesagens diárias durante 210 dias, e neste período, os parâmetros físico-químicos e de CCS foram mensurados a cada 28 dias. Foram calculadas as receitas com a venda de leite dos diferentes grupos, considerando-se a diferenciação de preço por qualidade. Observou-se que a CAE acarreta perdas econômicas significativas na receita da produção leiteira de cabras mestiças criadas nas condições ambientais do semiárido Cearense. Em virtude da pequena margem de lucro na produção de leite de cabra, estas perdas podem comprometer a rentabilidade da atividade. [Economic Losses Resulting from the Caprine Arthritis-Encephalitis in the Production of Fat and Milk Total Solids]. Abstract: The objective was to determine the economic losses in production of milk?s fat and total solids due to the CAE in goat crossbred dairy herd under semiarid environmental conditions of Ceara state. The evaluation was conducted at the Experimental Farm - Santa Rita, which belongs to Embrapa Goats and Sheep, in Sobral, CE. Used 40 ½ Anglo-Nubian x ½ Saanen goats. Milk production was measured by daily weighing during the period of 210 days. Was calculated the revenue from the sale of milk quality for the different groups, considering the price differentiation for quality. It was noted that the CAE causes significant economic losses in revenue from milk production of crossbred goats raised in semiarid environmental conditions of Ceara. As a very small profit margin in the production of goat milk, these losses can compromise the productivity of the activity for the raisers. Made available in DSpace on 2014-11-21T08:02:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 APPerdaseconomicas.pdf: 241806 bytes, checksum: effaac58a918de8e2c7287ce8eb517ec (MD5) Previous issue date: 2014-11-20

Resumo: A Geleia de Wharton (GW) é um tecido conectivo mucoso constituído de células mesenquimais imersas em uma substância de base, localizada em torno dos vasos sanguíneos do cordão umbilical. Na primeira fase desse trabalho, foram investigadas as melhores condições de transporte e cultivo para o tecido e células da GW ovinas, caracterizando-as como células multipotentes. Na segunda fase, o trabalho descreveu a permissividade destas células aos lentivirus de pequenos ruminantes (LVPR). Na terceira fase foram produzidos dois antígenos para o teste de imunodifusão em gel de agarose (IDGA) em células da GW de cordão umbilical ovino cultivadas em DMEM baixa glicose, infectadas in vitro com CAEV-Cork ou MVV-K1514, com análise da sensibilidade de detecção de anticorpos anti-CAEV. Para tanto, dez cordões umbilicais foram coletados de ovelhas hígidas por ocasião do parto natural. Foram realizadas culturas de explantes da GW e investigada a viabilidade em cada meio pelo método MTT, além da indução à diferenciação adipogênica, condrogênica e osteogênica in vitro. A permissividade da infecção das células GW ovina foi testada frente às cepas CAEV-Cork e MVV-K1514 quanto ao efeito citopático. Foram obtidos quatro sobrenadantes contento partículas virais CAEV-Cork e quatro MVV-K1514, provenientes do cultivo por 21 dias em meios distintos (MEM, DMEM baixa glicose, Meio 199 e RPMI), os quais foram destinados à nested-PCR e titulação viral. Destes, dois antígenos foram preparados a partir dos sobrenadantes virais CAEV-Cork e MVV K-1514 cultivados em DMEM baixa glicose por concentração em AMICON e liofilização. Foram avaliados quanto à sensibilidade e especificidade, utilizando-se 199 soros caprinos analisados previamente por Western Blot e por um kit OPPV/CAEV comercial. As células apresentaram morfologia fibroblastóides. Os ensaios de MTT e diferenciação in vitro, revelaram que a escolha do meio de cultura influi na proliferação e manutenção da multipotência, destacando o DMEM baixa glicose como o mais efetivo. Foi demonstrada permissividade por meio da visualização de sincícios, detecção do DNA pró-viral e titulação em todos os tratamentos. A sensibilidade dos antígenos produzidos em DMEM foi de 75% tanto utilizando o CAEV como o MVV, sendo superiores ao Kit de IDGA comercial. Abstract: Wharton Jelly (WJ) is a mucosal connective tissue made up of mesenchymal cells immersed in a base substance, located around the umbilical cord blood vessels. In the first phase of this work, the best conditions of transport and culture for ovine WJ tissue and cells were investigated, characterizing them as multipotent cells. In the second phase, the work described the permissiveness of these cells to lentiviruses of small ruminants (SRLV). In the third phase two antigens were produced for the agarose gel immunodiffusion (AGID) test in ovine cord WJ cells cultured in low-glucose DMEM, infected in vitro with CAEV-Cork or MVV-K1514, with sensitivity analysis of Detection of anti-CAEV antibodies. Ten umbilical cords were collected from healthy sheep on the occasion of natural childbirth. Cultures of WJ explants were performed and viability was investigated in each medium by the MTT method, in addition to the induction to adipogenic, chondrogenic and osteogenic differentiation in vitro. Permissiveness of ovine WJ cell infection was tested against CAEV-Cork and MVVK1514 strains for cytopathic effect. Four supernatants containing CAEV-Cork and four MVV-K1514 viral particles were obtained from the culture for 21 days in different media (MEM, DMEM low glucose, Media 199 and RPMI), which were destined for nested PCR and viral titration. Of these, two antigens were prepared from CAEV-Cork and MVV K-1514 viral supernatants cultured in low-glucose DMEM by concentration in AMICON and lyophilization. Sensitivity and specificity were evaluated using 199 goat sera previously analyzed by Western Blot and by a commercial OPPV / CAEV kit. The cells presented fibroblastomo morphology. MTT assays and in vitro differentiation revealed that the choice of culture media influences the proliferation and maintenance of multipotency, highlighting low-glucose DMEM as the most effective. Permissiveness was demonstrated through visualization of syncytia, pro-viral DNA detection and titration in all treatments. The sensitivity of the antigens produced in DMEM was 75% both using the CAEV and the MVV, being superior to the commercial AGID Kit. Made available in DSpace on 2018-01-23T00:35:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CNPC2016UPA01.pdf: 2894884 bytes, checksum: 48eac5ad5fde7091a7bdc685ea16b0b0 (MD5) Previous issue date: 2018-01-22 Tese (Doutorado em Ciências Veterinárias) - Universidade Estadual do Ceará, Fortaleza. Orientadora: Maria Fátima da Silva Teixeira; Coorientador: Raymundo Rizaldo Pinheiro.

Resumo: Dentre as enfermidades infecciosas que afetam os caprinos a Artrite-encefalite caprina é a principal doença de origem viral (Vírus da Artrite Encefalite Caprina - CAEV). O CAEV pertence ao gênero Lentivírus dentro da Família Retroviridae, Subfamília Orthoretrovirinae. A fonte de infecção do CAEV são os próprios caprinos infectados e seus fluidos orgânicos, sendo que esta enfermidade tem se demonstrado de difícil controle, devido à falta de informação sobre o grau de comprometimento dos rebanhos, da dificuldade de acesso ao diagnóstico e do desconhecimento do risco de algumas vias de transmissão, como é o caso da contaminação pelas vias reprodutivas. Além disso, o CAEV apresenta longo período de incubação, alta prevalencia de infecção assintomática e de resultados falso-negativos pelas técnicas de diagnóstico, bem como da existência de latência viral. Nos reprodutores a presença do CAEV foi identificada no sêmen, nos testículos, no epidídimo, no canal deferente e na vesícula seminal, pelas técnicas de PCR, RT-PCR e hibridização in situ e foi comprovada a transmissão através da inseminação artificial utilizando sêmen contaminado. Assim objetivou-se analisar o efeito da Dexametasona no parâmetro reprodutivo e da verificação da funcionalidade do mesmo em reprodutores caprinos acometidos pela CAE para diminuição do quantitativo de monócito e macrófagos, que são células alvos do CAEV. Os resultados demonstram que a Dexametasona causa uma prejuízo temporário nos parâmetros reprodutivos, porém levou a uma diminuição do número de monócitos no sangue assim como diminuiu a presença de DNA - proviral no sêmen, demonstrando que a Dexametasona pode vir a ser utilizada para combater infecções de animais acometidos pelo CAEV. Abstract: Among the infectious diseases that affect goats caprine arthritis-encephalitis is the leading viral disease (Arthritis Encephalitis Virus Caprina - CAEV). The CAEV belongs to the Lentivirus genus within the family Retroviridae, subfamily Orthoretrovirinae. The source of CAEV infection are themselves infected goats and their body fluids, and this disease has proven difficult to control due to the lack of information on the degree of commitment of the herds, the difficulty of access to diagnosis and the lack of some risk of transmission routes, such as contamination of the reproductive tract. In addition, CAEV has a long incubation period, high prevalence of asymptomatic infections and false-negative results by diagnostic techniques as well as the existence of viral latency. In breeding the presence of CAEV was identified in semen, testes, epididymis, vas deferens and seminal vesicle, by PCR techniques, RT-PCR and in situ hybridization and was proven transmission through artificial insemination using semen contaminated. So it aimed to analyze the effect of Dexamethasone on reproductive parameters and monitoring of the same functionality in breeding goats affected by CAE to decrease the quantity of monocytes and macrophages, which are cells targets of CAEV. The results show that Dexamethasone causes a temporary loss in reproductive parameters, but led to a decrease in the number of monocytes in the blood as well as reduced the presence of DNA - proviral semen, showing that dexamethasone might be used to combat infections animals affected by CAEV. Dissertação (Mestrado em Zootecnia) - Universidade Estadual Vale do Acaraú, Sobral. Orientação: Alice Andrioli Pinheiro; Coorientação: Raymundo Rizaldo Pinheiro

Os lentivírus de pequenos ruminantes, vírus da artrite encefalite caprina e vírus maedi visna, pertencem a família Retroviridae. São relacionados genética e antigenicamente, causam doenças crônicas e progressivas, levando a perdas produtivas e econômicas. A transmissão interespécie desses vírus pode ser preocupante devido a recombinação genética desses lentívirus. O estudo da proteômica desses vírus torna-se necessário para o conhecimento da função dos genes. A análise proteômica sorológica (SERPA) associada a espectrometria de massas (EM), dentre muitas possibilidades, permite o conhecimento de proteínas de valor diagnóstico. Com isso objetivou-se delinear o perfil proteíco-imunogênico bidimensional de lentivírus de pequenos ruminantes caracterizando proteínas detentoras de alto valor diagnóstico do antígeno dos lentivírus de pequenos ruminantes. Primeiramente realizou-se explant de células de membrana sinovial caprina e posteriormente, com o subcultivo das células, a produção do antígeno de três cepas virais MVV K1514, CAEV Cork e LVC-CE. Essas amostras foram submetidas à eletroforese bidimensional e western blot. Proteínas imunorreativas foram escolhidas para o sequenciamento através de espectrometria de massas. Como o resultado elaborou-se o perfil proteíco-imunogênico bidimensional das cepas de LVPR, inclusive da cepa viral do estado do Ceará (LVC-CE), dados inéditos para o país. Seis proteínas tiveram sequencias homologas compatíveis com proteínas de CAEV e MVV, referentes às proteínas p28, p19 e p15. Demonstrou-se a similaridade da resposta imune entre as cepas estudadas. A técnica SERPA associada à EM permitiu a identificação e caracterização peptídica das proteínas imunogênicas das cepas padrão CAEV Cork e MVV K1514, e da amostra de LVPR nativa do estado do Ceará. Abstract: The small ruminant lentiviruses (SRLV), the caprine arthritis encephalitis virus and maedi visna virus belong to Retroviridae family. They are related genetically and antigenically, and induce chronic and progressive disease which leads to productive and economic losses. The interspecific transmission is worrying due to the genetic recombination of these viruses. The proteomic study is necessary in order to know the genes function. Serological proteome analysis (SERPA) in association with mass spectrometry, besides others possibilities, allow knowing high-value proteins for diagnosis. The aim of this study was to determine the two-dimensional proteinimmunogenic profile and characterize the high-value proteins for diagnostic of different strains of SRLV. Initially, goat synovial membrane cells were explanted and subculture for antigen production of three viral strains CAEV Cork, MVV K1514 and LVC-CE. These samples were submitted to two-dimensional electrophoresis and western blot. Immunoreactive proteins were chosen in order to be sequenced by mass spectrometry. The results showed two-dimensional protein-immunogenic profile of the SRLV strains. Six proteins had homologous sequences compatible to protein CAEV and MVV, related to protein p28 and p15. The SERPA in association with mass spectrometry allowed the immunogenic protein identification and peptide characterization of the two standard strains, CAEV Cork and MVV K1514, and also the national one isolated in Ceará state. Dissertação (Mestrado em Zootecnia) - Centro de Ciências Agrárias e Biológicas, Universidade Estadual Vale do Acaraú, Sobral. Orientador: Raymundo Rizaldo Pinheiro; Coorientadora: Alice Andrioli Pinheiro.

Abstrract: This study was conducted in order to evaluate the transmission of caprine lentivirus to sheep using different experimental groups. The first one (colostrum group) was formed by nine lambs receiving colostrum from goats positive for small ruminant lentiviruses (SRLV). The second group (milk group) was established by nine lambs that received milk of these goats. Third was a control group, consisting of lambs that suckled colostrum and milk of negative mothers. Another experimental group (contact group) was formed by eight adult sheep, confined with two naturally infected goats. The groups were monitored by immunoblotting (IB), enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), agar gel immunodiffusion (AGID) and nested polymerase chain reaction (nPCR). All lambs that suckled colostrum and milk of infected goats and six sheep of the contact group had positive results in the nPCR, although seroconversion was detected only in three of the exposed animals, with no clinical lentiviruses manifestation, in 720 days of observation. There was a close relationship between viral sequences obtained from infected animals and the prototype CAEV-Cork. Thus, it was concluded that SRLV can be transmitted from goats to sheep, however, the degree of adaptation of the virus strain to the host species probably interferes with the infection persistence and seroconversion rate.

Resumo: A maioria das pesquisas para diagnóstico e avaliação da lentiviroses se baseia na identificação, direta ou indireta, da proteína viral no sangue, leite, sêmen, saliva ou tecidos. Trabalhos com proteômica avaliando as lentiviroses são escassos. A princípio, a análise, detecção e/ou avaliação do vírus são realizadas a partir, principalmente, de amostras de sangue, sendo a maioria dos estudos realizados relacionada ao HIV. O perfil proteico do plasma seminal de pequenos ruminantes associado com índices reprodutivos já foi determinado, mas trabalhos correlacionando a presença dessas proteínas no sêmen à Artrite Encefalite Caprina (CAE) são escassos. Na primeira fase desse trabalho foi avaliada a atividade das metaloproteinases (MMPs) no sangue por meio da zimografia (eletroforese unidimensional) e, na segunda fase, o trabalho objetivou analisar o perfil proteico do plasma seminal de caprinos soropositivos cronicamente para a CAE e identificar proteínas presentes no plasma seminal relacionadas com a enfermidade que possam ser utilizadas no futuro como possíveis marcadores da doença. Para tanto, foi realizada a eletroforese bidimensional em gel de poliacrilamida (2D-PAGE) e espectrometria de massa de amostras de plasma seminal de reprodutores soropositivos crônicos para a CAE. A zimografia mostrou alta atividade das MMPs (MMP-2 e MMP-9) no grupo soropositivo. A avaliação seminal mostrou não haver diferença estatística para os parâmetros volume, motilidade e vigor (respectivamente, 0,97A ± 0,61; 82,78A ± 7,52; 3,89A ± 0,58) entre grupos; porém existente para a concentração espermática (4,22B ± 0,71). A análise bidimensional dos géis mostrou grande número de spots em ambos os grupos avaliados, porém com maior número nos animais soropositivos. A cronicidade da CAE em reprodutores caprinos pode ter sido a responsável pela maior expressão e atividade das proteínas no sangue (MMP-2 e pro-MMP-2) e plasma seminal. A espectrometria de massa permitiu identificar no plasma seminal proteínas de resposta imune, relacionadas, possivelmente, ao quadro crônico da doença. Abstract: The most research for diagnosis and evaluation of lentiviruses are based on the identification (direct or indirect) of the viral protein in the blood, milk, semen, saliva or tissues. Works with proteomics evaluating lentiviruses are scarce. At first, virus's analysis, detection and assessment are made from mainly blood samples, most of the studies related to HIV. Studies have conducted the protein profile of seminal plasma of small ruminants associating with reproductive parameters but works correlating the presence of these proteins in the semen with Caprine Arthritis Encephalitis (CAE) are scarce. The first phase of this work aimed to evaluate the activity of matrix metalloproteinases (MMPs) in the blood by zymography (1DPAGE). In the second phase, the study aimed to analyze the protein profile of seropositive CAE goats and to identify proteins related with the disease that may be used as markers in the future. Two-dimensional electrophoresis and mass spectrometry was used on samples of seropositive goat bucks chronically infected with CAE. The zymography showed high activity of MMPs (MMP-2 and MMP-9) in the seropositive group. Semen evaluation showed no difference with volume, motility and vigor parameters (respectively, 0.97A ± 0.61; 82.78A ± 7.52; 3.89A ± 0.58); however, there was significant difference of sperm concentration between groups (4.22B ± 0.71). The two-dimensional analysis revealed a great number of spots in both groups, however there was a higher number in seropositive animals. CAE chronicity in bucks may have been responsible for greater expression and activity of proteins in seminal plasma. Mass spectrometry allowed the identification of immune response proteins in seminal plasma, possibly related to the chronic state of the disease. Tese (Doutorado) - Universidade Estadual do Ceará, Faculdade de Veterinária, Fortaleza. Orientação: Maria Fátima da Silva Teixeira; Coorientação: Ângela Maria Xavier Eloy (CNPC).

Animal agglomerations at commercial events such as trade fairs represent an important facilitator in infectious disease transmission. Thus, it is crucial to understand the epidemiology of infectious diseases in small ruminants. The objective of this study was to examine lentiviral presence in goats and sheep traded at the animal fair of Tabira city (Sertão region of Pernambuco) and identify possible risk factors associated with infection. We collected serum samples from 233 crossbred goats and 119 crossbred sheep, belonging to 12 breeders, at the Tabira livestock fair from November 2014 to June 2015. An epidemiological questionnaire was used to analyze the risk factors. Agar gel immunodiffusion (AGID) and western blotting (WB) were performed to diagnose small ruminant lentivirus (SRLV) infection. In the AGID test, we used maedi-visna virus (MVV) antigens for sheep and caprine arthritis/encephalitis virus (strain Cork) (CAEV-Co) antigen for goats. The WB analysis used CAEV-Co antigen for both species. Variables from the questionnaire were analyzed with univariate and multivariate statistics. One seropositive goat but no sheep was identified via AGID. According to the WB results, 15/233 goats (6.44%; CI95% = 3.94 - 10.35%) and 8/119 sheep (6.72%; CI95% = 3.45 - 12.71%) were seropositive, totaling 23/352 reactive animals (6.53%; CI95% = 4.39 - 9.61%) from 12 herds. Annual vermifugation of the animals was a significant risk factor (odds ratio = 5.9; CI95% = 1.7-19.8; p = 0.04) for disease in goats, but no variables associated with infection risks were identified in sheep. We concluded that SRLV was present in goats and sheep at the animal fair. Western blots were more sensitive than AGID for SRLV diagnosis. Practices aiming to improve sanitary management may reduce the risk of infection in goats. All studied herds included animals identified as seropositive for SRLV. Therefore, we recommend adopting measures that increase disease diagnosis while intensifying traffic control and surveillance of animal agglomerations. [Caracterização epidemiológica e fatores de risco associados às lentiviroses em pequenos ruminantes comercializados em feira de animais no Sertão de Pernambuco, semiárido brasileiro]. Resumo: Aglomerações de animais em eventos comerciais do tipo feiras de negócios representam um importante elo na transmissão de doenças infecciosas, resultando na importância do conhecimento acerca da epidemiologia das doenças de pequenos ruminantes. Desta forma, o objetivo desse estudo foi determinar a presença das lentiviroses em caprinos e ovinos comercializados na feira de animais da cidade de Tabira, Sertão de Pernambuco, bem como a identificação de possíveis fatores de risco associados à enfermidade. Foram coletadas amostras de soro de 233 caprinos e 119 ovinos, sem raça definida, pertencentes a doze proprietários, na feira de animais vivos do município no período de novembro de 2014 a junho de 2015. Foi aplicado questionário epidemiológico para análise dos fatores de risco. O diagnóstico da infecção por Lentivirus de Pequenos Ruminantes (LVPR) nas espécies foi realizado pela Imunodifusão em ágar-gel (IDGA) e Western Blotting (WB). Na IDGA foram utilizados antígenos de Vírus Maedivisna (MVV) para ovinos e de vírus da Artrite-Encefalite Caprina (CAEV), cepa CAEV- Cork para caprinos, e no WB foi utilizado a cepa CAEV- Cork como antígeno para ambas espécies. As variáveis obtidas no questionário foram submetidas a análises estatísticas univariada e multivariada. Pela técnica de IDGA foi possível identificar um caprino soropositivo. Não foi detectada positividade nos ovinos. No WB 15/233 (6,44%; IC95% = 3,94 ? 10,35%) caprinos e 8/119 (6,72%; IC95% = 3,45 ? 12,71%) ovinos foram soropositivos, totalizando 23/352 (6,53%; IC95% = 4,39 ? 9,61%) animais reagentes. Os doze rebanhos estudados apresentaram animais soropositivos. Vermifugar os animais anualmente (odds ratio = 5,9; IC 95% = 1,7 ? 19,8; p = 0,04) foi identificado como fator de risco para enfermidade em caprinos. Não foram identificadas variáveis associadas ao risco de infecção em ovinos. Concluiu-se que os LVPR estão presentes em caprinos e ovinos comercializados na feira de animais. A técnica de WB apresentou maior sensibilidade que a IDGA para diagnóstico dos LVPR. Melhorias nas práticas de manejo sanitário podem reduzir o risco de infecção nos caprinos. Todos os rebanhos estudados apresentaram animais soropositivos para lentiviroses de pequenos ruminantes (SRLV), sendo recomendado adotar medidas que possibilitem aumentar o diagnóstico da doença e intensificar o controle de trânsito e fiscalização das aglomerações animais. Made available in DSpace on 2017-09-24T00:13:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CNPC2017Epidemiological.pdf: 316153 bytes, checksum: 8fa86a42b6c56141e3e96d2c615455cf (MD5) Previous issue date: 2017-09-22

Resumo: A artrite-encefalite caprina (CAE) e a maedi-visna (MV) acometem caprinos e ovinos, respectivamente. Durante anos, os agentes etiológicos dessas enfermidades foram considerados como específicos a cada espécie animal. Entretanto, análises filogenéticas têm demonstrado a heterogeneidade desse vírus, reunindo diferentes genótipos e subtipos em um grupo denominado de lentivírus de pequenos ruminantes (LVPR). Sendo assim, o principal objetivo deste trabalho foi avaliar a transmissão interespecífica do lentivírus de caprinos para ovinos, a partir de quatro grupos experimentais. O primeiro (grupo colostro) foi formado por nove cordeiros que receberam colostro de cabras positivas para LVPR. O segundo (grupo leite) foi estabelecido por nove cordeiros que receberam leite dessas cabras. O terceiro foi um grupo controle, constituído por dez cordeiros que mamaram colostro e leite de suas mães negativas. Já o quarto grupo (grupo contato) foi formado por oito ovinos adultos confinados com duas cabras naturalmente infectadas, propiciando a análise de transmissão horizontal. Os grupos foram monitorados por immunoblotting (IB), ensaio imunoenzimático (ELISA), imunodifusão em gel de agarose (IDGA) e reação em cadeia da polimerase do tipo nested (nPCR). Todos os cordeiros que mamaram colostro e leite de cabras infectadas e seis ovinos do grupo contato apresentaram resultados positivos na nPCR, apesar de soroconversão somente ter sido detectada em três dos 26 animais expostos, não havendo manifestação clínica de lentiviroses, em 720 dias de observação. Análises filogenéticas demonstraram estreita relação entre sequências virais obtidas dos animais infectados e sequência do protótipo lentiviral caprino CAEV-Cork. Dessa forma, concluiu-se que os lentivírus foram transmitidos de caprinos para ovinos, entretanto, o grau de adaptação da cepa viral à espécie hospedeira provavelmente interfere na persistência da infecção, taxa de soroconversão e manifestação da doença. Outras avaliações ainda foram conduzidas nos grupos colostro e controle, para estudo da transferência de imunidade passiva colostral contra LVPR, em cordeiros. Determinaram-se as concentrações de proteína sérica total (PST), albumina (ALB), globulinas (GLOB) e imunoglobulina G (IgG). Em ambos os grupos, as menores médias de PST, GLOB e IgG foram observadas ao nascimento e as maiores médias foram constatadas às 24 horas de vida, devido à absorção de imunoglobulinas colostrais. Para o grupo colostro, a transferência de imunidade também pôde ser constatada pelas provas de imunodiagnóstico. Ao nascimento, os animais estavam soronegativos. Com 24 horas, todos foram reagentes nos três testes sorológicos. Posteriormente, resultados negativos começaram a ser observados, a partir dos 15 dias de idade, pela prova de IDGA. Já pelo teste de ELISA, todos os animais permaneceram reagentes até os 50 dias de vida. Apenas o IB foi capaz de detectar anticorpos anti-LVPR aos 70 dias. Esses dados estão de acordo com a sensibilidade e especificidade de cada prova sorológica e demonstram que aos 90 e 120 dias de idade, anticorpos colostrais anti-LVPR não mais são detectados no soro de cordeiros, com o emprego dessas metodologias. [Interspecies transmission of lentiviruses from goats to sheep]. Caprine arthritis-encephalitis (CAE) and maedi-visna (MV) affect goats and sheep, respectively. For many years, the etiological agents of these diseases were considered specific to each animal species. However, phylogenetic analyses have demonstrated the heterogeneity of these viruses, bringing the various genotypes and subtypes in a group called small ruminant lentiviruses (SRLV). Thus, the main objective of this study was to evaluate the transmission of caprine lentivirus to sheep, using four experimental groups. The first (colostrum group) was formed by nine lambs receiving colostrum from goats positive for SRLV. The second (milk group) was established by nine lambs that received milk of these goats. The third was a control group, consisting of lambs that suckled colostrum and milk of negative mothers. The fourth group (contact group) was formed by eight adult sheep, confined with two naturally infected goats. The groups were monitored by immunoblotting (IB), enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), agar gel immunodiffusion (AGID) and nested polymerase chain reaction (nPCR). All lambs that suckled colostrum and milk of infected goats and six sheep of the contact group had positive results in the nPCR, although seroconversion was detected only in three of the exposed animals, with no clinical lentiviruses manifestation, in 720 days of observation. Phylogenetic analysis showed a close relationship between viral sequences obtained from infected animals and the prototype CAEV-Cork. It was concluded that SRLV have been transmitted from goats to sheep, however, the degree of adaptation of the virus strain to the host species probably interferes with the infection persistence, seroconversion rate and disease manifestation. Further analyzes were also conducted in colostrum and control groups for the study of passive immunity against SRLV in lambs. The concentrations of total serum protein (TSP), albumin (ALB), globulin (GLOB) and immunoglobulin G (IgG) were determined. In both groups, the lowest averages of TSP, GLOB and IgG were observed at birth and the highest averages were observed at 24 hours of life, due to absorption of colostral immunoglobulins. For colostrum group, transfer of immunity could also be detected by immunodiagnostic tests. At birth, the animals were negative. After 24 hours, all animals were positive in three serological tests. Negative results were first observed 15 days after birth by the AGID test. As for ELISA testing, all animals remained reagent until 50 days old. Only IB was able to detect anti-SRLV at 70 days. These data are consistent with the sensitivity and specificity of serological tests and show that at 90 and 120 days of age, colostral antibodies to SRLV are no longer detected in the serum of lambs, with the use of these methodologies. Made available in DSpace on 2017-08-10T23:54:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CNPC2014Transmissaointerespecies.pdf: 5495599 bytes, checksum: bd6b7f9d3ad8ba469284a7f987035cf8 (MD5) Previous issue date: 2015-02-05 Tese (Doutorado em Ciência Animal nos Trópicos) - Escola de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Federal da Bahia, Salvador. Orientador: Joselito Nunes Costa; Co-orientador: Raymundo Rizaldo Pinheiro (CNPC).

As enfermidades de um modo geral são consideradas fatores limitantes para as criações de pequenos ruminantes, uma vez que as mesmas promovem perdas consideráveis. A toxoplasmose tem como agente etiológico o Toxoplasma gondii, protozoário pertencente ao Filo Apicomplexa que acomete todos os animais homeotérmicos, inclusive o homem. Nos caprinos, a principal repercussão clínica e econômica é o aborto. Algumas enfermidades podem favorecer a instalação da toxoplasmose nos rebanhos, dentre as quais a Artrite Encefalite Caprina (CAE), doença infecciosa, multissistêmica, causada por um retrovírus do gênero Lentivírus, que acomete caprinos de todos os sexos, idades e raças. Objetivou-se com este estudo determinar o perfil soroepidemiológico de Toxoplasma gondii em caprinos do Ceará e avaliar a associação com a Artrite Encefalite caprina. Foram avaliados soro de 833 animais. A prova sorológica utilizada para detecção de anticorpos anti-T. gondii foi o ELISA. Para a detecção de anticorpos anti-CAEV utilizou-se a técnica de Imunodifusão em Gel de Agarose - IDGA e o Western Blot. Os resultados obtidos mostram ocorrência de 63,9% (532/833), para toxoplasmose. Os animais que apresentaram-se positivos foram submetidos ao teste de Avidez a fim de determinar a fase de infecção (crônica e/ou aguda). Os resultados do teste de avidez evidenciaram que 75,0% (398/532) apresentavam infecção crônica, enquanto 25,0% (133/532) apresentavam quadro de infecção aguda. Os resultados obtidos pelo IDGA para a CAE mostraram que 3,7% (31/833) dos animais examinados encontravam-se positivos para esta enfermidade. As propriedades avaliadas que apresentaram pelo menos um animal reagente tiveram todas as amostras submetidas ao ?Western Blot? para confirmar os resultados. Ao todo foram testadas 193 amostras das quais, 41,5% (80/193) tinham anticorpos contra o vírus. Estes resultados demonstram que as ocorrências da toxoplasmose e da CAE foram alta nos rebanhos estudados, indicando a necessidade crescente da adoção de medidas de manejo a fim de controlar a disseminação destas doenças. [Sero-epidemiological profile of Toxoplasma gondii in goats in Ceará and evaluation of its association with caprine arthritis-encephalitis]. Abstract: The diseases are generally considered limiting factors for the creation of small ruminants, since they promote considerable losses. The etiologic agent of Toxoplasmosis, the protozoan Toxoplasma gondii, belongs to the Phylum Apicomplexa that affects all warm-blooded animals, including human. In goats, the main clinical sign which has the most important economic impact is abortion. Some diseases may favor the installation of toxoplasmosis in herds. Among them is the caprine arthritis encephalitis (CAE), an infectious and multisystemic disease, caused by a retrovirus of the genus Lentivirus, which affects goats of all genders, ages and races. The objective of this study was to determine the sero-epidemiology of Toxoplasma gondii in goats in Ceará and a possible association with the caprine arthritis encephalitis. Sera from 833 animals were evaluated. The serological test used to detect anti-T.gondii was ELISA. For the detection of anti-CAEV antibodies it was used the Agar Gel immunodiffusion - AGID and Western Blotting. The results show the occurrence of 63.9% (532/833) of toxoplasmosis. Animals that were positive were subjected to Avidity testing to determine the stage of infection (chronic and/or acute). The avidity test results showed that 75.0 % (398/532) of the animals had chronic infection, whereas 25.0% (133/532) had acute infection. The results obtained by AGID showed that 3.7% (31/833) of examined animals were found to be positive for CAE. The evaluated properties that had at least one reactant animals had all samples submitted to the Western Blot to confirm the results. As a whole, from 193 samples, 41.5% (80/193) had antibodies against the virus. These results show that the occurrence of toxoplasmosis and CAE were high in the evaluated herds, indicating the growing need to adopt management measures to control the spread of these diseases. Dissertação - (Mestrado em Zootecnica. Área de Concentração: Produção Animal) - Universidade Estadual Vale do Acaraú, Sobral. Orientador: Luiz da Silva Vieira (CNPC); Co-orientador: Antonio Cezar Rocha Cavalcante (CNPC).

As metaloproteinases estão sendo foco de recentes estudos, que visam buscar biomarcadores para doenças inflamatórias, de tumores e de resistência de animais e humanos às determinadas doenças. Na medicina humana as pesquisas já estão avançadas, enquanto que na medicina veterinária estas ainda são incipientes, principalmente na espécie caprina. Dentre os problema sanitários de caprinos destaca-se a Artrite Encefalite Caprina (CAE) que acomete animais em vária regiões do país, em especial os rebanhos de caprinos leiteiros. Apesar de haver vários tipos testes de diagnóstico eles não conseguem detectar todo o animais positivos levando a sérios problema no controle da enfermidade O estudo das MMP abre possibilidades incrementar este diagnóstico. Portanto, o conhecimento das proteases será de valia pois poderá colaborar para o diagnóstico, prognóstico e na identificação de anti-virais, além de identificar animais mais resistentes, mesmo estando infectados pelo vírus. Este trabalho teve como objetivo investigar a presença e atividade das metaloproteinases (MMPs) em caprinos sadios e acometidos pela CAE. Foram utilizados 12 reprodutores com idade média de 4 anos. Os animais foram divididos em dois grupos experimentais, um composto por animais soropositivos naturalmente para CAE e outro soronegativo, previamente testado através do IDGA e Western Blot. As coletas de sêmen foram realizadas com intervalos de uma semana para os grupos de animais soropositivos e soronegativos, e o plasma, obtido por centrifugação foi avaliado através da Zimografia. As formas latentes e ativas das proMMP-9, MMP-9 e a forma ativa da MMP-2 estão presentes no plasma seminal de caprinos dos dois grupos. Observou-se nos animais soropositivos correlação negativa e significativa entre a proMMP-9 e o vigor (-0,59) (P

Resumo: O escopo deste trabalho foi realizar um estudo zoosanitário e determinar a prevalência da Artrite-Encefalite Caprina (CAE) no rebanho de caprinos nos estados do Ceará (CE), Rio Grande do Norte (RN) e Sergipe (SE). Para tanto, foram coletadas amostras de sangue de 2.249 animais, sendo 738 do CE, 1.072 do RN e 439 de SE. Dos 38 criatórios pesquisados no Ceará, nove apresentaram pelo menos um animal soropositivo, com prevalência de 23,7%, enquanto a prevalência de caprinos sororeagentes para a Artrite-Encefalite Caprina (CAE) foi de 3,3% (24/738). Do total de amostras de soro de caprinos coletadas no RN, 1,0% (11/1.072) apresentaram anticorpos contra o vírus da CAE. Sergipe apresentou uma prevalência de 0,7% (3/439). Foi observada que o CE apresentou percentual de positividade significativamente maior em comparação aos demais estados (p

Resumo: O intuito deste trabalho foi verificar se o vírus da Artrite Encefalite Caprina interfere nos parâmetros clínicos, fisiológicos e hematológicos de reprodutores caprinos com infecção recente ou crônica e também analisar a técnica sorológica de Western Blotting em amostras de plasma seminal na detecção de anticorpos anti-CAEV em comparação às amostras de soro sanguíneos. Foram utilizados 12 reprodutores caprinos de diferentes raças, em bom estado de saúde de acordo com exame clínico geral realizado, os quais foram mantidos durante todo o período experimental (270 dias) em regime intensivo de produção. Os machos tinham de três a quatro anos de idade, e foram selecionados com base no quadro sorológico para o CAEV, sendo seis soropositivos (com infecção natural crônica há mais de 12 meses) e seis soronegativos, obtidos após três testes consecutivos de Western Blottting (WB) e de Nested-PCR (nPCR) no sangue, com intervalo de 30 dias. Os animais foram divididos inicialmente em dois grupos: o grupo de machos com infecção crônica e o grupo de macho pré-infecção. Após 90 dias do início do experimento, os seis machos pré-infecção foram inoculados com a cepa viral CAEV-Cork, título 105,6 TCID50/mL, por via intravenosa. A partir da inoculação viral o grupo pré-infecção passou a ser denominado de grupo de reprodutores com infecção recente e foram acompanhados semanalmente por testes de WB no soro sanguíneo e plasma seminal. Todos os animais inoculados com o CAEV-Cork, soroconverteram após a terceira semana. Os reprodutores de ambos os grupos apresentaram parâmetros fisiológicos e hematológicos dentro dos padrões de normalidade para espécie. Quanto aos parâmetros de comportamento sexual, foi observado que os animais não apresentaram receio à presença do homem em sala de coleta e que a maioria realizou o comportamento de cortejo da fêmea. O tempo de reação não diferiu (p>0,05) entre os grupos e está dentro dos parâmetros normais para a espécie. Entre os animais dos grupos de reprodutores pré-infecção e com infecção crônica para o CAEV que tiveram seu sêmen submetido à avaliação in vitro, através de espermograma, não houve diferença estatística (p>0,05) para os parâmetros de concentração, motilidade e vigor, com exceção apenas do volume do grupo pré-infecção, situação que permaneceu após a realização da infecção. Além disso, estes parâmetros estiveram dentro dos padrões recomendados pelo CBRA (2013). Assim, pode-se concluir que o CAEV não interferiu nos parâmetros fisiológicos e hematológicos de reprodutores caprinos, independente do tempo de infecção do CAEV, mantendo os parâmetros avaliados dentro dos padrões de referência para a espécie. Em adição, a CAE não altera o padrão de comportamento sexual, porém quando os animais apresentam artrite há um quadro de dor e desconforto, afetando o comportamento sexual e comprometendo o bem-estar do reprodutor. Observamos que animais com infecção recente apresentam maior porcentagem de resultados positivos no Western Blotting, tanto no plasma seminal como no soro sanguíneo, do que os animais com infecção crônica, consolidando a importância do diagnóstico precoce do CAEV. Já o diagnóstico de WB em amostras de soro sanguíneo é mais eficiente do que de plasma seminal, independente do tempo de infecção. No entanto, é uma alternativa válida de diagnóstico do CAEV. The aim of this work was to verify if the Caprine Arthritis Encephalitis virus interferes with the clinical, physiological and hematological parameters for breeding with recent or chronic infection and also examine, the technique of Western Blotting in samples of seminal plasma in the detection of anti-CAEV in compared to samples of blood serum. 12 breeding goats of different breeds were used, in good health according to general clinical examination, which were maintained throughout the experimental period (270 days) in intensive system of production. Males of three to four years of age, and were selected based on serological framework for CAEV, six seropositive (chronic natural infection for more than 12 months) and six seronegative obtained after three consecutive tests Western Blotting (WB) and Nested-PCR (nPCR) in the blood, with an interval of 30 days. The animals were divided initially into two groups: the group of males with chronic infection and the group of pre-infection male. 90 days after the beginning of the experiment, six male pre-infection were inoculated with the viral strain CAEV-Cork title TCID50/mL 105.6 intravenously. From the viral inoculation pre-infection group came to be named the group of breeding animals with recent infection and were monitored weekly for WB testing in blood serum and seminal plasma. All animals inoculated with CAEV-Cork, seroconverted after the third week. Breeders of both groups showed physiological and hematological parameters within normal limits for the species. Regarding the parameters of sexual behavior, it was observed that the animals showed no fear to the man in the collection room and realized that the majority held the courtship behavior of the female. The reaction time did not differ (p> 0.05) between groups and is within normal parameters for the species. Among the animals in groups of breeding pre-infection and chronic infection for CAEV which had their semen submitted to in vitro evaluation through semen analysis showed no statistical difference (p>0.05) for the parameters of concentration, motility and force, with the exception only of the volume of pre-infection group, a situation that remained after the completion of the infection. Furthermore, these parameters were within recommended by CBRA (2013) standards. Thus, we can conclude that the CAEV did not interfere with physiological and hematological parameters of breeding, regardless of time of CAEV infection by keeping the parameters evaluated in the reference standards for the species. In addition, the CAE does not alter the pattern of sexual behavior, but when they show arthritis there is a picture of pain and discomfort, affecting sexual behavior and compromising the welfare of the breeder. We observed that animals with recent infection have a higher percentage of positive results in Western Blotting, both in seminal plasma and blood serum than animals with chronic infection, strengthening the importance of early diagnosis of CAEV. Since the diagnosis of WB in blood serum samples is more efficient than seminal plasma, regardless of the time of infection. However, it is a valid alternative for the diagnosis of CAEV. Dissertação (Mestrado em Zootecnia. Área de Concentração: Reprodução Animal) - Centro de Ciências Agrárias e Biológicas, Universidade Estadual Vale do Acaraú, Sobral. Orientadora: Alice Andrioli Pinheiro; Co-orientador: Raymundo Rizaldo Pinheiro.

Resumo: Está consolidado que o vírus da artrite encefalite caprina (CAEV) está presente no sêmen, tanto na forma livre (RNA viral) no líquido seminal, como na forma de DNA pró-viral integrado às células não espermáticas. Estudos sugerem, ainda, que a presença do CAEV no sêmen pode não ter correlação positiva com o diagnóstico no sangue e que o patógeno pode ser detectado no plasma seminal antes mesmo da conversão sorológica. Além disso, os órgãos sexuais masculinos podem contribuir para a eliminação do DNA pró-viral do CAEV no ejaculado, e a transmissão do vírus pela via reprodutiva foi recentemente comprovada utilizando-se a inseminação artificial. Se considerada a adoção de testes de diagnósticos realizados diretamente no sêmen, pode-se diminuir o risco da entrada ou da disseminação do CAEV nos rebanhos pela via reprodutiva, especialmente na inseminação em que o número de fêmeas que podem receber sêmen contaminado é expressivamente maior. Neste contexto, objetivou-se com esta revisão fazer um levantamento bibliográfico e apontar perspectivas de utilização do sêmen para o diagnóstico da artrite encefalite caprina (CAE). [Caprine arthritis encephalitis virus by semen: diagnosis and transmission]. Abstract: It is well established that the Caprine Arthritis Encephalitis Virus (CAEV) is found in semen, either in free form (RNA) in the seminal fluid or in the integrated proviral DNA in leukocytes and macrophages present in the semen. Studies also suggest that the presence of CAEV in semen may not have a positive correlation with the blood diagnosis, and that the pathogen can be detected in seminal plasma even before the seroconvertion. Furthermore, male sexual organs may contribute to the DNA proviral elimination of CAEV in the ejaculate and transmission of the virus by reproduction was recently demonstrated using artificial insemination. If considered the adoption of diagnostic tests performed directly in semen, it can reduce the risk of entry of the virus or the spread of CAEV in flocks through reproduction, especially insemination, in which the number of females receiving contaminated semen is significantly higher. In this context, the aim of this report was to review the literature and point out perspectives for the use of semen in the diagnosis of caprine arthritis-encephalitis (CAE).

Os procedimentos de lavagem seminal associados a testes moleculares de alta sensibilidade para o diagnóstico do vírus da Artrite Encefalite Caprina (CAEV), como a Nested PCR e a RT-nested PCR, podem ter um impacto significante na prevenção da transmissão de enfermidades e preservação do germoplasma de reprodutores portadores do CAEV, a fim de ser utilizado sem o risco de contaminação da fêmea por via reprodutiva. Nesse cenário, objetivou-se com o presente trabalho determinar a influência da técnica de swim-up sobre a viabilidade espermática e sua eficiência na remoção de partículas virais de amostras de sêmen de reprodutores caprinos portadores do CAEV. Nesse estudo, 67 ejaculados foram avaliados antes da técnica de swim-up, quanto ao volume, concentração, motilidade individual progressiva (MIP), vigor e a presença do DNA pró-viral do CAEV por Nested PCR. Após essa etapa, as amostras foram submetidas ao teste de swim-up seguido da retirada do sobrenadante, contendo os espermatozoides, para avaliação quanto à MIP e ao vigor, como também presença de formas pró-viral e RNA viral livre do CAEV pela Nested PCR e RT-nested PCR, respectivamente, para avaliar a influência do procedimento de lavagem seminal nos parâmetros seminais. Das 67 amostras testadas por Nested PCR, antes do swim-up, 47 (70,15%) foram positivas para o DNA pró-viral. Além disso, quatro amostras adicionais foram positivas ao RT-nested PCR após o swim-up, o que permite dizer que pelo menos 76,12% (51/67) delas estavam infectadas antes da lavagem. Todavia, em 23,88% (16/67) das amostras não foram detectados a presença do CAEV antes do swim-up. Após a aplicação da técnica de swim-up constatou-se, pela Nested PCR e RT-nested PCR, que houve uma redução significativa (?²= 9,078; p< 0,001) da presença do CAEV nas amostras seminais, onde 28 de 51 amostras positivas resultaram livres do vírus (54,90%) tanto para DNA pró-viral quanto para o vírus livre. Ao demonstrar os resultados dos dois testes moleculares e avaliá-los individualmente, observou-se que em relação aos resultados da Nested PCR, o procedimento de swim-up foi capaz de remover de forma significativa (?² = 0,1965, p

Resumo: A Artrite Encefalite Caprina (CAE) é uma enfermidade infectocontagiosa causada por um vírus pertencente ao gênero lentivírus, denominado de vírus da Artrite Encefalite Caprina (CAEV). O CAEV é encontrado em vários tecidos, como o nervoso, o pulmonar, o da glândula mamária e do trato genital masculino e feminino. Desta forma, objetivou-se com este trabalho identificar a presença do CAEV, pelas técnicas de diagnóstico moleculares, em ovócitos e fluido uterino, visando avaliar a possibilidade de transmissão do CAEV pela reprodução. Foram selecionadas 13 cabras comprovadamente infectadas, as quais foram submetidas à eutanásia para coleta do aparelho reprodutor, aspiração do fluido uterino e dissecção dos ovários para coleta de ovócitos. Para identificação do CAEV nas amostras coletadas, na forma de provírus e na forma livre, foram realizadas as técnicas de PCRn e RT-PCRn, respectivamente. Observaram-se que 53,8% dos ovócitos foram positivos à técnica de RT-PCRn, enquanto apenas 9,1% foram positivos à PCRn. A técnica de RT-PCRn também identificou o vírus no fluido uterino de 46,1% das fêmeas testadas. Embora as 13 cabras em experimento fossem portadoras do CAEV, 30,8% apresentaram resultados negativos na PCRn e RT-PCRn em todas as amostras analisadas (ovócito e fluido uterino). Conclui-se que a PCRn e a RT-PCRn podem ser utilizadas no diagnóstico da CAE tendo os ovócitos e o fluido uterino como materiais de análise, e que a presença do CAEV nestes materiais aponta para o risco da transmissão do CAEV através das tecnologias reprodutivas aplicadas às fêmeas. [Caprine Arthritis Encephalitis virus is detected in oocytes and uterine fluid by nested PCR and nested RT-PCR]. Abstract: Caprine arthritis-encephalitis (CAE) is an infectious disease caused by the caprine arthritis-encephalitis virus (CAEV), belonging to the lentivirus genus. The presence of the virus has been observed in the nervous system, respiratory tract and mammary gland, and also in the male and female genital tract. The objective of this study is to identify the virus in oocyte and uterine fluid of infected goats by molecular diagnostic techniques, in order to assess the possibility of CAEV transmission with reproduction. Thirteen infected goats were selected and submitted to euthanasia for the collection of the reproductive system, aspiration of the uterine fluid and dissection of ovaries for oocyte collection. In order to identify the CAEV in the collected material, in the protovirus and free forms, it was submitted to the nRT-PCR and nPCR techniques, respectively. As a result, it was observed that 53.8% of oocytes were positive to nRT-PCR, while only 9.1% were positive to nPCR. The nRT-PCR also identified the virus in the uterine fluid of 46.1% of the tested females. Even though the 13 goats had CAEV, 30.8% presented negative results in nPCR and nRTPCR in all of the analyzed samples (oocyte and uterine fluid). This work concludes that nRT-PCR and nPCR can be used in the diagnosis of CAE for the analysis with oocytes and uterine fluid, and that the presence of CAEV in these materials points out to the risk of CAEV transmission through reproductive technologies used in females.

Submitted by Guilherme Lemeszenski (guilherme@nead.unesp.br) on 2013-08-22T18:56:38Z No. of bitstreams: 1 S0102-09352012000400021.pdf: 565183 bytes, checksum: 8b19265d3d9a11ce0fc44b10af4a7995 (MD5) Made available in DSpace on 2013-08-22T18:56:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 S0102-09352012000400021.pdf: 565183 bytes, checksum: 8b19265d3d9a11ce0fc44b10af4a7995 (MD5) Previous issue date: 2012-08-01 Made available in DSpace on 2013-09-30T19:50:45Z (GMT). No. of bitstreams: 2 S0102-09352012000400021.pdf: 565183 bytes, checksum: 8b19265d3d9a11ce0fc44b10af4a7995 (MD5) S0102-09352012000400021.pdf.txt: 27704 bytes, checksum: 955dff7a0523fb320a5406dd58e3cc62 (MD5) Previous issue date: 2012-08-01 Submitted by Vitor Silverio Rodrigues (vitorsrodrigues@reitoria.unesp.br) on 2014-05-20T15:13:11Z No. of bitstreams: 2 S0102-09352012000400021.pdf: 565183 bytes, checksum: 8b19265d3d9a11ce0fc44b10af4a7995 (MD5) S0102-09352012000400021.pdf.txt: 27704 bytes, checksum: 955dff7a0523fb320a5406dd58e3cc62 (MD5) Made available in DSpace on 2014-05-20T15:13:11Z (GMT). No. of bitstreams: 2 S0102-09352012000400021.pdf: 565183 bytes, checksum: 8b19265d3d9a11ce0fc44b10af4a7995 (MD5) S0102-09352012000400021.pdf.txt: 27704 bytes, checksum: 955dff7a0523fb320a5406dd58e3cc62 (MD5) Previous issue date: 2012-08-01 Este estudo teve como objetivo produzir um antígeno (Ag) a partir de cultura de células de membrana sinovial caprina (MSC) infectadas com o vírus de artrite encefalite caprina (CAEV), pela técnica de microfiltração seriada, substituindo a ultracentrifugação em colchão de sacarose (UCCS) para utilização em ELISA indireto (ELISA-i). Amostras de 188 soros caprinos, que previamente foram testados pelo Western blot (WB) com Ag UCCS, foram submetidas à análise pelo ELISA-i com o novo antígeno produzido, que mostrou concordância de 92% em relação ao antígeno UCCS. A sensibilidade e a especificidade do ELISA em relação ao WB foram de 95,6% e 88,5%, respectivamente. A nova técnica, criada a partir de microfiltrações, mostrou-se efetiva e de baixo custo para o diagnóstico sorológico de anticorpos para CAEV em comparação ao antígeno ultracentrifugado, e constitui uma alternativa viável para produção de antígeno purificado de lentivírus de pequenos ruminantes. This study aimed to produce an antigen (Ag) from the culture of goat synovial membrane cells (MSC) infected by CAEV through serial microfiltering technique replacing ultra ultracentrifugation in sacarosis Mattress (UCCS) for the indirect diagnosis ELISA tests (i ELISA). Samples of 188 sera from goats previously examined by Western Blot (WB) with Ag UCCS were submitted to analysis by i ELISA with new antigen produced, demonstrating an accordance of 92% in relation to UCCS antigen. The specificity and sensitivity relating to WB were of 95,65% and 88, 5% respectively. The new technique created from the microfiltering is effective and with low cost for the serological antibodies diagnosis of CAEV comparing to the ultracentrifuged one, presenting, therefore, as a viable alternative for purified antigen of lentivirus in small ruminants. Universidade Estadual do Ceará Faculdade de Veterinária Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (EMBRAPA) Caprinos e Ovinos Universidade Estadual Paulista Faculdade de Agricultura e Ciências Veterinárias Universidade Estadual Paulista Faculdade de Agricultura e Ciências Veterinárias

Resumo: A artrite-encefalite caprina (CAE) e a Maedi-Visna (MV) são doenças de curso progressivo, que acometem caprinos e ovinos, respectivamente. Durante anos, o agente etiológico viral dessas enfermidades era considerado como específico a cada espécie. Entretanto, análises filogenéticas têm demonstrado a heterogeneidade desse vírus, reunindo diferentes genótipos e subtipos em um grupo denominado de lentivírus de pequenos ruminantes (LVPR). Além disso, diversos estudos revelaram a ocorrência da infecção de caprinos e ovinos por um mesmo subtipo, evidenciando a ocorrência de transmissão cruzada. Dessa forma, o objetivo deste trabalho é abordar as principais características etiopatogênicas dos LVPR, fatores epidemiológicos para a sua ocorrência, diagnóstico, bem como os desafios para os programas de sanidade frente à possibilidade de transmissão interespécie. [Interspecies transmission of small ruminant lentiviruses: review and challenges]. Abstract: Caprine arthritis-encephalitis (CAE) and Maedi-Visna (MV) are diseases with progressive course, affecting goats and sheep, respectively. For many years, the etiological agent of these viral diseases was considered specific to each species. However, phylogenetic analyzes have demonstrated the heterogeneity of this virus, bringing the various genotypes and subtypes in a group called small ruminant lentiviruses (SRLV). Moreover, several studies revealed the occurrence of infection of goats and sheep by the same subtype, indicating the occurrence of cross transmission. Thus, the objective of this review is to discuss the main features of etiological and pathogenic about SRLV, epidemiological factors for its occurrence, diagnosis, and the challenges for health programs facing the possibility of interspecies transmission.

Resumo: Este estudo teve como objetivo avaliar um programa de controle da CAE, em rebanho leiteiro, utilizando testes sorológicos. Para tanto, foram padronizadas as técnicas de Ensaio Imunoenzimático Indireto (Elisa-i) e Western Blot (WB) a fim de diagnosticar precocemente anticorpos contra o Vírus da Artrite Encefalite Caprina (CAEV). A partir das padronizações realizadas testou-se 222 amostras de soro caprino, as quais também foram avaliadas comparativamente com a prova de rotina, Imunodifusão em Gel de Agarose (IDGA). Os testes de WB/IDGA, Elisa-i/IDGA e WB/Elisa-i foram comparados estatisticamente, tendo apresentado sensibilidade de 100%, 70% e 84,6% e concordância de 73,9%, 90,1%, e 72,5%, concomitantemente. Desta forma, essas três técnicas foram utilizadas para o acompanhamento de animais leiteiros com práticas de manejo a fim de controlar a enfermidade. Foram realizadas sete coletas de sangue a cada quatro meses em matrizes e reprodutores, utilizando os testes de IDGA, Elisa-i e WB. As crias que tiveram parto assistido foram submetidas a coletas de sangue logo após o nascimento. Um total de 283 amostras de soro de neonatos foi analisado pelas técnicas de IDGA e WB. A prevalência dos animais adultos foi de 6,8%, 14,9% e 39,2% respectivamente por IDGA, Elisa-i e WB. Na ultima análise detectou-se 1,9% no teste de IDGA e 7,5% nos testes de Elisa-i e de WB. Dos 283 neonatos avaliados ao nascimento, quatro apresentaram resultado positivo no teste de WB. Esses dados revelam que os testes de Elisa-i e WB apresentaram melhores resultados quando comparados a IDGA, sendo mais sensíveis. O WB por sua vez se destacou como o método mais sensível para o diagnóstico precoce de anticorpos anti-CAEV, porém as medidas de manejo aliadas as provas sorológicas adotadas não foram suficientes para erradicar a CAE, mas favoreceu uma redução significativa de animais soropositivos no rebanho estudado. Além disso, apesar da baixa frequência a transmissão vertical dos Lentivírus de Pequenos Ruminantes (LVPR), ocorre. Abstract: This study aimed to evaluate a control program of CAE, in dairy herd, using serological tests. For this, techniques of Enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) and Western Blot (WB) were standardized to diagnose early antibodies the caprine arthritis encephalitis virus (CAEV). From the patterning were tested 222 goat serum samples, which were also evaluated by the test routine agarose gel immunodiffusion (AGID) for comparison. Tests for WB/IDGA, ELISA/IDGA and WB/ELISA were compared statistically, and presented a sensitivity of 100%, 70% and 84.6% and concordance of 73.9%, 90.1%, and 72.5% concomitantly. Thus, these three techniques were used for tracking dairy animals with management practices control of disease. Seven surveys serological were realized, every four months, with collected samples blood the bucks and matrices, using the AGID tests, Elisa-i and WB. The kids who had delivery assisted were subjected to blood draws, shortly after birth, 283 serum samples were analyzed by the AGID and WB. The prevalence of adult animals was 6.8%, 14.9% and 39.2%, respectively, for AGID, ELISA and WB. In the final analysis detected 1.9% in test AGID and 7.5% in tests ELISA and WB. Of the 283 newborns evaluated the birth, four were positive in the WB. These data show that the tests of ELISA and WB shows better results when compared to AGID, being more sensitive. The WB in turn stood out as the most sensitive method for early diagnosis of the disease, but the management practices adopted allied with serologic tests were not sufficient to eradicate CAE, but favored to a significant reduction of the disease in the herd studied. Furthermore, despite the low frequency the vertical transmission of Small Ruminant Lentivirus (SRLV) occurs. Made available in DSpace on 2017-08-10T23:53:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TSApolianarodrigues.pdf: 1341009 bytes, checksum: ce9072f05e24f2112840d71953d39575 (MD5) Previous issue date: 2013-02-28 Dissertação (Mestrado em Ciências Veterinárias) - Faculdade de Veterinária, Universidade Estadual do Ceará, Fortaleza. Orientadora: Maria Fátima da Silva Teixeira; Co-orientador: Raymundo Rizaldo Pinheiro, Embrapa Caprinos e Ovinos (CNPC).

Resumo: A manifestação clínica na glândula mamária da Artrite-Encefalite Caprina (CAE) é freqüente e tem grande significado econômico na caprinocultura ao comprometer a produção leiteira e predispor a glândula mamária a infecções secundárias. Objetivou-se com este estudo determinar a prevalência e isolar e identificar os microrganismos causadores de mastite em animais livres e portadores de CAE. Foram utilizadas 44 cabras mestiças Saanen x Anglo-Nubiana, sendo 19 positivas para a CAE e 25 livres da enfermidade. As amostras de leite para o microbiológico foram coletadas de cada teto, durante sete meses, plaqueadas em Ágar Sangue e mantidas sob incubação a 37°C por 48h, totalizando 588 amostras. As colônias foram caracterizadas macro e microscopicamente. Posteriormente foram submetidas às provas bioquímicas de acordo com a suspeita microbiológica. Em relação ao grupo de animais infectados pela CAE, 28,17% das amostras analisadas foram microbiologicamente positivas, e no rebanho negativo, 18,15% obtiveram resultado positivo. Foi constatada diferença estatística significativa (p

Resumo: O Vírus da Artrite-Encefalite Caprina (CAEV) é um retrovírus não-oncogênico, que causa uma enfermidade incurável de caráter crônico debilitante e têm como principais sintomas: artrite, que é a mais comum; mastite; pneumonia e encefalite, que é a mais rara. Com o objetivo de avaliar as implicações da Artrite-Encefalite Caprina (CAE) na reprodução, na produção e na qualidade do leite de cabras criadas no trópico brasileiro, este estudo foi conduzido nas dependências da Embrapa Caprinos e Ovinos, situada em Sobral, Ceará. Para tanto foram realizados dois experimentos, sendo que um objetivou avaliar as implicações do CAEV nos parâmetros reprodutivos de matrizes ½ Anglo-Nubiana x ½ Saanen e o outro avaliar as implicações do vírus nos parâmetros produtivos e na qualidade do leite dessas cabras. Foram utilizados matrizes e reprodutores ½ Anglo-Nubiana x ½ Saanen e rufiões sem raça definida (SRD), que antes de participarem do estudo foram submetidos a exames clínicos e hematológicos e a testes sorológicos de Imunodifusão em Gel de Agarose (IDGA) e Western Blot (WB). No IDGA e no WB foi possível observar que todos os machos não apresentaram anticorpos anti - CAEV e as cabras foram separadas de acordo com a sorologia em instalações isoladas e os grupos permaneceram sem contato físico durante todo o período experimental. Para as avaliações reprodutivas, foram realizadas duas estações de monta, com um intervalo de oito meses entre cada uma. Cada estação de monta teve duração de 45 dias, sendo que a detecção do estro foi realizada com auxílio de rufiões SRD e a proporção reprodutor: matriz foi de 1:30. Não foi observada diferença (P>0,05) entre os grupos, nos seguintes parâmetros: duração da gestação, fertilidade, fertilidade ao parto, prolificidade, nas taxas de natimortos, aborto, parto distórcico/ retenção de placenta e mortalidade das crias aos 30 dias. Na segunda avaliação reprodutiva, foi possível observar que as crias nascidas de cabras soropositivas tiveram menor peso vivo ao nascer, além disso as soropositivas apresentaram as taxas de infertilidade, de serviços por concepção e de mortalidade das crias a desmama (83 - 89 dias) superiores aos das soronegativas. Para avaliar as implicações do CAEV na produção e na qualidade do leite, as cabras foram ordenhadas manualmente durante sete meses. As cabras soronegativas eram ordenhadas antes das soropositivas e o leite de cada cabra era pesado diariamente. A cada 28 dias, amostras de leite de cada cabra eram coletadas para avaliação da gordura, proteína, sólidos totais, extrato seco desengordurado, lactose e contagem de células somáticas (CCS). No período de lactação avaliado foi observada diferença (P0.05) was not observed among the groups, in the following parameters: gestation lengths, fertility, birth fertility, prolificacy, in the rates of stillbirth, of abortion, birth distorted, retention of placenta and mortality of kids at 30 days. In the second reproductive evaluation, it was possible to observe that the kids from goats seropositives they had lower birth weight, besides the groups seropositives showed the infertility rates, the services for conception and the mortality of the weaning kids (83 to 89 days) higher than the groups seronegatives. To evaluate the implications of CAEV in the production and in the quality of milk, the goats were milked manually for seven months. The goats seronegatives were milked before the seropositives and the milk weighed daily. Every 28 days, samples of milk from each goat were collected for evaluation of the fat, protein, total solids, degreased dry extract, lactose and somatic cell count (SCC). In the lactation period evaluated, was observed difference (P

Resumo: O estudo sobre a possibilidade de veiculacao do lentivirus caprino pela inseminacao artificial e transferencia de embriao, tem grande importancia nos programas de controle da artrite encefalite caprina (CAE) influindo diretamente no comercio e importacao de germoplasmas. Foram avaliados neste experimento a presenca do CAEV em amostras de semen, embriao, fluido uterino, e banho de lavagem dos embrioes, atraves do isolamento viral e reacao em cadeia da polimerase Nested, os fatores que influenciam na presenca do virus no semen, bem como o uso da TE como instrumento de controle da CAE. Comprovou-se a presenca do CAEV no semen e fluido uterino, indicando o risco da transmissao do virus pela monta natural, IA e tambem a possibilidade de transmissao materno fetal. Como o CAEV nao foi detectado no embriao e nos meios de lavagem e foram obtidas crias sadias atraves da TE, o uso desta tecnica, desde que sejam seguidas as normas sanitarias e EITS, e uma alternativa mais segura no aproveitamento do material genetico de reprodutores e matrizes infectados pelo CAEV. Abstract: The study on its possibilities for serving the caprine lentivirus by artificial insemination (AI) and embryo transfer (ET) has big importance in control programs caprine arthritis encephalitis (CAE) directly influencing trade considerations of Germplasm. Abaliados this experiment were the presence of CAEV in samples of semen, embryos, uterine fluid, and bath wash embiões through viral isolation and polymerase chain reaction Nested, the factors that influence the presence of virus in semen and using the TST as a tool to control the CAE. Proved the presence of CAEV in semen and uterine fluid, indicating the risk of virus transmission by natural mating, AI and the possibility of maternal fetal transmission. As the CAEV was not detected in the embryo and in the means of washing and healthy pups were obtained by ET, this technique, provided they followed the health standards of IETS is a safer alternative in the use of genetic material and breeding matrices infected CAEV Made available in DSpace on 2017-08-10T23:47:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CNPC2001VIrusdaartriteeencefalite.pdf: 20104647 bytes, checksum: bf554ff441fa6e5686b26e75dc222672 (MD5) Previous issue date: 2001-10-15 Tese (Doutorado) - Universidade Federal de Minas Gerais, Belo Horizonte. Orientadora: Aurora Maria Guimarães Gouvea.

Resumo: Para um melhor conhecimento e consequentemente implantação das medidas de controle da artrite encefalite caprina viral no Ceará foi realizado o levantamento epidemiológico com ênfase nos rebanhos que apresentam algum grau de melhoramento e nos rebanhos nativos/SRD, e um estudo do manejo sanitário empregado nos criatórios caprinos evidenciando os problemas sanitários mais relevantes. Constatou-se que o CAEV não encontra-se disseminado nos rebanhos SRD/Nativo do Ceará, entretanto já se encontra presente em várias regiões, principalmente nas bacias leiteiras do estado, e que os reprodutores são mais afetados o que pode representar, em decorrência das práticas comuns de aquisição (troca ou empréstimo), papel imoportante na disseminação da enfermidade nos criatórios. Verificou-se ainda, que a grande maioria dos criadores de caprinos no Estado do Ceará realizam uma criação de subsistência e exploram basicamente carne/pele e que o manejo sanitário dos caprinos destes criatórios é precário, independente do tipo de exploração ou regime de criação, com mortalidade de animais considerada alta, principalmente de jovens. Adicionalmente objetivou-se padronizar um ELISA indireto utilizando antígenos do vírus total para o diagnóstico da CAE e comparar com a IDGA comercial, desenvolver e validar um teste Dot-Blot para o diagnóstico sorológico da CAE e testar a purificação das proteínas dos LVPR através da utilização de coluna de afinidade. O ELISA padronizado mostrou-se um um teste mais sensivel que a IDGA podendo ser indicado para a utilização do controle dos LVPR. O teste Dot-Blot apresentou sensibilidade semelhante ao ELISA indireto na detecção anticorpos contra os LVPR, e pela rapidez, facilidade de execução, eficiência e pouco custo, é um teste de eleição para ser empregado em locais de grande movimento e comércio de pequenos ruminantes tais como: exposições, feiras, concursos, e outros. Quanto ao uso da cromatografia de afinidade na purificação de proteínas dos LVPR conclui-se ser a mesma uma alternativa viável para a produção de antígeno purificado de LVPR. Abstract: For a better knowledge and consequent implantation of the control measures for the arthritis encephalitis caprine in the state of Ceará an epidemic study was accomplished with emphasis in the flocks that have some genetic improvement and the native/SRD. A study of the health management used in the goat farms showing the more relevant sanitary problems was also done. It was verified that CAEV is not disseminated in the native/SRD flocks in the state of Ceará, however it is already present in several areas mainly in the milk production regions of the state. The bucks are more affected (P < 0,05) and can act, due to the practices commonly used, of changes or loan, an important paper in the transmission to the native/SRD flocks. It was also verified that the great majority producers of the caprine in the states of Ceará State explore their animals for meat/skin basically and that the sanitary handling of the animals of these farms in precarious, independent of the exploration type or system. Mortality of animals mainly youths, considered high committing the development of the activity. Another purpose of this work was to standardize an indirect ELISA using antigens of the whole virus for the diagnosis of CAE. Another thing was to develop and to validate a Dot-Blot test for the CAE serological diagnosis and to test the purification of the proteins of LVPR through the use of affinity chromatography. ELISA was shown to be more sensitive than IDGA being indicated for use in the control of LVPR. The Dot-Blot presents sensibility similar to indirect ELISA for the detection of antibodies against LVPR, because of the speed execution easiness, efficiency and little cost, it is an election test to be used in places of great movement and trade of small ruminant such as: exhibitions, fairs, shows, etc. The use of affinity chromatography in the purification of proteins of LVPR indicated it as viable alternative for production of purified antigen of LVPR. Made available in DSpace on 2017-08-10T23:47:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CNPC2001Virusdaartrite.pdf: 34579222 bytes, checksum: d0ca27677a92c056c99997d8ab825770 (MD5) Previous issue date: 2001-08-13 Tese (Doutorado em Ciência Animal. Área de Concentração: Medicina Veteriária Preventiva e Epidemiologia) - Universidade Federal de Minas Gerais, Belo Horizonte. Orientadora: Aurora Maria Guimarães Gouvea.

Resumo: A elevação do risco de contaminaçào pelo virus da artriteencefalite caprina (CAEV) em rebanhos caprinos nativos e sem raça definida (SRD) tem sida verificada paralelalnente à introdução de caprinos de raças exóticas no Brasil, o que motivou a realização deste levantamento epidemiológico no Estado do Ceará. Para o diagnóstico da infecção pelo CAEV, utilizou-se a microtécnica de imunodifusão em gel de agar. Foram pesquisadas 4019 amostras de soro caprino em 30 municípios do Ceará. A prevalência da infecção pelo CAEV verificada foi de 1% (40/4019 animais), sendo a maior prevalência (11,1%) na região metropolitana de Fortaleza. Analisando a distribuição de animais soropositivos nos municípios pesquisados, constatou-se que um terço dos municípios (10/30) apresentaram pelo menos um animal soropositivo. Verificou-se maior prevalência (p

Resumo: Objetivando avaliar a resposta superovulatória e a qualidade embrionária pós-colheita em animais soropositivos para o vírus da Artrite Encefalite Caprina (CAEV), foram utilizadas 18 cabras adultas da raça Saanen, sendo 12 soropositivas (G1) e seis soronegativas (G2).Não se observou diferenças significativas (P>0,05) entre o G1 e G2 quanto à resposta do estro, 100,0% vs. 83,0%; ao início do estro (hora) em relação ao momento da retirada das esponjas, 35,0±9,5 vs. 31,2±10,7; à duração do estro (hora), 27,0± 5,4 vs. 28,8±10,7; à taxa de ovulação, 10,8±5,7 vs. 10,8±8,6; e à porcentagem de estruturas recuperadas, 72,0 vs. 67,0 e de embriões viáveis 99,0 vs. 95,0, respectivamente. Considerando que a transferência de embriões é uma técnica segura para o controle da CAEV e diante da resposta satisfatória dos animais soropositivos, em especial, quanto as porcentagens de embriões recuperados e viáveis, concluí-se que animais geneticamente superiores mesmo que soropositivos para a CAEV podem ser usados como doadores de embriões. [The influence of caprine arthritis encephalitis on superovulatory response]. Abstract: The objectives of this work were to determine the ovulation rate and the embryo viability in seropositive animals to Caprine Arthritis Encephalitis Virus infection (CAEV). Eighteen goats of the Saanen breed were used, 12 CAEV-seropositives (G1) and six CAEV-seronegatives (G2). No statistical difference (P>0.05) was observed between groups (G1 and G2) in relation to estrus response, 100.0% vs. 83.0%; onset estrus (hours), 35.0+9,5 vs. 31.2+10.7; estrus duration (hours), 27.0+5.4 vs. 28.8+10.7; ovulation rate, 10.8+5.7 vs. 10.8+8.6; recovery rate of embryos, 72.0% vs. 67.0%; and viable embryos, 99.0% vs. 95.0%, respectively. Considering the embryo transfer is a safe technique for the control of CAEV and due to the fact that the seropositive female show a satisfatory response for embryo recovery rate and viability, we conclude that the CAEV-seropositive animals may be used as embryo donors

Resumo: O objetivo deste trabalho foi avaliar a utilização periódica de testes de diagnóstico mais sensíveis aliados às práticas de manejo, visando ao controle eficaz da artrite encefalite caprina (CAE). Foram realizadas oito coletas de sangue em matrizes e reprodutores. Da primeira à sétima análise, as coletas foram quadrimestrais, utilizando-se os testes de imunodifusão em gel de agarose (IDGA), ensaio imunoenzimático indireto (ELISA-i) e Western Blot (WB). A oitava coleta aconteceu seis meses após a sétima, utilizando-se o WB e a reação em cadeia de polimerase (PCR). A prevalência da CAE foi de 6,8%, 14,9% e 39,2% no IDGA, ELISA-i e WB, respectivamente. Na última análise, foram detectados 0,9% de animais positivos pelo WB e 10,8% pela PCR. Apesar de não erradicarem a CAE, as medidas adotadas, aliadas à utilização periódica dos testes sorológicos e à combinação com a PCR, foram importantes para reduzir significativamente os animais soropositivos no rebanho. [Evaluation of strategic control of caprine arthritis- encephalitis in dairy herd goats]. Abstract: The aim of this study was to evaluate the periodic use of more sensitive diagnostic tests associated to management practices for the effective control of caprine arthritis-encephalitis (CAE). We carried out eight blood samples in does and bucks. From the first to the seventh analysis, the samples were quarterly, using Agarose Gel Immunodiffusion (AGID), Enzyme linked immunosorbent assay (i-ELISA) and Western Blot (WB) tests. The eighth collection was made six months after the seventh, using the WB and Polymerase Chain Reaction (PCR). The prevalence of CAE was 6.8%, 14.9% and 39.2% in the AGID, iELISA and WB respectively. The last analysis detected 0.9% of animals positive by WB and 10.8% by PCR. Although they do not eradicate CAE, steps taken together with the periodic use of serological tests and the combination with PCR were important to significantly reduce positive animals in the herd. Made available in DSpace on 2018-04-10T00:39:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CNPC2018Avaliacaodeum.pdf: 237514 bytes, checksum: 0edcbeb2232e9ab334578ae8ea23c8af (MD5) Previous issue date: 2018-04-09

With the objective of detecting the presence of caprine lentivirus (CLV) in ewe milk and in ram semen, ten matrixes and four reproducers experimentally infected with CLV were used. Samples of ewe milk were collected during the four months of lactation, five collections per animal, totaling 50 samples. Regarding the rams, eight semen collections were made per animal, during one year of experimentation, totaling 32 samples. The milk and semen samples were submitted to DNA extraction and the nested polymerase chain reaction test (nPCR) to detect CLV proviral DNA. Eight (16%) of the milk samples were positive in nPCR originating from two ewes. Only one (3.12%) semen sample was positive. The amplification products were sequenced, and were confirmed to be a CLV genomic sequence. Thus, the presence of CLV proviral DNA in sheep milk and semen was demonstrated, confirming the feasibility of infection between species, and alerting to the risk of spreading infections. [Lentivírus caprino em leite e sêmen de ovinos]. Resumo: Com o objetivo de detectar a presença do lentivírus caprino (LVC) no leite de ovelhas e no sêmen de carneiros, utilizaram-se 10 matrizes e quatro reprodutores infectados experimentalmente com o LVC. Foram coletadas amostras de leite das ovelhas durante os quatro meses de lactação, ocorrendo cinco coletas por animal, totalizando 50 amostras. Quanto aos carneiros, realizaram-se oito coletas de sêmen por animal, durante um ano de experimentação, totalizando 32 amostras. As amostras de leite e de sêmen foram submetidas à extração de DNA e à prova de reação em cadeia da polimerase do tipo nested (nPCR) visando à detecção de DNA proviral do LVC. Oito (16%) amostras de leite foram positivas na nPCR oriundas de duas ovelhas. Apenas uma (3,12%) amostra de sêmen apresentou positividade. Produtos da amplificação foram sequenciados, confirmando-se tratar de sequência genômica do LVC. Dessa forma, demonstrou-se a presença do DNA proviral do LVC em leite e sêmen de ovinos, confirmando a viabilidade da infecção entre espécies e, assim, alertando sobre o risco de que a infecção seja disseminada. Made available in DSpace on 2017-09-24T00:12:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CNPC2017Caprine.pdf: 376528 bytes, checksum: 3ae3a9af4fdd105cae76695fa5801913 (MD5) Previous issue date: 2017-09-22 [ALICE ANDRIOLI PINHEIRO].