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El objetivo del presente estudio fue evaluar la susceptibilidad in vitro de larvas no alimentadas de Rhipicephalus microplus a diferentes aislados de hongos entomopatógenos nativos de suelo de unidades ganaderas y conocer las características de crecimiento y potencial de inóculo de los aislados que mostraran ser más patógenos. Se evaluó la patogenicidad y virulencia de aislados de Metarhizium anisopliae sensu lato (Ma), Beauveria bassiana (Bb) e, Isaria fumorosea (Ifr), en larvas de R. microplus de 7 días de edad, expuestas mediante inmersión en una solución acuosa a la concentración 1x108 conidios/ml. Los aislados Ma135 y Ma133, presentaron alta patogenicidad con 100 y 94% de mortalidad, con valores CL50 de 5.2x104 y 2.5x104 conidios/ml, respectivamente. En estos aislados, la producción de esporas fue de 1.0x10¹º conidios/ml, y el crecimiento radial de micelio fue de 3.07 y 3.60 mm/día, respectivamente. Estos resultados demuestran que los aislados Ma135 y Ma133, pueden ser considerados potenciales agentes de control biológico en larvas de R. microplus. Â