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Le patologie prostatiche possono essere osservate ed assumere un certo rilievo in tutti i cani, ma in particolare non devono essere sottovalutate nei soggetti riproduttori in cui, un interessamento di questa ghiandola può determinare effetti negativi sulla qualità del seme e sulla fertilità. Le due condizioni patologiche più frequenti nel cane sono l’Iperplasia Prostatica Benigna (IPB) e la prostatite. La terapia dell’IPB è indicata nei casi con sintomatologia medio-grave e/o che determina disagio nel paziente. Nuove modalità di approccio terapeutico, sia medico che chirurgico, permettono di conservare la fertilità in molti soggetti affetti da problematiche a carico della prostata. Il tumore prostatico è una patologia relativamente poco frequente. La terapia d’elezione è ad oggi quella chirurgica, ma è palliativa e può comportare importanti complicanze postoperatorie. L’utilizzo di cure alternative all’opzione chirurgica sembra in alcuni casi prolungare l’aspettativa di vita, ma è ancora allo studio. All dogs may experience prostatic disease, but particular care should be addressed to breeding dogs, in which prostatic affection may lead to decrease in semen quality and fertility. The two most frequent prostatic diseases in dogs are benign prostatic hyperplasia (BPH) and prostatitis. BPH therapy is usually recommended when mild-severe signs are present or if symptoms disturb the patient. New therapeutic approaches, both medical and surgical, permit to maintain fertility in most animals with prostatic disorders. Prostatic tumour is relatively infrequent. Elective therapy is the surgical one, but it is considered palliative and can result in important post-operative complications. Treatments alternative to surgery have been described and appear to increase survival times, but they are still being studied.

A healthy female Labrador Retriever was referred to the Reproduction Unit for a gynecological examination and for monitoring the cycle in view of the mating. The bitch underwent natural mating and the pregnancy diagnosis was performed on the 35th day after mating. The ultrasound examination revealed a mono gestational pregnancy and the presence of a parenclyymatous structure with very scarse liquid component consistent with the remaining of an empty gestational sac. At the end of the pregnancy a caesarean section was needed. The puppy was alive and apparently healthy. After ovariohysterectomy different nodular structures were observed on the endometrium of both uterine horns. A histopathological examination diagnosed a Pseudoplacentational Endometrial Hyperplasia (PEH) a not so common pathological finding often misdiagnosed as a common gstic endometrial hyperplasia.

L’utilizzo di procedure per l’inseminazione artificiale, basate sulla crioconservazione dello sperma di delfino, rappresenta un importante strumento a garanzia dello scambio e della varietà del materiale genetico. Lo scopo di questo lavoro è di valutare l’influenza di tre velocità di raffreddamento da 30 a 5°C sulla qualità dello sperma di delfino mediante prove eseguite in campo. Lo studio è stato eseguito utilizzando l’eiaculato di 3 delfini, addestrati alla donazione volontaria del materiale seminale. I dati raccolti evidenziano che, in termini di motilità i risultati migliori si rilevano in campioni portati a 5°C utilizzando una velocità di raffreddamento pari a -1.2°C/minuto.

Introduction and aim. It is now possible to predetermine the sex of offspring from a number of species before fertilization with an accuracy of 85-95%. The current technology is based on the well-known difference in X- and Y- sperm in the amount of DNA present, and incorporates modified flow cytometric sorting instrumentation to sort X- and Y-bearing sperm. Despite the birth of sex-selected pups has been announced by XY INC. in 2007, no information is available on sorting procedures and conditions for dog semen. In order to produce the number of sorted spermatozoa required for an AI in the dog, many hours of sperm sorting are necessary. The aim of this study was to evaluate which is the more appropriate extender for dog semen conservation at room temperature prior (experiment 1) and post (experiment 2) sorting. Materials and methods. The dogs included in this study were 8 (4 for each experiment). For the ejaculates to be included in exp.2, motility and the percentage of morphologically normal spermatozoa had to be >70%. For the exp.1, the three fractions of an ejaculate were collected from each dog in a calibrated plastic vial by digital manipulation. The volume was measured and for the sperm-rich fraction the sperm concentration was determined with a Bürker chamber. Sperm total motility (%) and movement (scale 0-5)(2) were assessed subjectively using a phase contrast microscope at 37°C and x400 magnification. The semen was divided in 4 aliquotes and diluted 1:1 with 4 different media: a) Tris-fructose-citrate (TFC), b) Tris-glucose-citrate (TGC), c) modified Tyrode’s albumine-lactate-pyruvate medium (mTALP), d) third fraction of the ejaculate (after centrifugation at 5000g for 10 min) (III FR). The diluted samples were kept at room temperature (25°C) for 48 hs and total motility, movement, viability (eosin-nigrosin and SYBR-PI stainings) and acrosomal integrity (Fast Green-Bengal Rose staining) were assessed soon after dilution (t0) and after 2,4,6,8,24, and 48 h. In exp.2, the sperm-rich fraction was rapidly evaluated and diluted with the best extender from exp.1 to obtain a final concentration of 100x106 spermatozoa/ml. For sorting, 1 ml samples were stained with Hoechst 33342 for 1 h at 35° C in the dark. Just prior sorting 25 mg/ml of red food dye was added. A MoFlo SX® sperm sorter (DakoCytomation) was used. Selected spermatozoa were collected in 10 ml tubes containing 500 μl/ml of Tes-Tris plus 2% egg-yolk and then centrifuged at 800g for 10 min and re-suspended in the same 4 extenders of exp. 1. The samples were kept at room temperature for 24 h and the same parameters of exp.1 were assessed at 0, 2, 4 and 24 h. Data were analysed by ANOVA (Statistics for Windows, Stat. Inc., OK, USA). Significance has been assessed for P0.05). Exp.2: total motility (t4), movement (t4), viability (t4) and acrosome integrity (t2 and t4) were higher in mTALP (p

In questo studio è stata valutata l'efficacia di separazione di seme congelato di cane mediante gradiente discontinuo di densità Percoll 40/80 e 45/90. Il seme di 8 cani è stato scongelato e separato sui due gradienti. Concentrazione, motilità totale, movimento progressivo, vitalità e reazione acrosomiale sono stati esaminati post-scongelamento e subito dopo separazione (t0) nel pellet e nel menisco ottenuti col gradiente. È stata inoltre valutata la longevità del seme dopo separazione e incubazione a 37°C (t3 e t6). Dai risultati ottenuti è emerso che, oltre a una notevole variabilità individuale, anche se il Percoll 40/80 ha permesso di recuperare una maggiore quantità di spermatozoi rispetto al Percoll 45/90 (20,0 ± 1,9 vs 6,7 ± 0,9%), la separazione di spermatozoi congelati di cane impiegando tali gradienti di densità è relativamente efficiente.

The urethral catheterization after the medetomidine pharmacological effect (UrCaPI) is the most practical technique to obtain a good cat ejaculate because not requires a specific equipment, as the electroejaculation (EE), or a trained tomcat, as the sperm collection with artificial vagina. As reported in literature the sperm collected by UrCaPI or by EE could be used for cryopreservation or for in vitro fertilization with the same results. The aim of this study is to evaluate if different protocols used for UrCaPI collection permits to obtain significative differences in sperm quality.In this experiment were enrolled male cats referred, between January and May 2009, to Animal Reproduction Unit of Veterinary Clinical Department – University of Bologna, in order to be submitted to orchiectomy. A total of 59 adult (1-4 years), mixed-breed male cats, privately owned or belonging to a cat pound, clinically healthy with two palpably normal descended testicles were used for this experiment. Before starting the study, the cats were random assigned to one of three groups for sperm collection using different protocols of UrCaPI. The UrCaPI was performed as described by Zambelli et al., using a 3F by 11 cm long urinary tomcat catheter with the tip cutted. All the animals were intramuscularly injected with medetomidine (120 μg/kg of body weight) in order to perform sperm collection and then the anaesthesia was maintained with 1.5-2% isoflurane in oxygen in order to perform the orchiectomy. In 11/59 cats (group 1) the collection was performed immediately once medetomidine pharmacological effect was obtained, 23/59 cats (group 2) were collected three times every 5 minutes after the pharmacological effect, finally in 25/59 (group 3) UrCaPI was performed 20 minutes after pharmacological effect was reached. Semen was collected into a pre-warmed plastic 1,5 mL eppendorf tube. The volume was measured using a calibrated pipette. Successively, 2 µl of sperm was diluted with 18 µL of Tris-glucose-citrate in order to be correctly evaluated. The percent motility (0-100%) and progressive motility (scale 0-5) were immediately estimated using a phase-contrast microscope (X400) equipped with a warming plate. A Bürker chamber was used for measuring sperm concentration (x106/ml). Data from semen evaluation have been expressed as mean ± S.D. and analysed using a t-test for independent samples or a Wald-Wolfowitz runs test, depending on data distribution (Statistica for Windows, Stat Soft Inc., Tulsa, Oklahoma, USA). A value of p0.01). Conclusions. Quality of sperm collected using a single catheterization (Group 1) immediately after pharmacological medetomidine effect was statistically not different (p>0.01) in comparison with sperm quality obtained with the other two protocols. Moreover this method avoids the urethra traumatism that a multiple catheterization could induce.

Il cateterismo uretrale dopo induzione farmacologica (Ur.Ca.P.I.) rappresenta il modo più pratico per ottenere materiale seminale di gatto di buona qualità. In questo lavoro si è inteso valutare la possibilità di raccolta dello sperma di gatto mediante Ur.Ca.P.I. dopo somministrazione di medetomidina ad un dosaggio più basso di quello riportato in letteratura e l’influenza dello stesso sulla qualità del materiale seminale prelevato. Lo studio è stato eseguito su 12 gatti maschi interi divisi a random in due gruppi da 6 soggetti e sottoposti ad un prelievo di sperma mediante Ur.Ca.P.I. utilizzando due diversi dosaggi di medetomidina, pari rispettivamente a 50 e 130 μg/kg. L’Ur.Ca.P.I. I risultati ottenuti evidenziano in termini di concentrazione, numero totale di spermatozoi e qualità del movimento, una migliore qualità nei campioni raccolti dopo somministrazione di 130 μg/kg. Le differenze osservate tra i campioni prelevati nei due gruppi di gatti indicano l’esistenza di una correlazione positiva tra dose di medetomidina e qualità seminale, ma soprattutto quantità di spermatozoi rilasciati in uretra. Inoltre, mentre la somministrazione di medetomidina ad un dosaggio pari a 130 μg/kg ha sempre garantito un’adeguata sedazione, nei gatti in cui questo farmaco è stato somministrato ad una dose di 50 μg/kg sono sempre stati osservati lievi movimenti degli arti posteriori al momento dell’introduzione del catetere in uretra.

The cat has been considered an important model to study 36 human pathologies and is also a valuable comparative model for assisted reproduction in endangered non-domestic felids. Many researchers have focused their studies on the application to the cat of new technologies such as in vitro maturation (IVM), fertilization (IVF), intracytoplasmic sperm injection (ICSI) and cloning. Only in the last years cat breeders increased their interest for artificial insemination (AI) and sperm preservation. All these techniques, comprised under the term of assisted reproductive technologies (ART), have been developed over the past 30 years but despite this years of research only few techniques are used in the practice by a too small number of practitioners.

In questo studio preliminare, sono stati considerati quali fonti di cellule staminali mesenchimali i liquidi fetali, gli invogli fetali e l'endometrio. A seconda dell'età gestazionale, sono state isolate cellule mononucleate da liquido vitellino, liquido allantoideo, liquido amniotico, membrana vitellina, membrana allantoidea, membrana amniotica e endometrio. Le cellule sono state sottoposte a differenziazione condrogenica, osteogenica e adipogenica in piastra su monostrati cellulari. In tutti i campioni, ad eccezione dell'endometrio, sono state osservate cellule con la classica morfologia fibroblasto-simile. Linee cellulari isolate da liquidi ed invogli fetali (LA, LAL, MA e MAL) sono risultate positive a colorazioni indicative di differenziamento per via condrogenica, osteogenica ed adipogenica.

Lo studio esamina 5 casi clinici di tumore prostatico non metastatizzato in cani maschi sintomatici, identificato all‘ecografia e diagnosticato con l‘esame citologico di campioni ricavati mediante agoaspirato della prostata. L‘istologia ha successivamente confermato definitivamente tale diagnosi. Gli animali sono stati sottoposti al trattamento chirurgico di prostatectomia totale, che ha permesso di offrire una maggiore aspettativa di vita rispetto a quanto riportato in letteratura. I cani sono sopravvissuti dai 4 ai 9 mesi post intervento. La chirurgia non ha comportato inoltre la comparsa di alcuna complicazione postoperatoria ed ha migliorato la qualità di vita dei pazienti, che non hanno presentato alterazioni delle grandi funzioni organiche, nemmeno negli ultimi stadi di vita.

Un cane di 1 anno e 7 mesi, maschio intero, pastore tedesco è stato presentato alla visita per ipoplasia prepuziale congenita che causava ptosi di 3 cm del pene. Il cane aveva subito in passato diversi interventi chirurgici, mirati alla riduzione della patologia, che non hanno apportato alcun miglioramento alle sue condizioni cliniche. La plastica prepuziale è stata realizzata mediante una nuova tecnica chirurgica, che prevedeva la creazione di un lembo cutaneo, il contemporaneo avanzamento dell‘ostio prepuziale e la retrazione del pene, permettendo di risolvere la patologia.

In questo studio è stato valutato, in vitro e in vivo, l‘effetto della vitrificazione in paillettes sulle capacità di sviluppo di blastocisti di gatto prodotte in vitro. Sebbene il 95,6% delle blastocisti sia sopravvissuto alla vitrificazione, di queste solo il 16% era ancora vitale dopo 24h di coltura e a 48h tutti gli embrioni erano degenerati. Dopo trasferimento embrionale non chirurgico di 6 blastocisti vitrificate e di 8 blastocisti fresche in 2 diverse riceventi, l‘esame ecografico eseguito al giorno 13 ha permesso di evidenziare una vescicola embrionale in entrambe le riceventi, ma a 25 g un feto vitale era presente solo nella ricevente di embrioni freschi e a 40 g la camera gestazionale era ancora presente, ma non il feto. In conclusione, la tecnica di vitrificazione necessita ulteriori miglioramenti per aumentare l‘incidenza di gravidanza, considerando anche che sarebbe opportuno trasferire un numero maggiore di embrioni per ricevente. Nonostante ciò, la tecnica di trasferimento trnscervicale si è dimostrata efficace.

La realizzazione di metodiche per l‘inseminazione artificiale, basate sull‘utilizzo di sperma di delfino crioconservato, rappresenta un importante strumento a garanzia dello scambio e della varietà del materiale genetico. L‘obiettivo di questa ricerca è stato di valutare l‘influenza di due temperature (5°C e 18°C) e 3 differenti diluitori (TYB-uovo, Tris-uovo, Latte-uovo), sulla qualità dello sperma di delfino conservato a breve termine. Lo studio è stato eseguito utilizzando l‘eiaculato di 3 delfini, addestrati alla donazione volontaria del materiale seminale. I risultati ottenuti in questo lavoro dimostrano la possibilità di conservazione dello stesso per 30 h a 5°C (TYB-uovo, Latte-uovo) e per 20 h a 18°C (TYB-uovo) mantenendo buoni valori di motilità ed una buona qualità del movimento.

Una leonessa (Panthera leo) di 14 anni, affetta da complesso iperplasia cistica endometriale/piometra associato ad un leiomioma uterino, è stata sottoposta ad ovarioisterectomia. L’intervento si è svolto senza alcuna complicazione intraoperatoria, né ha determinato la comparsa di problematiche nel post-operatorio. L’animale ha ben tollerato il protocollo anestesiologico applicato, manifestando ottime condizioni cliniche già il giorno successivo la chirurgia. L’intervento di ovarioisterectomia, anche se non eseguito di routine nella leonessa, può ritenersi, al pari di quanto descritto negli animali domestici, un metodo efficace per la risoluzione di patologie uterine di natura infettiva, degenerativa o neoplastica, refrattarie ai trattamenti medici.