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Candida albicans is the most prevalent fungal microorganism of human microbiota and one of the few fungi capable of causing diseases in humans, depending on the host's immune defense capacity. The similarity between fungal and host cells promotes several adverse effects during antifungal pharmacotherapy, and antimicrobial resistance increase is a major concern. Therefore, the search for alternative treatments and prevention strategies is urgent. In this context, probiotic bacteria, such as the strain Enterococcus faecium CRL 183, seem to be a viable alternative with its benefits to the immune system, activity against pathogens, and safety use well-documented through in vitro, in vivo, and clinical studies. Thus, this study aimed to evaluate if this probiotic strain prevents C. albicans ATCC 90028 biofilm colonization in vitro. To test the anti-Candida activity of the probiotic strain E. faecium CRL 183, we combined polymicrobial biofilms (C. albicans + E. faecium) with different proportions of fungi: a probiotic was formed (1:1, 1:10, 1:100) during the formation (24 h) and maturation (48 h) periods of the biofilm. The results show that E. faecium established itself with C. albicans in polymicrobial biofilms without losing its cellular viability. The probiotic strain significantly antagonized (p < 0.0001) C. albicans biofilm formation (up to 99.9% reduction in 24 h) and maturation (up to 99.43% reduction in 48 h). According to these results, E. faecium CRL183 may be a promising resource to prevent the formation of fungal biofilms. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Introdução: A Terapia Fotodinâmica (TFD) é uma modalidade terapêutica com mecanismo de ação fundamentado na ativação de um fotossensibilizador (FS) por uma fonte de luz adequada que é elevado ao estado excitado e este pode interagir com o oxigênio molecular de forma indireta via transferência de carga por reação com biomoléculas e geração de radicais formando espécies reativas de oxigênio (reação do tipo I) ou de forma direta (reação do tipo II), com formação de oxigênio singleto. A curcumina é um exemplo de FS utilizado na TFD. A curcumina é um polifenol ß-dicetona bis-a,ß-insaturada coexistindo em equilíbrio com sua forma enólica em pH entre 3 e 7. Nesse intervalo, atua como doador muito potente do íon H+ devido a ligação heptadienona entre os anéis de 2-metoxifenol, o qual possui um carbono altamente ativo com ligações de hidrogênio muito fracas devido ao desvio da trajetória dos elétrons não emparelhados do oxigênio. Em pH abaixo de 3 há predomínio da forma dicetônica, e, em pH acima de 7 há predomínio da forma enólica e a molécula é doadora de elétron. Objetivo: Avaliar se a irradiação por uma fonte de LED azul (460 nm) em soluções de curcumina ocasiona a alteração do pH da solução, alterando a forma tautomérica presente na solução e levando ao deslocamento de pico de absorção de luz. Metodologia: A curcumina foi preparada em solução de sacarose 0,5% contendo 1% de DMSO nas concentrações de 50 e 100 µg/mL. A seguir, alíquotas de 100 µL de cada concentração foram adicionadas a poços de placa de 96 poços e submetidas a irradiação (20 J/cm2) por 151, 302 e 454 segundos, sendo avaliados o espectro de absorção de luz e o pH imediatamente após cada irradiação. Todos os ensaios foram realizados em triplicata. Resultados e discussão: Após o ensaio de fotodegradação, os espectros de absorção de luz das soluções demonstraram picos na região em torno de 400 e 450 nm, com absorção máxima decaindo conforme o tempo de irradiação. Pode-se observar significativo deslocamento à esquerda do pico de absorção máxima das soluções após a irradiação, sugerindo que a forma tautomérica da curcumina estava se alterando. Foi proposto que o deslocamento seria devido a alteração do pH pelo aumento de radicais livres, fazendo com que ocorresse deslocamento do equilíbrio ceto-enólico e alterasse a região do pico espectral. Os valores de pH em todos os tempos de irradiação não demostraram alteração significativa a ponto de causar quebra do equilíbrio ceto-enólico, demonstrando que o deslocamento do pico de absorção de luz não está relacionado com alteração do pH. A hipótese é que o deslocamento do pico de absorção seja resultante da formação dos produtos de fotodegradação da curcumina. Conclusão: A irradiação por luz azul nas diferentes concentrações de curcumina avaliadas não alterou significativamente o pH de forma a explicar o deslocamento dos picos de absorção de luz após ensaio de fotodegradação. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Introdução: Staphylococcus aureus é uma bactéria Gram-positiva encontrada na pele e nas fossas nasais dos seres humanos na forma assintomática, entretanto apresenta capacidade de colonizar diversas partes do organismo e culminar em infecções simples como furúnculos e espinhas e até mesmo nas mais graves, como septicemia, endocardites, abcessos, meningite, pneumonia, entre outras. Além disso, possui a habilidade de adaptação e resistência a antibióticos, estando entre as espécies mais importantes dentro do estudo das infecções nosocomiais. A terapia fotodinâmica antimicrobiana apresenta-se como um tipo de tratamento promissor para infecções, sendo utilizado um fotossensibilizador para a produção de espécies reativas de oxigénio que culminam em inativação celular. Objetivo: No presente estudo foi avaliada in vitro a eficácia da terapia fotodinâmica antimicrobiana sobre S. aureus em fase planctônica. Metodologia: Utilizou-se o fotossensibilizador azul de metileno nas concentrações 75 e 100 ^g/mL e um sistema de diodo emissor de luz (LED) em um comprimento de onda de 660 nanômetros, com dose de luz equivalente a 90 J/cm2 (intensidade de luz de 46 mW/cm2). Após os tratamentos foram realizadas micro-diluições em placa de 96 poços contendo as amostras, e as soluções diluídas foram semeadas em Trypticase Soy Agar (TSA). Grupos não submetidos à incidência de luz também foram analisados, sendo possível realizar comparações entre os grupos tratados e não tratados e avaliar a importância da irradiação. Resultados e discussão: A partir dos experimentos observou-se que a uma dose de luz de 90 J/cm2 associada às concentrações de fotossensibilizador correspondentes a 75 e 100 ^g/mL foi obtida uma redução microbiana significativa em comparação com o grupo que não passou pelo tratamento fotodinâmico. A concentração de 75 ^g/mL submetida à dose de luz durante 33 minutos apresentou a maior redução bacteriana (1,91 logi0) e a concentração de 100 ^g/mL, nas mesmas condições, apresentou redução de 1,40 log10. Foi realizado o teste one-way ANOVA com pós teste de Tukey e foi verificado que não houve diferença estatística entre as concentrações de azul de metileno, observou-se também que o fotossensibilizador, quando ativado pela luz, apresentou citotoxicidade às células microbianas, como registrado na literatura. Conclusão: Os resultados obtidos nesse estudo demonstraram que as concentrações de fotossensibilizador associadas à irradiação apresentaram redução significativa da carga microbiana. Além disso, observou-se que na ausência da irradiação, o fotossensibilizador não apresentou toxicidade às células bacterianas, sendo assim, sob as condições testadas de dose de luz e concentrações de azul de metileno, a terapia fotodinâmica antimicrobiana é eficaz contra S. aureus em fase planctônica. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Introdução: A Acne vulgar é uma das mais comuns doenças dermatológicas encontradas na prática cotidiana, atingindo cerca de 80 a 90% dos adolescentes e 5 a 30% dos adultos. A principal causadora da acne é a infecção pela bactéria Propionibacterium acnes (P. acnes), um patógeno oportunista, que aumenta sua proliferação quando existe um aumento da produção de sebo na unidade pilossebácea. Atualmente, as opções de tratamento para acne vulgar são numerosas, porém muitas vezes com extensos efeitos colaterais. Fatores como resistência aos antibióticos, e a ação inicial lenta das terapias tópicas têm levado pesquisadores a buscar alternativas de tratamento. Uma destas alternativas é a terapia fotodinâmica mediada pela curcumina (C21H20O6), maior constituinte do pó turmérico, extraído dos rizomas da planta Curcuma longa, evidenciada como um promissor fotossensibilizador utilizado nesta terapia. Objetivo: Avaliar in vitro a eficácia da terapia fotodinâmica sobre o microrganismo P. acnes utilizando curcumina como fotossensibilizador, irradiado por um sistema LED emissor de luz azul (450nm). Metodologia: O teste de susceptibilidade bacteriana foi realizado em placas de 96 poços através do método de microdiluição. Alíquotas de 50 μL da suspensão bacteriana ajustada a uma densidade óptica em 630 nm (D.O.630nm) para 0,08 - 0,1 (~1x108cél/mL) foram transferidas para cada um dos poços da placa contendo 50 μL da solução do fotossensibilizador preparadas com o dobro da concentração desejada, resultando em um volume final de 100μL por poço e diluindo em 50% o inóculo (concentração final de células ~5x107cél/mL) e as soluções do fotossensibilizador. O tempo de pré-incubação do fotossensibilizador com a bactéria foi de 5 minutos e posteriormente foi realizado o tratamento. Após o tempo de incubação do tratamento, as suspensões bacterianas de cada poço foram diluídas seriadamente na base 10 até a concentração de ~103cél/mL. Um volume de 5 μL de cada suspensão a ~103cél/mL foi plaqueado em placa de ágar Clostridial Reforçado suplementando com Hemina e incubado em anaerobiose por 24 - 48 horas. Após a incubação realizou-se a contagem de unidades formadoras de colônias (UFC/mL). Resultados e discussão: As concentrações de curcumina testadas foram 5; 7,5; 10; 15; 20 μg/mL e as doses de luz utilizadas foram 18,75; 25; e 37,5 J/ cm2. A terapia mostrou maior eficiência nas amostras em que o tratamento foi feito utilizando o fotossensibilizador na concentração de 20 μg/mL e expostas à dose de luz de 37,5 J/ cm2, apresentando redução de 3,53 Log 10 UFC/mL. Conclusão: Concluiu-se com esse estudo que a terapia fotodinâmica foi eficiente quando utilizada a concentração de 20 μg/mL do fotossensibilizador e dose de 37,5 J/ cm2. Além disso, foi possível concluir também, que as concentrações de fotossensibilizador testadas e as doses de luz irradiadas não apresentaram toxicidade para o microrganismo. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

The polycomb group (PcG) proteins play a central role in the maintenance of a repressive state of gene expression. Recent findings demonstrate that PcG components are organized into nuclear condensates, contributing to the reshaping of chromatin architecture in physiological and pathological conditions, thus affecting the nuclear mechanics. In this context, direct stochastic optical reconstruction microscopy (dSTORM) provides an effective tool to achieve a detailed characterization of PcG condensates by visualizing them at a nanometric level. Furthermore, by analyzing dSTORM datasets with cluster analysis algorithms, quantitative information can be yielded regarding protein numbers, grouping, and spatial organization. Here, we describe how to set up a dSTORM experiment and perform the data analysis to study PcG complexes' components in adhesion cells quantitatively., (© 2023. The Author(s), under exclusive license to Springer Science+Business Media, LLC, part of Springer Nature.)