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[ES] El factor de iniciación de la traducción eucariótico eIF5A es una proteína altamente conservada en eucariotas con capacidad de unión a mRNAs, estando involucrada en la elongación de la traducción y que presenta una modificación post-traduccional única denominada `hipusinación¿ a partir de la poliamina espermidina. eIF5A es una proteína implicada en distintos procesos y vías de señalización en eucariotas, incluyendo regulación de la división, el crecimiento y la muerte celular. eIF5A también recibe otras modificaciones post- traduccionales, como la fosforilación y la acetilación. En Arabidopsis thaliana se han identificado 3 isoformas de eIF5A, y la modificación por hipusinación se ha demostrado que es esencial durante la gametogénesis y participa en otros procesos de desarrollo y respuesta a estrés, si bien el resto de las modificaciones no han sido estudiadas en detalle en plantas. Para profundizar en este conocimiento, en estudios previos en el laboratorio se obtuvieron mutantes puntuales en residuos reguladores del gen eIF5A2 de A. thaliana en la serina-2 (específica para plantas y hongos) y la lisina-48 (acetilable y altamente conservada en eucariotas) generando mutantes eIF5A2 S2A (no fosorilables), eIF5A2 S2D (fosfomiméticos), eIF5A2 K48R (no acetilables) y eIF5A2 K48Q (acetomiméticos) que mostraron alteraciones en el patrón de localización subcelular. En este trabajo, para avanzar en la caracterización funcional de dichas mutaciones, se generaron plantas transgénicas de A. thaliana sobre-productoras de las distintas variantes de eIF5A2, incluyendo también la versión silvestre de la proteína (eIF5A2 WT), y alogunas presentaron alteraciones en los patrones de tolerancia a estrés. Las líneas transgénicas expresando eIF5A2 S2A presentaban resistencia en la parte aérea de la planta a NaCl y ABA, y sensibilidad a sorbitol en la raíz. Aquellas expresando eIF5A2 S2D presentaban sensibilidad en la parte aérea a NaCl y ABA (crecimiento y germinación). Las líneas transgénicas expresando eIF5A2 K48Q presentaban sensibilidad en la parte aérea a NaCl y ABA (germinación), y resistencia en la raíz a sorbitol. Aquellas expresando eIF5A2 K48R presentaban sensibilidad a ABA (germinación). Se estudió también la posible implicación de los residuos mutados en la formación de homodímeros mediante estudios de complementación bimolecular fluorescente (BiFC). Sin embargo, se vio que eIF5A2 no contrarresta la tendencia al autoensamblaje que presentan las mitades de la proteína fluorescente, por lo que el método BiFC no es el correcto para estudiar estas posibles diferencias en la homo-dimerización de eIF5A2., [EN] The eukaryotic translation initiation factor eIF5A is a highly conserved protein among eukaryotes with mRNA binding capacity, being involved in translation elongation and presenting a unique post-translational modification called `hypusination¿ derived from the polyamine spermidine. eIF5A is a protein that operates in different processes and signaling pathways in eukaryotes, including the regulation of cell division, growth, and death. eIF5A also receives several other post-translational modifications, such as phosphorylation and acetylation. There are three identified isoforms of eIF5A in A. thaliana, and the hypusination modification has been proven essential during gametogenesis, being involved in other developmental processes and during stress response, but the other modifications haven¿t been thoroughly studied in plants. To deepen our knowledge in this topic, in previous studies in the lab, point mutants of regulatory residues of the eIF5A2 gene of A. thaliana were obtained, involving the residues of serine-2 (specific for plants and fungi) and lysine-48 (susceptible to acetylation and highly conserved among eukaryotes), generating eIF5A2 S2A (non-phosphorylable), eIF5A2 S2D (phospho-mimetic), eIF5A2 K48Q (aceto-mimetic) and eIF5A2 K48R (non-acetylable) mutants. These mutants showed alterations in their subcellular localization patterns. In the present study, to advance in the functional characterization of the mutations, A. thaliana transgenic plants that over-expressed the different variants of eIF5A2 were produced, including also the wild-type version of the gene (eIF5A2 WT), and some of them presented alterations in stress tolerance patterns. The transgenic lines expressing eIF5A2 S2A presented aerial resistance to NaCl and ABA, and root sensitivity to sorbitol. Those expressing eIF5A2 S2D presented aerial sensitivity to NaCl and ABA (growth and germination). The transgenic lines expressing eIF5A2 K48Q presented aerial sensitivity to NaCl and ABA (germination), and root resistance to sorbitol. Those expressing eIF5A2 K48R presented germination sensitivity to ABA. The possible implication of the mutated residues in the formation of homodimers was also tested by bimolecular fluorescent complementation (BiFC) studies. However, it was seen that eIF5A2 doesn¿t abolish the natural tendency to self-assembly of the different fractions of the fluorescent protein, and so BiFC isn¿t the correct method to analyze the homo-dimerization pattern of eIF5A2.

We report the synthesis and comprehensive study of two chromophores based on 4H-pyranylidene moiety as a part of the π-conjugated spacer. Triphenylamine (TPA) acts as donor and tricarbonitrile-based electron-accepting groups complete these V-shaped D–A–D architectures (A, acceptor; D, donor). Their electrochemical, photophysical and nonlinear optical properties are analyzed in detail by using a joint experimental and theoretical approach. The two chromophores exhibit near-infrared fluorescence, large Stokes shift, enhanced emission in tetrahydrofuran/water mixtures and good photostability. Additionally, the dimerization of triphenylamine groups to tetraphenylbenzidine (TPB) takes place upon electrochemical and chemical oxidation showing their peculiar electrochemical behavior and film formation capabilities. Interestingly, high molecular first hyperpolarizabilities and two-photon absorption cross-sections were found, highlighting their potential applications in electro-optical devices. Overall, our work demonstrates that these near-infrared (NIR) fluorescent chromophores are versatile materials with a myriad of applications ranging from optoelectronics to biological applications., The work at the University of Málaga was funded by the MICINN (PID2019-110305GB-I00, PID2019-104293GB-I00, RTI2018-095410-B-I00, EuroNanoMed 2019 PCI2019-111825-2), the Institute of Health Carlos III (ISCIII) RETIC ARADYAL (RD16/0006/0012) and by the Junta de Andalucıa (P09-FQM-4708, UMA18-FEDERJA-080, UMA18-FEDERJA-007, PIER-0084-2019). The work at the University of Zaragoza was funded by the MICINN (PID2019-104307GB-I00/AEI/10.13039/501100011033) and Gobierno de Aragón (E47_20R). The work at the University of Stuttgart was funded by the German Science Foundation (DFG) through the project “LU 1445/7-1, project number 416982273” on electrooptical hybrid modulators, C. Malacrida is acknowledged for discussions. S. G.-V. thanks the MINECO for a FPU predoctoral fellowship (FPU17/04908) and CB-M for FPU fellowship (FPU16/02516). Computer resources, technical expertise and assistance provided by the SCBI (Supercomputing and Bioinformatics) centre of the University of Málaga are gratefully acknowledged. We thank the Vibrational spectroscopy lab (EVI) of the Research Central Services (SCAI) of the University of Málaga and John Pearson (BIONAND) for help with laser confocal microscopy analysis. We gratefully acknowledge the ICTS “NANBIOSIS” facilities, more specifically the U28 Unit of the Andalusian Centre for Nanomedicine & Biotechnology (BIONAND), for their help with the 2PA characterization and the microscopy studies.

Nuevos complejos de titanio de fórmula general Ti(OAr)4•HOR con diferente grupo sustractor (Cl,CN, NO2), se sintetizaron por el método intercambio alcohol-fenol y se caracterizaron por resonancia magnética nuclear (1H NMR) que dio evidencia de la formación de estructuras diméricas con centros de Ti coordinado octaédricamente; y por análisis termogravimétrico (TGA) que registró pérdida de volátiles y permitió ajustar el peso molecular experimental de cada pre-catalizador. Mediante el análisis químico por absorción atómica se determinó el porcentaje elemental de aluminio en el co-catalizador de composición trietilaluminio. Los complejos de Ti en presencia de trietilaluminio se evaluaron en la reacción de dimerización de etileno a 50 °C, presión atmosférica y con flujo de etileno igual a 100 mL/min donde se observó en todos los catalizadores actividad hacia la producción de 1-buteno.

Este artículo propone la implementación de luminaria inteligente con una red LoRaWAN, realizando dimerización y medición de consumoenergético. El sistema implementado permite reducir el consumo energético, garantizando una autonomía,y a través de la dimerización se logre reducción del consumo energético de una luminaria LED. This article proposes the implementation of an intelligent luminaire with a LoRaWAN network, performing dimming and measuring energy consumption. The implemented system allows reducing energy consumption, guaranteeing autonomy, and through dimming, a reduction in energy consumption of an LED luminaire is achieved. Magíster en Ingeniería Electrónica Maestría

Los parásitos del género Leishmania son los agentes causales de la leishmaniasis. Estos parásitos tienen la capacidad de sobrevivir dentro de las vacuolas fagocíticas de los macrófagos a pesar de las condiciones de pH y estrés oxidativo allí generadas. Esta resistencia se debe a diversos mecanismos biológicos que comprenden enzimas de detoxificación de las especies reactivas de oxígeno, entre otras. Estas enzimas son potenciales dianas terapéuticas para el tratamiento de la leishmaniasis. Una de estas enzimas es la superóxido dismutasa que cataliza la dismutación del anión superóxido, una especie reactiva de oxígeno con capacidad de originar otras especies reactivas más tóxicas. Leishmania cuenta con 4 superóxido dismutasas de hierro. La superóxido dismutasa de hierro A (Fe-SODA) se localiza en la mitocondria, lugar de producción endógena de superóxido. Se ha visto que la Fe-SODA se sobrexpresa en las formas parasitarias que infectan los macrófagos y que protege de la muerte celular inducida por el tratamiento con miltefosina. En este trabajo se ha clonado, expresado y purificado la Fe-SODA de Leishmania infantum con dos “etiquetas” (tags) moleculares distintas que permiten generar una versión heterodimérica para la puesta a punto de dos ensayos que permitan evaluar la eficacia de compuestos dirigidos contra la enzima. Uno de los ensayos que se ha optimizado en este trabajo ha sido un ensayo de cuantificación de la dimerización basado en la técnica ELISA usando anticuerpos contra las dos etiquetas del heterodímero, uno para pegar a la placa y el otro para evaluar el porcentaje de enzima dimérica. El segundo ensayo está dirigido a medir la actividad catalítica de la enzima. El ensayo de actividad se basa en la producción de superóxido por el sistema xantina/xantina oxidasa y en la competencia por el superóxido entre la Fe-SODA y el citocromo c, una proteína que cambia de color al reducirse por el superóxido

El cáncer es un conjunto de enfermedades genéticas multifactoriales con uno de los más elevados índices de mortalidad a nivel mundial. En consecuencia, es necesaria la búsqueda de nuevas terapias con el fin de aumentar la supervivencia. Muchas vías de transducción de señales son iniciadas a partir de la dimerización y activación de los miembros de la familia ErbB de receptores. Múltiples evidencias sostienen que dichos receptores tienen una función fundamental en la transformación y progresión tumoral. Durante el trabajo, se han estudiado los efectos biológicos de péptidos inhibidores de la dimerización, comparándolos con los efectos inducidos por los inhibidores de la actividad tirosín quinasa de los receptores en distintas líneas celulares de carcinoma de colon y carcinoma de páncreas exocrino. También se ha analizado, a partir de los niveles de fosforilación de los receptores, la capacidad de inhibir específicamente la formación de dímeros. Se ha observado que los péptidos presentan efectos antiproliferativos en los distintos modelos celulares estudiados. Algunos de ellos presentan un efecto citoestático induciendo un aumento del porcentaje de células en la fase G1 acompañado de la reducción de las fases S y G2/M. Otros, muestran un efecto citotóxico aumentando la fase Sub-G1, indicativa de muerte celular. Por otro lado, los resultados parecen indicar que los péptidos inhiben específicamente los niveles de fosforilación de los receptores ErbB. Cancer is a multifactorial genetic disease showing one of the highest mortality index worldwide. Consequently, it is necessary searching news therapies in order to increase patient’s survival. Many signal transduction pathways are initiated through dimerization and activation of the ErbB family. Multiple evidences support that these receptors have an essential function in transformation and tumour progression. In this project we have studied the biological effects of dimerization-inhibitory peptides, comparing those effects with the effects induced by the tyrosine kinase inhibitors in different cell lines from colon carcinoma and exocrine pancreatic carcinoma. We have also analysed peptides ability for specifically inhibit dimerization determining receptor phosphorylation levels. It has been observed that the peptides show antiproliferative effects in the different cell models studied. Some of them show a cytostatic effect inducing an increase of G1 phase concomitant with the reduction of S and G2 / M phases. On the other hand, the results show a cytotoxic effect, with an increase of the Sub-G1 phase, indicative of cell death. Furthermore, the results suggest that the peptides specifically inhibit dimerization, reducing phosphorylation receptor levels.

En la presente tesis doctoral, empleando herramientas biológicas diseñadas ad-hoc, tales como receptores deficientes en unión de ligandos, acoplamiento a proteína G y localización subcelular, usadas en diseños experimentales dirigidos a estudiar la funcionalidad del homodímero 5-HT2A, se ha obtenido información acerca de la unidad funcional del dímero y la capacidad de complementación entre protómeros. A mayores, se ha caracterizado el mecanismo de acción in vitro de dos compuestos con afinidad y selectividad por el receptor 5-HT7, lo que nos ha permitido describir la inactivación irreversible de la funcionalidad del receptor por parte de estas herramientas químicas.

Trabajo de fin de máster. Curso 2012-2013. Máster Universitario en Investigación en Biología Molecular, Celular y Genética. Universitat de València. 23 páginas, 6 figuras., Laforina, una de las proteínas alteradas en la enfermedad de Lafora, presenta una estructura modular compuesta por un dominio de unión a carbohidratos y un dominio fosfatasa de especificidad dual. Aunque se ha postulado su función fisiológica como fosfatasa de carbohidratos, se ha descrito su interacción con la E3 ubicuitina ligasa malina, implicada también en la enfermedad. Esta interacción permite a laforina intervenir en la regulación de muchos otros procesos independientes de su actividad fosfatasa, como pueden ser la degradación proteica por la vía proteasomal o la autofagia. Se ha descrito que laforina es capaz de formar dímeros en función de las condiciones de oxidorreducción. Mientras que en un principio se postuló que los monómeros de laforina eran inactivos y que su dimerización podía ser necesaria para la actividad fosfatasa, más tarde se ha descrito que dicha actividad no depende de la dimerización, y que laforina se encuentra presente principalmente en forma monomérica. Ante la evidencia de que la capacidad de dimerización era dependiente de las condiciones de oxidación, estudios previos en nuestro laboratorio identificaron a la cisteína 329 como responsable mayoritaria de la dimerización de laforina. En el presente trabajo hemos confirmado la ausencia de dimerización del mutante C329S en células de mamífero, así como hemos comprobado que esta mutación no afecta a la actividad catalítica ni a la formación de un complejo funcional con malina. Hasta el momento se desconoce la posible función de los dímeros de laforina y su relación con la enfermedad, por lo que disponer de una forma mutante incapaz de dimerizar pero que conserva las propiedades bioquímicas y funcionales puede constituir una herramienta útil para analizar las implicaciones fisiológicas de la oligomerización de laforina.

Ribonucleases are promising candidates for use in anticancer therapy. There are different ways to endow an RNase with antitumor properties. Targeting the enzyme to the cell nucleus is a potential approach. PE5 is a variant of HP-RNase that it’s cytotoxic because it contains a nuclear localization signal. It has been shown that this sequence allows its interaction with α-importin. An alternative strategy to endow an RNase with cytotoxic activity is its dimerization. An HP-RNase variant, PM8, which forms a dimer through domain swapping, was produced in solution. This variant dimerized through a two-steps mechanism of domain swapping. To prove his model several variants of PM8 were produced in which the side chains of residues involved were removed. The variation of flexibility of the resulting hinge peptides and the effect of these changes on the ability of the variants to swap domains and to dimerize was determined, Les ribonucleases són potencials agents anticancerosos. Hi ha diferents camins per aconseguir que una RNasa adquireixi propietats antitumorals. La direccionalització al nucli de la cèl•lula és una opció potencial. PE5 és una variant de l’HP-RNasa que és citotòxica perquè conté una seqüència de localització nuclear. Es demostra que aquesta seqüència permet la interacció de PE5 amb la importina-α. Una estratègia alternativa per dotar una RNasa d’activitat citotòxica és l’adquisició d’estructura quaternària. Es va obtenir en solució una variant de l’HP-RNasa, PM8, la qual forma un dímer per intercanvi de dominis. Aquesta variant dimeritza a través d’un mecanisme en dues etapes. Per comprovar aquest model se’n van obtenir variants en les quals es van eliminar cadenes laterals de residus implicats. Es va determinar el canvi de flexibilitat dels pèptids xarnera resultants, així com l’efecte dels canvis en la capacitat de les variants per dimeritzar i intercanviar els dominis

Los compuestos dímeros 3-oxi-(bis)-2-propanol, 2-(2-hidroxipropoxi)-propanol y 2-oxi-(bis)-propanol fueron obtenidos de la reacción de descomposición térmica del 1,2-propanodiol, realizada a 573.15 K y a su presión de vapor, utilizando un sistema de reacción a microescala, Los dímeros resultaron ser isómeros y fueron elucidados por cromatografía gaseosa acoplada a espectrometría de masas. E stos compuestos no han sido reportados en la literatura como productos de termólisis de polioles. La cinética y el mecanismo, fueron confirmados por cálculos computacionales utilizando el método de la Teoría del Funcional Densidad, DFT. E l mecanismo propuesto transcurrió a través de un proceso concertado de una sola etapa, que pasa por un estado de transición cíclico de cuatro miembros , compatible con cálculos cinéticos y termodinámicos.

A lo largo de esta tesis se investigaron algunos de los mecanismos moleculares que modulan la actividad del receptor de glucocorticoides (GR), un factor de transcripción regulado por ligando. En primer lugar, utilizando cuatro esteroides con diferentes actividades se estudió cómo la estructura del ligando afecta la actividad transcripcional del GR. Además, mediante la técnica de Número y Brillo se demostró por primera vez, en forma directa, que el receptor es capaz de homodimerizar in vivo. Los resultados sugieren que este proceso sería independiente de la unión al ADN y a coactivadores como TIF2. En segundo lugar, se investigaron los mecanismos responsables de la inducción dependiente de glucocorticoides del gen pro‐apoptótico Bax, en células derivadas de timoma de ratón S49. Los resultados indican que el aumento transcripcional de bax no es causado por la estabilización de su ARNm, y que las primeras 6.5 kb del promotor del gen no estarían involucradas en el efecto inductor mediado por el GR. A través del uso de un glucocorticoide disociado, sugerimos que el GR induce la expresión de Bax mediante un mecanismo de transactivación. Más aún, no se descarta la posibilidad que el efecto del GR sea indirecto, es decir, induciendo la expresión de otro gen, necesario para aumentar los niveles totales de Bax. Por último, se investigaron los mecanismos involucrados en el efecto antagónico entre la melatonina (MEL) y los glucocorticoides. Nuestros hallazgos muestran que MEL no inhibe al GR en forma generalizada, sino que sólo lo hace en ciertos tipos celulares, y mediante mecanismos diferentes. Mientras que en timocitos de ratón MEL inhibe la disociación del complejo GR‐Hsp90, en células BHK inhibe la interacción del GR con el coactivador TIF2. Finalmente, presentamos evidencias que sugieren que el inhibidor farmacológico de los receptores de melatonina, el Luzindole, sería también un antagonista del receptor de glucocorticoides. The glucocorticoid receptor (GR) is a transcription factor that regulates gene expression in a ligand‐dependent fashion. This thesis explores some of the molecular mechanisms involved on GR’s activity modulation. By using four different steroid ligands with distinct glucocorticoid and antiglucocorticoid properties, we analyzed ligand structure effects on GR transcriptional modulation. In this sense, by performing Number and Brightness assays we presented for the first time direct evidence of GR homodimerization process in vivo. Results also show that this event can occur without TIF2 coactivator interaction and most likely in a ligand structure and DNA independent manner. On the other hand, we investigated the mechanisms underlying glucocorticoid‐dependent bax induction in S49 cells. Results show that glucocorticoids do not have any effect on bax mRNA stability, suggesting that GR enhances bax’s transcription rate. Moreover, at least 6.5 kb upstream of bax’s start translation site would not be involved on the glucocorticoid‐dependent induction. Results derived from the use of a selective glucocorticoid suggest that GR induces bax expression through a transactivation mechanism. Moreover, we can’t rule out that GR could regulate bax levels through an indirect mechanism involving the expression of another factor. Finally, we studied the molecular mechanisms underlying melatonin (MEL) modulation on the glucocorticoid pathway. Our results show that MEL is not a generalized‐cell type glucocorticoid antagonist. We found that MEL modulates GR response only in a subset of cells, in a cell‐type specific molecular mode of action. In thymocytes, it inhibits GR action by blocking the dissociation of the 90‐kDa heat shock protein; while in BHK cells MEL reduces GR‐TIF2 interaction. Lastly, we also present evidences suggesting that melatonin receptor inhibitor Luzindole is also an antagonist of the glucocorticoid receptor pathway. Fil: Presman, Diego Martín. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

Dimerisation of isoamylenes coming from a pentane catalytic dehydrogenation process is an option to transform these branched olefins into unsaturated compounds of ten carbons (diisoamylenes). Dimers derivatives have a wide range of industrial applications. The present research sets the basis for the development of a feasible process of branched pentene dimerisation using fluorinated alumina as catalyst. Experimental tests were carried out in a packed bed reactor. 2-methyl-2-butene was used as model reactant. The effluent composition was followed by gas chromatography and mass spectroscopy. Solid characterization was done by means of surface area, total acidity, elemental and thermogravimetric analysis.

14 p.-5 fig.-5 tab., [Background] The human pregnane X receptor (hPXR) is an orphan nuclear receptor that induces transcription of response elements present in steroid-inducible cytochrome P-450 gene promoters. This activation requires the participation of retinoid X receptors (RXRs), needed partners of hPXR to form heterodimers. We have investigated the expression of hPXR and RXRs in normal, premalignant, and malignant breast tissues, in order to determine whether their expression profile in localized infiltrative breast cancer is associated with an increased risk of recurrent disease., [Methods] Breast samples from 99 patients including benign breast diseases, in situ and infiltrative carcinomas were processed for immunohistochemistry and Western-blot analysis., [Results] Cancer cells from patients that developed recurrent disease showed a high cytoplasmic location of both hPXR isoforms. Only the infiltrative carcinomas that relapsed before 48 months showed nuclear location of hPXR isoform 2. This location was associated with the nuclear immunoexpression of RXR-alpha., [Conclusions] Breast cancer cells can express both variants 1 and 2 of hPXR. Infiltrative carcinomas that recurred showed a nuclear location of both hPXR and RXR-alpha; therefore, the overexpression and the subcellular location changes of hPXR could be considered as a potential new prognostic indicator.

Journal Article; Research Support, Non-U.S. Gov't; The transcription factor Aiolos (also known as IKZF3), a member of the Ikaros family of zinc-finger proteins, plays an important role in the control of B lymphocyte differentiation and proliferation. Previously, multiple isoforms of Ikaros family members arising from differential splicing have been described and we now report a number of novel isoforms of Aiolos. It has been demonstrated that full-length Ikaros family isoforms localize to heterochromatin and that they can associate with complexes containing histone deacetylase (HDAC). In this study, for the first time we directly investigate the cellular localization of various Aiolos isoforms, their ability to heterodimerize with Ikaros and associate with HDAC-containing complexes, and the effects on histone modification and binding to putative targets. Our work demonstrates that the cellular activities of Aiolos isoforms are dependent on combinations of various functional domains arising from the differential splicing of mRNA transcripts. These data support the general principle that the function of an individual protein is modulated through alternative splicing, and highlight a number of potential implications for Aiolos in normal and aberrant lymphocyte function. Yes

En aquesta tesi s'ha caracteritzat la ruta d'internalització de l'onconasa, una RNasa citotòxica. Els resultats indiquen que l'onconasa entra a les cèl·lules per la via dependent de clatrina i del complex AP-2. Seguidament es dirigeix als endosomes de reciclatge i es a través d'aquesta ruta que la proteïna exerceix la citotoxicitat. Per altra banda, els resultats d'aquest treball demostren que PE5, una variant citotòxica de la ribonucleasa pancreàtica humana (HP-RNasa), interacciona amb la importina  mitjançant diferents residus que tot i que no són seqüencials, es troben propers en l'estructura tridimensional d'aquesta proteïna. PM8 és una HP-RNasa amb estructura cristal·logràfica dimèrica constituïda per intercanvi de dominis N-terminals. En aquesta tesi s'han establert les condicions per estabilitzar aquest dimer en solució i també es proposa un mecanisme per la dimerització., In this thesis it has been characterized the internalization pathway of onconase, which is a cytotoxic ribonuclease. The results show that onconase enters cells using AP-2/clathrin mediated pathway and then is routed to the recycling endosomes. In addition, the results show that this is the route used by onconase to perform its cytotoxicity. On the other hand, the results indicate that PE5, a cytotoxic human pancreatic ribonuclease (HP-RNase), interacts with importin α using different residues that although they are scattered along the sequence, they are close in the three-dimensional structure of the protein. PM8 constitutes a crystallographic dimer by the exchange of the N-terminal domains. In this thesis it has been investigated the solution conditions that favour the dimeric form and it is proposed a dimerization process of this variant. Finally, the pattern of substrate cleavage is studied by HP-RNase.

210 páginas, 34 figuras, 31 tablas, esquemas. El presente trabajo está incluido dentro del Programa de Doctorado interdepartamental "Estudios Avanzados en Alimentos". Coordinador del Programa Dr. Fernando Romero Guzmán., En el presente trabajo se han diseñado nuevos procesos de dimerización de la D-fructosa con objeto de favorecer la formación de DAFs. En concreto, se han explotado el uso de zeolitas y resinas de intercambio iónico como catalizadores ácidos heterogéneos para llevar a cabo esta transformación. Un requisito importante para lograr este objetivo ha sido el disponer de metodologías sintéticas para la preparación de patrones de DAFs puros, así como de técnicas analíticas para su identificación y cuantificación. Para lo primero, se ha desarrollado un nuevo método basado en la activación selectiva de derivados acetonados de la D-fructosa, usando diferentes promotores capaces de provocar la rotura del grupo protecto acetal implicando el carbono anomérico y de catalizar la glicosilación y la posterior espirocetalización de una manera secuencial. Además, el uso de diferentes grupos protectores y la introducción de espaciadores rígidos nos ha permitido controlar el curso estereoquímico de la formación de DAFs. Como técnicas analíticas se han usado la resonancia magnética nuclear y la cromatografía de gases. También se ha explorado la posibilidad de utilizar zeolitas como soporte para la purificación de DAFs a partir de mezclas que los contienen, aprovechando las propiedades de adsorción selectivas de estos materiales., Institut für Technologie der Kohlenhydrate e. V.

In this issue of Chemistry & Biology, Grossman et al. report a study on aldosterone-dependent nuclear translocation of the mineralocorticoid receptor (MR). They analyze the dependency of MR retrotransport, DNA-binding, and transcriptional activity on Hsp90 and demonstrate that MR dimerization is a nuclear event. Fil: Galigniana, Mario Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina