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Vaginose Bacteriana (VB) é uma síndrome polimicrobiana, caracterizada pelo desequilíbrio da microbiota vaginal, associada à substituição da população bacteriana vaginal predominantemente aeróbia (Lactobacillus spp.) por uma população anaeróbia (principalmente Gardnerella vaginalis), gerando descarga vaginal anormal em mulheres em idade reprodutiva. Este trabalho tem como objetivo determinar a presença de VB entre as pacientes atendidas nos serviços de ginecologia da rede pública (SUS) e rede privada (RP), de Juiz de Fora, MG, utilizando o escore de Nugent, e estabelecer a validade e a confiabilidade do encontro de clue-cells como indicador da presença da síndrome, correlacionando aos resultados obtidos no exame preventivo (Papanicolaou). Amostras de secreção vaginal foram coletadas e processadas para isolamento seletivo. A presença de VB foi determinada por meio do escore de Nugent. A concordância entre a presença de clue-cells e o resultado positivo de Papanicolaou foi de 75,0% na RP e 57,1% no SUS. Os dados sugerem que a bacterioscopia pelo método de Gram pode ser uma técnica incorporada aos critérios diagnósticos de forma complementar ao Papanicolaou, auxiliando e agilizando o diagnóstico de VB.

FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais A microbiota intestinal humana (MIH) apresenta grande densidade e diversidade de microrganismos, desempenhando importantes funções, como fornecimento de energia, de nutrientes e modulação imunológica, sendo que seu desequilíbrio pode estar relacionado a diversas patologias. Um dos fatores que mais influenciam na formação da MIH são os hábitos alimentares, que poderiam ser utilizados de forma a modular a relação entre hospedeiro e MIH, abrindo caminho para possíveis intervenções terapêuticas, a fim de prevenir e controlar doenças. O presente estudo teve como objetivo avaliar a estrutura de comunidades bacterianas em indivíduos saudáveis com diferentes hábitos alimentares e correlacionar com suas características nutricionais. Voluntários vegetarianos estritos (n=19), ovolactovegetarianos (n=20) e onívoros (n=19) foram submetidos à avaliação antropométrica e de consumo alimentar, além da coleta de amostras fecais, que foram analisadas através de cultivo em meios de cultura seletivos e de quantificação relativa por PCR em tempo real. As culturas com crescimento viável de bactérias foram submetidas à contagem de UFC e avaliação de morfotipos. Na análise quantitativa por PCR em tempo real, foram avaliados os grupos bacterianos Firmicutes, Bacteroidetes, γ-Proteobacteria e Lactobacillus. A dieta de indivíduos vegetarianos estritos exibiu maior consumo de carboidratos e fibras e menor consumo de proteínas e lipídeos. O alto consumo de proteínas de origem animal e de lipídeos pode estar relacionado ao aumento da abundância de bactérias Gram negativas potencialmente patogênicas na MIH. Do ponto de vista qualitativo, não foi possível um agrupamento por similaridade desses voluntários, o que sugere que os diferentes hábitos alimentares, numa visão geral, não seriam suficientes para gerar diferenças qualitativas na composição da MIH. Entretanto, houve a formação de um core bacteriano compartilhado entre os grupos, que poderia estar relacionado ao consumo de vegetais in natura ou minimamente processados. Portanto, diferenças nos consumos de macronutrientes, bem como nos tipos e formas dos alimentos ingeridos, exercem grande responsabilidade sobre a abundância dos microrganismos na MIH. The human gut microbiota (MIH) has a high density and diversity of microorganisms, performing important functions, such as energy and nutrient supply and immune modulation, and its imbalance is related to several pathologies. MIH regulation is closely related to eating habits, which could be used to modulate the relationship between host and MIH, representing a possible path for therapeutic interventions to prevent and control diseases. Therefore, the present study aimed to evaluate the structure of bacterial communities in healthy individuals with different eating habits and to correlate with their nutritional characteristics. Strict vegetarian volunteers (n=19), lacto-ovo-vegetarians (n=20) and omnivores (n=19) were submitted to nutritional and anthropometric assessment and fecal samples were collected and analyzed by cultivation in selective culture mediaand real-time PCR. Cultures with viable bacterial growth were submitted to CFU counting and morphotype evaluation. In the real-time PCR analysis, the Firmicutes, Bacteroidetes, γ-Proteobacteria and Lactobacillus bacterial groups were evaluated. The diet of strict vegetarians exhibited higher consumption of carbohydrates and fiber and lower consumption of proteins and lipids. The high consumption of animal-derived proteins and lipids seems to be related to the increased abundance of potentially pathogenic Gram-negative bacteria in MIH. A qualitative grouping by similarity of these volunteers was not possible, which suggests that the different eating habits, in general, would not be enough to cause qualitative differences in the composition of the MIH. However, a bacterial core in common to the three groups was formed, which could be related to the consumption of fresh or minimally processed vegetables. Therefore, different macronutrient intake, as well as types and forms of food consumption, play a major role in microorganisms abundance in MIH.

CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior A obesidade materna e o consumo de dietas ricas em gordura aumentam o risco de diversas complicações na prole, incluindo o desenvolvimento de asma em qualquer idade, por mecanismos não totalmente esclarecidos. A concomitância de ambas as doenças promove fenótipos distintos, os quais podem ser caracterizados por um fenótipo Th2 agravado e eosinofilia, ou até mesmo uma mistura de respostas Th1 e Th2 na infância. Enquanto na fase adulta, ocorre um aumento da resposta de perfil Th17 e inflamação neutrofílica. Independentemente do perfil, na maioria dos casos, os sintomas são exacerbados e resistentes ao tratamento com corticosteroides. A obesidade e dietas obesogênicas maternas podem ainda influenciar na colonização da progênie, favorecendo a formação de uma microbiota intestinal prejudicial. Porém, ainda não há estudos que avaliem o impacto da dieta materna na composição da microbiota pulmonar da prole. O objetivo deste estudo foi explorar as modificações imunológicas pelas quais a dieta materna pode afetar o risco de asma e/ou agravar seus sintomas, bem como, modificar a colonização pulmonar. Para isso, matrizes de camundongos BALB/c alimentadas com dieta (HFD) ou padrão (SD) por 8 semanas foram acasaladas e sua prole foi utilizada no experimento. A asma foi induzida por sensibilização à Ovalbumina no 7º e 14º dias de vida, seguida de três desafios intranasais no 21º-23º dias, os camundongos foram eutanasiados no 24º dia. Os animais foram pesados, pulmão, cólon, baço, linfonodos e medula óssea foram coletados para análise histológica e imunofenotipagem. Uma análise preliminar da microbiota pulmonar foi realizada por Rep-PCR. O sangue foi coletado para análise metabólica e dos níveis de anticorpos antígenos-específicos. Os resultados demonstraram que as matrizes HFD não apresentaram ganho de peso significativo, porém houve um aumento nos níveis de leptina e colesterol LDL. Ao avaliar os efeitos da dieta materna na prole independentemente do estado de asma, os filhotes de fêmeas HFD apresentaram maior massa corporal, maiores níveis de glicose, menores níveis de colesterol HDL e maior expressão de CD86 e PDL1 em células pulmonares e esplênicas. Houve uma maior expressão de GATA3 no baço e pulmão. Já o RORγT apresentou uma expressão aumentada no baço, porém reduzida nos linfonodos mediastinais e no pulmão, quando comparados aos filhotes de matrizes SD. A dieta hiperlipídica materna também diminuiu a expressão de CD80 em células dendríticas derivadas da medula óssea estimuladas com LPS e aumentou a expressão de PDL1 nas mesmas células não estimuladas. Após a indução da asma, os filhotes asmáticos de mães HFD apresentaram maior contagem de eosinófilos e mastócitos no tecido pulmonar, maiores títulos de IgG2a e menores títulos de IgG1 e IgE, em comparação com filhotes asmáticos de matrizes SD. Além disso, a asma causou impacto mais significativo na composição bacteriana do pulmão quando comparado com a dieta materna. Em conjunto, os resultados demonstram que o consumo de uma dieta rica em gorduras antes e durante período gestacional pode afetar a resposta imune da prole, um efeito mediado em parte por ativação inadequada de células dendríticas, o que ocorreu antes mesmo da indução da asma. Esse evento pode contribuir para o aumento da inflamação eosinofílica, porém uma redução na atopia. Maternal obesity and the consumption of high-fat diets increase the risk of several complications in the offspring, including the development of asthma at any age, through mechanisms that are not fully understood. The concomitance of both diseases promotes distinct phenotypes, which can be characterized by an aggravated Th2 phenotype and eosinophilia, or even a mixture of Th1 and Th2 responses in childhood. While in adulthood, there is an increase in the Th17 profile response and neutrophilic inflammation. Regardless of the profile, in most cases, symptoms are exacerbated and resistant to corticosteroid treatment. Obesity and maternal obesogenic diets can also influence the colonization of the progeny, favoring the formation of a harmful intestinal microbiota. However, there are still no studies that evaluate the impact of maternal diet on the composition of the lung microbiota of the offspring. The aim of this study was to explore the immunological modifications by which maternal diet may affect asthma risk and/or worsen asthma symptoms, as well as modify lung colonization. For this, matrices of BALB/c mice fed with diet (HFD) or standard (SD) for 8 weeks were mated and their offspring were used in the experiment. Asthma was induced by sensitization to Ovalbumin on the 7th and 14th days of life, followed by three intranasal challenges on the 21st-23rd days, the mice were euthanized on the 24th day. The animals were weighed, lung, colon, spleen, lymph nodes and bone marrow were collected for histological analysis and immunophenotyping. A preliminary analysis of the lung microbiota was performed by Rep-PCR. Blood was collected for metabolic analysis and dosage of antigen-specific antibody levels. The results showed that the HFD dams did not show significant weight gain, but there was an increase in leptin and LDL cholesterol levels. When evaluating the effects of maternal diet on offspring regardless of asthma status, offspring of HFD females had higher body mass, higher glucose levels, lower HDL cholesterol levels and higher expression of CD86 and PDL1 in lung and splenic cells. There was an increased expression of GATA3 in the spleen and lung. On the other hand, RORγT showed an increased expression in the spleen, but reduced in the mediastinal lymph nodes and in the lung, when compared to offspring from SD dams. The maternal high-fat diet also decreased CD80 expression on LPSstimulated bone marrow-derived dendritic cells and increased PDL1 expression on the same unstimulated cells. After asthma induction, asthmatic pups from HFD dams had higher eosinophil and mast cell counts in lung tissue, higher IgG2a titers, and lower IgG1 and IgE titers compared to asthmatic pups from SD dams. In addition, asthma had a more significant impact on lung bacterial composition when compared to maternal diet. Taken together, the results demonstrate that consumption of a high-fat diet before and during pregnancy can affect the immune response of the offspring, an effect mediated in part by inappropriate activation of dendritic cells, which occurred even before the induction of asthma. This event may contribute to an increase in eosinophilic inflammation, but a reduction in atopy.

CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais As atividades humanas têm exercido intensa pressão seletiva nas comunidades microbianas na natureza, o que tem resultado em diferentes níveis de modulação dos diferentes ecossistemas microbianos. Dentre estas atividades, o uso de xenobióticos na produção de alimentos, bem como hábitos alimentares humanos figuram como forças expressivas que contribuem para o fenômeno da resistência bacteriana aos antimicrobianos. É reconhecido o fluxo genético horizontal entre microbiota exógena e microbiota intestinal humana (MIH), tendo os alimentos um importante papel na veiculação microbiana neste contexto. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar aspectos da resistência clínica da MIH entre indivíduos saudáveis com diferentes hábitos alimentares. Três grupos de voluntários com hábitos alimentares diferentes, onívoros (ON), ovolactovegetarianos (VT) e vegetarianos estritos (VG), foram submetidos à avaliação nutricional e antropométrica. A partir do DNA metagenômico obtido de amostras fecais destes indivíduos, foi avaliada, por PCR convencional, a ocorrência de 37 determinantes genéticos relacionados à resistência aos antimicrobianos de importância médica humana, para caracterização do resistoma clínico. A correlação entre os diferentes hábitos alimentares e a ocorrência de genes de resistência aos antimicrobianos (ARG) foi avaliada. Um total de 19 ON, 20 VT e 19 VG foram analisados. Não houve diferenças significativas na ingestão calórica média entre os grupos. A ingestão média de proteína foi significativamente maior em ON e o consumo de fibras e carboidratos foi maior em VG. Dos ARG pesquisados, 22 foram detectados. Nenhuma relação clara entre dietas e ocorrência de ARG foi observada. Os genes de resistência às tetraciclinas, β-lactâmicos e grupo MLS (macrolídeos, lincosamidas e estreptograminas) foram os mais frequentes, seguidos pelos genes de resistência às sulfonamidas e aminoglicosídeos. Vegetais e alimentos minimamente processados parecem ser a principal fonte de ARG para a MIH. Embora os hábitos alimentares variem entre os indivíduos, o ambiente e a ampla distribuição de ARG a partir de diferentes atividades humanas chamam atenção para a complexidade do fenômeno de resistência bacteriana aos antimicrobianos e a necessidade de seu manejo no contexto de Saúde Única. Human activities have exerted an intense selective pressure on microbial communities in nature, which has resulted in different levels of modulation of different microbial ecosystems. Among these activities, the use of xenobiotics in food production, as well as human eating habits, act as an expressive force that contribute to the antimicrobial resistance phenomenon. The horizontal genetic flux between exogenous microbiota and intestinal microbiota is recognized, with food having an important role in microbial transmission in this context. Thus, the objective of this study was to evaluate aspects of the clinical resistance of the human intestinal microbiota among healthy individuals with different eating habits. Three groups of volunteers with different eating habits, omnivorous (ON), ovolactovegetarians (VT) and strict vegetarians (VG), were submitted to nutritional and anthropometric assessment. From the metagenomic DNA obtained from fecal samples of these individuals, the occurrence of 37 genetic markers related to resistance to antimicrobials of human medical importance was evaluated by conventional PCR for the characterization of clinical resistome. The correlation between different eating habits and the occurrence of antimicrobial resistance genes (ARG) was assessed. A total of 19 ON, 20 VT and 19 VG were analyzed. There were no significant differences in the mean caloric intake between the groups. Mean protein intake was significantly higher in ON group and fiber and carbohydrate consumption was higher in VG group. From the screened ARG, 22 were detected. No clear relationship between diets and occurrence of ARG was observed. Resistance genes against tetracyclines, β-lactams and MLS group (macrolides, lincosamides and streptogramins) were the most frequent, followed by resistance genes against sulfonamides and aminoglycosides. Vegetables and minimally processed foods seem to be the main source of ARG for human gut microbiota. Although the eating habits vary among the individuals, the open environment and the widespread ARG from different human activities draws attention to the complexity of the antimicrobial resistance phenomenon and the need for its handling in the One Health context