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Los cítricos sufren numerosas enfermedades causadas por agentes abióticos y bióticos, que limitan su rendimiento y a veces las posibilidades de cultivo. Las enfermedades de origen biótico incluyen las causadas por nematodos, hongos, bacterias, micoplasmas, fitoplasmas, virus y viroides, más un amplio número de enfermedades a las que se atribuye origen viral, pero cuya etiología aún no ha podido ser establecida. La mayoría de estos patógenos, en particular los virus, viroides, micoplasmas, fitoplasmas y algunas bacterias, están estrechamente asociadas al material vegetal y se dispersan con éste al propagar yemas infectadas. Algunos de ellos también se dispersan por medio de vectores, generalmente insectos. Las enfermedades de origen abiótico están normalmente ligadas a las condiciones climáticas y edafológicas en que se desarrolla el cultivo y su incidencia e importancia económica varía mucho de unas zonas a otras. A su vez, la incidencia e importancia de las enfermedades de origen biótico varía mucho de unas zonas a otras en función de las variedades cultivadas, del control sanitario que se ejerce sobre el material propagativo, las poblaciones de vectores o las condiciones ambientales. Por ello, el cuadro de enfermedades que afectan el cultivo en cada zona citrícola y la importancia relativa de las mismas es muy variable. La revisión de enfermedades de los cítricos efectuada en este libro dista de ser exhaustiva y el tratamiento que se ha dado a las distintas enfermedades se ha hecho fundamentalmente desde la óptica de las condiciones españolas y de la cuenca del Mediterráneo en general. Se han incluido capítulos en los que se describen e ilustran enfermedades que aún no se han detectado en esta zona (vg: la clorosis variegada, el huanglongbing, o las escobas de bruja de la lima), considerando su importancia económica en otras zonas citrícolas, así como la posibilidad de que en el futuro pudieran introducirse en el área mediterránea. Para prevenir esta posibilidad se ha insistido en diversos capítulos del libro sobre la importancia de los sistemas de cuarentena para evitar la introducción de nuevas enfermedades. No obstante, el tratamiento de las enfermedades ausentes de la zona mediterránea ha sido en general más breve. Este libro va dirigido fundamentalmente a investigadores no especialistas en cítricos, técnicos de explotaciones y servicios de extensión agraria, estudiantes y agricultores cualificados. Por ello, aunque en el tratamiento de las distintas enfermedades se han tenido en cuenta los avances más recientes en el conocimiento sobre cada una de ellas, se ha procurado utilizar un lenguaje sencillo y directo, reduciendo en lo posible los tecnicismos. Para facilitar la comprensión de algunos apartados por los lectores no familiarizados con la patología vegetal, se ha incluido un glosario con términos utilizados en el libro, que son poco frecuentes en el lenguaje común. La definición de estos términos se ha adaptado en general a su significado en el contexto del libro. Los editores científicos mostramos nuestro agradecimiento al profesor Fernando García-Arenal, de la Universidad Politécnica de Madrid, por su cuidadosa revisión del glosario y su ayuda para hacer unas definiciones simples y precisas. Un elemento fundamental para los objetivos divulgadores de este libro son las fotografías de síntomas. En cada caso se ha intentado seleccionar aquellos síntomas que mejor caracterizan la enfermedad, buscando un equilibrio entre la importancia de la misma en términos de incidencia y daños causados y la lógica limitación en el número de fotografías a incluir. De nuevo los editores científicos queremos expresar nuestro reconocimiento y gratitud a aquellos investigadores y técnicos que, sin ser autores de algún capítulo, han colaborado en este libro cediendo desinteresadamente fotografías de su archivo para ilustrar algunos de los síntomas descritos. En particular, a AA. Seif (Kenia), M. Koizumi (Japón), S. Garrán (Argentina), C.N. Roistacher (California, EEUU), S.M. Garnsey (Florida, EEUU) Y J. Juárez, J A, Pina, J.M. del Rivero y J. Navas-Castillo (España). Finalmente, expresamos nuestro agradecimiento a los autores de los distintos capítulos por el esfuerzo de síntesis y clarificación realizado y esperamos que éste sea de utilidad para técnicos y profesionales de la citricultura.

The terms "Gum pocket", "wood pitting" and "gummy pitting" have been used to describe a characteristic disorder of trifoliate orange. Affected trees show gum pockets, which develop only in the bark and wood of the trifoliate orange rootstock. This disorder has been reported in Argentina, South Africa, Australia and Italy. The association of the disease with a viroid-like RNA with the electrophoretic mobility of CVd-III was recently demonstrated. Viroid infected clementine trees grafted on trifoliate orange were monitored for the presence of gum pockets and malformations of the bud union. Trees showing gum pocket symptoms were identified in all the viroid-infected treatments as well as in some uninoculated controls. The presence of symptoms was more frequently observed (50% and 54%) on trees infected with CVd-I and CVd-IlI respectively, than in the other treatments. The symptoms appeared to be associated with trees showing a shouldered stock overgrowth. No symptoms were observed on seedlings of trifoliate orange infected with the same viroid sources. These observations suggest that gum pocket symptoms may be of physiological or stress origin. The observations made on viroid infected trees maintained for at least ten years in field trials indicate that viroid infection may act simply by enhancing the development of non specific symptoms.

Los especies de cítricos y géneros afines pertenecen a la familia Rutaceae. Los cítricos son huéspedes naturales de siete viroides, pero solamente Citrus exocortis viroid (CEVd) y variantes específicas de Hop stunt viroid (HSVd) causan patologías (exocortis y cachexia, respectivamente) en especies sensibles. La mayoría de los cítricos son tolerantes a las infecciones viroidales salvo algunas especies que son sensibles y manifiestan síntomas. En variedades comerciales infectadas, es frecuente encontrar los viroides como infecciones múltiples. El objetivo de este trabajo es estudiar la respuesta de distintos genotipos de cítricos a la infección con viroides. Se ha caracterizado un aislado de campo que contenía CEVd (clase A), HSVd (variante no patogénica), CBLVd (variante tipo CVd-Ia) y CDVd (variantes de tipos CVd-IIIa y CVd-IIIb), y se ha estudiado su efecto en el comportamiento de árboles de naranjo dulce 'Navelina' y clementino 'Nules', ambos injertados sobre citrange Carrizo y mantenidos en condiciones de campo durante 10 años. Los árboles de ambos cultivares alcanzaron un tamaño inferior y su cosecha fue menor que la de los controles no inoculados. Las características de los frutos también resultaron afectadas: (i) Los frutos de naranjos infectados presentaban un tamaño, índice de madurez y contenido en zumo superiores a los de los controles no infectados; (ii) los frutos de clementinos infectados presentaban un tamaño y relación diámetro/altura mayores que los de los controles no infectados; (iii) En ambos cultivares, la densidad, contenido en sólidos solubles y acidez del zumo eran inferiores a los de los controles no infectados. Los árboles infectados tenían un sistema radicular poco desarrollado y mediante histología se demostró que sus raicillas contenían menos amiloplastos que las de los controles no inoculados., Bani Hashemian, SM. (2009). RESPUESTA DE DISTINTOS GENOTIPOS DE CÍTRICOS Y GÉNEROS AFINES A LA INFECCIÓN CON VIROIDES [Tesis doctoral no publicada]. Universitat Politècnica de València. doi:10.4995/Thesis/10251/6283.

Preliminary surveys of citrus field trees in Croatia showed their unsatisfactory sanitary status especially with regard to the presence of Citrus tristeza virus (CTV) even though symptoms in the field are mostly absent. The highest CTV incidence was recorded in the Satsuma mandarin (Citrus unshiu Marc), commercially the most important citrus in the country. The Satsuma collection orchard was founded in the year 2005 at the Institute for Adriatic Crops and Karst Reclamation. It encompasses 12 mandarin cultivars and 51 Satsuma clones from different sources. With the aim of assessing the phytosanitary status of Satsuma collection, biological indexing of all 12 cultivars for principal virus and virus-like diseases was performed. Seven citrus bioindicators were used ; Mexican lime, Madame Vinous and Pineapple sweet oranges, Sicilian sour orange, CRC grapefruit, Troyer and Carrizo citranges. Herbaceous hosts (white sesame, red kidney bean and Chenopodium quinoa) were also used for cool-climate pathogen detection. Serological tests (ELISA and DTBIA) were performed for CTV and Citrus psorosis virus (CPsV) directly on 18 representative clones and on Mexican lime and Madame Vinous indicators. CPsV was not detected by serology while only 2 clones were CTV-negative, both in biological and laboratory tests. Furthermore, the most severe CTV strains displaying stem-pitting and seedling yellows in grapefruit and sweet oranges were found in 4 tested clones. No biological indication of other disease presence in the collection has been found so far. Further testing of the collection Satsumas is under way, as well as the sanitation of the most important cultivars.

Los cítricos son huéspedes naturales de diferentes especies de viroides, todos pertenecientes a la familia Pospiviroidae. Estudios preliminares para detectar viroides en especies y variedades comerciales dieron resultados erráticos, excepto cuando se utilizaba la especie indicadora cidro Etrog como huésped bioamplificador. Para evitar el uso de este huésped en los ensayos de detección, se desarrolló un método basado en la hibridación northern. El protocolo desarrollado consistía en: (i) extracción de ácidos nucleicos de muestras de corteza recolectadas en diferentes épocas y/o almacenadas en distintas condiciones; (ii) separación de los RNAs en 5% PAGE o 1% agarosa y transferencia a membranas; (iii) hibridación con sondas de DNA marcadas con digoxigenina (DIG) específicas para cada viroide, detección con un anticuerpo anti-DIG conjugado con fosfatasa alcalina y revelado con un substrato quimioluminiscente (CSPD). Con este método se pueden detectar viroides en todas las especies de cítricos ensayadas. La técnica es extremadamente sensible, y acorta el tiempo necesario para la detección fiable de los viroides de cítricos conocidos hasta el momento. La aplicación de esta técnica ha permitido realizar prospecciones en árboles cultivados en distintas regiones citrícolas de Colombia, Perú y Brasil. En limas Tahití de Colombia se han identificado infecciones múltiples con HSVd y CDVd o con CEVd, HSVd y CDVd. Las muestras procedentes del Banco de Germoplasma de Palmira estaban libres de viroides, excepto una fuente de cidro Etrog que estaba infectada con CEVd y CDVd., Murcia Riaño, N. (2009). DETECCIÓN Y CARACTERIZACIÓN AGRONÓMICA DE VIROIDES DE CÍTRICOS. IDENTIFICACIÓN Y CARACTERIZACIÓN MOLECULAR Y BIOLOGÍCA DE VARIANTES DEL VIROIDE DEL ENANISMO DE LOS CÍTRICOS CDVd [Tesis doctoral no publicada]. Universitat Politècnica de València. doi:10.4995/Thesis/10251/6343.

Estudios realizados en Atalantia citroides, un género afín de los cítricos, mostraron que estaba infectada con un viroide no descrito hasta el momento. Este nuevo viroide tiene un genoma de 293-294 nucleótidos con una alta proporción de bases GC, una región central conservada que es característica de los miembros del género Apscaviroid, y también la región terminal conservada que tienen este y otros géneros de la familia Pospiviroidae. La estructura secundaria de mínima energía libre predicha para este nuevo viroide es una conformación en forma de varilla con un 68.7% de nucleótidos apareados y con una identidad de secuencia respecto a los otros viroides inferior al 90%, que es el límite convenido para separar las diferentes especies de viroides dentro de un mismo género. Los ensayos de infectividad utilizando el cidro Etrog han mostrado que este nuevo viroide produce síntomas característicos suaves. La co-inoculació de este nuevo viroide con Citrus bent leaf viroid o con Citrus dwarfing viroid, que también son miembros del género Apscaviroid, causa interacciones sinérgicas que se manifiestan induciendo síntomas muy pronunciados en las hojas y un enanismo muy marcado. Este aumento en la intensidad de síntomas no está acompañado por variaciones en la acumulación del viroide en la planta ya que su concentración se mantiene inalterada en plantas co-inoculadas. De acuerdo con estas propiedades moleculares y biológicas, así como por su capacidad por replicarse en A. citroides, este nuevo viroide que tentativamente hemos nombrado Citrus viroid V (CVd-V), ha sido propuesto como una nueva especie del género Apscaviroid.El análisis de 64 muestras provenientes de varias zonas citrícolas ha mostrado que CVd-V está presente en los Estados Unidos, España Nepal, y el Sultanato de Oman. Estos resultados indican que este viroide no ha surgido recientemente y está bastante difundido por diferentes partes del mundo. Los ensayos de transmisión a naranjo, mandarino, híb, Serra Alfonso, P. (2009). Estudios de Patogenicidad de Viroides del Género Apscaviroide y Hostuviroide en cítricos [Tesis doctoral no publicada]. Universitat Politècnica de València. doi:10.4995/Thesis/10251/6028.

About 30 citrus field samples (Satsuma mandarins, oranges, lemons) were collected from different orchards in the Croatian coastal region (Dalmatia), including one remote island. The majority of these trees was grafted on Poncirus trifoliata and displayed no symptoms of Citrus tristeza virus (CTV) infection. However, about 50% of tested trees were found CTV infected. The genetic variability and population structure of CTV from these samples were studied by single-strand conformation polymorphism (SSCP) and sequence analysis of the cloned coat protein (p25) and RNA-binding protein (p23) genes. In the majority of isolates, CTV populations consisted of a swarm of genomic variants with the one being predominant. Surprisingly, the results of phylogenetic analysis, corroborated by a biological characterization, showed that both CP and p23 sequences clustered into five out of seven phylogenetic groups defined by Zemzami et al. (Proc. 15th IOCV, 8-12, 2002). Three of these phylogenetic groups harbor sequences of severe quick decline, seedling yellows and stem pitting isolates. It has been generally believed that some of these strains do not exist in the Mediterranean region, or if found, they are immediately eradicated. It is possible that these CTV strains were introduced into the country with the infected Satsuma material 40-20 years ago and has been continuously spreading by grafting. We also found evidence of mixed infections and recombination events in our isolates. High genetic diversity of Croatian CTV isolates and their potential for further diversification should not be overlooked in the CTV epidemiological studies of the Mediterranean basin.