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Los incidentalomas suprarrenales (IS) son uno de los motivos de consulta más frecuentes en Endocrinología. En todo paciente con un IS de nuevo diagnóstico se deben valorar dos aspectos fundamentales: a) su naturaleza benigna o maligna y b) su funcionalidad. Sin embargo, a pesar de que la secreción autónoma de cortisol (SAC) está presente en hasta un 50% de los IS y se asocia a un aumento de la morbimortalidad, las pruebas hormonales de las que disponemos en la actualidad para establecer su diagnóstico presentan múltiples limitaciones. Por otra parte, incluso en IS aparentemente no funcionantes se ha observado un mayor riesgo cardio-metabólico y de mortalidad que en la población general. Este mayor riesgo podría estar justificado por la presencia de alteraciones incipientes en el metabolismo del cortisol no detectadas con las pruebas clásicas y que, con el tiempo, pueden progresar hasta hacerse detectables. Esto conlleva la necesidad de reevaluar periódicamente la capacidad autónoma para secretar cortisol en los pacientes con IS no funcionantes (ISNF). Por tanto, sería deseable identificar marcadores que permitan determinar, de forma más precoz y precisa, alteraciones en la secreción de cortisol que puedan tener una posible repercusión cardio-metabólica y/o marcadores clínicos, radiológicos y/o bioquímicos asociados a un mayor riesgo de desarrollar SAC en pacientes con ISNF. En nuestro estudio hemos encontrado que ciertas características clínicas, bioquímicas y radiológicas permiten estratificar el riesgo de desarrollar SAC en ISNF. Encontramos que el mejor modelo predictivo de desarrollo de SAC a lo largo del seguimiento combinó las variables edad, nivel de cortisol sérico tras el test de supresión con 1 mg de dexametasona (TSD) y la bilateralidad de los IS en el momento del diagnóstico. Los pacientes con ISNF con el riesgo más bajo de desarrollar SAC a lo largo del seguimiento fueron aquellos de menos de 50 años con valores de cortisol post-TSD

Adipose tissue is a dynamic organ that contributes to maintain whole-body metabolic status. Three major types of adipose tissue/cells, white, brown, and beige, can be found. All of them become dysfunctional in obesity and in aging, with brown and beige showing a declined activity. Importantly, both obesity and aging are associated to a chronic, low-grade inflammation that underlies the adipose tissue dysfunction and the development of the associated comorbidities. In this context, aging obese women represent a target population for preventive strategies, since aging and obesity-pathophysiological processes are accelerated due to menopause. In this background, docosahexaenoic acid (DHA), probably through its derived specialized proresolving lipid mediators (SPMs), as well as exercise training, via its beneficial effects in several metabolic organs, could be therapeutic approaches for aging and obesity. Hence, we hypothesized that DHA supplementation and/or exercise training could ameliorate adipose tissue dysfunction in aged obese female mice, and in postmenopausal women with overweight/obesity, also reducing biomarkers of metabolic disturbances. With this aim, the first experimental study was based on long-term DHA dietary supplementation or exercise training, conducted in diet-induced obese mice from adulthood up to 18 months of age, to study the effects on subcutaneous white adipose tissue (scWAT) and interscapular brown adipose tissue (iBAT). Thereafter, a randomized clinical trial was conducted in postmenopausal women with overweight/obesity, to explore the effects of DHA supplementation and/or resistance training (RT), on body composition and metabolic biomarkers, as well as in the systemic-adipose inflammatory axis. The animal studies revealed actions for DHA on improving scWAT metabolic and inflammatory status (Chapter 1), including a reduction in adipocytes size, the downregulation of lipogenic and inflammatory genes, the upregulation of antiinflammatory M2 macrophages, and the induction of beige adipocyte genes. On iBAT, obesity and aging induced a reduction in SPMs content, which could contribute to its proinflammatory status and reduced thermogenic function (Chapter 2). The DHA-enriched diet increased UCP1 levels and n-3 PUFA derived SPMs in iBAT, without recovering its impaired response to cold. Concerning the effects of long-term exercise in obese aged mice (Chapter 3), the scWAT showed an increase in fatty acid oxidation and a reduction in inflammatory genes, lower macrophage infiltration, and an increment in thermogenic and beige adipocytes genes. However, the iBAT was less responsive to exercise, revealing only a moderate stimulation of thermogenic genes/proteins. Importantly, the effects on scWAT and iBAT could contribute to the observed systemic effects exerted by DHA, which reduced total and LDL-cholesterol, and of exercise, which improved insulin resistance and glucose tolerance. Finally, the clinical trial in postmenopausal women with overweight/obesity (Chapters 4, 5), revealed that DHA supplementation induced lower diastolic blood pressure, inflammatory platelet-to-lymphocyte ratio, and circulating triglycerides. On the other hand, RT induced local fat mass losses and muscle mass gains, maintained whole-body bone mineral content and improved glucose tolerance and scWAT ADIPONECTIN expression. Both interventions reduced circulating C-reactive protein and scWAT mRNA levels of adipocytokines (LEPTIN, CHEMERIN, IL6) and M1 macrophages markers (CD11c). The combination of both treatments did not have any relevant synergistic effect. Overall, this research provides evidence that DHA supplementation and exercise training induce a beneficial remodeling of adipose tissue that could contribute to prevent the systemic inflammation and comorbidities of obesity and aging.

217 p. Background: Diabetic patients have prolonged cardiac repolarization and a higher risk ofarrhythmia. Besides, diabetes activatesthe innate immune system, resulting in higher levels of plasmatic proinflammatory cytokinessuch as TNFa and IL1b, which are described to prolong ventricular repolarization.Methods: Most of the current knowledge on diabetic cardiac electrical remodeling derivesfrom type 1 diabetic animals. Here, we characterize a metabolic model of type 2 diabetes withprolonged cardiac repolarization. Sprague-Dawley rats were fed on high fat diet (45% Kcalfrom fat) for 6 weeks, and a low dose of streptozotozin was intraperitoneally injected at week2. Body weight and fasting blood glucose were measured and electrocardiograms to consciousanimals were recorded weekly. Plasmatic lipid profile, insulin, cytokines and arrhythmiasusceptibility were determined at the end of the experimental period. The transient outwardK+ current and action potentials were recorded in isolated ventricular myocytes by patchclamp.Animals were also treated with PAP-1, an inhibitor of Kv1.3 channel that has animmunomodulatory role. Results: Type 2 diabetic animals showed insulin resistance,hyperglycemia and higher levels of plasma cholesterol, triglycerides, TNFa and IL1b thancontrols. They also developed bradycardia and prolonged QTc-interval duration that resultedin increased susceptibility to severe ventricular tachycardia under cardiac challenge. Actionpotential duration (APD) was prolonged in control cardiomyocytes incubated 24h with plasmaisolated from diabetic rats. However, adding TNFa and IL1b receptor blockers to the serum ofdiabetic animals prevented the increased APD. Inhibition of Kv1.3 reduced the circulaitingcytokines including TNFa and IL1B. It had an antidiabetic effect improving insulin resistanceand controlling the glucose while reduced the prolongation of QTc and the susceptibility toarrhythmia in the diabetic rats.Conclusions: The elevation of the circulating levels of TNFa and IL1b are responsible forimpaired ventricular repolarization and higher susceptibility to cardiac arrhythmia in ourmetabolic model of type 2 diabetes. Thus, immunomodulation by inhibition of Kv1.3 hasantidiabetic effects while improving the electrical alterations of the diabetic heart. Theseresults make the immune system a potential target for the treatment of diabetes and itsassociated alterations.

El embarazo representa un gran reto metabólico para la madre. El desarrollo de una resistencia a la insulina fisiológica en tejidos periféricos hacia el final de la gestación, requiere múltiples adaptaciones por parte de los islotes de Langerhans para preservar la normoglucemia. Estas adaptaciones, muy bien caracterizadas en las células β pancreáticas, implican un aumento de la función y de la masa de este tipo celular, con el fin de mantener un equilibrio energético y de nutrientes óptimo entre la madre y el feto. Sin embargo, a pesar de la importancia de las células α en el mantenimiento de la homeostasis de la glucosa, así como de los estudios publicados que parecen vincular alteraciones en la secreción de glucagón con el desarrollo de la diabetes gestacional, el conocimiento sobre las posibles adaptaciones de las células α pancreáticas y su regulación durante el embarazo es virtualmente inexistente. Para investigar las características morfo-funcionales de las células α pancreáticas durante el embarazo, se utilizaron ratonas C57BL/6 preñadas, y ratonas no preñadas como control. Inicialmente, se estudiaron las adaptaciones morfológicas in vivo en diferentes etapas de la gestación (día gestacional (G): 12.5, 15.2 y 18.5). Dado que la mayor parte de cambios significativos a nivel morfológico se observaron en el día de gestación G18.5, se decidió finalmente centrar el estudio en esta etapa de la gestación que correspondería con el final de la gestación en el ratón. Además, se llevó a cabo el aislamiento de islotes de Langerhans frescos para los estudios ex vivo. Para los análisis in vitro, se utilizó la línea celular secretora de glucagón (α-TC1.9) para evaluar el papel potencial de las hormonas gestacionales en la regulación de estas adaptaciones. Para estudiar las características morfológicas se realizaron experimentos de inmunohistoquímica e inmunocitoquímica, mientras que para las características funcionales se determinaron los niveles de hormonas plasmáticas mediante ELISA, la secreción estática de glucagón y el contenido empleando también la técnica de ELISA, la señalización de calcio intracelular para estudiar alteraciones en el acoplamiento estímulo-secreción mediante microscopía confocal y la expresión génica del mRNA de glucagón mediante PCR cuantitativa. En cuanto a las adaptaciones morfológicas en las ratonas preñadas G18.5, los resultados obtenidos muestran un aumento estadísticamente significativo del área y masa de células α así como hipertrofia celular. Estos cambios en la masa se asociaron también a un aumento en la proliferación. No se encontraron cambios en la apoptosis de células α, neogénesis ductal o transdiferenciación entre células α y β, en comparación con los controles. Por otro lado, los experimentos in vitro en la línea celular α-TC1.9 sugieren que el lactógeno placentario y la prolactina pueden participar en la expansión de las células α, promoviendo un aumento en la proliferación, mientras que el estradiol actuaría de forma opuesta. Por lo que respecta a la función de la célula α durante la gestación, también observamos diversos cambios significativos. En el día gestacional G18.5, las ratonas preñadas presentan una marcada hipoglucagonemia, en comparación con las ratonas control. Además, la secreción in vitro de glucagón presentó una inhibición en presencia de niveles bajos de glucosa (0.5 mM) en los islotes recién aislados de estos animales. Igualmente, el contenido de glucagón en los islotes se vio afectado negativamente. El tratamiento in vitro durante 8 días con las hormonas gestacionales (PL, PRL y E2) produjo efectos similares en las células α-TC1.9, disminuyendo la liberación de glucagón a 0.5 mM G. Estos resultados indicarían un posible papel de estas hormonas en la regulación de la función de las células α durante el embarazo. Además, la expresión del gen del mRNA de glucagón se vio afectada en las células α-TC1.9 tratadas con E2, revelando una vez más, la posible participación de esta hormona en particular, en los cambios adaptativos de las células α durante la gestación. En conclusión, las células α pancreáticas presentan importantes adaptaciones tanto morfológicas como funcionales hacía el final de la gestación en ratones, potencialmente mediadas por las hormonas gestacionales. Estas adaptaciones podrían contribuir al mantenimiento de una homeostasis normal de la glucosa, impidiendo el establecimiento de un ambiente hiperglucémico que podría favorecer al desarrollo de diabetes mellitus gestacional. Pregnancy represents a major metabolic challenge for the mother. The development of a physiologic insulin resistance requires multiple adaptations in the islets of Langerhans to preserve a normoglycaemic state. These adaptations are very well characterized in the pancreatic beta-cells and involve an enhancement of both function and cellular mass to maintain an optimal energetic and nutrient balance between the mother and the fetus. However, despite the importance of the alpha-cells in the maintenance of glucose homeostasis and the studies that link changes in these cells to the development of gestational diabetes, the knowledge about the potential adaptations of the alpha-cell and its regulation during pregnancy is scarce. To investigate the morphofunctional features of pancreatic alpha-cells during pregnancy, we used pregnant C57BL/6 mice and non-pregnant mice as controls. Initially, the in vivo morphological adaptations were studied at different gestational days: G12.5, G15.5 and G18.5). Keeping in mind that, most of the morphological changes took place at G18.5, we finally decided to focus the present study on this gestational stage in particular, the late pregnancy in mice. In addition, freshly isolated islets of Langerhans were obtained to perform the ex vivo experiments. For the in vitro analysis, the glucagonsecreting α-cell line α-TC1.9 was used to assess the potential role of pregnancy hormones in the regulation of these adaptations. For the analysis of the morphological features, we performed immunohisto- and immunocytochemical experiments, while the study of the functional features was performed by different approaches: plasma hormone levels, glucagon secretion and glucagon content were measured by ELISA, calcium signaling to study alterations in the stimulus-secretion coupling was recorded using confocal microscopy and glucagon mRNA gene expression was measured by quantitative PCR experiments. Pregnant mice at G18.5 exhibited augmented alpha-cell area and mass as well as cell hypertrophy. This change in cell mas was also associated with increased proliferation. No changes in alpha-cell apoptosis, ductal neogenesis, or alpha-to-beta transdifferentiation were found compared with controls. The experiments with the α- TC1.9 cell line suggested that placental lactogen and prolactin may be involved in the expansion of the alpha-cell, promoting an increase in proliferation, while estradiol reduce the proliferation rate. At G18.5, pregnant mice presented hypoglucagonaemia compared to controls. Additionally, in vitro glucagon secretion at low glucose levels (0.5 mM) was impaired in freshly isolated islets from these animals. Glucagon content was also found to be reduced. Treatment for 8 days with the pregnancy hormones (PL, PRL and E2) produced similar effects in α-TC1.9 cells, decreasing glucagon release at 0.5 mM G, further indicating a possible role for these hormones in the regulation of alpha-cell function during pregnancy. Moreover, glucagon mRNA gene expression was impaired in α-TC1.9 cells treated with E2, revealing the potential involvement of this particular hormone in the adaptive changes in alpha-cells during gestation. In conclusion, pancreatic alpha-cells present several morphological and functional adaptations during late pregnancy in mice, potentially mediated by pregnancy hormones. These adaptations may contribute to the maintenance of a normal glucose homeostasis, preventing a hyperglycemic milieu, which could promote the development of gestational diabetes mellitus.

La pérdida de la población beta pancreática y su regeneración han sido los temas centrales en la investigación de la diabetes mellitus tipo 1 (DM1). A pesar de la importancia de la célula alfa en la etiología y complicaciones de la DM1, existe poca información acerca de la masa de este tipo celular y su modulación en esta enfermedad. Además, investigaciones recientes han evidenciado que este tipo celular constituye un potencial reservorio celular para la regeneración de la población beta pancreática. El estudio de la regulación de la masa de la célula alfa en la DM1 constituye una importante fuente de información a la hora de elucidar los mecanismos que contribuyen a la fisiopatología de la DM y de crear estrategias para la regeneración de las células beta . En la presente tesis doctoral, se ha caracterizado la masa de la célula alfa así como los procesos que la modulan en dos estadios de diabetes autoinmune: diabetes temprana, una semana tras el comienzo de la enfermedad, y diabetes avanzada, cuatro semanas tras el debut. Para ello, se empleó el modelo murino inducible de diabetes autoinmune experimental RIPB7.1. Todos los animales diabéticos presentaron insulitis, hiperglicemia, hipoinsulinemia e hiperglucagonemia, junto a una marcada disminución del contenido total pancreático de insulina. En la diabetes temprana, la masa de la célula alfa y el contenido total pancreático de glucagón no presentaron cambios significativos respecto al grupo control, mientras que en la fase avanzada ambos parámetros sufrieron una disminución. En ambos estadios, el tamaño de la célula alfa, la proliferación y la neogénesis ductal se encontraron aumentados, mientras que la tasa de apoptosis en este tipo celular fue insignificante. El estudio de potenciales marcadores de transdiferenciación celular reveló un incremento, en ambos estadios, de la proporción de células bi-hormonales, positivas tanto para insulina como para glucagón, y de células positivas para glucagón con expresión del factor de transcripción PDX1, específico de las células beta. Estos hallazgos sugieren que la célula alfa experimenta diversos procesos de remodelación durante el transcurso de la diabetes autoinmune experimental, que puede estar ligado al mantenimiento de la población funcional de células alfa y/o a la regeneración de la población beta pancreática mediante transdiferenciación de las células alfa. Type 1 diabetes (T1D) studies have been focused on the loss and regenerative strategies of the pancreatic beta-cell population. Nevertheless, despite the role of the alpha-cell in the etiology and complications of T1D, there is a lack of knowledge about the modulation of the pancreatic alpha-cell mass in this pathology. Additionally, recent findings have presented the alpha-cell as a plastic cell with great potential as a reservoir for beta-cell regeneration. Thus, the understanding of the modulation of the alpha-cell mass could be of outstanding importance for the elucidation of contributive factors involved in T1D pathophysiology and for the implementation of beta-cell regeneration strategies. In the present doctoral thesis, the pancreatic alpha-cell mass and its modulatory processes have been characterized in two stages of the disease: early-onset, one-week after diabetes debut, and an advanced stage, four weeks after the onset. The transgenic RIP-B7.1 mice model of experimental autoimmune diabetes (EAD) was employed in this study. In both stages, diabetic mice presented insulitis, hyperglycaemia, hypoinsulinemia and high plasmatic glucagon levels along with a significative reduction of the pancreatic insulin content. In the early-onset of EAD, alpha-cell mass and pancreatic glucagon content were preserved, while both parameters were reduced in the advanced phase. At both diabetic phases, alpha-cell size, proliferation and ductal neogenesis were increased, whereas apoptosis was almost negligible. Interestingly, we found an increase in markers of alpha-cell transdifferentiation into beta-cells during EAD. In both the early-onset and advanced stages, diabetic mice showed an increase in the proportion of bihormonal cells positive for insulin and glucagon or positive for both glucagon and the beta-cell transcription factor PDX1. Our findings suggest that alpha-cell renewal mechanisms are up-regulated during the natural course of EAD, possibly as an attempt to maintain a functional alpha-cell population and/or to increase beta-cell regeneration via alpha-cell transdifferentiation.

Submitted by Alexandre Almeida (alexandre.almeida@caxias.ufrj.br) on 2020-01-22T22:25:38Z No. of bitstreams: 1 887974.pdf: 3347005 bytes, checksum: df5ca9ade5f0382d607b47655faf649c (MD5) Made available in DSpace on 2020-01-22T22:25:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 887974.pdf: 3347005 bytes, checksum: df5ca9ade5f0382d607b47655faf649c (MD5) Previous issue date: 2019-07-31 O ensino de Biologia ainda é visto nas salas de aulas como um ensino tradicional em que o quadro e o giz são indispensáveis, mas somente essa abordagem tende a acarretar falta de interesse, participação e assimilação do conteúdo. Sendo assim, desenvolvemos revistas didáticas no estilo “Passatempo” como um recurso facilitador para o ensino de Morfofisiologia do Sistema Endócrino. Este trabalho contou com a participação de cinco turmas do 2o ano do ensino médio, totalizando 155 estudantes, sendo 80 do sexo feminino e 75 do sexo masculino, com faixa etária de 14 a 19 anos. Os jogos foram desenvolvidos em duplas de alunos, após as aulas sobre o Sistema Endócrino. Foram confeccionados 100 jogos, sendo jogos de caça palavras (51%), palavras cruzadas (18%), labirinto (15%), forca (13%) e erros (3%). Observou- se que o tema mais abordado pelos alunos foi o próprio Sistema Endócrino (93%), seguido de Doenças/Distúrbios Endócrinos (6%) e Desreguladores Endócrinos (1%). Por fim, foi confeccionada pelos próprios alunos/autores uma revista para cada turma, sob a supervisão do docente. Posteriormente, foram aplicados e avaliados os jogos desenvolvidos em uma turma distinta em conjunto com um questionário. Pode-se notar que as aulas se tornaram mais dinâmicas, participativas e investigativas. Os dados coletados evidenciaram que o papel da construção das revistas didáticas pelos alunos conseguiu corresponder a necessidade do professor em desenvolver um método facilitador, lúdico, de baixo custo e fácil aplicabilidade, sendo um instrumento que pode suprir as lacunas existentes na literatura para o ensino de Morfofisiologia do Sistema Endócrino. The teaching of Biology is still seen in classrooms as a traditional teaching in which blackboard and chalk are indispensable, but only this approach tends to entail lack of interest, participation and assimilation of content. Thus, we developed "Hobby" didactic as a facilitator for the teaching of Endocrine System Morphophysiology. This work counted on the participation of the five classes of the second year of high school, totaling 155 students, of wich 80 were female and 75 were male, with ages ranging from 14 to 19 years. The games were developed in pairs of students, after classes on the Endocrine System. 100 games were made, hunting games words (51%), crosswords (18%), labyrinths (15%), forca (13%) and errors (3%). It was observed that the topic most approached by students was the Endocrine System (93%), followed by Endocrine Diseases / Disorders (6%) and Endocrine Disrupters (1%). Finally, it was made by the students /authors by magazine for each class, under the supervision of the teacher. Instead, games developed in a distinct class together with a questionnaire. They can be recognized as the most dynamic, participatory and investigative. The data obtained evidenced the role of the construction of the magazines in the didactic capacity by the student with the same capacity to develop a teacher, logical, low cost and easy applicability, being an instrument that can fill the existing gaps in the literature for the teaching of Morphophysiology of the Endocrine System.

A produção in vitro de embriões (PIVE) tem contribuído expressivamente na exploração do potencial de animais geneticamente superiores e no aumento da eficiência reprodutiva dos rebanhos, concedendo ao Brasil posição de destaque frente aos demais países. No entanto, apesar de consolidada, a técnica ainda apresenta alguns desafios como a reduzida sobrevivência dos embriões PIVE após a criopreservação. Um dos fatores apontados como cruciais neste aspecto é o elevado conteúdo lipídico destes embriões quando comparado aos seus homólogos in vivo. Neste sentido, o objetivo deste trabalho foi avaliar o desenvolvimento de embriões bovinos produzidos in vitro após suplementação do meio de cultivo com moduladores da Acil-CoA sintetase de cadeia longa, uma família de enzimas que participa diretamente na ativação dos ácidos graxos. Os embriões foram cultivados divididos em quatro grupos: suplementação positiva (ACS+) com GW3965 hydrochloride, suplementação negativa (ACS-) com Triacsin C, associação de ambos moduladores (ACS±) e controle. Não houve diferença (P>0,05) nas taxas de produção entre os diferentes grupos. O conteúdo lipídico citoplasmático demostrou-se aumentado (P0,05), no entanto, o maior número de células apoptóticas foi encontrado em ACS- quando comparado ao grupo controle. Após vitrificação, as taxas de re-expansão não diferiram (P>0,05) 12 h após recultivo. Às 24 h, embriões de grau I de qualidade apresentaram as melhores taxas de eclosão nos grupos ACS+ e controle, sendo que às 48 h o grupo ACS+ igualou as taxas de eclosão de seus embriões de graus I, II e III. A abundância relativa do nível de transcritos gênicos associados ao metabolismo lipídico (ACSL3, ACSL6, ACAT1, SCD e AUH), choque térmico (HSP90AA1 e HSF1), estresse oxidativo (GPX4), angiogênese (VEGF), dentre outros genes importantes para o desenvolvimento embrionário, foi afetada por pelo menos um dos tratamentos. Deste modo, identificou-se a efetividade dos tratamentos na modulação do nível de transcritos gênicos de membros da família da Acil-Coa sintetase de cadeia longa e no conteúdo lipídico citoplasmático. A modulação negativa de ACS- e a consequente redução no conteúdo lipídico não foram eficazes no aumento da criotolerância embrionária enquanto que ACS+ restaurou as taxas de sobrevivência após a vitrificação de embriões com baixa qualidade tornando-as equivalentes aos embriões de excelente qualidade. In vitro embryo production (PIVE) has significantly contributed to the exploitation of the potential of genetically superior animals and to the increase of the reproductive efficiency of the herds, giving Brazil a prominent position in comparison to the other countries. However, despite being consolidated, the technique still presents some challenges such as the reduced survival of the PIVE embryos after freezing. One of the factors identified as crucial in this regard is the high lipid content of these embryos when compared to their in vivo counterparts. In this sense, the objective of this work was to evaluate the development of bovine embryos produced in vitro after supplementation of the culture medium with long chain Acil-CoA synthetase modulators, a family of enzymes that participate directly in the activation of fatty acids. The embryos were cultivated divided into four groups: positive supplementation (ACS +) with GW3965 hydrochloride, negative supplementation (ACS-) with Triacsin C, association of both modulators (ACS ±) and control. There was no difference (P> 0.05) in production rates among the different groups. The cytoplasmic lipid content was increased (P 0.05), however, the highest number of apoptotic cells was found in ACS- when compared to the control group. After vitrification, re-expansion rates did not differ (P> 0.05) 12 h after recultivation. At 24 h, quality I embryos showed the best hatched rates in the ACS + and control groups, and at 48 h the ACS + group equaled the hatched rates of their embryos of grades I, II and III. The relative abundance of the level of gene transcripts associated with lipid metabolism (ACSL3, ACSL6, ACAT1, SCD and AUH), thermal shock (HSP90AA1 and HSF1), oxidative stress (GPX4), angiogenesis (VEGF), among other genes important for development embryo was affected by at least one of the treatments. Thus, the effectiveness of the treatments in modulating the level of gene transcripts of members of the long-chain Acil-Coa synthetase family and in the cytoplasmic lipid content was identified. The negative modulation of ACS- and the consequent reduction in lipid content were not effective in increasing embryonic cryotolerance, whereas ACS + restored survival rates after vitrification of embryos with low quality, making them equivalent to the embryos of excellent quality.

The presence of oxygen in our atmosphere is and has been vital for evolution and survival, not only for humans, but for the majority of living beings on Earth. In this sense, world renowned scientists have revealed that several metabolic disorders present altered oxygen partial pressure at a tissue level, while some researchers have re-considered oxygen as a nutrient. Oxygen availability could be compromised in obesity and several other metabolically related pathological manifestations such as: sleep apnea-hypopnea syndrome (SAHS), metabolic syndrome (Mets, which is a set of conditions, including: hyperglycemia, hypertension, hyperlipemia, and central adiposity), diabetes type 2 and cardiovascular disease. Strategies designed to reduce adiposity and accompanying manifestations have been mainly based on nutritional interventions and physical activity programs. However, novel therapies are needed since these approaches have not been sufficient to counteract the increasing rates of metabolic disorders. In this regard, a potential treatment is intermittent hypoxia training, which could induce several benefits from oxygen-related adaptations. Concerning prevention, other authors have reported that living at high altitude could have a protective effect against the development of abnormal metabolic conditions. On the other hand, there is a growing need for novel in vitro models to study the potential pathways involved in metabolic dysfunction in order to find appropriate therapeutic targets. Based on the existing evidence, it was theorized that the oxygen availability has a key role in obesity and related comorbidities. Thus, the general objective of the present dissertation was to investigate the implication of oxygen on metabolic disorders in vivo and in vitro. Overall, the results reported in the present dissertation evidenced the involvement of oxygen in obesity and associated metabolic disorders. Notably, individuals with obesity coupled to SAHS, showed specific cardiometabolic benefits from the treatment with intermittent hypoxia training. Moreover, our research adds novel data to the existing literature concerning the epigenetic markers and metabolic disease, as participants with lower resting oxygen consumption showed lower IL6 methylation and higher IL-6 serum levels, normally related with a pro-inflammatory status. Furthermore, the incidence and prevalence of MetS was inversely associated to altitude both in Spain and Ecuador, suggesting a physiological protective role of geographical elevation on metabolic disorders. These results confirm that oxygen availability could be one of the main features to understand, prevent and treat metabolic disorders. Furthermore, our research contributed to better comprehend not only the participation of oxygen levels in the air breathed, but also the cellular and molecular involvement of oxygen in inflammation through HIF-1α transcriptional activation, the master regulator of oxygen homeostasis. The CM in vitro model showed great similarities to the HFD mice models, commonly used in the study of obesity and related pathologies. Finally, the treatment with cerium oxide nanoparticles in metabolic syndrome-related cell lines under pro-inflammatory conditions suggested a potential insulin sensitizing effect specifically on adipose tissue and skeletal muscle as related to mitochondrial content and adiponectin expression. In conclusion, oxygen arises as a good option to further investigate not only the potential therapeutic strategies, but also new targets in the treatment and prevention of metabolic disorders.

La hiperuricemia se asocia a enfermedad cardiovascular (ECV). Sin embargo, la contribución del ácido úrico (AU) sobre la morbimortalidad cardiovascular en pacientes diabéticos es controvertida. Objetivo. Evaluar la contribución del AU al riesgo de ECV /( eventos cardiovasculares), ACV( accidente cerebrovascular)-IAM( infarto agudo de miocardio) ,MCV( mortalidad cardiovascular) y MT ( mortalidad total) y en pacientes con diabetes tipo 2 (DM). Se incluyeron pacientes con DM atendidos en consultas externas hospitalarias. Se recogieron variables demográficas, clínicas y bioquímicas, incluidos niveles de AU, excreción de albúmina urinaria (EAU) y tasa de filtración glomerular (TFG). La contribución independiente del AU a cada una de las variables dependientes ( ECV, ACV-IAM, MCV, MT) se evaluó con modelos de regresión de Cox con ajuste progresivo para potenciales factores de confusión.Se incluyeron 452 pacientes con edad media de 65,9 (DE 9,5) años. La media de AU fue de 4,2 mg/dl y los cuartiles (Q) de AU fueron: Q15,1 mg/dl. La correlación entre AU y TFG fue significativa (Rho= -0,227; p Conclusiones. Los niveles de AU se asocian a incremento de ECV, MCV y MT en pacientes con DM. No obstante la asociación puede no ser causal, sino mediada por la afectación de la función renal en los pacientes con hiperuricemia.

Orientador: Prof. Dr. Paulo Cezar de Freitas Mathias Dissertação (mestrado em Ciências Biológicas) - Universidade Estadual de Maringá, 2017 RESUMO: O sistema nervoso autonômico (SNA) desempenha um papel crucial na regulação da homeostase metabólica. Esta regulação inclui o controle da secreção de insulina pelo pâncreas endócrino, através da estimulação pelos receptores colinérgicos muscarínicos, e/ou inibição da secreção via receptores adrenérgicos. O desequilíbrio na atividade do SNA, com o aumento da atividade do sistema nervoso parassimpático (SNP) e/ou diminuição da atividade do sistema nervoso simpático (SNS), tem sido sugerido como um fator de risco para o desenvolvimento e manutenção de disfunções metabólicas, como o diabetes tipo 2. Objetivamos investigar se o desequilíbrio do SNA induzido por simpatectomia pancreática pode conduzir a distrúrbios metabólicas, incluindo modificações na secreção de insulina pelas células beta-pancreáticas. Para a realização desse estudo utilizamos ratos da linhagem Wistar, os quais foram submetidos a simpatectomia pancreática aos 60 dias de vida, através da excisão unilateral do nervo esplâncnico que se projeta para o pâncreas. A evolução do peso corporal foi mensurada o período da eutanásia, aos 120 dias de vida. Glicemia e insulinemia foram mensurados pelo teste de tolerância à glicose intravenoso (TTGiv). Os estoques de gordura (retroperitoneal, mesentérica e periepididimal) foram removidos e pesados para avaliar o estado de obesidade. Para melhor compreensão de possíveis alterações metabólicas ocorridas no pâncreas endócrino, as ilhotas pancreáticas foram incubadas com glicose na presença ou na ausência de acetilcolina (ACh); bem como, com drogas que bloqueiam os receptores colinérgicos muscarínicos [antagonistas seletivos para o subtipo M2mAChR (Metoctramina, MTT) ou M3mAChR (4-Diphenylacetoxy-N-methylpiperidine methiodide, 4-DAMP). Outro grupo de ilhotas, foram incubadas para estudar a contribuição dos receptores adrenérgicos no controle da secreção de insulina. Para tanto, utilizamos epinefrina (Epi); bem como, yohimbine (Yoh) ou propranolol (Pro) [antagonistas dos receptores alfa-2 adrenérgico (a2-AR) e beta-adrenérgico (ß-AR), respectivamente]. A expressão proteica do receptor a2-AR foi realizada pela técnica de western blotting. Para as análises estatísticas utilizamos o programa GraphPad Prism versão 6.01 para Windows (GraphPad Software Inc., San Diego, CA, USA). Os resultados são expressos como média ± EPM e submetidos ao teste t de Student, ANOVA de medidas repetidas ou ANOVA de uma via. Os valores de p < 0.05 foram considerados estatisticamente significantes. Os ratos simpatectomizados (SYM) apresentaram uma modesta elevação de peso corporal, bem como, aumento do acúmulo dos principais estoques de gorduras aos 120 dias de vida. Esses resultados em conjunto, indicam que a simpatectomia pancreática realizada no início da vida adulta prejudicou o balanço energético do metabolismo. Apesar de não ter ocorrido alterações na glicemia de jejum, observamos diminuição da secreção de insulina no jejum, bem como, um aumento da sensibilidade periférica à insulina no grupo SYM. Nosso modelo experimental demonstrou prejuízo na secreção estática de insulina em presença de glicose. Nossos resultados revelam uma maior resposta da secreção de insulina em presença de ACh e de MTT (23% e 105%, respectivamente), sem nenhuma modificação em presença de 4-DAMP. A respeito dos dados supracitados, hipotetizamos que possa ter havido um desbalanço na função e/ou composição dos receptores muscarínicos dos subtipos M2mAChR e M3mAChR nas ilhotas pancreáticas do grupo SYM. Verificamos uma fraca resposta da secreção de insulina, quando tratamos as ilhotas com Epi, com diminuição de 24%; embora não observamos nenhuma modificação da secreção de insulina com os antagonistas adrenérgicos, Yoh e Pro. Constatammos elevação de 43% na expressão proteica dos a2-AR do grupo SYM; esse resultado, nos revela que a inervação intacta do SNS do pâncreas endócrino exerce forte influência sobre a função e/ou expressão dos receptores adrenérgicos. Modelos experimentais em roedores transgênicos, demonstram que a ausência de receptores ß-AR poderia desencadear o aumento na expressão dos a2-AR, o que causaria impactos na secreção de insulina. Em contrapartida, modelo transgênico de roedores que superexpressam os a2-AR, foram observados perda da homeostase glicêmica e diminuição na secreção de insulina. Apesar da elevação dos a2-AR na célula-beta, não observamos aumento da secreção de insulina no estudo in vitro com Yoh. Contudo, é presumível hipotetizar que possa ter ocorrido alteração na função e/ou expressão de outros receptores adrenérgicos, como um possível mecanismo de contrabalancear a superexpressão dos a2-AR. Estudos futuros são necessários para melhores compreensões do mecanismo que envolve o controle da secreção de insulina através dos receptores adrenérgicos. A ablação do SNS no início da vida adulta conduziu ao desbalanço na atividade do SNA, comprometendo o metabolismo energético. Acompanhado por perda da homeostase glicêmica e danos no controle da secreção de insulina tanto na presença de glicose, como em presença de agentes muscarínicos e adrenérgicos, e ainda, superexpressão dos a2-AR. Desequilíbrio do SNA, ainda que na vida adulta, desencadeia disfunções metabólicas, principalmente atráves de alterações nos mecanismos que regulam o fino controle da secreção de insulina. Ademais, diminuição da secreção de insulina por superexpressão dos a2-AR podem participar do desenvolvimento do diabetes tipo 2 ABSTRACT: The autonomic nervous system (ANS) plays a crucial role in the regulation of metabolic homeostasis. This regulation includes the control of insulin release by the endocrine pancreas, through stimulation by muscarinic cholinergic receptors, and/or inhibition of insulin release by adrenergic receptors. The imbalance in ANS activity, through increased activity of the parasympathetic nervous system (PNS) and/or reduction of sympathetic nervous system (SNS) tone, has been suggested as a risk factor for the development and maintenance of metabolic dysfunction, such as type 2 diabetes. We aimed investigate whether the ANS imbalance induced by pancreatic sympathectomy can lead to metabolic alterations, including changes in insulin release from pancreatic beta-cells. For this study we used Wistar rats, which were submitted to selective pancreatic sympathectomy at 60-day-old, through unilateral excision of the splanchnic nerve that projects to the pancreas. The evolution of body weight and food intake were collected until the euthanasia period, at 120-day-old. Glycemia and insulinemia were measured by the intravenous glucose tolerance test (ivGTT). Fat pad stores (retroperitoneal, mesenteric and periepididymal) were removed and weighed to assess the state of obesity. Towards a better understanding of the changes in the endocrine pancreas, pancreatic islets were incubated with glucose in the presence or absence of acetylcholine (ACh), as well, as with drugs that block muscarinic acetylcholine receptors [selective antagonist to M2mAChR subtype (Metoctramine, MTT) or M3mAChR subtype (4-Diphenylacetoxy-N-methylpiperidine methiodide, 4-DAMP)]. Another group of islets were incubeted to study the contribution of adrenergic receptors in the control of insulin secretion. For this, we used epinephrine (Epi); as well, yohimbine (Yoh) or propranolol (Pro) (adrenergic receptor alpha-2 (a2-AR) - and beta antagonists (ß-AR), respectively). Protein expression of alpha-2 adrenergic receptor was performed by the western blotting. For statistical analysis we used the GraphPad Prism version 6.0 for Windows (GraphPad Software Inc., San Diego, CA, USA). The results are given as the means ± SEM and submitted to Student's t-test, ANOVA repeated measures or ANOVA One-way. Values of p < 0.05 were considered statistically significant. Sympathectomized rats (SYM) presented increased food intake, followed by a modest elevation in body weight, and an increase in the accumulation of the main fat stores at 120-day-old. These results together indicate that pancreatic sympathectomy performed early in adult life impaired energy metabolism. Although fasting glycemia was unchanged, we observed a 10% increase in glycemia in the area under the curve (AUC) of ivGTT; moreover, we observed fasting hypoinsulinemia and 30% decrease in insulin AUC during the test. We found high insulin sensitivity in a fasting condition, calculated through HOMA-IR index, the ablation of sympathetic innervation that protrudes into the pancreas, was able to cause loss in glycemic control, causing glucose intolerance, probably due to defect in glucose-stimulated insulin secretion. Similar to the in vivo data, we observed that the static secretion of insulin in the presence of glucose was also impaired. Our results revealed a higher insulin secretion response in the presence of ACh and MTT (23% and 105%, respectively), and no change in presence of 4-DAMP. About the above-mentioned data, we hypothesized that there may have been an imbalance in the function and/or composition of the muscarinic receptors of the M2mAChR and M3mAChR subtypes in the pancreatic islets of the SYM group. We observed a poor response of insulin secretion when we treated the islets with Epi, the decrease was 24%. Although we did not observe any modification of insulin secretion with the adrenergic antagonists, Yoh and Pro. We found a 43% increase in the protein expression of the alpha-2 adrenergic receptors of the SYM group, this result reveals that the intact innervation of the SNS of the endocrine pancreas exerts a strong influence on function and/or expression of adrenergic receptors. Experimental models in transgenic rodents, demonstrate that the absence of beta-adrenergic receptors could trigger increased expression of a2-AR, which would impact on insulin secretion. In contrast, another transgenic model that overexpressed a2-AR, loss of glycemic control and decrease in insulin secretion were observed. Despite significant elevation of a2-AR in the beta-cell, we did not observe an increase in insulin secretion in the isolated pancreatic islet incubation with Yoh. However, it is presumed hypothesized that there may have been alterations in the function and/or expression of other adrenergic receptors, such as a possible mechanism to counterbalance the overexpression of a2-AR. Future studies will be needed to better understand this interesting mechanism that involves the control of insulin secretion through adrenergic receptors. SNS ablation in early adulthood led to the imbalance in the activity of the ANS, compromising the energy metabolism. Accompanied by loss of glycemic homeostasis and damage to the control of insulin secretion to either glucose or muscarinic/adrenergic agents, and overexpression of a2-AR. SNA imbalance, although in adult life, triggers metabolic dysfunctions, mainly through alterations in the mechanisms that regulate the fine control of insulin release. In addition, decreased of insulin release by overexpression of a2-AR may participate in the development of type 2 diabetes 37 f. : il.

El uso de técnicas osteopáticas manipulativas en el raquis es frecuente en el tratamiento de pacientes con dolencias en el aparato locomotor. Estas maniobras pueden desencadenar efectos locales mecánicos. Pero otras apreciaciones clínicas nos hacen sospechar de efectos a distancia mediante las vías del sistema nervioso autónomo o vegetativo. Sin embargo, no existe clara evidencia de ello por la dificultad para medir respuestas viscerales. OBJETIVOS: Determinar si una manipulación con impulso de alta velocidad y baja amplitud, conocida como técnica de thrust, puede producir variaciones en la glucemia capilar aplicada a nivel de la novena vértebra dorsal (D9). MATERIAL Y MÉTODOS: Se realizó un estudio experimental de tipo ensayo clínico aleatorio y a simple ciego. La muestra final fue de 85 sujetos divididos en población diabética y no diabética. A su vez cada grupo se distribuyó de modo aleatorio en grupo control o experimental. Los sujetos del grupo experimental recibieron manipulación dorsal y los del grupo control ninguna técnica. Se tomaron muestras de sangre capilar antes de la manipulación y 2 min, 5 min y 10 minutos después de ésta para registrar los valores de glucemia en cada intervalo de tiempo. RESULTADOS: No se evidenciaron diferencias en la glucemia basal entre grupo control y experimental ni en la población diabética ni en la no diabética. Sin embargo, se registró un descenso intragrupo de los valores de glucosa en sangre en el grupo experimental entre el valor preintervención y a los 5 min (p= 0,011) y 10 min tras thrust (p=0,005). No se apreciaron diferencias según el sexo, aunque en varones del grupo experimental se identificó descenso en los valores entre preintervención y 10 min tras el thrust (p=0,04). El fenómeno de cavitación no influyó en los resultados de la técnica, pero se produjo un descenso estadísticamente significativo en las manipulaciones acompañadas de chasquido articular entre glucemia premanipulación y 5min (p=0,007) y 10 min (p=0,013) después. CONCLUSIONES: No se pudo afirmar que la técnica de thrust a nivel D9 fuera efectiva para provocar variaciones en la glucemia basal, aunque existieron diferencias intragrupo. Terapia y Rehabilitación

Introducción: La prevalencia de la obesidad está alcanzando unas cifras extremadamente elevadas a nivel mundial. Pero quizá, el dato más sorprendente es que los años 2020-2030 el porcentaje de individuos con sobrepeso se incrementará hasta casi un 60%. Desafortunadamente, aunque se han propuesto muchos tratamientos (nutricional, farmacológico, quirúrgico), el gran inconveniente es que no son efectivos a largo plazo. Aunque la obesidad se produce por una ingesta calórica mayor a las necesidades, este equilibrio está influenciado por múltiples factores, entre los que cabe destacar los fisiológicos, genéticos y sobre todo aquellos relacionados con los hábitos saludables. Recientemente, los factores neurocognitivos y cronobiológicos están acaparando la atención por su influencia sobre la obesidad. Objetivos: Evaluar la influencia de los factores cronobiológicos y neurocognitivos en la regulación del apetito y la eficacia del tratamiento de la obesidad. Material y métodos: en la fase 1 desarrollamos una aplicación para la determinación subjetiva del apetito. En las fases 2 y 3, analizamos los factores cronobiológicos relacionados con los ritmos de hambre/saciedad y su relación con los hábitos alimentarios, lo que nos llevó a realizar en la fase 4 un ensayo clínico aleatorizado para analizar la eficacia de una dieta ajustada al cronotipo. En la fase 5 estudiamos la influencia de la obesidad y la pérdida de peso sobre las funciones ejecutivas, y finalmente en la fase 6 realizamos otro ensayo clínico aleatorizado para determinar la efectividad del entrenamiento de las funciones ejecutivas sobre la pérdida de peso. Resultados y discusión: Fase 1: el análisis ANOVA de medidas repetidas indicó que no había diferencias significativas en cuanto al método de medida (P P o Dietavisa®) o en cuanto a la composición de la comida (HC o HF) (p>0,050 en todos los casos) para las puntuaciones de hambre, deseo de comer o saciedad. Los coeficientes de correlación mostraron un alto acuerdo entre ambos métodos (R2 de 0,94-0,98), así como los resultados de la prueba de Bland-Altman. Fase 2: dentro del grupo normopeso, los sujetos matutinos ingirieron la mayor parte de su energía y nutrientes en el desayuno y en la comida, mientras que los sujetos vespertinos mostraron una mayor ingesta en la cena, coincidiendo con sus cronotipos. Se observó una interacción significativa entre el cronotipo y el índice de masa corporal en cuanto a la energía y tipo de nutrientes consumidos durante la cena (p

La diabetes tipo 1 es una enfermedad crónica que se acompaña de desórdenes metabólicos que pueden conducir hacia el desarrollo de complicaciones microvasculares y macrovasculares. Revisando la literatura, parece haberse objetivado una disminución importante de las complicaciones microvasculares al mejorar el control metabólico de la enfermedad mediante la introducción de la terapia intensiva de insulina con múltiples dosis. Sin embargo, la enfermedad cardiovascular (ECV) continúa siendo un problema grave de salud en la población con diabetes tipo 1, más frecuente y más precoz que en población sana. Se han descrito como factores implicados: la obesidad, sobre todo si se asocia a exceso de grasa corporal, la dislipemia y la hipertensión arterial, además del control metabólico inadecuado; pero todavía son escasos los estudios sobre este tema en niños y adolescentes con diabetes, lo cual ha servido de punto de partida para esta tesis.

Las alteraciones de los ejes hipotálamo-hipófiso-adrenal (HPA) y somatotrópico (SM) se observan con frecuencia en pacientes con DM-1 mal controlada. Estas alteraciones podrían estar relacionadas con trastornos en el tono colinérgico que regula ambos ejes hormonales. El objetivo de este trabajo fue investigar las respuestas de los ejes HPA y SM a fármacos agonistas colinérgicos y la posible correlación entre ellas. SUJETOS Y MÉTODOS: Se midieron CLU (cortisol libre urinario) en muestra de orina de 24 h y los efectos de la administración de placebo (Pb), piridostigmina (PD), GHRH y GHRH más PD sobre los niveles circulantes de ACTH y cortisol (test 1 y 2), y GH y glucosa en los 4 tests. El estudio se realizó en 16 varones jóvenes: 10 controles normales y 6 pacientes con DM-1 mal controlada (HbA1c: 9,2%). No se observaron diferencias en las respuestas hormonales entre los 5 fumadores y los 5 no fumadores en el grupo control, por tanto, ambos grupos se consideraron similares para compararlos con los diabéticos. En cada prueba, se administraron Pb VO + placebo de GHRH IV (prueba 1), PD (120 mg) VO + placebo de GHRH IV (prueba 2), Pb VO + GHRH 50 mcg IV (prueba 3) y PD (120 mg) VO + GHRH 50 mcg IV en orden aleatorio en diferentes días a las 08:30. Se extrajeron 12 muestras de sangre: antes de administrar Pb o PD, a las 09:00 y luego cada 15 minutos hasta 11:30. Se calculó el área bajo la curva (AUC) para el período del muestreo completo y por intervalos de 1 hora para los 4 tests. En los tests GHRH se calcularon los parámetros de respuesta: pico máximo, incremento absoluto, incremento porcentual y áreas de respuesta. Los datos se expresan como la media ± SEM. RESULTADOS: Los niveles de CLU fueron más altos en diabéticos que en controles (47,21 ± 7,29 vs 33,70 ± 2,63 mcg/24 h, p

A síndrome dos ovários policísticos (PCOS) é a endocrinopatia mais comum em mulheres em idade reprodutiva, caracterizada pela presença de anovulação, infertilidade e hiperandrogenismo, e freqüentemente associada à obesidade e resistência insulínica. Postula-se que, a longo prazo, estas pacientes possam apresentar maior risco de neoplasias do trato reprodutivo como carcinoma (CA) de endométrio, mama e ovário. Um risco aumentado de hiperplasia e CA endometrial nessas pacientes tem sido demonstrado em vários estudos, embora seja reconhecido que a variabilidade dos critérios de seleção para o diagnóstico de PCOS em alguns destes estudos limite o valor dos dados. Apesar das pacientes com PCOS apresentarem características clínicas associadas comum aumento de risco de CA de mama, até o momento não foi possível relacionar com certeza a presença da síndrome per se com maior prevalência desta neoplasia. Finalmente, quanto ao CA do ovário, considera-se que altas concentrações locais de hormônios esteróides e fatores de crescimento representam fatores de risco para esta neoplasia. Apesar destas alterações serem comumente observadas nas pacientes PCOS não tratadas ou em tratamento para infertilidade, ainda são poucos os estudos que avaliam uma possível relação entre PCOS e CA de ovário, mas seus resultados, embora conflitantes, sugerem ausência de associação. Polycystic ovary syndrome (PCOS) is themost commonendocrine disease in women on reproductive age. PCOS is characterized by the presence of anovulation, infertility and hyperandrogenism and is associated with obesity and insulin resistance. A major risk for neoplasms of the reproductive tract, like endometrial, breast and ovary cancer seems to be related to PCOS. While several studies have shown an increased risk for endometrial hyperplasia and cancer in PCOS patients, the variability of the selection criteria for PCOS has been recognized as a potential bias for these data. PCOS women also present clinical characteristics that are related to risk factors for breast cancer and some epidemiological evidences have been described on this issue. However, until now, a clear association between the presence of PCOS and breast carcinoma has yet not been found. Finally, high local steroid and growth factor concentrations are considered risk factors for ovary carcinoma, and are frequently observed in PCOS women. In turn, few studies have addressed the possibility of a link between PCOS and ovarian cancer and the results are conflicting but suggest that this association is unlikely.

Tesis-Universidad CEU San Pablo, Facultad de Farmacia, Departamento de Ciencias Farmacéuticas y de la Salud, octubre del 2015, [X, 155 p.] Este estudio indica que la CCK podría ser fundamental en la regulación de la captación de los lípidos por parte del tejido adiposo durante los periodos pospandriales. La CCK tiene un efecto estimulante sobre la liberación de insulina que, junto con la disminución del tamaño de las raciones ingeridas, permitiría la correcta distribución de los nutrientes. De este modo, se evitaría la eventual sobrecarga de los mismos, que podría desencadenar la saturación de los mecanismos celulares involucrados en el metabolismo de la glucosa y los TG. Por tanto, es necesario seguir investigando el papel de la CCK en la regulación hormonal de la digestión y el modo en el que se relaciona con el desarrollo de obesidad, para obtener un conocimiento más completo acerca de los mecanismos fisiopatológicos responsables de esta enfermedad y poder desarrollar tratamientos efectivos. Además, este estudio incide en el concepto de que la obesidad, independientemente de los factores genéticos, no es únicamente una cuestión de ingesta calórica y de composición de la comida sino también de la distribución circadiana de la ingesta diaria. Por tanto, este estudio puede proporcionar información relevante para el diseño de nuevas terapias para el tratamiento y prevención de la obesidad.

Para avaliar a utilidade dos fitoestrogênios (FE) na terapia de reposição hormonal da menopausa (TRHM), o Departamento de Endocrinologia Feminina da SBEM reuniu um grupo de especialistas para fazer uma revisão bibliográfica e selecionar trabalhos nos quais a metodologia adotada demonstrasse rigor científico. Os FE têm ações estrogênicas e antiestrogênicas, predominantemente sobre os receptores de estrogênios (E) beta, com potência estrogênica muito inferior à do estradiol. O conteúdo de FE nas suas fontes vegetais é variável, dependendo da forma de cultivo, safra, armazenamento e industrialização. Também a conversão dos precursores em fitormônios ativos no organismo humano tem grande variabilidade individual. A maior parte das pesquisas com FE é realizada in vitro ou com animais de laboratório, nem sempre podendo ser extrapoladas para humanos. Com relação à síndrome do climatério, alguns estudos sugerem discreta melhora dos fogachos, sem modificação do ressecamento vaginal ou das alterações do humor. No metabolismo lipídico, alimentação rica em soja, mas não isoflavonas isoladamente, promove redução do colesterol total, do LDL-col e dos triglicerídeos, mas não elevam o HDL-col, como os E, e podem causar aumento da lipoproteína (a), que os E contribuem para diminuir. Embora alguns estudos de curta duração sugiram aumento da densidade mineral óssea com uso de isoflavonas, não há demonstração de redução de fraturas. Conclui-se que não há evidências convincentes que justifiquem o uso de FE ou alimentação rica em soja como alternativa para a TRHM. To evaluate the benefit of phytoestrogens (PhE) in hormone replacement therapy of menopause (HRTM), the Department of Female Endocrinology of the Brazilian Society of Endocrinology and Metabolism convened a group of specialists to perform a bibliographic review. Only articles that met strict scientific methodological criteria were included. PhE exhibit both estrogenic and antiestrogenic actions, mainly on estrogen (E) receptors beta, with much less estrogenic potency than estradiol. PhE content of vegetal sources varies, depending on cultivation, harvesting, storage and industrialization. Conversion of precursors to active phytohormones in the human body exhibits great individual variability. Most studies with PhE was done in vitro or in laboratory animals and could not always be extrapolated to humans. Some studies on the climateric syndrome suggest little improvement of hot flushes but not of vaginal dryness or mood instability. Regarding lipid metabolism, soy-rich food but not isolated isoflavones promotes reduction of total cholesterol, LDL-chol and triglyceride levels, but does not raise HDL-chol as E do, and promotes elevation of lipoprotein (a), which are reduced by E. Although some short-term studies suggest improvement of bone mineral density with isoflavones, no reduction in fracture rate is demonstrated. We conclude that there are no convincing evidences to support the use of PhE or soy-rich food as alternatives to HRTM.

Tesis con mención internacional, Los estrógenos son hormonas imprescindibles para el buen funcionamiento de las funciones cerebrales, además de su conocido papel, a nivel hipotalámico, sobre el eje neuroendocrino-reproductor. De este modo, los cambios cíclicos que se producen en sus niveles a lo largo de la vida sexual de la mujer pueden influir en la homeostasis cerebral. No obstante, es en el momento final de este periodo reproductivo cuando más evidente resulta su importancia, ya que la caída en los niveles de estrógenos, inherente a la menopausia, puede dar lugar a la aparición de diversos síntomas y patologías, tales como un incremento de la resistencia central a la acción de la insulina o un aumento en la incidencia de daño isquémico cerebral. A pesar de que la terapia de reemplazamiento hormonal con estrógenos puede resultar efectiva para paliar muchas patologías asociadas al envejecimiento, en ocasiones conlleva de forma implícita la aparición de efectos secundarios no deseados. Esto nos ha llevado a estudiar si los tratamientos con 17ß-estradiol o genisteína, una isoflavona presente en ciertos tipos de plantas, podrían ejercer un papel neuroprotector frente a la resistencia a la insulina y el daño isquémico asociados al envejecimiento femenino. Así, mediante el empleo de modelos animales y celulares, en este trabajo observamos que las diferencias en los niveles de estrógenos que existen entre distintas fases del ciclo estral modulan el metabolismo oxidativo cerebral de una forma específica de región. Además, el tratamiento agudo con 17ß-estradiol, pero no con genisteína, redujo el impacto negativo del envejecimiento sobre la sensibilidad a la acción de la insulina en el córtex cerebral de ratas hembra. Sin embargo, el hecho de que la genisteína provocara la activación de la proteína quinasa B (Akt), la cual está implicada en múltiples procesos celulares, sugiere la existencia de otros mecanismos implicados en la mediación de los efectos neuroprotectores de este fitoestrógeno durante el envejecimiento femenino. Por último, tanto el 17ß-estradiol como la genisteína ejercieron un papel neuroprotector frente a un daño por isquemia/reperfusión recurrente en un estudio in vitro realizado con la línea neuronal de hipocampo de ratón HT22. Este efecto protector pareció ser mediado, al menos en parte, por una mejoría del metabolismo oxidativo neuronal, el cual se había visto comprometido como consecuencia del daño isquémico. En conjunto, todo ello apunta a que los estrógenos juegan un papel muy importante en la regulación de diversas patologías a nivel central que pueden tener lugar durante el envejecimiento femenino. A pesar de que la genisteína no haya sido capaz de mimetizar este papel protector del estradiol en todas las patologías estudiadas, los resultados positivos encontrados con este fitoestrógeno, tales como la activación de Akt en el córtex cerebral de ratas hembra viejas y su papel neuroprotector frente al daño isquémico recurrente, son esperanzadores y alientan a la realización de más estudios, bien sea utilizándolos como monoterapia o en terapias combinadas con otros fitoestrógenos.

Sodium and water intake are important regulatory components of the hidromineral balance. In this context, human body regulates hidromineral imbalance through the neuro-immune-endocrine and behavioral response. Gonadal hormones are important players for the modulation of ingestive behaviors. The present study aimed to investigate the influence of male and female gonadal hormones in cerebral ECA2/ANG-(1-7)/Mas axis over the control of water sodium intake in rats. In this experiment, ovariectomized female rats were treated with estradiol benzoate (20μg/animal/day, sc; OVXE) or vehicle (sunflower oil; OVXV). Male rats underwent bilateral orchiectomy (ORQX) or sham surgery (SHAM). Guide cannulae were implanted into the right lateral ventricle for intracerebroventricular administration (icv) of drugs. We used angiotensin-converting enzyme type 2 (ACE2) activator, DIZE (diminazene of aceturate, 40 nmol / 2μl , icv ) or the antagonist of Ang-(1-7) Mas recetor, D-Ala7-ANG-(1-7) (A779, 10 nmol / 2μl, icv). The vehicle for both drugs was artificial cerebrospinal fluid (aCFS) administered in the same volume. For induction of thirst and sodium appetite, animals were subjected to hydrossaline depletion by administration of furosemide (20 mg / kg, sc) and access to distilled water and low sodium diet (corn ) for 24 hours. After microinjection of drugs, water and 0.3 M NaCl were reoffered and the ingested volume were recorded at the following 15, 30 , 60, 90 , 120, 180, 240 min and 24 h. Two-way analysis of variance was performed, followed by Bonferroni posthoc test when appropriate. The level of significance was p < 0.05. In females treated with vehicle or DIZE, sodium and water intake, as well as sodium preference index (SPI) did not differ between groups. However, OVXV ingested less water than OVXE when both were treated with A779 (p < 0.05). Twenty-four hours after reintroduction of fluids intake sodium ingestions was higher in OVXV than in OVXE when both received A779 (p

Submitted by Daniella Santos (daniella.santos@ufma.br) on 2018-12-18T21:29:41Z No. of bitstreams: 1 AndersonFerreira.pdf: 1613492 bytes, checksum: 3148c327268fbbfd466299429e9213c4 (MD5) Made available in DSpace on 2018-12-18T21:29:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AndersonFerreira.pdf: 1613492 bytes, checksum: 3148c327268fbbfd466299429e9213c4 (MD5) Previous issue date: 2011-06-22 CAPES CNPq There are amphibian populations declining in many parts of the world, due to environmental changes caused by humans. The aquatic contamination by endocrine disruptors, which act by interfering with the physiology of animals and alter the functions of the endocrine system may be one factor that is contributing to this decline. Among the disruptors, hormones pose a danger because it can act during larval development of amphibians, a critical period for survival and reproductive success of individuals. This risk may increase if there are interactions of the hormone with the stressors that maintain the natural balance of populations. The objective of this study was to assess the effects of contamination by the hormone 17α- ethinylestradiol and its interaction with natural stressors in tadpoles, using as model the specie Physalaemus cuvieri. For this, a factorial experiment was set up to evaluate the effects of ethinylestradiol in different concentrations (0, 0.005 or 2.5 µg/L) and their interactions with density (high or low) and predator (present or absent). To evaluate the effects of treatments were used, as response variables, survival to metamorphosis, survival of tadpoles not metamorphosed, malformations, size at metamorphosis, development time and sex ratio. It has been found to decrease survival in the higher concentration and at high density, being more evident in the first 30 days, indicating an acute effect of hormone and stress caused by a higher density. Most of the tadpoles that completed metamorphosis were exposed to concentrations of 0 and 0.005 µg/L on treatments with low density and absence of the predator, which reflects the action of ethinylestradiol at a concentration of 2.5 µg/L and at high density. Individuals were found with malformations (mainly located in the limbs), which have a higher occurrence in the treatments exposed to 0.005 µg/L of ethinylestradiol and low density, which is connected can lower rates of survival and selection of stronger individuals in treatments with higher concentration and density, and a possible chronic effect on the tadpoles exposed to lower concentration. There is the hypothesis that ethinylestradiol acts on the hormonal mechanisms regulating the metamorphosis by inhibiting the thyroid, which could explain the slower development of tadpoles in treatments with 0.005 and 2.5 µg/L and the predator, that can also decrease the metabolism of tadpoles. The size at metamorphosis was higher in treatments in the presence of 2.5 µg/L and predator, a fact associated to increased development time and possible stimulation of Prolactin and Growth Hormone by ethinylestradiol. There was no change in sex ratio of the treatments exposed to ethinylestradiol, when compared to control. This study indicates that exposure of tadpoles P. cuvieri to the estrogen 17α-ethinylestradiol together with stressors in natural communities, alters the normal development of different forms. Existem populações de anfíbios declinando em várias partes do mundo, decorrentes de alterações ambientais causadas pelo homem. A contaminação aquática por desreguladores endócrinos, que agem interferindo na fisiologia dos animais e alteram as funções do sistema endócrino, pode ser um dos fatores que está contribuindo para esse declínio. Dentre os desreguladores, os hormônios oferecem perigo, pois podem agir durante o desenvolvimento larval dos anfíbios, que é um período crítico para a sobrevivência e o sucesso reprodutivo dos indivíduos. Esse perigo pode aumentar se existirem interações do hormônio com os estressores naturais que mantêm o equilíbrio das populações. O objetivo deste trabalho foi verificar os efeitos da contaminação pelo hormônio 17α-etinilestradiol e sua interação com estressores naturais em girinos, utilizando como modelo a espécie Physalaemus cuvieri. Para isso, foi montado um experimento fatorial para avaliar os efeitos do etinilestradiol em diferentes concentrações (0, 0,005 ou 2,5 µg/L) e suas interações com densidade (alta ou baixa) e predador (presente ou ausente). Para avaliar os efeitos dos tratamentos, foram utilizadas, como variáveis resposta, a sobrevivência até a metamorfose, sobrevivência dos girinos não metamorfoseados, presença de malformações, tamanho na metamorfose, tempo de desenvolvimento e razão sexual. Foi constatada a diminuição da sobrevivência na maior concentração e em densidade alta, sendo mais evidente nos 30 primeiros dias, indicando um efeito agudo do hormônio e um estresse causado pela maior densidade. A maioria dos girinos que completaram a metamorfose, estavam expostos as concentrações 0 e 0,005 µg/L dos tratamentos com densidade baixa e ausência do predador, o que reflete a ação do etinilestradiol na concentração de 2,5 µg/L e em densidade alta. Foram encontrados indivíduos com malformações (localizadas principalmente nos membros), no qual tiveram maior ocorrência nos tratamentos expostos a 0,005 µg/L de etinilestradiol e densidade baixa, o que pode está ligado as menores taxas de sobrevivência e seleção de indivíduos mais fortes nos tratamentos com maior concentração e densidade, além de um possível efeito crônico sobre os girinos expostos a menor concentração. Existe a hipótese que o etinilestradiol age sobre os mecanismos hormonais reguladores da metamorfose, através da inibição da tireóide, fato que explicaria o desenvolvimento mais lento dos girinos nos tratamentos com 0,005 e 2,5 µg/L e o predador, que também pode diminuir o metabolismo dos girinos. O tamanho na metamorfose foi maior nos tratamentos na presença de 2,5 µg/L e predador, fato ligado ao maior tempo de desenvolvimento e possível estimulação da produção de Prolactina e Hormônio do Crescimento pelo etinilestradiol. Não houve mudança na razão sexual dos tratamentos expostos ao etinilestradiol, quando comparados ao controle. Este estudo indica que a exposição de girinos de P.cuvieri ao estrogênio 17α-etinilestradiol junto com estressores presentes em comunidades naturais, altera o seu desenvolvimento normal de diferentes formas.

Somatostatina (SST)/cortistatina (CST) y ghrelina son los más conocidos miembros de dos sistemas complejos formados por un gran número de péptidos y receptores (ssts y GHS-Rs, respectivamente), que, aunque exhiben claras diferencias desde el punto de vista estructural, evolutivo y funcional, presentan importantes similitudes y coincidencias. De hecho, además de los bien conocidos efectos opuestos de los sistemas SST/CST y ghrelina en la regulación de varios tipos celulares en la adenohipófisis, actuando directamente a nivel hipofisario o indirectamente a través del hipotálamo, ambos sistemas ejercen además un gran número de funciones biológicas diversas. Sin embargo, numerosas pruebas apuntan a que los sistemas de la SST/CST y de la ghrelina no son sistemas de neuro-péptidos y receptores aislados con funciones diversas y separadas, sino que componen un red de componentes interrelacionados fisiológicamente capaces de interaccionar funcionalmente a nivel molecular, celular y orgánico para regular multitud de funciones. Teniendo en cuenta estos antecedentes, el reto consiste en identificar, caracterizar y colocar en un contexto fisiológico y en una posición de posible aplicación terapéutica los elementos que componen el supra-sistema SST/CST/ghrelina y receptores, sus interacciones y los nuevos elementos. En este sentido, el objetivo general de la Tesis consiste en ampliar nuestros conocimientos acerca del papel de los sistemas de la SST/CST y la ghrelina en condiciones pato-fisiológicas, extendiendo las acciones más clásicas a nivel hipotálamo-hipofisario, e incorporando nuevas funciones e interacciones en la interfase del cáncer, el metabolismo y los desórdenes neurodegenerativos. Los resultados obtenidos en el presente estudio se resumen en los siguientes: 1)Los sistemas de la SST y la ghrelina están regulados diferencialmente y de manera tejido-dependiente en respuesta a insultos metabólicos en el eje hipotálamo-hipófisis-estómago, donde parece que estos sistemas se regulan de manera cruzada. De hecho, el ayuno altera, en ratones, la expresión de SST y ghrelina en dicho eje, así como los niveles de ghrelina plasmáticos. Interesantemente, los ratones deficientes en SST presentan elevados niveles de ghrelina en plasma y en estómago, lo que sugiere que los niveles basales de SST son importantes en la regulación de la ghrelina. Además, la regulación de la expresión de la enzima responsable de la acilación de la ghrelina, así como su actividad enzimática y la disponibilidad de sustrato, podrían actuar sinérgicamente para regular los niveles plasmáticos de ghrelina acilada bajo condiciones de estrés metabólico en ratones. 2)Los sistemas de la SST/CST y de la ghrelina están desregulados en cáncer de mama en mujeres, donde algunos de los nuevos componentes de estos sistemas (sst5TMD4, In2-ghrelina, GHS-R1b, GOAT) pueden tener una contribución especial en esta patología. Así, el receptor truncado sst5TMD4 está presente en cánceres de mama agresivos, donde se asocia con marcadores de mal pronóstico. Además, en líneas celulares derivadas de cáncer de mama, su expresión incrementa su malignidad, posiblemente a través de la disrupción de sistema "protector"compuesto por SST y sst2. Por otro lado, una nueva variante de la ghrelina, la In2-ghrelina, así como la GOAT o el GHS-R1b, están altamente expresados en muestras humanas de cáncer de mama y su sobreexpresión en líneas celulares de cáncer de mama provoca un incremento en su tasa de proliferación. 3)Los sistemas de la SST/CST y de la ghrelina, en pacientes con la enfermedad de Alzheimer, están profundamente alterados en el giro temporal, una de las regiones corticales más importantes en procesos cognitivos. Puesto que los estos sistemas parecen ejercer acciones protectoras influyendo directamente en los procesos relacionados con la memoria, la desregulación de estos sistemas en el lóbulo temporal de los pacientes con enfermedad de Alzheimer puede contribuir a las alteraciones de los procesos cognitivos observadas en esta patología. En conclusión, los sistemas de la SST/CST y de la ghrelina están presentes y regulados diferencialmente en ejes y en condiciones patológicas claramente diferentes y distantes de sus originales funciones neuroendocrinas a nivel hipotálamo-hipofisario. Por lo tanto, parece razonable proponer que la SST/CST, la ghrelina, los péptidos relacionados y sus receptores conforman dos sistemas pleiotrópicos profundamente interrelacionados, los cuales podrían ser considerados como nuevas dianas para la intervención terapéutica.

[ES] La Pioglitazona (PIO) y Rosiglitazona( ROSI) son antidiabéticos orales de la clase tiazolidinadiona que ejercen sus acciones antidiabéticas hipoglucemiantes, a medio y largo plazo, de forma indirecta por activación selectiva de los receptores PPARg que son muy abundantes en el tejido adiposo pero no tanto en el hígado y en el músculo. Se sabe que las TZDs son capaces de actuar sobre el hígado donde dichos receptores son bastante escasos por lo que se plantea la posibilidad de que las TZDs puedan ejercer efectos DIRECTOS no mediados por dichos receptores sobre el metabolismo hepático y su función mitocondrial. Nosotros demostramos que en hepatocitos de rata perifundidos con dihidroxiacetona, fructosa, glicerol y lactato más piruvato como sustratos, pioglitazona y rosiglitazona ejercen acciones antidiabéticas directas e independientes de la activación de los receptores PPARg, inhibiendo la gluconeogénesis y activando la glucólisis. En las mismas condiciones experimentales, PIO y ROSI antagonizan los efectos pro-diabéticos del glucagón disminuyendo la activación de la hidrólisis de la glucosa 6-fosfato. Todos los efectos inhibidores de PIO y ROSI sobre la gluconeogénesis y su activación estimulada por el glucagón, son mediados por una acción inhibidora directa sobre la enzima gluconeogénica más importante: la glucosa 6-fosfatasa. En hepatocitos de rata perifundidos con dihidroxiacetona, PIO y ROSI activan la degradación de la glucosa liberada desde el glucógeno por glucógenolisis hasta la formación de lactato más piruvato. Todos los efectos activadores de pioglitazona y rosiglitazona sobre la glucólisis y sobre la degradación de la glucosa liberada en la glucógenolisis, son mediados por una acción directa sobre la enzima glucolítica más importante: piruvato quinasa. Además, en hepatocitos intactos y mitocondrias aisladas, pioglitazona y rosiglitazona inhiben la respiración de forma dosis-dependiente al actuar sobre los complejos I y III de la cadena respiratoria. Las dos glitazonas muestran efectos antioxidantes muy claros en mitocondrias aisladas de hígado, inhibiendo la producción de especias reactivas de oxígeno a nivel mitocondrial., [EN] The Pioglitazone (PIO) and rosiglitazone (ROSI) are oral antidiabetic thiazolidinedione class that exert their hypoglycemic antidiabetic actions in the medium and long term, indirectly by selective activation of PPAR receptors which are abundant in adipose tissue but not both liver and muscle. It is known that TZDs are able to act on the liver, where these receptors are very rare so it raises the possibility that TZDs may exert direct effects not mediated by these receptors on liver metabolism and mitochondrial function. We showed that in rat hepatocytes perifundidos with dihydroxyacetone, fructose, glycerol and lactate over pyruvate as substrates, pioglitazone and rosiglitazone exert direct anti-diabetic actions independent of PPAR receptor activation by inhibiting gluconeogenesis and activating glycolysis. In the same experimental conditions, PIO and ROSI antagonize the pro-diabetic effects of glucagon decreased activation of the hydrolysis of glucose 6-phosphate. All the inhibitory effects of PIO and ROSI on gluconeogenesis and glucagon-stimulated activation are mediated by a direct inhibitory action on the most important gluconeogenic enzyme, glucose 6-phosphatase. Perifundidos rat hepatocytes with dihydroxyacetone, PIO and ROSI activate the degradation of glucose released from glycogen by glycogenolysis to the formation of lactate pyruvate. All activating effects of pioglitazone and rosiglitazone on glycolysis and the degradation of glucose released in glycogenolysis are mediated by a direct action on the most important glycolytic enzyme, pyruvate kinase. Furthermore, in intact hepatocytes and isolated mitochondria, pioglitazone and rosiglitazone inhibit breathing dose-dependent manner by acting on complex I and III of the respiratory chain. The two glitazones show very clear antioxidant effects in isolated mitochondria of liver, inhibiting the production of reactive oxygen species in mitochondria.

A falência ovariana prematura (FOP) acomete aproximadamente 1:1000 mulheres antes dos 30 anos, 1:250 em torno dos 35 anos e de 1:100 aos 40 anos. Manifesta-se como amenorréia primária ou amenorréia secundária, não podendo ser considerada definitiva em todas as pacientes, uma vez que a concepção espontânea pode ocorrer em até 5–10% das FOP. Na maioria dos casos apresenta-se na forma esporádica, pois apenas 5% apresentam história familial. Entre as causas conhecidas estão as alterações cromossômicas, dos genes ligados ao cromossomo X e cromossomos autossômicos, doenças autoimunes, alterações tóxicas e iatrogênicas. Com relativa freqüência, a causa etiológica não é obtida, sendo então denominada de idiopática. O diagnóstico da FOP é feito baseado na história clínica e níveis elevados do hormônio folículo estimulante (FSH), sendo posteriormente investigadas as causas mais específicas. O manejo clínico visa o suporte emocional, o tratamento hormonal com estrogênios e progestogênios, a abordagem da infertilidade e a prevenção de co-morbidades como a osteoporose e potencial maior risco cardiovascular. Premature ovarian failure occurs in approximately 1:1000 women before 30 years, 1:250 by 35 years and 1:100 by the age of 40. It is characterized by primary or secondary amenorrhea and cannot be considered as definitive because spontaneous conception may occur in 5 to 10% of cases. In 95% of cases, premature ovarian failure is sporadic. The known causes of premature ovarian failure include chromosomal defects, autoimmune diseases, exposure to radiation or chemotherapy, surgical procedures, and certain drugs. Frequently, however, the etiology is not clear and these cases are considered to be idiopathic. Premature ovarian failure is defined by gonadal failure and high serum follicle-stimulating hormone (FSH) levels. Clinical approach includes emotional support, hormonal therapy with estrogens and progesterone or progestogens, infertility treatment, and prevention of osteoporosis and potential cardiovascular risk.

Prevalencia de sindrome metabolica em pacientes sul-brasileiras com sindrome dos ovarios policisticos

A prolactina (PRL) é um hormônio peptídico sintetizado e secretado, principalmente, pelas células lactotróficas da glândula hipófise anterior, tendo como principal função a indução e manutenção da lactação. Existem três formas moleculares de PRL na circulação: PRL monomérica (little prolactin) com massa molecular de cerca de 23KDa, PRL dimérica (big prolactin) com 45 a 50KDa, e macroprolactina (big big prolactin) maior do que 150KDa. Esta última está geralmente ligada a imunoglobulinas G. Em condições normais, ou em pacientes com hiperprolactinemia sintomática, predomina em circulação a forma monomérica. A hiperprolactinemia é uma das disfunções endócrinas hipotálamo-hipofisárias mais comuns em mulheres em idade reprodutiva. Ocorre mais freqüentemente por adenomas hipofisários (prolactinomas) e secundária ao uso de drogas com ação central. Na ausência de causas conhecidas, a hiperprolactinemia é considerada como idiopática. Finalmente, pode estar associada ao predomínio de macroprolactina no soro, sendo denominada macroprolactinemia. A suspeita de macroprolactinemia ocorre quando um paciente com hiperprolactinemia não apresenta os sintomas típicos e/ou não tem evidências radiográficas de tumor na hipófise, embora a macroprolactinemia possa estar ocasionalmente associada a prolactinomas. Os objetivos deste trabalho foram: avaliar a freqüência de macroprolactinemia, através da precipitação com PEG, numa amostra de mulheres com hiperprolactinemia; descrever associações da macroprolactinemia com variáveis clínicas, hormonais e de imagem da hipófise; e caracterizar a evolução clínica e dos níveis de prolactina durante o seguimento desta coorte. Realizou-se um estudo descritivo, onde foi estudada uma coorte de pacientes do sexo feminino (n = 32), consultando no HCPA de 1989 a 2005, com diagnóstico de hiperprolactinemia (>26ng/mL) e seguimento com agonistas da dopamina. Após um período de 3 meses sem tratamento (washout), as pacientes dosaram prolactina para investigação dos níveis séricos e presença de macroprolactina, e foram classificadas como aquelas que normalizaram os níveis séricos de prolactina durante estes anos de seguimento (Grupo Hprl prévia) e as que continuaram hiperprolactinêmicas. Estas foram reclassificadas como grupo de hiperprolactinêmicas cuja forma circulante predominante é a prolactina monomérica (Grupo Hprl mono) e o grupo de hiperprolactinêmicas com predominância de macroprolactina (Grupo Hprl macro). O percentual de macroprolactina foi calculado através dos valores de PRL totais obtidos das amostras íntegras em comparação com os níveis de PRL encontrados nas amostras precipitadas com PEG. Recuperações de prolactina monomérica > 50% classificaram a amostra como tendo predomínio de formas monoméricas, o percentual de recuperação  40% foi considerado como predomínio de formas de alto peso molecular (macroprolactinemia), e recuperação entre 40 e 50% indicou indefinição da forma predominante de PRL. A freqüência de macroprolactina foi de 28,1% (n = 32). Pacientes hiperprolactinêmicas com macroprolactinemia são significativamente mais jovens do que as hiperprolactinêmicas com a forma monomérica. Como esperado, tanto as pacientes do grupo Hprl macro como Hprl mono apresentam níveis de prolactina significativamente mais elevados que as pacientes Hprl prévia. Através do método de precipitação com PEG, identificou-se a forma predominante de prolactina na circulação em 71,8% dos casos (n = 32). Verificamos ainda que as pacientes com predominância de macroprolactina não apresentam os sintomas da síndrome hiperprolactinêmica, e na maioria dos casos, possuem exames de imagem por TC normal.

En niños recién nacidos con genitales masculinos correctamente desarrollados o con genitales ambiguos, podemos encontrar que los testículos no son palpables en las bolsas escrotales. Se debe distinguir en estos casos entre una falta total de testículos y la presencia de tejido testicular en la cavidad abdominal. Las causas pueden ser primariamente testiculares, o secundarias a un defecto del eje hipotálamo-hipofisario. En ambos casos es menester identificar la existencia y capacidad funcional de los testículos. Entre los métodos diagnósticos existentes para definir la existencia de gónadas, contamos la exploración quirúrgica, que provee un diagnóstico definitivo, si bien las gónadas pueden ser difíciles de encontrar. Es una exploración invasiva y puede ocasionar un compromiso en el tejido gonadal. Los métodos de diagnóstico por imágenes son pocos sensibles, con excepción de la resonancia magnética nuclear (RMN), que en el niño debe ser realizada bajo anestesia. Las mediciones en sangre de las hormonas del eje hipotálamo-hipófiso-gonadal son más adecuadas para definir la presencia y capacidad funcional del tejido testicular. Esto ha sido demostrado en muchos trabajos en la niñez. Sin embargo no existen en la literatura trabajos sistemáticos que definan con precisión el patrón de cambio de los valores normales de las hormonas del eje hipotálamo-hipófiso-gonadal en el período neonatal. El objetivo del presente trabajo ha sido describir los cambios que ocurren en los valores de LH, FSH, Testosterona, AMH, Inhibina B y Pro-aC dentro del primer mes de vida en varones normales. Como medida comparativa, se midieron los valores de las mismas hormonas en niñas recién nacidas y de 1 mes de vida., Facultad de Ciencias Exactas

A síndrome dos ovários policísticos atinge 5 - 10% das mulheres em idade fértil e mais de 40% destas pacientes apresenta obesidade e resistência insulínica, o que aumenta o risco para o desenvolvimento do diabetes mellitus tipo 2 (DM2). Numerosos genes poderiam contribuir para o desenvolvimento do DM2 e outras alterações metabólicas. Dentre estes o gene da calpaína-10 (CAPN-10), tem sido associado com DM2 em populações mexicanosamericanos, e em duas populações do Norte da Europa (Finlândia e Alemanha). No presente estudo analisamos o genótipo de 96 pacientes hiperandrogênicas reunidas em dois grupos: Síndrome dos ovários policísticos (PCOS) e Hirsutismo idiopático (HI), com relação à freqüência de quatro polimorfismos do gene da CAPN-10 (SNP-44, 43, 19 e 63). Foram ainda realizadas análises de associação entre a freqüência alélica dos polimorfismos e características clínicas das pacientes, com ênfase na obesidade e resistência insulínica. A variação genética da CAPN-10 foi avaliada a partir do DNA genômico por amplificação pela Polimerase Chain Reaction (PCR) e PCR-aleloespecífico (Teste de AMRS) dos fragmentos que contém os polimorfismos do gene da CAPN-10. Nossos resultados mostraram que não houve diferença entre as freqüências genotípicas e alélicas dos SNPs 44, 43, 19 e 63 entre os grupos PCOS e HI. Por outro lado, a comparação das características clínicas dos dois grupos mostrou que o alelo Ins do SNP-19 da CAPN-10 tendeu a ser mais freqüente entre as pacientes PCOS estratificadas para sobrepeso e obesas (p≤0,05). Não houve diferença na comparação das características clínicas avaliadas e a freqüência alélica para os SNPs 43 e 63. A análise da amostra total de pacientes hirsutas, ou seja, pacientes com PCOS e HI agrupadas não evidenciou diferença entre a freqüência alélica das variantes genéticas estudadas para a CAPN-10 e a presença de resistência insulínica. Tendo em vista o efeito modesto dos SNPs 44, 43, 19 e 63 avaliados isoladamente nestas pacientes, estudos adicionais serão necessários avaliando a freqüência desses polimorfismos na população do Sul do Brasil.

O câncer de próstata (CP) é uma das principais causas de doença e morte, representando no Brasil a segunda causa de óbitos por câncer em homens. A hiperplasia prostática benigna (HPB) é uma doença progressiva de alta prevalência, com evidências histológicas em 50% dos homens aos 50 anos e 90% aos 80 anos de idade. A patogênese das neoplasias prostáticas tem sido associada à ação dos androgênios e a seu receptor nuclear específico, embora os mecanismos moleculares que envolvem os processos de proliferação, diferenciação e apoptose não estejam bem estabelecidos, assim como os mecanismos de transformação neoplásica e carcinogênese. Co-ativadores e co-repressores podem também contribuir para a carcinogênese prostática, ligando-se diretamente aos receptores nucleares, recrutando proteínas adicionais e interagindo com a maquinaria transcricional para aumentar a transcrição de genes-alvo. Polimorfismos do receptor de androgênios e da 5 redutase tipo 2 foram identificados e poderiam estar associados com risco para CP. Genes reguladores do ciclo celular e da apoptose, bem como fatores de crescimento, também participam de processos relacionados com a tumorigênese prostática. Assim, alterações no padrão da expressão gênica do tecido normal podem levar ao desenvolvimento do fenótipo maligno e potencialmente estes genes podem servir como marcadores de prognóstico. Com o advento de novas tecnologias moleculares, o número de genes marcadores potenciais para o CP cresce dia a dia, mas os dados atuais requerem ainda validação com maior número de amostras e correlação com o processo da doença. Trazê-los do ambiente de laboratório para o uso clínico requer uma análise rigorosa e há, portanto, um longo caminho ainda a percorrer. Prostate cancer (PC) is one of the main causes of disease and death and represents the second cause of death among men in Brazil. Benign prostate hyperplasia is a progressive and prevalent disease. It is estimated that men present around 50% and 90% of histological evidences of prostate hyperplasia at 50 and 80 years, respectively. While the pathogenesis of prostate neoplasias has been closely related to androgen and their specific nuclear receptor, the molecular mechanisms of cell growth, differentiation and apoptosis processes are still not clearly established. Co-activators and co-repressors could also contribute to prostate carcinogenesis by their binding to nuclear receptors or by interacting with the transcriptional machinery in order to increase the transcription of target genes. AR and type 2 5 reductase polymorphisms seem to be associated to the risk for PC. In addition, apoptosis and cellular cycle regulator genes, as well as growth factors, have been reported to be associated with the prostate tumorigenesis. Therefore, changes on the gene expression of normal tissue may be associated to the development of malign phenotype and these genes could be regarded as candidates of prognosis markers. The number of these genes increases every day but the present data needs further studies and correlation with the disease progression.

The aim of the present study was to determine the expression of the genes for type 1 (SDR5A1) and type 2 (SDR5A2) 5α-reductase isoenzymes in scalp hairs plucked from 33 hirsute patients (20 with polycystic ovary syndrome and 13 with idiopathic hirsutism) and compare it with that of 10 men and 15 normal women. SDR5A1 and SDR5A2 expression was estimated by RT-PCR using the gene of the ubiquitously expressed protein ß2-microglobulin as an internal control. The results are expressed as arbitrary units in relation to ß2- microglobulin absorbance (mean ± SEM). SDR5A2 expression was not detected in any hair samples analyzed in this study. No differences were found in SDR5A1 mRNA levels between men and normal women (0.78 ± 0.05 vs 0.74 ± 0.06, respectively). SDR5A1 gene expression in the cells of hair plucked from the scalp of normal women (0.85 ± 0.04) and of women with polycystic ovary syndrome (0.78 ± 0.05) and idiopathic hirsutism (0.80 ± 0.06) was also similar. These results indicate that SDR5A1 gene expression in the follicular keratinocytes from the vertex area of the scalp seems not to be related to the differences in hair growth observed between normal men and women and hirsute patients. Further studies are needed to investigate the expression of the 5α-reductase genes in other scalp follicular compartments such as dermal papillae, and also in hair follicles from other body sites, in order to elucidate the mechanism of androgen action on the hair growth process and related diseases.

A síndrome dos ovários policísticos (PCOS) tem sido associada à resistência insulínica/hiperinsulinemia compensatória e a uma maior prevalência de intolerância aos carboidratos (ICH) e diabetes mellitus tipo 2 (DM2). Há controvérsia na literatura sobre se a hiperinsulinemia, presente nas pacientes com PCOS, é independente ou não da obesidade. No presente estudo, avaliaram-se as características hormonais e o perfil metabólico glico-insulínico e lipídico em mulheres hirsutas com o diagnóstico de PCOS em comparação com pacientes com hirsutismo idiopático (HI), estratificadas de acordo com o índice de massa corporal (IMC 25kg/m²). Foram dosados androgênios, SHBG, gonadotrofinas, além de glicose, lipídeos e lipoproteínas, insulina e pró-insulina. Foi também realizado o teste de tolerância oral à glicose (75g) para avaliação da curva de glicose e insulina. Concluímos que as pacientes com PCOS e IMC > 25kg/m² apresentam maior prevalência de obesidade abdominal, de hiperinsulinemia, hipertrigliceridemia e curvas glicêmicas alteradas em relação às pacientes PCOS e IMC 25kg/m²). Androgens, SHBG, gonadotropins as well as glucose, lipids and lipoproteins, insulin and proinsulin were measured. A 75g glucose oral tolerance test was also performed to evaluate the glucose and insulin curves. We conclude that patients with PCOS and BMI > 25kg/m² presented higher prevalence of abdominal obesity, hyperinsulinemia, hypertrygliceridemia and IGT and DM2 when compared to PCOS patients with BMI

Evidências acumuladas indicam que a saúde dos seres humanos, animais e espécies selvagens pode sofrer conseqüências adversas da exposição a produtos químicos presentes no meio ambiente e que interagem com o sistema endócrino, tais como bifenilas policloradas, dioxinas, estrogênios de ocorrência natural e sintéticos. Por outro lado, permanecem incertezas científicas com respeito aos dados relatados e, também, quanto à hipótese de haver níveis suficientemente elevados de exposição a estes agentes, a ponto de exercer efeito estrogênico generalizado sobre a população. Este trabalho revisa os principais tópicos relacionados a um dos xenoestrogênios que vem sendo mais recentemente estudado: o Bisfenol A (BFA), um monômero de plástico poli-carbonato, com pouca homologia estrutural com o estradiol (E2) mas semelhante ao dietilestilbestrol (DES), hexestriol e componente bisfenólico do tamoxifeno. O presente trabalho comenta e analisa criticamente os efeitos do BFA sobre o trato reprodutivo e função lactotrófica em animais de experimentação, à luz das informações disponíveis e experiência do grupo nesta área, e recomenda algumas necessidades de pesquisa. Some evidences indicate that humans and domestic and wildlife species might suffer adverse consequences from exposure to environmental chemicals that interact with the endocrine system, including polychlorinated biphenyls, dioxins, synthetic and naturally occurring plant estrogens. However, considerable scientific uncertainty remains regarding the causes of these reported effects and whether sufficiently high levels of endocrine-disrupting chemicals exist in the ambient environment to exert adverse effects on the general population. This review summarizes the principal issues related to bisphenol A, an environmental endocrine disrupting chemical with estrogen activity. Bisphenol A is a monomer of plastics and has little structural homology with estradiol, sharing similarity with synthetic estrogens such as diethylstilbestrol and with the bisphenolic component of tamoxifen. In the light of available information and our laboratory experience in this field of research, this work comments and critically analyses the effects of BPA on the reproductive tract and lactotroph function in several rat strains, and also offers some recommendations for additional research.

Relevância da avaliacao dos sintomas e dosagem de estradiol no tratamento de reposicao hormonal em pacientes pos-menopausicas

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior Captacao de "antpot. 131 i' na" pela glandula tiroide, foi observada utilizando o homogeneizado de membrana celular tiroidiana como modelo biologico. Os homogeneizados celulares de baco, rim e figado, inibira m significativamente esta captacao. A atividade inibitoria foi crescente com a utilizacao de sobrenadantes, de homogeinizados de baco pre-incubado como tambem com a segunda fracao obtida da purificacao deste so brenadantes. O baco de animais esquistossomoticos, apresentou o efeitoinibitorio mais pronunciado sobre a captacao de "antpot. 131 i' na" pela membrana celular tiroidiana