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Tesis-Universidad de Murcia., Consulte la tesis en: BCA. GENERAL. ARCHIVO UNIVERSITARIO. T.M. 3764., Consulte la tesis en: BCA. GENERAL. Fac. Veterinaria. Departamentos. E002B Tesis 127.

Introducción. La psoriasis es una enfermedad inflamatoria crónica de alta prevalencia cuyas formas moderadas y severas se asocian a una reducción de la calidad de vida y mayor comorbilidad. En relación a los tratamientos clásicos, los fármacos biológicos muestran elevada eficacia y mejor perfil de seguridad. Sin embargo, no están exentos de riesgo y sus elevados costes amenazan el sostenimiento del tratamiento de estos pacientes dentro de los sistemas públicos de salud. En este contexto, es especialmente importante que las decisiones de los clínicos y los gestores sanitarios se basen en las mejores pruebas científicas. Las revisiones sistemáticas, acompañadas en ocasiones de un meta-análisis, constituyen los documentos estándar para sintetizar la evidencia. El desarrollo de recomendaciones metodológicas y de herramientas para la conducción, notificación y el control de su calidad ha permitido minimizar el grado de incertidumbre de las estimaciones que establecen sobre los efectos analizados, mejorando así la eficiencia de las recomendaciones derivadas. Sin embargo, se ha observado en los últimos años un crecimiento exponencial de revisiones sistemáticas conflictivas. Conocer la calidad metodológica y el riesgo de sesgo de estas publicaciones en psoriasis permitirá seleccionar sólo las de mayor calidad científica. Objetivos. En el presente proyecto de investigación nos propusimos una serie de objetivos primarios y secundarios que abordaríamos mediante dos estrategias. En primer lugar, llevamos a cabo una revisión sistemática y un meta-análisis en red sobre el tratamiento a corto plazo de la psoriasis en placas moderada-severa en adultos con fármacos biológicos. En segundo lugar, evaluamos la calidad metodológica y el riesgo de sesgo de las revisiones sistemáticas y los meta-análisis publicados sobre psoriasis, incorporando datos y metadatos relacionados con las revisiones, las revistas y los autores, con el fin de elaborar modelos predictivos que pueden servir de ayuda en la toma de decisiones. Metodología. Para la conducción y notificación de las revisiones sistemáticas se empleó el manual de la Colaboración Cochrane y las recomendaciones PRISMA (Preferred Reporting Items for Systematic Reviews and Meta-Analyses), respectivamente . La evaluación de la calidad metodógica y del riesgo de sesgo de las revisiones sistemáticas se realizó con AMSTAR (A Measurement Tool to Assess the Methodological Quality of Systematic Reviews) y ROBIS (Risk Of Bias In Systematic Reviews), respectivamente. En la síntesis se aplicó el metaanálisis en red para la comparación de los fármacos y el análisis de regresión logística, análisis de componente principal y análisis de clustering en los estudios metaepidemiológicos. Resultados. Los resultados derivados de los análisis anteriores han sido publicados como tres artículos originales en revistas de alto impacto científico (todas en el primer decil de su área temática). En resumen, tras publicar un protocolo a priori en PROSPERO, se llevó a cabo la revisión sistemática y el metaanálisis en red, incluyendo 27 ensayos clínicos aleatorizados y controlados. Infliximab 5 mg/Kg cada 8 semanas y secukinumab 300 mg cada 4 semanas fueron los tratamientos más eficaces para los resultados de PASI 75 y PASI 90 en la semana 10-16, respectivamente. Además, ambos tratamientos presentaron el mayor riesgo de tener al menos un efecto adverso (42.1 %) o al menos una infección (52.2%), respectivamente. No se encontraron diferencias en los acontecimientos adversos severos. Ustekinumab 90 mg cada 12 semanas fue el fármaco con mejor perfil riesgo beneficio para las medidas estudiadas. La calidad de la evidencia para los valores de eficacia fue alta en el caso de ustekinumab y modera o baja para el resto. Para los datos de seguridad resultó ser, en general, baja o muy baja. Respecto a los estudios metaepidemiológicos relacionados con la evaluación y predicción de la calidad metodológica, se incluyeron 220 revisiones sistemáticas publicadas por 741 autores de 520 instituciones diferentes procedentes de 32 países. Tan sólo el 17% de las revisiones presentaron alta calidad metodológica según AMSTAR. La inclusión de metaanálisis (OR 6.22, IC95% 2.78-14.86), la financiación por instituciones acad ´ micas (OR 2.90, IC95% 1.11-7.89), un número elevado de autores con conflicto de intereses (OR0.90, IC95% 0.82-0.99), el factor de impacto de la revista (OR2.14, IC95% 1.05-6.67), el factor de impacto a 5 años (OR 1.34, IC95% 1.02-1.40) y el número de páginas (OR 1.08, IC95% 1.02-1.15) fueron predictoras de alta calidad metodológica. En referencia al análisis efectuado para comparar AMSTAR y ROBIS, se evaluaron 139 revisiones sistemáticas sobre intervenciones en psoriasis, de las que únicamente el 22.3% presentaron alta calidad metodológica y un 14% bajo riesgo de sesgo. El porcentaje de revisiones sistemáticas de alta calidad con alto riesgo de sesgo fue mayor del 50%. Los componentes que mejor explicaron la variabilidad de los resultados de AMSTAR y ROBIS están relacionados con la evaluación de los estudios primarios de las revisiones sistemáticas. Background. Psoriasis is a highly prevalent chronic inflammatory skin disease whose moderate and severe forms are associated with a reduction of quality of life and a greater comorbidity. In relation to the classic treatments, biologics show high efficacy and better safety profile. However, they are not risk-free and their high costs threat to sustain the treatment of these patients within the public health systems. In this context, it is especially important that decisions taken by clinicians and health managers will be supported on the best evidence. Systematic reviews and a meta-analysis constitute the standard documents for summarizing scientific evidence. Methodological instruments and protocols used in the development, notification, and quality control of these documents have allowed to reduce the degree of uncertainty of drug effect estimations, thus improving the efficiency of the derived recommendations. However, it has been observed in recent years an exponential growth of systematic reviews of dubious scientific quality. By assessing the methodological quality and the risk of bias of these publications, we can select only those of the highest scientific quality. Objectives. In the present research project we proposed a series of primary and secondary objectives that were achieved through two different strategies. First, we carried out a systematic review and a network meta-analysis on the short-term effect of biologics for the treatment of moderate-severe plaque psoriasis in adults. Second, we assessed the methodological quality and the risk of bias of systematic reviews and meta-analyses published on psoriasis, by incorporating data and metadata related to articles, journals and authors, in order to develop a predictive model that can be helpful in decision-making processes. Methodology. We followed the Cochrane Handbook for Systematic Reviews on interventions and the PRISMA (Preferred reporting items for Systematic reviews and Meta- Analyses) recommendations to for systematic reviews conduction and notification respectively. The evaluation of the methodological quality and the risk of bias of the systematic reviews were performed with AMSTAR (A Measurement Tool to Assess the Methodological quality of Systematic reviews) and ROBIS (Risk of Bias In (Systematic reviews) tools, respectively. For metaepidemiological analyses different analytic approach were followed: multinomial logistic regresion models, principal component analysis, clustering analysis. Results. The results derived have been included in three original articles published in high-impact scientific journals (all ranked in the 10th percentile). In summary, after publishing a priori protocol in PROSPERO, it was carried out a systematic review and network meta-analysis, including 27 randomized-controlled clinical trials. Infliximab 5 mg/Kg every 8 weeks and secukinumab 300 mg every 4 weeks were the most effective treatments in week 10-16 accounting for PASI 75 and PASI 90 results respectively. In addition, both treatments presented the highest risk of having at least one adverse effect (42.1 %) or at least one infection (52.2 %), respectively. No differences were found in severe adverse events among the treatments. Ustekinumab 90 mg Every 12 weeks was the treatment with the best risk vs benefit profile. The quality of the evidence for efficacy estimates was high in the case of ustekinumab and moderate or low for the rest drugs. For the safety, quality of the evidence was, in general, low or very low. With respect to the metaepidemiological studies related to the evaluation and prediction of the methodological quality, 220 systematic reviews published by 741 authors of 520 different institutions from 32 countries were included. Only 17% of the reviews presented high methodological quality according to AMSTAR tool. The inclusion of a metan alisys (OR 6.22, (IC95% 2.78-14.86), funding by academid institutions (OR 2.90, IC95% 1.11-9.19), low number of authors with conflict of interests (OR 0.90, IC95% 0.82-0.99), a high journal impact factor (OR 2.14, IC95% 1.05-6.67), a high 5 years journal impact factor (OR 1.34, IC95% 1.02-1.40), and a high number of pages (OR 1.08, IC95% 1.02-1.15) were predictors of high methodological quality. In reference to the analysis carried out to compare AMSTAR and ROBIS, we evaluated 139 systematic reviews on interventions in psoriasis, of which only 22.3% presented a high methodological quality and 14 % a low risk of bias. The percentage of systematic reviews with high methodological quality and with high risk of bias was greater than 50%. The components that best explained the variability of the results of AMSTAR and ROBIS are related with the evaluation of the primary studies of systematic reviews.

La piel es sin duda el órgano por excelencia en la anatomía humana, por extensión y por su implicación en múltiples funciones que incluye la síntesis de vitamina D(1)(2)(3). La integridad de la piel en muchas ocasiones se puede ver alterada por distintos mecanismos lesivos, que abocan muchas veces en una herida. El objetivo de este estudio experimental ha sido comprobar la eficacia de diferentes formulaciones de curcumina en nanopartículas, aplicadas en las heridas de espesor total en ratas (Sprague-Dawley) sanas y en ratas diabetizadas. Las distintas preparaciones se aplicaron a diario en las heridas y se hizo una evaluación macroscópica del diámetro de la herida, así como un estudio histomorfométrico e inmunohistoquímico (sólo en ratas diabéticas) en los días 3, 7 y 14. En el estudio macroscópico de ratas sanas se obtuvo una más rápida cicatrización en las tratadas con curcumina en glicerosomas recubiertos de ácido hialurónico (AH). Los resultados de las variables histomorfométricas demostraron una clara tendencia a la reepitelización precoz del grupo de ratas sanas tratadas con curcumina en glicerosomas+AH, si bien no se hallaron diferencias estadísticamente significativas (d.e.s). El resto de variables histomorfométricas no mostraron d.e.s El estudio inmunohistoquímico no relevó d.e.s. Concluimos que la eficacia de la encapsulación de curcumina en glicerosomas+AH frente a otras presentaciones se haya debido a la consecución de una mayor concentración de curcumina en la herida y mayor estabilidad, así como por el efecto adyuvante del AH (antiinflamatorio y promotor de la movilidad celular). The skin is undoubtedly the organ par excellence in human anatomy, by extension and by its involvement in multiple functions that include the synthesis of vitamin D. On many occasions, the integrity of the skin can be altered by different damaging mechanisms, which often lead to a wound. The objective of this experimental study has been to verify the efficacy of different formulations of curcumin in nanoparticles, applied in full thickness wounds in healthy rats (Sprague-Dawley) and in diabetic rats. The different preparations were applied daily to the wounds and a macroscopic evaluation of the wound diameter was made, as well as a histomorphometric and immunohistochemical study (only in diabetic rats) on days 3, 7 and 14. In the macroscopic study of healthy rats, faster healing was obtained in those treated with curcumin in hyaluronic acid (HA) -coated glyerosomes. The results of the histomorphometric variables demonstrated a clear trend towards early re-epithelialization of the group of healthy rats treated with curcumin in glycerides + HA, although no statistically significant differences were found (s.d.). The rest of the histomorphometric variables did not perform s.d. The immunohistochemical study did not reveal s.d. We conclude that the efficacy of curcumin encapsulation in glyerosomes + HA compared to other presentations was due to the achievement of a higher concentration of curcumin in the wound and greater stability, as well as the adjuvant effect of HA (anti-inflammatory and promoter of HA). cell mobility).

Introducción: El cáncer de piel no melanoma tiene una alta incidencia en la población mundial, y sus cifras aumentan cada año. Las radiaciones solares son la causa principal de este tipo de cáncer en humanos. Aunque la mayoría de estudios realizados sobre fotocarcinogénesis in vivo utilizan UVB como fuente de radiación, la RUVA también es carcinogénica a largo plazo. Objetivos: Los extractos de granada y cacao han sido utilizados desde los orígenes de la humanidad con fines medicinales. Algunas de sus propiedades han sido propuestas recientemente como eficaces en la prevención de la fotocarcinogénesis y el fotoenvejecimiento, pero no han sido probados en modelos in vivo utilizando RUVA, por lo que éste es el propósito de nuestro trabajo. Material y métodos: Utilizamos 27 ratones SKH-1/CRL hembras, que fueron divididos en tres grupos: Grupo 1 (control irradiado, n=9), Grupo 2 (ratones irradiados tratados con extracto de granada, n=9) y Grupo 3 (ratones irradiados tratados con extracto de cacao, n=9). Todos los animales fueron irradiados con la lámpara de bronceado cosmético Type HB 554/01/A que emite un 98,6% de UVA y un 1,4% UVB) 3 veces a la semana, durante una hora, con un total de 80 sesiones. Se realizó estudio macroscópico con la medida de áreas de lesión mediante análisis de imagen, así como estudio microscópico de la parte dorsal de la piel de los animales con Hematoxilina-Eosina para determinar el tipo y severidad de las lesiones, así como el estudio inmunohistoquímico con los marcadores PCNA, p53, MMP-9 y TIMP-1. Resultados: Hemos observado una menor presencia de lesiones macroscópicas en los animales tratados con PGE (p

INTRODUCCIÓN La mucositis es uno de los efectos secundarios más frecuentes cuando un paciente es sometido a terapias contra el cáncer. Su incidencia está entre un 20-40% de los pacientes que reciben quimioterapia convencional, y un 80% de los pacientes con trasplantes de médula ósea y que han recibido radioterapia de cabeza y cuello. La complejidad del proceso de reparación de los tejidos, está influenciada por diferentes factores. La apigenina es un flavonoide natural con propiedades antiinflamatorias e antioxidantes, y posee la capacidad de neutralizar radicales libres. OBJETIVOS Objetivo general: El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto de la administración de apigenina potásica o dexametasona sobre un modelo animal de mucositis oral inducida por el quimioterapéutico 5- Fluorouracilo. Objetivos específicos Reproducir el modelo experimental de mucositis oral en hámsters mediante la aplicación sistémica del quimioterapéutico 5- Fluorouracilo. Evaluación clínica de las lesiones orales desarrolladas y su evolución con la administración tópica de apigenina potásica o dexametasona, y estudiar los cambios producidos en los distintos tiempos de sacrificio (5, 7,10 y 14 días). Analizar mediante el estudio anatomopatológico el área de mucositis oral, y valorar los cambios orales a los 5, 7,10 y 14 días de la aplicación apigenina potásica o dexametasona. MATERIALES Y MÉTODOS Para la realización de este estudio, se utilizaron 36 hamsters Sirios que fueron divididos en 3 grupos, de los cuales se obtuvo 72 muestras: Control (50% ácido acético + 5-FU); grupo II (50% ácido acético + 5-FU + Dexametasona); grupo III (50% ácido acético + 5-FU + Apigenina Potásica). Seis animales de cada grupo fueron sacrificados en los días 5,7, 10 y 14, una vez inducida la mucositis. Las úlceras fueran clasificadas mediante un sistema de puntuaciones clínicas. El estudio histomorfométrico se realizó para cuantificar el número de células inflamatorias en las lesiones. RESULTADOS El proceso de curación en el grupo control fue más lento en comparación con los grupos tratados con Dexametasona y Apigenina. Se observan diferencia estadísticamente significativas entre el grupo tratado con Apigenina potásica con respecto a los otros dos grupos en el día 10 del experimento. El infiltrado inflamatorio era menor en el grupo de la Apigenina potásica en los días 7 y 10 del estudio, en comparación con el resto (p, INTRODUCTION Mucositis is an important side affect of cancer therapy, occurring in nearly 20% to 40% of patients receiving conventional chemotherapy, 80% of those under high-dose chemotherapy as conditioning for hematopoietic stem cell transplantation and nearly all patients receiving head and neck radiation therapy. Tissue repair complexity may be influenced by different factors. Naturally occurring flavonoids, like apigenin, have been shown to possess anti-inflammatory properties related to their antioxidant and free radical scavenging ability. PURPOSE General objective: - The aim of this study was to evaluate the effect of administration of apigenin potassium or dexamethasone on an animal model of oral mucositis induced by 5-fluorouracil chemotherapy. Specific objectives: - Replicate the experimental model of oral mucositis in hamsters by the systemic application of 5-fluorouracil chemotherapy. - Evaluate clinically the developed oral lesions and its evolution with topical administration of potassium apigenin or dexamethasone, and study the changes at different times of sacrifice (5, 7, 10 and 14 days). - Analyse by anatomopathological study the area of oral mucositis, and evaluate oral changes at 5, 7,10 and 14 days of application potassium apigenin or dexamethasone. MATERIALS AND METHODS Seventy-two male Syrian hamster were divided into three groups, and 72 samples were obtained: control (50% acetic acid + 5-FU); 50% acetic acid + 5-FU + Potassium Apigenin (KA) and 50% acetic acid + 5-FU + Dexametasone. Six animals from each group were sacrificed 5, 7, 10 and 14 days after inducing the mucositis; ulcers were assessed by imaging analysis using a scoring system (Cho, 2006). The number of inflammatory cells in the ulcerated region was quantified in all periods through histomorphometric analysis (H&E). RESULTS The healing process of the control group was slower than that of KA and Dexametasone-treated groups. There was significant difference between KA and control group in the 10-day period. Lower quantity of inflammatory cells in the KA treated group in comparison to control group in the 7- and 10-day periods was observed (p

El carcinoma oral de células escamosas es el cáncer más frecuente de cabeza y cuello, y está caracterizado por una baja tasa de supervivencia y mal pronóstico. La quimioprevención de esta enfermedad mediante extractos naturales constituye un importante campo de investigación en la actualidad. En el presente estudio hemos aplicado el modelo de carcinogénesis oral inducida por 7,12-dimetil-1,2-benzatraceno (DMBA) sobre 61 hámster sirios (Mesocricatus auratus) para estudiar el efecto quimiopreventivo de los compuestos fenólicos: apigenina potásica, catequinas del cacao, eriocitrina y ácido rosmarínico. De los resultados obtenidos podemos concluir que todos los compuestos fenólicos han demostrado reducir la incidencia tumoral, y en especial la apigenina potásica y el ácido rosmarínico fueron los compuestos que mostraron mejores resultados; la primera reduciendo considerablemente el volumen tumoral de los carcinomas desarrollados, y ambos compuestos fueron los que redujeron de forma más significativa la incidencia y agresividad de los tumores desarrollados. PALABRAS CLAVE: carcinogénesis oral, apigenina, catequinas del cacao, eriocitrina, ácido rosmarínico, DMBA, hámster. Effect of the phenolic compounds apigenin, cocoa cathechin, rosmarinic acid and eriocitrin on oral carcinogenesis induced by DMBA in hamsters. Ms. Beatriz Baldasquín Cáceres Departament of Oftalmology, Optometry, Otolaryngology and Pathology anatomy. University of Murcia. SUMMARY Oral squamous cell carcinoma is the most common cancer of the head and neck, and is characterized by a low survival rate and poor prognosis. Chemoprevention of this disease by natural extracts is an important area of research today. At the present study we have developed the model of oral carcinogenesis induced by 7,12-dimethyl-1,2-benzatraceno (DMBA) in 61 Syrian hamsters to study the chemopreventive effect of these phenolic compounds: apigenin potassium, cocoa cathechin, eriocitrin and rosmarinic acid. The results reveal that all the groups treated with phenolic compounds present low tumor incidence, and especially the apigenin potassium and rosmarinic acid have shown the best results. Apigenin reduced the volume of the developed carcinomas, and boths compounds significantly decreased the oral tumor incidence and the tumor´s biological aggressiveness. KEYWORDS: oral carcinogenesis, apigenin, cocoa cathechin, eriocitrin and rosmarinic acid, DMBA, hamster.

La osteoporosis es una patología caracterizada por la pérdida progresiva de masa ósea debido a un desequilibrio en el remodelado óseo que provoca que las trabéculas sean más finas, estén menos conectadas y se originen microfracturas, y a largo o corto plazo, puedan provocar una fractura del hueso (González, 2004). Los flavonoides son compuestos fenólicos muy abundantes en la naturaleza con capacidad antioxidante. Algunos de ellos poseen una estructura química muy similar a los estrógenos, y son capaces de unirse a sus receptores, activándolos, por lo que pueden ejercer una función análoga (Milligan, 2000; Schaefer, 2003). Por este y otros motivos, se está considerando su inclusión como suplemento alimentario. El objetivo de nuestro estudio ha sido analizar el efecto de los flavonoides contenidos en el extracto de Humulus Lupulus L. sobre un modelo de osteoporosis secundaria a ovariectomía en ratas Sprague-Dawley a través de diferentes estudios: del peso de los animales, bioquímico general y de la fosfatasa alcalina ósea, estudio de la distribución de la masa ósea y cuantificación de la densidad mineral mediante microtomografía computerizada, estudio anatomo-patológico del grosor de las trabéculas óseas y del espesor del epitelio luminal del endometrio uterino a través del microscopio óptico, y por último, el estudio ionómico de los componentes químicos del hueso mediante espectrofotometría. Para ello, utilizamos 40 ratas Sprague-Dawley distribuidas en cuatro grupos (n=10): I: Control; II: Control ovariectomía; III: Ovariectomía + EHL D1 (0,032 g/kg) y IV: Ovariectomía + EHL D2 (0,32 g/kg). La ovariectomía realizada a los grupos II, III y IV fue bilateral y tras cuatro meses de tratamiento, los animales fueron sacrificados para extraer los huesos fémur y tibia y los úteros para su posterior análisis. Durante el experimento se pesó a los animales periódicamente y se les extrajo sangre para realizar el estudio bioquímico en tres tiempos: antes de ser tratadas, dos meses después de la intervención y al sacrificio. Al final del estudio los animales tratados presentaron un retraso del aumento de peso comparado con el grupo intervenido sin tratar. En el estudio bioquímico, los niveles séricos de calcio y fósforo se mantuvieron estables en todos los grupos experimentales y los niveles de fosfatasa alcalina total y ósea descendieron en todos los grupos. Sin embargo, nuestros resultados más relevantes fueron observados a nivel óseo. Así, tanto el grosor como el volumen de las trabéculas de los huesos de los animales tratados con EHL fueron mayores que en los animales ovariectomizados no tratados (constatado mediante histomorfometría y microtomografía computerizada). Estos animales, además, sufrieron menor pérdida de los minerales que conforman la matriz ósea que los controles operados, como confirmó el estudio ionómico. Al estudiar el epitelio endometrial uterino, observamos que el de los animales tratados con EHL mostraba proliferación y presencia de glándulas similar a la normalidad (control no operado), mientras que en los animales operados no tratados, dicho epitelio presentaba signos claros de atrofia. Por todo ello, concluimos que la ingesta de EHL ha sido efectiva en el tratamiento de la osteoporosis provocada por deprivación hormonal en nuestro estudio, siendo necesario profundizar más en el conocimiento de este agente en futuros estudios que permitan clarificar su mecanismo de acción y seguir avanzando en su posible uso en clínica humana., Osteoporosis is a disease characterized by progressive mass bone loss due to an imbalance on bone remodeling that causes the trabeculae to be thinner, less connected and microfractures to be generated which, in short or longer term, will inflict a bone fracture (González, 2004). Flavonoids are phenolic compounds very abundant in nature with antioxidant capacity. The inclusion of flavonoids in the intake as a food supplement is being considered. Some flavonoids have a chemical structure very similar to estrogens, and they are able to bind to their receptors, activating them, so they can play an analogous role (Milligan, 2000; Schaefer, 2003). At the end of our study, treated animals showed delayed weight gain compared to untreated intervention group. In the biochemical study, serum levels of calcium and phosphorus remained stable in all experimental groups and total alkaline phosphatase levels and bone decreased in all groups. The purpose of our study was to analyze the effect of the flavonoid content in the Humulus Lupulus L. (EHL) extract on a model of osteoporosis secondary to ovariectomy in Sprague-Dawley rats through different studies: weight of the animals, general biochemistry and bone alkaline phosphatase studies, study of the bone mass distribution and quantification of the mineral density via computerized microtomography, anatomopathologic study of the thickness of the bone trabeculae and the luminal epithelium thickness in the uterine endometrium through the optic microscope and, finally, the ion measurement study of the chemical compounds of the bone via spectrophotometry. To do this, we used 40 Sprague-Dawley rats, distributed in four groups (n=10): I: Control; II: ovariectomy control; III: ovariectomy + EHL D1 (0,032 g/kg) y IV: ovariectomy + EHL D2 (0,32 g/kg). The ovariectomy done to groups II, III y IV was bilateral and after four months being treated they were sacrificed to extract each animal´s femur, tibia and uterus for subsequent analysis. During the experiment the animals were weighed periodically and blood was extracted for biochemical analysis on three occasions: before treatment, two months after the intervention and at the time of sacrifice. The most relevant results in our study were observed at the bone level. Therefore, both trabeculae thickness and volume in the bones of the animals treated with EHL were higher than in the ovariectomized untreated animals (determined via histomorphometry and microtomography). These animals, besides, suffered from a lower loss of the minerals compounding the bone matrix than the surgically operated control ones, confirmed by the ion measurement study. By studying the endometrial uterine epithelium, we realized that the one in the animals treated with EHL showed proliferation and presence of glands similar to the normal one (non-operated control), while in untreated operated animals, this epithelium showed clear signs of atrophy. Therefore, we conclude that the intake of EHL was effective in the treatment of osteoporosis caused by hormonal deprivation in our study, being necessary to go deeper into the knowledge of this agent in future studies which clarify its mechanism of action and further progress in its use in clinical practice.

Justificación: El carcinoma oral de las células escamosas (COCE) es el cáncer más común de cabeza y cuello. La extirpación quirúrgica es el tratamiento de referencia, junto a la quimioterapia y radioterapia, en combinación con la cirugía. Pese a los avances conseguidos, estos tratamientos aumentan de manera substancial los efectos adversos. En estudios recientes, se han usado distintos extractos y fitoquímicos para explotar su acción adyuvante terapéutica, con el objetivo de reducir los efectos adversos de los tratamientos convencionales. Objetivo: Búsqueda de agentes noveles como adyuvantes para el tratamiento del cáncer oral y sus complicaciones. Métodos: Realizamos ensayos de migración, viabilidad, ciclo celular y apoptosis sobre la línea de cáncer oral escamoso PE/CA-PJ15 tras el tratamiento con los agentes antirresortivos epigalo-3-catequingalato (EGCG), diosgenina (DG) y ácido zoledrónico (ZA). Evaluamos la efectividad de la combinación del 5-Fluorouracilo (5-FU) con EGCG y radiación (0,2.5 y 5 Gy), mediante ensayos de viabilidad, migración y ciclo celular en las líneas PE/CA-PJ15 y H357 de cáncer oral escamoso. Por último, estudiamos el efecto del ZA y los efectos protectores de la combinación de ZA con EGCG mediante pruebas de viabilidad, mineralización, deposición de colágeno y migración en células con fenotipo de osteoblasto SAOS-2. Resultados: Dosis de 100 μM de DG o ZA redujeron la viabilidad (p0.01), as well as boosting apoptosis. ZA, DG and EGCG decreased cell migration and altered cell cycle progression, each compound in a different phase of the cycle. The combination of EGCG with 5-FU reduced cell viability and migration distance in comparison with control samples and the same dose of 5-FU alone. The addition of EGCG modified the cell cycle, increasing numbers of cells in the G2/M phase, while 5-FU arrested the cell cycle in phase S. Cell exposure to 5 Gy radiation decreased the effects of combining with EGCG. Micromolar (1 and 5 µM) doses of ZA reduced cell viability (p

El propósito principal de este estudio experimental ha consistido en calibrar y comprender, desde el punto de vista densitométrico a nivel óseo, la efectividad de los biomateriales que aplicamos en nuestros animales, en este caso, conejos, con el fin de valorar su extrapolación a seres humanos en futuros ensayos clínicos en el ámbito de la implantología. Se depositaron los biomateriales (naringina sola, naringina con colágeno y naringina con extracto de uva) en lechos de las tibias, maxilares y mandíbulas de 7 conejos albinos de Nueva Zelanda. Se realizó, tras su sacrificio y obtención de los resultados en unidades Hounsfield a través del micro-TC, un análisis densitométrico, 6 meses después de la implantación del biomaterial. Objetivos. -Estudiar los cambios densitométricos que se producen durante la curación de defectos óseos creados en tibia, maxilar y mandíbula de conejos albinos de Nueva Zelanda, mediante densitometría. -Estudiar el efecto del relleno de dichos defectos con naringina, sola y en combinación con extracto de uva y/o colágeno. -Determinar la correlación anatómica en términos de densidad, en tibia, maxilar y mandíbula, mediante el estudio con micro-tomografía computarizada (micro-TC). Resultados. El porcentaje global de score positivos (1+ y 2+), donde se integran todos los grupos que presentan naringina sola o bien combinada con colágeno o extracto de uva, resultó ser de un 73%, si bien este porcentaje varía según el ámbito de aplicación o en función de la combinación, si la hubiera. Así, la naringina sola, reportó un porcentaje de 71% de score positivos frente a un 29% de las muestras que no indicaron cambios que indiquen una mejoría densitométrica o score (0). La naringina en combinación con colágeno reportó un 85% de score positivos (1+ y 2+) frente a un 15% de score (0). La amalgama resultante de naringina en combinación con extracto de uva arrojó un resultado de 62% de score positivos frente a un 38% de score (0). Conclusiones. La microtomografía computerizada es una técnica adecuada para evaluar los cambios densitométricos tras la realización de defectos óseos quirúrgicos, existiendo correlación entre los aspectos morfológicos y los datos densitométricos.En nuestro modelo, el tratamiento con naringina favoreció la neoformación ósea en los defectos, siendo la combinación más efectiva, la formada por naringina y colágeno.Probablemente, no hayamos observado mayores diferencias entre los distintos grupos experimentales debido a que el periodo de estudio fue relativamente largo. Naringin and its densitometric effects on guided regeneration with grape extract and porcine collagen. Study in experimental model with albino rabbits from New Zealand. The main purpose of this experimental study was to calibrate and understand, from the densitometric point of view at the bone level, the effectiveness of the biomaterials we apply to our animals, in this case, rabbits, in order to assess their extrapolation to the human beings at future clinical trials in the field of implantology. Biomaterials (naringin alone, naringin with collagen and naringin with grape extract) were deposited in beds of the tibia, maxillary and jawbone of 7 New Zealand albino rabbits. Analysis was performed after slaughter, and the results were obtained in Hounsfield units through the microTC, a densitometric analysis, 6 months after implantation of the biomaterial. Objectives. -To study the densitometric changes that occur during the healing of bone defects created in tibia, maxillary and jawbone of New Zealand albino rabbits by densitometry. -To study the effect of filling these defects with naringin, alone and in combination with grape extract and / or collagen. -To determine the anatomical correlation in terms of density, in tibia, maxillary and jawbone, by the study with computerized microtomography (microTC). Results. The overall percentage of positive scores (1+ and 2+), where all the groups that present naringin alone or combined with collagen or grape extract, were found to be 73%, although this percentage varies according to the scope of application or depending on the combination, if any. Thus, naringin alone, reported a percentage of 71% of positive score compared to 29% of the samples that did not indicate changes that indicated a densitometric improvement or score (0). Naringin in combination with collagen reported a positive 85% score (1+ and 2+) versus a 15% score (0). The resulting amalgam of naringin in combination with grape extract yielded a 62% positive score versus a 38% score (0). Conclusions. The computerized microtomography is a suitable technique to evaluate the densitometric changes after the accomplishment of surgical bone defects, being there correlation between the morphological aspects and the densitometric data. In our model, the treatment with naringin favored the new bone formation in the defects, being the combination more effective, formed by naringin and collagen. Probably, we have not observed greater differences between the different experimental groups because the study period was relatively long.

La piel es el órgano más externo y extenso que recibe directamente las radiaciones UV solares, responsables del fotoenvejecimiento y la fotocarcinogénesis cutáneos. El objetivo de nuestro trabajo ha consistido en el desarrollo de un modelo experimental de fotoenvejecimiento mediante la exposición crónica a RUV, así como la evaluación de los efectos del tratamiento con ingenol mebutato y paclitaxel sobre las lesiones originadas. Para ello utilizamos 72 ratones SKH-1 que se expusieron a 65 sesiones de radiación UV (98,6% RUV A y 1,4% RUV B) de 60 minutos de duración, 4 días a la semana; cada animal fue expuesto a 1.371,5 J/cm2. Los ratones se dividieron en 6 grupos (n=12) según el tratamiento aplicado: grupo I (RUV exclusivamente); grupo II, tratados con ingenol mebutato durante 3 días consecutivos; grupo III, tratados con paclitaxel+5% GES durante 3 semanas; grupo I , tratados con paclitaxel+5% GES 6 semanas; grupo V, tratados con paclitaxel+1,2% GES 3 semanas y Grupo VI, tratados con paclitaxel+1,2% GES 6 semanas. Tras el período de tratamiento los ratones fueron observados durante 1 mes, y finalmente se realizó su sacrifio y necropsia. Todos los animales presentaban clínicamente todo el espectro lesional del fotoenvejecimiento y la fotocarcinogénesis cutáneos. En los animales tratados con ingenol mebutato se produjo la reducción de la superficie de las lesiones desarrolladas durante la irradiación, así como la reducción del 17% de la incidencia de carcinomas con respecto al grupo Control, mientras que los animales de los grupos tratados con distintas formulaciones de paclitaxel lograron reducir la incidencia de carcinomas entre el 25 y el 50%, siendo los animales tratados con paclitaxel+1,2% GES durante 3 semanas los que mostraron mayor grado de respuesta al tratamiento con una reducción de la incidencia de carcinomas del 50%. En el estudio inmunohistoquímico los animales de todos los grupos mostraron un comportamiento similar. Se observó la disminución de expresión de PCNA y, por tanto la proliferación celular y una mayor expresión de MMP-9 en los carcinomas in situ y microinvasores, lo que sugiere una mayor actividad de estas enzimas en estadíos iniciales de la carcinogénesis; mientras que el inhibidor de metaloproteinasas TIMP-1 parece tener poca relevancia en el proceso neoplásico en nuestro modelo. En conclusión, el presente modelo reproduce el efecto sobre la piel de la exposición crónica a la radiación ultravioleta, provocando las alteraciones del fotoenvejecimiento y el desarrollo de carcinomas. El tratamiento de la piel con signos de daño actínico con ingenol mebutato o con paclitaxel previene la evolución de las lesiones hasta el desarrollo de carcinomas espinocelulares., The skin is the outermost and extensive organ that directly receives solar UV radiation, responsible for photoaging and skin photocarcinogenicity. The aim of our work was to develop an experimental model of photoaging by chronic exposure to UVR, as well as the assessment of the effects of the treatment with paclitaxel and mebutato ingenol on the injuries caused. We used 72 SKH-1 mice wich were exposed to 65 sessions of UV radiation (98.6% UVR A and 1.4% UVR B) of 60 minutes length, 4 days a week; each animal was exposed to 1371.5 J / cm2. Mice were divided into 6 groups (n = 12) as the treatment applied: Group I (only UVR); Group II, treated with ingenol mebutato for 3 consecutive days; Group III, treated with paclitaxel + 5% GES for 3 weeks; Group IV, treated with paclitaxel + 5% GES for six weeks; Group V, treated with paclitaxel + 1.2% GES 3 weeks; and Group VI, treated with paclitaxel + 1.2% GES 6 for weeks. After the treatment period mice were observed for 1 month, and finally its sacrifice and necropsy was performed. All animals showed clinically the whole lesional spectrum of skin photoaging and photocarcinogenicity. In animals treated with mebutato ingenol, the surface of the lesions developed during irradiation was reduced, and a 17% reduction in the incidence of carcinomas compared to the control group, while animals on the groups treated with different paclitaxel formulations reduced the incidence of carcinomas between 25 and 50%, the animals treated with paclitaxel + 1.2% GES for 3 weeks showed increased responsiveness to treatment with reduced incidence of carcinomas 50%. In the immunohistochemical study animals in all groups showed a similar behavior. A decreased expression of PCNA was observed, and thus cell proliferation and increased expression of MMP-9 in situ and microinvasive carcinomas, suggesting an increased activity of these enzymes in early stages of carcinogenesis; while the metalloproteinase inhibitor TIMP-1 seems to have little relevance in the neoplastic process in our model. In conclusion, this model reproduces the effect on skin of chronic exposure to ultraviolet radiation, causing alterations of photoaging and development of carcinomas. Treatment of skin with signs of photodamage with mebutato ingenol or paclitaxel prevented the evolution of injury to the development of squamous cell carcinomas.

Objetivos: Estudiar in vitro el efecto sobre la viabilidad y la proliferación celular de los compuestos: extracto de semilla de uva (flavan-3-oles polímeros de catequinas), extracto de cacao (flavan-3-oles epicatequinas), extracto de pomelo (glicósidos de flavanonas naringina y neohesperidina), extracto de piel de limón (glicósido de flavanona eriocitrina), naringenina (flavanona), apigenina (flavona) y apigenina potásica. Así mismo estudiar la influencia de estas sustancias sobre el ciclo celular y la apoptosis de las líneas celulares Vero y Ca-Co2. Material y Métodos: Los compuestos fueron ensayados sobre la línea celular no tumoral Vero (túbulo renal de mono verde africano) y la línea celular tumoral CaCo-2. Utilizamos el test de MTT con diferentes concentraciones de los extractos. Todo ello junto con el conocimiento de la composición cromatográfica de cada extracto nos permitió hallar posibles relaciones entre la estructura molecular y su efecto en la proliferación celular. Resultados: En las condiciones de nuestro estudio, no hallamos efecto negativo significativo sobre la proliferación celular en ninguno de los extractos testados a concentraciones inferiores a 10 μM en la línea celular Vero. Podría establecerse como orden de actividad antiproliferativa de las estructuras flavonoides estudiadas: flavan-3-ol > flavanona > flavona. Sobre la línea transformada CaCo-2, todos los extractos estudiados mostraron efecto antiproliferativo y/o citotóxico, sobre todo apigenina potásica. Sobre la línea Vero apigenina potásica y extracto de semilla de uva, provocaron un mayor bloqueo del ciclo celular. Y sobre la línea CaCo-2, extracto de piel de limón y de cacao. El análisis del porcentaje de población celular que se encontraba en apoptosis mostró unos valores en general muy bajos en relación a la población total analizada en la línea celular Vero. Sin embargo, sobre CaCo-2, consideramos especialmente relevantes los resultados obtenidos por la flavona apigenina potásica, que mostró una capacidad apoptótica significativa a partir de las 72 horas de tratamiento. Conclusión: Las estructuras moleculares más complejas y de mayor peso molecular causan mayores efectos antiproliferativos, y parecen influir más sobre el ciclo celular y la apoptosis., Introduction: Molecular structure is a very important factor in relation of any substances with cells or biological system. Objective: Present study is an in vitro research about the viability and proliferation activity of following products and extracts: grape seed extract (flavan-3-ols catechins polymers), cocoa extract (flavan-3-ol epicatechins), grapefruit extract (flavanones glycosides naringin y neohesperidin), skin lemon extract (flavanone glycoside eriocitrin), naringenin (flavanone), apigenin (flavone). Also study the influence of these extracts on cellular cycle and apoptosis on Vero and CaCo2. Material and Methods: We have study the different extracts and products effects concentrations on Vero cells proliferation and CaCo-2 cells culture, using the MTT assay. It together with the knowledge of the chromatographic composition of every extract of the experiment allows us to find relations between structures or molecular skeletons and his effect on the cellular proliferation. Results: In our study conditions, we have not negative effect on cellular proliferation with all the extracts, on concentrations lower than 10 µMa on Vero. The order in antiproliferative capacity could be: flavan-3-ol > flavanone > flavone. On CaCo-2, all the extracts showed antiproliferative effect or citotoxicity especially apigenine. On Vero apigenine and grape fruit seed, showed the best arrest in cell cycle. On CaCo-2, citrus and cocoa were he most significant. Cellular population percentage analyses, in apoptosis were very low regarding the total population in Vero. But, on CaCo-2, we considered relevant results on Apigenine, which showed an important apoptotic capacity after 72 hours. Conclusion: We have found the more complex molecular structures it provokes antiproliferative activity increase. This fact would interact in relationship between cell and environment.

El fotoenvejecimiento es un tema de enorme interés socio-sanitario (Kawada, 2011) al ser un proceso patológico común Su manejo clínico y terapéutico implica un alto presupuesto sanitario (Yaar, 2007; Jemal, 2011; Siegel, 2012). Los países desarrollados invierten sumas millonarias en la investigación de sustancias que eviten o retrasen sus efectos (Gil Ortega,2014). De ahí el interés del desarrollo de modelos experimentales para su estudio, así como el de nuevas medidas de fotoprotección. El primer objetivo de nuestro trabajo correspondió al establecimiento de un modelo de fotoenvejecimiento cutáneo en ratones SKH-1 mediante exposición crónica a RUV; el segundo fue evaluar los posibles efectos protectores de la Astaxantina. Utilizamos 60 ratones SKH1/CRL, expuestos a RUV (98,6% UVA y 1,4% UVB) / 60 minutos / sesión / 3 veces a la semana / 80 sesiones, con un total de 1.688 J/cm2 por animal. Los ratones se dividieron en dos grupos (N= 30): El Control sólo recibió RUV y el segundo, RUV más Astaxantina / oral / 0,05 mg / animal / dia. Dado que en la mayoría de los animales de este grupo no se originaron lesiones neoplásicas al final del experimento (80 sesiones), seguimos aplicando hasta un total de 113 sesiones (2.384,3 J/cm2) a 10 ratones,. Los animales expuestos exclusivamente a RUV Grupo Control presentaron las alteraciones características descritas en el fotoenvejecimiento (100% de carcinomas escamosos), por lo que lo consideramos un modelo experimental idóneo para el estudio de estas patologías. No obstante, encontramos diferencias entre las lesiones de los animales tratados con Astaxantina, respecto a las del Control: el eritema se hacía fijo con aspecto reticulado, 15-16 sesiones mas tarde que en el Control; la presentación del marcado patrón geométrico de la piel (8-10 sesiones); arrugas (15-16 sesiones); engrosamiento cutáneo-lesiones queratósicas (10-12 sesiones) y de las lesiones eritemato-erosivas (5-6 sesiones). Las diferencias más destacables fueron en las lesiones tumorales, ya que solo las presentaron 10 animales del grupo tratado. De los 20 que recibieron 80 sesiones, solo 2 presentaron tumores; y de los 10 que recibieron 113 sesiones, se presentaron solo en 6 a partir de la sesión 100 y en 2 tras la 113. Todas las neoplasias correspondían a carcinomas de células escamosas. Microscópicamente, también encontramos diferencias en las lesiones precancerosas: la displasia en: el 60% de los animales tras la sesión 80 y en el 80% tras la 113; el carcinoma “in situ” en el 25% y el 75% respectivamente, mientras que en los animales del grupo Control se observaban ambos en el 100% de los animales. En el estudio inmunohistoquímico, constatamos un incremento significativo de la tasa de proliferación celular en los tumores del grupo control respecto a los tratados. La expresión de MMP-9 resultó más alta en los tumores de los animales tratados que en los del control. Sin embargo, el inhibidor de metaloproteinasas TIMP-1, se expresó de forma más intensa en el estroma de los tumores de los animales tratados que en los controles, sugiriendo que el tratamiento con astaxantina podría inhibir la progresión tumoral, mediante la inducción de la síntesis de inhibidores de metaloproteinasas en el estroma tumoral., Photoaging, a common pathological process, is of enormous socio-sanitary interest (Kawada, 2011) and its clinical and therapeutic treatment is expensive (Yaar, 2007; Jemal, 2011; Siegel, 2012). Developed countries invest enormous sums of money in research into substances to prevent or delay the effects of the process (Gil Ortega, 2014) – hence the interest in developing experimental models for its study and new protection methods. The first objective of our study was to establish a model of cutaneous photoaging in SKH-1 mice chronically exposed to UVR, and the second to evaluate the possible protective effects of Astaxanthin. Sixty SKH1/CRL mice were exposed to 80 sessions of UVR (98.6% UVA and 1.4% UVB) for 60 minutos/session, 3 times per week (total of 1,688 J/cm2 per animal). The mice were divided into two groups (N= 30): the control group, which only received UVR, and a second group, which received UVR and Astaxanthin adminsitered orally at 0.05 mg / animal / day. Since most of the animals of the second group showed no neoplastic lesions at the end of the 80 sessions, the treatment was continued in 10 mice to reach 113 sessions (2,384,3 J/cm2). The control group animals showed the alterations characteristic of photoaging (100% squamous carcinomas), so that the experimental model can be considered ideal for studying such pathologies. However, there were differences in the lesions treated with Astaxanthin compared with the control group: erythema became permanent and showed a reticulated pattern 15-16 sessions later than in the control group; a marked geometric pattern of the skin (8-10 sessions later); swelling and/of queratósicas cutáneo-lesiones (10-12 sessions later); wrinkling (15-16 sessions) and eritemato-erosivas lesions (5-6 sessions later). The most pronounced differences concerned the tumoral lesions, which only appeared in 10 animals of the treated group. Of the 20 animals that received 80 sessions, only 2 showed tumours, while, of the 10 animals that received 113 sessions, tumour growth was evident in 6 after 100 sessions and another 2 after 113 sessions. All the neoplasias corresponded to squamous cell carcinomas. Microscopically, there were also differences in the precancerous lesions observed: dysplasia in 60% of animals after 80 sessions and in 80% after 113 sessions. “In situ” carcinomas were observed in 25 and 75%, respectively of the treated animals. In the control group, on the other hand, both were observed in 100% of the animals. An immunohistochemical study pointed to a significantly higher cell proliferation rate in the tumours of the control group, while MMP-9 expression was higher in the tumours of the treated group. Metaloproteinase TIMP-1 inhibitor expression was greater in the stroma of the tumours of the treated animals, suggesting that treatment with astaxanthin may inhibit tumour progression by inducing the synthesis of inhibitors of metaloproteinases in the tumoral stroma.

La piel es el órgano más extenso del organismo y puede sufrir, además del envejecimiento cronológico, el denominado fotoenvejecimiento o envejecimiento cutáneo patológico. Está caracterizado por un envejecimiento cutáneo más extenso y sobre todo, de mayor gravedad, pues engloba la fotocarcinogénesis o presentación de cánceres cutáneos. Desde la Antigüedad, el hombre tuvo conciencia de la importancia del Sol en su vida, pero también de sus efectos indeseables. En la actualidad las sociedades de los países desarrollados invierten sumas millonarias en la investigación de sustancias que eviten o retrasen los efectos del envejecimiento, no sólo por el culto a la belleza, sino por el gran coste económico que tiene la asistencia sanitaria de las lesiones. En los últimos años, los aceites esenciales han recibido gran atención dada su capacidad antioxidante, que podría interferir en los mecanismos de fotoenvejecimiento, evitando la formación de radicales libres y potenciando el subsistema inmunológico cutáneo. Por otro lado, a las dificultades metodológicas que supone la lenta evolución de los tumores, se suman las limitaciones éticas del desarrollo de modelos experimentales en humanos. Por esta razón, el primero de los objetivos de nuestro trabajo fue el establecimiento de un modelo de fotoenvejecimiento cutáneo en ratones SKH-1, mediante la exposición crónica a Radiación Ultravioleta (RUV), para en el segundo objetivo de nuestro estudio, evaluar las propiedades de dos aceites, el de almendras dulces y el de la crisálida del gusano de la seda, como posibles fotoprotectores. Para la realización del estudio, utilizamos 60 ratones SKH1/CRL, que se sometieron a radiación ultravioleta, 60 minutos por sesión, tres veces por semana, durante un total de 80 sesiones, con 1.688 J/cm2 de energía total absorbida por cada animal. Los ratones se dividieron en tres grupos. El primero (Control) sólo recibió RUV y los otros dos fueron tratados tópicamente, previamente a la irradiación, con aceite de almendras dulces (Grupo II) y con aceite de la crisálida del gusano de seda (Grupo III). Todos los animales expuestos a las RUV presentaron las alteraciones características del fotoenvejecimiento y fotocarcinogénesis cutánea, por lo que consideramos este modelo experimental idóneo para el estudio de esta patología, ya que la exposición crónica a las radiaciones provocó todo el espectro de lesiones propias del fotoenvejecimiento, si la exposición era prolongada (entre 65 y 80 sesiones), además de tratarse de un modelo fácilmente reproducible y de bajo coste. No obstante, en nuestro estudio observamos diferencias significativas entre los animales tratados con el aceite de la crisálida del gusano de seda (Grupo III) respecto a los de los otros dos grupos. En los ratones del grupo III se observa un retraso en la presentación de las lesiones cutáneas (6-9 semanas), con respecto a los otros grupos y hubo dos animales sin lesiones tumorales al final del experimento. Además, el área media de las lesiones era menor en el grupo III un 59,14% respecto al grupo control (reducción del 40,86%); el grupo tratado con aceite de almendras dulces, tan sólo redujo el área media en un 10%. Esto sugiere las propiedades fotoprotectoras del aceite de crisálida del gusano de seda, probablemente debidas a la acción de la sericina que contiene, que es un potente antioxidante. Este retraso en la presentación de lesiones neoplásicas y su menor volumen fue confirmado por el estudio inmunohistoquímico, respecto a la metaloproteinasa 9 (MMPs-9) y los inhibidores TIMP., The skin is the largest organ of the body and may, in addition to chronological aging, suffer some disease called photoaging. It is characterized by a large aging of the skin and above all, what is more dangerous, photocarcinogenesis or presentation of skin cancers . Since antiquity, men became aware of the importance of the sun in our life, but also of its undesirable effects. At present, a lot of companies of developed countries invest a large amount of money in researching, looking for substances that prevent or delay the effects of aging, not only for beauty, but also by the great economic cost of health care. In recent years, essential oils have received great attention due to its antioxidant capacity, which may interfere with the mechanisms of photoaging, preventing the formation of free radicals and boosting the skin 's immune subsystem. Furthermore, to the methodological difficulties of the slow evolution of tumors, ethical constraints on development of experimental models in humans are added . Therefore, the first objective of our work was to establish a model of cutaneous photoaging in SKH -1 mice by chronic exposure to Ultraviolet Radiation (UVR). The second objetive of our study was to evaluate the properties of two oils, sweet almond and chrysalis of silkworm, as possible photoprotective . For the study, we used 60 mice SKH1/CRL, that received ultraviolet radiation, 60 minutes per session, three times per week, for a total of 80 sessions , with 1,688 J/cm2 of total energy absorbed by each animal. The mice were divided into three groups. The first (control) received only UVR and the other two were treated topically prior to irradiation, with sweet almond oil (Group II ) and oil of silkworm chrysalis (Group III). All animals exposed to UVR showed the characteristic alterations of cutaneous photoaging and photocarcinogenesis, so consider this experimental model as ideal for the study of this disease, since chronic exposure to radiation caused the entire spectrum of lesions characteristic of photoaging, if the exposure was prolonged (65 to 80 sessions), besides being an easily reproducible and not expensive model . However, in our study we observed significant differences between animals treated with oil of chrysalis silkworm (Group III) compared to the other two groups. In Group III, mice observed a delay in the presentation of skin lesions (6-9 weeks), with respect to the other groups, and there were three animals without tumor lesions at the end of the experiment. In addition, the mean area of lesions was lower in group III (59.14 %) than in the control group (40.86 % reduction), the group treated with sweet almond oil only reduced the area by 10 %. This suggests the photoprotective properties of oil of silkworm chrysalis, probably due to the action containing sericin, which is a potent antioxidant. This delay in the presentation of neoplastic lesions and their smaller area was confirmed by immunohistochemical study, regarding metalloproteinase 9 ( MMP -9) and TIMP inhibitors.

El primer objetivo de nuestro trabajo fue desarrollar un modelo de osteoporosis secundaria a ovariectomía en ratas Sprague-Dawley. El segundo objetivo consistió en analizar el efecto de los compuestos fenólicos: Naringenina, Eriocitrina y Citrolive®, sobre el citado modelo. Material y Métodos: Utilizamos 50 animales distribuidas en cinco Grupos (n=10): (I) Control; (II) Control ovariectomía; (III) Ovariectomía + Naringenina (1mg/kg día), (IV) Ovariectomía + Eriocitrina (1mg/kg día) y (V) Ovariectomía + Citrolive®. (1mg/kg día). La ovariectomía realizada a los Grupos (II, III, IV y V) fue bilateral y tras cuatro meses de tratamiento, los animales fueron sacrificados para extraer las muestras. Durante el experimento se pesó a los animales periódicamente y se les extrajo sangre para el estudio bioquímico. Realizamos las siguientes determinaciones: bioquímica general, distribución de la masa ósea y cuantificación de la densidad mineral mediante microtomografía computerizada, estudio anatomo-patológico del grosor de las trabéculas óseas y ionómico de los componentes químicos del hueso mediante espectrofotometría. Resultados: En el estudio bioquímico, los niveles séricos de calcio y fósforo se mantuvieron estables en todos los Grupos experimentales mientras que los niveles de fosfatasa alcalina total fueron superiores en el Grupo (III) Naringenina y con valores muy parecidos al Grupo (I) Control en el resto de Grupos tratados. No obstante, los resultados más relevantes fueron observados a nivel óseo. Así, tanto el grosor como el volumen de las trabéculas óseas de los animales tratados, eran mayores, que los de los animales ovariectomizados no tratados, Grupo (II). Además, los animales, de los tres Grupos tratados sufrieron menor pérdida de los minerales que conforman la matriz ósea que los del Grupo (II) según el estudio ionómico. Conclusiones: Consideramos, que la administración de dichos compuestos ha demostrado efectividad, aunque de grado variable, sobre el modelo de osteoporosis desarrollado. No obstante, son necesarios futuros estudios que permitan clarificar su mecanismo de acción y seguir avanzando en su posible utilización en clínica humana., The first aim of this work was to develop an ovariectomized rat model of osteoporosis. The second objective was to analyse the effect of the phenolic compounds, Naringenia, Eriocitrin and Citrolive®, on that model. Materials and Methods: We used 50 animals distributed into 5 groups (n=10): (I) Control; (II) Ovariectomy control; (III) Ovariectomy + Naringenin (1mg/kg día), (IV) Ovariectomy + Eriocitrin (1mg/kg day) and (V) Ovariectomy + Citrolive® (1mg/kg day). Animals in groups (II, III, IV and V) were bilaterally ovareictomized. After 4 months of treatment, the animals were sacrificed to extract their femurs for analysis. Animal weight, general biochemistry, distribution of bone mass and quantification of mineral density by computerized microtomography, anatomical-pathological study of bone trabeculae and ionomic study of the chemical components of the bone by spectrophotometry, were carried out to determine the effects of the treatments on the animal model. Results: At the end of the experiment all the animals of the treated groups showed a delayed weight gain compared with the control group (I). In the biochemical study, the serum levels of calcium and phosphorus remained stable in all the experimental groups, while the total alkaline phosphate levels were highest in in group (III) Naringenina and lowest in control group (II) OVX. However, the most interesting results were observed at osseous level – both the thickness and volume of the trabeculae of the treated animals were greater than the corresponding measurements made in untreated animals that had been subjected to ovariectomy, group (II). In addition, the ionomic study showed that the animals of the three treated groups suffered lower loss of the minerals conforming the bone matrix of Group (II). Conclusion: We are of the opinion, therefore, that the administration of the mentioned compounds is effective, although to varying degrees, in the osteoporosis model developed. However, more studies are necessary to clarify their action mechanism before clinical application in humans can be considered.

La DM constituye un trastorno metabólico caracterizado por niveles elevados de glucosa en sangre o hiperglucemia, ocasionado por defectos en la secreción de insulina, la mala función de la misma o más frecuentemente de ambos, que suele asociarse con lesiones secundarias en diversos órganos, especialmente vasos sanguíneos, ojos, riñones, páncreas, sistema nervioso, etc. En los últimos años, las sustancias polifenólicas han recibido una gran atención debido a su potencial para la prevención de algunas enfermedades crónicas muy prevalentes, gracias a su actividad antioxidante de reducción del estrés oxidativo. El objetivo de nuestro trabajo experimental ha sido conocer los efectos de tres productos antioxidantes: extractos de fresno, spergularia y granada, en un modelo animal de DM tipo 2, a través de la evolución del peso corporal y el índice de conversión; los marcadores relacionados con la glucemia; la histomorfometría del páncreas y el deterioro cognitivo (biomarcadores y test de conducta). Para la realización del estudio, utilizamos 40 ratones LepRdb/db hembra, divididos en cuatro grupos (n=10), control y tres de tratamiento con los extractos citados. A todos los animales se les efectuaron determinaciones sanguíneas de glucosa y medida de los pesos semanalmente durante todo el experimento y a los 3, 5 y 7 meses se les realizó el estudio bioquímico. Al finalizar el estudio los animales fueron sacrificados y se tomaron muestras de páncreas para su posterior estudio histológico. Los resultados más relevantes consistieron en un menor incremento de peso e índice de conversión a partir del tercer-cuarto mes de los animales tratados. Así mismo, los animales de los grupos de tratamiento presentaron menor resistencia a la insulina, mostrando el grupo E. fresno los niveles mas bajos de glucemia y hemoglobina glicosilada. A nivel histológico este grupo también fue el que presentó mayor porcentaje de islotes pancreáticos. También el uso de los polifenoles mejoró la función cognitiva de los animales tanto a nivel bioquímico como a nivel conductual. En conclusión, los polifenoles estudiados en este modelo de DM tipo 2 mostraron una reducción del peso corporal de los animales así como el índice de conversión alimenticio; una ligera reducción en la resistencia a la insulina en todos los grupos tratados, que en el caso del grupo tratado con E. fresno se asociaba también a una disminución de los niveles de glucemia y un mayor número de islotes pancreáticos. Todos los tratamientos evidenciaron una mejora en la función cognitiva. ABSTRACT: DM is a metabolic disorder characterised by high blood sugar levels, or hyperglycemia, as a result of defects in the secretion of insulin, the malfunctioning of the same or, most frequently, both. The disorder is commonly associated with secondary lesions in several organs, including blood vessels, the eyes, kidneys, pancreas, nervous system. In recent years polyphenolic substances have received much attention for their potential to prevent several prevalent chronic diseases due to their antioxidant activity or ability to reduce oxidative stress. The aim of the experimental study described was to know the effects of three antioxidative products - ash, spergularia and pomegranate extracts – in a DM type 2 animal model, by following the body weight and conversion index, glycemia-related markers pancreatic histomorphometry and cognitive deterioration (biomarkers and behaviour test). For the study, 40 female LepRdb/db mice were divided into four groups of ten animals – a control group and one group for each of the above mentioned treatments. Blood glucose levels and body weight were measured weekly in all the animals, and a biochemical analysis was made after 3, 5 and 7 months. At the end of the experiment the animals were sacrificed and pancreas simples were taken for histological study. The most important results concerned the lower body weight increase and conversion index in the treated animals after the 3th-4th month of treatment. The same animals showed lower resistance to insulin, the group treated with ash extract showing the lowest glycemia and glycosylated haemoglobin levels. At the histological level, the same group showed the highest percentage of pancreatic islets. The use of polyphenols also improved the cognitive functions of the animals both at biochemical and behavioural levels. In conclusion, the polyphenols studied in this DM type 2 model led to a reduction in body weight and conversion index. The slight reduction in resistance to insulin in the treated groups was associated, in the case of the ash extract treatment, with a diminution of glycemia levels and greater number of pancreatic islets. All the treated groups showed an improved cognitive function.

OBJETIVOS: La obesidad es una enfermedad que su prevalencia ha ido aumentando en las últimas décadas. Son bien conocidas las consecuencias del exceso de peso sobre el sistema cardiovascular, digestivo, osteoarticular, endocrino-metabólico y algunos tipos de cáncer. Los flavonoides han demostrado en diversos estudios propiedades beneficiosas para la salud que incluyen, entre otros, efectos antiinflamatorios, antidiabéticos, antihipertensivos, cardioprotectores y antiobesidad. Nuestro objetivo general fue analizar el efecto de flavonoides en un modelo experimental de ratón obeso. METODOLOGÍA: Realizamos el estudio experimental con 60 ratones LepRdb / db hembras (n=10) para conocer el efecto de 4 tipos de flavonoides: Extracto de Fresno (E. Fresno), Extracto de Spergularia (E. Spergularia), Extracto de Granada (E. Granada) y Citrolive. El tratamiento con E. Fresno, E. Spergularia y E. Granada se administró en el pienso y la administración de Citrolive se realizó en el agua (PO-Citrolive) y de manera subcutánea (SC-Citrolive) durante 7 meses. Se determinó el peso mensual y tensiones arteriales quincenales. Se analizaron los siguientes parámetros plasmáticos: colesterol total, colesterol HDL (lipoproteína de alta densidad), triglicéridos, adiponectina, TNF-α (Factor de necrosis tumoral alfa), homocisteína, glucosa, hemoglobina glicosilada, insulina y parámetro HOMA-IR (Homeostatic model assessment-resistencia a la insulina). Se llevó a cabo el análisis histopatológico del hígado al final del experimento. Los datos fueron analizados mediante el programa estadístico ANOVA SPSS v 21. RESULTADOS: En todos los grupos de tratamiento se observó una disminución del peso de los animales respecto a los del grupo control, excepto para el grupo PO-Citrolive. Dicha disminución se correlacionó con un aumento mayor de adiponectina en los grupos tratados y menor TNF-α a nivel plasmático. El colesterol total plasmático fue menor en todos los grupos de tratamiento. La concentración de triglicéridos plasmáticos resultó menor a los 7 meses de tratamiento en los grupos del E. Fresno, E. Spergularia y PO-Citrolive. Asimismo existió un descenso mayor de la tensión arterial sistólica y diastólica y de los niveles de homocisteína en los grupos de tratamiento. Los niveles de glucosa y de hemoglobina glicosilada no se vieron reducidos por ningún tratamiento, excepto para el grupo del E. Fresno. Sin embargo los niveles de insulina y parámetro HOMA-IR de los grupos tratados fue menor, reflejando una menor resistencia a la insulina en los grupos tratados con flavonoides. La esteatosis hepática fue significativamente menor en todos los grupos de tratamiento (grado I en todos ellos, excepto en el grupo PO-Citrolive, que, como para el grupo control fue grado II). Dichos datos demuestran el efecto beneficioso de la pérdida de peso traducido en una menor hipertensión arterial, un mejor perfil lipídico y una menor esteatosis de los grupos tratados con flavonoides. ABSTRACT OBJECTIVES: Obesity is a disease whose prevalence has been increasing over recent decades. The consequences of being overweight on the cardiovascular, digestive, osteo-articular and endocrine-metabolic systems are well known, and the disease has been associated with several types of cancer. Meanwhile, studies have pointed to the beneficial effects of flavonoids, which may act as antiinflammatory, antidiabetic, antihypertensive and cardioprotective agents, and which possess anti-obesity properties. The general aim of the research described within was to analyse the effect of flavonoids in an experimental obese mouse model. METHODOLY: An experimental study was made using 60 female LepRdb / db mice (n=10) to ascertain the effect of 4 types of flavonoid: ash extract (E. Fresno = Ash E), Spergularia Extracto (Spergularia E), Pomegranate extract (Pomegranate E), and Citrolive. The three extracts were administered in the feed, while Citrolive was provided in the water (PO-Citrolive) or subcutaneously (SC-Citrolive) over a period of 7 months. The weight of the mice was determined monthly and the arterial tension every two weeks. The following parameters were analysed in plasma: total cholesterol, HDL (high-density lipoprotein) cholesterol, triglycerides, adiponectin, TNF-α (Tumor necrosis factor alpha), homocysteine, glucose, glycosylated haemoglobin, insulin and HOMA-IR (The homeostatic model assessment-insulin resistance). A histopathological analysis of the liver was made at the end of the experiment. The data were analyzed by the statistics program ANOVA SPSS v 21. RESULTS: A decrease in weight was observed in the animals of all treatment groups compared with the control group, except in the case of PO-Citrolive. The decrease was related with an increase in adiponectin in the treated groups, accompanied by lower levels of plasma TNF-α. Total plasma cholesterol was lower in all the treatments, while, after 7 months of treatment, the Ash E, Spergularia E and PO-Citrolive groups showed lower serum triglyceride concentrations than the control group. The systolic and diastolic blood pressure values and homocystein levels were lower than the control group. Glucose and glycosylated haemoglobin were not affected by any treatment, except Ash E. However, insulin levels and HOMA-IR were lower in the flavonoid-treated groups, reflecting a lower resistance to insulin. Hepatic steatosis was significantly lower in all the treated groups (grade 1 in all groups, except in the PO-Citrolive group, which showed the same level as the control group – grade II). The data demonstrate the beneficial effect of weight loss - which translated into lower blood pressure, improved lipid profile and lower steatosis in the groups treated with flavonoids.

En nuestro trabajo nos planteamos conocer los posibles efectos de los flavonoides apigenina y naringenina potásicas sobre un modelo experimental de osteoporosis inducida mediante ovariectomía en conejas albinas Nueva Zelanda. El estudio “in vitro” demostró que los flavonoides ensayados, no afectaban de forma negativa a la viabilidad celular. En el “in vivo”, la deprivación estrogénica mediante la ovariectomía, fue suficiente en un plazo de ocho meses, para provocar la osteoporosis. Los estudios: bioquímico, de microCT, anatomopatológico (óptico y MEB) e ionómico (icp-oes), confirmaron la eficacia, tanto de la apigenina como de la naringenina potásicas, como agentes protectores frente a la pérdida ósea inducida por la ovariectomía, constituyéndose así, en una medida complementaria frente a la osteoporosis, a la vez que abre nuevas vías de investigación para la utilización de terapias preventivas minimizando los problemas de los efectos secundarios que caracterizan a otros tratamientos., The effects of the flavonoids potassium apigenin and naringenin were studied in an experimental model of osteoporosis induced by ovariectomy in New Zealand albino/white rabbits. The in vitro study showed that cell viability was unaffected by either flavonoid, while in vivo experiments showed that estrogenic deprivation caused by ovariectomy provoked osteoporosis after eight months. Biochemical, microCT, anatomical-pathological (optical and SEM) and ionomic (icp-oes) studies confirmed the effectiveness of both potassium apigenin and naringenin as protective agents against bone loss induced by ovariectomy, representing a complementary measure against osteoporosis, while opening up new research pathways into using preventative therapies that minimise the secondary effects associated with other treatments.