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Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-02-24Bitstream added on 2014-06-13T19:29:04Z : No. of bitstreams: 1 guilherme_grb_me_botfm.pdf: 2588332 bytes, checksum: 8ef4f30634a7a7abfb353bf08791a95c (MD5) Fundação para o Desenvolvimento Médico e Hospitalar (Famesp) Secretaria do Estado da Saúde de São Paulo O sistema imunológico é dividido em imunidade natural e adquirido (humoral e celular). Os linfócitos B são os principais efetores da resposta humoral. Junto aos linfócitos T, mediam diversas reações imunológicas. Todos os leucócitos possuem antígenos de superfície (clusters of differentiation – CD) determinados que possuem as mais diferentes funções. As expressões destes CDs podem variar na maturação e na presença de patologias, sendo as de maior prevalência e gravidade as leucemias e linfomas, tornando-se marcadores importantes que podem ser avaliados por citometria de fluxo ou imunoquímica através do uso de anticorpos monoclonais murinos (AcMm). Após produção dos AcMm é necessário caracterizar e validá-los. Utilizou-se 11 clones que apresentaram especificidade somente contra linfócitos B. Pela técnica de Western Blotting, 5 anticorpos (3 do tipo IgM e 2 do tipo IgG) foram escolhidos de acordo com sua possível especificidade e importância clínica. A validação dos anticorpos tipo IgM foi realizada por citometria de fluxo utilizando anticorpo comercial para comparação de quantidade de células marcadas, sendo testados em 20 amostras de indivíduos normais e 20 de indivíduos portadores de neoplasias hematológicas diversas. O LINB B, que foi comparado com o anti-CD171 e anti-CD45RA, apresentando diferença estatística somente em relação ao anti-CD45RA, e identidade com o anti-CD171. O LINB C, que foi comparado com o anti-CD20 e anti-CD19, não apresentou diferença estatística significante quando frente a ambos anticorpos comerciais. No teste de regressão linear, houve maior correlação dos resultados com o anti-CD19. O LINB E foi comparado somente contra o anti-CD107b, havendo grande identidade entre os dois. Dos resultados apresentados, conclui-se que o LINBs B e E apresentam grandes chances de serem específicos contra... The immunological system is divided into: natural immunity and acquired immunity (celular and humoral responses). The B lymphocytes are the main effectors of the humoral response. Together with the T lymphocytes, they make several immunological reactions. All leucocytes have antigens on the surface (clusters of differentiation – CD) that possess lot of functions. The expressions of these CDs may be altered during maturation and pathologies, like leukemia and lymphomas, becoming important markers that can be evaluated by flow cytometry or immunochemistry thought murine monoclonals antibodies (Mab). After production of Mabs it´s necessary characterize and validated them. We used 11 clones that presented Mab against B lymphocytes only. By Western Blotting method 5 Mab (3 IgM and 2 IgG) were chosen according you possible especifity and clinical importance. The validation of IgM Mabs were made by flow cytometry using commercial antibody to compare the quantity of marked cells, being used 20 samples from normal people and 20 samples from person with hematological cancer. The LINB B, compared to anti-CD171 and anti-CD45RA, presented statistical difference from anti-CD45RA and identity to anti-CD171. The LINB C, compared to anti-CD19 and anti-CD20, didn´t presented any statistical difference from both commercial antibodies, although it correlates better with anti-CD19. The LINB E was compared to anti-CD107b, where it appears great identity between then. By the present results, we conclude that LINB B and E need multicentre studies to expand validation, and LINB C, needs to increase the samples to have a statistical validation. The two IgGs LINB, possible anti-CD138, weren´t test yet.

Submitted by Guilherme Lemeszenski (guilherme@nead.unesp.br) on 2013-08-22T19:03:50Z No. of bitstreams: 1 S1413-78522009000400011.pdf: 698392 bytes, checksum: e2c2bc376d0c064ee17dea6df08437d2 (MD5) Made available in DSpace on 2013-08-22T19:03:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 S1413-78522009000400011.pdf: 698392 bytes, checksum: e2c2bc376d0c064ee17dea6df08437d2 (MD5) Previous issue date: 2009-01-01 Made available in DSpace on 2013-09-30T20:06:11Z (GMT). No. of bitstreams: 2 S1413-78522009000400011.pdf: 698392 bytes, checksum: e2c2bc376d0c064ee17dea6df08437d2 (MD5) S1413-78522009000400011.pdf.txt: 23096 bytes, checksum: 2d9ca931d656ea65870c8cb659ead8ab (MD5) Previous issue date: 2009-01-01 Submitted by Vitor Silverio Rodrigues (vitorsrodrigues@reitoria.unesp.br) on 2014-05-20T13:32:23Z No. of bitstreams: 2 S1413-78522009000400011.pdf: 698392 bytes, checksum: e2c2bc376d0c064ee17dea6df08437d2 (MD5) S1413-78522009000400011.pdf.txt: 23096 bytes, checksum: 2d9ca931d656ea65870c8cb659ead8ab (MD5) Made available in DSpace on 2014-05-20T13:32:23Z (GMT). No. of bitstreams: 2 S1413-78522009000400011.pdf: 698392 bytes, checksum: e2c2bc376d0c064ee17dea6df08437d2 (MD5) S1413-78522009000400011.pdf.txt: 23096 bytes, checksum: 2d9ca931d656ea65870c8cb659ead8ab (MD5) Previous issue date: 2009-01-01 OBJETIVOS: O presente estudo teve como objetivo cultivar condrócitos retirados da articulação do joelho de coelhos encapsulados em hidrogel de alginato (HA) e caracterizar a produção de matriz extracelular (ECM). MÉTODOS: A cartilagem articular foi removida do joelho de coelhos, com três a seis meses, fragmentada em pedaços de 1mm e submetida à digestão enzimática. Uma concentração de 1x106 céls/mL foram ressuspensas em uma solução de alginato de sódio a 1,5% (w/v), em seguida fez-se o processo de gelatinização em CaCl2 (102 mM), permitindo a formação do HA e cultivo em meio DMEM-F12 durante quatro semanas. A distribuição das células e a ECM foram acessadas através das secções histológicas coradas com e azul de toluidina hematoxilina e eosina (HE). RESULTADOS: Houve um aumento no número e na viabilidade dos condrócitos durante as quatro semanas de cultura. Através das análises histológicas dos HAs corados com azul de toluidina e HE foi possível observar a distribuição definida dos condrócitos no hidrogel, assemelhando-se a grupos isógenos e formação de matriz territorial. CONCLUSÃO: Este estudo demonstrou a eficiência do HA como arcabouço para ser usado na cultura de condrócitos, constituindo uma alternativa no reparo de lesões na cartilagem articular. OBJECTIVES: The aim of this study was to culture chondrocytes from knee joint cartilage of rabbits encapsulated in alginate hydrogel (HA) and to characterize the production of extracelular matrix (ECM). METHODS: Joint cartilage was obtained from rabbits' knees, three to six months old, fragmented into 1-mm pieces and submitted to enzymatic digestion. A concentration of 1x106 cells/mL were re-suspended into a 1.5% (w/v) sodium alginate solution, followed by gel formation process with CaCl2 (102 mM), allowing HA to build for culturing it into a DMEM-F12 medium for four weeks. The distribution of cells and ECM were assessed from histological slices stained toluidine blue and hematoxyline-eosin (HE). RESULTS: There was an increase of the number and viability of the chondrocytes during the four weeks of culture. By assessing the histological sections stained with toluidine blue and HE, we could note the definitive distribution of chondrocytes in the hydrogel, similarly to isogenous groups and territorial matrix formation. CONCLUSION: In this study, the alginate was shown to be an effective scaffold for use in chondrocytes culture, constituting an alternative for repairing joint cartilage defects. UNESP Faculdade de Medicina de Botucatu UNESP Instituto de Biociências UNESP Faculdade de Medicina de Botucatu UNESP Instituto de Biociências