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Objetivo: detectar Plasmodium en muestras de sangre total mediante gota gruesa y PCR Nested, para su posterior uso en la elaboración de paneles de evaluación 2017. Métodos: se evaluaron 40 muestras de sangre total obtenidas en la cosecha de parásitos 2017 en el departamento de Loreto realizada por el personal del laboratorio, así como muestras controles del Laboratorio Supranacional de Malaria. Las muestras fueron evaluadas por la prueba diagnóstica gota gruesa con tinción Giemsa y por la prueba de PCR Nested, para la cual se extrajo ADN con el kit comercial de ThermoscientificTM a partir de 200μL de sangre. El PCR Nested fue basado y adaptado según la metodología de Singh et al., 1999, usando los primer 's rPLU5 y rPLU6 para el género Plasmodium y rFAL1 y rFAL2 (P. falciparum); rVIV1 y rVIV2 (P. vivax). Resultados: la técnica de gota gruesa pudo detectar: 22 muestras de P. vivax, 11 P. falciparum, 3 infecciones mixtas y 4 negativas. Los resultados del PCR nested se observaron en la electroforesis de agarosa mostrando diferentes tamaños de las bandas para P. vivax (120 pb) y P. falciparum (205 pb); así como la aparición de doble banda para las infecciones mixtas; esta técnica pudo detectar: 21 muestras de P. vivax, 10 P. falciparum, 6 infecciones mixtas y 3 negativas. La discordancia de resultados entre las dos técnicas fue mayor en las infecciones mixtas, para la gota gruesa a causa del parecido morfológico de algunos estadios jóvenes de P. falciparum con merozoitos de P. vivax; además el falso negativo en la gota gruesa se debe a una infección submicroscópica la cual si fue detectada por PCR Nested. Conclusiones: en la presente evaluación se ha logrado obtener mejores resultados de detección de Plasmodium empleando la técnica de PCR Nested comparado con la gota gruesa, especialmente en muestras mixtas e infecciones submicroscópicas. Por ello se requiere la implementación y validación de dicha técnica para el diagnóstico de la malaria. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Objetivo: el primer componente de la estrategia global del control de la malaria, es el acceso al diagnóstico y tratamiento adecuado. Entre los esfuerzos que se han realizado para el control del paludismo en las Américas se tuvo como objetivo evaluar la concordancia en resultado, especie, estadio y densidad parasitaria en el diagnóstico microscópico; a los países de América del Sur participantes del Programa de Evaluación Externa del Desempeño (PEED) internacional. Métodos: se evaluaron 11 Laboratorios de Referencia Nacional de América del Sur: Argentina, Bolivia, Fiocruz - Brasil, Evandro Chagas - Brasil, Colombia, Chile, Ecuador, Guyana, Paraguay, Surinam, y Venezuela. Se elaboraron paneles de 20 láminas con P. falciparum, P. vivax, mixta (Pf/Pv) y negativas; asimismo, las láminas positivas tenían diferentes estadios y densidades parasitarias. Los parámetros a evaluar fueron: concordancias de resultado y especie (aceptable >95%) y estadio con densidad parasitaria (p/μL) (aceptable >80%). Para el análisis estadístico se empleó el coeficiente Kappa de Cohen (κ) para determinar la concordancia en los resultados, así como también valores predictivos positivos (VPP) y valores predictivos negativos (VPN). Se utilizó el sistema NetLab para la comparación y cálculo de los resultados en tiempo real. Resultados: para el parámetro de resultado la concordancia fue aceptable para todos los laboratorios y el VPP y VPN fue del 100% para todos. Para el parámetro de especie 7 tuvieron una concordancia aceptable; el valor de concordancia κ fue muy buena para 7 laboratorios identificando a P. falciparum y para 10 laboratorios identificando P. vivax. En el parámetro de estadio todos obtuvieron una concordancia aceptable; para el estadio sexuado de P. falciparum 8 y estadio asexuado de P. vivax 10 tuvieron concordancia κ muy buena. En contraste, la concordancia en densidad parasitaria fue no aceptable para todos los laboratorios; sin embargo, 4 laboratorios mejoraron su concordancia, pero sin llegar al valor de aceptabilidad. Los resultados reflejan la falta de experticia al momento de hacer recuento microscópico. Conclusiones: en la presente evaluación se ha logrado obtener mejores resultados de concordancia en los parámetros de resultado, especie y estadio en comparación con años anteriores; sin embargo, aún se sigue presentando baja concordancia en densidad parasitaria. Por ello, se requiere la continuidad de participación de los países en el PEED. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Objetivo: Evaluar la concordancia en resultado, especie, estadio y densidad parasitaria en el diagnóstico microscópico de malaria a los laboratorios de la red nacional de Perú en el marco del PEED. Métodos: Se evaluaron 22 Laboratorios de Referencia Regional y Laboratorios Intermedios de zonas endémicas y no endémicas a malaria. Se elaboraron paneles de 20 láminas con P. falciparum, P. vivax, mixta (Pf/Pv) y negativas; asimismo, las láminas positivas tenían diferentes estadios y densidades parasitarias. Los parámetros a evaluar fueron: concordancias de resultado y especie (aceptable >95%) y estadio con densidad parasitaria (p/μL) (aceptable >80%). Para el análisis estadístico se empleó el coeficiente Kappa de Cohen (κ) para determinar la concordancia en los resultados, así como también valores predictivos positivos (VPP) y valores predictivos negativos (VPN). Se estableció una escala de calificación según el nivel de concordancia del laboratorio evaluado. Se utilizó el sistema NetLab para la comparación y cálculo de los resultados en tiempo real. Resultados: Para el parámetro de resultado 20 de los laboratorios la concordancia fue aceptable y el VPP fue del 100% para todos. Para el parámetro de especie sólo 9 tuvieron una concordancia aceptable; el valor de concordancia κ fue muy buena para 12 laboratorios identificando a P. falciparum y para 9 laboratorios identificando P. vivax. En el parámetro de estadio 12 obtuvieron una concordancia aceptable; para el estadio asexuado de P. falciparum 12 y P. vivax 9 tuvieron concordancia κ muy buena. En contraste, la concordancia en densidad parasitaria fue no aceptable para todos los laboratorios, reflejando la aplicación errónea de la fórmula, así como la falta de experticia en la determinación de la densidad parasitaria en las solicitudes del diagnóstico microscópico de malaria que se realiza en los establecimientos de salud. Conclusiones: La evaluación refleja concordancia aceptable en el parámetro resultado; sin embargo, tienen una baja concordancia en los parámetros especie, estadio y densidad parasitaria; por ello, se deben realizar capacitaciones para una mejora en la concordancia y asegurar un diagnóstico rápido y oportuno. [ABSTRACT FROM AUTHOR]