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Os fibrossarcomas ou sarcomas de tecido mole de aplicação são neoplasias malignas associadas à reação imunogênica às substâncias aplicadas por via subcutânea ou intramuscular, induzindo o aumento da produção de fibroblastos e miofibroblastos de alteração do DNA, e correspondem a 46% das neoplasias cutâneas e subcutâneas em gatos. A eletroquimioterapia é uma técnica que associa a eletroporação e a quimioterapia, tendo potencial para alcançar altas taxas de remissão neoplásica, e indicada para o tratamento de neoplasias cutâneas e subcutâneas de qualquer tipo histológico. Visto que o fibrossarcoma de aplicação é uma neoplasia maligna com alto índice de invasão dos tecidos circunvizinhos, e dependendo da fase evolutiva da afecção, o tratamento deve ser multimodal, o presente trabalho teve por objetivo descrever a recidiva à longo prazo de fibrossarcoma de aplicação em gata idosa, cujo o tratamento instituto foi a excisão cirúrgica associada à eletroquimioterapia transoperatória. Gata idosa, sem raça definida, foi diagnosticada com neoformação medindo 1,5 x 1,2 cm em região abdominal esquerda, mesma região onde um ano atrás foi diagnosticado e removido fibrossarcoma de aplicação. O exame citopatológico foi sugestivo à sarcoma de tecido mole. Após a exérese da neoplasia com margens de segurança de 4 cm e eletroquimioterapia transoperatória não foi identificada presença de células neoplásicas, e o exame histopatológico foi sugestivo à recidiva de fibrossarcoma de aplicação. Concluiu-se que o diagnóstico definitivo do fibrossarcoma de aplicação foi o exame histopatológico, e em casos recidivantes, a eletroquimioterapia transoperatória induziu efeitos benéficos na manutenção de margens cirúrgicas seguras em gato idoso.

Ulcerações corneanas são comuns em animais de companhia e podem progredir para perfuração ocular. As úlceras profundas, especialmente com descemetocele, são emergências oftálmicas progredindo rapidamente para perfuração, requerendo terapia específica e imediata. O reparo efetivo do defeito corneano é fundamental para a manutenção ou restauração da função visual. Os retalhos pediculados conjuntivais são amplamente utilizados nestas condições por serem práticos e versáteis. No entanto, podem resultar em opacidade corneana prejudicando a função visual. Alternativas ao tratamento convencional podem surgir do estudo das diversas membranas biológicas criando a possibilidade de utilização de aloenxertos ou xenoenxertos nas cirurgias oftalmológicas. O objetivo deste estudo foi avaliar a viabilidade microbiológica da coleta, armazenamento e utilização de membranas biológicas diversas no tratamento de doenças corneanas em cães e gatos.

A pele de Tilápia do Nilo passou a ser considerada como um possível biocurativo, podendo ser utilizado em feridas superficiais, visando o reparo tecidual de forma mais rápida e menos dolorosa. Entretanto, para o sucesso do procedimento é necessário que a pele passe por rigorosos processos de descontaminação. O objetivo desse trabalho foi comprovar a eficácia do método de descontaminação química desse biomaterial com clorexidina e glicerol com armazenamento de até 60 dias. Em dois períodos de análises, foram utilizadas quatro Tilápias do Nilo. Após o abate, as peles foram removidas e, em seguida, foi realizado a descontaminação química utilizando gluconato de clorexidina a 2% e glicerol em diversas concentrações. As amostras foram armazenadas sob refrigeração (4ºC) em envelopes plásticos com dupla selagem. Nos dias 0, 7, 15, 30, 45 e 60, foi realizado a semeadura de uma solução contendo fragmentos de pele em placas dos meios de cultura ágar Sangue, ágar Macconkey e Sabouraund permanecendo encubadas por 72 horas. Após esse período, foi realizada a análise macroscópica e microbiológica de cada placa para a identificação de colônias e não foi observado crescimento bacteriano e/ou fúngico. O método de descontaminação utilizado teve a eficácia comprovada, visto que não houve crescimento bacteriano e/ou fúngico nas estrias de inoculação dos meios de cultura utilizados. Essa metodologia permite a criação de um banco de pele de tilápias armazenadas por até 60 dias.

O objetivo do estudo foi conhecer a prevalencia de problemas odontologicos em equinos oriundos do Norte Pioneiro do Parana. Foram avaliadas 55 cavidades orais de equinos da raca Quarto de Milha ou mesticos, machos e femeas. Os exames odontologicos foram realizados atraves da inspecao e palpacao da cavidade oral dos animais previamente sedados. Os resultados obtidos foram descritos em odontogramas individuais e analisados por regressao logistica (P

The ocular system in domestic animals is very complex and delicate, and composed for the eyeball and ocular adnexal. Disorders that affect the balance between production and outflow of aqueous humor can result in variations in intraocular pressure and glaucoma. Syndrome glaucomatous presents approximately 0.5% incidence in dogs and is a leading cause of blindness, eye pain and surgeries for enucleation. The secondary glaucoma are frequent and result of uveitis by bacteria of the genus Brucella, Leptospira, Ehrlichia, and other etiologic agents. In humans, the bacteria of the genus Helicobacter has attracted the attention of ophthalmologists because potentially operate in the pathogenesis of several eye problems, including glaucoma. In dogs, there are no studies that correlate the origin of glaucoma or secondary uveitis to bacteria of the genus Helicobacter. Whereas uveitis with unknown cause in dogs is very common and proven association between bacteria of the genus Helicobacter and this condition in humans, increases the importance of studies that evaluate these aspects also in pets, helping the understanding of pathogenesis and resulting in proposing therapeutic protocols most effective for glaucoma patients.

For the determination of the bacterial etiology of the external ocular diseases and sensitivity to antimicrobials, 38 dogs with external ...

For the determination of the bacterial etiology of the external ocular diseases and sensitivity to antimicrobials, 38 dogs with external ocular diseases, unilateral or bilateral, and 120 dogs without ocular diseases (control group), were studied between 08/2008 and 07/2009 in the Veterinary Hospital of North Paraná State University, Brazil. The collected samples of the inferior conjunctival sac were incubated at 37ºC in an aerobic environment, in blood agar and MacConkey agar, for 120 hours. After the presumptive identification, the bacterial species were identified by the systems APISTAPH (bio- Merieux, Incorporation), API 20 STREP (bio-Merieux, Incorporation) and BACTRAY (Laborclin, Ltd.) and incubated in Mueller-Hinton agar with antimicrobials disks, for sensitivity determination. For the risk factors, the owners answered a questionnaire with epidemiological variables. There was microorganism growth in 46 (73.02%) samples, with isolation of one microorganism in 42 samples and two microorganisms in four. Gram-positive bacteria corresponded to 76% of the isolated, Gramnegative 20% and yeasts fungi 4%. Staphylococcus spp totalized 66% of isolated, with S. aureus (24%) and S. intermedius (24%) the most prevalent. With the exception of S. intermedius (91.67%) and S. epidermidis (66.67%), the isolated bacterial species presented 100% resistance to the sulfonamide. The S. aureus isolated presented 91,67% sensitivity to chloranphenicol, tobramycin and amoxicillin/clavulanic acid, and the same percentile of resistance to tetracycline. The S. intermedius presented 100% sensitivity to amoxicillin/ clavulanic acid and 91,67% to gentamicin and 75% resistance to tetracycline and ceftriaxone. The associations of risk for external ocular diseases were clinical returns (OR=59,50, 7,29Para a determinação da etiologia bacteriana das afecções oculares externas e perfil de sensibilidade a antimicrobianos, 38 cães com doenças oculares externas, unilaterais ou bilaterais, e 120 cães sem doenças oculares (grupo controle), foram atendidos entre 08/2008 a 07/2009 no Hospital Veterinário da Universidade Estadual do Norte do Paraná. As amostras coletadas do saco conjuntival inferior foram semeadas em ágar sangue e MacConkey e incubadas em aerobiose a 37ºC por até 120 horas. Após a identificação presuntiva, as espécies bacterianas foram identificadas pelos sistemas APISTAPH (bio- Merieux, Inc.), API 20 STREP (bio-Merieux, Inc.) e BACTRAY (Laborclin, ltda.) e semeadas em agar Mueller-Hinton, para determinação da sensibilidade por meio da técnica de difusão de discos. Para as associações de risco, os proprietários dos 158 cães responderam um questionário com variáveis epidemiológicas. Das 63 amostras, houve crescimento de microrganismos em 46 (73,02%), com isolamento de um microrganismo em 42 amostras e de dois microrganismos em quatro. Bactérias Gram positivas corresponderam a 76% dos isolamentos, Gram negativas a 20% e fungos leveduriformes a 4%. Staphylococcus spp totalizaram 66% dos isolamentos, sendo S. aureus (24%) e S. intermedius (24%) as mais prevalentes. Exceto S. intermedius (91,67%) e S. epidermidis (66,67%), as espécies bacterianas isoladas apresentaram resistência de 100% às sulfonamidas. Os S. aureus isolados apresentaram sensibilidade de 91,67% para cloranfenicol, tobramicina e amoxicilina/clavulanato, e o mesmo percentual de resistência para tetraciclina. Os S. intermedius apresentaram 100% de sensibilidade para amoxicilina/clavulanato e 91,67% para gentamicina e resistência de 75% para tetraciclina e ceftriaxona. As associações de risco para as doenças oculares externas foram recidivas clínicas (OR=59,50, 7,29

In 2001, 698 urine samples were randomly collected from cattle at a slaughterhouse in the State of Paraná, Brazil. Direct examination using dark field microscopy was carried out immediately after collection. Five putative positive samples were cultured in modified EMJH medium, yielding two positive cultures (LO-14 and LO-10). Typing with monoclonal antibodies revealed that the two isolates were similar to Canicola (LO-14) and Copenhageni (LO-10). Microscopic agglutination test results show that Hardjo is the most common serovar in cattle in Brazil. Rats and dogs are the common maintenance hosts of serovars Copenhageni and Canicola. The excretion of highly pathogenic serovars such as Copenhageni and Canicola by cattle can represent an increasing risk for severe leptospirosis is large populations, mainly living in rural areas.No ano de 2001, 698 amostras de urina foram colhidas aleatoriamente, durante o abate em um frigorífico do Estado do Paraná, Brasil. O exame direto em microscópio de campo escuro foi realizado imediatamente após a colheita. As cinco amostras de urina positivas neste exame foram semeadas em meio EMJH modificado, sendo possível o crescimento de leptospiras em duas (LO-14 e LO-10). As estirpes isoladas foram tipificadas, por painel de anticorpos monoclonais, como mais similares ao perfil das amostras de referência dos sorovares Canicola (LO-14) e Copenhageni (LO-10). No Brasil, inquéritos sorológicos utilizando a prova de soroaglutinação microscópica mostram o predomínio de reações para o sorovar Hardjo em bovinos. Roedores e cães são os reservatórios mais comuns dos sorovares Copenhageni e Canicola, respectivamente. A eliminação dos sorovares Canicola e Copenhageni pela espécie bovina pode resultar em um aumento na ocorrência de casos graves de leptospirose humana, principalmente na população rural.

The aim of this work was to demonstrate the association between microscopic kidney´s lesions and presence of antibodies against Leptospira spp in apparently healthy swine from slaughterhouses located in northern Paraná State. Samples of kidney and blood coagulum were collected from 120 animals with macroscopic kidney´s lesions type white spots and from120 animals without macroscopic lesions, used as control. Samples of serum, were submitted to microscopic agglutination test (MAT) and samples of kidney for histopathological evaluation stained with Hematoxylin and Eosin (HE). Although no association (p=0,27) between macroscopic kidney’s lesions type white spots and presence of antibodies against Leptospira spp has been observed, there was a significant association (p=0,015) between interstitial nephritis and seropositivity to leptospirosis.O objetivo deste trabalho foi demonstrar a associação entre lesões renais microscópicas e a presença de anticorpos contra Leptospira spp em suínos aparentemente sadios, abatidos em frigorífico da região norte do Estado do Paraná. Foram colhidas amostras de rim e coágulo sanguíneo de 120 animais com lesões renais macroscópicas tipo white spots e de 120 sem lesões renais macroscópicas tipo White spots, utilizados como controle. As amostras de soro foram submetidas à prova de soroaglutinação microscópica (SAM) e as amostras de rim, ao exame histopatológico corado pela Hematoxilina-Eosina (HE). Embora nenhuma associação (p=0,27) entre as lesões renais macroscópicas tipo white spots e a presença de anticorpos contra Leptospira spp tenha sido observada, verificou-se uma significativa associação (p=0,015) entre a nefrite intersticial e a soropositividade para leptospirose.

A leptospirose é uma enfermidade bacteriana causada por espécies patogênicas do gênero Leptospira. Os roedores são considerados como principal reservatório, mas o cão, assim como outros animais domésticos, pode desenvolver a doença e se tornar carreadores assintomáticos. O objetivo desse trabalho foi conhecer a frequência de aglutininas anti-Leptospira spp. em cães atendidos no Hospital Veterinário da Universidade Estadual do Norte do Paraná (UENP), no município de Bandeirantes-Paraná. Foram testados, pela prova de soroaglutinação microscópica (SAM), 70 cães adultos assintomáticos para leptospirose, 27 machos e 43 fêmeas, de diferentes raças e idades. A frequência de animais positivos foi de 26,47%, 33,33% dos machos e 25,58% das fêmeas. Os sorovares Canicola (33,33%) e Autumnalis (27,78%) foram os mais frequentes, seguidos pelo Icterohaemorrhagiae (11%) e Grippotyphosa (11%). Conclui-se que a bactéria Leptospira está circulante em animais assintomáticos, podendo dispersar a doença para outros animais e inclusive para o homem.

A Chlamydophila abortus (anteriormente classificada como Chlamydia psittaci sorotipo 1) tem sido descrita em muitos países, associada principalmente com distúrbios reprodutivos em ovinos, bovinos e caprinos. O aborto enzoótico dos ovinos e caprinos e o aborto epizoótico dos bovinos são as doenças mais importantes causadas por esta bactéria. No Brasil, as pesquisas com C. abortus são praticamente inexistentes. O objetivo desta revisão é apresentar informações sobre modificações taxonômicas, ciclo de vida, epidemiologia, patogenia, sinais clínicos e diagnóstico da infecção por C. abortus principalmente em ovinos, bovinos e caprinos.Chlamydophila abortus (previously known as Chlamydia psittaci serovar 1) has been reported in many countries, associated with reproductive disorders in sheep, cattle, and goats. The enzootic abortion of sheep and goats and the epizootic bovine abortion are the most important diseases produced by this bacterium. In Brazil, there is scarce information about C. abortus. The objective of this review is to show information about taxonomic changes, life cycle, epidemiology, pathogenesis, clinical signs and diagnosis of C. abortus in sheep, cattle and goats.

A Chlamydophila abortus (anteriormente classificada como Chlamydia psittaci sorotipo 1) tem sido descrita em muitos países, associada principalmente com distúrbios reprodutivos em ovinos, bovinos e caprinos. O aborto enzoótico dos ovinos e caprinos e o aborto epizoótico dos bovinos são as doenças mais importantes causadas por esta bactéria. No Brasil, as pesquisas com C. abortus são praticamente inexistentes. O objetivo desta revisão é apresentar informações sobre modificações taxonômicas, ciclo de vida, epidemiologia, patogenia, sinais clínicos e diagnóstico da infecção por C. abortus principalmente em ovinos, bovinos e caprinos.

The objective of this trial was to detect leptospires in fragments of kidney, liver and uterus of 96 cows with unknown sanitary status, randomly chosen at slaughter in Paraná, Brazil. All 96 urine samples were submitted to direct examination using dark field microscopy. Positive samples in the direct examination and all kidney, liver and uterus fragments were cultured in EMJH modified medium and Tween 80/40/LH. Sections cut of kidney, liver and uterus were stained by Hematoxylin-Eosin (HE) and indirect immunoperoxidase with hyperimmune serum against serovar Hardjo (Hardjoprajitno) and strain Londrina 14 (LO14), from serovar Canicola, which was isolated in the northern region of Paraná state, Brazil, used as primary antibodies. Direct examination detected leptospires in the urine of four animals. All attempts to isolate leptospires from urine and kidney, liver and uterus fragments were negative after 16 weeks of incubation. In the HE stain, focal infiltrate of mononuclear inflammatory cells was observed in the renal interstitial area of most animals. In the indirect immunoperoxidase assay using hyperimmune serum against LO14 strain, the kidney of only one animal presented positive results. All fragments of kidney, liver and uterus tested with hyperimmune serum against serovar Hardjo were negative.O objetivo deste trabalho foi detectar leptospiras em fragmentos de rim, fígado e útero de 96 fêmeas bovinas com histórico sanitário desconhecido, escolhidas aleatoriamente durante o abate em um frigorífico no Estado do Paraná, Brasil. Todas as 96 amostras de urina foram submetidas ao exame direto em microscópio de campo escuro. As amostras positivas neste exame e todos os fragmentos de rim, fígado e útero foram semeados nos meios de cultura EMJH modificado e Tween 80/40/LH. Os cortes histológicos de rim, fígado e útero foram submetidos à coloração de Hematoxilina-Eosina (HE) e a prova de imunoperoxidase indireta com soros hiperimunes contra o sorovar Hardjo (Hardjoprajitno) e contra a estirpe Londrina (LO14), do sorovar Canicola, isolada no norte do Paraná, Brasil, utilizados como anticorpo primário. O exame direto detectou leptospiras na urina de quatro animais. Todas as tentativas de isolamento das urinas e fragmentos de rim, fígado e útero foram negativas após 16 semanas de incubação. No exame histopatológico foi observado infiltrado focal de células mononucleares no interstício renal da maioria dos animais. Na prova de imunoperoxidase indireta com o soro hiperimune contra a estirpe LO14, o rim de um animal foi o único a apresentar resultado positivo. Todos os fragmentos de rim, fígado e útero testados com o soro hiperimune contra o sorovar Hardjo foram negativos.

Leptospira isolation allows definitive diagnosis of the infection. Contamination by microorganisms is one of the inconveniences of the culture. The objective of this study was to describe the isolation of Leptospira from dogs, bovine and swine naturally infected. Urine samples from 14 dogs and three bovines, and kidney, liver, ovary, and uterus body samples from 36 slaughtered sows with unknown health history, were used. The urine and organ samples were cultured in culture medium. Modified Ellinghausen-McCullough-Johnson-Harris medium (EMJH) culture medium was used with addition of 5-fluorouracil, chloramphenicol, vancomycin, nalidixic acid and neomycin. Incubation was performed at 28oC for 24 hours, followed by subculture in modified EMJH without antibiotics. The cultures were assessed weekly for up to eight weeks for the dog and swine samples and for up to 16 weeks for the bovine samples. With this methodology, Leptospira spp could be isolated from 11 dogs, two bovines and liver fragments from two sows.O isolamento da Leptospira permite o diagnóstico definitivo da infecção. Um dos inconvenientes do cultivo é a contaminação por microrganismos. O objetivo deste trabalho foi descrever o isolamento de Leptospiras de cães, bovinos e suínos naturalmente infectados. Foram utilizadas amostras de urina de 14 cães, três bovinos, e amostras de rim, fígado, ovário e corpo de útero de 36 matrizes suínas de descarte sem histórico sanitário. As amostras de urina e tecidos foram semeadas em meio de cultura. Foi utilizado o meio de cultura Ellinghausen-McCullough-Johnson-Harris (EMJH) modificado acrescido de 5-fluorouracil, cloranfenicol, vancomicina, ácido nalidíxico e neomicina. A incubação foi realizada a 28°C por 24 horas, seguida de subcultura em EMJH modificado sem antibiótico. Com esta metodologia, foi possível o isolamento de Leptospira spp da urina de 11 cães e dois bovinos e de fragmentos de fígado de dois suínos.

Leptospira isolation allows definitive diagnosis of the infection. Contamination by microorganisms is one of the inconveniences of the culture. The objective of this study was to describe the isolation of Leptospira from dogs, bovine and swine naturally infected. Urine samples from 14 dogs and three bovines, and kidney, liver, ovary, and uterus body samples from 36 slaughtered sows with unknown health history, were used. The urine and organ samples were cultured in culture medium. Modified Ellinghausen-McCullough-Johnson-Harris medium (EMJH) culture medium was used with addition of 5-fluorouracil, chloramphenicol, vancomycin, nalidixic acid and neomycin. Incubation was performed at 28oC for 24 hours, followed by subculture in modified EMJH without antibiotics. The cultures were assessed weekly for up to eight weeks for the dog and swine samples and for up to 16 weeks for the bovine samples. With this methodology, Leptospira spp could be isolated from 11 dogs, two bovines and liver fragments from two sows.

Leptosporosis is a re-emergent zoonosis associated to close contact between man and dogs. It is important to determine whether the canine leptospirosis risk factors are similar to those of man or are variables exclusive to the species habitat and management. The objective of this study was to identify the individual and environmental variables most frequently associated with seropositive dogs attended in the Veterinary Hospital at Londrina State University. One hundred and sixty dogs of both sexes not vaccinated against leptospirosis were studied over a 13-month period (march 1997 to april 1998). All the animals were submitted to the microscopic aglutination test and to the direct urine test. An epidemiological questionnaire filled out for each one to investigate variables that could be associated with this infection and the results obtained were submitted to the c2 test. Antibody titers ³ 100 were detected in 40 dogs and were more frequent against the pyrogenes serovar (45,00%). Twenty-four animals were positive in the direct urine test. The analysis of the variables pointed as a risk factor for canine leptospirosis the habit of hunting rodent (OR = 4.22, 1.89£IC95%£9.50), the presence of flooded areas near the houses (OR = 2.86, 1.32£IC95%£6.22) and access to the street (OR = 2.57, 1.19£ IC95%£5.59). The results serve as a warning about the possibility of human exposure to some risk factors that these dogs are exposed to.A leptospirose é uma zoonose reemergente associada ao convívio próximo entre o cão e o homem. É importante determinar se os fatores de risco da leptospirose canina são semelhantes aos do homem, ou são variáveis exclusivas ao hábito e manejo da espécie. Os objetivos deste trabalho foram identificar variáveis individuais e ambientais, associadas a maior freqüência de cães soropositivos para leptospira, atendidos no Hospital Veterinário da Universidade Estadual de Londrina. Foram estudados 160 cães de ambos os sexos e não vacinados contra leptospirose, entre março de 1997 e abril de 1998. Todos os animais foram submetidos à prova de aglutinação microscópica e ao exame direto da urina. Para cada um deles foi utilizado um questionário epidemiológico que procurou investigar variáveis que poderiam estar associadas a essa infecção. Os resultados obtidos foram submetidos ao teste c2. Foram detectados títulos de anticorpos ³100 em 40 cães, sendo em maior freqüência contra o sorovar pyrogenes (45,00%) e 24 animais foram positivos no exame direto da urina. A análise das variáveis apontou como fator de risco para a leptospirose canina,o hábito de caçar roedor (OR=4,22; 1,89£IC95%£9,50), a presença de áreas alagadiças próximas às residências (OR=2,86; 1,32£IC95%£6,22) e o acesso à rua (OR=2,57; 1,19£IC95%£5,59). Os resultados servem como alerta em relação a possibilidade de exposição humana a alguns fatores de risco para a leptospirose a que estão expostos estes cães.

Chlamydophila abortus (C. abortus) is associated with reproductive problems in cattle, sheep, and goats. Diagnosis of C. abortus using embryonated chicken eggs or immortalized cell lines has a very low sensitivity. Polymerase chain reaction (PCR) assays have been used to detect C. abortus infection in clinical specimens and organ fragments, such as placenta, fetal organs, vaginal secretions, and semen. The aim of this study was to develop a PCR assay for the amplification of an 856-bp fragment of the rRNA gene of the Chlamydiaceae family. The PCR assay was evaluated using organs from 15 mice experimentally infected with the S26/3 reference strain of C. abortus. The results of the rRNA PCR were compared to the results from another PCR system (Omp2 PCR) that has been previously described for the Omp2 (outer major protein) gene from the Chlamydiaceae family. From the 15 C. abortus-inoculated mice, 13 (K=0.84, standard error =0.20) tested positive using the rRNA PCR assay and 9 (K=0.55, standard error=0.18) tested positive using the Omp2 PCR assay. The detection limit, measured using inclusion-forming units (IFU), for C. abortus with the rRNA PCR (1.05 IFU) was 100-fold lower than for the Omp2 PCR (105 IFU). The higher sensitivity of the rRNA PCR, as compared to the previously described PCR assay, and the specificity of the assay, demonstrated using different pathogenic microorganisms of the bovine reproductive system, suggest that the new PCR assay developed in this study can be used for the molecular diagnosis of C. abortus in abortion and other reproductive failures in bovines, caprines, and ovines.Chlamydophila abortus (C. abortus) é frequentemente associada a distúrbios reprodutivos em bovinos, ovinos e caprinos. Para o diagnóstico, os métodos de cultivo em ovo embrionado de galinha e em células de linhagem contínua apresentam baixa sensibilidade. A reação em cadeia da polimerase (PCR) tem sido utilizada em placenta, órgãos fetais, secreção vaginal e sêmen para o diagnóstico da C. abortus. O objetivo deste trabalho foi desenvolver um sistema de PCR para a amplificação de um fragmento de 856-pb do gene rRNA da família Chlamydiaceae. A PCR foi avaliada em órgãos de 15 camundongos infectados experimentalmente com a estirpe de referência S26/3 da C. abortus. Os resultados foram comparados com os obtidos em outro sistema de PCR, previamente descrito para o gene Omp2 (outer major protein) da família Chlamydiaceae. Dos 15 camundongos inoculados com C. abortus, 13 (K=0,84, erro padrão=0,20) foram positivos na rRNA PCR e nove (K=0,55, erro padrão=0,18) na Omp2 PCR. O limite de detecção da C. abortus na rRNA PCR (1,05 UFI) foi 100 vezes inferior à Omp2 PCR (105 UFI). A maior sensibilidade em comparação ao sistema de PCR anteriormente descrito, bem como a especificidade demonstrada frente a diferentes microrganismos patogênicos do sistema reprodutivo, abrem a perspectiva da utilização da PCR desenvolvida nesse estudo para o diagnóstico molecular da C. abortus em casos de abortamentos e outros distúrbios reprodutivos em bovinos, ovinos e caprinos.

Chlamydophila abortus (C. abortus) infection is related to reproductive failure in domestic ruminants. Although it has not been well characterized worldwide, this pathogen has already been identified in some European countries and in the USA. In Brazil, preliminary studies have shown serological evidence of C. abortus infection in herds with low antibody prevalence. Until now, the identification of C. abortus in biological samples from females presenting reproductive failures has not been described in Brazilian herds of domestic ruminants. The aim of this study was to evaluate the presence of the C. abortus in a collection of abortions from cattle (n=85), sheep (n=12), and goats (n=8), in samples of vaginal mucus from cows (n=13), sheep (n=90), and goats (n­=20), and in semen from sheep (n=10) and goats (n=5). The specimens (n=243) were evaluated using a PCR assay developed to amplify the 16S-23S rRNA intergenic space of C. abortus. A PCR assay with an internal control, which amplifies a fragment from the ND5 gene of bovine mitochondrial DNA, was used in order to evaluate the efficiency of the DNA extraction and of the PCR reaction. All biological samples (n=243) included in this study were negative for C. abortus in the PCR assay. The internal control enabled the amplification of a product from the bovine mitochondrial ND5 gene in all cattle abortion samples (n=85). Given the serological evidence indicating the presence of C. abortus infection in Brazilian herds of domestic ruminants, and considering the wide sampling evaluated, the failure to identify C. abortus in this survey suggests that the frequency of clinical signs in infected animals may be low or even absent.A infecção pela Chlamydophila abortus (C. abortus) em ruminantes domésticos está relacionada com distúrbios reprodutivos. Apesar de ainda pouco estudada em todo o mundo, a infecção já foi identificada em alguns países europeus e também nos EUA. No Brasil, estudos preliminares demonstraram evidências sorológicas da infecção em alguns rebanhos com baixa prevalência de anticorpos. Até o momento ainda não foi possível a identificação de C. abortus a partir de material biológico proveniente de fêmeas com problemas reprodutivos em rebanhos brasileiros. O objetivo deste trabalho foi avaliar a presença da C. abortus em uma coleção de abortos bovinos (n=85), ovinos (n=12) e caprinos (n=8), em amostras de muco vaginal bovino (n=13), ovino (n=90) e caprino (n=20), e em sêmen ovino (n=10) e caprino (n=5). As amostras biológicas (n=243) foram avaliadas por meio de técnica de PCR desenvolvida para a amplificação do espaço intergênico 16S-23S RNAr da C. abortus. Um controle interno da reação, que amplifica um fragmento do gene ND5 do DNA mitocondrial de bovino, foi utilizado para a avaliação da eficiência da extração e da amplificação do DNA nas amostras provenientes de abortamento bovino. Todas as amostras biológicas (n=243) incluídas nesse estudo resultaram negativas para a C. abortus na PCR. O controle interno da reação possibilitou a amplificação de um produto do gene ND5 mitocondrial bovino em todas as amostras de aborto bovino (n=85). Apesar de evidências,,sorológicas indicarem a presença da infecção por C. abortus em rebanhos de ruminantes no Brasil, e considerando o número de amostras biológicas avaliadas, a não identificação de C. abortus nesse estudo sugere que a frequência de sinais clínicos nos animais infectados pode ser baixa ou mesmo ausente.

Chlamydophila abortus is a recognized cause of bovine epizootic abortion. Abortion, premature birth and weak lamb/calf, stillbirth and repeat breeding in irregular intervals are the most frequent disease manifestations. The complement fixation test is the recommended by the World Organization of Animal Health (OIE) for Chlamydophila spp. serologic diagnosis. The aim of this study was estimate the prevalence of antibodies against Chlamydophila spp. in cattle herds with abortion, selected inside the sampling design of National Program of Control and Erradication of Brucellosis in Parana state. Serum samples of 3,102 cows (age > 24 months) from 373 herds were analyzed by complement fixation test. Totally, 44 (1.42%) animal were positive with titers > 32. The seroprevalence of Chlamydophila spp. in the herds was 8.82% (6.15%-12.17%). Four variables were associated with seroprevalence for Chlamydophila spp. in the final model of logistic regression: confined or semi-confined breeding (OR=3.339, P=0.004), farms with less than 35 cows (OR=3.339, P=0.017), abortion in the pasture (OR=2.372, P=0.037) and pasture rent (OR=3.398, P=0.006) were risk factors for Chlamydophila spp. This bacterium infected a small number of cattle from herds with abortion in Parana state. Chlamydophila spp impact as abortion cause is reduced in this state.

In 2001, 698 urine samples were randomly collected from cattle at a slaughterhouse in the State of Paraná, Brazil. Direct examination using dark field microscopy was carried out immediately after collection. Five putative positive samples were cultured in modified EMJH medium, yielding two positive cultures (LO-14 and LO-10). Typing with monoclonal antibodies revealed that the two isolates were similar to Canicola (LO-14) and Copenhageni (LO-10). Microscopic agglutination test results show that Hardjo is the most common serovar in cattle in Brazil. Rats and dogs are the common maintenance hosts of serovars Copenhageni and Canicola. The excretion of highly pathogenic serovars such as Copenhageni and Canicola by cattle can represent an increasing risk for severe leptospirosis is large populations, mainly living in rural areas. No ano de 2001, 698 amostras de urina foram colhidas aleatoriamente, durante o abate em um frigorífico do Estado do Paraná, Brasil. O exame direto em microscópio de campo escuro foi realizado imediatamente após a colheita. As cinco amostras de urina positivas neste exame foram semeadas em meio EMJH modificado, sendo possível o crescimento de leptospiras em duas (LO-14 e LO-10). As estirpes isoladas foram tipificadas, por painel de anticorpos monoclonais, como mais similares ao perfil das amostras de referência dos sorovares Canicola (LO-14) e Copenhageni (LO-10). No Brasil, inquéritos sorológicos utilizando a prova de soroaglutinação microscópica mostram o predomínio de reações para o sorovar Hardjo em bovinos. Roedores e cães são os reservatórios mais comuns dos sorovares Copenhageni e Canicola, respectivamente. A eliminação dos sorovares Canicola e Copenhageni pela espécie bovina pode resultar em um aumento na ocorrência de casos graves de leptospirose humana, principalmente na população rural.

Chlamydophila abortus (anteriormente classificada como Chlamydia psittaci sorotipo 1) tem sido descrita em muitos países, associada principalmente com distúrbios reprodutivos em ovinos, bovinos e caprinos. A detecção de C. abortus é usualmente realizada por métodos sorológicos (fixação de complemento, ELISA) e de cultivo em células de linhagens ou ovo embrionado de galinha. O diagnóstico pela amplificação do DNA pela PCR tem sido proposto por apresentar alta sensibilidade e especificidade. Este trabalho teve por objetivo detectar Chlamydophila spp por técnicas molecular e sorológica em amostras biológicas de animais experimentalmente e naturalmente infectados. Um sistema de PCR foi desenvolvida para a amplificação do espaço intergênico 16S-23S do RNAr da família Chlamydiaceae, em órgãos de camundongos (n=15) experimentalmente infectados com a estirpe de referência S26/3 da C. abortus. Os resultados encontrados foram comparados a outro sistema de PCR previamente descrito para o gene Omp2 (outer major protein). Dos 15 camundongos inoculados com C. abortus, 13 foram positivos na RNAr PCR e nove na Omp2 PCR. O limite de detecção de C. abortus pela RNAr PCR (1,05 unidades formadoras de inclusão -UFI) foi cem vezes superior à Omp2 PCR (105 UFI). A RNAr PCR também foi utilizada para a detecção da C. abortus em uma coleção de abortos bovinos (n=85), ovinos (n=12) e caprinos (n=8), em amostras de muco vaginal de ovelhas (n=90) e de cabras (n=20) e em sêmen de ovinos (n=10) e caprinos (n=5), coletados no período de 2002 a 2007. Um controle interno (PCR com os primers BOV1 e BOV2 para o gene ND5 do DNA mitocondrial de bovino) foi utilizado nas amostras de aborto bovino para a avaliação da eficiência das técnicas de extração e de amplificação do DNA. Todas as amostras de aborto, muco vaginal e sêmen foram negativas para C. abortus na RNAr PCR. O controle interno amplificou um produto de 626 pb para o gene ND5 em todas as amostras de aborto bovino. Para o diagnóstico sorológico, 3.102 amostras de soro de fêmeas bovinas (idade > 24 meses) provenientes de 373 propriedades, com histórico de abortamento, foram testadas pela prova de fixação de complemento. As propriedades rurais com abortamento foram selecionadas dentro do delineamento amostral do Plano Nacional para o Controle e Erradicação da Brucelose no estado do Paraná. Ao total, 44 (1,42%) animais foram positivos com títulos >32. A soroprevalência estimada para Chlamydophila spp nas propriedades foi de 8,82% (6,15%-12,17%). A criação de animais confinados ou semiconfinados foi considerada uma associação de risco (OR= 2,21; p= 0,031). Apesar da falta de evidência de C. abortus nas amostras de aborto, muco vaginal e sêmen, avaliadas pela PCR neste trabalho, os resultados sorológicos positivos das fêmeas bovinas de propriedades com histórico de abortamento no estado do Paraná sugerem a presença da bactéria. Assim, novos estudos sobre a ocorrência de Chlamydophila spp. em rebanhos bovinos, ovinos e caprinos do país devem ser realizados. Chlamydophila abortus (previously Chlamydophila psittaci serotype 1) is reported in many countries, related with reproductive disorders mainly in ovine, bovine and goat. Usually, C. abortus detection is carry out by serologic methods (complement fixation test, ELISA) and in cell cultures or embryonated chicken eggs. DNA amplification diagnosis by PCR showed high sensibility and specificity. The aim of this study was to detect Chlamydophila spp. by molecular and serologic methods in samples of experimentally and naturally infected animals. A PCR was developed to amplified the 16S-23S rRNA intergenic space of Chlamydiaceae in organs of mice experimentally infected with S26/3 strain of C. abortus (n=15). The results were compared with other PCR, previously described, and based in the Omp2 gene (outer major protein) of Chlamydiaceae family. Of the 15 mice inoculated with C. abortus, 13 had been positive in rRNA PCR and 9 in Omp2 PCR. The detection limit of C. abortus in rRNA PCR (1,05 UFI) was a hundred times superior to Omp2 PCR (105 UFI). This rRNA PCR was also used to detect C. abortus in a collection of bovine abortions (n=85), sheep (n=12) and goat (n=8), in samples of ewe (n=90) and goat vaginal discharge (n=20) and ram (n=10) and goat semen (n=5), collected between 2002 a 2007. An internal control (PCR with BOV1 and BOV2 primers for gene ND5 of bovine mitochondrial DNA) was used in bovine abortion samples for evaluation of efficiency of DNA extration and PCR. All abortion, vaginal discharge and semen samples were negative in PCR for C. abortus. The internal control amplified a product of 626 pb for ND5 gene in all bovine abortion samples. To serologic diagnosis, 3.102 serum samples of cows (age > 24 months), from 373 herds with abortion were analyzed by complement fixation test. These herds were selected inside the sampling design of National Program of Control and Erradication of Brucellosis in Paraná state. Forty four (1.42%) animal were positive with titers > 32. The seroprevalence of Chlamydophila spp in the herds was 8.82% (6.15%-12.17%). Confined or semi-confined breeding was a risk association (OR = 2.21, p = 0.031). Although the lack of evidence of C. abortus in abortion, vaginal discharge e semen by PCR in this study, positive serologic results in cows from herds with abortions in Paraná state, Brazil suggest the occurrence of the bacterium infection. Thus, more studies should be done about the occurrence of Chlamydophila spp. in bovine, ovine and caprine in Brazil.

A total of 320 horses were studied in this paper, both male and female, between two and 17 years of age, which were used for traction of wagons in the urban area of the municipality of Londrina (PR). These animals were kept, after their daily work, in abandoned areas or plots, in the outskirts of the urban area of the city. When these animals were attended by the veterinarians, between 1996 and 2005, none of them presented symptoms suggesting leptospirosis. The most frequent reasons for the visit were loss of weight, unwillingness for work, parasitism, laminess, and wounds. Microscopic Seroagglutination Test (SAM), with 22 Leptospira serovars, was performed in sera sample from all these animals. The aim of this study was to investigate the occurrence of antibodies against Leptospira spp. in horses from the urban area of Londrina (PR). From the samples tested, 214 (66.88%) were considered positive, with titers between 100 and 3200, being that 49 (22.90%) presented antibodies against a single serovar of Leptospira, and 165 (77.10%) samples presented antibodies against two or more serovars simultaneously, where in 88 (53.33%) it was possible to characterize the most likely probable serovar. Antibodies against the serovar Icterohaemorrhagiae were detected in 32 (23.36%) animals. Foram estudados 320 eqüinos, machos e fêmeas com idade entre dois a 17 anos, utilizados para tração de carroças na área urbana do município de Londrina (PR). Estes animais eram mantidos, após a jornada diária de serviço, em áreas ou terrenos baldios, localizados na periferia da área urbana do município. Por ocasião do atendimento, realizado entre 1996 e 2005, no Hospital Veterinário da Universidade Estadual de Londrina, nenhum dos animais apresentou sintomas sugestivos de leptospirose, sendo os motivos mais freqüentes, o emagrecimento, a indisposição para o trabalho, a verminose, problemas no sistema locomotor e feridas. A prova de soroaglutinação microscópica (SAM), com 22 sorovares de Leptospira, foi realizada em amostra de soro de todos os animais. O objetivo deste trabalho foi investigar a ocorrência de anticorpos contra Leptospira spp. em eqüinos da área urbana do município de Londrina. Foram consideradas positivas 214 (66,88%) amostras de soros com títulos entre 100 e 3200, sendo em 49 (22,90%) detectadas anticorpos contra um único sorovar de Leptospira e em 165 (77,10%) amostras com anticorpos contra dois ou mais sorovares simultâneamente, sendo em 88 (53,33%) destes caracterizado o sorovar mais provável. Anticorpos contra o sorovar Icterohaemorrhagiae foram detectados em 32 (23,36%) animais.

A Chlamydophila abortus (anteriormente classificada como Chlamydia psittaci sorotipo 1) tem sido descrita em muitos países, associada principalmente com distúrbios reprodutivos em ovinos, bovinos e caprinos. O aborto enzoótico dos ovinos e caprinos e o aborto epizoótico dos bovinos são as doenças mais importantes causadas por esta bactéria. No Brasil, as pesquisas com C. abortus são praticamente inexistentes. O objetivo desta revisão é apresentar informações sobre modificações taxonômicas, ciclo de vida, epidemiologia, patogenia, sinais clínicos e diagnóstico da infecção por C. abortus principalmente em ovinos, bovinos e caprinos. Chlamydophila abortus (previously known as Chlamydia psittaci serovar 1) has been reported in many countries, associated with reproductive disorders in sheep, cattle, and goats. The enzootic abortion of sheep and goats and the epizootic bovine abortion are the most important diseases produced by this bacterium. In Brazil, there is scarce information about C. abortus. The objective of this review is to show information about taxonomic changes, life cycle, epidemiology, pathogenesis, clinical signs and diagnosis of C. abortus in sheep, cattle and goats.

The objective of this trial was to detect leptospires in fragments of kidney, liver and uterus of 96 cows with unknown sanitary status, randomly chosen at slaughter in Paraná, Brazil. All 96 urine samples were submitted to direct examination using dark field microscopy. Positive samples in the direct examination and all kidney, liver and uterus fragments were cultured in EMJH modified medium and Tween 80/40/LH. Sections cut of kidney, liver and uterus were stained by Hematoxylin-Eosin (HE) and indirect immunoperoxidase with hyperimmune serum against serovar Hardjo (Hardjoprajitno) and strain Londrina 14 (LO14), from serovar Canicola, which was isolated in the northern region of Paraná state, Brazil, used as primary antibodies. Direct examination detected leptospires in the urine of four animals. All attempts to isolate leptospires from urine and kidney, liver and uterus fragments were negative after 16 weeks of incubation. In the HE stain, focal infiltrate of mononuclear inflammatory cells was observed in the renal interstitial area of most animals. In the indirect immunoperoxidase assay using hyperimmune serum against LO14 strain, the kidney of only one animal presented positive results. All fragments of kidney, liver and uterus tested with hyperimmune serum against serovar Hardjo were negative. O objetivo deste trabalho foi detectar leptospiras em fragmentos de rim, fígado e útero de 96 fêmeas bovinas com histórico sanitário desconhecido, escolhidas aleatoriamente durante o abate em um frigorífico no Estado do Paraná, Brasil. Todas as 96 amostras de urina foram submetidas ao exame direto em microscópio de campo escuro. As amostras positivas neste exame e todos os fragmentos de rim, fígado e útero foram semeados nos meios de cultura EMJH modificado e Tween 80/40/LH. Os cortes histológicos de rim, fígado e útero foram submetidos à coloração de Hematoxilina-Eosina (HE) e a prova de imunoperoxidase indireta com soros hiperimunes contra o sorovar Hardjo (Hardjoprajitno) e contra a estirpe Londrina (LO14), do sorovar Canicola, isolada no norte do Paraná, Brasil, utilizados como anticorpo primário. O exame direto detectou leptospiras na urina de quatro animais. Todas as tentativas de isolamento das urinas e fragmentos de rim, fígado e útero foram negativas após 16 semanas de incubação. No exame histopatológico foi observado infiltrado focal de células mononucleares no interstício renal da maioria dos animais. Na prova de imunoperoxidase indireta com o soro hiperimune contra a estirpe LO14, o rim de um animal foi o único a apresentar resultado positivo. Todos os fragmentos de rim, fígado e útero testados com o soro hiperimune contra o sorovar Hardjo foram negativos.

Leptospira isolation allows definitive diagnosis of the infection. Contamination by microorganisms is one of the inconveniences of the culture. The objective of this study was to describe the isolation of Leptospira from dogs, bovine and swine naturally infected. Urine samples from 14 dogs and three bovines, and kidney, liver, ovary, and uterus body samples from 36 slaughtered sows with unknown health history, were used. The urine and organ samples were cultured in culture medium. Modified Ellinghausen-McCullough-Johnson-Harris medium (EMJH) culture medium was used with addition of 5-fluorouracil, chloramphenicol, vancomycin, nalidixic acid and neomycin. Incubation was performed at 28oC for 24 hours, followed by subculture in modified EMJH without antibiotics. The cultures were assessed weekly for up to eight weeks for the dog and swine samples and for up to 16 weeks for the bovine samples. With this methodology, Leptospira spp could be isolated from 11 dogs, two bovines and liver fragments from two sows. O isolamento da Leptospira permite o diagnóstico definitivo da infecção. Um dos inconvenientes do cultivo é a contaminação por microrganismos. O objetivo deste trabalho foi descrever o isolamento de Leptospiras de cães, bovinos e suínos naturalmente infectados. Foram utilizadas amostras de urina de 14 cães, três bovinos, e amostras de rim, fígado, ovário e corpo de útero de 36 matrizes suínas de descarte sem histórico sanitário. As amostras de urina e tecidos foram semeadas em meio de cultura. Foi utilizado o meio de cultura Ellinghausen-McCullough-Johnson-Harris (EMJH) modificado acrescido de 5-fluorouracil, cloranfenicol, vancomicina, ácido nalidíxico e neomicina. A incubação foi realizada a 28°C por 24 horas, seguida de subcultura em EMJH modificado sem antibiótico. Com esta metodologia, foi possível o isolamento de Leptospira spp da urina de 11 cães e dois bovinos e de fragmentos de fígado de dois suínos.

O objetivo deste trabalho foi estimar a prevalencia de anticorpos anti- Chlamydophila abortus em ovinos de propriedades localizadas na regiao de Londrina, estado do Parana. A prova de fixacao de complemento foi realizada em 267 amostras de soro sanguineo de ovinos adultos, provenientes de oito propriedades e foram considerados positivos os soros com titulos ? 32. Em sete (87,50%) propriedades foram detectados 19 (7,11%) animais positivos, sendo 17 com titulos de 32, um com 64 e outro com 128. Nestas propriedades, os sinais clinicos descritos foram abortamentos, natimortalidade, nascimento de crias fracas e repeticao de cio. A elevada frequencia de propriedades com pelo menos um animal positivo e a ocorrencia de 19 (7,11%) animais positivos na prova de fixacao de complemento sugerem a presenca de Chlamydophila abortus nos animais das propriedades estudadas.

O aparelho da visao nos animais domesticos e bastante complexo e delicado, formado pelo bulbo ocular e seus anexos. Disturbios que comprometam o equilibrio entre a producao e a drenagem do humor aquoso podem resultar em variacoes da pressao intra-ocular e glaucoma. A sindrome do paciente glaucomatoso apresenta aproximadamente 0,5% de incidencia nos caes e e uma das principais causas de cegueira, dor ocular e indicacao de cirurgias para enucleacao. Os glaucomas secundarios sao frequentes e podem resultar de quadros de uveite causadas pela infeccao por bacterias dos generos Brucella , Leptospira , Ehrlichia , entre outros agentes etiologicos. Nos humanos, as bacterias do genero Helicobacter tem atraido a atencao dos oftalmologistas, pois potencialmente atuam na patogenese de diversos problemas oculares, incluindo o glaucoma. Em caes, nao foram realizados estudos que correlacionem a origem dos glaucomas ou uveites secundarias com bacterias do genero Helicobacter. Considerando que a uveite com causas diversas nos caes e muito frequente e que, comprovadamente, ha associacao entre bacterias do genero Helicobacter e esta condicao em humanos, evidencia-se a importância de estudos que avaliem estes aspectos tambem em animais de companhia, facilitando a compreensao da etiopatogenia dos glaucomas e possivelmente acarretando na proposicao de protocolos terapeuticos mais eficazes para os pacientes glaucomatosos.