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Cutaneous Larva Migrans (CLM), also known as creeping eruption or ground itch, is a parasitic infection caused by larvae of the Ancylostoma braziliense and A. caninum species, which usually infect dogs and cats. CLM is considered a neglected disease that affects populations in developing countries located in tropical regions such as Brazil, India, and the Caribbean. Although the infection is more prevalent in areas with low economic and social development, sports activities on sand courts or beaches have led to infections among an economically privileged audience, including international travelers. Considering the current importance of CLM, this work describes an outbreak of the disease among residents of a high-end residential condominium located in the municipality of Lavras, Minas Gerais, Brazil. During the epidemiological investigation, five individuals with CLM were identified, and environmental risk factors for sand contamination were discovered. Preventive measures and controls for new cases were advised, as well as health education initiatives aimed at guiding the residents. The findings highlight the importance of CLM as a public health issue, even among populations with high socioeconomic status, and the need for increased awareness and control measures to prevent further outbreaks. This study adds to the growing body of evidence on the epidemiology of CLM and underscores the need for continued research to develop effective prevention and control strategies for neglected parasitic diseases.

A doença causada pelo novo coronavírus trouxe vários impactos negativos, inclusive sobre os catadores de materiais reciclados que tiveram suas atividades interrompidas em função das medidas de controle implementadas mundialmente. Algumas regiões, como foi o caso do município de Lavras, adotaram protocolos de biossegurança para permitir o retorno das atividades de coleta e processamento do material reciclável. Neste sentido, tornou-se relevante avaliar os efeitos das medidas de prevenção à COVID-19 na infecção humana e contaminação ambiental pelo SARS-CoV-2. No presente trabalho avaliou-se a contaminação ambiental e a infecção de trabalhadores de uma Associação de Catadores de Materiais Recicláveis localizada no município de Lavras, sudeste do Brasil. Amostras ambientais, coletadas com o uso de swabs friccionados em superfícies do galpão de armazenamento de resíduos e amostras de swab nasofaringeo dos catadores foram submetidos à extração de RNA viral e RT-qPCR. Não foi encontrado RNA viral em nenhuma amostra ambiental e todos os trabalhadores apresentaram resultado negativos para a presença do SARS-CoV-2. Os catadores não estavam com o protocolo vacinal iniciado. As medidas de vigilância e controle da COVID-19 foram rigorosamente implementadas no município. Além disso, os catadores também seguiram os protocolos de biossegurança aprovados pelas autoridades locais. Os dados do presente estudo demonstram a importância de protocolos bem estabelecidos para prevenção da infecção por SARS-CoV-2, em um grupo caracterizado pela vulnerabilidade, principalmente após a mudança de cenário com a pandemia de COVID-19.

The global spread of SARS-CoV-2 has resulted in a public health crisis and major economic impact, with millions of confirmed cases and deaths worldwide. An important aspect of controlling the spread of the virus is testing individuals for COVID-19. Currently, the gold standard is the association of RT-qPCR with the Nasopharyngeal Swab (Ns), which is uncomfortable and requires specialized personnel for sample collection. Mass testing, unprecedented in human history, leads to the search for innovations and facilities in the methodology, but which maintains diagnostic security, even in the face of new variants of the virus. This study aimed to evaluate a less invasive alternative method, collecting samples from the oral mucosa with a swab (Os). For comparison, the same patients were tested using biological material collected through Os and Ns. Samples were processed and analyzed by RTq-PCR. Results showed 100% concordance between Ns and Os samples from elderly patients, and SARS-CoV-2 was detected in saliva samples up to 14 days after the onset of symptoms in 31.25% of hospitalized patients. Our data and conclusion provide an important base for future studies of standardization and validation of the procedure described here. Using a more comfortable method could increase population adherence to testing and contribute to controlling the transmission of COVID-19.

Visceral Leishmaniasis is a vector-borne disease that represents one of the most important public health problems in the world. This neglected tropical zoonosis shows an increasing urbanization process, since the end of the 1980s. The increase in ecotourism practices, mainly in regions nearby urban areas facilitates the interaction between companion animals, humans, and wildlife. Known as the land of the waterfalls, Carrancas is a 728 km² Brazilian municipality located at 1052m, in the southeast of Brazil. The region is surrounded by urban areas with autochthonous cases of Canine Visceral Leishmaniasis and lacking studies on the presence of vectors of Leishmania spp. The municipality is part of the most important ecotourism area, a renowned tourist destination in Brazil and abroad called Royal Road or “Estrada Real – ER. Due to the increasing number of travelers involved in ecotourism and exposing them to risk factors for diseases, we propose to investigate the presence of phlebotomine sandflies in a protected area in the southern state of Minas Gerais, which is constantly visited by tourists over the world. Six specimens of Lutzomyia longipalpis were captured in Carrancas. This is the first report of L. longipalpis in an ecotourism area south of Minas Gerais State. This record contributes to our knowledge of the geographical distribution of the main vector of American Visceral Leishmaniasis in Carrancas and alerts us to the need for permanent surveillance and health education at this location.

As leishmanioses são doenças negligenciadas de grande importância em saúde pública. Esta doença, causada por parasitos do gênero Leishmania e transmitidos por insetos vetores pode se manifestar sob as formas visceral, cutânea e muco-cutânea. A leishmaniose visceral ganhou importante destaque na abordagem da “Saúde Única” em função da interface humana, veterinária e ambiental. Neste contexto, a detecção de novas áreas com ocorrência de casos autóctones de LV canina é o marco para iniciar a investigação, vigilância e monitoramento epidemiológico. O município de Lavras era considerado área silenciosa e não vulnerável para leishmaniose visceral canina até o ano de 2013. Diante da necessidade de confirmação da infecção canina, o objetivo do presente trabalho foi confirmar a ocorrência de casos autóctones de LV canina no município de Lavras – MG, com técnicas parasitológicas, sorológicas e moleculares. A partir da Reação em Cadeia da Polimerase em tempo real – qPCR, foi analisada a carga parasitária de amostras de baço e medula óssea de nove cães naturalmente infectados, sabidamente positivos para LVC nos testes DPP® e EIE LVC Bio-Manguinhos®. Foram observadas quatro amostras positivas para Leishmania infantum em medula óssea, e cinco amostras positivas de baço. Não houve diferença significativa para os valores de carga parasitária entre os dois tipos de tecido analisados. A confirmação da infecção por L. infantum em cães realizada neste estudo é a primeira na macrorregião de Lavras - sul do estado de Minas Gerais, e serve de alerta para implementação das ações de vigilância e controle, no sentido de evitar a dispersão da doença e a ocorrência de casos humanos.

Cutaneous leishmaniasis (CL) is not a life-threatening condition, the treatment of which can cause serious adverse effects and sometimes lead to death. In this study, we report a case of success in the treatment of LC of a 2.5 cm lesion located in the neck region of a 22-year-old man treated with intralesional meglumine antiomoniate (IL-MA) without adverse effects and without recurrence or complications after 18 months of follow-up. The results suggest that the treatment of CL lesions with IL-MA is simple, efficient and safe.

The COVID-19 pandemic brought a series of challenges to the academic community. Social distancing measures imposed the interruption of face-to-face activities besides the implementation of remote work and online classes. For safe and gradual return, the monitoring of individuals, quick detection of infection, contact tracing, and isolation of those infected became essential. In this sense, we developed strategies to face the pandemic at the Federal University of Lavras (UFLA) - Brazil. A Telemedicine Program (TeleCovid) and the assemblage of a laboratory for SARS-CoV-2 molecular diagnosis (LabCovid) were essential measures for monitoring, preventing, and controlling outbreaks at the university. TeleCovid works with a team of students who guide and answer questions regarding COVID-19 and, when necessary, make the referral for online consultation with medical professionals. In the suspicion of SARS-CoV-2 infection, the doctor refers the patient for testing at LabCovid. LabCovid performs the sample collection using nasal swabs, followed by processing samples by the RT-qPCR method. We have placed all positive patients in isolation and tested their contacts. This approach meant that positive cases were identified early, thus avoiding outbreaks in different environments in face-to-face activities.Keyword: Covid-19; university, RT-qPCR

INTRODUÇÃO: A Síndrome Pós-Covid constitui novo desafio para os profissionais de saúde. É complicação decorrente da infecção por Sars-CoV-2, considerada condição inflamatória difusa e multissistêmica. OBJETIVO: Realizar uma revisão integrativa sobre a prática da reabilitação física em idosos, no contexto do Pós-Covid, atualizando os profissionais da saúde quanto às particularidades dessa população. MÉTODO: Foram realizadas buscas em bases da área de saúde (MEDLINE, PEBMED) nos portais Periódicos CAPES e Google Acadêmico, e fontes de literatura adicional (OMS, CREFITO-4). Foram utilizados os descritores "post covid", "rehabilitation", "elderly", "age", "guidline" e “physiotherapy”, com operadores booleanos “and" e “or". Utilizou-se o critério de seleção de estudos que apresentaram peculiaridades no Pós-Covid em idosos. RESULTADOS: Foram encontrados onze artigos nas bases e fontes de literatura adicional, sendo incluídos cinco artigos que atenderam ao critério de seleção. A população idosa apresentou maior fragilidade e vulnerabilidade, sarcopenia, dinapenia e risco de trombose, com maior mortalidade e fragilidade, assim como desnutrição e déficit protéico. Os candidatos à fisioterapia foram aqueles que apresentaram Covid grave, porém as sequelas podem ocorrer também após as formas mais leves da doença. Os estudos demonstraram maior risco de delírio na fase aguda e mortalidade associada à aspiração na internação em UTI; alterações de memória e dificuldade de comunicação (por presbiacusia ou uso da máscara). CONCLUSÃO: Conclui-se que há um déficit de estudos na área de Gerontologia para a Síndrome Pós-Covid fazendo-se necessários aprimoramentos neste campo, em função das peculiaridades encontradas nessa população.

American visceral leishmaniasis (VL) is a parasitic disease whose main domestic reservoir in the urban environment is dog and is considered one of the most important zoonoses in the context of public health. Serological tests are typically used for the diagnostic screening of the disease. This study aimed to analyse the performance of different methodologies used in the diagnosis of VL in dogs sampled from a recent transmission area. The sample consisted of 52 dogs separated into groups based on the absence and presence of clinical signs of VL. The following serological techniques were carried out: the DPP® rapid test (RT), the ALERE® RT and an RT and immunoenzymatic assay with a recently developed protein (rKDDR-plus). In addition, molecular techniques were carried out with conjunctival swabs, and bone marrow aspirate samples and parasitological samples were obtained directly from bone marrow aspirates. It was concluded that 27.4% of seronegative dogs were infected, but the serological tests, used as screening tests, showed unsatisfactory sensitivity results (average: 51.2%) for dogs without clinical signs. It was suggested that polymerase chain reaction with conjunctival swabbing be used as a screening test for dogs without clinical signs, as this is a non-invasive collection technique with high-sensitivity values.

The COVID-19 pandemic brought a series of challenges to the academic community. Social distancing measures imposed the interruption of face-to-face activities besides the implementation of remote work and online classes. For safe and gradual return, the monitoring of individuals, quick detection of infection, contact tracing, and isolation of those infected became essential. In this sense, we developed strategies to face the pandemic at the Federal University of Lavras (UFLA) - Brazil. A Telemedicine Program (TeleCovid) and the assemblage of a laboratory for SARS-CoV-2 molecular diagnosis (LabCovid) were essential measures for monitoring, preventing, and controlling outbreaks at the university. TeleCovid works with a team of students who guide and answer questions regarding COVID-19 and, when necessary, make the referral for online consultation with medical professionals. In the suspicion of SARS-CoV-2 infection, the doctor refers the patient for testing at LabCovid. LabCovid performs the sample collection using nasal swabs, followed by processing samples by the RT-qPCR method. We have placed all positive patients in isolation and tested their contacts. This approach meant that positive cases were identified early, thus avoiding outbreaks in different environments in face-to-face activities.

Wild animals may be regarded as reservoirs of several parasite species. The occurrence of certain parasitic agents may provide significant information on host’s ecology and behavior and its trophic relations. Thus, this study aimed to determine the parasitic fauna of wild animals from southern Minas Gerais within the period from January to December 2011. A cross-sectional study was conducted with a convenience sample consisting of the dead bodies of two run over animals, which were rescued from highways and transported to the Laboratory of Animal Anatomy of the Federal University of Lavras (UFLA). The specimens were inspected to verify the presence of ectoparasites and, then, dissected to resume gastrointestinal content and detect helminths. No ectoparasites were identified in the two animals, both belonging to the species Conepatus semistriatus (striped hog-nosed skunk), but the presence of helminths belonging to the genus Physaloptera was identified in the stomach of one specimen. Os animais silvestres podem ser considerados reservatórios de espécies de vários parasitos. A ocorrência de determinados agentes parasitários pode fornecer informações importantes sobre a ecologia e o comportamento do hospedeiro e suas relações tróficas. Dessa forma, este estudo teve por objetivo determinar a fauna parasitária de animais silvestres do sul de Minas Gerais no período de janeiro a dezembro de 2011. Foi realizado um estudo transversal com uma amostra de conveniência constituída por cadáveres de dois animais atropelados, que foram resgatados de rodovias e transportados para o Laboratório de Anatomia Animal da Universidade Federal de Lavras (UFLA). Os exemplares foram inspecionados para verificação da presença de ectoparasitos e, em seguida, dissecados para recuperação do conteúdo gastrintestinal e detecção de helmintos. Não foram identificados ectoparasitos nos dois animais, ambos da espécie Conepatus semistriatus (jaritataca), mas foi identificada a presença de helmintos do gênero Physaloptera no estômago de um espécime.

A determinant factor in the pathology of canine angiostrongylosis seems to be related to the location of the parasite in the definitive host. Their presence inside the arteries and its branches, promoting mechanical and metabolic action on the wall of the vessels, may alter its homeostasis. Bronchoalveolar lavage (BAL) is a procedure that retrieves cells and other elements from de lungs for evaluation, and helps in the diagnosis of many pulmonary diseases. The aim of this study was to evaluate CD4+/CD8+ lymphocyte profile during the infection by Angiostrongylus vasorum, using cells retrieved using BAL. The identification of subpopulations of T lymphocytes by evaluating the co-expression of CD4 and CD8 receptor proteins has shown that despite the increase in both populations, there was a predominance of CD4+ T-cells, instead of CD8+ T-cells. These increases of CD4+ T-cells associated with the increase of the ratio between CD4+/CD8+ suggest polarization of a Th2 response. However, the immune cells, signaling factors, and cytokines that mediate such immunity and how and where they act within the body remain largely undefined during angiostrongylosis.

The purpose of this study was to assess the transit of poultry, as well as the inspection on the outbreak of diseases, by addressing the issues concerning the system of the National Program on Poultry Sanity and its legal resolutions. The data on the animal transportation and the occurrence of the diseases were collected from the official services. A legislation-based assessment was also carried out for the period from 2008 to 2012 in the state of Sergipe, Brazil. Results showed an intense transit of poultry in just about all towns of the state in the period under study, especially in chicken farms where less number of poultry is bred: from 5,000 to 15,000. Besides, 64% of poultry transportation was found to be intermunicipal. The state of Sergipe has received poultry particularly from the states of Pernambuco (49.87%), Bahia (20.85%), Minas Gerais (5.94%), Paraíba (5.16%), and Goiás (5.05%). The number of transit indicates an increase in transit over the years. In addition, three of six municipalities which saw these diseases (Estância, São Cristóvão and Itaporanga d'Ajuda) are responsible for a great part of the poultry transit. Results also showed that the majority of activities of the State Program on Poultry Sanity would be carried out in the municipalities where a larger poultry marketing flow takes place, thereby seeking to record a greater number of notifications on the diseases and, then, carry out the surveillance activities. Therefore, regarding the poultry transit, it is recommended to do a mapping of the risk regions for poultry diseases, as well as studies about the epidemiological characterization of the municipalities of the state of Sergipe. RESUMO: O objetivo deste estudo foi avaliar o trânsito de aves, sua fiscalização e o surgimento de enfermidades, abordando questões referentes ao sistema do Programa Nacional de Sanidade Avícola e suas determinações legais. Dessa forma, compilaram-se dados do serviço oficial sobre o trânsito dos animais e a ocorrência de doenças, realizando-se também uma avaliação da legislação vigente entre 2008 e 2012, no estado do Sergipe. Observou-se no período averiguado um intenso trânsito de aves em quase toda a totalidade dos municípios, principalmente entre granjas que alojam pequenas quantidades de aves (5.000 a 15.000), e 64% do total do transporte de aves ocorreu entre municípios do Estado. Os estados fornecedores de aves para Sergipe foram sobretudo Pernambuco (49,87%), Bahia (20,85%), Minas Gerais (5,94%), Paraíba (5,16%) e Goiás (5,05%). O número de guias de trânsito emitidas aponta um crescimento do trânsito ao longo dos anos. Verificaram-se que três municípios (Estância, São Cristóvão e Itaporanga d'Ajuda), dos seis acometidos por enfermidades, são aqueles responsáveis por grande parte do trânsito realizado. O estudo mostrou que para os municípios sergipanos, nos quais acontece maior fluxo de comercialização avícola, seriam indicadas mais das ações do Programa Estadual de Sanidade Avícola, com a finalidade de registrar maior número de notificações de enfermidades e, consequentemente, exercer ações de vigilância. Assim, quanto ao trânsito animal, recomendam-se a adoção de um mapeamento das regiões de risco sanitário para as enfermidades de aves e a realização de estudos sobre a caracterização epidemiológica dos municípios de Sergipe.

A mongrel dog with angiostrongylosis died suddenly and was submitted to necropsy. Post-mortem findings showed adult worms in ectopic locations. This is the first report of Angiostrongylus vasorum adult worms being found within the pericardial sac and in the lumen of the bladder of an infected dog. A total of 587 A. vasorum first-stage larvae were recovered from different organs and tissues after concentration using Baermann apparatus.

An improved method to obtain a large number of axenic larvae of Angiostrongylus vasorum from fecal samples was developed in the present study. The procedure here in reported consisted of obtaining larvae using a modified Baermann technique, followed by an additional filtration step. This isolation technique recovered almost 90% of the living larvae in a clean preparation. Isolated larvae were submitted to decontamination treatments with either sodium hypochlorite or antibiotic cocktail solutions. The axenic status, as confirmed by oral inoculation of decontaminated larvae into germ-free mice, was only achieved using larvae treated with 0.5% sodium hypochlorite solution for 10 min. The isolation and decontamination treatment did not affect larval viability. Treated larvae remained viable and infective to the invertebrate host.

The mammalian immune system is continuously exposed to infectious microorganisms as well as innocuous substances in the environment. Depending on the genetic makeup, the innate and adaptive immune responses develop and determine the frequency and the course of infectious diseases. The immune response to an infection is initiated by molecular recognition of damage-associated patterns (DAMPs) by receptors of the innate immunity, that, most of the time, occurs as an inflammatory reaction (Turvey & Broide, 2010). The inflammation associated to parasite organisms is a complex reaction of the vascular tissues against infection, exposition to toxins or cellular injury involving extravascular accumulation of plasmatic proteins and leukocytes, as well as production of cytokines from the injured tissue. It is an essential component of multifactorial pathogenesis involved in different diseases (Scrivo et al., 2011). The acute inflammation is a common result of innate immune response; however local immune adaptative factors can also promote inflammation (Lukic et al., 2009). The morphologic transformations and functional characteristics of immunological responses and consequently, of the inflammatory processes intend to destroy, to dilute or to isolate the harmful agent. Virtually, all the acute or chronic diseases are lead or modulated by the inflammation. Although the inflammation serves to a protective function in the control of parasitic infections and promotion of tecidual repair, this can also cause injury and illness itself. Schistosomiasis is an exemple of parasitary disease caused predominantly by the host immune response to schistosome eggs (ova) and the granulomatous reaction they evoke (Burke et al., 2009). In some cases, the inflammation can even persist after the removal of the infectious agent, contributing to the chronic inflammation (Vodovotz et al., 2009). Amongst the various infectious agents, helminth parasites are regarded as master manipulators of the host immune system, often inducing a long-lasting asymptomatic form of infection. Parasitic worms can establish and reproduce in mammalian hosts, switching off the inflammatory immune response and inducing a tolerant response to parasite antigens. The time of duration and the intensity of the inflammatory agent determine different degrees or phases of transformation in tissues (Zaccone et al., 2006).

Fasciolosis is a parasitic disease which is caused by digenetic trematodes, such as Fasciola hepatica, and which occurs worldwide. The disease causes significant economic losses in cattle because of the reduction in milk and meat production and because the parasitized livers have no economic value. Also, abortion and mortality rates increase. To determine the occurrence and dispersal of F. hepatica in the state of Minas Gerais, fecal samples were collected from bovines aged 12 months and older between April 2005 and April 2006. The bovines came from 1,251 rural farms of 120 municipalities/cities in Minas Gerais. Water was collected to ascertain the presence of the intermediate host in the properties where infected bovines were found. A total of 16 municipalities had infected bovines and 13 had the presence of Lymnaea columella. We detected infected bovines in 70% of the rural farms visited in the municipality of Itajubá. Itajubá was also found to have infected snails with the larval stage of F. hepatica. The results revealed that infection by F. hepatica in bovines of Minas Gerais was associated with the presence of the intermediate host and favorable epidemiological factors, drawing attention to the necessity of adopting proper control measures in the area. A fasciolose é uma doença parasitária que ocorre em todo o mundo e é causada por um trematódeo digenético conhecido como Fasciola hepatica. A doença é responsável por causar perdas econômicas significativas em bovinos, devido à diminuição na produção de carne e leite, condenação de fígados parasitados e aumento na mortalidade. Para determinar a ocorrência e a dispersão da F. hepatica no estado de Minas Gerais, amostras de fezes de bovinos com idade superior a 12 meses foram coletadas, no período de Abril de 2005 a Abril de 2006. Foram examinados bovinos provenientes de 1.251 propriedades rurais de 120 municípios do estado de Minas Gerais. Coleções hídricas também foram examinadas, a fim de verificar a presença de hospedeiros intermediários nas propriedades onde foram encontrados bovinos parasitados. Para um total de 16 municípios foi relatada a presença de bovinos infectados por F. hepatica e destes, 13 apresentaram também o molusco Lymnaea columella. Foi possível diagnosticar bovinos infectados em 70% das propriedades visitadas no município de Itajubá. Além disso, no município de Itajubá foi possível detectar a presença de moluscos naturalmente infectados com diferentes estádios larvais de F. hepatica. Os resultados evidenciam a necessidade de medidas de controle para esta parasitose na área estudada, uma vez que foi possível verificar a presença de bovinos e moluscos infectados por F. hepatica, associada a fatores epidemiológicos favoráveis a dispersão do parasito.

Intestinal parasites are considered an important public health problem, especially in low income groups whose hygiene and housing conditions are unsatisfactory. Among individuals affected by these diseases, children are a relevant group since intestinal parasitosis may aggravate underdevelopment, malnutrition and also increase the risk of infection and anemia. The occurrence of enteroparasites was verified in 176 children (1 to 5 years-old) of three municipal day-care clinics of Vespasiano/MG. Three samples of each child’s feces were collected and processed by the Ritchie method (Blagg / Formol ether). A prevalence of intestinal parasitism was verified in 22.7 % of the analyzed children, and the most frequent parasites were Entamoeba coli (57.5 %); Giardia duodenalis (40.0 %); E. histolytica/dispar (15 %); Trichuris trichiura (7.5 %); Ascaris lumbricoides (7.5 %); Enterobius vermicularis (2.5 %); Taenia sp. (2.5 %) and Hymenolepis sp. (2.5 %). Significant association was verified among intestinal parasitosis, family residence and sanitation. The high enteroparasite prevalence in day-care clinics suggests a complex epidemiology, where factors as basic sanitation and education should be considered.

Bronchoalveolar lavage (BAL) is a procedure that retrieves cells and other elements from the lungs for evaluation, which helps in the diagnosis of many pulmonary diseases. The aims of this work were to perform this procedure in dogs in the acute and chronic phases of an Angiostrongylus vasorum infection for cytological analysis and to evaluate the potential of this technique as a diagnostic method for this lung-heart worm. The BAL procedure was performed through the use of an endotracheal tube on seven A. vasorum infected dogs and on five non-infected dogs lined as a control group. Sixty days post-infection (dpi) active and live larvae were retrieved from the bronchoalveolar fluid (BALF) of all infected dogs. Furthermore, in one animal it was possible to retrieve larvae in its BALF before the pre-patent period. This work reports that the A. vasorum infection resulted in an increase of relative neutrophils and eosinophils counts. In contrast, there was a significant decrease in the alveolar macrophage relative count in infected animals from 60 to 330 dpi. This study shows that the BAL is an accurate technique for the diagnosis of canine angiostrongylosis. Moreover, the technique allows us to retrieve cells and other elements that line the lung surface for cytological evaluation, which provides information about inflammatory diseases, and the diagnosis and prognosis of pulmonary parasites such as A. vasorum.

Canine angiostrongylosis is a nematode infection in domestic dogs and wild canids. A natural infection in a domestic dog frequently leads to pneumonia, loss of physical performance, coughing, anemia, cardiac insufficiency, pulmonary fibrosis and death. The main diagnostic method is based on the finding of Angiostrongylus vasorum first-stage larvae (L1) in infected dog feces. With this objective, 11 experimentally exposed to 100 third-stage larvae (L3) per kilogram of body weight (mean = 885.45 L3/animal; S.E. = 77.7). The animals were monitored for 300 days post-single-infection (PI) and the quantity of L1 output measured. Our results showed an irregular excretion of L1 and a variation in the pre-patent period (33-76 days) and the number of L1 excreted by individual animals (1-1261 L1/g). After 300 days PI, five dogs were exposed a second time and monitored for 300 days post-re-infection (PRI) (=600 days PI). The quantity of L1 output demonstrated that double exposed dogs also presented an irregular excretion of L1 but a smaller variation in the number of L1 excreted by individual animals (4-550 L1/g).

Biomphalaria glabrata snails were experimentally infected with Angiostrongylus vasorum first-stage larvae and divided into four groups of 30 snails. To assess the shedding of third-stage larvae (L3), the snails were maintained under different stimuli: group 1 60 W light bulb for 24 h, group 2 37 degrees C water bath for 24 h, group 3 room temperature (23-25 degrees C) for 24 h, Group 4 room temperature (23-25 degrees C) for up to 15 days. After 24 h, a total of 512 A. vasorum L3, alive and active, were released by snails from group 1, while 2,446 L3 were released from group 2 and five L3 from group 3. After 15 days, snails from group 4 released a total of 44 L3. To evaluate the infectivity of A. vasorum L3, two mongrel dogs were successfully infected with L3 released by snails from groups 1 and 2, confirming that the infection of dogs with A. vasorum L3 was possible, independently of ingestion of the mollusk intermediate host. The results shown in these experiments suggest that angiostrongylosis could be directly transmitted to the definitive hosts, with implications for the parasite's life cycle.

CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior O quati (Nasua nasua) é um carnívoro de médio porte, membro da família Procyonidae que apresenta ampla distribuição geográfica, hábitos gregários e antropofílicos. Comuns em unidades de conservação, N. nasua comumente atinge grandes densidades populacionais em áreas urbanas, apresentando íntima associação com humanos e/ou animais domésticos. Esses animais podem ser parasitados por várias espécies de helmintos. Entretanto, no Brasil, são escassos os estudos sobre a ocorrência e a descrição morfológica da fauna parasitológica desses animais. O objetivo desse estudo foi identificar morfológica e/ou molecularmente a helmintofauna recuperada da necropsia de quatis, adultos e filhotes de ambos os sexos, encontrados mortos por atropelamento, no Parque das Mangabeiras e seu entorno, em Belo Horizonte, Minas Gerais, Brasil. No período de agosto de 2016 a agosto de 2018, os animais foram necropsiados no Laboratório de Helmintologia Veterinária do Departamento de Parasitologia do ICB/UFMG. Os helmintos foram coletados e os nematódeos foram fixados em formol a 10% à 80 ºC e diafanizados em solução de lactofenol de Amann. Os cestódeos foram comprimidos e fixados em formol a 10%, corados em solução de carmim, desidratados em série crescente de álcool, diafanizados em creosoto de Faia e montados em bálsamo do Canadá. Os helmintos foram quantificados, selecionados e as estruturas morfológicas fotografadas, medidas e identificadas conforme chaves taxonômicas, bem como, analisadas por microscopia eletrônica de varredura. Gongylonema sp. foram submetidos à análise molecular, por meio de extração do DNA, amplificação por reação de PCR e leitura em gel de agorose 1% para detecção dos produtos amplificados. As amostras fecais foram centrifugadas com formol 10% e éter e, posteriormente, analisadas em microscópio óptico. Dos 34 animais necropsiados, 100% estavam parasitados e destes, 94,1% (32/34) apresentando mais de uma espécie de helminto. Foram identificados: Physaloptera semilanceolata no esôfago e estômago de 44,1% (15/34); Toxocara alienata em 20,5% (7/34), Uncinaria bidens em 11,7% (4/34), Molineus nasuae em 50% (17/34) e Capillaria sp. em 20,6% (7/34) no intestino delgado; Capillaria feliscati em 14,7% (5/34) nos rins e bexiga; Gongylonema sp. em 41,2% (14/34) no pulmão e na luz do esôfago. Cestódeos em 70,6% (24/34) e pseudophilideos em 8,82% (3/34) parasitando o intestino delgado e acantocéfalos em 70,6% (24/34) parasitando o intestino grosso dos animais. Dos exames coproparasitológicos, 8,82% (3/34) indicaram a presença de ovos nas fezes, sendo estes, do filo Acanthocephala, da ordem Spirurida e do gênero Capillaria. Este estudo contribui para o conhecimento sobre a diversidade de helmintos parasitos presentes nos quatis do Parque das Mangabeiras. The coati (Nasua nasua) is a medium-sized carnivore, a member of the Procyonidae family that has a wide geographic distribution, gregarious and anthropophilic habits. Common in conservation units, N. nasua commonly reaches high population densities in urban areas, presenting close association with humans and / or domestic animals. These animals can be parasitized by various species of helminths. However, in Brazil, there are few studies on the occurrence and morphological description of the parasitological fauna of these animals. The objective of this study was to identify morphologically and / or molecularly the helmintofauna recovered from necropsy of quatis, adults and pups of both sexes, found dead by trampling, in the Mangabeiras Park and its surroundings, in Belo Horizonte, Minas Gerais, Brazil. From August 2016 to August 2018, the animals were necropsied at the Veterinary Helminthology Laboratory of the Department of Parasitology of the ICB / UFMG. The helminths were collected and the nematodes were fixed in 10% formaldehyde at 80 ° C and diaphanized in Amann's lactophenol solution. The cestodes were compressed and fixed in 10% formaldehyde, stained in carmine solution, dehydrated in an increasing series of alcohol, diaphanized in beech creosote and mounted in Canada balsam. The helminths were quantified, selected and the morphological structures photographed, measured and identified according to taxonomic keys, as well as analyzed by scanning electron microscopy. Gongylonema sp. were submitted to molecular analysis, through DNA extraction, PCR reaction amplification and 1% agorose gel reading to detect the amplified products. Fecal samples were centrifuged with 10% formaldehyde and ether and then analyzed under an optical microscope. Of the 34 necropsied animals, 100% were parasitized and 94.1% (32/34) presented more than one helminth species. Physaloptera semilanceolata were found in the esophagus and stomach of 44.1% (15/34); Toxocara alienata in 20.5% (7/34), Uncinaria bidens in 11.7% (4/34), Molineus nasuae in 50% (17/34) and Capillaria sp. in 20.6% (7/34) in the small intestine; Capillaria feliscati in 14.7% (5/34) in the kidneys and bladder; Gongylonema sp. in 41.2% (14/34) in the lung and lumen of the esophagus. Cestodeans in 70.6% (24/34) and pseudophilids in 8.82% (3/34) parasitizing the small intestine and acanthocephals in 70.6% (24/34) parasitizing the large intestine of the animals. From the coproparasitological examinations, 8.82% (3/34) indicated the presence of eggs in the feces, being these, of the phylum Acanthocephala, of the order Spirurida and of the genus Capillaria. This study contributes to the knowledge about the diversity of helminth parasites present in the quatis of Mangabeiras Park.

CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior Angiostrongylus vasorum é um nematoide, cujas formas adultas podem ser encontradas nas artérias pulmonares e coração direito de cães domésticos e canídeos silvestres, que são os hospedeiros definitivos. Além da importância na clínica de pequenos animais, este parasito tem importância discutida em termos de saúde pública, devido à possibilidade de infecção humana. O ciclo heteroxeno, apresenta diversas espécies de moluscos como hospedeiros intermediários, que se infectam por ingestão e/ou penetração de larvas de primeiro estádio do parasito. Nos moluscos ocorrem duas mudas, de larva de primeiro estádio (L1) para L2 e L3, que é infectante para os hospedeiros definitivos. Além dessas vias de infecção, pode haver também a participação de hospedeiros paratênicos, que podem abrigar as L3, como por exemplo, rãs, camundongos, ratos e aves. Considerando que várias questões inerentes ao ciclo deste parasito ainda permanecem obscuras, o presente estudo teve como objetivo avaliar se Biomphalaria glabrata pode ser hospedeiro paratênico de Angiostrongylus vasorum, identificando as possíveis vias de penetração destas larvas, a rota migratória, além de descrever as possíveis alterações histológicas em diferentes tempos de infecção. Larvas de terceiro estádio foram recuperadas de moluscos da espécie B. glabrata, com 30 dias após infecção com 1.000 L1 de A. vasorum, utilizando o método de Baermann modificado. As L3 recuperadas foram utilizadas para infecção de moluscos da espécie B. glabrata, com o número de 100 L3+ (Larva de terceiro estádio advinda de molusco infectado com 100 L3). Larvas de terceiro estádio de A. vasorum foram recuperadas vivas e ativas nos tecidos dos moluscos, demonstrando assim, a permissividade destes a infecção por L3+. Os demais exemplares de moluscos infectados, foram fixados em formol 10% para avaliação histológica, onde se observou a presença de larva no tecido e que as mesmas tendem a ficar na região cefalopodal. Em relação a viabilidade das L3+, ainda são necessários mais estudos, visto que dois cães sem raça definida foram submetidos a patê canino com a presença das L3+ e até o momento somente quatro L1 foram encontradas nas fezes dos cães. Este trabalho demonstra pela primeira vez, a possibilidade de B. glabrata participar como hospedeiro paratênico no ciclo de A. vasorum. Angiostrongylus vasorum is a nematode whose adult forms can be found in the pulmonary arteries and right heart of domestic dogs and wild canids, which are the definitive hosts. In addition to the importance in the small animal clinic, this parasite is discussed in terms of public health due to the possibility of human infection. The heteroxene cycle presents several molluscan species as intermediate hosts, which are infected by ingestion and / or penetration of first stage larvae of the parasite. In the molluscs two seedlings of first instar larvae (L1), L2 and L3 occur, which is infective to the definitive hosts. In addition to these infection routes, there may also be paratenic hosts, which may harbor L3, such as frogs, lizards, mice, rats and birds. Considering that several issues inherent to the cycle of this parasite still remain obscure, the present study aimed to evaluate if Biomphalaria glabrata can be paratenic host of Angiostrongylus vasorum, identifying the possible routes of penetration of these larvae, the migratory route, besides describing the possible changes at different times of infection. Third instar larvae were recovered from B. glabrata molluscs 30 days after infection with 1.000 L1 of A. vasorum using the modified Baermann method. The recovered L3 were used for infection of mollusks of the species B. glabrata, with the inoculum of 100 L3 + (larva of third stage coming from mollusc infected with 100 L3). Third-instar larvae of A. vasorum were recovered alive and active in the mollusc's tissues, thus demonstrating their permissiveness to L3 + infection. The other specimens of infected molluscs were fixed in 10% formaldehyde for histological evaluation, where the presence of larvae in the tissue was observed and they tended to remain in the cephalopodal region. Regarding the viability of L3 +, further studies are still needed, since two mixed breed dogs were submitted to canine pate with the presence of L3 + and so far only four L1 were found in the feces of the dogs. This work demonstrates, for the first time, the possibility of B. glabrata to participate as paratenic host in the A. vasorum cycle.

CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior A ascaridiose humana é a doença tropical negligenciada mais prevalente do mundo afetando cerca de 800 milhões de pessoas. Em áreas endêmicas, a reinfecção é recorrente devido às precárias condições de saneamento básico e, sobretudo, à simplicidade do ciclo de vida do parasito. Após a ingestão de ovos infectantes, larvas de terceiro estádio (L3) eclodem e penetram no intestino grosso, ganham a circulação sanguínea, chegando ao fígado e posteriormente aos pulmões do hospedeiro, caracterizando a ascaridiose larval. Nesses órgãos, as L3 migram gerando lesões tanto mecânicas quanto provenientes da intensa resposta inflamatória, que é caracterizada principalmente pela intensa infiltração de neutrófilos e eosinófilos. O presente trabalho visou descrever e caracterizar os efeitos fisiopatológicos da migração das larvas de Ascaris suum nos pulmões de camundongos infectados, bem como avaliar o papel dos eosinófilos e da regulação das respostas Th1, Th2 e Th17 na patogênese da ascaridiose larval após primoinfecção e reinfecção. Para tal, inicialmente, foi realizada a avaliação parasitológica e imunopatológica em camundongos BALB/c primoinfectados e reinfectados durante o pico de migração larval pelo fígado, pulmão e intestino. Posteriormente, camundongos geneticamente deficientes em GATA1, IFN-γ, IL-17RA, ST2, IL-4 e os respectivos selvagens foram infectados e reinfectados e, após oito dias de infecção, foram submetidos à avaliação imunoparasitológica e fisiopatológicas. Os resultados mais importantes deste trabalho demonstraram que camundongos reinfectados apresentaram uma relevante redução da carga parasitária no pulmão e aumento da celularidade no lavado broncoalveolar associado à intensa inflamação pulmonar granulocítica, que levaram ao comprometimento da função respiratória. Foi evidenciado que a inflamação pulmonar mista contribui para o controle da migração larval, contudo, no que se refere as respostas Th2/Th17, foram associadas ao maior comprometimento da função pulmonar. Além disso, este trabalho trouxe evidências contundentes da contribuição dos eosinófilos no controle da carga parasitária na ascaridiose em modelo de simples e múltiplas exposições. Foi evidenciado também que os eosinófilos são indispensáveis para a produção de SIgA e, que essas células dependem da sinalização mediada pela a ativação de TLR2 e TLR4 para induzir a produção de SIgA na mucosa e, como consequência, controlar a carga parasitária. Por outro lado, foi comprovado que os eosinófilos contribuem para a fibrose do parênquima pulmonar em resposta às lesões teciduais, contudo, a maior perda fisiológica da função pulmonar foi associada às lesões agudas provocadas pela migração larval pelo parênquima pulmonar. Human ascariasis is the most prevalent neglected tropical disease in the world affecting about 800 million people. In endemic areas, reinfection is recurrent due to poor basic sanitation conditions and, above all, the readiness of the parasite life cycle. After ingestion of infective eggs, third stage larvae (L3) hatches and penetrates the large intestine, gaining blood circulation and reaching the liver and later the host lungs, characterizing larval ascariasis. In these organs, L3 migrates generating both mechanical lesions and intense inflammatory response, which is characterized mainly by intense neutrophil and eosinophil infiltration. The present work aimed to describe and characterize the pathophysiological effects of the Ascaris suum larvae migration on the lungs of infected mice, as well as to evaluate the role of eosinophils and regulation of the Th1, Th2 and Th17 responses in the pathogenesis of larval ascariasis after single- and re-infection. For this, parasitological and immunopathological evaluation was initially performed in BALB / c mice single- and re-infected during the peak of larval migration within the liver, lung and intestine. Afterwards, mice genetically deficient in GATA1, IFN-γ, IL-17RA, ST2, IL-4 and the respective wild-type were infected and re-infected and, after eight days of infection, underwent immunoparasitological and pathophysiological evaluation. The most important results of this work demonstrated that re-infected mice presented a significant reduction of the parasitic load in the lung and increased cellularity in the bronchoalveolar lavage (BAL) associated to an intense granulocytic pulmonary inflammation, which led to a compromised respiratory function. It was evidenced that mixed pulmonary inflammation is of extreme importance for the control of larval migration. However, regarding Th2 / Th17 responses, they are associated with a greater impairment of pulmonary function, especially Th2. In addition, this work has brought strong evidence of the contribution of eosinophils in a ascariasis multiple exposition model. It was evidenced that eosinophils are indispensable for the production of SIgA in the pulmonary mucosa and that these cells depend on the signaling by TLR2 and TLR4 activation to induce SIgA production in the mucosa and to control the parasitic load. It has been demonstrated that eosinophils contribute to pulmonary parenchymal fibrosis in response to A. suum tissue damage. Extrapolating to the current scenario of human ascariasis, the data of this work could also explain the epidemiological distribution of Ascaris sp. since most of the infected individuals in high endemicity areas, where they are exposed multiple times to the parasite, present low parasitic load.

CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico Angiostrongylus vasorum é um nematóide parasito de canídeos domésticos e silvestres, cuja forma adulta pode ser encontrada no ventrículo direito, artérias pulmonares e ramificações. O ciclo envolve uma fase no ambiente e a participação de moluscos aquáticos e terrestres como hospedeiros intermediários. O presente trabalho avaliou a relação entre Achatina fulica infectado experimentalmente com 1000 L1 A. vasorum, nos dias 01, 08,13 e 30. Analisou-se a presença de fenoloxidase (PO), na fração acelular da hemolinfa, no sobrenadante de hemócitos, utilizando os substratos L-Dopa L- Tirosina e p-fenilenediamine (PPD), assim como a evidência de melanina no tecido da região cefalopodal. Também quantificou-se óxido nítrico, na fração acelular de A. fulica pela Reação de Griess. Ainda, nesse estudo, avaliou-se a morfologia e morfometria de L1, L2 e L3, fixadas com paraformaldeído 4% e marcadas com anticorpos anti-β-tubulina, anti- α- tubulina, anti- colga 1/1- colagen, anti-β- actina, pelo picrosirius, oil red em microscópio de epifluorescência. E, para observar a infecção natural por A. vasorum, realizou-se digestão química de A. fulica, capturados na cidade de Belo Horizonte, Sabará, Igarapé e Lagoa Santa. Observou-se atividade de PO e produção de melanina tecidual em A. fulica, variando entre o controle e infectados. Ao 1°dpi, observou-se com L-tirosina (p

CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior Avanços para um diagnóstico mais eficiente da leishmaniose visceral faz-se necessário, pois essa doença pode ser fatal, se não tratada. Apesar do contínuo desenvolvimento de testes de imunodiagnóstico, limitações intrínsecas de cada técnica resultam em um diagnóstico incerto. Durante os últimos anos, nosso grupo vem desenvolvendo estudos de imunogenômica para a busca de novos antígenos que sejam mais sensíveis e específicos. Utilizando metodologias de mineração de dados, é possível identificar proteínas ou peptídeos presentes nos parasitos que exibem certa homologia a moléculas do hospedeiro que estão associadas à resposta imunológica, que podem ser o diferencial na tentativa de melhoria de testes diagnósticos. Neste contexto, o presente estudo identificou e testou três proteínas de Leishmania que apresentam similaridade com proteínas presentes no banco de dados ImmunomeBase, o qual dispõe de proteínas de Homo sapiens com função biológica associada a processos de defesa do hospedeiro previamente caracterizadas. Foram selecionados para esse trabalho os genes que codificam a proteína ATP difosfohidrolase de L. infantum (EctoLi), a proteína de ligação ao GTP de L. infantum (MyxoLi) e de L. mexicana (MyxoLm) e a proteína tirosina fosfatase de L. braziliensis (TyroLb). Esses alvos foram expressos em um sistema heterólogo, utilizando como vetor o plasmídeo pET28a-TEV e como sistema de expressão Escherichia coli da cepa BL21 e Arctic Express. Após a purificação por cromatografia de afinidade, as proteínas foram utilizadas como antígenos no teste sorológico por ELISA para leishmaniose visceral humana (LVH) e canina (LVC). As propriedades antigênicas das proteínas foram avaliadas e epítopos lineares de célula B foram identificados. Na validação com soros de cães, a eficiência do teste foi capaz de discriminar as amostras positivas de negativas e a qualidade dos testes com os antígenos recombinantes, baseada na área sob a curva ROC, foi entre bom e excelente, sugerindo que estas proteínas constituem bons candidatos para uma triagem inicial dos animais e/ou teste confirmatório de LVC. Em destaque, os testes com EctoLi e MyxoLi apresentaram alta especificidade, sendo úteis não só para determinar os verdadeiros positivos e verdadeiros negativos, como também para distinguir reações cruzadas. O valor preditivo positivo e a acurácia para esses testes foram superiores ao observado para o kit EIE-LVC – Bio-Manguinhos, sugerindo que os antígenos testados no trabalho são melhores candidatos para o diagnóstico de LVC. Na validação com soros de pacientes humanos, a proteína recombinante EctoLi demonstrou um bom desempenho no teste diagnóstico e destacou-se pela alta especificidade, sendo capaz de separar significativamente pacientes infectados de não infectados e com doença de Chagas, sugerindo ser um bom candidato para teste confirmatório de LVH. Em adição, a proteína truncada MyxoTLm mostrou ser uma boa candidata para o sorodiagnóstico de tripanossomatídeos (Leishmania e Trypanossoma cruzi) com 100% de especificidade e 90% sensibilidade, sendo seu uso sugerido para triagem em bancos de sangue. A partir dos dados obtidos, nosso trabalho sugere que a estratégia do ELISA baseado em proteínas recombinantes, homólogas ao sistema imune do hospedeiro, pode ser útil para o desenvolvimento de um teste sensível e altamente específico para o sorodiagnóstico desta parasitose. Advances seeking a more efficient diagnosis of visceral leishmaniasis are still necessary, since this disease can be fatal if untreated. Despite the continuous development of immunodiagnostic tests, intrinsic limitations of each technique usually lead to an uncertain diagnosis. Over the last years, our group has been focused in immunogenomic studies for the search of new antigen candidates that would be more sensitive and specific. Using data mining methodologies, it is possible to identify proteins or peptides present in the parasites with homology to host molecules associated with the immune response, which may be the differential approach in an attempt to improve the performance diagnostic tests. In this context, the present study identified and tested three Leishmania proteins that present similarity to proteins present in the ImmunomeBase database, which comprises Homo sapiens proteins with biological function associated with previously characterized host defense processes. It was selected genes coding for ATP diphosphohydrolase protein of the Leishmania. infantum (EctoLi), GTP binding protein of the L. infantum (MyxoLi) and L. mexicana (MyxoLm), and tyrosine phosphatase protein of the L. braziliensis (TyroLb). These targets were expressed in a heterologous system using the plasmid pET28a-TEV as vector and Escherichia coli strain BL21 and Arctic Express as the expression system. After purification by affinity chromatography, the proteins were used as antigens in the ELISA test for human visceral leishmaniasis (HVL) and canine (CVL). The antigenic properties of the proteins were evaluated and the linear B-cell epitopes derived from these targets were identified. When proteins were tested with the dog sera, the efficiency of the test was able to discriminate the positive from the negative samples and the quality of the tests with the recombinant antigens, based on the area under the ROC curve, was between good and excellent, suggesting the use of these proteins for an initial screening of the animals and/or confirmatory test for CVL. In particular, EctoLi and MyxoLi showed high specificity, being useful not only to determine true positives and true negatives, but also to distinguish cross-reactions. The positive predictive value and the accuracy for the assays using these proteins were higher when compared to the EIE-LVC kit – Bio-Manguinhos, suggesting that the use of the antigens provides are better candidates for the diagnosis of LVC. When tested with human sera, the recombinant protein EctoLi demonstrated a good performance for diagnostic test screening and distinguished by the high specificity, being able to significantly separate infected from uninfected patients and with Chagas disease, suggesting to be a good candidate for HVL confirmatory test. In addition, the truncated protein MyxoTLm proved to be a good candidate for the serodiagnosis of trypanosomatids (Leishmania and Trypanosoma cruzi) with 100% specificity and 90% sensitivity, and our results suggest the possible use in blood bank screening. Taken together, our work suggests that the ELISA strategy based on recombinant proteins, homologous to the host immune system, could be an useful approach for the development of a more sensitive and specific tests for the serodiagnosis of this parasitosis.

A toxocarose humana e uma importante zoonose causada pelas larvas de Toxocara canis. A infeccao ocorre por meio de ingestao acidental de ovos embrionados liberados em fezes de caes. O exerciciofisico esta associado com inumerosbeneficios para a saude, melhorando a aptidaofisica e estimulando fatores imunologicos que podem auxiliar a resposta imunologica de combate ao parasito. Dessa forma, o objetivo desse estudo foi padronizar um modelo experimental de infeccao por T. canis e avaliar o efeito do exerciciofisico com intensidade moderada na resposta imunologica na infeccao experimental. Foram utilizados camundongos femeas adultos (8 semanas) da linhagem BALB/c divididos nos seguintes grupos: Sedentario sem infeccao (CONTROLE), Sedentario com infeccao (INF), Exercicio sem infeccao (EX e EX-EX), Exercicio com infeccao (INF-EX), Infectado com exercicioprevio (EX-INF) e Infectado com exercicioprevio e treinado (EX-INF-EX). A infeccao foi com 100L de solucao contendo 1000 ovos embrionados por via intragastrica (gavage). O treinamento de natacao foi realizado na intensidade moderada de exerciciofisico, sendo classificadas pela duracao do treino (1 sessao/dia de 90 minutos sem carga adicional). Os camundongos foram eutanasiados nos 7 e 14 dias pos-infeccao (dpi) para caracterizacao da migracao das larvas. O sangue foi coletado para analisehematologica e para determinacao do perfil de citocinas sistemicas. O cerebro, figado e pulmoes foram retirados para analisehistopatologica, para determinacao do perfil de citocinas tecidual e para recuperacao e contagem das larvas. Os resultados mostraram a migracao das larvas no figado com 1 dpi, nos pulmoes com 3 dpi e no cerebro a partir de 5 dpi. O tecido hepatico apresentou infiltrado inflamatorio, o pulmonar mostrou espessamento do septo e o cerebral demostrou areashemorragicas. A leucocitose, neutrofilia e eosinofilia apareceram a partir de 7 dpi. O aumento das peroxidades de eosinofilos e neutrofilos (EPO e MPO) foi presente nos tecidos analisados. A resposta inflamatoria inata/TH17/TH2, com a predominancia deste ultimo que foi evidenciado pelo aumento de IL-4, IL-5, IL-13 e IL- 33, apesar do aumento dos niveis de IL-6 e IL-17. Conclui-se que a infeccao por T. canis produziu uma resposta pro-inflamatoriasistemica, com a ativacao de celulas efetoras da resposta imune inata e resposta imune TH2 dominante nas alteracoeshistopatologicas. Alem disso, o exerciciofisico potencializou o sistema imunologico para um padrao de resposta mista TH1/TH2 melhorando a capacidade do organismo de tolerar de forma mais adequada os danos causados pelos eventos inflamatorios da infeccao por T. canis. Human toxocarose is an important zoonotic disease caused by the larvae of Toxocara canis. The infection occurs by accidental ingestion of embryonated eggs released in dog feces. Physical exercise is associated with numerous health benefits, improving physical fitness and stimulating immune factors, which may help the immune response to combat the parasite. Thus, the aim of this study was to standardize an experimental model of T. canis infection and to evaluate the effect of physical exercise with moderate intensity in the immune response in experimental infection. Adult females BALB/c mice (8 weeks) were divided into the following groups: Sedentary without infection (CONTROL), Sedentary with infection (INF), Exercise without infection (EX and EX-EX), Exercise with infection (INF-EX), Infected with previous exercise (EX-INF) and Infected with previous exercise and trained (EX-INF-EX). The infection consisted in 100L of solution containing 1000 embryonated eggs by the intragastric way (gavage). The swimming training was conducted at moderate-intensity exercise, being classified by the training duration (1 session/day with 90 minutes with no extra load). The mice were euthanized at 7 and 14 days post-infection (p.i.) for characterization of the larval migration. The blood was collected for the hematological analysis and to determine the profile of systemic cytokines. The brain, liver and lungs were removed for histopathological analysis, to determine the cytokine profile and to recover and count the larvae. The results showed migrating larvae in the liver with 1 day p.i., in the lungs with 3 days p.i. and in the brain from 5 days p.i. The liver tissue showed inflammatory infiltrate, the lung tissue showed thickening of the septum and the brain tissue demonstrated hemorrhagic areas. The leukocytosis, neutrophilia and eosinophilia appeared from 7 dpi. The increase in the eosinophils peroxidases and neutrophils was present in the analyzed tissues. The innate inflammatory response/TH17/TH2, with the prevalence of the latter, was evidenced by increased IL-4, IL- 5, IL-13 and IL-33, despite the increase in IL-6 and IL- 17 levels. The conclusion was that the T. canis infection produced a systemic pro-inflammatory response by activating effector cells of the innate immune response and TH2-dominant immune response in histopathological changes. In addition, the exercise potentiated the immune system to a standard mixed response TH1/TH2 improving the body's ability to tolerate more adequately the damage caused by inflammatory events of T. canis infection.

Angiostrongylus vasorum, parasito do sistema cardiorrespiratório em canídeos, possui ciclo biológico heteroxênico em que os hospedeiros intermediários são moluscos terrestres e aquáticos. Geralmente, os canídeos são infectados pela ingestão dos hospedeiros intermediários ou de hospedeiros paratênicos que contêm larvas infectantes (L3). Este trabalho reune quatro experimentos que foram divididos em capítulos. No capítulo 1 avaliou-se a sobrevivência das L1 no ambiente utilizando 207 amostras de 50 g de pool de fezes de cães infectados com A. vasorum sobre papel impermeável do tipo celofane em locais sob incidência de luz solar, em locais sombreados, em geladeira (4ºC) e em freezer (-20ºC). Conclui-se que as L1 de A. vasorum suportam por maior período de tempo temperaturas mais baixas (4ºC) em relação a temperatura ambiente (25ºC) e a incidência solar direta sobre o bolo fecal estimula a migração das larvas e aumenta a mortalidade das mesmas. No capítulo 2 foi avaliado a susceptibilidade, o crescimento, a oviposição e o desenvolvimento larvário em 282 P. canaliculata infectados com 500 larvas de primeiro estádio (L1) de A. vasorum. A recuperação larvária variou de 38,2% a 65,9%, sendo que larvas de primeiro estádio (L1) foram encontradas até o 19º dpi, larvas de segundo estagio (L2) do 11º ao 25º dpi e larvas de terceiro estádio (L3) a partir do 19° dpi. Os moluscos infectados apresentaram maior número de ovos por desova. Entretanto, a taxa de eclosão e o tamanho da concha foram menores no grupo infectado em relação ao grupo controle. Este é o primeiro relato de infecção experimental de P. canaliculata por A. vasorum, confirmando a sua inespecificidade em relação ao hospedeiro intermediário e indicando a importância de levantamentos epidemiológicos direcionados ao parasito e este molusco. No capítulo 3 avaliou-se a susceptibilidade e a viabilidade de Gallus gallus domesticus como hospedeiro paratênico de A. vasorum, 17 frangos da linhagem Cobb foram divididos aleatoriamente em dois grupos. Os animais do grupo A foram inoculados com L3 de A. vasorum, e os do grupo B ingeriram moluscos infectados com L3 de A. vasorum. Aos trinta dias pós-infecção, os frangos foram sacrificados, e os músculos e órgãos foram colocados numa solução de HCl-pepsina (1% de HCl (37%), 1% de pepsina) durante 3 horas em estufa a 40 ° C para recuperar L3. No grupo A, 1.863 L3 foram recuperadas por frango. No grupo B, 2585 L3 foram recuperadas. Um cão que ingeriu órgãos e tecidos de uma galinha do grupo A eliminou larvas de A. vasorum em suas fezes 51 dias após a infecção. Aos 107 dias iniciou-se o tratamento com doses diárias de fenbendazol 13 25 mg / kg durante 21 dias. A permanência de L3 viável por 30 dias e a infecção do cão indicam que Gallus gallus é um potencial hospedeiro paratênico para este parasito. No capítulo 4 foi analisado os aspectos parasitológicos da infecção na cadela gestante, avaliou-se a existência de anticorpos anti-A. vasorum no leite materno de cadelas infectadas e a cinética dos anticorpos anti-A. vasorum no soro dos seus respectivos filhotes. Além disso, avaliou-se a cinética de eliminação de larvas de primeiro estádio (L1) de A. vasorum nas fezes das cadelas nas fases de estro, gestação e lactação. Houve transferência de anticorpos anti- A. vasorum para os filhotes e estes diminuem ao longo do tempo em relação aos valores encontrados na genitora. Até os 45 dias ANF foram detectados anticorpos no soro de todos os filhotes e aos 90 dias ANF apenas 1 filhote apresentou reação ao antígeno. Após 105 dias não houve reação ao antígeno em nenhum dos soros dos filhotes. Nenhuma forma larvária foi detectada nas amostras de leite. O soro do leite apresentou anticorpos aos 15 dias ANF aos 30 dias ANF não foi detectado reação antígeno-anticorpo. Houve eliminação de L1 de A. vasorum nas fezes da cadela em todas as fases reprodutivas. Sendo que na segunda metade do período gestacional houve um aumento da quantidade de larvas nas fezes. Aumento este que coincidiu com o aumento dos níveis de prolactina nas cadelas gestantes. Angiostrongylus vasorum, parasite of the cardiorespiratory system in dogs, has heteroxenic biological cycle in which the intermediate hosts are terrestrial and aquatic molluscs. Generally, canids are infected by eating the intermediate hosts or paratenic hosts containing infective larvae (L3). This work brings together four experiments were divided into chapters. In Chapter 1 we evaluated the survival of L1 in the environment using 207 samples of 50 g of stool pool of dogs infected with A. vasorum on waterproof cellophane paper type in places under incidence of sunlight in shady locations, in the refrigerator (4 ° C) and freezer (-20 ° C). We conclude that the L1 A. vasorum support for a longer period of time at lower temperatures (4 ° C) with respect to room temperature (25 ° C) and the direct sunlight on the stool stimulates the migration of the larvae and increases mortality of the same . In Chapter 2 we study the susceptibility, growth, oviposition and larval development in 282 P. canaliculata infected with 500 first stage larvae (L1) of A. vasorum. The larval recovery ranged from 38.2% to 65.9%. L1 were found until 19 dpi, larvae of the second stage (L2) of 11 to 25 dpi and third stage larvae (L3 ) from 19 dpi. The infected snails had higher number of eggs per clutch. However, the rate of onset and the size of the shell were lower in the infected group compared to the control group. This is the first report of experimental infection of P. canaliculata by A. vasorum, confirming its specificity in relation to the intermediate host and indicating the importance of epidemiological surveys targeted to the parasite and this mollusk. In chapter 3 we evaluated the susceptibility and the feasibility of Gallus gallus domesticus as paratenic host of A. vasorum, 17 chickens from Cobb were randomly divided into two groups. The animals in group A were inoculated with L3 of A. vasorum, and group B ate snails infected with L3 of A. vasorum. At thirty days post-infection the chickens were sacrificed and the muscles and organs were placed in a pepsin-HCl solution (1% HCl (37%), 1% pepsin) for 3 hours in an oven at 40 ° C for L3 recover. In group A, 1,863 L3 were recovered by chicken. In group B, 2585 L3 were recovered. A dog that ingested organs and tissues of a group of chicken eliminated the larvae of A. vasorum in their feces 51 days after infection. After 107 days began the treatment with fenbendazole daily doses of 25 mg / kg for 21 days. The L3 to remain viable for 30 days and the infection dog indicate that Gallus gallus is a paratenic potential host for this parasite. In Chapter 4 was analyzed parasitological aspects of the infection in pregnant bitch, we evaluated the existence of anti-A.vasorum antibodies in 15 the breast milk of infected dogs and the kinetics of anti-A. vasorum antibodies in the serum of their pups. In addition, we evaluated the elimination kinetics of first stage larvae (L1) of A. vasorum in the feces of dogs in the estrus phase, pregnancy and lactation. There was transfer of anti- A. vasorum for puppies and these decrease over time in relation to the values found in mothers'. By 45 days after birth of puppies (ABP) antibodies were detected in the serum of all pups at day 90 and only 1 chick presented ABP response to the antigen. After 105 days there was no reaction to the antigen in the sera of pups. No larval form was detected in milk samples. The whey showed antibodies at 15 days ABP and at 30 days was not detected antigen-antibody reaction. There was elimination of L1 A. vasorum in bitch feces in all reproductive phases. Since the second half of pregnancy was an increase in the number of larvae in the feces. This increase coincided with the increase in prolactin levels in pregnant bitches.

Estudos relacionados aos aspectos imunobiológicos da infecção por Ascaris sp. continuam escassos, principalmente aqueles que objetivam elucidar os eventos imunológicos da fase inicial da infecção, denominada ascaridíase larval. Neste trabalho, foi demonstrada uma nova padronização para a infecção experimental e os principais aspectos sobre a imunopatologia pulmonar causada pela migração das larvas de Ascaris sp. Além disso, a resposta imune celular, com ênfase no papel dos eosinófilos no controle da carga parasitária e patogênese da inflamação pulmonar foi avaliada, utilizando camundongos deficientes em eosinófilos (dblGATA) como estratégia experimental. Por fim, a coinfecção com o Vaccinia virus (VACV) respiratório foi realizada como um modelo de inflamação pulmonar que objetivou a avaliação da influência da migração das larvas de Ascaris spp. em um microambiente inflamatório já estabelecido nos pulmões dos animais e a capacidade da ascaridíase larval em alterar o percurso de infecções virais respiratórias. Os principais resultados deste trabalho sugerem que o modelo de proteção na ascaridíase larval seja mediado por uma intensa resposta inflamatória inata, caracterizada inicialmente pela ativação de eosinófilos por meio da produção de IL-5 por células pulmonares residentes. Estes eosinófilos, por sua vez, são responsáveis em ativar e potencializar a resposta imune celular inata, principalmente neutrófilos, que são responsáveis em produzir IL-6 e MPO, aumentando a inflamação pulmonar. A intensa inflamação tecidual reduz o número de larvas de Ascaris spp. no pulmão, mas por outro lado, provoca lesão e perda de função no tecido pulmonar. Por essa razão, após a migração das larvas pelos pulmões, os eosinófilos produzem TNF e EPO que irão participar ativamente no processo de cicatrização e remodelamento do tecido pulmonar lesado. Esta hipótese de proteção para a ascaridíase larval foi comprovada por meio da utilização de um modelo de inflamação pulmonar induzido pelo VACV respiratório e subsequente associação à infecção concomitante por A. suum. Em conclusão, os novos aspectos apresentados sobre a ascaridíase larval possibilitaram um melhor entendimento sobre os eventos imunopatológicos associados à proteção na ascaridíase larval, os quais contribuirão para futuros estudos direcionados a ensaios de imunoprofilaxia e imunização. Studies related to the immunobiological aspects of an Ascaris spp. infection are still scarce, especially those that aim to elucidate the early events of the immune response. In this study, we demonstrated a novel standardized method for early experimental Ascaris infection, using a murine model, and we evaluated the main aspects about the lung immunopathology induced by the Ascaris larvae migration. Besides that, the innate immune response, highlighting the role of eosinophils in the control of parasitic burden and into the pathogenesis of lung inflammation was evaluated, using an eosinophil-deficient mice model (dblGATA mice). Finally, a coinfection model by respiratory Vaccinia virus (VACV) and pulmonary ascariasis was performed in order to evaluate the impact of Ascaris larvae migration through an inflammatory microenvironment, and to evaluate the capacity of larval ascariasis on alter the course of viral infection. The main findings of this study suggest that the protective immunity against larval ascariasis is mediated by an intense innate inflammatory response, characterized by the activation of eosinophils by IL-5 producing innate lymphoid cells. These eosinophils are responsible to potentiate the innate immunity, activating neutrophils, which produce IL-6 and MPO, increasing the lung inflammation. This lung inflammation decreases the number of migrating larvae, however causes tissue damage and fibrosis. To restore lung homeostasis, eosinophils start to produce TNF and EPO, which are involved in the lung remodeling and repairing after larvae migration. This hypothesis on the mechanisms of protection against larval ascariasis was supported by the experiments of coinfection with VACV and A. suum. The results revealed that the increase of lung inflammation induced by the airway concomitant infection was responsible to reduce consistently the number of migrating larvae through the lungs of coinfected mice. Taken together, the novel aspects of Ascaris infection presented here enabled a better understanding of the immunopathological events during larval migration, providing insight for further studies focused on immunization and immunoprophylatic assays.

Nas últimas décadas doenças vêm ganhando papel de destaque entre os fatores que são causadores de extinção entre espécies silvestres, e maior enfoque tem sido dado àquelas transmitidas por animais domésticos, os quais crescem em número à medida que populações humanas aumentam em áreas naturais. OParque Nacional da Serra do Cipó (PARNA Serra do Cipó) e a Área de Proteção Ambiental Morro da Pedreira (APA Morro da Pedreira) abrigam populações de três canídeos silvestres: lobo-guará (Chrysocyon brachyurus,), raposinha-do-campo (Lycalopex vetulus) e cachorro-do-mato (Cerdocyon thous) e apresentam em seus limites comunidades humanas que criam animais domésticos, entre eles o cão. O presente estudo objetivou verificar a ocorrência de endo e ectoparasitos de cães pertencentes a moradores de algumas localidades da APA Morro da Pedreira e de enteroparasitos de canídeos silvestres do PARNA Serra do Cipó. Para isso foram realizadas: coletas de sangue de 56 cães pertencentes a moradores do entorno do Parque, fezes de 45 entre estes e ectoparasitos de 33 deles; necropsias de setecães doados por esses moradores, sendo que desses foram também obtidos sangue e ectoparasitos; coletas, nas trilhas do Parque, de 38 amostras fecais de canídeos silvestres e entrevista com proprietários dos cães. Nas amostras fecais foram identificados os seguintes táxons: Ancylostomidae, Trichuridae, Toxocara sp., Spirocerca sp., Physaloptera sp., Strongyloides sp., Cestoda, Dipylidium caninum, Diphyllobothriidae, Hymenolepidae, Anoplocephalidae, Trematoda, Acanthocephala, Isospora sp., sendo predominante entre cães domésticos e cachorro-do-mato a família Ancylostomidae (42,2% e 60,0%, respectivamente) e em lobo-guará, Tichuridae (75,8%). Como achados de necropsia destacaram-se Ancylostoma caninum (57,1%), Dipylidium caninum (57,1%), Spirocerca lupi (42,8%), Toxocara canis (14,3%), Physaloptera sp. (14,3%) e Acanthocephala (14,3%). Dois cães (3,57%) apresentaram-se reativos aos testes sorológicos para leishmaniose e 41 (73,2%), para Babesia canis. Entre os ectoparasitos, foram encontrados Rhipicephalus sanguineus em 29 (87,9%) dos cães e Amblyomma cajennense em 27 (81,8%). Ctenocephalides felis felis esteve presente em 33 (100%) dos animais amostrados, sendo que, dentre essas, exemplares híbridos, os quais apresentaram variação na quetotaxia do metepisterno, exibindo características de Ctenocephalides felis felis e Cthenocephalides canis, foram encontrados em 15 (45,5%) dos cães, sendo este o primeiro relato de tal variação no Brasil. Provavelmente a sobreposição de áreas de canídeos domésticos e silvestres se dê com maior freqüência no entorno do Parque. Entretanto, são necessários estudos mais detalhados para determinar se ocorre transmissão de patógenos entre esses canídeos na área de estudo. É importante também que se conheça a ecologia dos cães que vivem em áreas de conservação, visando prever e evitar possíveis impactos causados por eles na vida silvestre, bem como a educação de populações locais, elucidando o significado de se manter seus animais sadios e com acesso limitado ao ambiente doméstico.

A importancia de Lymnaea columella e destacada na epidemiologia de Fasciola hepatica devido ao crescente numero de relatos de infeccoes naturais do molusco pelo trematodeo no Brasil e em diversos paises. O presente trabalho avaliou a sazonalidade de moluscos coletados mensalmente entre janeiro de 2013 a dezembro de 2014, em bebedouros naturais de bovinos localizados em lagoa marginal situada no municipio de Confins (19°40'17.26" S, 43°57'52.57" O), Estado de Minas Gerais, Brasil. Os moluscos foram coletados em vegetacao aquatica, troncos de madeira e lama do fundo e margens dos bebedouros. Em laboratorio os moluscos e a vegetacao foram identificados. Os fatores cilmaticos de temperatura media e precipitacao pluvial mensais influenciaram na populacao dos moluscos L. columella, Biomphalaria spp., Melanoides spp., Physa spp. e Pomacea spp.. De um total de 1909 gastropodes coletados, Physa spp. foi mais abundante (n=537), seguido de Melanoides spp. (n=487), Pomacea spp. (n=407), L. columella (n=351) e Biomphalaria spp. (n=127). O numero de L. columella coletado em 2014 (n=267) foi maior que no ano 2013 (n=84), quando a precipitacao pluvial anual total foi 1,7 vezes maior. Durante o estudo, Biomphalaria spp. e Melanoides spp. apresentaram menor numero de especimes coletados na estacao seca, enquanto que Physa spp., ocorreu em todo o periodo do estudo, com distribuicao mensal variavel entre as estacoes seca e chuvosa nos dois anos de coleta. Ja Pomacea spp., obteve maior numero durante meses da estacaochuvosa de 2013 e de 2014. Nao foi observado estagios evolutivos de F.hepatica nos especimes de L. columella coletados. A dinamica da infeccao por F. hepatica em L. columella tambem foi avaliada por meio da histologia e da contagem de hemocitos circulantes do molusco. Miracidios foram observados nos tecidos da regiao cefalopodal e do manto 30 minutos apos infeccao. Miracidios/esporocistos ocorreram ao 1° dpi, e esporocistos totalmente formados foram observados na regiao cefalopodal ao 7° dpi. Redias foram localizadas entre o 10° e o 14° dpi, na regiao cefalopodal e hemocele. Entre o 45° e 50° dpi as redias continham cercarias e localizavam-se na glandula digestiva do molusco. A analise estatistica dos hemocitos totais de L. columella infectados por F. hepatica foram significativamente diferentes no periodo de 30 minutos apos infeccao (p