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BackgroundPathogenic variants (PV) ofCTNNA1are found in families fulfilling criteria for hereditary diffuse gastric cancer (HDGC) but no risk estimates were available until now. The aim of this study is to evaluate diffuse gastric cancer (DGC) risks for carriers of germlineCTNNA1PV.MethodsData from published CTNNA1 families were updated and new families were identified through international collaborations. The cumulative risk of DGC by age for PV carriers was estimated with the genotype restricted likelihood (GRL) method, taking into account non-genotyped individuals and conditioning on all observed phenotypes and genotypes of the index case to obtain unbiased estimates. A non-parametric (NP) and the Weibull functions were used to model the shape of penetrance function with the GRL. Kaplan-Meier incidence curve and standardised incidence ratios were also computed. A ‘leave-one-out’ strategy was used to evaluate estimate uncertainty.ResultsThirteen families with 46 carriers of PV were included. The cumulative risks of DGC at 80 years for carriers ofCTNNA1PV are 49% and 57%, respectively with the Weibull GRL and NP GRL methods. Risk ratios to population incidence reach particularly high values at early ages and decrease with age. At 40 years, they are equal to 65 and 833, respectively with the Weibull GRL and NP GRL.ConclusionThis is the largest series ofCTNNA1families that provides the first risk estimates of GC. These data will help to improve management and surveillance for these patients and support inclusion ofCTNNA1in germline testing panels.

International audience

e21592 Background: While 10% of melanomas occur in a context suggesting hereditary predisposition, a clear molecular explanation has only been established for approximately 20% of families. In the course of clinical care, we identified a new CTNNA1 truncating germline mutation in a family affected by multiple early-onset melanomas. Methods: NGS and CGH-array were performed on the index case’s melanoma, followed by Sanger sequencing of the germline DNA of relatives. Immunochemistry (IHC) was employed to evaluate the level of αE-catenin (encoded by CTNNA1) in the family's samples. Stable CTNNA1 knockout human melanoma cell lines were generated to investigate the functional effects of CTNNA1 loss. Functional assays, including colony formation, 3-D tumor spheroid formation, wound healing, and transwell invasion were performed, as well as electron microscopy and RNAsequencing (RNAseq). CTNNA1 mutational status was determined in several databases and further sequencing of CTNNA1 in a DNA bank of families with multiple melanomas was done. Results: While the allele frequency in the index patient’s tumoral DNA was compatible with a germline mutation, the CTNNA1 F611fs*10 mutation was subsequently found cosegregating with individuals affected by melanoma in the family. CGH array on tumor DNA identified a segmental loss on chromosome 5, leading to a loss of heterozygosity of CTNNA1, resulting in a loss of αE-catenin observed by IHC. Clinically, the mean age of first melanoma diagnosis was 29,7 years (range: 18-56), 2 were metastatic, and the others were SSM (superficial spreading melanoma) in situ (n = 3) or Breslow index 0,56 mm (n = 1). Functional assays performed on CTNNA1 KO melanoma cell lines showed a loss of cell-to-cell adhesion phenotype, in accordance with the altered adherens junctions observed by electron microscopy, and the specific pathway enrichments observed by RNAseq. This specific phenotype could be rescued by transfection with a plasmid containing wild-type CTNNA1, as opposed to the CTNNA1 F611fs* plasmid. Germline CTNNA1 mutations are rare as none could be further identified in a DNA bank of 27 multiple melanoma families. In a database of 4743 melanomas somatically sequenced for CTNNA1, 131 of them had a CTNNA1 alteration (2,76%), with a median tumor mutational burden of 44 mut/MB of DNA (range from 0 to 451). Among them, 15 alterations were predicted to be inactivating, including 7 associated with a BRAF or NRAS activating mutation. Conclusions: Altogether, our results strongly support that CTNNA1 loss of function predisposes to melanoma formation characterized by a decreased cell adhesion. Since germline CTNNA1 alterations have already been implicated in lobular breast cancers and hereditary diffuse gastric cancers, CTNNA1 likely constitutes a tumor suppressor gene involved in familial melanoma, thus broadening the spectrum of syndromes associated with this gene.

Introduction Environ 7 % des melanomes surviennent dans un contexte evocateur d’une predisposition hereditaire, or seuls 20 % d’entre eux ont une cause moleculaire clairement identifiee a ce jour. Au decours de l’analyse somatique d’un melanome, il arrive de detecter des mutations constitutionnelles. Materiel et methodes Le test NGS FoundationOne® permettant le sequencage de 315 genes a ete propose a un patient de 23 ans atteint de melanome stade III dans un contexte de multiples antecedents familiaux de melanomes (mere et 2 sœurs, l’une decedee de son melanome a 33 ans). Une CGH-array a ete realisee a partir d’ADN tumoral. L’immunohistochimie (IHC) des proteines impliquees dans la voie Wnt/β-catenine a ete realisee sur le melanome du patient et une serie de melanomes controles. Les caracteristiques cliniques de la famille ont ete recueillies. Resultats Le test FoundationOne® sur ADN tumoral a mis en evidence une mutation BRAFV600E avec une frequence allelique (FA) de 3 % associee a une mutation CTNNA1 F611fs*10 (gene suppresseur de tumeur codant pour l’α-catenine). Cette mutation, responsable d’un decalage du cadre de lecture induisant un codon stop, est trouvee avec une FA de 41 %. Cette discordance de FA pouvait faire evoquer une mutation constitutionnelle de CTNNA1, confirmee dans le sang de sa mere et sa sœur. La CGH sur l’ADN tumoral a identifie une perte segmentaire du chromosome 5 en 5q31.2. Cette perte bi-allelique de CTNNA1 se traduit par une perte d’expression de CTNNA1 en IHC dans le melanome du patient. Sur le plan clinique, les 7 melanomes familiaux ont ete operes a un âge moyen de 29 ans (18–56), 2 etaient avances (Breslow 6,7 mm/metastatique d’emblee), et les autres etaient des SSM in situ (n = 4) ou de Breslow 0,56 mm (n = 1). Le patient index presente une agenesie dentaire, une fente labiopalatine et un goitre multinodulaire. Enfin, le sequencage haut debit FoundationOne® sur une serie de 4889 melanomes successifs a retrouve CTNNA1 mute dans 145 cas (3 %). Les mutations perte de fonction sont frequemment associees a des mutations activatrices de BRAF ou NRAS. Discussion CTNNA1 est un frein de la voie Wnt/β-catenine. In vitro, sa perte de fonction favorise l’evolution metastatique par hyperproliferation et perte d’adhesion cellulaire. Des mutations germinales CTNNA1 ont ete mises en cause dans les cancers du sein lobulaires et les cancers gastriques diffus familiaux. Nous decrivons ici la 1ere mutation CTNNA1 dans un contexte de melanomes familiaux. Conclusion CTNNA1 est un bon candidat pour expliquer les multiples melanomes de cette famille, avec selon le modele des 2 hits de Knudson, une mutation constitutionnelle tronquante de CTNNA1 et une perte somatique d’un segment du chromosome 5. Outre des perspectives de prevention/depistage precoce du melanome chez les porteurs de mutation CTNNA1, une meilleure connaissance de cette voie oncogenique pourrait aider a concevoir de nouvelles strategies de combinaison de therapies ciblees dans le traitement du melanome.

Introduction La pre-eclampsie est classiquement associee a une activation de la coagulation [1] . Le test de generation de thrombine donne une vision globale du profil de coagulation. Cette etude a pour objectif de caracteriser la coagulation et de verifier l’hypothese d’une hyper-coagulabilite associee a la pre-eclampsie a travers les parametres de thrombinographie et les marqueurs classiques de la coagulation. Materiel et methodes Cette etude prospective biomedicale cas/temoins compare les marqueurs de la generation de thrombine utilisant la technique de thrombinographie (ETP Potentiel endogene de thrombine, pic de thrombine, temps de latence et velocite) et les taux de facteur II, facteur V, fibrinogene, complexes TAT, antithrombine, monomeres de fibrine et D dimeres entre des patientes pre-eclamptiques ( n = 111) et des patientes temoins ( n = 207) a l’inclusion, a l’accouchement et en post-partum. L’evolution de ces parametres au cours du temps a ete etudiee au sein de la population pre-eclamptique. Une analyse multivariee a ete realisee. Resultats En analyse multivariee, a l’inclusion, l’ETP et les taux de facteurs II, facteur V, les complexes TAT et les D dimeres sont superieurs et le taux d’antithrombine est inferieur dans le groupe pre-eclampsie ( p p p Discussion L’hypothese d’un profil hyper-coagulable associe a la pre-eclampsie est confirmee [2] . Cette etude decrit un profil de generation de thrombine different chez les pre-eclamptiques.

Introduction La preeclampsie est associee a un etat d’hypercoagulabilite comme le suggere l’augmentation de l’incidence des evenements thromboemboliques dans cette population. Plusieurs etudes ont montre un exces de generation de thrombine chez les patientes preeclamptiques par l’utilisation d’examens d’hemostase standards et plus recemment par thrombinographie. Materiel et methodes Cette etude prospective cas temoin multicentrique comparait les parametres ROTEM® (INTEM et FIBTEM) de 103 patientes preeclamptiques avec 103 femmes enceintes temoins appariees a l’inclusion, et 99 femmes enceintes temoins appariees sur le mode d’accouchement a l’accouchement et en post-partum. Dans le groupe preeclampsie, nous avons examine l’evolution au cours du temps des parametres ROTEM® ainsi que leurs correlations avec le taux de fibrinogene plasmatique. Les resultats sont exprimes en mediane [interquartiles ou range]. Les comparaisons ont fait appel a des tests non parametriques. Resultats Il existait une diminution de l’INTEM ML chez les patientes preeclamptiques par rapport aux temoins a l’inclusion (2 [1–3] vs 5 [3–7] ; p Discussion Les resultats permettent d’emettre l’hypothese que l’hypercoagulabilite chez les patientes preeclamptiques pourrait etre parallele avec une diminution de la fibrinolyse pendant la grossesse persistant en post-partum. L’evaluation rapide du taux de fibrinogene par le ROTEM® reste valide dans cette population pour aider la prise en charge hemostatique en cas d’hemorragie de la delivrance.