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Resumo Butia yatay é uma palmeira nativa do Rio Grande do Sul que encontra-se em risco de extinção. Sua propagação é realizada por via sexuada, porém a germinação por sementes é baixa, lenta e desuniforme. Objetivou-se estabelecer um protocolo de criopreservação visando a conservação da espécie. Foram testadas concentrações de sacarose em pré-tratamento de embriões antes do congelamento. Embriões de Butia yatay podem ser criopreservados, com subseqüente retomada do crescimento, quando submetidos ao prévio tratamento com sacarose a 0,4 M. Neste estudo, os embriões foram congelados por 10 dias, indicando que o pré-tratamento possibilita a conservação de Butia yatay por longo tempo.

The culture media sterilization is typically performed by autoclaving. However, this process may degrade or reduce the action of compounds with desired physiological effect, such as vitamins and growth regulators. This study aimed to evaluate the effect of sterilizing agents added to the culture medium in vitro mume 'Rigitano' establishment. For this purpose, nodal segments were inoculated into culture medium prepared considering the following treatments: addition of sodium hypochlorite (0.01 and 0.05 % v/v), chlorine dioxide (0.1, 0.5 and 1% v/v) or hydrogen peroxide (0.3, 0.7 and 1.5 %, v/v). The control treatment consisted of the absence of sterilizing, autoclaved and non-autoclaved. In different periods (7, 14 and 21 days), it was determined survival explants, whole contamination, contamination by bacteria, fungi contamination and oxidation. It was found ocurrence of Alternaria, Cladosporim, Penicillium, Trichoderma and Cryptococcus fungal genera. It was conclude that the use of hydrogen peroxide or chlorine dioxide is effective for the chemical sterilization of culture media.

One main obstacle to the development and expansion of pear tree cultivation in Brazil has been the lack of cultivars adapted to the edaphoclimatic conditions of regions with the potential for pear production. Intending to overcome this hindrance, Embrapa Clima Temperado (Embrapa Temperate Climate) developed and released the cultivar Cascatense, with a low cold requirement (~400 h) better suited for Rio Grande do Sul`s and Santa Catarina`s climate. Still, seedlings of high genetic and sanitary quality are necessary for the establishment of a high-yield orchard. Plants with both sanitary quality and uniformity can be obtained through in vitro micropropagation. Thus, the present study aimed to assess the influence of different culture media (MS, MS¾, WPM, QL, and Himédia), concentrations of sucrose (0, 15, 30, 45, and 60 g L-1), and concentrations of benzylaminopurine (BAP) (0, 0.4, 0.8, 1.2, and 1.6 mg L-1) upon the in vitro multiplication of cultivar Cascatense, to establish an efficient protocol to enhance its propagation and reproducibility. The study included three sequential experiments in which the number of shoots per explant, the length of shoots, the number of axillary buds per shoot, fresh mass, and dry mass of shoots were evaluated. Cultivar Cascatense can be best propagated in vitro with the use of Himédia medium, supplemented with 0.8 mg L-1 of BAP and 30 g L-1 of sucrose.

Sugarcane is a crop widely planted in Brazil because of the economic importance of its products, like sugar and ethanol. Thus, the crop is often inserted in breeding programs. Therefor, the aim of this study was to evaluate the morphogenic response to somatic embryogenesis and somatic embryos regeneration for genotype RB996961. Transversal segments of young leave rolls with 2-3 mm size from plants with 6 to 9 months old were subcultured on solid MS medium supplemented with three concentrations of 2.4-dichlorophenoxyacetic acid (2.4-D) for embryogenic callus induction. Better results were obtained using 13.5 or 31.5 µM L-1 of 2.4-D in 45 or 60 days of incubation on induction medium, one to three subculture and 15 to 45 days of incubation on regeneration medium for genotype RB996961. This results show that the protocol used to genotype RB996961 was efficient to somatic embryos production (over 80%), nevertheless, it is necessary to adjust the regeneration approach (62.3 to 73.4%).

O cultivo de plantas in vitro envolve procedimentos que demandam tempo e oneram os custos das mudas produzidas por micropropagação. A etapa inicial para introdução de propágulos in vitro é o preparo do meio de cultura e a sua esterilização por meio da autoclavagem, processo este que em aspecto mais negativo pode degradar ou reduzir os compostos com efeito fisiológico desejável, como vitaminas e reguladores de crescimento. Visando desenvolver tecnologias para a propagação de genótipos de porta-enxertos para prunóideas, e considerando as dificuldades encontradas até o momento para o estabelecimento de alguns genótipos in vitro, este trabalho teve por objetivo avaliar a adição de diferentes agentes esterilizantes ao meio de cultura para o estabelecimento e desenvolvimento de segmentos nodais in vitro de Prunus mume Sieb. et Zucc. cv. Rigitano. Para tanto, segmentos nodais foram inoculados em meio de cultura MS, preparado considerando os seguintes tratamentos: adição de hipoclorito de sódio (0,01 e 0,05% v/v); de dióxido de cloro (0,1; 0,5 e 1,0 % v/v); e de peróxido de hidrogênio (0,3; 0,7 e 1,5% v/v). O tratamento controle constou da ausência de agente esterilizante, autoclavado e não autoclavado. Foram avaliados em tempos distintos (7, 14 e 21 dias), sendo verificadas as variáveis sobrevivência, contaminação total, contaminação por bactéria, contaminação por fungos e oxidação. Os resultados indicaram a presença, em alguns tratamentos, dos seguintes gêneros de fungos: Alternaria, Cladosporium, Penicillium e Trichoderma e Criptococcus. Dentre os produtos testados pode-se concluir que o uso de dióxido de cloro na concentração de 0,5% é uma alternativa eficiente para a esterilização química de meios de cultivo.

The difficulty and length of time required for seed germination of mate (Ilex paraguariensis), as well as the pressing need for clonal multiplication of improved genetic material, has resulted in several studies related to vegetative propagation in an effort to obtain rooted cuttings more quickly and with better genetic quality. Currently, the biggest challenge is propagating and rooting adult plants selected in the field without requiring clear cutting to generate conditions for the basal induction of juvenile sprouts. Therefore, the objective of this study was to develop a method to rescue adult mate plants through the generation of epicormic sprouts. To accomplish this, tree branches of mate that were at least 19 years of age were collected and packed in trays with sand for sprouting. Different solutions containing a mixture of sucrose and indole-3-butyric acid (IBA) were sprayed in branches at 29, 22, 15, 8 and 1 day(s) before collection. We conclude that the vegetative propagation of adult mate trees is technically efficient and requires no treatment with sucrose or IBA and results in the formation of plants suitable for planting or serving as mother plants for continuous multiplication via cloning.

http://dx.doi.org/10.5902/198050985075O trabalho teve como objetivo avaliar a técnica de miniestaquia na clonagem de Eucalyptus benthamii × Eucalyptus dunnii ao longo das estações do ano quanto à sobrevivência de minicepas e à produção de miniestacas. As minicepas dos clones H12, H19 e H20 foram manejadas durante 352 dias em minijardim clonal sob sistema semi-hidropônico em leito de areia com solução nutritiva fornecida por gotejamento, efetuando-se 27 coletas sucessivas de brotações durante as quatro estações do ano (primavera, verão, outono e inverno). O experimento foi conduzido no delineamento inteiramente casualizado contendo cinco repetições e quatro minicepas por repetição. As minicepas apresentaram elevado percentual de sobrevivência (89,68%) após 27 coletas sucessivas de brotações, indicando alta longevidade como fontes fornecedoras de propágulos. A produção de miniestaca variou conforme o clone e mostraram-se sensíveis às estações do ano e às oscilações da temperatura. A maior produção ocorreu nas estações consideradas mais quentes (primavera e verão) com variação de 635,42 a 852,64 miniestacas m-2, e a menor nas estações mais frias (outono e inverno) com 592,38 a 629,36 miniestacas m-2. A produção anual de miniestacas foi de 18.934,76; 20.942,27 e 20.748,14 miniestacas m-2 ano-1, respectivamente para os clones H12, H19 e H20.

This study was designed to micropropagate E. benthamii x E. dunnii, by testing chlorine concentrations for explant asepsis, the optimal concentrations of benzylaminopurine (BAP) and naphthaleneacetic acid (NAA) for bud proliferation, and the ratio between BAP and gibberellic acid (GA3) in two nutrient media for shoot elongation. Nodal segments from H12, H19 and H20 clones were disinfected with 0.5, 1.0, 1.5 and 2.0% (v v-1) of chlorine. Explants were grown on ½MS medium supplemented with BAP (0, 0.25, 0.50, 0.75 and 1.00 mg L-1) and NAA (0, 0.025, 0.050, 0.075 and 0.100 mg L-1) for bud production. They were elongated on MS and ½MS media supplemented with BAP (0, 0.05 and 0.10 mg L-1) and GA3 (0, 0.1, 0.2 and0.3 mg L-1). The 0.50 mg L-1 BAP and 0.050 mg L-1 NAA combination was optimal for bud proliferation for H12 and H20. GA3 concentrations of 0.10 and 0.20 mg L-1 combined with 0.10 mg L-1 BAP on ½MS resulted in the longest shoots, for H12 and H20, respectively. Regardless of clone, the rooting rate was low, with an average of 12.0% and 14.4% of plants having roots for in vitro and ex vitro conditions, respectively.Objetivou-se micropropagar E. benthamii x E. dunnii, testando concentrações de cloro para a assepsia de explantes, a concentração ótima de benzilaminopurina (BAP) e ácido naftalenoacético (ANA) para a proliferação de gemas e a relação entre BAP e ácido giberélico (GA3) em dois meios de cultura para o alongamento de brotações. Segmentos nodais dos genótipos H12, H19 e H20 foram desinfetados com 0,5; 1,0; 1,5 e 2,0% (v v-1) de cloro. Os explantes foram multiplicados em meio ½MS suplementado com BAP (0; 0,25; 0,50; 0,75 e 1,00 mg L-1) e ANA (0; 0,025; 0,050; 0,075 e 0,100 mg L-1) para produção de gemas, e alongados nos meios MS e ½MS suplementados com BAP (0; 0,05 e 0,10 mg L-1) e GA3 (0; 0,1; 0,2 e 0,3 mg L-1). A combinação de 0,50 mg L-1 de BAP e 0,050 mg L-1 de ANA proporcionou melhor proliferação de gemas para os genótipos H12 e H20. As concentrações de 0,10 e 0,20 mg L-1 de GA3 combinadas com 0,10 mg L-1 de BAP em ½MS, promoveram os melhores resultados no alongamento, para os clones H12 e H20, respectivamente. O enraizamento foi baixo, com média de 12,0% para condições in vitro e 14,4% ex vitro.

O Eucalyptus apresenta grande importância no setor florestal e muitos avanços na área do melhoramento foram conquistados com o advento da biotecnologia. Contudo, alguns genótipos promissores ainda não possuem protocolos de multiplicação com técnicas de clonagem, como a miniestaquia. Objetivou-se avaliar concentrações de IBA na sobrevivência, enraizamento e vigor vegetativo de miniestacas de E. benthamii x E. dunnii, com a determinação da dose de máxima eficiência técnica. Minicepas dos clones H12, H19 e H20 foram manejadas em minijardim clonal em sistema semi-hidropônico. Para o enraizamento, mergulhou-se a porção basal da miniestaca em soluções hidroalcoólicas, cujas concentrações foram: 0, 2.000, 4.000, 6.000 e 8.000 mg L-1 de IBA. O experimento foi conduzido no delineamento inteiramente casualizado, sendo constituído por três clones e cinco concentrações de IBA, com cinco repetições, contendo dez miniestacas por repetição. O IBA influenciou positivamente os processos rizogênicos das miniestacas com resposta diferenciada entre os clones, a qual variou de 30,32 a 55,45% de enraizamento. Para os clones H12 e H19, os incrementos positivos ocorreram até a maiorconcentração de IBA. Contudo, a faixa situada entre os tratamentos de 4.000 e 6.000 mg L-1 de IBA promoveu os melhores resultados de enraizamento para o clone H20. Eucalyptus has great importance in the forestry sector and many advances in the area of improvement have been achieved with the advent of biotechnological techniques. However, some promising genotypes still do not have multiplication protocols with cloning techniques, such as minicutting. The study aimed to evaluate IBA concentrations for survival, rooting and vegetative vigor of E. benthamii x E. dunnii minicuttings, and determine the maximum technical efficiency dose. Ministumps H12, H19 and H20 clones were cultivated in a clonal minigarden under a semi-hydroponic system. For rooting, the minicutting basal portion was plunged in hydro-alcoholic solutions, whose concentrations were: 0; 2,000; 4,000; 6,000 and 8,000 mg L-1 of IBA. The experiment was conducted in a completely randomized design, with the factors consisting of three clones and five IBA concentrations, with five replications, containing 10 minicuttings per replication. IBA positively influenced the minicutting rooting processes, with differentiated behavior between the clones, with 30.32 to 55.45% rooting variation. The positives increments occurred until the highest IBA concentration for H12 and H19 clones. However, the range between 4,000 and 6,000 mg L-1 ofIBA treatments promoted the best rooting results for the H20 clone.

O trabalho teve como objetivo avaliar a técnica de miniestaquia na clonagem de Eucalyptus benthamii × Eucalyptus dunnii ao longo das estações do ano quanto à sobrevivência e enraizamento de miniestacas. As minicepas dos clones H12, H19 e H20 foram manejadas durante 352 dias em minijardim clonal sob sistema semi-hidropônico em leito de areia com solução nutritiva fornecida por gotejamento, efetuando-se 27 coletas sucessivas de brotações durante as quatro estações do ano (primavera, verão, outono e inverno). Mergulhou-se a porção basal da miniestaca durante 10 segundos em solução hidroalcoólica (1:1 v/v) de concentração de 2.000 mg L-1 de AIB. O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado contendo cinco repetições e vinte miniestacas por repetição. O enraizamento das miniestacas variou conforme o clone e mostrou-se muito sensível às estações do ano e às oscilações da temperatura. Os melhores índices de enraizamento foram registrados nas estações mais frias onde variou de 19,59% a 56,20% e os menores nas estações mais quentes, com 4,62% a 8,50%. Os clones H19 e H20 apresentaram os maiores índices de enraizamento nas quatro estações do ano.

Neste trabalho foram testadas diferentes concentrações de cloro ativo (NaOCl) na assepsia de explantes para o estabelecimento in vitro, bem como benzilaminopurina (BAP) e ácido naftalenoacético (ANA) para a multiplicação e alongamento de Eucalyptus benthamii x Eucalyptus dunnii. As minicepas fornecedoras de propágulos para introdução in vitro foram conduzidas em minijardim clonal sob sistema semi-hidropônico. Segmentos nodais dos clones H12, H19 e H20 foram desinfestados com 0,5; 1,0; 1,5; e 2,0% (v/v) de cloro ativo durante 10 min e inoculados em meio de cultura MS. Na obtenção de brotações múltiplas, utilizou-se o meio de cultura ½MS suplementado com 0; 0,25; 0,50; 0,75; e 1,0 mg L-1 de BAP. Na fase de alongamento, utilizou-se o meio de cultura ½MS com 0; 0,25; 0,50; 0,75; e 1,0 mg L-1 de ANA. Não houve interação entre os fatores estudados, obtendo-se 45%, 46% e 66% de estabelecimento do clone H12, H19 e H20, respectivamente. A concentração de BAP que resultou na maior proliferação de gemas axilares para o clone H12 aos 60 dias foi estimada na faixa de 0,25 e 0,30 mg L-1. Aos 60 dias, a faixa entre 0,25 e 0,75 mg L-1 de ANA promoveu o maior número de brotações alongadas do clone H12.This work aimed to evaluate different concentrations of active chlorine (NaOCl) in explant asepsis for the establishment in vitro as well as of benzylaminopurine (BAP) and naphthalene acetic acid (NAA) in the multiplication and elongation of Eucalyptus benthamii x Eucalyptus dunnii. Ministumps, which supply shoots for introduction in vitro, were cultivated in a clonal mini garden under semi-hydroponic system. Nodal segments of clones H12, H19 and H20 were disinfested with 0.5, 1.0, 1.5 and 2.0% (v/v) of active chlorine during 10 minutes and inoculated in MS medium. In the multiplication phase, culture ½MS medium supplemented with 0, 0.25, 0.50, 0.75 and 1.0 mg L-1 of BAP was used. In the elongation phase, ½MS medium supplemented with 0, 0.25, 0.50, 0.75 and 1.0 mg L-1 of NAA was used. No interaction occurred between the studied levels, with 45%, 46% and 66% of establishment of clones H12, H19 and H20, respectively. The BAP concentration that resulted in the highest axillary's bud proliferation for clone H12 at 60 days was estimated in the range of 0.25 to 0.30 mg L-1. At 60 days, the range between 0.25 to 0.75 mg L-1 of NAA, promoted the highest number of elongated shoots for H12 clone.

Na obtenção de mudas de figueira (Ficus carica L.) de raiz nua por meio de estacas lenhosas, além de demandar em torno de um ano para sua obtenção, ocorre alto percentual de perda, requerendo grande quantidade de material vegetal. Com o uso de estacas herbáceas, objetivou-se verificar o seu enraizamento influenciado pela presença e ausência das folhas, coletadas de plantas-matrizes com e sem frutos e tratadas com AIB em diferentes concentrações. As estacas herbáceas foram retiradas da porção mediana de ramos de figueira 'Roxo de Valinhos' preparadas com 25 cm de comprimento e 15 mm de diâmetro aproximadamente e foram imersas em solução de AIB nas concentrações de 0,150 e 300 mg L-1 durante 24 horas. Posteriormente, foram plantadas em sacolas de polietileno preto contendo areia lavada e solo em mistura na proporção de 3:2 v/v como substrato e mantidas em casa-de-vegetação sob nebulização intermitente durante 60 dias. Maiores percentuais de enraizamento, peso da matéria seca das brotações e das raízes foram obtidas em estacas sem folhas e coletadas de plantas-matrizes sem frutos. Constatou-se ainda que não houve necessidade do tratamento das estacas com AIB.Roots from young fig plants (Ficus carica L.) obtained through hardwood cuttings takes around one year and it has a high percentage of loss a large requesting amount of propagation material. With the use of herbaceous cuttings, it was aimed to verify its rooting influence by the presence and absence of leaves, collected from mother-plants with fruits, without fruits and treated with indolbutyric acid in different concentrations. The herbaceous cuttings were removed from the middle portion of fig branches cv. Roxo de Valinhos with 15 cm length and 15 mm diameter approximately and they were clipped in indolbutyric acid solution on 0, 150 and 300 mg L-1 concentrations during 24 hours. After this period, the cuttings were planted in black polyethylene bags containing washed sand and soil mixture inside (3:2 v/v) as a substrate and maintained in greenhouse under intermittent mist for 60 days. Higher percentage of rooting, dry matter weight of sprouts and roots dry matter weight of roots were obtained in cuttings without leaves and collected from mother-plants without fruits. It is not necessary the treatment with indolbutyric acid in cuttings.

O objetivo deste trabalho foi avaliar a viabilidade técnica do sistema semi-hidropônico para condução de minicepas de erva-mate e a resposta destas a soluções nutritivas de diferentes diluições nas sucessivas coletas, bem como, a sobrevivência das miniestacas produzidas neste sistema, após enraizamento. Depois de onze coletas, obteve-se 95,6% de sobrevivência das minicepas e média de 291 miniestacas m-2 de minijardim. As mudas obtidas por miniestaquia apresentaram média de 85,6% de sobrevivência, sem variação significativa entre as soluções testadas e número da coleta. O sistema adotado é tecnicamente viável, e recomenda-se a utilização de solução nutritiva menos concentrada.The objective of this study was to assess the technical viability of semi-hydroponic system for conduction of Ilex paraguariensis ministumps, and the answer of these to different nutritional solutions in the successive gatherings, as well as, the survival of the minicuttings produced in this system after rooting. After eleven gatherings, there was 95.6% of ministumps survival, and production of 291minicuttings m-2 of miniclonal garden. The minicuttings survival was 85.6%, with no significant difference between the solutions. The adopted system is technically viable, and lower concentrated solution to conduct the ministumps is recommended.

Dendrobium nobile Lindl. (olho-de-boneca) é uma das orquídeas mais populares do Brasil, ocupando posição de destaque no mercado de plantas de corte e de vaso. Entretanto, o desenvolvimento muito lento da família Orchidaceae tem contribuído para o elevado valor unitário de suas plantas, sendo necessárias técnicas que promovam a obtenção mais rápida de plantas comercializáveis. Objetivando avaliar o efeito do ácido giberélico no alongamento de plantas de D. nobile, foi realizado experimento em delineamento inteiramente casualizado com cinco concentrações de GA3 (0, 50, 100, 200 e 400 mg.L-1) e treze repetições. Efetuaram-se quatro pulverizações com soluções de ácido giberélico a intervalos quinzenais e noventa dias após início dos tratamentos, avaliaram-se as seguintes características: altura e diâmetro do pseudobulbo, número de folhas, largura e comprimento das folhas. A aplicação do GA3 promoveu, em comparação às plantas testemunhas, incrementos de 64,08% em altura e 44,27% no comprimento das folhas e decréscimos de 50% no diâmetro do pseudobulbo e 56,09% na largura das folhas. Não houve diferença entre as concentrações de GA3 testadas. Portanto, o ácido giberélico nas concentrações de 50 a 400 mg.L-1 é igualmente eficiente no alongamento de plantas D. nobile.The Dendrobium nobile Lindl. (olho-de-boneca) is one of the most popular orchids of Brazil, occupying prominence position in the market of cut plants and pot. However, the very slow development of the family Orchidaceae has been contributing to the high unitary value of the plants, being necessary techniques that promote the fastest way of obtaining plants in the marketed. With the objective of evaluating the effect of the gibberellic acid in the elongation of plants of D. nobile spread by cutting, an entirely randomized experimental design was carried out with five concentrations of GA3 (0, 50, 100, 200 and 400 mg.L-1) and thirteen replications. They were made four sprays with GA3 solutions to biweekly intervals and ninety days after beginning of the treatments, the following characteristics were evaluated: height and diameter of the pseudobulbs, number of leaves, width and length of the leaves. The GA3 application promoted, in comparison with the control, increasings of 64,08% in height and 44,27% in the length of the leaves and decreasing of 50% in the diameter of the pseudobulbs and 56,09% in the width of the leaves. There was no difference among the GA3 concentrations tested. Therefore, the giberelic acid in the concentrations from 50 to 400 mg. L-1 is efficient in the elongation of D. nobile plants.

The aim of this work was to evaluate the effect of 'Ponkan' mandarin (C. reticulata) x 'Pêra' sweet orange (C. sinensis) immature fruits storage and sucrose concentrations on embryos in vitro culture. Fruits with 3 to 4 cm in diameter were harvested and placed inside black polyethylene bags with lateral openings and stored at 5±1ºC during 135 days. Every 15 days a sample was removed, its embryos were excised and individually inoculated in test tubes containing 15 mL of MS medium (Murashige & Skoog, 1962) with sucrose (0, 1.5, 3, 6, 12, 18 and 24 g L-1) and 0.3 mg L-1 GA3 and 1 g L-1 activated charcoal. Those treatments rested 48 hours in the dark and later in a growth room at 27 ± 1ºC with a 16-h photoperiod and 32 µmol m-2 s-1 light intensity. Immature fruits can be stored for posterior excision and embryos culture. Fruits with 120 days after the pollination can be stored for at most 135 days without damaging the embryos viability. It was observed a better development of the aerial part and root system of plantlets from 'Ponkan' mandarin x 'Pêra' sweet orange embryos in MS medium with 12-18 g L-1 sucrose.Objetivou-se com este trabalho avaliar o efeito do armazenamento de frutos e concentrações de sacarose no cultivo in vitro de embriões imaturos de tangerineira 'Ponkan' (Citrus reticulata Blanco) x laranjeira 'Pêra' [Citrus sinensis (L.) Osb.]. Frutos com 3 a 4 cm de diâmetro foram coletados e colocados em sacos pretos de polietileno perfurados e armazenados a 5±1ºC por um período de 135 dias. A cada 15 dias, uma amostra foi retirada, seus embriões foram excisados e inoculados individualmente em tubos de ensaio contendo 15 mL de meio MS acrescido de sacarose (0; 1,5; 3; 6; 12; 18 e 24 g L-1), 0,3 mg L-1 GA3 e 1 g L-1 de carvão ativado. Os tratamentos permaneceram 48 horas no escuro e em seguida foram transferidos para sala de crescimento a 27±1ºC com fotoperíodo de 16 horas e 32 µmol m-2 s-1 de intensidade luminosa. Frutos imaturos podem ser armazenados e posteriormente utilizados na excisão e cultura de embriões. Frutos com 120 dias após a polinização podem ser armazenados por mais de 135 dias sem afetar a viabilidade dos embriões. Observou-se melhor desenvolvimento da parte aérea e sistema radicular de plântulas oriundas de embriões de tangerineira 'Ponkan' x laranjeira 'Pêra' em meio MS com 12-18 g L-1 de sacarose.

A micropropagação da amoreira-preta pode gerar plantas livres de vírus e em curto espaço de tempo. Com o objetivo de aprimorar técnicas de micropropagação de amoreira-preta cultivar Brazos (Rubus idaeus L.), segmentos nodais, oriundos de plântulas preestabelecidas in vitro foram excisados e inoculados em meio WPM (0, 50, 100, 150 e 200%), suplementado com diferentes concentrações de BAP (0; 0,5; 1,0; 2,0 e 4,0 mg L-1). Após a inoculação, os explantes foram transferidos para sala de crescimento a 27±1ºC, irradiância de 35 mmol m² s¹ e fotoperíodo de 16 horas, onde permaneceram por 60 dias. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado, utilizando-se de quatro repetições com quatro explantes cada. Maior número de brotos foi proporcionado com 1,0 mg L-1 de BAP associado a 100% de meio WPM e maior comprimento médio dos brotos após 60 dias foi verificado em 1,0 mg L-1 de BAP associado a 200% de meio WPM. Maior peso de matéria seca da parte aérea foi obtido em meio WPM 200% acrescido de 0,5 mg L-1 de BAP.With the objective of multiplying blackberry cv. Brazos, nodal segments, coming from in vitro plants previously selected, were excised and inoculated in WPM culture medium (0, 50, 100, 150 and 200%), supplemented with different concentrations of BAP (0; 0,5; 1,0; 2,0 and 4,0 mg L-1). After inoculation, the explants were transferred to culture room, at 27±1ºC temperature, 35 mmol m² s¹ ofirradiance and photoperiod of 16 hours, for 60 days. The experimental was a design randomized complete block, with four replications and four explants each. Greater number of sprouts was provided with 1,0 mg L-1 of BAP associated with 100% WPM culture medium and larger sprouts length average after 60 days were verified in 1,0 mg L-1 of BAP associated with 200% WPM culture medium. Higher dry matter weight of the aerial part was obtained in 200% WPM culture medium added with 0,5 mg L-1 of BAP.

Adição de carvão ativado e giberelina no meio de cultura podem proporcionar melhores condições no desenvolvimento de embriões imaturos de citros. Objetivou-se avaliar o efeito de carvão ativado e GA3 (ácido giberélico) no cultivo de embriões imaturos provenientes do cruzamento entre laranjeira 'Pêra Rio' x tangerineira 'Poncã'. Após 118 dias da polinização, frutos imaturos, com 3 a 4 cm de diâmetro, foram coletados, suas sementes removidas e tratadas com álcool (70%) por cinco minutos, hipoclorito de sódio (2%) por 20 minutos e, posteriormente, lavadas três vezes em água destilada e autoclavada. Em condições assépticas, os tegumentos das sementes foram separados, os embriões globulares excisados e inoculados em tubos de ensaio contendo 15 mL do meio MT, acrescido de carvão ativado (0; 0,5; 1; 1,5 e 2 g L-1) e GA3 (0; 0,01; 0,1; 1 e 10 mg L-1). Após a inoculação, os embriões permaneceram por 90 dias em sala de crescimento a 27+1ºC, fotoperíodo de 16 horas e irradiância de 32 mmol m-2 s-1. Maior comprimento da parte aérea foi obtido em meio MT, acrescido de 0,1 e 1 mg L-1 de GA3, combinado com 2 g L-1 de carvão ativado. Maior comprimento do sistema radicular, massa da matéria fresca e número de folhas de plântulas foram obtidos em meio MT, acrescido de 0,01 mg L-1 de GA3, na ausência de carvão ativado. A adição de carvão ativado influenciou na concentração de ácido giberélico acrescido no meio de cultura.Activated charcoal and gibberelin provides better conditions on development of citrus immature embryos. Activated charcoal and GA3 (gibberelic acid) on 'Pêra Rio' sweet orange x 'Poncã' mandarin immature embryos culture was evaluated. After 118 days-pollination, imature fruits with 3 to 4 cm of diameter were collected, seeds removed and treated with alcohol (70%) for five min., sodium hypoclorite (2%) for 20 min. and three times washed with distilled and autoclaved water. In aseptic conditions, the teguments were separated, the globular embryos excised and inoculated in test tubes containing 15 mL of the MT medium culture, added of activated charcoal (0; 0.5; 1; 1.5 and 2 g L-1) and GA3 (0; 0.01; 0.1; 1 and 10 mg L-1). After inoculation, the embryos were maintained for 90 days in growth room at 27+1ºC, 16 hours photoperiod and 32 mmol m-2 s-1 irradiance. Higher length of the aerial part was obtained in MT medium added 0.01 and 1 mg L-1 of GA3 combined with 2 g L-1 of activated charcoal. Higher length of the roots system, fresh mass and number of leaves of seedlings was obtained in MT medium added 0.01 mg L-1 of GA3 and activated charcoal absence. Addition of activated charcoal influenced in giberellic acid concentration added in MT medium.

O potencial de enraizamento do porta-enxerto pode ser influenciado pelo enxerto e pelo transporte basípeto de auxinas e cofatores. Objetivou-se verificar o efeito do ácido indolbutírico (AIB) e da enxertia recíproca entre dois porta-enxertos de pessegueiro: o umezeiro (A) e o pessegueiro 'Okinawa' (B), nas concentrações de 0 e 4000 mg.L-1, no enraizamento de estacas lenhosas dessas duas espécies. As estacas foram enxertadas nas seguintes combinações enxerto (enxerto com duas gemas e sem folhas)/porta enxerto (20 cm de comprimento): A/B e B/A. Como testemunhas, foram utilizadas estacas não enxertadas e tratadas ou não com AIB. Posteriormente, as estacas foram colocadas em sacos de polietileno preto contendo areia lavada e de granulometria média e mantidas em casa-de-vegetação sob nebulização intermitente durante 80 dias. Observou-se que a utilização do AIB aumenta o percentual de enraizamento, o número e o comprimento médio de raízes primárias das estacas de pessegueiro 'Okinawa' e do umezeiro enxertadas ou não. A enxertia recíproca entre o pessegueiro 'Okinawa' (porta-enxerto)/umezeiro (enxerto), quando tratadas com AIB, aumentou o percentual de enraizamento de estacas de pessegueiro 'Okinawa'.Rootstock rooting potential may be influenced by the graft because auxin down movement and cofactors. The objective was to verify the reciprocal grafting effects between peach tree rootstock: Japanese apricot (A) and 'Okinawa' (B), IBA at the 0 and 4.000 mg L-1 concentrations upon both woody cutting rooting. The following grafting combinations were used on the grafted cuttings (two gems graft without leaves) in rootstock 20 cm long: A/B and B/A and woody cuttings not grafted an treated IBA as check. Later the cutting were kept in black polyethylene bags containing washed sand and maintained in greenhouse with intermittent mist during 80 days. IBA was efficient to improve the rooting, percentual, number and length primary roots of peach tree 'Okinawa' and Japanese apricot cuttings grafted or no. The reciprocal grafting between 'Okinawa' peach tree (rootstock)/Japanese apricot (graft), treated IBA, improved the rooting cuttings percentual 'Okinawa' peach tree.

Com o objetivo de induzir a multiplicação em explantes de oliveira, segmentos nodais oriundos de plântulas mantidas in vitro foram excisados e inoculados em tubos de ensaio contendo meio de cultura MS suplementado com 2 g L-1 de carvão ativado, BAP (0, 1, 2 e 4 mg L-1) e ANA (0; 0,01; 0,1 e 1 mg L-1), solidificado com 6 g L-1 de ágar e pH ajustado para 5,8. Durante 100 dias, os explantes foram mantidos em sala de crescimento a 25±1ºC, intensidade luminosa de 32 µmoles.m-2.s-1 e fotoperíodo de 16 horas. Não houve indução de brotações nos segmentos nodais. O maior comprimento da parte aérea foi obtido com 0,1 mg L-1 de ANA na ausência de BAP. O meio de cultura sem BAP proporcionou maior peso de matéria fresca da parte aérea.This work had the objective to induce olive multiplication. Nodal segments from in vitro plantlets were excised and inoculated in test tubes containing MS culture medium supplemented with activated charcoal (2 g L-1), BAP (0, 1, 2 and 4 mg L-1), NAA (0; 0.01; 0.1 and 1 mg L-1), agar (6 g L-1) and pH adjusted to 5.8. The explant were maintained in growth room to 25±1°C, 32 µmoles.m-2.s-1 light intensity and 16 hours photoperiod for 100 days. There was not shoots induction in the nodal segments. Larger length of aerial part were obtained with ANA 0.1 mg L-1 in the BAP absence. Culture medium without BAP provides larger weight of fresh matter of the aerial part.

Estudou-se o efeito do ácido indol-butírico (AIB) e ácido naftalenoacético (ANA) no enraizamento de estacas do porta-enxerto de videira 'Riparia de Traviú', resultantes da desbrota realizada em plantas situadas no local definitivo, antes de serem enxertadas, visando à obtenção antecipada de novos porta-enxertos. O experimento foi conduzido em casa-de-vegetação com 50% de sombrite, temperatura e nebulização controladas, no pomar didático da Universidade Federal de Lavras - UFLA. As estacas herbáceas desprovidas de folhas e com comprimento de 15 cm e 8 mm de diâmetro foram imersas em soluções AIB e ANA (0, 1000, 2000, 3000 e 4000 mg.L-1) por 15 segundos e, em seguida, colocadas em bandejas de isopor preenchidas com substrato vermiculita. Após 60 dias, coletaram-se os seguintes dados biométricos: porcentagem de estacas enraizadas e brotadas, número de folhas e brotos, comprimento médio das raízes e biomassa seca das brotações. Não houve efeito significativo das concentrações AIB e ANA para todas as características analisadas. Para a característica porcentagem de estacas enraizadas, obtiveram-se 56,73% de enraizamento sem aplicação de auxinas, podendo esse método resultar na antecipação da obtenção de novos porta-enxertos, utilizando-se material resultante da desbrota.The effect of the indol butiric acid (IBA) and the naftalenoacetic acid (NAA) in the rooting of 'Riparia de Traviú' cuttings obtained from the sproutings of the plants, before being grafted, in order to obtain new rootstocks. The experiment was conduted under green house conditions, at the orchard of the Lavras Federal University (UFLA). The herbaceous cuttings, measuring 15 cm of lengh 8 mm of diameter and without leaves, were treated with IBA and NAA (0, 1000, 2000, 3000 and 4000 mg.L-1) for 15 seconds and taken to polystyrene trays filled with vermiculita. After 60 days, the percentage of rooting and sprouted cuttings, the number of leaves and sprouts, the roots average length and the dry matter of the sproutings were evaluated. There was not signifficant effect of the IBA and NAA dosages for all the characteristics evaluated. The rooting percentage 56,73% not using of auxins, indicating that this can be a way to antecipate the obtaining of new rootstocks, by using material obtained from sproutings.

A amoreira-preta (Rubus sp) é uma espécie de clima temperado que, por ocasião da poda hibernal, realizada durante o período de dormência, produz grande quantidade de material vegetal que pode ser utilizado na propagação. Dessa forma, objetivou-se verificar o potencial de enraizamento de estacas lenhosas de duas cultivares de amoreira-preta tratadas com ácido indolbutírico (AIB). De ramos com um ano de idade coletados de plantas-matrizes das cultivares Brazos e Guarani, foram retiradas estacas lenhosas, sem folhas, com aproximadamente 15 cm e tratadas com solução de AIB, nas concentrações de 0, 1000, 2000 e 3000 mg.L-1, por 15 segundos. Posteriormente, as estacas foram plantadas em sacos de polietileno contendo mistura de areia e terra (2:1 v/v) como substrato e mantidas em casa-de-vegetação, sob nebulização intermitente durante 90 dias.As cultivares apresentaram diferentes potenciais de enraizamento e desenvolvimento da parte aérea. Maiores percentuais de estacas enraizadas e brotadas, número de folhas e de brotos e peso da matéria seca das brotações foram obtidos em estacas de ‘Brazos' não-tratadas e em estacas de ‘Guarani' com aplicação de 2000 mg.L-1 de AIB.During the winter pruning, in the dormancy period, there are surpluses of great amount of vegetable material that can be used in the propagation. It was aimed at verifying the hardwood cuttings rooting potential of two blackberry cultivar treated with indolebutyric acid (IBA). Hardwood cuttings without leaves, with approximately 15 cm were collected from branches with one year old of ‘Brazos' and ‘Guarani' mother-plant and treated with solution of IBA at of 0, 1000, 2000 and 3000 mg.L-1 concentrations for 15 seconds immersion. Later the cuttings were planted in polyethylene bags containing sand and soil mixture (2:1 v/v) as substrate and maintained in greenhouse under intermittent mist for 90 days. The cultivars presented them different rooting potential and aerial part development cuttings. Larger rooted and sprouted cuttings percentage, number of leaves and sprouts and dry matter weights of the sprouts were obtained in ‘Brazos' cuttings non treated with IBA and in ‘Guarani' cuttings with treatment of 2000 mg.L-1 of IBA.

Objetivou-se estudar a influência do fotoperíodo no cultivo in vitro de embriões imaturos oriundos do cruzamento entre tangerineira ‘Poncã’ e laranjeira ‘Pera’. Os embriões foram extraídos de frutos com 3 - 4 cm de diâmetro e inoculados em meio MS, adicionado de GA3 e carvão ativado nas concentrações de 0,3 mg.L-1 e 1 mg.L-1, respectivamente, previamente autoclavado a 121oC por 20 minutos. Os tratamentos constaram dos seguintes fotoperíodos: 8, 10, 12, 14, 16, 18 e 24 horas de luz contínua, na intensidade luminosa de 43 µM.m-2.s-1, a 27ºC, em estufas tipo B.O.D. O tratamento com 16 horas de luz contínua foi realizado em sala de crescimento em intensidade luminosa de 35 µM.m-2.s-1. O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado, com quatro repetições de três tubos de ensaio cada uma. Após 60 dias, melhores resultados para altura da parte aérea, número de folhas, peso da matéria fresca da parte aérea, comprimento das raízes e peso da matéria fresca das raízes foram obtidos com fotoperíodos de 8, 10, 12, 14, 18 e 24 horas. Fotoperíodo de 16 horas proporciona menor desenvolvimento de embriões imaturos.It was aimed to study the influence of the photoperiod on in vitro culture of immature embryos from ‘Poncã’ mandarin and ‘Pera’ sweet orange fruits. The embryos were removed from 30-40-mm wide fruits and inoculated on the MS medium, supplemented with 0.3 mg L-1 GA3 and 1 mg L-1 activated charcoal, previously sterilized at 121°C for 20 minutes. The following photoperiods were evaluated: 8, 10, 12, 14, 16, 18, and 24 hours of continuous light in 43 µM.m-2.s-1 intensity, at 27ºC, in B.O.D chambers. The 16 hours continuous light was performed in growth room at 35 µM m-2 s-1. The statistical analysis used was entirely randomized, with four replications, each one constituted of three tubes. After 60 days, better results for plant height, number of leaves, above ground fresh matter weight, root length, and root fresh weight were obtained with 8, 10, 12, 14, 18 e 24 hours photoperiod. The 16 hours rendered smaller immature embryos development.

A gloxínia é uma planta ornamental cultivada pela exoticidade e variação de coloração de suas flores. Objetivou-se avaliar a influência residual da citocinina 6-Benzilaminopurina (BAP) usada durante a cultura in vitro sobre o processo de aclimatização de gloxínia (Sinningia speciosa Lood. Hiern.). As concentrações de 0,0; 0,5; 1 e 2,0 mg L-1 de BAP, em cultivo in vitro, foram combinadas com os substratos: vermiculita, plantmax® e vermiculita + plantmax®, durante o processo de aclimatização. Após o processo de inoculação in vitro, o material foi transferido para sala de crescimento com temperatura de 26 ± 1ºC, intensidade luminosa de 35 m mol m² s-1 e fotoperíodo de 16 horas, permanecendo nessas condições por 60 dias. Após esse período, as plantas obtidas foram plantadas nos diferentes substratos. As avaliações foram efetuadas após 120 dias, em casa-de-vegetação, registrando-se o número de brotos, peso da matéria fresca do sistema radicular, peso da matéria seca da planta e número de flores. Os melhores resultados foram obtidos com o cultivo em substrato plantmax® ou plantmax�� + vermiculita advinda de meio de cultura in vitro isento de BAP.The present work aimed to evaluate the influence of concentrations of 6-benzylaminopurine (BAP) used in acclimatization of gloxinia (Sinningia speciosa Lood. Hiern). Concentrations of BAP (0.0; 0.5; 1.0 and 2.0 mg L-1) in vitro and substrates (vermiculite, plantmax®, and vermiculite+plantmax®) were tested for acclimatization in every possible combination. After in vitro inoculation, the material was transferred to a growth chamber with temperature of 26±1ºC and light intensity of 35 m mol m-2 s-1 for 16 hours, remaining under these conditions for 60 days. After that period, the plants obtained were transferred to pots containing substrates in a greenhouse. The evaluations were performed 120 days after cultivation. It were measured number of shoots, roots dry weight, above-ground dry weight, and number of flowers. On acclimatization, the best results for the variables were obtained with the use of the substrate Plantmax® or Plantmax®+vermiculite for plants originated from culture tissue.

Objetivou-se, com este trabalho, estudar a embriogênese somática indireta em Coffea arabica L. cv. Obatã, incluindo as etapas de indução de calos, diferenciação, regeneração e formação de embriões. Segmentos foliares retirados de plantas em condições de campo foram desinfestados com álcool 70% por 1' e hipoclorito de sódio 1% durante 15' e inoculados em meio IC (indução de calos) suplementado de 2,4-D (0, 1, 2 e 4 mg.L-1) e Cinetina (0, 2, 4 e 8 mg.L-1). Posteriormente, os calos foram transferidos para o meio DC (diferenciação de calos), adicionado de diferentes concentrações de 2,4-D (0, 1, 2 e 4 mg.L-1) e BAP (0, 2, 4 e 8 mg.L-1); em seguida, durante a etapa de regeneração, os calos embriogênicos friáveis foram inoculados em meio R suplementado de BAP (0, 2, 4 e 6 mg.L-1) e sacarose (0, 15, 30, 45 e 60 g.L-1). Os meios de cultura utilizados tiveram pH ajustado para 5,6 ± 1 antes de serem autoclavados. Os experimentos foram mantidos em sala de crescimento a 26 ± 1ºC. Durante as etapas de indução e diferenciação de calos, os experimentos ficaram em condições de obscuridade, e na etapa de regeneração, os experimentos foram mantidos sob fotoperíodo de 16 horas e intensidade luminosa de 35 µmol.m-2.s-1. Concluiu-se que a combinação entre 4 mg.L-1 de 2,4-D e 2 mg.L-1 de cinetina favoreceu a indução de calos primários mistos. Maior freqüência de calos embriogênicos friáveis ocorreu na presença de BAP (8 mg.L-1), associado ou não ao 2,4-D, e maior número de embriões por explante foram obtidos quando utilizou-se sacarose (30 g.L-1) e BAP (3 mg.L-1).It was aimed with this work to study the indirect somatic embryogenesis in Coffea arabica L. cv. 'Obatã', including the steps of induction, differentiation and regeneration of plants. Leaf segments withdrawn from plants under field conditions were disinfected with 70% alcohol for 1', 1% sodium hypochlorite for 15'and inoculated in 'CI' medium (callus induction) supplemented with 2,4 D (0, 1, 2 and 4 mg.L-1) and kinetin (0, 2, 4 and 8 mg.L-1). Later, the callus were transferred to the 'CD' medium (callus differentiation) to which was added 2,4-D (0, 1, 2 and 4 mg.L-1) and BAP (0, 2, 4 and 8 mg.L-1). During the regeneration step, friable embryogenic callus were inoculated in 'R' medium supplemented with BAP (0, 2, 4 and 6 mg.L-1) and sucrose (0, 15, 30, 45 and 60 g.L-1). The culture media utilized had their pH adjusted to 5.6 ± 1 before being autoclaved. The experiments were kept in growth room at 26 ± 1ºC. Over the steps of callus induction and differentiation, the experiments were carried out in dark conditions and at the regeneration step the experiments were carried out under 16-hour photoperiod and light intensity of 35 µmol.m-2.s-1. It was observed that the combination of 2,4-D and kinetin favors the induction of primary callus. High frequency of friable embryogenic callus was observed with BAP (8 mg.L-1), combined or not with 2,4-D, and greater number of embryos per explant, when sucrose (30g.L-1) and BAP (3 mg.L-1) was utilized.

O experimento foi desenvolvido em estufa com nebulização intermitente, objetivando comparar quatro tipos de recipientes no enraizamento de estacas de ameixeira. Foram utilizados ramos do ano das cultivares Frontier e Reubennel, dos quais foram retiradas estacas da porção mediana, com aproximadamente 12cm de comprimento, um par de folhas secionadas pela metade e duas incisões laterais na base. Posteriormente, as mesmas tiveram sua base tratada por imersão rápida durante 5 segundos em solução de ácido indolbutírico (AIB), a 2000mg.L-1 e acondicionadas nos seguintes recipientes: tubetes, bandejas de isopor (128 células), sacos plásticos grandes (14 x 20cm) e sacos plásticos pequenos (10 x 17cm), contendo vermiculita como substrato. O delineamento experimental adotado foi o inteiramente casualizado, com 3 repetições e 12 estacas por repetição. Após 70 dias, não foi observada diferença no percentual de enraizamento entre as cultivares. A bandeja proporcionou o menor enraizamento entre os recipientes, não havendo diferença entre os demais. O maior número de raízes foi obtido com a cultivar Frontier. O maior peso da matéria seca das raízes foi obtido com a cultivar Frontier em saco grandes. Maiores comprimentos de raízes foram obtidos nos maiores recipientes. O tubete proporciona maior economia e menor movimentação de substrato, sem reduzir o enraizamento.

O objetivo deste trabalho foi avaliar a resposta morfogênica do genótipo RB935744 à indução de embriogênese somática com subsequente regeneração dos embriões. Segmentos transversais de folhas jovens medindo 2-3 mm de espessura foram cultivados em meio MS sólido contendo três diferentes concentrações de ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D) para indução de calos embriogênicos. Os melhores resultados foram obtidos usando 31.5 µM L-1 de 2,4-D em 45 ou 60 dias de incubação em meio de indução, realizando de um a três subcultivos e incubando em meio de regeneração por 15 a 45 dias. Este resultado mostra que o protocolo de embriogênese somática para o genótipo RB935744 necessita de ajustes para se alcançar uma satisfatória produção de embriões somáticos.

O presente trabalho foi realizado no Laboratório de Cultura de Tecidos da EMBRAPA/CPACT, Pelotas-RS, com o objetivo de verificar o comportamento in vitro de duas cultivares de morangueiro em diferentes concentrações do meio MS. Explantes de morangueiro, cultivares Hofla e Tangi provenientes do cultivo in vitro foram cultivados em meio MS, na concentração plena, 3/4 e 1/2 adicionado de sacarose a 30g/l, mio-inositol a 100mg/l e benzilaminopurina (BAP) a 0,005mg/l. Utilizaram-se frascos com capacidade de 250ml, que continham 40ml de meio de cultura, nos quais inocularam-se cinco explantes. O cultivo foi mantido em sala de cultura, onde permaneceu por 32 dias sob fotoperíodo de 16 horas, luminância de 1500 lux e temperatura de 25°C. Os resultados indicaram que a redução na concentração dos sais MS incrementa o percentual de explantes enraizados, aumentando o número de raízes da cultivar Tangi. O maior comprimento médio de raízes foi obtido com a cultivar Hofla na concentração 3/4 e 1/2 do meio MS. Não se observaram diferenças no desenvolvimento das plântulas, entre as cultivares, com a redução das concentrações do meio MS.The present work was carried out in the Tissue Culture Laboratory EMBRAPA/CPACT, Pelotas-RS, with the objective of verifying the behaviour in vitro of two cultivars of strawberry on different MS medium concentration. Strawberry explants, Hofla and Tangi cultivars coming from in vitro culture were tested on MS medium in the full, 3/4 and 1/2 strength suplemented with 30g/l sucrose, 100mg/l myo-inositol and 0.005mg/l benzylanimopurine (BA). Flasks (250ml) containing 40ml of medium culture with five explants per flasks were used. Cultures were maintained in a growth room at 25°C with a photoperiod of 16 h at 1.5 Klux for 32 days. Results indicated that the reduction in MS salts improved rooting explant by increasing the number of roots of the Tangi cultivar. A large root length was obtained with the Hofla cultivar in the 3/4 and 1/2 MS concentration. It was not observed any difference in the development of the plantlets among the cultivars due to the reduction in MS salts.

Objetivou-se estudar substratos e adubação em plantas de orquídea da espécie C. loddgesii "Alba" x C. loddgesii "Atibaia". Plantas oriundas de cultivo in vitro foram transplantadas para bandejas coletivas contendo pó de xaxim e aclimatizadas em casa de vegetação. Após seis meses, quando as plantas tinham de 3,0 a 5,0cm de comprimento, foram transferidas para bandejas de plástico com 24 células de 150cm³ cada contendo os substratos brita no 0, casca de arroz carbonizada (CAC), xaxim desfibrado e fibra de piaçava e submetidas a adubações semanais com Biofert Plus® (5,0mL L-1), Dyna-Grow® (2,5mL L-1) e formulação elaborada. Após 12 meses, verificou-se que os melhores substratos para plantas da orquídea C. loddgesii "Alba" x C. loddgesii "Atibaia" são casca de arroz carbonizada e fibra de piaçava, e melhores respostas à adubação são obtidas com o adubo foliar Biofert Plus®.This paper was aimed at studing different substrates and fertilization for the development of C. loddgesii 'Alba' x C. loddgesii 'Atibaia' orchid species. Seedlings from in vitro culture were transplanted to plastic trays containing xaxim powder. After 6-months of acclimatization inside a greenhouse, plantles measuring beetwen 3.0 to 5.0cm length were transferred to 24 cell trays with a volume of 150cm³. Four substrates were tested (broken stone number 0, carbonized rice hulls, defibered xaxim and piassava fiber with tree different fertilizations (Biofert Plus®, Dyna Grow® and a specific formulation developed for this work). Pure water was tested as control. After 12-months of growth the best treatments for the acclimatization of in vitro produced C. loddgesii 'Alba' x C. loddgesii 'Atibaia' orchid plantlets were carbonized rice hulls or piassava fiber substrates combined with leaf fertilizer Biofert Plus®.

O trabalho foi realizado em casa de vegetação do Departamento de Fitotecnia da Faculdade de Agronomia Eliseu Maciel, Universidade Federal de Pelotas, com o objetivo de verificar o efeito de diversos substratos no enraizamento de estacas de ameixeira em diferentes épocas de coleta dos ramos. Foram utilizadas estacas medianas da cultivar Frontier, com comprimento de 15cm e um par de folhas, coletadas nos meses de novembro de 1993, janeiro e março de 1994, obtidas em um pomar comercial com 8 anos de idade. Todas as estacas utilizadas foram tratadas com ácido indolbutirico na concentração de 3000ppm, introduziu-se em torno delem da base das estacas em ácido indolbutirico, na forma de pó e colocou-se em tubetes, acondicionados em bandejas de isopor, contendo diferentes substratos: areia média lavada; vermiculila de grânulos médios; cinza de casca de arroz e serragem de eucalipto, utilizados isolados e em misturas (1: 1v/v). O período de permanência das estacas na casa de vegetação foi de 60 dias. Observou-se maiores índices de enraizamento na coleta dos ramos realizadas em janeiro e março, e que o substrato areia + serragem proporcionou os maiores percentuais de estacas enraizadas com 68,22% e 65,99% nos meses de janeiro e março.This work was carried out in a greenhouse with intermittent mist out at the plant Science Department, Eliseu Maciel Agronomy College of Federal University of Pelotas (Brazil), aiming to evaluate the effect of different substratos and time of cutting on rooting of pium cuttings. Mild cuttings with 15cm length andapair of ieaves of Frontier cultivar were coilected from a commercial orchard eight years old in November 1993, January and March 1994. All cuttings were treated with indolbutiric acid (IBA) at 3000ppm concentration introducing about 1.0cm of their basal end in IBA powder and placed in tubes on isopor trays containing different substratos: washed mild sand: vermiculite of medium grains; rice husk ash and saw dust, utilized as isolated or as mixtures (1:1 v/v). Cuttings were kept on substratos for 60 days. The results demonstrated that the higher rooted cuttings percentage were obtained for cuttings collected in January and in March. The mixture of sand and saw dust gave the higher number of cuttings rooting with 68.22% and 65.99% for January and March.

Objetivou-se verificar qual o melhor estádio embrionário para o cultivo de embriões imaturos oriundos de frutos provenientes de hibridação entre 'Pêra Rio' x 'Poncã' , bem como o efeito de diferentes concentrações do meio de cultura MT. Os embriões em diferentes estádios de desenvolvimento (globulares, torpedo e cordiforme) foram excisados e inoculados em tubos de ensaio contendo 15 mL do meio MT com diferentes concentrações (0; 50; 100 e 150% da composição original e acrescido de 50 g.L-1 de sacarose). Após a inoculação, os embriões foram incubados à 27±1ºC, fotoperíodo de 16 horas e irradiância de 32 mmol.m-2.s-1. Após 90 dias, avaliou-se o comprimento da parte aérea e do sistema radicular, massa fresca e número de folhas das plântulas. Melhor desenvolvimento dos embriões imaturos foi obtido em estádio cotiledonar e com a concentração de 150% do meio MT.Embryos obtained from Citrus sinensis Osbeck 'Pêra Rio' x Citrus reticulata Blanco 'Poncã' crossings were excised in diverse phases of development and cultivated in different medium concentrations. Embryos in globular, torped and cotiledonary stage were excised and inoculated individually in test tubes with 15 mL in distinct MT medium concentrations (0; 50; 100 and 150% of original composition and added sucrose (50 g.L-1). After inoculation, the embryos were maintained in growth room at 27±1ºC, 16 hour photoperiod and 32 umol.m-2.s-1 irradiance. After 90 days, the length of the aerial part and roots system, fresh mass and number of leaves, were evaluated. The best results were obtained by incubating embryos in the cotiledonary stage, in MT medium with concentrations of 150%.

O Eucalyptus apresenta grande importância no setor florestal e muitos avanços na área do melhoramento foram conquistados com o advento da biotecnologia. Contudo, alguns genótipos promissores ainda não possuem protocolos de multiplicação com técnicas de clonagem, como a miniestaquia. Objetivou-se avaliar concentrações de IBA na sobrevivência, enraizamento e vigor vegetativo de miniestacas de E. benthamii x E. dunnii, com a determinação da dose de máxima eficiência técnica. Minicepas dos clones H12, H19 e H20 foram manejadas em minijardim clonal em sistema semi-hidropônico. Para o enraizamento, mergulhou-se a porção basal da miniestaca em soluções hidroalcoólicas, cujas concentrações foram: 0, 2.000, 4.000, 6.000 e 8.000 mg Lde IBA. O experimento foi conduzido no delineamento inteiramente casualizado, sendo constituído por três clones e cinco concentrações de IBA, com cinco repetições, contendo dez miniestacas por repetição. O IBA influenciou positivamente os processos rizogênicos das miniestacas com resposta diferenciada entre os clones, a qual variou de 30,32 a 55,45% de enraizamento. Para os clones H12 e H19, os incrementos positivos ocorreram até a maior concentração de IBA. Contudo, a faixa situada entre os tratamentos de 4.000 e 6.000 mg L-1 de IBA promoveu os melhores resultados de enraizamento para o clone H20.

Objetivou-se avaliar a indução de brotações epicórmicas em cepas e as técnicas de estaquia, miniestaquia e enxertia para a clonagem de Cupressus lusitanica. Para a estaquia, testaram-se concentrações de ácido indolbutirico e substratos em plantas de 5 e 10 anos de idade. Na miniestaquia, avaliou-se o tipo de propágulo. Na enxertia, utilizaram-se propágulos de árvores de 10 anos como enxertos para o primeiro subcultivo, sendo, a partir deste, coletadas as brotações para o segundo subcultivo. A espécie apresentou difícil enraizamento e a enxertia, o melhor resultado. A indução de brotações de cepas apresentou baixa viabilidade. doi: 10.4336/2010.pfb.30.62.161

The objective was to evaluate the induction of epicormic shoots in strains and techniques of cutting, grafting and minicutting for Cupressus lusitanica cloning. For cutting, concentrations of IBA and substrates in plants of 5 and 10 years of age were tested. In minicutting evaluated the type of propagules. Grafting seedlings of trees 10 years as grafts for the first sub-culture, and from this, the shoots were collected for the second subculture. The species presented difficult rooting. The grafting showed the best result. Shoots induction of strains showed low viability.doi: 10.4336/2010.pfb.30.62.161 Objetivou-se avaliar a indução de brotações epicórmicas em cepas e as técnicas de estaquia, miniestaquia e enxertia para a clonagem de Cupressus lusitanica. Para a estaquia, testaram-se concentrações de ácido indolbutirico e substratos em plantas de 5 e 10 anos de idade. Na miniestaquia, avaliou-se o tipo de propágulo. Na enxertia, utilizaram-se propágulos de árvores de 10 anos como enxertos para o primeiro subcultivo, sendo, a partir deste, coletadas as brotações para o segundo subcultivo. A espécie apresentou difícil enraizamento e a enxertia, o melhor resultado. A indução de brotações de cepas apresentou baixa viabilidade.doi: 10.4336/2010.pfb.30.62.161

Várias espécies da família Lauraceae encontram-se em risco de extinção, devido ao alto valor comercial de suas madeiras e a consequente exploração das reservas naturais. Dentre elas, Ocotea porosa (imbuia), O. odorifera (canela-sassafras) e O. catharinensis (canela-preta) são de grande importância no Sul do Brasil, de onde são originárias. Estas espécies apresentam sementes recalcitrantes, o que dificulta sua regeneração natural. Alem disso, a propagação por meio de estaquia e enxertia apresenta limitações. Este trabalho teve por objetivo avaliar a germinação e multiplicação in vitro das canelas preta e sassafrás na presença de BAP e carvão ativado e a germinação e multiplicação in vitro de imbuia sob diferentes concentrações de sacarose no meio de cultura. Para as canelas preta e sassafrás foram avaliadas duas concentrações de NaClO na desinfestação de embriões (0,1 % e 0,5 %). Na fase de multiplicação, foi avaliado o efeito de BAP e carvão ativado. Para a imbuia, foi avaliada a influência da concentração de sacarose (30, 60, 90 ou 120 g.L-1) na introdução e multiplicação in vitro. A porcentagem de germinação foi superior a 85 % para as três espécies. Para a canela sassafrás, as melhores taxas de multiplicação foram obtidas na presença de 5 μmol.L-1 de BAP. Para a imbuia, a concentração de 60 g.L-1 de sacarose no meio proporcionou as maiores taxas de multiplicação. Apesar de o estabelecimento da canela preta ter sido satisfatório, após algumas semanas no meio de multiplicação os explantes não apresentavam aparência normal e oxidaram. Doi: 10.4336/2009.pfb.59.37

O eucalipto é o gênero florestal mais pesquisado em micropropagação, entretanto, são poucos os resultados efetivos obtidos com sua multiplicação contínua. A micropropagação inclui a desinfestação e cultivo dos explantes em meio nutritivo e condições assépticas, a multiplicação dos propágulos em sucessivos subcultivos e o enraizamento in vitro ou ex vitro. Como vantagens, possibilita: alto rendimento por planta matriz; obtenção de plantas isentas de viroses; produção de mudas em qualquer época do ano; produção intensiva de mudas sadias, em curto período de tempo e espaço reduzido; clonagem de plantas de difícil propagação vegetativa por métodos convencionais como estaquia e miniestaquia; e preservação de plantas matrizes sem riscos de infecção. Suas desvantagens incluem a dependência de um laboratório de cultura de tecidos, cuja manutenção implica em altos custos, além da exigência de mão-de-obra altamente especializada; elevada possibilidade de contaminação; variação de condições entre e dentro de clones; dificuldade de encontrar o meio adequado para a espécie desejada; e possibilidade de ocorrência de mutações, como resultado do uso de fitorreguladores. Embora tenha alto custo em comparação a outros métodos de clonagem, a micropropagação de eucalipto é estratégica para manter material vegetal superior in vitro ou para abastecer o microjardim clonal. Doi: 10.4336/2009.pfb.58.49

The Eucalyptus is the genus that has the highest number of researchs in micropropagation. However, there are few effective results obtained with their continuous proliferation. Micropropagation includes disinfection and culture of explants in nutrient medium and aseptic conditions, multiplication in successive subcultures and in vitro or ex vitro rooting. As advantages, the micropropagation allows: high yield per donor plant, freevirus plants, production of saplings at any time of the year, intensive production of healthy saplings in a short period of time and in a limited space, cloning of plants difficult-to-propagate by conventional methods, such as cutting and minicutting, and donor plant preservation without risk of infection. Its disadvantages include the dependence on a tissue culture laboratory, which results in high maintenance costs, as well as the requirement of highly trained workers, high possibility of contamination, variation of conditions within and among clones, the difficulty of finding appropriate culture medium for the species desired and possibility of mutation as a result of the use of growth regulators. Despite having high cost when compared to other cloning methods, the species and hybrids of eucalypt micropropagation is strategic to maintain superior plant material in vitro or to supply the micro-clonal hedge. doi: 10.4336/2009.pfb.58.49O eucalipto é o gênero florestal mais pesquisado em micropropagação, entretanto, são poucos os resultados efetivos obtidos com sua multiplicação contínua. A micropropagação inclui a desinfestação e cultivo dos explantes em meio nutritivo e condições assépticas, a multiplicação dos propágulos em sucessivos subcultivos e o enraizamento in vitro ou ex vitro. Como vantagens, possibilita: alto rendimento por planta matriz; obtenção de plantas isentas de viroses; produção de mudas em qualquer época do ano; produção intensiva de mudas sadias, em curto período de tempo e espaço reduzido; clonagem de plantas de difícil propagação vegetativa por métodos convencionais como estaquia e miniestaquia; e preservação de plantas matrizes sem riscos de infecção. Suas desvantagens incluem a dependência de um laboratório de cultura de tecidos, cuja manutenção implica em altos custos, além da exigência de mão-de-obra altamente especializada; elevada possibilidade de contaminação; variação de condições entre e dentro de clones; dificuldade de encontrar o meio adequado para a espécie desejada; e possibilidade de ocorrência de mutações, como resultado do uso de fitorreguladores. Embora tenha alto custo em comparação a outros métodos de clonagem, a micropropagação de eucalipto é estratégica para manter material vegetal superior in vitro ou para abastecer o microjardim clonal. Doi: 10.4336/2009.pfb.58.49

Dentre as espécies exóticas, as do gênero Eucalyptus demonstram seu potencial como matéria-prima de produtos florestais como celulose e madeira (KHUSPE et al., 1987). Entretanto, nem todas as espécies de Eucalyptus adaptam-se a climas com baixas temperaturas. Neste sentido, destaca-se o E. Benthamii. De acordo com Paludzyszyn Filho et al. (2006), este é indicado para plantios em regiões com temperaturas mínimas absolutas de até -10ºC, sob condições de aclimatação prévia por gradual abaixamento de temperatura na estação fria. Sob temperaturas abaixo desse limite, podem ocorrer atrasos no desenvolvimento em altura de plantas, porém são pouco expressivos (2%). Trata-se de uma espécie indicada para clima temperado ainda pouco estudada, porém, com indicações favoráveis de crescimento em países como África do Sul, China e Brasil. Plantios nos municípios paranaenses de Colombo e Guarapuava indicam alta tolerância a geadas e crescimento médio superior ao de E. dunnii. As primeiras observações indicam que a madeira tem maior aptidão para fins energéticos. Das técnicas de clonagem, a micropropagação apresenta vantagens como a produção massal de genótipos selecionados, produção de plantas livres de patógenos, preservação de germoplasma in vitro e rejuvenescimento de material adulto (ELDRIDGE et al., 1994; HARTMANN et al., 1997). Com o sucesso no estabelecimento de plantas adultas in vitro, as fases seguintes da micropropagação, proliferação e alongamento, relacionam-se a estudos visando o enraizamento e produção de mudas. Este trabalho teve por objetivo testar, a partir de ápices caulinares estabelecidos in vitro, um protocolo de proliferação e alongamento de Eucalyptus benthamii.

As espécies Eucalyptus dunnii e Eucalyptus benthamii apresentam tolerância a baixas temperaturas, fator limitante à expansão do cultivo de eucalipto na região sul do Brasil. Um híbrido interespecífico entre estes materiais possivelmente permitirá explorar-se as vantagens advindas deste cruzamento. O desenvolvimento da clonagem em espécies puras e em híbridos interespecíficos do gênero Eucalyptus por meio do enraizamento de estacas foi o marco inicial da propagação vegetativa assumir posição de destaque e despertar o interesse das empresas e pesquisadores, com conseqüente busca de aprimoramento e inovações tecnológicas (TITON et al., 2003). Atualmente a técnica de miniestaquia é empregada na maioria das empresas florestais, sendo que para DEL PONTE et al. (2001), a principal aplicação desse método tem sido na produção de mudas clonais de materiais selecionados. Da mesma forma, a micropropagação também está sendo empregada para multiplicação massal de indivíduos selecionados (XAVIER e COMÉRIO, 1996; WATT et al., 2003) com inúmeras vantagens e aplicações comprovadas, como a promoção de uniformidade dos plantios, adaptações dos clones específicos para determinados sítios e maximização da produção de madeira em quantidade e qualidade desejáveis para determinados fins, em comparação com plantios oriundos de mudas produzidas por sementes (XAVIER e COMÉRIO, 1996). Além disso, proporciona a manutenção das características favoráveis evitando a variabilidade encontrada em árvores obtidas a partir de sementes (HIGASHI et al., 2000). Na micropropagação de espécies lenhosas, as citocininas são indispensáveis para a quebra de dominância apical e indução de proliferação de gemas axilares, sendo o tipo de citocinina e a sua concentração os fatores que mais influenciam o sucesso da multiplicação in vitro. As concentrações de citocininas para a multiplicação variam de 0,1 a 5,0 mg L-1, em que as concentrações de auxina são freqüentemente baixas se comparadas com as das citocininas para manter um balanço auxina/citocinina menor que 1 na fase de proliferação de gemas (GRATTAPAGLIA e MACHADO, 1998). Como meio de multiplicação, para obter ao mesmo tempo culturas alongadas, tem sido utilizado o meio MS (MURASHIGE e SKOOG, 1962) suplementado com BAP (0,08 mg L-1) e ANA (0,1 mg L-1), sendo que repicagens sucessivas para novos meios de multiplicação devem ser feitas a cada 3 a 4 semanas (ALFENAS et al., 2004). Entretanto, devido a diferenças no comportamento das espécies, essas concentrações de reguladores de crescimento são variáveis. Com base no exposto, o presente trabalho teve como objetivo testar diferentes concentrações de BAP e ANA na multiplicação e alongamento de híbridos de Eucalyptus benthamii x E. dunnii.

A falta de opções de espécies do gênero Eucalyptus tolerantes a geadas é uma das limitações da expansão de seu cultivo na região sul do Brasil. Neste sentido, tanto o E. dunnii como o E. benthamii apresentam-se como alternativas para o empreendedor florestal. Adicionalmente, a produção do híbrido interespecífico entre os materiais citados poderá proporcionar benefícios extras, ao associar as vantagens adaptativas e silviculturais das espécies parentais. As práticas e as técnicas silviculturais convencionais contribuíram significativamente para melhoria da produtividade das espécies florestais, e continuarão a ter um impacto substancial nas plantações comerciais (NEHRA et al., 2005). Nesse sentido, o uso da clonagem está sendo reconhecido pelo mundo inteiro como fator contributivo para o aumento da produtividade (JOSHI et al., 2003). A propagação vegetativa de Eucalyptus já é realidade em várias empresas florestais (XAVIER e COMÉRIO, 1996) e atualmente está ganhando destaque no setor de produção de mudas. Dentre as técnicas de cultura de tecidos de plantas, a micropropagação tem sido a mais difundida e com aplicações práticas comprovadas. Esta já se encontra embutida nos programas de melhoramento, que na maioria das vezes objetivam a maximização ou manutenção do valor genético do clone a ser propagado, permitindo assim, acelerar os métodos convencionais de propagação vegetativa (XAVIER e COMÉRIO, 1997). Um dos fatores mais críticos na micropropagação de espécies lenhosas refere-se ao sucesso na fase de desinfestação dos explantes. GRATTAPAGLIA e MACHADO (1998) destacam que a dificuldade maior nessa etapa reside em se obter tecido descontaminado, sem conduzi-lo à morte quando isolado, em que os pré-tratamentos aplicados à planta matriz são determinantes para o sucesso dessa etapa. Segundo os mesmos autores, várias substâncias com ação germicida são utilizadas para fazer a desinfestação dos explantes, destacando-se o etanol e os compostos a base de cloro, tais como o hipoclorito de sódio (NaOCl) e de cálcio. Quando se utiliza material vegetativo diretamente do campo, os tratamentos desinfestantes são mais criteriosos, em virtude de apresentarem maiores níveis de contaminação (ALFENAS et al., 2004) e as concentrações e tempos de exposições aos agentes desinfetantes devem ser maiores (GRATTAPAGLIA e MACHADO, 1998), em comparação aos explantes provenientes de ambientes protegidos. O presente trabalho teve como objetivo testar diferentes concentrações de hipoclorito de sódio (NaOCl) no estabelecimento de segmentos nodais de Eucalyptus benthamii x E. dunnii oriundos de sistema semi-hidropônico.

Este trabalho foi conduzido no Departamento de Fitotecnia da Faculdade de Agronomia Eliseu Maciel, Universidade Federal de Pelotas, em estufa com nebulização intermitente, com o objetivo de verificar o efeito do ácido indolbutírico(AIB) e ethefon (ácido 2-cloroetil fosfônico) no enraizamento de estacas de ramos de pessegueiro. Utilizou-se estacas medianas retiradas de ramos de plantas com seis anos de idade, da cultivar Diamante, com comprimento de 15cm. Efetuou-se duas lesões laterais na base das estacas que foram tratadas com ácido indolbutírico nas concentrações 0; 1000; 2000 e 3000ppm, na forma líquida e, ethefon nas concentrações de 0; 50; 100 e 150ppm. Após a imersão de 5 segundos, acondicionou-se as estacas em sacos de polietileno contendo como substrato a mistura de areia+cinza (2:1 v/v). Pelos resultados obtidos concluiu-se que o ácido indolbutírico aumentou o percentual de estacas realizadas até a concentração de 1752ppm. e o número de raízes até a concentração de 1791ppm. O ethefon não apresentou resultados significativos na forma e concentração utilizadas.This work was conducted at the Plant Science Departament Eliseu Maciel Agronomy College of Federal University of Pelotas, in greenhouse with intermitent mist, aiming to evaluate the effect of indolebutyric acid and ethephon (2-chloroetyl phosphonic acid) on peach hranch cutting rooting. Median cuttings with 15cm length removed from Diamante cultivar branch were used. Two lateral lesions were made on cutting basis and they were treated with indolebutyric acid in liquid at 0; 1000; 2000; and 3000ppm concentrations and ethefon at 0; 50; 100 and 150ppm concentrations. The immersion time was five seconds and the cuttings were packed in polietylene sacks containing a mixture of sand and rice husk ash substrate (2:1 v/v). Results showed that the indolebutyric acid increased the rooted cuttings percentage up to 1752ppm concentration and the number of roots until 1791ppm concentration. The ethephon did not show significant variation for the form and concentrations used.

Uma das fases relevantes do processo de propagação de plantas in vitro é a indução de enraizamento e a aclimatização. A ineficiência desses processos ou falta de protocolos adequados pode inviabilizar todo o processo de micropropagação. Para a propagação in vitro de bromélias, alguns métodos já estão definidos, mas para a bromélia imperial (Alcantarea imperialis), uma Bromeliaceae nativa brasileira ameaçada de extinção, ainda não há um protocolo definido. Objetivou-se avaliar, neste trabalho, o efeito do regulador de crescimento ANA (ácido naftaleno acético), adicionado em diferentes concentrações (0,0; 0,1; 0,5; 1,0; 2,0 mg L-1) ao meio de cultura MS, sobre a indução de enraizamento em brotos dessa bromélia já regenerados in vitro. Avaliou-se, ainda, o pegamento de mudas aclimatizadas com e sem raízes. O processo de enraizamento é induzido em todas as brotações quando se adiciona ANA ao meio de cultura. Sugere-se utilizar 0,1 mg L-1 de ANA, pois tal concentração proporciona menor número de brotações secundárias nos brotos a serem climatizados, além de ser mais econômica. A aclimatização ocorre com mais eficiência em mudas enraizadas ao final do processo in vitro.