Submitted by LUCAS PORTILHO DA CUNHA null (lucasportilhodacunha@gmail.com) on 2020-06-09T22:57:35Z No. of bitstreams: 1 TESE_LUCAS PORTILHO DA CUNHA_01_99 colocar junto ao cd.pdf: 3151497 bytes, checksum: d15893a1fd9fb680954982dead345f5e (MD5) Submitted by LUCAS PORTILHO DA CUNHA null (lucasportilhodacunha@gmail.com) on 2020-06-09T22:57:35Z No. of bitstreams: 1 TESE_LUCAS PORTILHO DA CUNHA_01_99 colocar junto ao cd.pdf: 3151497 bytes, checksum: d15893a1fd9fb680954982dead345f5e (MD5) Submitted by LUCAS PORTILHO DA CUNHA null (lucasportilhodacunha@gmail.com) on 2020-06-09T22:57:35Z No. of bitstreams: 1 TESE_LUCAS PORTILHO DA CUNHA_01_99 colocar junto ao cd.pdf: 3151497 bytes, checksum: d15893a1fd9fb680954982dead345f5e (MD5) Approved for entry into archive by Elza Mitiko Sato null (elzasato@ibilce.unesp.br) on 2020-06-11T13:30:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 cunha_lp_dr_sjrp.pdf: 3151497 bytes, checksum: d15893a1fd9fb680954982dead345f5e (MD5) Approved for entry into archive by Elza Mitiko Sato null (elzasato@ibilce.unesp.br) on 2020-06-11T13:30:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 cunha_lp_dr_sjrp.pdf: 3151497 bytes, checksum: d15893a1fd9fb680954982dead345f5e (MD5) Made available in DSpace on 2020-06-11T13:30:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 cunha_lp_dr_sjrp.pdf: 3151497 bytes, checksum: d15893a1fd9fb680954982dead345f5e (MD5) Previous issue date: 2020-04-06 Approved for entry into archive by Elza Mitiko Sato null (elzasato@ibilce.unesp.br) on 2020-06-11T13:30:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 cunha_lp_dr_sjrp.pdf: 3151497 bytes, checksum: d15893a1fd9fb680954982dead345f5e (MD5) Made available in DSpace on 2020-06-11T13:30:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 cunha_lp_dr_sjrp.pdf: 3151497 bytes, checksum: d15893a1fd9fb680954982dead345f5e (MD5) Previous issue date: 2020-04-06 Approved for entry into archive by Elza Mitiko Sato null (elzasato@ibilce.unesp.br) on 2020-06-11T13:30:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 cunha_lp_dr_sjrp.pdf: 3151497 bytes, checksum: d15893a1fd9fb680954982dead345f5e (MD5) Made available in DSpace on 2020-06-11T13:30:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 cunha_lp_dr_sjrp.pdf: 3151497 bytes, checksum: d15893a1fd9fb680954982dead345f5e (MD5) Previous issue date: 2020-04-06 Made available in DSpace on 2020-06-11T13:30:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 cunha_lp_dr_sjrp.pdf: 3151497 bytes, checksum: d15893a1fd9fb680954982dead345f5e (MD5) Previous issue date: 2020-04-06 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Este trabalho tem como objetivo produzir esporos do fungo Metarhizium anisopliae IBCB 425 em biorreator de leito empacotado visando o aumento da escala, propondo ainda alternativas para a extração dos esporos do meio de cultivo. Também se propõe compreender a preferência do fungo pelo arroz como substrato, procurando-se alternativas para redução dos custos de produção relativos a este substrato. Para isso, realizou-se o cultivo e o reuso do substrato em embalagens plásticas, onde se observou que o cultivo em arroz tipo 1 ainda é o melhor substrato para o fungo, quando comparado com os utilizados neste trabalho sendo, quirera de arroz e farelo de arroz, porém para o aumento de escala e reuso do substrato, a melhor alternativa é a mistura de arroz com bagaço de cana-de-açúcar na proporção de 9:1. Também se realizou ensaios em biorreatores de leito empacotado de 7.62 cm e 20 cm de diâmetro, utilizando a mistura de arroz e bagaço como substrato, e observou-se que, para ambas as configurações, o bagaço evitou a compactação do leito, não se observando temperaturas elevadas que interferissem no desenvolvimento do microrganismo. Com as análises de degradação do amido e da atividade das enzimas amilase total, alfa – amilase e protease, foi possível concluir que o fungo se desenvolve de maneira distinta a cada uso dos grãos e que, o maior consumo de amido ocorre no primeiro cultivo (R1), reduzindo-o em cerca de 30%. Análises de microscopia óptica foram realizadas nos grãos cultivados, onde se observou que no R1 as hifas do fungo penetram os grãos e no segundo (R2) e terceiro (R3) cultivos isso não ocorre, pois o crescimento ocorre apenas na superfície dos grãos. Constatou-se nos biorreatores que houve redução da massa de grãos de 24% após o R1, de 20% após o R2 e de 17% após o R3. A concentração total de esporos foi similar nos três cultivos sucessivos, mas a concentração total de esporos foi cerca de 2,5 vezes maior quando se fez os três cultivos em relação a um único cultivo. Para os testes de extração de esporos, utilizou-se uma técnica seca e outra úmida. Na extração a seco, foi utilizado um tambor rotativo com fluxo de ar seco e um ciclone para recolhimento dos esporos e na úmida, após a extração dos esporos com solução Tween, utilizou-se a técnica de spray drying, utilizando como carreador maltodextrina, sendo que ambas as técnicas apresentaram bons resultados quanto à separação e secagem dos esporos. No tambor rotativo, constatou-se tempo elevado para extração, mas obteve-se extração de até 61% dos esporos. Utilizando o spray dryer foi possível observar uma tendência na diminuição da viabilidade dos esporos com o aumento de temperatura e aumento da viabilidade com concentrações de maltodextrina mais altas. This work aimed to produce spores of the entomopathogenic fungus Metarhizium anisopliae IBCB 425 in packed-bed bioreactors targeting the scale-up, and also to propose alternatives to the extraction of the spores from the cultivation medium. The understanding of the preference of the fungus for the long rice as substrate was also verified in order to reduce the production costs associated to the rice. Therefore, the rice was cultivated in plastic packages and it was noticed that rice is still the best substrate for the fungal growth, even though for the scale-up and reutilization of the substrate it was necessary to mix it with sugarcane bagasse at a proportion 9:1 (rice:bagasse). Experiments in packed-beds of 7.62 and 20 cm internal diameter have been carried out using the mixture rice:bagasse and for both sizes no compaction was noted and no excessive temperature took place. From starch analysis and from the activities of total amylase, alpha-amylase and protease it was noticed that the microbe develops distinctly in each consecutive cultivation of rice, and that after the first cultivation (R1), the starch content was reduced by 30%. Optical microscopy of the cultivated grains revealed that during R1 the fungal hyphaes penetrated the grains, but during the second (r2) and third (R3) cultivations the fungal growth is restricted to the grain surface. It was observed a substrate mass reduction in the packed-bed experiments of 24%, 20% and 17% after R1, R2 and R3, respectively. The total spore concentration was similar in the three consecutive cultivations, although the total production of spores was 2.5 times higher for the three consecutive cultivations when compared with a single cultivation. The spores were extracted using a dry technique and a moist one. For the dry extraction was used a rotating drum with dry air flow and a cyclone to restrain the dry spores, while for the moist alternative the spores were removed from the grains using a Tween solution followed by drying in a spray dryer, using maltodextrin as adjuvant. Both approaches presented good results in terms of spore separation and drying. The experiments in rotating drum were quite long, but the efficiency of extraction was very high, 61%. The dry spores from the spray dryer were less viable with the increase of the temperature and more viable with the increase of the maltodextrin concentration. CAPES: 001