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Orientador: Marlene Tiduko Ueta Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: Coletas de tucunaré (Cichla monoculus) e matrinxã (Brycon amazonicus) foram feitas quinzenalmente nas duas lagoas da Fazenda Rio das Pedras, Campinas, SP, no período de junho de 2005 a setembro de 2006, com o objetivo de pesquisar a fauna helmintológica das espécies amazônicas introduzidas nestas lagoas. Um total de 38 tucunarés e 16 matrinxãs foram coletados, os quais foram levados para o laboratório de Helmintologia do Departamento de Parasitologia, IB, Unicamp, onde foi feita a biometria, determinados os sexos dos peixes e analisados os órgãos a procura de ecto e endoparasitos. No tucunaré, cestódeos adultos da espécie Proteocephalus microscopicus (Prevalência = 76,3%, Intensidade de infecção = 280,9 vermes/peixe, Abundância média = 214,5) e Bothriocephalus cuspidatus (P= 5,3%, I=2 vermes/peixe, A=0,10) apresentaram-se parasitando o intestino. Nos olhos foram encontrados metacercárias do gênero Diplostomum sp. (P=28,9%, I=4,36 larvas/peixe, A=1,26). Monogênea do gênero Notozothecium (P= 47,4%, I=2,33 vermes/peixe, A=1,10)foi encontrado parasitando as brânquias e o nematódeo adulto Procamallanus (Spirocamallanus) inopinatus no intestino, (P = 5,3%, I= 1 verme/peixe, A=0,05). Um típico padrão de distribuição agregada foi observado em P. microscopicus, além disso observou-se correlação negativa entre intensidade de infecção e comprimento dos peixes, mostrando que peixes menores albergaram maior número deste cestódeo. Ainda para P. microscopicus, a intensidade de infecção e a transparência da água apresentaram correlação positiva. Correlação negativa entre a prevalência da infecção e pH da água foi observado para Notozothecium sp., indicando maior presença de monogêneas em águas mais ácidas. A presença deste gênero de monogênea em Cichla monoculus pode evidenciar especificidade ecológica, pois é um parasita habitual de Serrasalmidae. A espécie Bothriocephalus cuspidatus ainda não foi descrita parasitando Cichla monoculus, sendo a primeira ocorrência deste parasita em tucunaré. No matrinxã foram encontrados nematódeos adultos de Procamallanus (S.) inopinatus no intestino (P= 56,3%, I = 1,44 vermes/peixe, A= 0,81) comumente encontrado nesta espécie e monogêneas não identificadas nas brânquias Abstract: Samples of tucunaré (Cichla monoculus) and matrinxã (Brycon amazonicus) were collected biweekly in two lakes of Rio das Pedras farm, Campinas - SP, from June 2005 to September 2006 with the objective of researching the helminthological fauna of the Amazonian species introduced at these ponds. A total of 38 tucunarés and 16 matrinxãs were collected, taken to the Laboratory of Helminthology, Parasitology Department, Biology Institute, UNICAMP, where we made the biometry and sexed the fish and analyzed the organs, searching for ecto and endoparasites. In the tucunaré, adult cestodes of the species Proteocephalus microscopicus (Prevalence = 76.3%, Intensity of infection = 280.9 worms/fish, Mean Abundance = 214.5) and Bothriocephalus cuspidatus (P= 5.3%, I = 2 worms/fish, MA= 0.10) were found in the intestine. In the eyes we have found larvae of Diplostomum sp. (P= 28.9%, I = 4.36 larvae/fish, MA= 1.26). Monogenean Notozothecium sp. (P= 47.4%, I = 2.33, worms/fish, MA= 1.10) was found parasitizing the gills and the adult nematode Procamallanus (Spirocamallanus) inopinatus (P = 5.3%, I = 1 worms/fish, MA= 0.05) in the intestine. A typical pattern of aggregate distribution were observed in P. microscopicus; the infection intensity and host length were found to be negative correlated, showing that smaller fish housed larger number of P. microscopicus. Between infection intensity and transparency of the water, there was a positive correlation. Negative correlation were found between prevalence of the infection and the water pH for Notozothecium sp, indicating higher presence of monogeneans in more acid water, in Cichla monoculus this parasite can evidences ecological specificity, because this parasite is usual in the Serrasalmidae family. The species Bothriocephalus cuspidatus is not commonly found in the Cichla monoculus, been this one its first appearance. In the matrinxã we have found adult nematodes of the species Procamallanus (Spirocamallanus) inopinatus (P = 56.3%, I = 1.44 worms/fish, MA= 0.81) in the intestine, a commom nematode for this specie and unidentified monogeneans in the gills Mestrado Mestre em Parasitologia

Orientadores: Edson Aparecido Adriano, Marcus Vinicius Domingues Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: Dactilogirídeos (Monogenoidea) provavelmente representam o grupo de helmintos com a maior diversidade e abundância do planeta. A partir disso, reconhecer essa diversidade e compreender as histórias evolutivas que os moldaram e os conduziram a um processo de radiação adaptativa é um desafio atual. Esses parasitas obtiveram seu maior sucesso associado aos peixes de água doce, aos quais, o parasitismo eventualmente podem incidir em doenças e até induzir à morte. Na região Neotropical, habitat da mais rica fauna de peixes de água doce do mundo, os dactilogirídeos não estão uniformemente associados a esses peixes, mas estão melhor representados junto aos hospedeiros caraciformes (54% da diversidade de Dactylogyridae), siluriformes (24%) e perciformes (14%). Os maiores avanços no conhecimento dessa diversidade de dactilogirídeos se deu na década de 1960, mas é ainda caracterizado como incipiente, principalmente em relação à sistemática filogenética. Assim, há indícios de que menos do que 5% da diversidade de dactilogirídeos foi revelada para a região Neotropical, resultado da escasses de estudos para muitos hospedeiros. Nos últimos anos, os dactilogirídeos parasitas de siluriformes da região Neotropical vêm recebendo maior atenção e algumas dezenas de espécies foram descritas na ultima década. Esse sistema parasita-hospedeiro vem sendo considerado um modelo interessante para inferir hipóteses biogeográficas e sobre co-evolução. Porém, um mínimo de conhecimento sobre o relacionamento entre os clados é necessário para avançar nessa temática. O presente estudo traz resultados que permitem avanços na compreensão das relações evolutivas dentro de Dactylogyridae, os quais foram obtidos a partir de estudos de sistemática filogenética de dactilogirídeos parasitas de peixes pimelodídeos das bacias dos rios Amazonas e Paraná, Brasil. As inferências filogenéticas com base em dados moleculares realizadas foram potencializadas pelo desenvolvimento de novos primers e os resultados obtidos são apresentados nesta tese em três capítulos: o primeiro capítulo trata da descrição de uma nova espécie de Pavanelliella parasita de Brachyplatystoma rousseauxii, e o sequenciamento do 18S rDNA parcial e ITS1 corrobora a monofilia do gênero; O segundo capítulo é dedicado à descrição de uma nova espécie de Ameloblastella parasita de Phractocephalus hemioliopterus, e por meio do sequenciamento das regiões D1 ¿ D3 do 28S rDNA, foi sugerida uma hipótese de relacionamento filogenético para dactilogirídeos; o terceiro capítulo foi fortemente baseado no estudo de dactilogirídeos parasitas de P. hemioliopterus da bacia do rio Amazonas, mas também de Hoplias malabaricus e Pimelodus maculatus da bacia do rio Paraná. Neste capítulo foi descrita uma nova espécie de Demidospermus e duas espécies anteriormente consideradas incertae sedis foram transferidas para este gênero. A criação de um novo gênero proposta. Todas as propostas realizadas no terceiro capítulo foram suportadas por meio de inferência filogenética com base no sequenciamento total do 18S rDNA. Os resultados alcançados durante o desenvolvimento desta tese permitiram compreender parcialmente a complexa história evolutiva de dactilogirídeos, a qual pode envolver inúmeros eventos de colonização secundária do ambiente marinho, e reinvasões de ambientes de água doce, além de colonizações independentes de hospedeiros filogeneticamente próximos a partir de hospedeiros filogeneticamente distantes Abstract: Dactylogyrids (Monogenoidea) probably represent the helminth group with largest diversity and abundance on the planet. Therefore, recognizing this diversity and understanding the evolutionary histories that shaped and led them to an adaptive radiation process is a current challenge. These parasites had their greatest success associated with freshwater fish, in which could eventually lead to disease and even induce host death. In the Neotropical region, habitat of the richest freshwater fish fauna in the world, dactylogyrids are not uniformly associated with these fishes, but best represented by the association to characiform hosts (54% of the diversity of Dactylogyridae), siluriform (24%) and perciform (14%). The greatest advances in the knowledge of this diversity of dactylogyrids occurred in the 1960s, but it is still characterized as incipient, mainly in relation to phylogenetic systematics. Thus, there are indications that less than 5% of this dactylogyrid diversity has been revealed for the Neotropical region, and this is result of the paucity of studies for many hosts species. In recent years, the parasitic dactylogyrids of siluriform from the Neotropical region have been receiving more attention and some dozens of species have been described in the last decade. This parasite host system has been considered as an interesting model to infer biogeographic hypotheses and co-evolution. However, to advance in this theme is necessary to have a minimum of knowledge about the relationship among the lineages. The present study provides results that allow advances in the understanding of evolutionary relationships within Dactylogyridae. These data were based on studies of phylogenetic systematics of parasitic dactylogyrids of pimelodid fish from the Amazonas and Paraná rivers basins, Brazil. The molecular phylogenetic inferences were potentiated by the development of new primers and the results obtained are presented in three chapters: the first chapter provides the description of a new species of Pavanelliella found parasitizing Brachyplatystoma rousseauxii, and based on the sequencing of the 18S partial rDNA and ITS1 corroborated the monophyly of the genus; the second chapter provides the description of a new species of Ameloblastella parasitizing Phractocephalus hemioliopterus and based on the sequencing of the D1-D3 regions of 28S rDNA, has been proposed a hypothesis of phylogenetic relationship for dacthylogirids; the third chapter was strongly based on the study of parasitic dactylogirids of P. hemioliopterus from Amazon river basin, but also of Hoplias malabaricus and Pimelodus maculatus from Paraná River basin. In this chapter, was described one species of Demidospermus, two species previously considered incertae sedis were transferred to this genus and the erection of a new genus was proposed. All proposals of the third chapter were supported by phylogenetic inference based on the complete 18S rDNA sequencing. The results obtained during the development of this thesis allowed to understand partially the complex evolutionary history of dactylogyrids, which may involve numerous events of secondary colonization of the marine environment, and reinvasions of freshwater environments, in addition to independent colonizations of phylogenetically close hosts from phylogenetically distant hosts Doutorado Relações Antrópicas, Meio Ambiente e Parasitologia Doutor em Biologia Animal FAPESP 2013/20770-5, 2013/21374-6

Orientador: Marlene Tiduko Ueta Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: Os protozoários do gênero Trypanosoma são flagelados do Filo Euglenozoa e são parasitas de um grande número de hospedeiros. Os tripanossomas, transmitidos por hirudíneos foram reportados em diversas espécies de peixes de água salgada e doce, a maioria descrita com base nas características morfológicas. Novos estudos moleculares envolvendo marcadores diferentes do SSU rRNA estão sendo empregados para resolver a filogenia do grupo, bem como uma descrição de novas espécies. Este trabalho tem como objetivos caracterizar morfologicamente as diferentes formas de Trypanosoma observadas em infecção natural de hirudíneos e peixes do gênero Hypostomus coletados no rio Mogi-Guaçu; caracterizar por técnicas moleculares os exemplares de Trypanosoma spp. encontradas no sangue dos cascudos e hirudíneos; determinar relações filogenéticas entre tripanossomas encontrados nesse estudo, entre espécies de tripanossomas de outras espécies de peixes com base na sequência dos genes SSU V7V8 e gGAPDH; comparar também padrões filogenéticos dos tripanossomas e análisar os grupos obtidos com seus hospedeiros e respectivos vetores e finalmente identificar os hospedeiros invertebrados. Entre agosto de 2012 e setembro de 2014 foram coletados 433 exemplares de cascudos sendo 138 Hypostomus albopunctatus, 160 Hypostomus regani e 135 Hypostomus strigaticeps. O sangue foi coletado e esfregaços foram confeccionados, para a determinação da positividade e densidade. A prevalência geral de tripanossomas foi de 78% e densidade média geral de 0,8 parasitas/ µl de sangue. As análises estatísticas mostraram relação apenas entre a prevalência e o ano de coleta. Relações com peso, comprimento dos peixes e estação do ano não foram significativas. Hirudíneos do gênero Haementeria sp. foram coletados para análises histológicas, morfológicas e moleculares. Foram medidos 60 parasitas tripomastigotas, vinte parasitas para cada espécie de peixe e os valores foram comparados com os de outras espécies de peixes do gênero. Os parasitas encontrados nas três espécies de peixes apresentaram polimorfismo intraespecífico evidente e não foi possível separar em espécies. As análises histológicas dos hirudíneos sugerem a presença de ninho de amastigota. Os resultados moleculares incluíram um grande número de isolados novos na filogenia do gênero Trypanosoma. Os estudos moleculares e morfológicos corroboram a existência de pelo menos uma espécie nova de tripanossoma em cascudos brasileiros, As análises filogenéticas baseadas nos genes SSU rRNA e gGAPDH apoiaram a monofilia dos tripanossomatídeos de peixes Abstract: The flagelates of genus Trypanosoma belong to Phylum Euglenozoa and are parasites of a large number of hosts. Trypanosomes transmitted by leeches have been reported in several species of fish that inhabit salt and fresh waters. The majority of these protozoan species are described based on morphologic features. New molecular studies involving different markers of SSU rRNA are being used to resolve the group phylogeny, as well as the description of new species. This work aims to characterize the morphology and by molecular techniques Trypanosoma spp. parasites found in infected leeches and catfish of the genus Hypostomus from Mogi-Guaçu river, and determine phylogenetic relationships among trypanosomes found in this study and others, based on the sequence of the SSU gene and V7V8, gGAPDH, also compare phylogenetic patterns of trypanosomes and analyze the groups obtained with their hosts and their vectors and finally identify the species of invertebrate hosts. Between august 2012 and september 2014, 433 specimens of armored catfish were collected (138 Hypostomus albopunctatus, 160 Hypostomus regani, and 135 Hypostomus strigaticeps). Blood was collected for blood smears preparation to analysis of positive presence and density of trypanosomes. A prevalence of 78,0% with an average density of 0,8 parasites/µl of blood was found. Statistical analyzes showed a relationship only between prevalence and year of collection. No relation between the presence of the parasite and the weight, fish length or season were found. Leeches genus Haementeria sp. were collected from the body surface of the catfish, for molecular, histological and morphological analysis. A total of 60 trypanosomes were measured, twenty of each species, and the measurements were compared with those of other parasite species found in different species of fish. The parasites found in the three species of fish presented evident polimorfism so it was impossible to separate species. The leeches histological analyzes suggested the presence of amastigotes. The molecular results included a large number of new isolates of the genus Trypanosoma. Molecular and morphological studies support the existence of at least one new species of trypanosome in Brazilian catfishes. Phylogenetic analyzes based on SSU rRNA genes and gGAPDH supported the monophyly of fish trypanosomes Doutorado Relações Antrópicas, Meio Ambiente e Parasitologia Doutora em Biologia Animal CAPES