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Mannans has been attracted the interest in various sectors due to its promising applications. The low toxicity of mannans allows for their use in cosmetics, pharmaceutical, and biomedical industries. In this study, the ��-D-mannan extraction conditions from Aureobasidium pullulans by alkaline extraction were optimized using a Box-Behnken design (BBD). The effect of temperature (��C), pH and extraction time (hours) on the yield of ��-mannan was investigated. The conditions that produced the highest yield (26%) were a temperature of 92 ��C, extraction time of 3 h and pH 13. In addition, the ��-D-mannan structure was confirmed by methylation analysis, 1D and 2D NMR spectroscopic analysis, and GC-MS.

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Orientador: Prof. Doutor Marcello Iacomini Coorientadoras: Prof. Doutora Fhernanda Ribeiro Smiderle e Prof. Doutora Lucimara Mach Cortes Cordeiro Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ciências (Bioquímica). Defesa : Curitiba, 17/02/2020 Inclui referências Resumo: A pesquisa desenvolvida com os cogumelos comestíveis Pholiota nameko (nameko) e Pleurotus eryngii (eryngii) envolveu extração dos polissacarídeos em água, à temperatura ambiente, à temperatura a 100 °C, e em auto-clave (121 °C 1 h 1 atm) e, posteriormente, purificação por técnicas como congelamento e degelo, tratamento por solução de Fehling, diálise por membranas e ultrafiltração. Tanto os extratos quanto os polissacarídeos purificados foram caracterizados quimicamente com técnicas metodológicas como: Cromatografia Gasosa acoplada à Espectrometria de Massa, Ressonância Magnética Nuclear, Cromatografia de exclusão por tamanho de alto desempenho, e as estruturas químicas dos polissacarídeos confirmadas também por análises de metilação. Ao purificar o extrato bruto de Pholiota nameko, uma ?-D-glucana foi obtida por extração em água quente e purificada por tratamento com amilase. As análises de RMN e de metilação da fração purificada (GHW-PN) indicaram a presença de uma ?-D-glucana (1?3), altamente substituída (~ 27%) em O-6 por unidades únicas de ?-D-Glcp ou por fragmentos (1?6)-?-D-Glcp. Esta ?-D-glucana foi submetida à avaliação de sua propriedade reológica sob diferentes concentrações e temperatura, onde foi constatado que este polissacarídeo apresenta comportamento de gel e que é estável frente à variações térmicas de 90°C - 4 °C. A atividade terapêutica in vivo também foi avaliada para a ?-D-glucana, indicando que sua aplicação intraperitoneal em animais da raça Mus musculus (camundongos) teve efeito antinociceptivo. Em outro estudo, o cogumelo eryngii foi submetido a três processos de extração para polissacarídeos utilizando àgua à temperatura ambiente (CW), à temperatura de 100 °C (HW) e autoclave (AE) gerando, respectivamente, três frações denominadas CW, HW e AE, e quando quimicamente caracterizadas apresentaram, respectivamente, manogalactana, ?-DGlucana( 1?6) linear e ?-D-Glucana(1?3),(1?6) ramificada como principais polissacarídeos em cada fração, podendo-se concluir que o processo de extração aplicado influencia o tipo de polissacarídeo extraído. As frações CW, HW e AE foram submetidos a testes in vitro com células da linhagem THP-1, onde foi possível observar o potencial imunoestimulador, visto que não foram tóxicas e estimularam liberação das citocinas IL- 1? e IL-10. Finalmente, ao investigar as estruturas químicas de heteropolímeros presentes em extratos aquosos, obtidos à temperatura ambiente dos cogumelos nameko e eryngii, três heteropolissacarídeos foram purificados. Duas manogalactanas de nameko foram purificadas por ultrafiltração sendo uma retida na membrana de 30 kDa e outra eluída, denominadas respectivamente como R30PN e E30PN. E, uma manogalactana de eryngii foi obtida pelo tratamento com solução de Fehling e denominada FPE. Os heteropolissacarídeos foram quimicamente caracterizados como manogalactanas naturalmente metiladas em O-3, com cadeia principal de ?-Galp-(1?6), ramificada em O-2 por unidades ?-D-Manp. Porém, há diferenças quanto ao grau de ramificação das estruturas químicas, o percentual de grupos O-metil e o peso molecular. Os resultados demonstraram que os métodos de extração utilizados em P. nameko e P. eryngii são processos simples que proporcionam obter estruturas polissacarídicas diferentes quimicamente, como glucanas e heteropolímeros que possuem propriedades reológicas e biológicas imunoestimuladoras e antinociceptiva com potencial aplicação para a indústria de alimentos e de produtos terapêuticos. Palavras-chave: Polissacarídeos. Cogumelos comestíveis. Extração e purificação. Caracterização química. Propriedade Reológica. Propriedades biológicas. Abstract: The research carried out with the edible mushrooms Pholiota nameko (nameko) and Pleurotus eryngii (eryngii) involved extracting the polysaccharides in water, at room temperature, at a temperature of 100 °C, and in an autoclave (121 °C 1h 1 atm) and, subsequently, purification by techniques such as freezing and thawing, treatment by Fehling's solution, membrane dialysis and ultrafiltration. Both the extracts and the purified polysaccharides were chemically characterized with methodological techniques such as Gas Chromatography coupled to Mass Spectrometry, Nuclear Magnetic Resonance, High-performance size exclusion chromatography, and the chemical structures of the polysaccharides also confirmed by methylation analyzes. When purifying the crude extract of Pholiota nameko, a ?-D-glucan was obtained by extraction in hot water and purified by treatment with amylase. NMR and methylation analyzes of the purified fraction (GHW-PN) indicated the presence of a ?-D-glucan (1?3), highly substituted (~ 27%) in O-6 by single units of ?-D-Glcp or by fragments (1?6)-?-D-Glcp. This ?-D-glucan was submitted to the evaluation of its rheological property under different concentrations and temperature, where it was found that this polysaccharide has a gel behavior and is stable in the face of thermal variations of 90 °C - 4 °C. In vivo therapeutic activity was also evaluated for ?-D-glucan, indicating that its intraperitoneal application in animals of the Mus musculus breed (mice) had an antinociceptive effect. In another study, the eryngii mushroom was subjected to three extraction processes for polysaccharides using water at room temperature (CW), at a temperature of 100 °C (HW) and autoclave (AE), generating, respectively, three fractions called CW, HW, and AE, and when chemically characterized they presented, respectively, mannogalactan, linear ?-D-Glucana (1?6) and ?-D-Glucana (1?3), (1?6) as main polysaccharides in each fraction, it is concluded that the applied extraction process influences the type of polysaccharide extracted. The CW, HW, and AE fractions were subjected to in vitro tests with cells of the THP-1 lineage, where it was possible to observe the immunostimulatory potential since they were not toxic and stimulated the release of cytokines IL-1? and IL- 10. Finally, when investigating the chemical structures of heteropolymers present in aqueous extracts, obtained at room temperature from nameko and eryngii mushrooms, three heteropolysaccharides were purified. Two nameko mannogalactans were purified by ultrafiltration, one being retained in the 30 kDa membrane and the other eluted, named respectively R30PN and E30PN. And, an eryngii mannogalactan was obtained by treatment with Fehling's solution and called FPE. The heteropolysaccharides were chemically characterized as mannogalactans naturally methylated in O-3, with ?-Galp- (1?6) main chain, branched in O-2 by ?-D-Manp units. However, there are differences in the degree of branching of chemical structures, the percentage of O-methyl groups, and the molecular weight. The results demonstrated that the extraction methods used in P. nameko and P. eryngii are simple processes that provide chemically different polysaccharide structures, such as glucans and heteropolymers that have immunological and antinociceptive rheological and biological properties with potential application for the food industry and therapeutic products. Keywords: Polysaccharides. Edible mushrooms. Extraction and purification. Chemical characterization. Rheological Property. Biological properties.

Orientadora: Profª. Dra. Cláudia C. H. Krüger Coorientadora: Profª. Dra. Lucimara M. C. Cordeiro Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Alimentação e Nutrição. Defesa : Curitiba, 27/10/2020 Inclui referências: p. 93-102 Resumo: A banana (Musa spp.) é um fruto tropical amplamente produzido e consumido no mundo. É rica em nutrientes, saudável, acessível e culturalmente inserida no hábito alimentar brasileiro. Tem-se observado que o fruto ainda nos estádios iniciais de maturação possui vantagens tanto na utilização culinária quanto dietoterápica, devido ao conteúdo expressivo de amido resistente e fibras, que apresenta. Contudo, ainda são escassos os estudos que demonstram a forma com que o processamento da banana verde impacta em sua composição química e, portanto, em suas aplicações culinárias e dietoterápicas. Sendo assim, o objetivo do presente trabalho foi avaliar a influência do processamento sobre as características físico-químicas, conteúdo de minerais e atividade antioxidante de duas cultivares de banana verde orgânica (Musa AAA, subgrupo Cavendish nanica e Musa ABB, subgrupo Sapientum marmelo). Os frutos foram colhidos em uma propriedade localizada no município de Adrianópolis-PR. Casca e polpa foram separadas e três processamentos realizados: desidratação por liofilização, desidratação em forno (farinha) e biomassa, totalizando 12 amostras de estudo. Inicialmente foi realizada a caracterização física dos frutos in natura e posteriormente as análises físico-químicas, de minerais e de antioxidantes em base seca. Os resultados encontrados sugerem que cascas da banana verde orgânica, independente da cultivar, são partes comestíveis que devem ser utilizadas na alimentação humana como ingrediente culinário, por ser especialmente superior à polpa no teor de fibras insolúveis e minerais. Observou-se também que o tipo de processamento teve influencia importante sobre o teor de amido resistente (até 4 vezes maior nas biomassas de casca e de polpa), já a farinha de banana verde apresentou a melhor quantificação mineral e de fibras. O estudo ainda demonstrou que os minerais em maior concentração na banana verde, em todas as amostras analisadas, foram: potássio, fósforo, magnésio e cálcio. Contudo, no alcance da IDR, o cromo e o manganês apresentaram as maiores contribuições diárias tanto na farinha quanto na biomassa. E na formulação teórica de farinha e de biomassa de banana verde, o cálcio foi o mineral comum às cultivares que teve melhor incremento com a utilização de 25% de casca na composição. Além disso, constatou-se que as cascas liofilizadas apresentaram o maior potencial antioxidante, com redução na farinha e na biomassa. Palavras-chave: Banana verde. Farinha de banana verde. Biomassa de banana verde. Culinária. Consumo de alimentos. Abstract: Banana (Musa spp.) is a tropical fruit produced and consumed worldwide. It is rich in nutrients, healthy, accessible and culturally inserted in the Brazilian eating habit. It has been observed that the fruit in the early stages of maturation has advantages in both culinary and diet therapy uses, due to the expressive content of resistant starch and fibers, which it presents. However, studies that demonstrate a way in which the processing of unripe bananas impact their chemical composition and, therefore, their culinary and dietary applications, are still scarce. Therefore, the objective of the present study was to evaluate the processing on the physical characteristics, minerals content and antioxidant activity of two organic unripe banana cultivars (Musa AAA, subgroup Cavendish nanica and Musa ABB, subgroup Sapientum marmelo). The fruits were harvested on a property located in Adrianópolis- PR. Peel and pulp were separated and three processes were carried out: dehydration by lyophilization, dehydration in oven (flour) and biomass, totaling 12 study samples. Initially, the physical characterization of the fruits in natura was carried out and later the physical-chemical, mineral and antioxidant analyzes on a dry basis. The results found obtained that organic unripe banana peels, regardless of the cultivar, are edible parts that must be used in human food as a culinary ingredient, as it is especially superior to the pulp in the content of insoluble fibers and minerals. It was also observed that the type of processing had an important influence on the resistant starch content (up to 4 times higher in the peel and pulp biomass), whereas the unripe banana flour presented a better mineral and fiber quantification. The study also corrects that the minerals in greater concentration in the unripe banana, in all as analyzed, were: potassium, phosphorus, magnesium and calcium. However, in the scope of the IDR, chromium and manganese aggregate the largest contributions in both flour and biomass. And in the theoretical formulation of green banana flour and biomass, calcium was the mineral common to both cultivars that had the best increase with the use of 25% of peel in the composition. In addition, it was found that lyophilized peels had the greatest antioxidant potential, with a reduction in flour and biomass. Keywords: Green banana. Unripe banana flour. Unripe banana biomass. Cooking. Food consumption.

Orientador : Prof. Dr. Thales Ricardo Cipriani Coorientadora : Profª. Drª. Lucimara M.C.Cordeiro Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ciências : Bioquímica. Defesa: Curitiba, 31/07/2017 Inclui referências ao final de cada capítulo Resumo: As plantas Sedum dendroideum e Casearia sylvestris, conhecidas popularmente como bálsamo e guaçatonga, respectivamente, são amplamente utilizadas pela população para diversas enfermidades, incluindo tratamento de úlceras e alterações relacionadas a processos inflamatórios. No presente trabalho foram avaliadas as atividades imunomoduladora e antiúlcera gástrica de polissacarídeos do infuso das folhas de S. dendroideum e C. sylvestris. O processo de infusão das folhas de S. dendroideum e as etapas de purificação (congelamento e degelo, e diálise em membrana de exclusão de 100 kDa), forneceu dois principais polissacarídeos RSBAL e ESBAL. RSBAL foi submetido a cromatografia de troca aniônica, com eluição sequencial por H2O e NaCl 0,5 M gerando, respectivamente, as frações RSBAL-H2O (25% de rendimento) e RSBAL-0.5 (62% de rendimento). Análises de metilação e RMN-HSQC permitiram caracterizar RSBAL-H2O como sendo uma homogalacturonana altamente metil-esterificada, constituída por unidades de ?-D-GalpA (1?4)-ligadas, e RSBAL-0.5 como sendo uma homogalacturonana altamente metil-esterificada, ramificada em O-3 por cadeias de arabinogalactana do tipo II e arabinana. RSBAL-H2O e RSBAL-0.5 foram capazes de estimular a secreção das citocinas TNF-?, IL1-? e IL-10 por macrófagos THP-1, atuando como agentes imunoestimuladores. Por outro lado, eles reduziram a secreção de TNF-? e IL1-? induzida por LPS, um agente pró-inflamatório, mostrando, portanto, efeito anti-inflamatório. Além disso, foi demonstrado que a fração RSBAL (RSBAL-H2O + RSBAL-0.5) apresenta efeito gastroprotetor, preservando o muco gástrico e os níveis de GSH em modelo de úlcera induzida por etanol em ratos. Com relação à C. sylvestris, a partir da infusão das suas folhas, seguida de processos de purificação (congelamento e degelo, e diálise em membrana de exclusão de 100 e 50 kDa), foram obtidas as frações R100, R50 e E50. Análises de metilação e RMN-HSQC permitiram caracterizar E50 como sendo uma fração constituída por arabinogalactana do tipo II, além de arabinanas com unidades de ?-L-Araf (1?3) e (1?5)-ligadas. O polissacarídeo bruto (R100 + R50 + E50) e a fração E50 foram capazes de promover proteção aguda contra úlcera gástrica induzida por etanol em ratos. Além disso, E50 também inibiu o desenvolvimento de úlcera crônica induzida por ácido acético em ratos. Os resultados obtidos neste trabalho demonstram que os efeitos farmacológicos do infuso das plantas S. dendroideum e C. sylvestris são, podem ser promovidos por polissacarídeos. Palavras-chaves: Casearia sylvestris, Sedum dendroideum, polissacarídeos, atividade gastroprotetora, atividade imunomoduladora Abstract: The plants Sedum dendroideum and Casearia sylvestris, popularly known as balm and guaçatonga, respectively, are widely used by the population to treat various diseases, including ulcers and inflammatory processes. The present study evaluated the immunomodulatory and gastric antiulcer activities of polysaccharides from the infusion of S. dendroideum and C. sylvestris leaves. The infusion process of S. dendroideum leaves, followed by purification steps (freezing and thawing, and dialysis at 100 kDa cut-off membrane) provided two main polysaccharides (RSBAL and ESBAL). RSBAL was subjected to anion exchange chromatography, with sequential elution by H2O and 0.5 M NaCl generating the fractions RSBAL-H2O (25% yield) and RSBAL-0.5 (62% yield). Methylation and HSQC-NMR analyses allowed the characterization of RSBAL-H2O as a highly methyl-esterified homogalacturonan composed of ?-D-GalpA (1?4)-linked units; and RSBAL-0.5 as a highly methyl-esterified homogalacturonan, branched at O-3 by type II arabinogalactan and arabinan chains. RSBAL-H2O and RSBAL-0.5 were able to stimulate the secretion of the cytokines TNF-?, IL1-? and IL-10 by THP-1 macrophages, acting as immunostimulatory agents. On the other hand, they reduced the secretion of TNF-? and IL1-? induced by LPS, a pro-inflammatory agent, thus showing anti-inflammatory effect. In addition, it was demonstrated that the RSBAL fraction (RSBAL-H2O + RSBAL-0.5) has a gastroprotective effect, preserving gastric mucus and GSH levels in ethanol-induced ulcer model in rats. With respect to the C. sylvestris, fractions R100, R50 and E50 were obtained after infusion of its leaves, followed by purification processes (freezing and thawing, and dialysis at 100 and 50 kDa cut-off membranes). Methylation and HSQC-NMR analyses allowed characterizing E50 as a fraction consisting of type II arabinogalactan, as well as arabinans with ?-L-Araf units (1?3) and (1?5)-linked. The crude polysaccharide (R100 + R50 + E50) and E50 fraction were able to promote acute protection against ethanol-induced gastric ulceration in rats. Furthermore, E50 also inhibited the development of chronic ulcer induced by acetic acid in rats. The results obtained in this work demonstrate that the pharmacological effects of the infusion of the plants S. dendroideum and C. sylvestris are, can promoted by polysaccharides. Keywords: Casearia sylvestris, Sedum dendroideum, polysaccharides, gastroprotective activity, immunomodulatory activity

Orientador : Profª. Drª. Lucimara Mach Côrtes Cordeiro Coorientadores : Prof. Dr. Thales Ricardo Cipriani e Prof. Dr. Bruce Hamaker Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ciências : Bioquímica. Defesa: Curitiba, 19/12/2016 Inclui referências ao final de cada capítulo Resumo: Foi previamente postulado que a parede celular primária de membros da família Arecaceae (plantas monocotiledôneas comelinídeas) possuiria pectinas como principal polissacarídeo não celulósico, ao invés da hemicelulose arabinoxilana que é encontrada nas demais famílias comelinídeas. Entretanto, poucos estudos foram desenvolvidos no sentido de confirmar tal hipótese. Além disso, a estrutura e composição de polissacarídeos de plantas é um fator determinante das funcionalidades que estes poderão exercer quando consumidos pelo homem, como por exemplo, com função atividade prebiótica. O presente trabalho apresenta a caracterização estrutural de polissacarídeos extraídos dos frutos do buriti (Mauritia flexuosa), açaí (Euterpe oleracea), tucumã (Astrocaryum aculeatum) e da pupunha (Bactris gasipaes), todos pertencentes à família Arecaceae, com foco nas suas relações filogenéticas, assim como na avaliação do potencial prebiótico in vitro de alguns dos seus polissacarídeos. Os polissacarídeos foram extraídos por extrações aquosa e alcalina a quente sequenciais. Foram fracionados por congelamento/degelo, tratamento com solução de Fehling, ultrafiltração, e tratamentos com ?-amilase e ácido tricloroacético. As moléculas obtidas foram caracterizadas por técnicas químicas, espectrométricas, espectroscópicas (RMN), cromatográficas (GC-MS e HPSEC) e microscopia eletrônica de varredura (SEM). O potencial prebiótico de alguns dos polissacarídeos obtidos foi avaliado por meio do perfil de fermentação dos mesmos (produção de ácidos graxos de cadeia curta e ramificada, gás e alterações de pH) durante fermentação in vitro usando microbiota intestinal humana. Hemiceluloses foram encontradas como principal componente polissacarídico no tucumã (arabinoxilana> arabinana> glucuronoxilana> xiloglucana) e açaí (xilana linear). Este último também apresentou menores porções de polissacarídeos pécticos identificados como arabinogalactana do tipo II e homogalacturonana (DM = 88%). Com relação ao buriti, polissacarídeos pécticos ricos em arabinose foram encontrados em quantidades similares às hemiceluloses. Na pupunha, uma homogalacturonana (DM = 70%) com pequenas porções de xilogalacturonana e ramnogalacturonana do tipo I foram obtidas a partir do extrato aquoso. Entretanto, a caracterização de polissacarídeos da sua fração alcalina não foi realizada. Com relação ao potencial prebiótico dos polissacarídeos obtidos, polímeros com baixa solubilidade como a xilana (extraída do açaí), arabinoxilana e arabinana (extraídas do tucumã) nativos e tratados com microondas foram submetidos à fermentação in vitro. Embora nenhum dos substratos tenha sido fermentado na sua forma nativa, o tratamento com micro-ondas aumentou significativamente a produção de gás e ácidos graxos de cadeia curta, indicando maior fermentabilidade. Em especial, destaca-se a produção de butirato durante a fermentação da xilana tratada com microondas, que atingiu 28% do total de seus ácidos graxos de cadeia curta produzidos em 24 horas de fermentação. Alterações físicas dos polímeros após tratamento com micro-ondas, como teor de solubilidade e estrutura tridimensional foram observadas e podem estar associadas a maior fermentabilidade das frações após tal procedimento. Por fim, pectinas extraídas da pupunha foram submetidos à fermentação in vitro, e levaram a mesma produção de ácidos graxos de cadeia curta totais que o controle positivo (FOS), mas com maior produção de acetato (16.2%) e propionato (6.2%) e menor produção de butirato (112%) em relação a FOS. De maneira geral, os polissacarídeos encontrados na parede celular primária da família Arecaceae, apresentam maior variabilidade entre espécies do que previamente se havia suposto. Além disso, a compreensão de como a fermentação de diferentes estruturas químicas leva à produção de metabólitos distintos pela microbiota intestinal humana durante a fermentação de polissacarídeos solúveis e insolúveis aqui realizada, traz novas perspectivas para o desenvolvimento e aplicação de prebióticos. Palavras-chave: Arecaceae, comelinídeas, polissacarídeos, pectinas, hemiceluloses, atividade prebiótica. Abstract: It has been previously hypothesized that primary cell walls of Arecaceae family members (commelinid group of monocotyledonous plants) possess pectic polymers as main non-cellulosic constituents, instead of the hemicellulose arabinoxylan which is found in other commelinids families. However, few studies have been undertaken to confirm this hypothesis. Additionaly, the chemical structure of polysaccharides affects the functionalities that they may exert when consumed by man, such as prebiotic activity. This work presents the structural characterization of polysaccharides extracted from the fruits of buriti (Mauritia flexuosa), açaí (Euterpe oleracea), tucumã (Astrocaryum aculeatum) and peach palm (Bactris gasipaes), all belonging to the Arecaceae family, focusing on their taxonomic relationships, as well as the assessment of potential prebiotic activities of some of their polysaccharides. Polysaccharides were extracted by sequential hot water and alkali extractions. They were fractionated by freeze/thawing, treatment with Fehling solution, ultrafiltration and treatment with ?-amylase and trichloroacetic acid. The molecules obtained were characterized by chemical, spectrometric, spectroscopic (NMR) and chromatographic (GC-MS, and HPSEC) techniques and by scanning electron microscopy (SEM). The prebiotic potential of some polysaccharides obtained was evaluated by their fermentation profile (production of short- and branched-chain fatty acids, gas and pH changes) during an in vitro fermentation with human intestinal microbiota. Hemicelluloses were found as the main component in tucumã (galactoarabinoxylan> arabinan> glucuronoxylan> xyloglucan) and açaí (linear xylan). The latter also presented smaller portions of pectic polysaccharides identified as a type II arabinogalactan and homogalacturonan (DM = 88%). Regarding buriti fruits, pectic polysaccharides rich in arabinan were found in similar amounts to the hemicellulosic ones previously found by our research group. In peach palm fruits, a homogalacturonan (DM = 70%) with small portions of xylogalacturonan and type I rhamnogalacturonan were found. However, polysaccharides on its alkali extracts were not evaluated. To evaluate the prebiotic potential of some extracted polymers, low solubility polysaccharides such as xylan (extracted from acai), arabinoxylan and arabinan (extracted from tucumã), native and microwaved, were sumbmitted to an in vitro fermentation. Although none of the substrates were fermented on their native forms, the treatment with microwaves significantly increased gas and short chain fatty acids production, indicating higher fermentability than native polymers. In particular, microwave treated xylan lead to higher butyrate production, which reached 28% of its total short chain fatty acid produced in 24 hours of fermentation. Polymers physical changes after microwave treatment such as solubility and tridimensional structure were observed and may be associated with its increased fermentation profile after this proceadure. Finally, pectic polysaccharides extracted from pupunha were also subjected to in vitro fermentation and led to the production of similar amounts of total short chain fatty acids than the positive control (FOS), but with a higher acetate and propionate production (16.2% and 6.2%, respectively) and lower butyrate production (112 %) than FOS. Overall, polysaccharides found in the primary cell walls of Arecaceae family members presented more variations between species than previously hypothesized. Furthermore, understanding how the polysaccharides chemical structures lead to the production of distinct metabolites generated during soluble and insoluble polysaccharides human microbiota fermentation brings new perspectives for the development and application of prebiotics. . Keywords: Arecaceae, commelinid, polysaccharides, pectins, hemicelluloses, prebiotic activity.

Orientadora : Profª Drª Lucimara M.C. Cordeiro Coorientador : Prof. Dr. Marcello Iacomini Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ciências : Bioquímica. Defesa: Curitiba, 30/03/2017 Inclui referências Resumo: Malpighia emarginata é uma planta frutífera tropical, encontrada naturalmente nas ilhas do Caribe e na América do Sul, seu fruto comestível é conhecido como Acerola ou Barbados Cherry. Seus polissacarídeos foram obtidos por extrações aquosas, submetidas ao processo de congelamento e descongelamento e por ultrafiltração. Foram realizadas análises de composição monossacarídica, HPSEC, metilação e obtidos espectros de RMN da fração purificada (ACWS-01E). Os resultados apresentaram uma pectina rica em arabinana, com massa molar de 6.1 x 104 g/mol e constituída principalmente por uma homogalacturonana altamente metil-esterificada (DM= 86%) e arabinanas ramificadas. Estas últimas estão ancoradas em regiões de ramnogalacturonana do tipo I. A cadeia principal das arabinanas são constituídas por unidades de ?-Araf (1?5)-ligadas ramificadas somente em O-3. A potencial atividade antioxidante intracelular da fração ACWS-01E contra o stress oxidativo induzido pelo H2O2 em linhagem celular de fibroblasto murino (3T3) foi determinada através da sonda DCFH-DA. O tratamento com a fração ACWS-01E reduziu significativamente o efeito citotóxico induzido pelo H2O2, assim como os níveis de ROS. Estes resultados sugerem que ACWS-01E protegeu e aumentou a viabilidade das células NIH-3T3 após toxicidade induzida pelo H2O2 através da diminuição dos níveis intracelulares de ROS. Uma nova extração foi realizada para obter quantidade suficiente de amostra para avaliar atividades biológicas in vivo, da fração denominada ACWS. Esta nova fração apresentou 93% de carboidratos totais, massa molar relativa de 7,5 × 104 g/mol, ácido galacturônico, arabinose, galactose, xilose e ramnose numa relação molar de 52,1:32,4:7,2:4,8:3,5 e teve sua estrutura confirmada por análises de RMN. A atividade antifadiga da fração ACWS foi avaliada utilizando o Weight load swim test. ACWS foi administrada via oral em doses de 50 mg/kg, 100 mg/kg e 200 mg/kg durante 28 dias. Foram determinados parâmetros bioquímicos plasmáticos, respiração de fibras musculares esqueléticas permeabilizadas e dosados níveis de GSH e lipoperoxidação (LPO) em diferentes áreas do cérebro (córtex pré-frontal, hipocampo, estriado e hipotálamo). ACWS prolongou o tempo de natação, aumentou os níveis plasmáticos de glucose, triglicérideos, lactato e os níveis de GSH no hipocampo em todas as doses testadas. A capacidade respiratória mitocondrial do músculo esquelético foi aumentada nas doses média e alta de ACWS. Este estudo fornece uma forte evidência de que a suplementação de polissacarídeos pécticos da M. emarginata tem atividade antifadiga, pode modificar a cinética da mobilização de substratos energéticos (carboidratos e gorduras) e a capacidade respiratória do músculo esquelético, bem como o status antioxidante no hipocampo dos animais. Palavras-chave: Malpighia emarginata, pectina, atividade antioxidante intracelular, atividade antifadiga. Abstract: Malpighia emarginata is a tropical fruit plant, found naturally in the Caribbean islands and South America that produces an edible fruit known as acerola or Barbados Cherry. Its polysaccharides were obtained by aqueous extraction, submitted to a freezing and thawing process and ultrafiltration. A homogeneous fraction (ACWS- 01E) was analyzed by sugar composition, HPSEC, methylation and NMR spectroscopy analyses. The results showed an arabinan-rich pectic polysaccharide, with 6.1 x 104 g/mol and formed mainly by a high methyl esterified (DM= 86%) homogalacturonan and branched arabinan. This latter is anchored in type I rhamnogalacturonan regions. The main chain of arabinan consisted of (1?5)-linked ?-Araf, branched only at O-3. The potential ACWS-01E intracellular antioxidant activity against H2O2-induced oxidative stress in murine fibroblast cell line (3T3) was determined by DCFH-DA assay. The treatment with ACWS-01E significantly reduced H2O2-induced cytotoxic effect and the levels of ROS. These findings suggested that ACWS-01E protected and improved NIH 3T3 cell viability from H2O2-induced toxicity by decreasing intracellular levels of ROS. A new extraction was performed to obtain sufficient amount of sample of ACWS fraction to perform biological activities in vivo. This fraction presented 93% of total carbohydrate, relative molecular weight of 7.5 × 104 g/mol, galacturonic acid, arabinose, galactose, xylose and rhamnose in 52.1:32.4:7.2:4.8:3.5 molar ratio and had its structure confirmed by NMR analysis. The anti-fatigue activity of ACWS was evaluated using the weight load swim test on trained mice. ACWS was orally administered at doses of 50mg/kg, 100mg/kg and 200mg/kg for 28 days. Plasma biochemical parameters, respiration of permeabilized skeletal muscle fibers, and GSH levels and lipoperoxidation (LPO) in the brain (prefrontal cortex, hippocampus, striatum and hypothalamus) were determined. ACWS could lengthen the swimming time, increase the plasma levels of glucose, triglycerides, lactate, and the GSH levels in the hippocampus at all tested doses. The mitochondrial respiratory capacity of the skeletal muscle was increased at middle and high ACWS dose. This study provides strong evidence that M. emarginata pectic polysaccharide supplementation have anti-fatigue activity, can modify the kinetics of energy substrates (carbohydrate and fat) mobilization and the respiratory capacity of the skeletal muscle, as well the antioxidant status in the hippocampus of ACWS treated animals. Keywords: Pectin; Malpighia emarginata; intracellular antioxidant activity, antifatigue activity.

Orientador : Profª. Drª. Lucimara M. C. Cordeiro Coorientadores : Prof. Dr. Marcelo Iacomini Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ciências : Bioquímica. Defesa: Curitiba, 21/12/2015 Inclui referências : f. 55-59-76-82-96-103-11-125-147-162 Resumo: A carambola (Averrhoa carambola L.) é originária do continente asiático e tem sidocultivada em muitos países. Popularmente, os frutos são utilizados no tratamento devárias afecções e estudos científicos relatam atividades antioxidante ehipoglicemiante. A graviola (Annona muricata L.) é originária da América Central edo norte da América do Sul. No Brasil é cultivada principalmente nas regiõesnordeste, norte e sudeste. Apresenta diversas propriedades medicinais e estudoscientíficos estão sendo realizados, corroborando com os usos populares. O presentetrabalho apresenta a caraterização estrutural de polissacarídeos extraídos dos frutosde Averrhoa carambola L. e da polpa dos frutos de Annona muricata L. e avaliaçãoda atividade biológica de polissacarídeos purificados. Os polissacarídeos foramextraídos por extrações aquosa e alcalina a quente. Foram fracionados porcongelamento/degelo, tratamento com solução de Fehling, cromatografia de trocaaniônica, ultrafiltração, e tratamentos com ?-amilase, hipoclorito de sódio edimetilsulfóxido. As moléculas obtidas foram caracterizadas por técnicas químicas,espectrométricas, espectroscópicas (RMN) e cromatográficas (GC-MS e HPSEC). Afração SFSCK, proveniente do extrato alcalino da carambola, apresentou-secomposta por uma ramnogalacturonana tipo I com inserções de arabinogalactanatipo I e arabinana. Fucogalactoxiloglucana e heteroxilana foram caracterizadas nafração PFSCK proveniente do extrato alcalino da carambola. A partir do extratoaquoso da carambola foram caracterizadas duas frações contendo arabinogalactanatipo II (frações 50R e 10R) e uma fração (PFSCW) composta por galacturonanasubstituída. A galacturonana substituída reduziu em 99% a dor em modelo deedema de pata induzido por formalina, na dose de 300 mg/kg, a qual tambémreduziu o edema de pata em 53%, sugerindo efeito antinociceptivo decorrente doefeito anti-inflamátorio. Os extratos aquoso e alcalino da polpa da graviolaapresentaram alta concentração de amido. Foram observadas evidências dapresença de arabinogalactana tipo II na fração SGWaH50R e a presença dehomogalacturonana linear na fração PGWaH-PD-SR através dos deslocamentosquímicos observados nos espectros de RMN-13C. A fração PGKa, proveniente doextrato alcalino da graviola, apresentou-se composta por xilose e os deslocamentosquímicos em RMN-13C foram característicos de uma xilana linear ?-(1?4)-ligada. Afração PFSGKa, proveniente do extrato alcalino da graviola, apresentoudeslocamentos químicos no espectro de RMN-13C similares aos de uma xiloglucana.Palavras-chave: Averrhoa carambola L. Annona muricata L. Polissacarídeos.Pectinas. Hemiceluloses. Atividade Antinociceptiva. Atividade Anti-inflamatória. Abstract: Starfuit (Averrhoa carambola L.) is native of Asia and has been cultivated in manycountries. In folk medicine, the fruits are used in the treatment of many diseases andscientific studies report antioxidant and hypoglycemic activities. Soursop (Annonamuricata L.) is native of Central America and northern South America. In Brazil it isgrown mainly in the northeast, north and southeast. It has several medicinalproperties and scientific studies are being conducted, corroborating the popular uses.This work presents the structural characterization of polysaccharides extracted fromthe fruits of Averrhoa carambola L. and from the pulp of Annona muricata L. fruits,and evaluation of the biological activity of purified polysaccharides. Thepolysaccharides were extracted by hot aqueous and alkaline extractions.Polysaccharides were purified by freeze-thawing, Fehling treatment, anion exchangechromatography, ultrafiltration, and ?-amylase, sodium hypochlorite and dimethylsulfoxide treatments. The obtained molecules were characterized by chemical,spectrometric, spectroscopic (NMR) and chromatographic (GC-MS and HPSEC)techniques. Fraction SFSCK, from the alkaline extract of carambola, was composedof a rhamnogalacturonan I to which a branched arabinan and a type Iarabinogalactan are attached. Fucogalactoxyloglucan and heteroxylan werecharacterized in fraction PFSCK from the alkaline extract of carambola. From thestarfruit's aqueous extract two fractions containing type II arabinogalactans (fractions50R and 10R) and a fraction (PFSCW) containing a substituted galacturonan werecharacterized. Substituted galacturonan reduced 99% of the pain in a paw edemamodel induced by intraplantar injection of formalin in the dose of 300 mg/kg, whichalso reduced the paw edema in 53%, suggesting antinociceptive effect due to antiinflammatoryeffect. The aqueous and alkaline extracts of soursop pulp have a highconcentration of starch. It has been observed the presence of type II arabinogalactanin fraction SGWaH50R and the presence of a linear homogalacturonan in fractionPGWaH-PD-SR through the chemical shifts present in the 13C-NMR spectra. Thefraction PGKa, from the alkaline extract of soursop was composed of xylose and itschemical shifts in 13C-NMR were characteristic of a linear xylan ?-(1?4)-linked.Fraction PFSGKa, from the alkaline extract of soursop had chemical shifts in 13CNMRspectrum similar to a xyloglucan.Keywords: Averrhoa carambola L. Annona muricata L. Polysaccharides. Pectins.Hemicelluloses. Antinociceptive activity. Anti-inflammatory activity.

Orientadora : Profª Drª Lucimara M. C. Cordeiro Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ciências : Bioquímica. Defesa: Curitiba, 25/08/2015 Inclui referências : f. 70-82 Resumo: Chamomilla recutita é comumente utilizada na fitoterapia e está incluída nas farmacopeias de quase todos os países. Esta espécie possui importantes propriedades farmacológicas, como por exemplo ação anti-inflamatória e sedativa. Alguns destes efeitos se devem à presença dos metabólitos secundários, mas não é sabido se outras moléculas, tais como polissacarídeos, trabalham em conjunto para estes efeitos. A caracterização estrutural destes polímeros é de suma importância para elucidar a relação entre as estruturas químicas com suas atividades biológicas. Poucos são os estudos realizados sobre a estrutura química e atividade biológica dos polissacarídeos da camomila e nenhum deles abordou a caracterização química fina destas moléculas. Para aprimorar o conhecimento científico da espécie e corroborar a eficácia dos usos populares, o presente estudo objetivou-se na elucidação química fina e avaliação das atividades antinociceptiva e gastroprotetora dos polissacarídeos presentes no infuso dos capítulos florais da camomila. Os capítulos florais secos foram submetidos a infusão (chá), que após concentração e precipitação com etanol (3x vol.) gerou um fracão bruta de polissacarídeos com rendimento de 3,2% (MRW) e uma fração sobrenadante etanólico com rendimento de 20,2% (MRW-ET). A partir da fração bruta foram purificadas e caracterizadas uma frutana do tipo inulina (SCETE-10E), uma homogalacturonana altamente metil esterificada e acetilada (DE = 87%, e DA = 19%) (SMRW-100R), uma 4-O-metil-glucuronoxilana (CTSN-100R) e uma arabinogalactana do tipo II (CCCEDE-EDEAE). A partir do sobrenadante etanólico foi investigado a presença de frutanas de baixa massa molar e realizada a verificação do grau de polimerização (DP) destas moléculas, que consistiu em polímeros de 2 a 11 unidades de ?-D-Frucf-(2?1). As amostras SCETE-10E, SMRW-100R e CTSN-100R foram submetidas a avaliação da atividade antinociceptiva in vivo, sendo que as frações SCETE-10E e SMRW-100R não mostraram diminuição na nocicepção e a fração CTSN-100R mostrou diminuição na nocicepção da fase aguda (Fase I) e inflamatória (Fase II). Devido a sintomas como sonolência e pelos ouriçados, na avaliação antinociceptiva de CTSN-100R, foi realizado o teste de campo aberto para verificar se o polissacarídeo poderia estar afetando os sistema locomotor dos animais. A partir deste teste foi verificada uma diminuição na locomoção dos animais e este resultado indica que a fração CTSN-100R poder ter obtido um falso positivo na avaliação da atividade antinociceptiva, e que a real atividade pode ser a sedativa. A fração MRW foi submetida a avaliação da atividade antiúlcera gástrica in vivo e mostrou diminuição na área das lesões causadas por etanol no estômago dos animais, indicando que a fração bruta de polissacarídeos apresenta atividade antiúlcera gástrica. Palavras chave: Camomila. Matricaria recutita. Polissacarídeos. Atividade antinociceptiva. Atividade antiúlcera gástrica. Abstract: Chamomilla recutita is one of most commonly used species in herbal medicine and is included in the pharmacopoeia of almost all countries. This species has valuable pharmacological properties such as anti-inflammatory and sedative effect. Some of these effects are attributed to the presence of secondary metabolites, but it is not known whether other molecules such as polysaccharides, are working together for this purpose. The structural characterization of these polymers is of paramount importance to elucidate the relationship between chemical structure with their biological activities. There are few studies on the chemical structure and biological activity of camomile polysaccharides and neither fulfilled the fine chemical characterization of these molecules. To improve scientific knowledge of the species and support the effectiveness of popular uses, this study aimed to elucidate the fine chemical structure and evaluate an antinociceptive and gastroprotective activity of the polysaccharides present in the infusion of chamomile flower chapters. The dried flower chapters were subjected to infusion (tea) which after concentration and precipitation with ethanol (3x vol.) generated a crude polysaccharide fraction in a yield of 3.2% (MRW) and a fraction ethanolic supernatant in a yield of 20.2% (MRW-ET). From the crude fraction were purified and characterized a inulin type fructan (SCETE-10E), a highly methyl esterified and acetylated homogalacturonan (DE = 87% and DA = 19%) (SMRW-100R) a 4-O-methyl-glucuronoxylan (CTSN-100R) and a type II arabinogalactan (CCCEDE-EDEAE). From the ethanolic supernatant was noticed the presence of low molar mass fructan and performed the verification of the degree of polymerization (DP) of these molecules, the polymers consisted of 2 to 11 units of ?-DFrucf-( 2 ?1). The SCETE-10E, SMRW-100R and 100R-CTSN samples were subjected to evaluation of in vivo antinociceptive activity, where SCETE-10E and SMRW-100R fractions showed no decrease in nociceptive perception and while CTSN-100R fraction showed decreased of nociception in acute (Phase I) and inflammatory (Phase II) phases. Due to symptoms such as drowsiness and piloerection, in CTSN-100R antinociceptive evaluation, open field test was performed to verify if the polysaccharide could be affecting the locomotor system of animals. From this test it was observed a decrease in locomotion of the animals and this result indicates that CTSN-100R fraction may has produced a false positive result of the antinociceptive activity and the real activity can be sedating. MRW fraction was subjected to evaluation of gastric anti-ulcer activity in vivo and showed a decrease in the area of the lesions caused by ethanol in the stomach of the animals, indicating that the crude fraction of polysaccharides has gastric anti-ulcer activity. Keywords: Chamomile. Matricaria recutita. Polysaccharides. Antinociceptive activity. Gastric antiulcer activity.

Resumo: O tamarillo (Solanum betaceum), conhecido também pelo nome popular de tomate de árvore, é um fruto tropical exótico nativo dos Andes, de alto valor nutricional e utilizado em diversas preparações culinárias. Na medicina popular existem relatos de seu uso principalmente como antinociceptivo e anti-inflamatório. Como não existem na literatura trabalhos que caracterizem a estrutura química dos polissacarídeos presentes no fruto e que os relacionem com propriedades biológicas, este trabalho teve como objetivo elucidar a estrutura química dos polissacarídeos presentes na polpa do fruto maduro do tamarillo, bem como verificar o efeito antinociceptivo de uma galactoarabinoglucuronoxilana purificada. Os frutos, descascados e sem sementes, foram liofilizados e moídos, e após a deslipidificação com clorofórmio-metanol (1:1), a polpa foi submetida à extrações aquosas e alcalinas (KOH 10%) sob refluxo. A partir do extrato aquoso foi isolada e caracterizada (a) uma arabinana linear (1?5) ligada (PTW-Amil), (b) uma fração péctica contendo uma homogalacturonana (HG) altamente metil esterificada (DE = 71%, e DA = 1,3%) (PPF), provavelmente com inserções de ramnogalacturonana tipo I (RG-I) contendo cadeias laterais constituídas principalmente por arabinogalactanas tipo I (AG-I), e (c) uma arabinogalactana do tipo I presente nas frações AG-I 50E e 50R, contendo uma cadeia principal formada por unidades de ?-D-Galp (1?4) ligadas, parcialmente substituídas em O-3 por unidades de ?-L-Araf. Já a partir do extrato alcalino foram purificadas e caracterizadas duas galactoarabinoglucuronoxilanas (STK-1000R e PF), contendo uma cadeia principal constituída por unidades de ?-D-Xylp (1?4) ligadas, exclusivamente ramificadas em O-2. Aquela presente em STK-1000R é menos ramificada que a encontrada na fração PF, com cadeias laterais formadas por unidades de ?-L-Araf (1?5) ligadas, ?-D-GlcpA (1?4) ligadas e terminais não redutores formados por ?-L-Araf, ?-Arap, ?-D-Galp, ?-D-GlcpA e 4-O-Me-?-D-GlcpA. A administração intraperitonial da fração STK-1000R mostrou redução significativa na contorção abdominal induzida por 0,6% de ácido acético e na fase inflamatória da nocicepção induzida por 2,5% de formalina em camunondongos, indicando que o efeito da galactoarabinoglucuronoxilana na dor é através de mecanismos anti-inflamatórios.

Resumo: As ameixas secas são os frutos desidratados de Prunus domestica, que podem ser diretamente consumidos, ou ainda, empregados em diversas preparações culinárias. Além disso, em muitos países, as ameixas secas são popularmente utilizadas no tratamento de distúrbios gastrointestinais. Com relação a sua composição química, carboidratos são os principais macronutrientes presentes em ameixas secas. Entretanto, a estrutura de seus polissacarídeos ainda é pouco conhecida. Este trabalho apresenta a extração, a purificação e a caracterização estrutural e a atividade antiúlcera gástrica de polissacarídeos de ameixas secas. As ameixas secas tiveram seus polissacarídeos extraídos por extração aquosa em temperatura ambiente e a quente, e extração alcalina a quente. Após diversas etapas de purificação dos polissacarídeos provenientes do extrato aquoso da ameixa, foram originadas as frações AGI-50R e AGI-50E, que apresentaram-se homogêneas quando analisados por HPSEC-MALLS, com Mw de 62 kDa e 17 kDa, respectivamente. A composição monossacarídica de AGI-50R e AGI-50E indicou a presença de Ara, Gal, Rha e GalA numa proporção molar de 47,8:31,5:10,7:10,0 e 39,6:50,3:5,1:5,0, respectivamente. Análise de metilação e espectroscopia de RMN-13C indicaram que ambos os polissacarídeos eram arabinogalactanas do tipo I (AG-I), formadas por cadeias principais compostas por unidades de ?-D-Galp (1?4) ligadas, substituídas em O-3, O-2 e O-6 por terminais não-redutores de ?-L-Araf ou cadeias laterais de ?-L-Araf (1?3), (1?5), (1?3,5) e (1?2,5) ligadas. Estas AG-I, por sua vez, estão inseridas na posição O-4 de algumas unidades de ramnose, de uma ramnogalacturonana do tipo I (RG-I), formada pela repetição da unidade dissacarídica [?4)-?-D-GalpA-(1?2)-?-L-Rhap-(1?]. Além da massa molecular, AGI-50E e AGI-50R diferiram quanto às proporções de RG-I e AG-I, no tamanho da cadeia de ?-Galp (1?4) ligada, e na proporção das cadeias laterais de arabinanas. Com relação ao extrato alcalino, após diversas etapas de purificação, foi obtida a fração PF-SPK-100R, que contém Fuc, Ara, Xyl, Gal e Glc em uma razão molar de 3,5:12,7:34,0:11,2:38,6. Análises de metilação e espectroscopia de RMN-13C indicaram que a fração contém uma xiloglucana composta por uma cadeia principal de Glcp (1?4) ligada, com substituições em O-6 por unidades de xilose. Unidades de Xylp terminais, (1?2), (1?4) e (1?2,4) ligadas foram encontradas, sendo estas duas últimas raramente encontradas em xiloglucanas. Outros açúcares pouco comuns também foram identificados na fração. Estes poderiam estar diretamente ligados à xiloglucana, ou ainda, ser oriundos de outros polissacarídeos que poderiam estar presentes em menor concentração. Por este motivo, um estudo detalhado dos oligossacarídeos produzidos por hidrólise enzimática específica, deverá ser conduzido futuramente para completa elucidação estrutural desta xiloglucana. Além da caracterização estrutural dos polissacarídeos presentes na ameixa seca, a atividade gastroprotetora dos mesmos foi avaliada. Para isto, utilizou-se o extrato aquoso bruto, que foi capaz de inibir a formação de lesão gástrica induzida por etanol em ratos, em 67 ± 11% e 60 ± 12% nas doses de 3 e 10 mg/kg, respectivamente. Portanto, este resultado mostra que polissacarídeos presentes em ameixas secas apresentam atividade protetora antiúlcera gástrica.

Resumo

Background: Castleman´s disease is an extremely rare heterogenous lymphoproliferative pathology with a mostly benign behavior. It is a localized or generalized lymph node enlargement of an unknown aetiology. Unicentric form is typically a slow-growing solitary mass occurring mostly in the mediastinum, abdominal cavity, retroperitoneum, pelvis and neck. Aetiology and pathogenesis of CD is probably diverse, varying in different types of this heterogeneous disease., Materials and Methods: Authors present a review of this issue based on their extensive experience. The aim is to summarize the crucial factors in the management of diagnostics and a surgical treatment of the unicentric form of Castleman´s disease. One of the key issues in the unicentric form is precise preoperative diagnostics and thus choosing the right surgical treatment strategy. Authors highlight pitfalls of the diagnosis and surgical treatment., Results: All histological types such as a hyaline vascular type, plasmacytic type and a mixed type are presented as well as options of surgical and conservative treatment. Differential diagnosis and malignant potential is discussed., Conclusion: Patients with Castleman´s disease should be treated in the high- volume centers, with a great experience in major surgical procedures as well as with preoperative imaging diagnostic techniques. Specialized pathologists and oncologists focusing on this issue are also absolutely necessary to avoid misdiagnosis. Only this complex approach can lead to excellent outcomes in patients with UCD., Competing Interests: The authors declare that the research was conducted in the absence of any commercial or financial relationships that could be construed as a potential conflict of interest., (Copyright © 2023 Molacek, Treska, Skalicky, Vodicka, Ferda, Ferdova, Baxa, Mach, Jungova and Michal.)