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The present study aims to report the experience of students and lecturers on the Work-based Learning Program in the health services network in a municipality in the South of Brazil in 2012, focussing on actions of training of the Unified Health System (SUS) workers. The program was participated in by students from the physiotherapy and nursing courses, who undertook actions so as to meet the needs of the services from the areas of Mental Health, Primary Care and General Hospital. The results converge on the need for training of the professionals of the network and for encouraging Continuous Education in Health Policy. It is concluded that the Program has importance for the teaching, service, management and community, bearing in mind the global perception of the benefits and results created in the care network in the municipality. O presente estudo objetiva relatar a experiência de discentes e docentes no Programa de Educação pelo Trabalho na rede de serviços de saúde de um município do Sul do Brasil no ano de 2012, enfocando ações de formação dos trabalhadores do Sistema Único de Saúde. O Programa contou com a participação de alunos dos cursos de fisioterapia e da enfermagem que desenvolveram ações no sentido de atender as necessidades dos serviços da área de Saúde Mental, Atenção Básica e do Hospital Geral. Os resultados convergem para a necessidade de formação dos profissionais da rede e ao fomento à Política de Educação Permanente em Saúde. Conclui-se sobre a importância do Programa para o ensino, serviço, gestão e comunidade, tendo em vista a percepção global dos benefícios e resultados gerados na rede de atenção no município.

Erythrina species are used in popular medicine as sedative, anxiolytic, anti-inflammatory, and antihypertensive. In this work, we investigated the chemical composition of extracts obtained from leaves of E. falcata and E. crista-galli. The hypotensive potential of E. falcata and the mechanism of action were also studied. The extracts were obtained by maceration and infusion. The total content of phenolic compounds and flavonoids was estimated by spectrophotometric methods. The chemical constituents were studied performing a chromatographic analysis by UPLC-ESI-MS. For in vivo protocols, blood pressure and heart rate were measured by the invasive hemodynamic monitoring method. Different concentrations of extracts and drugs such as L-NAME, losartan, hexamethonium, and propranolol were administrated i.v.The results of total phenolic contents for E. falcata and E. cristagalli were 1.3193–1.4989mgGAE/mL for maceration and 0.8771–0.9506mgGAE/mL for infusion. In total flavonoids, the content was 7.7829–8.1976mg RE/g for maceration and 9.3471–10.4765 REmg/g for infusion. The chemical composition was based on alkaloids, suggesting the presence of erythristemine, 11-methoxyglucoerysodine, erysothiopine, 11-hydroxyerysodine-glucose, and 11-hydroxyerysotinone-rhamnoside. A potent dose-dependent hypotensive effect was observed for E. falcata, which may be related to the route of -adrenergic receptors.

Thyroid cancer is the most common endocrine neoplasia, and its incidence has been increasing in recent years. A better understanding of the molecular events involved in the progression of thyroid cancer may aid in the identification of patients with low and high-risk carcinomas. Among the mediators capable of modulating immune processes, such as cell differentiation, we highlight ATP, ADP, AMP, and adenosine, whose extracellular concentrations are controlled by the activity of the ectonucleoside triphosphate 5'-diphosphohydrolase (E- NTPDase), E-5'-nucleotidase (E-5’-NT) ectoenzymes and adenosine deaminase (ADA), and which act on specific receptors, forming the purinergic system. It is well known the relationship between reactive oxygen species (ROS) and cancer, in which ROS can contribute to the neoplastic transformation of cells. ROS are normally produced by metabolic oxidative processes and the molecules often damaged by them are lipids, proteins, and DNA. Antioxidant defense systems work cooperatively to relieve oxidative stress caused by increased production of ROS. Any change in one of these systems can break that balance and cause cell damage and, ultimately, malignant transformation. In addition, butyrylcholinesterase (BChE) appears to play important non-cholinergic roles as it is capable of intervening in cellular processes such as proliferation, differentiation, and apoptosis, suggesting a possible influence on tumorigenesis. The objective of this work is a better understanding of the molecular processes that occur during the progression of thyroid cancer, in order to identify possible new therapeutic targets. Therefore, we investigated the purinergic signaling profile in patients with thyroid cancer through platelet determination of E-NTPDase and E-5’-NT enzyme activities, as well as platelet and serum determination of ADA activity, by spectrophotometry. We also investigated the oxidative profile, through the determination of ROS levels and the biological damage caused by reactive species in lipids and proteins by the determination of lipid peroxidation and carbonylation levels of proteins. In addition, we verified the antioxidant profile of thyroid cancer patients by determining the levels of total thiols (T-SHs) and reduced glutathione (GSH). The serum activity of BChE was also performed. We observed a significant reduction in E-NTPDase activity, both in ATP and ADP hydrolysis. These results suggest an increase in ATP concentration as a consequence of a self-protection mechanism, and ADP, favoring thromboembolic changes. However, a significant increase in E-5’-NT activity has been observed, which, together with the reduction of ADA activity in both platelets and serum, leads to an increase in the extracellular concentration of adenosine, which may be involved in the tumor progression. Analyzing the oxidative profile, we observed a significant increase in the levels of ROS, which, together with the absence of a concomitant increase in antioxidant defenses represented by T-SHs and GSH levels, generate a pro-oxidant environment that justifies the elevated levels of thiobarbituric acid reactives substances (TBARS). The significant increase in BChE activity may be related to the stage of tumor progression, since patients in the study had pronounced nodules indicating a more advanced stage of cancer. The results demonstrated that, during the progression of thyroid cancer, alterations occur both in the activity of the enzymes of the purinergic and cholinergic systems as well as in the oxidative profile of these patients. Therefore, such parameters may represent future targets for the therapy and monitoring of the evolution of this neoplasm. O câncer de tireoide é a neoplasia endócrina mais comum, cuja incidência vem aumentando nos últimos anos. A melhor compreensão dos eventos moleculares envolvidos na progressão do câncer de tireoide pode auxiliar na identificação de pacientes com carcinomas de baixo e alto risco. Dentre os mediadores capazes de modular processos imunes, tais como a diferenciação celular, destacam-se o ATP, o ADP, o AMP e a adenosina, cujas concentrações extracelulares são controladas pela atividade das ectoenzimas ectonucleosídeo trifosfato 5'- difosfoidrolase (E-NTPDase), E-5’-nucleotidase (E-5’-NT) e adenosina desaminase (ADA), e que agem em receptores específicos, formando o sistema purinérgico. É bem conhecida a relação entre as espécies reativas de oxigênio (EROs) e câncer, na qual as EROs podem contribuir para a transformação neoplásica de células. As EROs são normalmente produzidas por processos oxidativos metabólicos e as moléculas frequentemente danificadas por elas são lipídios, proteínas e o DNA. Os sistemas de defesa antioxidante trabalham cooperativamente para aliviar o estresse oxidativo causado pela produção aumentada das EROs. Qualquer alteração em um desses sistemas pode quebrar esse equilíbrio e causar dano celular e, em última instância, transformação maligna. Além disso, a butirilcolinesterase (BChE) parece desempenhar funções não-colinérgicas importantes, pois é capaz de intervir em processos celulares como a proliferação, diferenciação e apoptose, o que sugere uma possível influência na tumorigênese. O objetivo desse trabalho é a melhor compreensão dos processos moleculares que ocorrem durante a progressão do câncer de tireoide, visando a identificação de possíveis novos alvos terapêuticos. Para tanto, investigamos o perfil de sinalização purinérgica em pacientes com câncer de tireoide através da determinação, em plaquetas, da atividade das enzimas E-NTPDase e E-5’-NT, além da determinação em plaquetas e no soro da atividade da E-ADA, por espectrofotometria, além do perfil oxidativo, através da dosagem dos níveis de EROs e da avaliação da intensidade do dano biológico causado por eles em lipídios e proteínas, através da determinação da peroxidação lipídica e dos níveis de carbonilação de proteínas. Adicionalmente, verificamos o perfil antioxidante dos pacientes com câncer de tireoide, através da determinação dos níveis de tióis totais (T-SHs) e glutationa reduzida (GSH). A atividade sérica da BChE também foi determinada. Observamos uma significativa redução da atividade da E-NTPDase, tanto na hidrólise do ATP quanto na do ADP. Esses resultados sugerem um aumento da concentração de ATP como consequência de um mecanismo de autoproteção, e ADP, favorecendo alterações tromboembólicas. Contudo, foi observado um significativo aumento da atividade da E-5’-NT, que associada à redução da atividade da ADA, tanto nas plaquetas quanto no soro, conduzem ao aumento da concentração extracelular de adenosina, a qual pode estar envolvida no processo de progressão tumoral. Quanto ao perfil oxidativo, observamos um significativo aumento dos níveis de EROs, que associado a ausência de um aumento concomitante das defesas antioxidantes representadas pelo níveis de T-SHs e GSH, geram um ambiente pró-oxidante que justifica o aumento dos níveis de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) observados. O aumento significativo da atividade da BChE pode estar relacionado ao estágio de progressão tumoral, visto que os pacientes do estudo apresentavam nódulos pronunciados indicando um estágio mais avançado do câncer. Os resultados descritos demonstram que, durante a progressão do câncer de tireoide, ocorrem alterações tanto na atividade das enzimas do sistema purinérgico e colinérgico quanto no perfil oxidativo desses pacientes. Portanto, tais parâmetros podem representar futuros alvos para a terapia e monitoramento da evolução dessa neoplasia.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Chagas disease is a zoonosis caused by Trypanosoma cruzi. It occurs primarily in Latin America, where it causes serious health problems for about 7 million people in endemic regions. Considering that Chagas disease currently few effective treatments, and those that exist carry several side effects, new alternatives for treatment should be evaluated. Therefore, the objective of this study was to evaluate the efficacy of cordycepin (an adenosine analogue) and pentostatin (an inhibitor of the enzyme adenosine deaminase) in mice experimentally-infected with T. cruzi, and also to verify if the purinergic system is affected and has a role in the pathogenesis of Chagas disease. We did this because nucleosides and nucleotides in the purinergic cascade are involved in the pathophysiology of various parasitic infections. The study design was divided into four experimental protocols. In the experimental protocol I, the animals were divided into two groups (n = 6): control group (not infected with T. cruzi), and infected group (infected with T. cruzi). We then investigated the effect of purinergic enzymes on platelets, lymphocytes, and hearts in experimentally-infected mice infected with T. cruzi (strain Y). We observed increased activity of E-NTPDase (ATP and ADP substrates) and E-ADA in lymphocytes of T. cruzi-infected mice (P

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES With the rise of new concepts such as functional foods, nutraceuticals and phytomedicines, allied to the use of traditional medicine, products of plant origin are in evidence. Brazil is a highlight in the development of new medicines from these products since it presents the greatest vegetal biodiversity in the world and occupies the third place in fruit production. Within this context, there is the Tucumã (Astrocaryum aculeatum), an Amazonian fruit widely used in the north of the country. Knowing the wide use and popular use as a treatment for several diseases, the objective of this work was to evaluate the antioxidant and anti- inflammatory effects of the Tucumã extract in different doses. For this, cultures of cells (RAW 264.7), activated with phytohemagglutinin (PHA) and treated with extract of A. aculeatum at doses of 1, 10, 30, 50, 100, 300 μg/ml were used. The results demonstrated an in vitro anti- inflammatory activity by decreasing the viability and proliferation of PHA-induced macrophages (P

As doencas cardiovasculares sao a principal causa de morte no Brasil e estao fortemente associadas a disturbios metabolicos como a sindrome metabolica. A sindrome metabolica e caracterizada pela cocorrencia de fatores de risco cardiovasculares como hipertensao, hiperinsulinemia, a glicose, obesidade central e dislipidemia. Campomanesia xanthocarpa, conhecida no Brasil como Guabiroba, tem sido utilizada empiricamente devido ao seu potencial efeito na reducao dos niveis de colesterol sanguineos, e para varias condicoes, incluindo doencas inflamatorias, renais, digestivas, dislipidemias e outras. O objetivo deste estudo foi analisar a composicao quimica e investigar os efeitos do extrato aquoso de C. xanthocarpa na pressao arterial de ratos normotensos agudamente, bem como seu possivel mecanismo de acao, in vivo e in silico. Alem disso, tambem se avaliou os efeitos do extrato aquoso de C. xanthocarpa sobre a atividade da ATPase miosinica e expressao genica de marcadores cardiacos em ratos com sindrome metabolica induzida por uma dieta rica em frutose. O extrato foi analisado quanto aos compostos fenolicos totais e ao teor total de flavonoides. Os componentes quimicos foram determinados por analise de HPLC. Para a avaliacao aguda, a pressao arterial sistolica e diastolica e a frequencia cardiaca foram medidas na presenca de extrato e com administracao de farmacos. Para avaliacao dos animais com sindrome metabolica, os animais foram tratados durante 30 dias com extrato aquoso das folhas preparado por infusao. A extracao de miosina cardiaca foi realizada com centrifugacao de alta forca ionica, a medida da atividade da ATPase miosinica foi quantificada pelo fosfato inorganico liberado atraves de metodo colorimetrico e expresso em nmolPi/min/mg de proteina. A expressao genica de α-MHC, β-MHC, fator natriuretico atrial e α-actina esqueletica foi avaliada por PCR em tempo real. As folhas de C. xanthocarpa apresentaram conteudo relevante de fenois e flavonoides, e sugerimos a presenca de acido clorogenico, acido galico, quercetina e teobromina. A administracao aguda de extrato aquoso de C. xanthocarpa tem um efeito hipotensor dose-dependente em ratos normotensos, sugerindo que o mecanismo de acao pode ser mediado pelo sistema renina-angiotensina atraves do bloqueio do receptor AT1 (AT1R) e resposta simpatica autonomica. Estudos “docking” mostraram modelos que indicaram uma interacao entre acido clorogenico e quercetina com o sitio de ligacao do AT1R. Os achados desses estudos de acoplamento sugerem o potencial dos constituintes de C. xanthocarpa para uso como agentes preventivos para a pressao sanguinea. No tratamento de ratos com sindrome metabolica o extrato aumentou a atividade de ATPase miosinica e impediu a reexpressao da isoforma fetal da MHC, auxiliando na prevencao do dano cardiaco. Cardiovascular diseases are the leading cause of death in Brazil and are strongly associated with metabolic disorders such as the metabolic syndrome. Metabolic syndrome is characterized by the co-occurrence of cardiovascular risk factors such as hypertension, hyperinsulinemia, glucose intolerance, central obesity and dyslipidemia. Campomanesia xanthocarpa, known in Brazil as Guabiroba, has been used empirically because of its potential effects on reduce blood cholesterol levels, and for various conditions including inflammatory, renal, digestive, dyslipidemia, and other diseases. The objective of this study was to analyze the chemical composition and to investigate the effects of the aqueous extract of C. xanthocarpa on blood pressure of normotensive rats acutely, as well as its possible mechanism of action, using in vivo and in silico procedures. In addition, the effects of C. xanthocarpa aqueous extract on myosin ATPase activity and gene expression of cardiac markers in rats with metabolic syndrome induced by a high fructose diet were also evaluated. The extract was evaluated for total phenolic compounds and total flavonoid content. The chemical components were determined by HPLC analysis. For acute evaluation, systolic and diastolic blood pressure and heart rate were measured in the presence of extract and with drug administration. For the evaluation of animals with metabolic syndrome, the animals were treated for 30 days with aqueous extract of the leaves prepared by infusion. Cardiac myosin extraction was performed with high ionic strength centrifugation, the myosin ATPase activity measurement was quantified by the ionorganic phosphate released through a colorimetric method and expressed in nmolPi/min/mg of protein. Gene expression of α-MHC, β-MHC, atrial natriuretic factor and skeletal α-actin was evaluated by real-time PCR. C. xanthocarpa leaves presented a relevant content of phenols and flavonoids, and we suggest the presence of chlorogenic acid, gallic acid, quercetin and theobromine. Acute administration of C. xanthocarpa aqueous extract has a dose-dependent hypotensive effect in normotensive rats, suggesting that the mechanism of action may be mediated by the renin-angiotensin system through AT1 receptor blockade (AT1R) and autonomic sympathetic response. Docking studies showed models that indicated an interaction between chlorogenic acid and quercetin with the active site of the AT1R. The findings of these coupling studies suggest the potential of the C. xanthocarpa constituents for use as preventive agents for blood pressure. In the treatment of rats with metabolic syndrome the extract increased the myosin ATPase activity and prevented reexpression of fetal MHC isoform, helping to prevent cardiac damage.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Sickle cell anemia (SCA) is a hemoglobinopathy characterized by hemolysis and vaso-occlusions caused by rigidly distorted red blood cells, genetically determined by homozigous hemoglobin S (HbSS). The SCA is associated with inflammatory conditions that may result from pro-adhesive and procoagulant phenotype and lead to the majority of deaths related to vascular occlusions. Extracellular nucleotides such as ATP, ADP, AMP and the adenosine nucleoside are important signaling molecules that are necessary for the maintenance and modulation of inflammatory reactions in the platelets and lymphocytes. They also act effectively in the regulation of vascular response from endothelial damage exerting effects on platelets. The extracellular levels of these nucleotides are physiologically controlled by the action of an enzyme complex formed by E-NTPDase, E-5'nucleotidase and E-ADA. These enzymes are located on the surface of platelets and lymphocytes with the aim of maintaining the normal hemostasis and preventing excessive platelet aggregation, as well as modulating inflammatory response. Thus, the function of this study was to evaluate the inflammatory profile, activity and expression of these ecto-enzymes in lymphocytes and platelets of patients with SCA. The results revealed a decrease in the TNF-α and IL-6 serum levels in SCA patients when compared to normal subject (control). Moreover, there were significant (P

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico The food products deterioration by pathogenic microorganisms is a major problem especially in meat industries. Escherichia coli is a facultative anaerobic bacteria of intestinal origin, and is a cause of concern in the meat industry. The use of essential oils as inhibitors of growth of spoilage and pathogenic microorganisms is a good natural choice contributing for the reduction of food deterioration. This study aimed to evaluate twenty (20) in vitro activities of E. coli strains retrieved from the collection of bacteria of Laboratório de Pesquisas Micológicas of the Universidade Federal de Santa Maria (UFSM). The microdilution methodology was applied following the M31-A3 technique protocols. Thymol and the essential oil of thyme (Thymus vulgaris), cinnamaldehyde and the essential oil of cinnamon (Cinnamomum zeylanicum), carvacrol and the essential oil of oregano (Origanum vulgare) were the main oils used along with their components. In these tests, the essential oils presented better results than its constituents. Besides, in vitro tests had been carried out with the same isolate in order to evaluate the antimicrobial activity of the thyme, cinnamon and oregano essential oils. The geometric means of the MIC (minimum inhibitory concentration) and MBC (minimal bactericidal concentration) for the essential oils of oregano, cinnamon and thyme did not show relevant differences (p > 0.05). Afterwards, the activities of these oils were evaluated against the growth of coliforms in the Toscana sausage mass. The samples (Toscana sausage mass added with the essential oils) to the concentrations of 8000 μg.ml-1 , 3200 μg.ml-1 , 400 μg.ml-1 , 200 μg.ml-1 , with the addition of the strain (Escherichia coli) 103 U C T 5 C 5 20 e 30 days using the 3M technique Petrifilm dish for counting the E.coli and coliforms (AOAC 991.14). During the 30 days storage of the Toscana sausage mass, there was a reduction in the counting of total coliforms and the thermotolerant coliforms with addition of essential oils in different concentration levels. The sensory analysis of the Toscana sausage added with the essential oils of cinnamon and oregano in the concentration of 200 μg.ml-1 and 400 μg.ml-1 were considered as acceptable by the consumers. A deterioração de produtos alimentares, especialmente aqueles derivados de carne, por microrganismos patogênicos é um grande problema na indústria. Escherichia coli é uma bactéria anaeróbia facultativa de origem intestinal, e é um motivo de preocupação no setor de carnes. Neste contexto, os óleos essenciais com suas propriedades antimicrobianas, seriam uma forma natural de contribuírem com a redução da deterioração. Neste estudo avaliou-se a atividade antimicrobiana de óleos essenciais e seus componentes, in vitro, frente a 20 espécies de Escherichia coli de origem entérica, pertencente a coleção de bactérias do Laboratório de Pesquisas Micológicas da UFSM, usando a técnica de microdiluição de acordo com o protocolo M31-A3. O óleo essencial de tomilho (Thymus vulgaris), e timol, óleo essencial de canela (Cinnamomum zeylanicum), e cinamaldeído e óleo essencial de orégano (Origanum vulgare) e carvacrol, foram os óleos essenciais e seus componentes majoritários utilizados. Nestes testes, os óleos essenciais apresentaram melhores resultados em relação aos seus respectivos compostos. As médias geométricas de CIMs (concentrações inibitórias mínimas) e CBMs (concentrações bactericidas mínimas) para os óleos essenciais de orégano, canela e tomilho não evidenciaram diferença significativa (p > 0,05). Ainda avaliou-se a atividade antimicrobiana dos mesmos, nas concentrações de 8000 μg.ml-1, 3200 μg.ml-1 , 400 μg.ml-1 , 200 μg.ml-1 adicionados em massa de linguiça Toscana , inoculada com Escherichia coli ATCC 25922 (10³ UFC. ml-1 ). Aa análises foram realizadas no período de 0, 10, 15, 20 e 30 dias, usando a técnica 3M Petrifilm placa para contagem de E.coli e coliformes (AOAC 991.14). Nos 30 dias de armazenamento da massa de linguiça Toscana, houve uma redução na contagem de coliformes totais e coliformes termotolerantes com adição dos óleos essenciais em diferentes concentrações. Os óleos essenciais de canela e tomilho foram eficientes no controle de coliformes a partir da concentração de 1600 μg.ml-1, enquanto que o óleo essencial de orégano foi eficiente desde a concentração de 200 μg.ml-1 A análise sensorial demonstrou que a linguiça Toscana adicionada do óleo essencial de canela e óleo essencial de orégano nas concentrações de 200 μg.ml-1 e 400 μg.ml-1, foi considerada aceitável pelos consumidores.

O gênero Erythrina está presente mundialmente nas regiões tropicais e subtropicais. Estudos fitoquímicos utilizando vários órgãos dessas plantas, demostraram a presença de alcaloides, flavonoides, pterocarpanos e triterpenóides. Várias espécies são encontradas no Brasil, dentre elas Erythrina falcata e Erythrina crista-galli, conhecidas popularmente como “corticeira” e utilizadas medicinalmente devido à ação sedativa, ansiolítica, anti-inflamatória e antihipertensiva. Este trabalho objetivou estudar a composição química de extratos vegetais obtidos de folhas de E. falcata e E. crista-galli e ainda, avaliar o potencial hipotensor in vivo de extratos de E. falcata. Inicialmente, após coleta do material, as folhas foram selecionadas, submetidas à secagem e trituradas. Então, foram submetidas à extração por maceração exaustiva utilizando etanol 40% (v/v) e por infusão utilizando água a 100 °C. Para a caracterização em termos de fenólicos totais e conteúdo de flavonoides, os extratos foram quantificados por espectrofotometria. Para o ensaio cromatográfico, os extratos foram analisados por CLAE em sistema de fase reversa, com fase móvel consistindo de acetonitrila:água em eluição por gradiente e fluxo de 1,0 mL/min. Para a análise por CLUEESI- MS, a fase móvel foi composta de mistura de acetonitrila:metanol (4:1) e ácido fórmico pH 3,0, com eluição por gradiente e fluxo de 0,2 mL/min. A detecção por espectrometria de massas foi conduzida a partir das seguintes condições: N2 como nebulizante; energia de colição 4.0 eV; temperatura da fonte do eletrospray e do gás de solvatação 100°C e 120°C, respectivamente; voltagem do capilar 3000V; voltagem do cone 40V. Os espectros de massas foram obtidos na faixa de m/z 200-800. A avaliação dos efeitos hemodinâmicos foi realizadaem ratos wistar normotensos, anestesiados com uretana (1,4 mg/Kg), via canulação da artéria carótida (para a verificação da PAS, PAD e FC) e veia jugular (para administração do extratose drogas). A avaliação do potencial hipotensor da E. falcata foi investigada através da realização de uma curva crescente de administração dos extratos e os possíveis mecanismos de ação envolvidos foram analisados através da administração de diferentes drogas sendo elas: L-NAME (30 mg/kg); losartana (10 mg/Kg); hexametônio (20mg/Kg) e propranolol (5mg/kg). Os teores de fenólicos totais para E. falcata e E. crista-galli estiveram na faixa de 1,3193 – 1,4989 mgEAG/mL para os extratos obtidos por maceração e de 0,8771 – 0,9506 mgEAG/mL para as infusões. Em flavonoides totais, os conteúdos estiveram na faixa de 7,7829 – 8,1976 ER mg/g para os extratos obtidos por maceração e 9,3471 – 10,4765 ER mg/g para as infusões. Na determinação por CLUE-MS, os dados de íon molecular e fragmentos de massa indicaram a composição predominante em alcaloides, sugerindo-se os componentes erythristemine, 11β-methoxyglucoerysodine, erysothiopine, 11β- hydroxyerysodine–glicose e 11-hydroxyerysotinone-ramnosídeo. O extrato aquoso da E. falcata mostrou-se um potente hipotensor dose-dependente, causando uma queda na PAS de 23 a 35% e na PAD de 32 a 49% para ambos os extratos estudados, sem influenciar a FC, podendo este efeito estar relacionado com a via dos receptores β-adrenérgicos. The genus Erythrina is present worldwide in tropical and subtropical regions. Phytochemical studies using various organs of these plants demonstrated the presence of alkaloids, flavonoids, pterocarpans and triterpenoids. Several species are found in Brazil, among them Erythrina falcata and Erythrina crista-galli, which are popularly known as “corticeira” and. used medicinally due to it action as sedative, anxiolytic, anti-inflammatory and antihypertensive. The present study aimed to investigate the chemical composition of extracts obtained from leaves of E. falcata and E. crista-galli, and still, to evaluate the hypotensive potential in vivo of E. falcata extracts. Initially, after collection of material plant, the leaves were selected, submitted to dryness and powdered. Then, submitted to extration by exhaustive maceration using ethanol 40% (v/v) and by infusion using water at 100 °C. For characterization in terms of phenolics and flavonoid content, the extracts were quantified by spectrophotometry. For chromatographic assay, the extracts were analysed by HPLC in reversed phase system, with a mobile phase consisting of acetonitrile:water in gradient elution and flow rate of 1.0 mL/min. For analysis by UPLC-ESI-MS, the mobile phase consisted in a mixture of acetonitrile:methanol (4:1) and 0.1% formic acid pH 3.0, with a elution by gradient and flow rate of 0.2 mL/min. The MS detection was performed following the conditions: N2 as nebulizing; collision energy 4.0 eV; temperature of electrospray source and desolvation gas 100°C and 120°C, respectively; capillary voltage 3000V; sample cone 40V. Mass spectra were recorded in the range of m/z 200-800. The evaluation of the hemodynamic effects was performed in normotensive Wistar rats, anesthetized with urethane (1.4 mg/kg) by cannulation of the carotid artery (for verification of SBP, DBP and HR) and jugular vein (for administration of the extracts and drugs). The hypotensive potential of E. falcata was investigated by conducting a growing curve administration of the extracts and the possible mechanisms involved were analyzed by administering different drugs such as: L-NAME (30 mg/kg); losartan (10 mg/kg); hexamethonium (20 mg/kg) and propranolol (5 mg/kg). The total phenolics content for E. falcata and E. crista-galli was from 1.3193 to 1.4989 mgGAE/mL for maceration and 0.8771 to 0.9506 mgGAE/mL for infusions. In total flavonoid, the content was from 7.7829 to 8.1976 mg RE/g for maceration and 9.3471 to 10.4765 RE mg/g for infusions. The molecular ions and mass fragments obtained by UPLCMS indicated the predominant composition in alkaloids, suggesting the components erythristemine, 11β-methoxyglucoerysodine, erysothiopine, 11β-hydroxyerysodine-glucose and 11-hydroxyerysotinone-rhamnoside. The aqueous extract of E. falcata showed to be a potent dose-dependent hypotensive, decreasing the SBP in 23 to 35% and DBP in 32 to 49% for both extracts, without influence in HR, and this effect may be due to the route of β- adrenergic receptors.

Multiple myeloma (MM) is an incurable progressive hematologic malignancy with heterogeneous evolution. It is a disease characterized by abnormal clonal proliferation of plasma cells in the bone marrow producing monoclonal immunoglobulins and causing a number of organ dysfunctions. Most patients relapse after treatment. Therefore, the use of methods of analysis of serum and urinary samples in order to detect as early as possible the presence of monoclonal immunoglobulins, before the occurrence of relapses, may aid in the treatment of patients with MM, improving its quality and prolonging survival. In this study we compared the effectiveness of the techniques of immunofixation (IF) and electrophoresis (EP) in the detection of MM relapses. For this, 52 patients under treatment in the University Hospital of Santa Maria (HUSM) were monitored, being detected the relapse of the disease in nine of these patients. A retrospective analysis of serum proteins of the nine patients, between January 2012 and July 2014, showed that IF was more effective than EP in early detection of relapse, regardless of the present class of immunoglobulins. The precocity of IF in relation to EP in detecting MM relapses in the nine patients studied, ranged from 2.0 to 18.8 months, with a mean of 6.6 months. Thus, we suggest the implementation of IF in the Clinical Analysis Laboratory (CAL) of HUSM to help onco-hematology physicians in the diagnosis and supportive care for patients with MM. O mieloma múltiplo (MM) é uma neoplasia hematológica progressiva, com evolução heterogênea e ainda incurável. É uma doença caracterizada pela proliferação clonal anormal de plasmócitos na medula óssea produzindo imunoglobulinas monoclonais e ocasionando uma série de disfunções orgânicas. A maioria dos pacientes recidivam após o tratamento. Portanto, a utilização de métodos de análise de amostras séricas e urinárias, que permitam detectar o mais precocemente possível a presença de imunoglobulinas monoclonais, antes da ocorrência das recidivas, pode auxiliar no tratamento de pacientes com MM, melhorando a qualidade e ampliando o tempo de sobrevida dos mesmos. No presente estudo foram comparadas as técnicas de imunofixação (IF) e eletroforese (EF) quanto a sua eficácia na detecção das recidivas do MM. Para isso, foram monitorados 52 pacientes em tratamento junto ao Hospital Universitário de Santa Maria (HUSM), sendo detectada a recidiva da doença em nove destes pacientes. A análise retrospectiva de proteínas séricas dos nove pacientes, no período entre janeiro de 2012 e julho de 2014, mostrou que a IF foi mais eficaz do que a EF em detectar precocemente as recidivas, independentemente da classe de imunoglobulinas presente. Nos nove pacientes recidivados, a precocidade da IF, em relação à EF, na detecção das recidivas do MM variou de 2,0 a 18,8 meses, com um tempo médio de 6,6 meses.

A hipertensão arterial sistêmica é fundamentada como uma condição clínica multifatorial caracterizada por níveis elevados e sustentados de pressão arterial. A progressão da doença está intimamente ligada com alterações estruturais e funcionais cardíacas e vasculares além de promover danos em alguns órgãos alvo, como os rins, cérebro, além das alterações metabólicas, que produzem um aumento sensível nos riscos de doenças cardiovasculares. De acordo com a Sociedade Brasileira de Cardiologia a hipertensão arterial sistêmica apresenta uma alta prevalência e baixas taxas de controle, tornando-a um dos mais importantes problemas de saúde pública no Brasil. O uso de plantas medicinais para fins terapêuticos é bastante antigo e muitas vezes seu uso é absolutamente empírico, sem nenhum estudo científico que embase essa prática. A Blepharocalyx salicifolius, conhecida como Murta, apresenta várias utilidades terapêuticas baseadas no conhecimento popular, entre elas o uso como digestivo, antibacteriano, antiespasmódico e anti-hipertensivo, entre outros. No presente trabalho foi avaliado o efeito hipotensor do extrato aquoso da B. salicifolius em ratos normotensos, e analisado, através do uso do L-NAME, da losartan e do hexametônio, qual seria seu possível mecanismo de ação. A avaliação dos efeitos hemodinâmicos foi realizada em ratos wistar normotensos, anestesiados com uretana (1,4 mg/Kg i.p.) e via canulação da artéria carótida (para a verificação da PAS, PAD e FC) e da veia jugular (para administração do extrato e drogas). O primeiro protocolo foi realizado para verificação do efeito do extrato sobre os parâmetros hemodinâmicos, utilizando uma curva dose-crescente do extrato (10, 25, 50, 75 e 100 mg/Kg) via intravenosa individualmente (cada grupo contendo 6 animais). O extrato aquoso foi administrado após 30 minutos de estabilização no equipamento, e permaneceram por 60 min. O segundo protocolo foi para avaliar alguns dos possíveis mecanismos envolvidos na resposta hipotensora. Foram utilizados: um inibidor da óxido nítrico sintase - L-NAME (L-NG-nitroarginina metil ester) (30 mg/kg); um antagonista do receptor AT1 - Losartan, (10 mg/Kg), e um bloqueador ganglionar, Hexamêtonio (20mg/Kg). As drogas foram administradas após a estabilização, sendo feito uma nova estabilização para a administração do extrato (concentração 7,5 mg/Kg; volume de 200 μL) e registros realizados por 60 min. O extrato aquoso da B. salicifolius mostrou-se um potente hipotensor, reduzindo a pressão arterial de forma dose-independente, já que as quedas foram semelhantes indiferentemente da dose usada, sem provocar alterações na frequência cardíaca. Na avaliação dos possíveis mecanismos de ação foi observado que o bloqueio do receptor AT1 e administrado o extrato aquoso não houve modificação na hipotensão provocada pelo Losartan bem como após o bloqueio ganglionar com o hexametônio. Já quando induzida a hipertensão por L-NAME, o extrato aquoso causou queda de pressão arterial, sugerindo que a via do óxido nítrico não estaria envolvida. Estes resultados evidenciam pela primeira vez que o efeito hipotensor da administração aguda do extrato aquoso de Blepharocalyx salicifolius, possa ser via bloqueio dos receptores de angiotensina II tipo I e pela possível diminuição da resposta autonômica simpática. Hypertension is finds as a multifactorial clinical condition characterized by high and sustained levels of blood pressure. Disease progression are intimately linked with structural and functional cardiac and vascular changes, promoting some damage in target organs such as the kidneys, brain, in addition to metabolic changes that produce a significant increase in the risk of cardiovascular diseases. According to the Brazilian Society of Cardiology, hypertension has a high prevalence and low control rates, making it one of the most important public health problems in Brazil. The use of medicinal plants for therapeutic purposes is quite old and often its use is completely empirical, no scientific study that basement this practice. Blepharocalyx salicifolius, known as Murta, has several therapeutic utilities based on popular knowledge, including use as digestive, antibacterial, antispasmodic and antihypertensive, among others. The present study evaluated the hypotensive effect of aqueous extract of B. salicifolius in normotensive rats and analyzed with L-NAME, the losartan and hexamethonium, which would be its possible mechanism of action. The evaluation of the hemodynamic effects was perform in normotensive Wistar rats, anesthetized with urethane (1.4 mg / kg i.p.) and cannulated in the carotid artery (for verification of SBP, DBP and HR) and the jugular vein (for administration of the extract and drugs). The first protocol was performed to verify the effect of the extract on the hemodynamic parameters using a dose increasing curve of the extract (10, 25, 50, 75 and 100 mg/kg) intravenously individually (each group containing six animals). The administration of the aqueous extract was after 30 minutes of stabilization in the equipment, and they remained for 60 min. The second protocol was to evaluate some of the possible mechanisms involved in the hypotensive response. Were used: an inhibitor of nitric oxide synthase - L-NAME (L-NG-L-nitroarginine methyl ester) (30 mg / kg); AT1 receptor antagonist - losartan (10 mg / kg), and a ganglionic blocker - hexamethonium (20mg/kg). Drug administration was performed after stabilization, performing a new stabilization for the administration of the extract and records kept for 60 min. The aqueous extract of B. salicifolius proved a potent hypotensive effect, reducing blood pressure in a dose-independent way since the declines were similar regardless of the dose used, and without effect on heart rate. In evaluation of the possible mechanism of action it was observed, when the AT1 receptor were blockade and the extract was administrated, that there was no change in blood pressure caused by losartan as after ganglionic blockage. When hypertension was induced by L-NAME, the extract caused arterial pressure low, suggesting that the nitric oxide pathway could not be involved. These results show for the first time that the hypotensive effect of acute administration of Blepharocalyx salicifolius aqueous extract may be by blockade of angiotensin II type 1 receptors and the possible reduction in sympathetic autonomic response.

A úlcera gástrica é considerada um dos principais distúrbios gastrointestinais de evolução geralmente crônica. A terapia convencional é realizada através da utilização concomitante de antibióticos e inibição da secreção ácida por determinados fármacos, com a finalidade de potencializar a rápida cicatrização da mucosa gástrica. O conhecimento empírico é o principal determinante na utilização de materiais biológicos pela população, na região oeste do Rio Grande do Sul/Brasil, existe uma cultura de utilização da cutícula coilina (C) da moela da galinha como substância de origem natural para o tratamento de distúrbios gástricos. Não há relatos científicos comprovando seu efeito gastroprotetor, portanto o objetivo deste trabalho foi determinar a atividade e possíveis mecanismos gastroprotetores da C em modelo de úlcera induzida por ácidos orgânicos, através de tratamento agudo, na perspectiva de uma nova alternativa terapêutica. Para tanto, a C foi doada limpa por produtores rurais, seca e triturada para utilização dos protocolos experimentais. Foram usadas ratas Wistar, 3 meses, n=5/grupo. As lesões gástricas foram provocadas com etanol absoluto (refrigerado; 1mL/200mg) e ácido acetilsalicílico (AAS; 400 mg/200mg), e avaliadas macroscópica e microscopicamente, sendo o tecido estomacal submetido à histologia com coloração hematoxilina-eosina. A investigação dos possíveis mecanismos foi iniciada através da quantificação do muco aderido na mucosa estomacal e da acidez gástrica (titulação ácida) e seu volume. Ao mesmo tempo, foi realizado a determinação da atividade da H + ,K + -ATPase na fração microssomal da mucosa gástrica por espectrofotometria. Os resultados expressos em MEPM e aplicado ANOVA de 1 via, com post-hoc de Tukey’s, p

Pythiosis is a disease caused by the oomycete Pythium insidiosum that affects horses, cattle, sheep, cats and humans, and occurs in tropical, subtropical and temperate regions. In horses the lesions are characterized by ulcerative eosinophilic granulomas. Most drugs are ineffective against this pathogen and immunotherapy has shown promise in the regression of the disease, even without the complete elucidation of the immune mechanisms involved. The purinergic system via adenine nucleotides (ATP and ADP) and its derivated nucleoside (adenosine), plays an important role in modulating the immune and inflammatory responses. Once released by cells, nucleotides interact with specific receptors and their extracellular concentrations are controlled by a group of ecto-enzymes, among which are ENTPDase (ecto-nucleoside triphosphate diphosphohydrolase) and ADA (adenosine deaminase). Taking into account the importance of immunotherapy in the treatment of pythiosis and a possible involvement of purinergic signaling in the immune response, the activities of E-NTPDase and E-ADA were evaluated in lymphocytes of rabbits with experimental pythiosis. For disease induction, zoospores were inoculated, subcutaneously, in the lateral region of the torax of each rabbit. These animals were evaluated weekly and the nodular area (cm2) developed was determined after 28 days of inoculation. Animals with experimental pythiosis, confirmed by enzyme immunoassay and the development of characteristic lesions, were treated with immunotherapy, whereas the ratio between the enzymatic activity in lymphopcytes and the consequent triggered immune response was investigated. Animals that did not develop lesions and those from the control group showed the same pattern of ectoenzymatic activity. E-NTPDase activity in lymphocytes of rabbits with experimental pythiosis was significantly higher (p

As doenças cardiovasculares representam a primeira causa de morte no Brasil, sendo estas, atualmente, bastante associadas a distúrbios metabólicos. A Síndrome Metabólica é o exemplo mais comum destes distúrbios, sendo caracterizada pelo agrupamento de fatores de risco cardiovascular como hipertensão arterial, resistência à insulina, hiperinsulinemia, intolerância à glicose/diabetes do tipo 2, obesidade central e dislipidemia. No sul do Brasil, a Campomanesia xanthocarpa, conhecida como guabiroba, tem sido empiricamente usada por seu efeito potencial em reduzir os níveis de colesterol sanguíneo, sendo confirmado em estudo com pacientes hipercolesterolêmicos. Os relatos populares acerca do uso tradicional do chá de suas folhas revelam sua utilização para diversas doenças, incluindo inflamatórias, renais, digestórias, entre outras. Embora a confiança nesses medicamentos seja benéfica para algumas pessoas, a informação fidedigna é fundamental, a toxicidade de medicamentos preparados com plantas pode parecer trivial, quando comparada com os tratamentos convencionais, entretanto é um problema sério de saúde pública. Diante de tantos potenciais e necessidades de estudos, este trabalho avaliou os efeitos da C. xanthocarpa sobre parâmetros hemodinâmicos e de contratilidade cardíaca em ratos com síndrome metabólica induzida por dieta rica em frutose e sua toxicidade aguda. Utilizou-se extrato aquoso das folhas de C. xanthocarpa preparado por infusão. Para avaliação da toxicidade desta planta foram realizados dois procedimentos simultâneos, a determinação da dose letal 50% e o “Screening Hipocrático”. Para avaliação das funções hepáticas e renais, foram feitas determinações de aspartato aminotransferase, alanina aminotransferase, uréia e creatinina. Também foram coletados rim e fígado para análise histológica. Os animais foram tratados por 30 dias, a pressão arterial foi avaliada por medida direta da carótida e a contratilidade através dos músculos papilares do ventrículo esquerdo, foram ainda determinados parâmetros bioquímicos para avaliação dos perfis lipídico e glicídico através de kits comerciais. Não houve mortalidade dos animais durante a observação de 48h para cálculo de DL50, impossibilitando determiná-la, e nenhuma mudança no comportamento dos animais, em todos os parâmetros, foi observada. O extrato foi capaz de reverter à hipertensão e taquicardia causada pela frutose e causar inotropismo positivo, também diminuiu os níveis de triglicerídeos e aumentou o colesterol-HDL, sem causar qualquer toxicidade renal ou hepática, podendo ser, portanto, ingerido com segurança até a dose de 5g/dia e tornando-se uma possível alternativa natural para indivíduos com síndrome metabólica. Cardiovascular diseases are the leading cause of death in Brazil, which are nowadays strongly associated with metabolic disorders. Metabolic syndrome is the most common of these disorders, it is characterized by the grouping of cardiovascular risk factors such as hypertension, insulin resistance, hyperinsulinemia, glucose intolerance/type 2 diabetes, central obesity and dyslipidemia. In southern Brazil, the Campomanesia xanthocarpa, known as guabiroba, has been used empirically by its potential effect in reducing blood cholesterol levels, which was confirmed by Klafke et al., (2010) studing hypercholesterolemic patients. The popular accounts about the traditional use of leaves tea reveal their use for various diseases, including inflammatory, renal, digestive, among others. Although the trust in these medicine is benefit for some people, the reliable information is essential , the toxicity of medicines prepared from plants may seem trivial when compared with conventional treatments, however, is a serious public health. Faced with so many needs and potential studies, this study evaluated the effects of C. xanthocarpa on hemodynamics and cardiac contractility in rats with metabolic syndrome induced by fructose-rich diet and it accute toxicity. We used aqueous extract of the leaves of C. xanthocarpa prepared by infusion. To evaluate the toxicity of these plant two simultaneous procedures were performed determination of lethal dose 50% and "Hippocratic Screening". For evaluation of hepatic and kidney functions, determination aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase, urea and creatinine were made. Also kidney and liver were collected for histological analysis. The animals were treated for 30 days, blood pressure was assessed by direct measurement of carotid and contractility through isometric force of papillary muscles of the left ventricle, biochemical parameters were also determinate to evaluated lipid and glucose profiles using commercial kits. There was no mortality of animals during the observation of 48 h for calculation of LD50, making impossible to determine it, and no change in the behavior of animals were registered in all parameters evaluated . The extract was able to reverse the hypertension and tachycardia caused by fructose and to cause positive inotropism. It also decreased the levels of triglycerides and increased HDL-cholesterol, without causing any renal or hepatic toxicity. So the extract can be ingested safely until the dose of 5g/day and may be a natural alternative for individuals with metabolic syndrome.

In the present study, in vitro antifungal activity of essential oils obtained from Origanum vulgare (oregano), Cinnamomum zeylanicum (cinnamon), Lippia graveolens (Mexican oregano), Thymus vulgaris (thyme), Salvia officinalis (sage), Rosmarinus officinalis (rosemary), Ocimum basilicum (basil) e Zingiber officinale (ginger) was assessed against Candida glabrata isolates. A group of 36 fluconazole-susceptible C. glabrata isolates were used and another group, derived from the first, obtained after in vitro induction of the fluconazole-resistance, totalizing 72 isolates tested. The methodology used was broth microdilution, cancentrations of 50 μg/mL, 100 μg/mL, 200 μg/mL, 400 μg/mL, 800 μg/mL, 1600 μg/mL and 3200 μg/mL were used, through which Minimal Inhibitory Concentration (MIC) and Minimal Fungicidal Concentration (MFC) were determined. Thyme, sage, rosemary, basil and ginger essential oils showed no antifungal activity on the tested concentrations. Antimicrobial activity lower than or equal to 3200 μg/mL was observed for oregano, Mexican oregano and cinnamon essential oils, being oregano essential oil the most potent. Oregano essential oil has shown the best antifungal activity against fluconazole-susceptible C. glabrata group. Likely, Mexican oregano essential oil has shown the best antifungal activity against fluconazole-susceptible C. glabrata group. And cinnamon essential oil has shown the best antifungal activity against fluconazole-resistant isolates of C. glabrata. No presente estudo, avaliou-se a atividade antimicrobiana in vitro dos óleos essenciais obtidos de Origanum vulgare (orégano), Cinnamomum zeylanicum (canela), Lippia graveolens (orégano mexicano), Thymus vulgaris (tomilho), Salvia officinalis (sálvia), Rosmarinus officinalis (alecrim), Ocimum basilicum (manjericão) e Zingiber officinale (gengibre) frente aos isolados de Candida glabrata. Foi utilizado um grupo de 36 isolados de C. glabrata sensíveis ao fluconazol e outro grupo, derivado do primeiro, obtido após indução a resistência ao fluconazol in vitro, totalizando 72 isolados testados. Empregou-se a metodologia de microdiluição em caldo, utilizando-se concentrações de 50 μg/mL, 100 μg/mL, 200 μg/mL, 400 μg/mL, 800 μg/mL, 1600 μg/mL e 3200 μg/mL, através do qual se determinou Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Fungicida Mínima (CFM). Os óleos essenciais de tomilho, sálvia, alecrim, manjericão e gengibre não evidenciaram atividade antifúngica nas concentrações testadas. Atividade antimicrobiana inferior ou igual à máxima testada (3200 μg/mL) foi observada para os óleos essenciais de orégano, orégano mexicano e canela. O óleo essencial de orégano apresentou a atividade antimicrobiana mais potente. Quando analisada a diferença entre os dois grupos de micro-organismos, C. glabrata sensível ao fluconazol mostrou-se mais suscetível ao óleo essencial de orégano e orégano mexicano, e C. glabrata resistente ao fluconazol mostrou-se mais suscetível ao óleo essencial de canela.

Recently was proposed that Sporothrix schenckii is a complex encompassing six cryptic species, which calls for the reassessment of laboratory characteristics inherent susceptibility and virulence of this fungi complex. In these contexts, the aim of this study was to evaluate the in vitro susceptibility of Sporothrix albicans, S. brasiliensis, S. luriei and S. schenckii to terbinafine in combination with itraconazole, ketoconazole and voriconazole as well as the correlation of enzymatic profile with the new species. The isolates (n=40) were from cases of human (18 isolates from cases of fixed cutaneous sporotrichosis and 13 isolates from cases of lymphocutaneous sporotrichosis), feline (n = 8) and canine (n=1) sporotrichosis and were previously identified by phenotypic and molecular tests. The assessment of the susceptibility was performed based on the protocol M38-A2 and the enzymatic activity was determined using the commercial kit API-ZYM System (BioMérieux, Marcy- l’Etoile, France) in accordance with the manufacturer’s instructions. In assessing the susceptibility, synergism was observed in only one isolate (2,5%) of the association of TRB+CTZ; addition, in the 11 (27,5%) strain tested for TRB+CTZ; in TRB+ITZ 14 (35%) of isolates and in TRB+VRC. Most interactions were indifferent. The Sporothrix schenckii Complex had different positive results for each of the new species tested. Enzymes such as esterase, esterase lipase, acid phosphatase, naphthol-AS-BI-phosphohydrolase and β-glucosidase were recorded as positive reaction in 85 – 97,5% of strains. Among the different enzymatic profiles obtained, there was unique and very peculiar to the new specimens, the positive it was observed that positive reactions for lipase and leucine arilamidase were documented only for S. brasiliensis and S. albicans, respectively. Furthermore, only S. luriei species was recorded as negative reaction for naphthol-AS-BI-phosphohydrolase. Furthmore, only S. luriei obtained negative result for naphthol-AS-BI-phosphohydrolase. The 37 isolated of S. schenckii were tested featured in 15 different biotypes. The variability enzyme found may contributes to a better understanding to the differences in virulence and resistance among species of the genus Sporothrix, and may possibility a new phenotypic basis for separating and classify the new specie, as well as providing a review of clinical and epidemiological data of sporotrichosis. Recentemente foi proposto que Sporothrix schenckii é um complexo que engloba seis espécies, o que exige a reavaliação das características laboratoriais inerentes à suscetibilidade e à virulência desse complexo fúngico. Neste contexto, o objetivo deste estudo foi avaliar a suscetibilidade in vitro de 40 isolados de Sporothrix albicans, S. brasiliensis, S. luriei e S. schenckii à terbinafina (TER) em combinação com itraconazol (ITZ), cetoconazol (CTZ) e voriconazol (VRC), bem como investigar o perfil enzimático destas novas espécies. Os isolados são oriundos de esporotricose em humanos (18 da forma cutânea fixa e 13 isolados da forma linfocutânea), de felinos (n = 8) e de canino (n = 1), tendo sido previamente identificados por testes fenotípicos e moleculares. A avaliação da suscetibilidade foi realizada com base no protocolo M38-A2 (CLSI) e a atividade enzimática foi determinada através do Sistema API-ZYM® (bioMérieux, Marcy-l'Etoile, França). Na avaliação da suscetibilidade aos antifúngicos combinados, a interação sinérgica só foi verificada pela associação TRB+ITZ, ocorrendo somente frente a um isolado da espécie S. schenckii; a mesma combinação evidenciou efeito aditivo frente a 14 (35%) isolados. Já as combinações TRB+CTZ e TRB+VRC apresentaram efeito aditivo para 11 [27,535%] e 1 [2,5%] isolados, respectivamente. Todas as demais combinações evidenciaram interações indiferentes. Em relação ao perfil enzimático, as enzimas esterase, lipase esterase, fosfatase ácida, naftol-AS-BI-phosphohydrolase e β-glucosidase foram caracterizadas em 85 - 97,5% dos isolados estudados. A enzima lipase só foi detectada em S. brasiliensis enquanto que a leucino-arilamidase somente ocorreu em S. albicans. a ausência de naftol-as-bi-phosphohydrolase só ocorreu em S. luriei. Os 37 isolados identificados como S. schenckii manifestaram variações enzimáticas que permitiram agrupar estes isolados em 15 diferentes biotipos. O estudo do perfil enzimático em espécies recentemente identificadas é importante, pois, vem contribuir com a compreensão da virulência, suscetibilidade e, sobretudo, pode oportunizar novas possibiliades para identificar, separar e classificar fenotipicamente as novas espécies de agentes da esporotricose.

In the last two decades it has been seen a large increase in blood stream infections by Candida spp. The candidemias are associated with high morbidity and mortality, as well as the increase in hospital costs. The phenomenon of resistance highlights the importance of performing tests for susceptibility to antifungal agents. Such tests are improving constantly in an attempt to standardize their interpretations. This study evaluated the susceptibility of Candida spp. isolated from candidemias during a period of 15 years divided into three periods of five years in Santa Maria, RS, Brazil, interpreting minimum inhibitory concentrations according to the proposal of the CLSI and the new breakpoints recently proposed by Pfaller et al. Among the 525 isolates during the three periods, C. parapsilosis was the predominant species (49.14%), followed by C. albicans (34.47%), C. tropicalis (8.19%), C. glabrata (3.61%), C. lusitaniae (1.90%), C. guilliermondii (1.71%) and C.krusei (0.95%). During the study period and considering the two criteria, 136 non-susceptible isolates were found. According to CLSI, we identified 40 (7.61%) non-susceptible isolates, from wich 19 (3.61%) were resistant. According to Pfaller et al., 96 (18.28%) isolates presented themselves as nonsusceptible, being 11 (2.09%) resistant. All isolates were susceptible to amphotericin B and 3 presented themselves dose-dependent or intermediate suscpetible to flucytosine and caspofungin. Resistance was detected only among the azole antifungals: itraconazole (2.09%), fluconazole (1.14%) and voriconazole (0.38%). The isolation of species resistant to the antifungal agents used was not a prominent feature in this study. Detecting a higher number of non-susceptible species highlighted the relevance of evaluating of susceptibility tests by new breakpoints in order to find a more efficient therapy. Nas últimas duas décadas observou-se um grande aumento nas infecções de corrente sanguínea por Candida spp. As candidemias estão associadas a altas taxas de morbidade e mortalidade, bem como ao incremento nos custos hospitalares. O fenômeno da resistência evidencia a importância da realização de testes de suscetibilidade aos agentes antifúngicos. Tais testes estão aprimorando-se constantemente na tentativa de uniformizar suas respectivas interpretações. O presente estudo avaliou a suscetibilidade de Candida spp. isoladas de candidemias por um período de 15 anos divididos em três períodos de cinco anos, em Santa Maria, RS, Brasil, interpretando as concentrações inibitórias mínimas de acordo com a proposta do CLSI e os novos breakpoints recentemente propostos por Pfaller et al. Entre os 525 isolados nos três períodos avaliados, C. parapsilosis foi a espécie predominante (49,14%), seguida por C. albicans (34,47%), C. tropicalis (8,19%), C. glabrata (3,61%), C. lusitaniae (1,90%), C. guilliermondii (1,71%), e C. krusei (0,95%). Durante o período estudado e considerando-se os dois critérios, foram detectados 136 isolados não sensíveis. Segundo o CLSI, foram identificados 40 (7,61%) isolados não sensíveis, sendo 19 (3,61%) resistentes. De acordo com Pfaller et al., 96 (18,28%) isolados apresentaram-se como não sensíveis, sendo 11 (2,09%) resistentes. Todos os isolados foram sensíveis a anfotericina B e 5 e 3 isolados apresentaram-se intermediários a flucitosina e caspofungina, respectivamente. Resistência foi detectada somente entre os antifúngicos azólicos: itraconazol (2,09%), fluconazol (1,14%), e voriconazol (0,38%). O isolamento de espécies resistentes aos agentes antifúngicos utilizados não foi uma característica marcante no presente estudo. Este estudo permitiu uma melhor visão da epidemiologia local. A detecção de um maior número de espécies não sensíveis ressaltou a relevância da avaliação dos testes suscetibilidade através dos novos breakpoints a fim de ser direcionada a uma terapia mais eficiente.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior Trypanosoma cruzi infection causes Chagas disease (CD), a chronic inflammatory disease. The most infected individuals present no apparent morbidity, consistent with the indeterminate form of Chagas disease (IFCD). Although parasite-related factors may influence the clinical progress of disease, factors such as immune and inflammatory responses of host have a fundamental participation in the dynamic of pathology. The cellular immune response is closely associated with the presence of a tissue inflammatory infiltrate, which is composed by mononuclear cells that proliferate and produce pro- and anti-inflammatory cytokines. The inflammatory reaction triggered by T. cruzi infection is maintained by persistence of parasite in the host, and produces systemic effects, including microvascular changes. The puricergic signaling system plays an important role in the modulatiib of immune and inflammatory responses as well as vascular thrombosis by adenine nucleotides (ATP, ADP and AMP) and their derivative nucleoside adenosine. These signaling molecules are released from cells such as lymphocytes and platelets in response to damage or cell stimulation by the action of pathogens. The effects of adenine nucleotides and adenosine are promoted through the agonism of specific purinergic receptors and controlled by an enzymatic complex located on the cell surface. The aim of this study was to evaluate the influence of purinergic signaling in the regulation of microvascular dysfunction triggered by infection and in the adaptive immune response induced by the host through ectoenzymes activities involved in the metabolism of ATP in lymphocytes and platelets of patients IFCD. It was observed a decrease in both E-NTPDase and E-ADA activities, representing an adaptive consequence of host to a low antigenic stimulation during the latent phase of disease. Therefore, low concentrations of extracellular ATP would lead the induction of a Th2 response that would protect the host from an intense Th1 response, while high concentrations of extracellular adenosine would be responsible for anti-inflammatory and immunosuppressive effects. It was not observed any change in E-NTPDase expression when compared with the control group, demonstrating that its decreased activity may be a result of some tridimencional alteration of the enzyme itself. In platelets of IFCD patients, there was an increase in E-NPP and E-5 -NT activities and a decrease in E-ADA activity, which could be related to tromboregulatory effects by nucleotides degradation as well as formation and preservation of extracellular adenosine levels, in view of its vasodilator and cardioprotective roles. The decreased platelet aggregation observed in IFCD patients probably occurred due to antiaggregating action of adenosine. In conclusion, the purinergic system ectoenzymes, which are responsible for ATP metabolism, contribute in tromborregulation and modulation of host immune responses during the indeterminate form of the disease. A infecção pelo Trypanosoma cruzi causa a doença de Chagas (DC), uma doença inflamatória crônica. A maioria dos indivíduos infectados não apresenta morbidade aparente, compatível com a forma indeterminada da doença de Chagas (FIDC). Embora fatores relacionados ao parasito possam influenciar a evolução clínica da doença, fatores como resposta imune e inflamatória do hospedeiro têm fundamental participação na dinâmica da patologia. A resposta imune celular está intimamente associada à presença de um infiltrado inflamatório tecidual, composto por células mononucleares que proliferam e produzem citocinas pró e anti-inflamatórias. A reação inflamatória desencadeada pela infecção pelo T. cruzi é mantida pela persistência do parasito no hospedeiro, e produz alterações sistêmicas, incluindo alterações microvasculares. O sistema de sinalização purinérgica desempenha um importante papel na modulação da resposta imune e inflamatória, assim como da trombose vascular, através dos nucleotídeos da adenina (ATP, ADP e AMP) e seu derivado nucleosídeo adenosina. Estas moléculas sinalizadoras são liberadas de células como linfócitos e plaquetas em resposta ao dano ou ao estímulo celular por ação de patógenos. Os efeitos dos nucleotídeos de adenina e da adenosina são promovidos através da ativação de receptores purinégicos específicos e controlados por um complexo enzimático localizado na superfície das células. O objetivo deste trabalho foi avaliar a influência da sinalização purinérgica na regulação das disfunções microvasculares desencadeadas pela infecção, bem como da resposta imune adaptativa induzida pelo hospedeiro, através da determinação da atividade de ectoenzimas envolvidas no metabolismo do ATP em linfócitos e plaquetas de pacientes FIDC. Foi observada uma diminuição nas atividades da E-NTPDase e da E-ADA, representando uma conseqüência adaptativa do hospedeiro frente a uma baixa estimulação antigênica durante o período de latência da doença. Logo, baixas concentrações do ATP extracelular liberadas, levariam à indução de uma resposta Th2 que protegeria o hospedeiro de uma intensa resposta Th1, enquanto, elevadas concentrações de adenosina extracelular seriam responsáveis por efeitos anti-inflamatórios e imunossupressores. Não foi observada alteração na expressão da E-NTPDase em relação ao grupo controle, demonstrando que a diminuição da sua atividade enzimática pode ser resultado de alguma modificação na conformação tridimensional da própria enzima. Em plaquetas de pacientes FIDC, foi observado um aumento nas atividades da E-NPP e E-5 -NT e uma diminuição na atividade da E-ADA, o que poderia estar relacionado a um efeito tromborregulatório, com a formação e preservação dos níveis extracelulares de adenosina, tendo em vista seu papel vadodilatador e cardioprotetor. A agregação plaquetária diminuída observada nos pacientes FIDC, provavelmente ocorreu devido à ação anti-agregante da adenosina circulante. Dessa forma, sugere-se que as ectoenzimas do sistema purinérgico, responsáveis pelo metabolismo do ATP contribuem na tromborregulação e na modulação das respostas imunes do hospedeiro durante a forma indeterminada da doença.

In Brazil, breast cancer (BC) is the most common malignant neoplasic diseases among women. The identification of markers that can predict the behavior of tumors is especially important, mainly due to variability in clinical disease progression. It has been a high number of new prognostic factors mentioned in literature in recent years. The inclusion of new predictors provides advances that lead to an even better selection of patients for adjuvant therapy primarily, being able to reach a better individualization of therapeutics. Many studies have shown an association between certain blood groups and different types of cancer, and have correlated the expression of antigens of the ABO blood groups in cancer cells, with more or less favorable prognosis. The purpose of this study was to evaluate the possibility of expression of antigens of the ABO blood system be applied as a marker of genetic susceptibility and / or prognosis for breast cancer and its association with other clinical prognostic factors, anatomopathological and immunohistochemical. First, through a case study (n = 127) and controls (n = 67), were analyzed the association between ABO blood type and the risk of developing breast cancer. The frequency of blood group A was significantly higher and frequency of group O significantly lower in patients with BC compared with controls. When the case study group was analyzed according to their blood group, there was a statistically significant increase in risk for BC in type A blood group patients. The results suggest that blood group type should be considered together with other factors to understand the individual risk of each patient and may be used as an independent risk marker for BC. In a second study, immunohistochemical were performed on a formalin-fixed paraffin sections of 80 tissue samples (29 benign lesions derived from breast and 51 breast carcinoma) to investigate the expression of the blood antigens A and B. There was a decrease in the tissue expression of antigen A in patients with BC, with statistical significance, assuming that the occurrence of decreased expression in malignant breast tissues can predict a more aggressive tumor behavior. No significant correlation was found between expression pattern of A and B tissue antigens in BC patients with clinical prognostic factors, anatomopathological and immunohistochemical characteristics. The distribution of the expression of antigens A and B in benign and malignant breast cells was not completely uniform. Most of the benign lesions showed maintenance of the expression of antigens, but some lost their expression, suggesting that the loss of ABO antigen expression in benign lesions may be an early marker for neoplastic transformation. No Brasil, o câncer de mama (CM) é a neoplasia maligna mais freqüente entre as mulheres. A identificação de marcadores que possam predizer o comportamento dos tumores é especialmente importante, devido, sobretudo, à variabilidade na progressão clínica da doença. Tem sido elevado o número de novos fatores prognósticos mencionados na literatura mundial nos últimos anos. A inclusão de novos fatores preditivos proporciona avanços que conduzem a uma seleção ainda melhor dos pacientes principalmente para terapias adjuntivas, podendo-se chegar a uma melhor individualização da conduta terapêutica. Muitos trabalhos mostraram uma associação entre determinado grupo sanguíneo e diferentes tipos de câncer, e têm relacionado a expressão de antígenos do sistema sanguíneo ABO nas células neoplásicas, com prognóstico mais ou menos favorável. O objetivo do trabalho foi avaliar a possibilidade da expressão de antígenos do sistema sanguíneo ABO ser aplicada como marcador de susceptibilidade genética e/ou prognóstico para o câncer de mama, e sua associação com outros fatores prognósticos clínicos, anatomopatológicos e imuno-histoquímicos. Primeiramente, mediante um estudo de casos (n = 127) e controles (n = 67), analisou-se a relação entre tipo sanguíneo ABO e o risco de desenvolver câncer de mama. A freqüência do grupo sanguíneo A foi significativamente maior e a freqüência do grupo O significativamente menor nas pacientes com CM quando comparadas aos controles. Quando agrupadas as pacientes com câncer de mama segundo seu grupo sanguíneo, verificou-se um aumento estatisticamente significativo do risco para desenvolvimento de CM no tipo sanguíneo A. Os resultados sugerem que o tipo sanguíneo deva ser considerado, em conjunto com outros fatores, na compreensão do risco individual de cada paciente, podendo ser usado como um marcador de risco independente para o CM. Num segundo estudo, em um total de 80 amostras de tecidos (29 oriundas de lesões benignas da mama, e 51 de carcinoma mamário) foi realizada a pesquisa imuno-histoquímica da expressão dos antígenos sanguíneos A e B. Verificou-se uma diminuição, estatisticamente significativa, da expressão do antígeno sanguíneo A no câncer de mama, supondo-se que essa redução na expressão nos tecidos mamários malignos possa predizer um comportamento mais agressivo do tumor. Ao serem relacionados o padrão de expressão dos antígenos A e B, nas amostras de tecidos de pacientes com CM, com alguns fatores prognósticos clínicos, anatomapatológicos, e imunohistoquímicos já estabelecidos, nenhuma associação significativa foi encontrada. A distribuição da expressão dos antígenos A e B em células malignas e benignas da mama não foi totalmente uniforme. A maioria das lesões benignas demonstrou manutenção da expressão 8 dos antígenos, mas algumas perderam a expressão, sugerindo que a perda da expressão de antígenos ABO em lesões benignas possa ser um marcador prematuro para a transformação neoplásica.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior In ischemic stroke, damage to the brain is caused by a reduction or complete blockage of blood flow to parts of the brain, resulting in glucose and oxygen deficiency. It is a leading cause of mortality and disability particularly in the elderly. The majority of strokes are not fatal and survivors are at a high risk of subsequent vascular complications and new vascular accidents. Hypertension is the most important risk factor in strokes, being that it is present in 70% of all cases. Oxidative stress is believed to be one of the mechanisms taking part in neuronal damage in stroke. The key role the cholinergic system plays in normal brain functions and in memory disturbances of several pathological processes, such as in cerebral blood flow regulation, has been well documented. This study investigated the oxidative status and acetylcholinesterase (AChE) activity in whole blood in patients diagnosed with the acute and chronic stage of ischemia, as well as with hypertension. We determined the catalase activity in the blood, reduced glutathione (GSH) in erythrocytes, and TBARS and protein carbonyl content from serum samples. The oxidative profile of lipids and proteins represented by MDA levels and protein carbonylation content, respectively, showed increased levels both in the acute ischemic group and in the hypertensive group, when compared to the control. Catalase activity and GSH levels in the acute group also were higher than in the hypertensive and control groups. No difference was found between the catalase activity of the chronic ischemic group and the hypertensive group (p< 0.05). The activity of AChE in acute ischemic patients was significantly higher than that presented by the control, hypertensive and chronic ischemic patients (p

Hemostasis is a complex process that involves equilibrium between the coagulation and fibrinolytic systems. Furthermore, the spatial and temporal expression of NTPDases in the vasculature appears to control platelet activation, thrombus size and stability, by regulating phosphohydrolytic activity and consequent P2 receptor signaling. Here we show the activity of ectonucleotidases on the platelet surface of normal pregnant women and pregnant women with complications. The activities of the enzymes, NTPDase and 5 - nucleotidase, were analyzed in the platelets of four patient groups composed of women divided into the following way: nonpregnant (NP), pregnant without complications (P), pregnant with hypertension (HP) (preeclampsia) and pregnant with gestational diabetes mellitus (GDP). Increased NTPDase and 5 -nucleotidase activities were observed in the groups of P, HP and GDP when compared to control (p