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Resumo A cultura da erva-mate está exposta a doenças que prejudicam o desenvolvimento da planta, reduzindo a produtividade. Dentre essas doenças têm-se a podridão-de-raízes causada por Fusarium spp. O objetivo deste trabalho foi avaliar a ação antagonista in vitro de Trichoderma spp. sobre Fusarium oxysporum, agente causal da podridão-de-raízes em erva-mate. Foram utilizados quatro isolados de Trichoderma spp. e um isolado de Fusarium oxysporum. A ação antagônica de Trichoderma spp. sobre F. oxysporum foi avaliada por meio do teste de pareamento de culturas e de metabólitos voláteis. No teste de pareamento de culturas, os isolados de Trichoderma spp. inibiram o crescimento micelial de Fusarium oxysporum, com percentual de inibição que variou de 13,06% a 14,24%. No teste de metabólitos voláteis, T. tomentosum e T. harzianum apresentaram os melhores resultados de inibição, com 27,70% e 24,46%, respectivamente. Assim, pode-se concluir que Trichoderma spp. apresenta ação antagonista in vitro contra F. oxysporum, agente causal da podridão-de-raízes em erva-mate. Abstract Yerba mate (Ilex paraguariensis) crop is susceptible to many disease-causing agents that affect a plant, like a root rot, reducing its productivity. The present study aimed to evaluate the in vitro antagonist potential of Trichoderma sp. on Fusarium oxysporum, the causal agent of root rot in yerba mate. Four Trichoderma spp. isolates and one Fusarium oxysporum isolate were used. The antagonistic action of Trichoderma spp. on F. oxysporum was evaluated through the dual cultures and volatile metabolites tests. The results of the dual cultures assay revealed that Trichoderma spp. inhibited the mycelial growth of Fusarium oxysporum, with percent inhibition ranging from 13.06 to 14.24%. Moreover, in the volatile metabolites test, T. tomentosum and T. harzianum showed the best inhibition results, 27.70 and 24.46%, respectively. Thus, Trichoderma spp. presented in vitro antagonist potential in the control of Fusarium oxysporum.

Resumo O controle biológico é uma importante ferramenta para o controle de insetos-praga pelas inúmeras vantagens apresentadas e por diminuir os riscos ambientais provocados pelas técnicas de controle químico. No entanto, são escassos estudos referentes à morfofisiologia de microrganismos utilizados nesse método de controle, principalmente no que se refere ao Oncideres impluviata, principal inseto-praga da acácia-negra. Assim, o objetivo do presente estudo foi realizar a caracterização morfofisiológica de isolados de Beauveria bassiana e Metarhizium anisopliae, como uma potencial alternativa para o controle biológico do anelador-da-acácia-negra. Para tanto, foram utilizados cinco isolados de fungos entomopatogênicos (três isolados de Beauveria bassiana e dois de Metarhizium anisopliae) e avaliados o crescimento micelial, esporulação, coloração e caracterização dimensional dos conídios em diferentes meios de cultura (BDA, V8CaCO3 e meio completo). Os isolados de Beauveria bassiana apresentaram melhor crescimento micelial no meio V8CaCO3 e maior esporulação no meio de cultura completo; o micélio aéreo se apresentou de cor branca em todos os isolados. Em relação aos isolados de Metarhizium anisopliae, o maior crescimento micelial e esporulação ocorreram no meio de cultura completo e a coloração do micélio aéreo variou entre tons de cinza e verde-oliva. Esses resultados vêm a gerar informações preliminares a respeito do uso de fungos entomopatogênicos para o controle do anelador-da-acácia-negra. Abstract Biological control is a useful tool for insect pests control due to the many advantages set out and further to reduce the environmental risks caused by chemical control techniques. However, there is a gap in the scientific literature that describes microorganisms' morphophysiology used in this control method, especially in Oncideres impluviata, the main pest insect of black wattle (Acacia mearnsii De Wild.). Thus, this study aimed to perform morphophysiology characterization of isolates of Beauveria bassiana and Metarhizium anisopliae as a potential alternative for the biological control of twig girdler of black wattle. So, five isolates of entomopathogenic fungi (three isolates of Beauveria bassiana and two of Metarhizium anisopliae) were used. Also, mycelial growth, sporulation, staining was evaluated. Additionally, a dimensional characterization of conidia in different culture media (BDA, V8CaCO3, and complete medium) was carried out. Beauveria bassiana isolates showed better mycelial growth in the V8CaCO3 medium and greater sporulation in the complete culture medium; the aerial mycelium presented a white color in all isolates. These results allow producing preliminary information regarding the use of entomopathogenic fungi for the control of the twig girdler of black wattle.

Resumo Juglans regia e Carya illinoinensis, ambas da família Juglandaceae, são espécies de nogueiras conhecidas mundialmente pela produção das chamadas nozes, com crescente expansão da área cultivada na América do Sul. Entretanto, nos últimos anos houve aumento da incidência de doenças nessas espécies, o que compromete a rentabilidade dos cultivos e a qualidade do produto. Colletotrichum nymphaeae foi recentemente identificado no Brasil causando danos em frutos de Juglans regia. Este estudo teve como objetivo avaliar o potencial de infecção cruzada de C. nymphaeae, isolado de frutos sintomáticos de Juglans regia, em folíolos e frutos de cultivares de Carya illinoinensis. Para isso, discos de meio de cultura contendo estruturas do patógeno foram depositados sobre folíolos e frutos de seis e três cultivares de Carya illinoinensis, respectivamente. Colletotrichum nymphaeae mostrou-se patogênico tanto em folíolos como em frutos de todas as cultivares avaliadas, sendo que as maiores lesões em folíolos foram observadas nas cultivares ‘Barton’, ‘Melhorada’ e ‘Imperial’, enquanto que a cultivar ‘Shawnee’ demonstrou menor suscetibilidade ao patógeno. Nos frutos, a cultivar ‘Imperial’ mostrou-se mais suscetível ao patógeno, já que apresentou as maiores lesões.

In the central-western and southern regions of Brazil, the cultivation of yerba mate (Ilex paraguariensis) is considered an important source of forest extraction, besides providing an alternative income, especially for families. The yerba mate, like other forest species, is infected by several pathogens, such as fungi of the genus Fusarium, causing root rot. Pathogens have wide genetic variability, even within a single genus and species, resulting from adaptations to their environments. This study aimed at characterizing molecularly isolated Fusarium spp. through the sequencing of the ITS and β-tubulin genome regions, identifying the species level as well as the formation of vegetative compatibility groups (VCG) among these isolates of the root rot pathogen in yerba mate. The sequencing of the ITS and β-tubulin regions, defined the separation between the seven pathogenic isolates of F. solani and F. oxysporum. For the same isolates, the technique to obtain nit mutants was suitable for the phenotypic classification, obtaining five VCGs for species of Fusarium, root rot in yerba mate. Resumo Nas regiões Centro-Oeste e Sul do Brasil, a cultura da erva-mate (Ilex paraguariensis) constitui-se uma importante fonte de extrativismo florestal, além de diversificar a renda, principalmente na agricultura familiar. A erva-mate, como outras espécies florestais, é infectada por diversos patógenos, como o gênero Fusarium, causador da podridão-de-raízes. Os patógenos possuem ampla variabilidade genética, mesmo dentro de um único gênero e dentro de uma única espécie, resultado de adaptações ao meio em que vivem. Este estudo teve como objetivo avaliar o sequenciamento das regiões do genoma ITS e β-tubulina na identificação em nível de espécie dos isolados de Fusarium spp. patogênicos à erva-mate, e identificar a formação de grupos de compatibilidade vegetativa (VCG) entre os isolados de Fusarium spp. patogênicos à erva-mate. O sequenciamento das regiões ITS e β-tubulina consolidou a separação entre os sete isolados patogênicos em F. solani e F. oxysporum. Para esses isolados, a técnica para obtenção de mutantes nit foi adequada para a classificação fenotípica, fundamentais nos testes de VCG para espécies de Fusarium, sendo obtidos cinco VCG.

A utilização de extractos vegetais no combate a fungos mostra-se como uma alternativa ao uso de produtos químicos. Este trabalho teve a finalidade de testar a eficiência do extracto aquoso obtido de folhas de Nerium oleander (espirradeira) na germinação das sementes de Peltophorum dubium (canafístula), no vigor das plântulas resultantes destas e na sanidade das sementes. Foram testados nove tratamentos, sendo três as concentrações do extracto da espirradeira: 0, 50 e 100%, e três os tempos ensaiados: 15, 30 e 45 minutos. Conclui-se que o extracto aquoso de espirradeira não foi eficiente para o controle de patogénios associados às sementes de canafístula, observando-se ainda que o mesmo incentivou o aparecimento de fungos. Em contrapartida, o extracto aquoso da espirradeira auxiliou a germinação das sementes e vigor das plântulas resultantes destas, sendo as sementes mais infectadas as que obtiveram melhor germinação e desenvolvimento., The use of plant extracts in the fungi control can be an alternative to the use of chemicals. This work has the purpose to test the efficiency of the aqueous extract obtained from leaves of Nerium oleander (espirradeira) on seed germination of Peltophorum dubium (canafístula), as well on seedling vigour and seed sanity. Nine treatments were tested, with three concentrations of extract: 0, 50 and 100%, and three assay times: 15, 30 and 45 minutes. It was found that the aqueous extract of N. oleander was not effective for controlling the pathogens associated with P. dubium seeds, and there is an increase of fungi incidence. However, the aqueous extract of N. oleander helped seed germination and vigour of the resulting seedlings and the most infected seeds were the ones showing better germination and development.

Occurrence of Fusarium spp. is one of the problems, most limiting to growth of seedlings, in nurseries. This pathogen can be transmitted via seeds and causes damages to the seedlings during pre- and post-emergence stages. The present study aimed to identify Fusarium spp. at the species level based on morphological and molecular characteristics and to verify the pathogenicity of these isolates in seeds lots of Pinus elliottii and P. taeda. For this, we used two Fusarium isolates and five lots of Pinus spp. seeds. Morphological characterization was performed based on a key, specific to Fusarium spp. identification, whereas, molecular identification was carried out by amplification and sequencing of the regions from internal transcribed spacer (ITS) and the elongation factor 1-α (tef1). The pathogenicity test was conducted through the contact of the seeds with fungal culture for 48 h, followed by sowing them in sand. The variables evaluated were emergency speed index, percentage of emergency, non-emergency seeds, symptomatic seedlings, and seedling damping-off. One isolate, F1UFSM, was identified as F. verticillioides and another isolate, F2UFSM, was identified as F. oxysporum. Both the isolates were pathogenic to the seeds of Pinus spp., causing a reduction in the percentage of emergence and seedling damping-off. RESUMO A ocorrência de Fusarium spp. é um dos problemas mais limitantes em viveiros, esse patógeno pode ser transmitido via semente e causar danos em pré e pós-emergência. O presente trabalho objetivou identificar isolados de Fusarium spp. a nível de espécie e verificar a patogenicidade desses isolados em lotes de sementes de Pinus elliottii e P. taeda. Foram utilizados dois isolados do patógeno e cinco lotes de sementes de Pinus spp. Para caracterização molecular, sequenciaram-se as regiões genômicas: ITS e fator de elongação 1-α (tef1), para morfologia dos isolados utilizaram-se chaves de identificação específica para o gênero Fusarium. O teste de patogenicidade foi realizado através do contato das sementes com a cultura fúngica por 48 horas, seguida de semeadura em areia. As variáveis avaliadas foram: índice de velocidade de emergência, porcentagem de emergência, plântulas sintomáticas e tombamento de plântulas. O isolado F1UFSM foi identificado como Fusarium verticillioides e o F2UFSM como F. oxysporum. Ambos foram patogênicos a P. taeda e P. elliottii, causando redução no percentual de emergência e tombamento de plântulas.

RESUMO O presente estudo teve como objetivo identificar patógenos, analisar diferentes tratamentos de sementes e substratos para germinação de sementes de Cabralea canjerana e ainda indicar instruções para realização de teste laboratoriais de germinação da espécie. Primeiramente, foi avaliado o teor de umidade e determinado o peso de mil sementes. Para avaliar os patógenos associados às sementes, foi realizado o teste de sanidade com diferentes tratamentos de sementes: T1 - Testemunha; T2 - Captan(r); T3 - Maxim(r); T4 - Hipoclorito de sódio; e T5 - Agrotrich Plus(r). O teste de germinação foi realizado em esquema fatorial com cinco tratamentos das sementes e três substratos (sobre papel mata-borrão, vermiculita e areia). As sementes apresentaram teor de umidade e peso de mil sementes, respectivamente, de 41,2% e 457,3 g. Os principais gêneros de fungos associados às sementes de Cabralea canjerana foram: Penicillium spp., Fusarium spp., Cladosporium spp., Pestalotia spp. e Phomopsis spp. O tratamento das sementes com os produtos Captan(r), Maxim(r) e hipoclorito de sódio mostraram-se eficientes na redução da incidência de Penicillium spp. em sementes de Cabralea canjerana, porém, somente os dois últimos proporcionaram maior potencial de germinação independente do substrato utilizado. O tratamento com Agrotrich Plus(r) apresentou a menor porcentagem de germinação e aumento da incidência de Fusarium spp. Indica-se para o teste de germinação das sementes de Cabralea canjerana assepsia com hipoclorito de sódio 1% por 2' e substrato de semeio sobre vermiculita, sendo que a primeira contagem pode ser realizada aos 19 dias e a contagem final aos 30 dias após a instalação do teste. ABSTRACT The current study aimed to identify pathogens, analyzing different seed treatments and substrates for the germination of Cabralea canjerana and also to indicate instructions testing for laboratory test of the species germination. First, we assessed the moisture content and determined the thousand seed weight. In order to assess the pathogens associated with the seeds, health testing was performed at different seed treatments: T1 - Control; T2-Captan(r); T3-Maxim(r); T4-Sodium hypochlorite; and T5-Agrotrich Plus(r). The germination test was performed based on a factorial design with five seed treatment sand three substrates (on blotting paper, vermiculite and sand). The seeds showed moisture content and thousand seed weight of 41.2% and 457.3 g, Fusarium spp., Cladosporium spp., Pestalotia spp. and Phomopsis spp.. The seed treatment with Captan(r), Maxim(r) and sodium hypochlorite was effective in reducing the incidence of Penicillium spp., but only the last two showed the greatest potential forseed germination, regardless the used substrate. Treatment with Agrotrich Plus(r) had the lowest percentage of germination and increased incidence of Fusarium spp. Asepsis with 1% per 2' sodium hypochlorite and seeding substrate over vermiculite is indicated for the germination tests of Cabralea canjerana seeds and the first counting can be performed at the 19th day and the final one at the 30th day after the test.

RESUMO Cordia americana (L.) Gottschling & J. S. Mill. (guajuvira) é uma espécie florestal amplamente distribuída no território brasileiro e que apresenta importância econômica e ambiental devido à qualidade de sua madeira e utilização em reflorestamentos. Com o objetivo de avaliar a patogenicidade de Fusarium sp. associado às sementes, foram caracterizados, morfológica e molecularmente, quatro isolados do fungo que foram inoculados nas sementes de guajuvira. A caracterização morfológica foi realizada com o auxílio de uma chave de identificação para o gênero Fusarium e para a identificação molecular foram sequenciadas as regiões genômicas Internal Transcribed Spacer (ITS) e Fator de elongação 1 - alpha (TEF1-α). Os resultados do sequenciamento de DNA concordaram com os da caracterização morfológica e permitiram identificar as espécies Fusarium acuminatum e Fusarium verticillioides. No teste de patogenicidade, verificou-se que ambas as espécies do fungo foram patogênicas a Cordia americana, causando tombamento em pré e pós-emergência, além de apodrecimento de raízes e necrose no hipocótilo. ABSTRACT Cordia americana (L.) Gottschling & J. S. Mill. (guajuvira) is a forest species widely distributed in Brazil and represents environmental and economic importance due to the quality of its timber and use in reforestation. In order to evaluate the pathogenicity of Fusarium sp. associated with seeds, characterizing the isolates morphologically and molecularly in order to identify them on the species level, was obtained four fungal isolates that were inoculated in seeds to demonstrate their pathogenicity. The morphological characterization was performed using an identification key for the genus Fusarium and, for the molecular identification, genomic regions Internal Transcribed Spacer (ITS) were sequenced with its elongation factor 1 alpha (TEF1-α). The results of the molecular identification agreed with the morphological characterization and allowed to identify the species Fusarium acuminatum and Fusarium verticillioides, both being pathogenic to Cordia americana, causing damping-off in pre and post emergence, and rotting of roots and necrosis of hypocotyl.

A cultura da nogueira-pecã tem grande importância para a economia de vários municípios do Sul do Brasil. Entretanto, problemas como baixa porcentagem de germinação das sementes e irregularidade na emergência das plântulas trazem dificuldades no processo de propagação, decorrentes da influência do fenômeno da dormência. O objetivo deste trabalho foi avaliar diferentes técnicas de superação da dormência de sementes de nogueira-pecã e o posterior desenvolvimento das plântulas. Para tanto, foram testados quatro diferentes métodos de superação de dormência, em que, nos tratamentos testemunhas, as sementes permaneceram em ambiente protegido sem qualquer tratamento; no método com escarificação, as sementes foram lixadas na parte apical no momento da semeadura e na estratificação, acomodadas em caixas com areia úmida e mantidas na temperatura de 4 ºC. Também foi testada a combinação escarificação e estratificação, simultaneamente. Os tratamentos foram compostos por 10 repetições de três sementes cada. Após cada período (30, 60 e 90 dias), as sementes foram semeadas em bandeja contendo substrato Mecplant® e mantidas a 25 ºC ± 2 ºC, sob fotoperíodo de 12 h. Avaliaram-se a altura da parte aérea, o diâmetro do colo, o número de folhas, a emergência total, o índice de velocidade de emergência, a biomassa seca, a área foliar e o comprimento da raiz pivotante. O melhor desenvolvimento de plântulas de nogueira-pecã, bem como sua emergência, foi observado no tratamento com estratificação por 90 dias e, quando combinadas escarificação mais estratificação, por 90 dias. ABSTRACT Pecan culture is very important for the economy of a large number of towns in Southern Brazil. However, problems such as low percentage of germination and irregularity in seedling emergence hamper the process of propagation, resulting from the influence of the dormancy phenomenon. The objective of this study was to evaluate different techniques to overcome the dormancy of pecan seeds and the subsequent development of seedlings testing four different methods. In the control treatments, the seeds remained in a protected environment with no treatment. In the method with scarification, seeds were sanded in the apical part at the time of sowing and stratification. Then, seeds were accommodated in boxes with moist sand and subsequently kept at 4 °C. Additionally, scarification and stratification methods were tested simultaneously. Treatments consisted of 10 repetitions of three seeds each. After each period (30, 60 and 90 days), seeds were sown in trays containing Mecplant® substrate and maintained at 25 °C ± 2 °C, photoperiod of 12 h. Shoot height, stem diameter, number of leaves, total emergency, emergency speed index, dry biomass, leaf area and length of the taproot were evaluated. The best development of pecan seedlings and their emergence were observed in the stratification treatment for 90 days as well as when scarification was used in combination with stratification for 90 days.

O objetivo deste trabalho foi determinar o tamanho de amostra (número de plantas) necessário para a estimação da média de altura de planta, do diâmetro do coleto e da relação altura de planta/diâmetro do coleto de mudas de nogueira-pecã (Carya illinoinensis) e verificar a variabilidade do tamanho de amostra entre tratamentos de superação de dormência de sementes. Foram avaliados 12 tratamentos de superação de dormência de sementes e, aos 98 dias após a semeadura, foram mensurados os caracteres altura de planta (H) e diâmetro do coleto (D), e calculada a relação altura de planta/diâmetro do coleto (HD). Foram calculadas medidas de tendência central e de variabilidade, verificadas a normalidade e a homogeneidade de variâncias e calculado o tamanho de amostra. O tamanho de amostra para avaliar H, D e HD de mudas de nogueira-pecã é dependente do tratamento para superação de dormência de sementes. Sessenta e três plantas são suficientes para a estimação da média de H, do D e da HD de mudas de nogueira-pecã, para erro de estimação de 10% da média estimada, com grau de confiança de 95% The aim of this research was to determine the sample size (number of plants) necessary to estimate the average plant height, collar diameter and relation plant height/collar diameter of seedlings pecan (Carya illinoinensis) and to verify the variability of the sample size among treatments of overcoming seed dormancy. It was evaluated 12 treatments of overcoming seed dormancy and at 98 days after sowing it was measured the plant height (H) and collar diameter (D) and calculated the relation plant height/collar diameter (HD). Measures of central tendency and variability were calculated, the normality and homogeneity of variances were verified and sample size was calculated. The sample size to evaluate H, D e HD is dependent on treatments of overcoming seed dormancy. Sixty-three plants enough to predict the average of H, D and HD seedlings pecan, with an estimation error equal to 10% of estimated average, with a degree confidence of 95%

The objective of this work was to characterize and cluster isolates of Pestalotiopsis species and to identify those that are pathogenic to pecan, based on morphological and molecular characters. Pestalotiopsis spp. isolates were identified by sequencing the internal transcribed spacer (ITS) and β?tubulin regions. Identification methods were compared to indicate the key morphological characters for species characterization. Thirteen isolates were used for the pathogenicity tests. Morphological characterization was performed using the following variables: mycelial growth rate, sporulation, colony pigmentation, and conidial length and width. Ten pathogenic isolates were identified, three as -tubulin regions. Identification methods were compared to indicate the key morphological characters for species characterization. Thirteen isolates were used for the pathogenicity tests. Morphological characterization was performed using the following variables: mycelial growth rate, sporulation, colony pigmentation, and conidial length and width. Ten pathogenic isolates were identified, three as Pestalotiopsis clavispora and three as P. cocculi. The other isolates remained as an undefined species. The morphological characters were efficient for an initial separation of the isolates, which were grouped according to differences at species level, mainly colony diameter, which was identified as an important morphological describer. Beta-tubulin gene sequencing was less informative than the ITS region sequencing for species identification. O objetivo deste trabalho foi caracterizar e agrupar isolados de espécies de Pestalotiopsis e identificar aquelas patogênicas à nogueira-pecã, com base em caracteres morfológicos e moleculares. Os isolados de Pestalotiopsis spp. foram identificados por meio do sequenciamento das regiões internal transcribed spacer (ITS) e β-tubulina. Os métodos de identificação foram comparados, para indicar os caracteres morfológicos chave para a caracterização das espécies. Treze isolados foram utilizados para os testes de patogenicidade. A caracterização morfológica foi realizada com a utilização das seguintes variáveis: taxa de crescimento micelial, esporulação, pigmentação das colônias, comprimento e largura de conídios. Dez isolados patogênicos foram identificados, três como Pestalotiopsis clavispora e três como P. cocculi. Os outros isolados permaneceram como espécie não definida. Os caracteres morfológicos foram eficientes na separação inicial dos isolados, os quais foram agrupados por diferenças quanto à espécie, principalmente o diâmetro das colônias, identificado como um importante descritor morfológico. O sequenciamento do gene da β-tubulina foi menos informativo do que o sequenciamento da região ITS para a identificação de espécies.