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Anesthesia can be utilized as a non-lethal procedure to allow easy handling of teleosts and elasmobranchs in captivity or in the wild. For this, anesthetic protocols need to be established according to the species. The aim of this study was to determine the ideal concentration of eugenol for anesthesia of Zapteryx brevirostris. Four concentrations were tested: 21.25, 42.50, 85.00 and 170.00 mg L-1 (ratio of 1:5 with absolute ethanol). The perfect concentration of eugenol for this species was 85.0 mg L-1 , which enabled up to 300 seconds of work on the fish, without any response to handling. Resumo A anestesia pode ser utilizada como um procedimento não letal que facilita o manejo de teleósteos e elasmobrânquios de cativeiro e de vida livre. Para isso, protocolos anestésicos devem ser estabelecidos de acordo com a espécie. O objetivo deste trabalho foi determinar a concentração ideal do eugenol para anestesiar Zapteryx brevirostris. Foram testadas as concentrações de 21,25; 42,50; 85,00 e 170,00 mg L-1 (1:5 de álcool absoluto). A concentração de 85,0 mg L-1 de eugenol foi a mais adequada para a espécie, permitindo uma janela de trabalho de até trezentos segundos com o animal não respondendo ao manejo.