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Currently, no established biomarkers are recommended for the routine diagnosis of penile carcinoma (PeCa). The rising incidence of this human papillomavirus (HPV)–related cancer entity highlights the need for promising candidates. The Calprotectin subunits S100A8 and S100A9 mark myeloid-derived suppressor cells in other HPV-related entities while their receptor CD147 was discussed to identify patients with PeCa at a higher risk for poor prognoses and treatment failure. We thus examined their expression using immunohistochemistry staining of PeCa specimens from 74 patients on tissue microarrays of the tumor center, the invasion front, and lymph node metastases. Notably, whereas the tumor center was significantly more intensively stained than the invasion front, lymph node metastases were thoroughly positive for both S100 subunits. An HPV-positive status combined with an S100A8+S100A9+ profile was related with an elevated risk for metastases. We observed several PeCa specimens with S100A8+S100A9+-infiltrating immune cells overlapping with CD15 marking neutrophils. The S100A8+S100A9+CD15+ profile was associated with dedifferentiated and metastasizing PeCa, predominantly of HPV-associated subtype. These data suggest a contribution of neutrophil-derived suppressor cells to the progression of HPV-driven penile carcinogenesis. CD147 was elevated, expressed in PeCa specimens, prominently at the tumor center and in HPV-positive PeCa cell lines. CD147+HPV+ PeCa specimens were with the higher-frequency metastasizing cancers. Moreover, an elevated expression of CD147 of HPV-positive PeCa cell lines correlated negatively with the susceptibility to IgA-based neutrophil-mediated tumor cell killing. Finally, stratifying patients regarding their HPV/S100A8/S100A9/CD15/CD147 profile may help identify patients with progressing cancer and tailor immunotherapeutic treatment strategies.

Einleitung: Die m��nnliche Belastungsinkontinenz ist zumeist iatrogen bedingt und h��ufig mit Drangbeschwerden vergesellschaftet. Die Therapie der Wahl einer persistierenden Belastungsinkontinenz ist nach Versagen der konservativen Ma��nahmen eine operative Korrektur mittels suburethraler [zum vollst��ndigen Text gelangen Sie ��ber die oben angegebene URL]

Hintergrund/Fragestellung: Eine progrediente Spastizität der unteren Extremitäten ist das Kardinalsymptom der Hereditären Spastischen Paraplegie (HSP). Daneben leiden bis zu 75% der Betroffenen auch an nicht-motorischen Symptomen in Form urologischer Störungen, welche bisher weniger Beachtung fanden. Ziel der Arbeit war daher die detaillierte Charakterisierung urologischer Störungen bei HSP. Methodik: 71 HSP-Patienten (37w, 34m, Durchschnittsalter 55,4 ±13,9 Jahre, mittleres Erkrankungsalter 35,8 ±15,6 Jahre, mittlere Krankheitsdauer 20,7 ±14,3 Jahre; 62% genetisch-gesicherte HSP) wurden mittels eines standardisierten eigens für die Studie entworfenen Fragebogens untersucht. Erfasst wurden Informationen zum allgemeinen Krankheitsverlauf der HSP, zur Manifestation der urologischen Symptomatik und der urologischen Lebensqualität unter Verwendung etablierter urologischer Skalen, sowie zur Patientenzufriedenheit. Ergebnisse: 53 Patienten (74,6%) der untersuchten HSP-Kohorte gaben eine urologische Beteiligung an. Die vier häufigsten Manifestationen der urologischen Symptomatik waren Nykturie, Harndrang, Inkontinenz und Blasenentleerungsstörungen. Für über ein Drittel (n=26, 36,6%) waren –neben den prominenten motorischen Merkmalen– die Blasenstörungen das am meisten belastende Symptom; insbesondere die Inkontinenz war mit einer Einschränkung der Lebensqualität assoziiert, vor allem für weibliche Patienten. Bemerkenswerterweise erhielten 37,7% der urologisch betroffenen Probanden keine Therapie für die urologischen Symptome. Schlussfolgerung: Urologische Symptome treten bei HSP-Patienten sehr häufig auf und stellen eine erhebliche Belastung im Alltag mit Einschränkungen der Lebensqualität dar. Mehr als ein Drittel der betroffenen Patienten bleibt bislang unbehandelt. Eine interdisziplinäre Anbindung ist indiziert.

Die vorliegende präklinische Studie behandelt die Fragestellung, ob sich eine Monotherapie mit Sunitinib oder mit Zoledronat oder eine Kombinationstherapie aus beiden Medikamenten gegenüber einer Placebobehandlung (Kontrollgruppe) zur Prävention von Knochenmetastasen des Mammakarzinoms – aufgrund antiosteolytischer und antiangiogener Wirkung – im Tiermodell als wirksam erweist. Die Behandlung der weiblichen Fox nu/nu Nacktmäusen erfolgte zwei Tage vor der intrakardialen Injektion der humanen Mammakarzinomzellen der Zelllinie MDA-MB-231. Zur Bestimmung des Behandlungseffekts auf die Anzahl tumorvermittelter aktiver Osteoklasten erfolgten TRAPFärbungen sowie auf die Tumorangiogenese CD34-Färbungen jeweils bei Gewebeschnitten von Knochenmetastasen der Mäusehinterläufe. Zudem wurde die histomorphometrische Tumorgröße bei Längsschnitten des distalen Femurs der behandelten Mäuse mittels Masson-Goldner-Trichromfärbung bestimmt. Die Ermittlung der TRAP-positiven Zellen, der Mikrogefäßdichte sowie der Knochentumor-Querschnittsfläche erfolgte mithilfe eines computergestützten Mikroskops. Schlussfolgerung: Nach den Ergebnissen der vorliegenden Studie wirkte die Sunitinib-Monotherapie einerseits signifikant antiangiogen und die Zoledronat-Monotherapie sowie die Kombinationstherapie aus Sunitinib und Zoledronat andererseits signifikant antiresorptiv. Ein signifikant antiresorptiver Sunitinib-Effekt sowie eine signifikant antiangiogene Wirkung durch die alleinige Behandlung mit Zoledronat oder durch die kombinierte Behandlung war,wie in anderen präklinischen Studien aufgezeigt, dagegen nicht nachzuweisen.

In der Arbeit wurden Wilms-Tumore mit hohem Risiko sowie als Vergleich alle neu aufgetretenen Tumore in Deutschland 2007 auf einen genetischen Zugewinn auf Chromosom 1q untersucht. Dies wurde mit dem Krankheitsverlauf korreliert, um zu prüfen, ob diese genetische Alteration als prognostischer Faktor genutzt werden kann.

Diese Arbeit beschäftigt sich mit der Frage, ob es verschiedene klinische, diagnostische, intraoperative oder tumorbiologische Prädiktionsfaktoren für das Vorhandensein von Tumorzellen in der pathologischen Bearbeitung des Resektates der Nachresektion bei initial randständig brusterhaltend operierten Patientinnen gibt. Dazu wurden die Daten aller in der Klinik für Gynäkologie und Geburtshilfe des UKSH brusterhaltend operierten Patientinnen für den Zeitraum vom 1. Januar 2005 bis 31. Dezember 2009 erhoben und durch vorher festgelegte Ein- und Ausschlusskriterien selektiert. So konnten insgesamt 212 Patientinnen in die Studie mit einbezogen werden. In der Grundauswertung der erhobenen Patientinnencharakteristika zeigte sich überraschenderweise bei lediglich 26 % aller Patientinnen ein positives Nachresektionsergebnis, also in dem Resektat der Nachresektion vorhandene Tumorzellen, des zuvor diagnostizierten und operierten Mammakarzinoms. In 74 % konnten also keine Tumorzellen mehr nachgewiesen werden. Dies haben auch schon andere Autoren beschrieben, es wurde jedoch nicht weiter untersucht. Daher widmet sich diese Studie der Suche nach möglichen Vorhersagewerten, die bei der Einschätzung helfen, ob eine Nachresektion noch notwendig ist oder nicht. Dabei zeigte sich ein signifikantes Ergebnis bei denjenigen Patientinnen, bei denen eine tertiäre Ablatio durchgeführt wurde: Hier fanden sich in fast 95 % der Fälle ein positives Nachresektionsergebnis (p = < 0,001). Ebenfalls auffällig war, dass bei einem Tumor in dem unteren Quadranten der linken Mamma eher positive Nachresektionen gefunden wurden als auf der Gegenseite (46 % vs. 25 %). Obwohl viele verschiedene mögliche Prädiktoren mit einbezogen und ausgewertet wurden, ließen sich keine signifikanten Charakteristika bestimmen, die eine Vorhersage über das Vorhandensein von Tumorzellen und somit eine begründete Nachresektion geben könnten.

Ziel dieser Dissertation ist es, den neuen kombinierten Wirkstoff 2'-Desoxy-5-Fluoruridin-Alendronat (5-FdU-ale) anhand von in vitro und in vivo durchgeführten Versuchen auf seine Wirksamkeit gegenüber der Entstehung und des Wachstums von Knochenmetastasen beim metastasierenden Mammakarzinom zu testen. 5-FdU-ale setzt sich aus dem Zytostatikum 2'-Desoxy-5-Fluoruridin (5-FdU) und dem Aminobisphosphonat Alendronat zusammen. Dieses Molekül vereinigt somit die hohe Knochenaffiniät (bone targeting) des Alendronats und die zytostatische Komponente des 5-FdU in sich und wirkt so potentiell hochspezifisch und mit wenigen systemischen Nebenwirkungen gegen Knochenmetastasen. In vitro wurde an humanen Mammakarzinomzellen einerseits ein Zellviabilitätsassay (MTT-Test) zur Toxizitätsprüfung und andererseits eine FACS-Analyse zur Untersuchung der Auswirkungen der einzelnen Medikamente auf den Zellzyklus durchgeführt. Zur in vivo Evaluation wurde ein kliniknahes Mausmodell verwendet. Den Mäusen wurden zu Versuchsbeginn die humanen Mammakarzinomzellen intrakardial appliziert und so ein metastasierendes Tumorgeschehen imitiert. In wöchentlichen Intervallen wurden den Versuchstieren die Medikamente 5-FdU-ale, 5-FdU oder Alendronat gespritzt. Eine Kontrollgruppe erhielt keine Medikation. Nach 5 Wochen wurden die Tiere euthanasiert, ihre Seren gewonnen und Tibiae und Femora zur histologischen Aufarbeitung präpariert. Die entstandenen Knochenmetastasen der Knieregionen wurden anhand eines histomorphometrischen Verfahrens an histologischen Schnitten analysiert. Knochenstoffwechselparameter wie das osteoblastenspezifische Osteocalcin und die von aktivierten Osteoklasten gebildete Tartrat-resistente saure Phosphatase (TRAP) wurden anhand enzymatischer Immunadsorptionsverfahren aus den Seren der Tiere bestimmt. Die lokale Osteoklastenaktivität an der Tumor-Korikalis-Grenze wurde zusätzlich anhand einer immunhistochemischen TRAP-Färbung der Knochen bestimmt.

Die 137 Patienten dieser Studie (Stadien T1c bis T2b) wurden mit Iod-125 Einzelseeds mit Hilfe von transrektaler Ultraschallbildgebung implantiert. Die Luftkermastärke eines Einzelstrahlers betrug 0,635 cGycm2h-1, die Dosisverschreibung erfolgte gemäß GEC ESTRO Empfehlungen [1] 145 Gy, Dosisberechnungen wurden dem TG-43-Formalismus entsprechend ausgeführt. Vier Wochen nach der Operation erfolgte eine Computertomographie (CT) zur Qualitätssicherung. Die mittlere Nachbeobachtungszeit lag bei 58 Monaten. Es wurde zunächst das biochemisch rezidivfreie Überleben der Patienten nach den ASTRO-Kriterien analysiert. Des Weiteren wurden die Patienten mittels des standardisierten Fragebogens International Prostate Symptome Score (IPSS) zur Erfassung der posttherapeutischen Harntraktfunktionen und der Harntraktsymptom-assoziierten Lebensqualität (LQ) befragt. Die Ergebnisse der Tumorkontrolle und der IPSS-Erhebung wurden mit dosimetrischen und nicht-dosimetrischen Parametern möglicher Relevanz statistisch (Wilcoxon-Rangsummentest) korreliert, um deren Einflüsse zu bewerten.

Zielsetzung: Neben dem Zelltod können Zytostatika verschiedene andere Mechanismen induzieren, die dass biologische Verhalten von Tumorzellen beeinflussen. In der folgenden Untersuchung wurden die pro-Inflammatorischen und pro-Invasiven Chemotherapie(Ctx)-induzierten Effekte auf das NSCLC analysiert. Methoden: Bei 4 NSCLC Zelllinien wurden in Dosiseskalationsuntersuchen die Zytotoxizität von 5 verschieden Zytostatika gemessen (Cisplatin, Etoposid, Gemcitabin, Paclitaxel, 5-FU). Mit den ermittelten Effektivdosen ED 20/50 wurden PI-FACS Zellzyklusanalysen durchgeführt. In Fibroblastenlayer-Invasionsanalysen wurde die Modulation der Invasivität der Tumorzellen durch die Chemotherapie gemessen. In ELISA/Multiplex-FACS-Analysen wurden 16 Proteinen (IL1ß,4,6,8,10,12,TNF,VEGF,MIP1a,1b,Angiogenin,bFGF,FAS-L,uPA,MMP2,7,9) unter Ctx gemessen. In einem SCID Mausmodell wurde nach Ctx neben dem Tumorwachstum in der Tumorextrahierten mRNA semiquantitativ mittels RT-PCR die Expression eine Auswahl der o.g. Gene analysiert. Korrespondierende Analysen wurden bei 30 Patienten (15 ohne/mit neoadjuvanter Ctx) mit einem NSCLC im Stadium IIIA aus reseziertem Tumormaterial durchgeführt. Ergebnis: Die Zelllinien wiesen eine unterschiedliche Sensitivität bzgl. der verschiedenen Zytostatika auf. In den PI-FACS Analysen wurde neben unterschiedlichen Apoptoseraten sowohl ein Zellzyklusarrest in der G1 als auch in der G2-Phase nachgewiesen. Für einzelne Zelllinien/Zytostatika Kombinationen konnte eine gesteigerte Invasivität nachgewiesen werden. In den ELISA/FACS-Analysen ließ sich eine universelle Stimulation von IL-8 nachweisen. Für die anderen Proteine wurde ein Substanz-/Zelllinien-assoziiertes spezifisches Expressions-Profil dargestellt. In den orthotop gewachsen Tumoren ließen sich die Ergebnisse in der RT-PCR-Analyse auf mRNA-Ebene reproduzieren. Auch in den humanen Tumorproben konnte eine erhebliche Ctx-Induzierte Stimulation der mRNA Expression nachgewiesen werden. Schlussfolgerung:Zusammenfassend wurde in in vitro Analysen gezeigt, dass verschiedene Che- motherapeutika Einfluss auf die Expression von inflammationsassoziierten Genen bei NSCLC-Tumorzellen nehmen. Dieses ist substanz-, tumorzellsentitivitäts- und konzentrationsabhängig. Der Effekt konnte auf mRNS-Ebene in vivo sowohl in einem Tiermodell als auch an menschlichen Tumorproben auf mRNS-Ebene verifiziert werden. Die biologische Relevanz dieser Effekte muss in weiterführenden Untersuchungen analysiert werden. Dennoch deuten die Ergebnisse aus den humanen Tumorproben auf eine Prognose relevante Bedeutung hin.

Die vorliegende Arbeit hatte zum Ziel, die Praktikabilität und die klinische Anwendbarkeit von OSNA (One-step Nucleic Acid Amplification) bei der intraoperativen Sentinellymphkno-tendiagnostik zu untersuchen. Es wurden 330 SLN von 143 Patientinnen mit invasivem Mamma-CA intraoperativ analysiert. OSNA detektiert die CK19-Kopienanzahl/µl und teilt anhand derer das Ergebnis wie folgt ein: (-) negativ, (+) Mikrometastase und (++) Makrometastase. Vor dem OSNA-Durchlauf wurde aus dem Zentrum des LN eine 1mm breite Probe zur post-operativen histologischen Untersuchung entnommen. Das restliche Gewebe wurde direkt mit-tels OSNA analysiert und im Falle von Positivität wurde eine Axilladissektion während der gleichen Narkose durchgeführt. Außerdem wurden Korrelationen zwischen klinischen und prognostischen Tumorcharakteris-tika und dem OSNA-Ergebnis ermittelt und der Zeitbedarf der Methode analysiert. 39 der 143 Patientinnen hatten ein OSNA positives Ergebnis. Davon wiesen 22 Makro- und 17 Mikrometasen auf. Im Mittel wurden 34,4 min für die Untersuchung eines LN benötigt. Zwischen Tumorgröße und OSNA-Positivität (p= 0,038) als auch zwischen der Tumorlast im SLN und der Wahrscheinlichkeit im Hinblick auf eine Axillametastasierung (p= 0,011) konn-ten signifikante Korrelationen gefunden werden. Zudem wurde ein Cut-Off-Wert von 7900Kopien/µl ermittelt, bei dem mit einer Sensitivität von 0,90 und einer Spezifität von 0,60 die Wahrscheinlichkeit für Non-SLN-Positivität bestimmt werden kann (Youden-Index: 0,5162). Die vorliegende Studie zeigt, dass OSNA eine klinisch-praktikable Methode zur intraoperati-ven Diagnostik des SLN ist und im weiteren Verlauf auch die Entscheidungsfindung zur Axilladissektion erleichtern kann. Die Möglichkeit ganze LN in kurzer Zeit untersuchen zu können, kann die Arbeitsbelastung der Pathologen aber auch die Rate an Zweitoperationen senken. Außerdem konnte nachgewiesen werden, dass die Tumorlast im SLN mit der Wahr-scheinlichkeit einer Axillametastasierung korreliert (p=0,015). Durch die mittlerweile übliche Planung der adjuvanten Therapie anhand des intrisischen Sub-typs muss der prognostische und therapeutische Stellenwert der ALND bei positiven SLN intensiver untersucht werden, um abschließend über die Bedeutung der SLN-Diagnostik mit-tels OSNA urteilen zu können.