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As hemoglobinopatias estão entre as doenças hereditárias monogênicas mais frequentes mundialmente. Especificamente, a α-talassemia é caracterizada pela redução na síntese de α-globina, comumente causada por deleções que envolvem, parcial ou completamente, o agrupamento gênico HBA, localizado no cromossomo 16 e composto por duas cópias do gene por alelo (HBA1 e HBA2). A gravidade do fenótipo da α-talassemia depende do número de genes afetados. Portadores da deleção de um único gene (-α/αα) são geralmente assintomáticos (portador silencioso), a deleção de dois genes (–/αα ou -α/-α) está associada ao fenótipo de traço talassêmico, com presença de anemia microcítica. A deleção de três genes (–/-α) está associada à doença de hemoglobina H, e a deleção de quatro genes (–/–) está associada a um fenótipo incompatível com a vida, a hidropsia fetal. O diagnóstico das α-talassemias é realizado pela análise de parâmetros clínicos e hematológicos, perfil de hemoglobinas e análise molecular do cluster gênico HBA. Este estudo tem como objetivo caracterizar a frequência e o perfil de variações em número de cópias (CNV) do agrupamento gênico da α-globina, em nosso laboratório, no período de outubro/2023 a julho/2024. A análise de CNVs foi feita por MLPA (Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification) utilizando o kit SALSA MLPA Probemix P140-C1 HBA. Neste período foram analisados 391 pacientes (219 do sexo feminino) com mediana de idade de 23 anos (0 – 93 anos). Foram detectadas CNVs em 239 casos (61,1%), sendo deleção -α3.7 a alteração mais frequente, identificada em 218 casos (91,2%). A deleção -α4.2 foi identificada em cinco casos (2,1%), sendo em dois como deleção única e em três casos com deleção bialélica -α3.7/-α4.2. O predomínio da deleção de 3,7 Kb (-α3.7) em relação a deleção 4,2 Kb (-α4.2) foi observado em estudos anteriores com MLPA e outras técnicas moleculares. Em cinco casos (2,1%) foi identificada a triplicação αααanti3.7. A presença de triplicação do gene da α-globina geralmente é assintomática, mas a concomitância desta alteração e o traço de β-talassemia pode levar a um desequilíbrio mais pronunciado entre as cadeias α e β da globina. Em dois casos (0,8%) foi identificada a deleção de três genes de α-globina, compatível doença de hemoglobina H. As deleções –α20.5 e –FIL ou –THAI foram identificadas em apenas um caso cada. O MLPA não permite a distinção entre os genótipos –FIL e –THAI. Em sete casos (2,9%) foram identificadas deleções envolvendo a região regulatória (HS-40). Em 124 casos (51,9%) foi identificada a deleção de dois genes de α-globina. Deleções de um gene foram identificadas 108 casos (45,2%). A investigação de CNVs pela técnica de MLPA permite a identificação das mutações mais frequentes na α-talassemia. Ainda que a alta prevalência de mutações nesta população esteja relacionada ao perfil de atendimento do laboratório e não represente a população geral, os resultados deste estudo mostram a diversidade de CNVs detectadas no gene de α-globina na amostragem analisada. Além da contribuição para o diagnóstico da α-talassemia, a investigação de CNVs nos genes de α-globina é importante para o aconselhamento genético e prevenção da forma mais grave da doença.

Aim: We describe a case of an obstetric patient, asian, whose Red Blood Cells (RBCs) showed a low expression of the RH:1 antigen in the routine tests and the strategies used for the characterization of an unusual RHD variant. Material and methods: Japanese, 25th weak of pregnancy, showed discrepant results in RhD typing with different anti-D monoclonal antibodies (Clones MS-201/MS26 (Fresenius-Kabi); ESD-1 (Diaclon); Blend MS-201/MS26 (Fresenius-Kabi); P3×61, P3×290, P3×35, P3×61 and P3×21223 B10 (Grifols); RUM-1/ESD1-M (Grifols); D175+D415 (Immucor), NaTH119+LOR-15C9 (Imunoscan). The phenotype C, c, E, e, Cw was performed by Gel Card (DG Gel RH+Kell, Grifols). Screening was performed to detect the most prevalent RHD alelles variants in Asians: RHD*Del1 (c.1227G>A), RHD*DVI.3 (D-CE(3-6)-D); RHD*01.W11 (c.885G>T) and RHD*01.W15 (c.845G>A) according to PCR-Multiplex, PCR-RFLP protocols and Sanger Sequencing method. RHD zygosity genotyping was performed by AS-PCR protocol. The RhD antigen density of the sample was determined by Flow cytometry (Navius EX, Beckman Coulter) using monoclonal IgG anti-D (Clone MS26) and the secondary antibody was goat anti-human IgG, Fab-fragment, FITC-conjugated (Life Technologies). Results: The pregnant women was phenotyped as C+c-E-e+Cw-. Blood sample showed inconsistent hemagglutination reactions (negative/weak/2+) with the anti-D panel. Genomic analyzes defined a single nucleotide change (845G>A) in the exon 6, leading to the amino acid change Gly282Asp located between transmembranous and exofacial RhD protein that is associated with RHD*weak D type 15 phenotype. The low D density found (323 sites/cell) and the hemizigozity status could explain why RHD*01.W15 was mistyped as RhD-negative by some anti-D serum including identification antibody test. Discussion: RHD allele that encodes a protein with very weak expression of the D antigen are rare in asian population. These variations in the RhD antigen structure result either in a D partial, Del and weak D phenotype. Although the frequency of the RHD*01.W15 genotype is relatively common in Japanese populations (16%), this is the first case found in a Japanese pregnant woman detected in our service. Accurate identification of RhD Variants is of great significance for a safe and effective clinical measures to prevent Hemolytic Disease of Newborn (HDN) for women childbearing age. Conclusion: The identification of there rare individuals associated with unusual phenotypes is very important, both for Transfusion purposes and to prevent HDN.

Introdução: A titulação de anticorpos irregulares é um teste semi-quantitativo em que se determinada a concentração de anticorpos presente no soro ou plasma. O teste pode ser realizado em tubo ou em gel-teste, sendo o teste em tubo o procedimento padrão, amplamente validado. Em contrapartida, o teste em gel é uma alternativa mais simples e com potencial de automação. Entretanto, variações de pelo menos dois títulos acima da determinação em tubo são esperadas e a definição de um título clinicamente crítico por esta metodologia ainda não foi estabelecida. Objetivo: O objetivo desse estudo foi comparar o comportamento das metodologias em tubo e gel-teste para titulação de anticorpos. Material e métodos: No período de novembro de 2022 a fevereiro de 2023, foram avaliadas 40 amostras da rotina laboratorial atendendo a dois critérios: 1) Ter havido identificação e titulação de anticorpo irregular; 2) Haver volume excedente. As amostras foram anonimizadas para a análise. Do total de amostras, 24 eram positivas para o anticorpo anti-D, uma para o anti-C, três para o anti-c, três para o anti-E, seis para o anti-K, duas para o anti-Dia e uma para o anti-Fya. Para a titulação dos anticorpos, as amostras foram diluídas e homogeneizadas em solução comercial nas proporções: pura, 1:2, 1:4 e assim sucessivamente até o resultado de leitura negativo. As hemácias usadas para titulação em tubo foram as mesmas usadas para titulação em gel. A leitura foi feita de forma visual em tubo e gel. Todos os reagentes usados foram da Bio-Rad. Resultados: Nove (22%) das 40 amostras analisadas em gel-teste mostraram o mesmo título em relação á metodologia em tubo, 25 (63%) apresentaram variação de 2 títulos e seis (15%) uma variação de 3 títulos.Quando avaliamos os anticorpos específicos, verificamos que para anticorpo anti-D, seis (25%) das 24 amostras não apresentaram variação de título, 15 (62%) apresentaram variação de 2 títulos e três (13%) apresentaram variação de 3 títulos. As amostras positivas para anti-C e anti-Fya tiveram variação de 3 e 2 títulos respectivamente. Duas (40%) das cinco amostras com anti-E tiveram variação de 2 títulos e três tiveram variação de 3 títulos. As duas amostras positivas para anti-Dia tiveram variação de 2 títulos. Para o anti-Kell, duas (33%) das seis amostras não apresentaram variação nos títulos e quatro (67%) apresentaram variação de 2 títulos. Discussão: A variação de título foi observada em grande parte dos anticorpos estudados, sendo que em 15% deles a variação foi superior aos 2 títulos esperados, corroborando dados de estudos que relatam até 5 títulos de diferença em análises similares. Mesmo que 63% dos casos tenham tido a variação esperada, outros 22% tiveram títulos iguais, dificultando o estabelecimento de um padrão. Conclusão: Em conclusão, o uso da metodologia gel-teste para titulação de anticorpos irregulares não guarda correlação linear com a titulação em tubo, dificultando o estabelecimento de um padrão de correspondência em relação à metodologia em tubo. Estudos que determinem valores críticos em gel ainda são necessários, bem como determinação da reprodutibilidade do método, para que a técnica possa ser adotada com segurança. A AABB segue recomendando o uso de metodologia em tubo para a determinação do título de anticorpos irregulares.

Introdução: A doença de Gaucher (DG) é uma desordem genética rara que afeta o metabolismo lipídico, resultando no acúmulo de glicolipídios em diferentes órgãos. É a mais comum das glicoesfingoliposes e a pioneira em receber a terapia por enzimas recombinantes (TRE). Materiais e métodos: Relato de paciente diagnosticado com DG I em 1994, a partir de dados obtidos pelo prontuário e entrevista. Resultados: Homem, 59, portador de DG I, cardiopata, DPOC, DRGE, osteoartrose, diverticulose, amaurose bilateral, hipoacusia afasia e disartria. Em uso de: alenia; milgamma; ossone; imiglucerase. Intervenções cirúrgicas prévias: esplenectomia, colecistectomia e implante de marcapasso definitivo. Em, 2020, o paciente recebeu o diagnóstico de gamopatia monoclonal do tipo lambda. Ao exame físico: presença de numerosos depósitos de glicolipídios em pescoço e face. Cisto em fossa poplítea e atrofia dos pododáctilos à esquerda, com limitação de deambulação. Abdome globoso com circulação colateral, edema no quadrante inferior direito e cicatrizes nos quadrantes superior e inferior esquerdos. Foram realizados 20 exames laboratoriais nos últimos 3 anos, entre estes o cálcio sérico, fosfatase alcalina, biomarcadores renais e vitamina D mantiveram-se normais. Contudo, a cinética de ferro para acompanhamento de anemia não foi rastreada, apesar da série vermelha e branca permanecerem abaixo da normalidade. Para mais, marcadores inflamatórios tiveram média acima do valor de normalidade. Discussão: A DG envolve alterações na via metabólica ou de subproduto. Geneticamente, o erro inato recessivo provém de uma mutação no gene GBA que leva a deficiência da enzima glicocerebrosidase. Contudo, ela não é fator unicamente determinante do fenótipo, atuam também fatores ambientais. Na DG I há envolvimento imune devido um estado pró-inflamatório o que causa um estímulo crônico e alteração da função dos macrógafos, comprometimento ósseo e hepatoesplenomegalia, importantes para aumento das imunoglobulinas e gamopatia monoclonal. A esplenectomia (realizada em 1991 no paciente) é comum devido a repercussões de hiperesplenismo que comprimem estruturas adjacentes. Somado a isso, a colecistectomia sugere complicações endocrinometabólicas da doença. Apesar de diversos exames solicitados, ausentaram-se elementos importantes, como as dosagens séricas de Na, K, Ca, ferritina, vitamina B12, PTT e GGT. Os resultados do tratamento com a imiglucerase trouxeram benefícios ao paciente, reduzindo os impactos da progressão da doença. No momento, o paciente está estável, porém depende de terceiros para atividades de vida diária e recorre de forma constante ao posto de urgência devido a infecções oportunistas. Conclusão: O diagnóstico tardio pelo difícil acesso à saúde e raridade da doença trouxeram consequências importantes: amaurose, asplenia e hepatomegalia. Com relação a DG I com a gamopatia monoclonal, não possuem evidências que comprovem o agravamento do quadro do paciente. Portanto, reconhecer a DG em seu início possibilita a redução de complicações relativas à doença e, por conseguinte, à um prognóstico favorável.

BackgroundCatastrophic fractures are among the most common cause of fatalities in racehorses. Several factors, including genetics, likely contribute to increased risk for fatal injuries. A variant in the procollagen-lysine, 2-oxoglutarate 5-dioxygenase1 gene (PLOD1 c.2032G>A) was shown to cause Warmblood fragile foal syndrome type 1 (WFFS), a fatal recessive defect of the connective tissue. Screening of multiple horse breeds identified the presence of the WFFS allele in the Thoroughbred. PLOD1 is involved in cross-linking of collagen fibrils and thus could potentially increase the risk of catastrophic breakdown.ObjectivesEstimate the frequency of the WFFS allele (PLOD1 c.2032G>A) and determine if it is a risk factor for catastrophic breakdown in the Thoroughbred.Study designCase-control genetic study.MethodsGenomic DNA from hair and/or tissue samples was genotyped for the WFFS allele. Fisher's Exact tests were performed to compare allele and carrier frequencies between the case cohort (catastrophic breakdown, n = 22) and several cohorts with no record of injury (n = 138 raced/trained at same track and season and n = 185 older than 7 years and raced during same season), nonracers (n = 92), and a random sample without consideration for racing history (n = 279).ResultsThe frequency of the PLOD1 c.2032G>A variant in the Thoroughbred breed is low (1.2%). Seventeen of 716 Thoroughbreds tested were carriers (2.4%) and no WFFS homozygotes were detected. Only one catastrophic breakdown case carried the WFFS allele. No statistically significant difference in allele or carrier frequency was identified between case and control cohorts (P>0.05 in all comparisons performed).Main limitationsThis study evaluated cases from one single track.ConclusionsThis study demonstrated that the PLOD1 c.2032G>A associated with WFFS is present at very low frequency in Thoroughbreds and is not a genetic risk factor for catastrophic breakdown.

Cerebellar Abiotrophy (CA) is a neurodegenerative disease in Arabian horses affecting the cerebellum, more specifically the Purkinje neurons. Although CA occurs in several domestic species, CA in Arabian horses is unique in that a single nucleotide polymorphism (SNP) has been associated with the disease. Total RNA sequencing (RNA-seq) was performed on CA-affected horses to address the molecular mechanism underlying the disease. This research expands upon the RNA-seq work by measuring the impact of the CA-associated SNP on the candidate gene MutY homolog (MUTYH) and its regulation, isoform-specific expression and protein localization. We hypothesized that the CA-associated SNP compromises the promoter region of MUTYH, leading to differential expression of its isoforms. Our research demonstrates that the CA-associated SNP introduces a new binding site for a novel transcription factor (Myelin Transcription Factor-1 Like protein, MYT1L). In addition, CA-affected horses show differential expression of a specific isoform of MUTYH as well as different localization in the Purkinje and granular neurons of the cerebellum.

BackgroundThe carrier status of lavender foal syndrome (LFS), cerebellar abiotrophy (CA), severe combined immunodeficiency (SCID), and occipitoatlantoaxial malformation (OAAM1) in foals with juvenile idiopathic epilepsy (JIE) is unknown.Hypothesis/objectivesTo determine the carrier status of LFS, CA, SCID, and OAAM1 in foals with JIE.AnimalsTen foals with JIE.Materials and methodsArchived DNA samples were tested for known genetic mutations causing LFS, CA, SCID, and OAAM1. The inclusion criteria consisted of having been diagnosed with JIE by ruling out other causes of seizures in foals and supported by electroencephalographic examination.ResultsTen Egyptian Arabian horses (5 females and 5 males) were phenotyped as foals with JIE by electroencephalography (EEG). All foals were negative for the genetic mutations that cause LFS, CA, SCID, and OAAM1 except for 1 foal that was a carrier of CA.Conclusions and clinical importanceJuvenile idiopathic epilepsy of Egyptian Arabian foals and LFS appear to be phenotypically and genetically distinct disorders. There was no apparent association between JIE and LFS, CA, SCID, and OAAM1.

In the horse, the term occipitoatlantoaxial malformation (OAAM) is used to describe a developmental defect in which the first cervical vertebra (atlas) resembles the base of the skull (occiput) and the second cervical vertebra (axis) resembles the atlas. Affected individuals demonstrate an abnormal posture and varying degrees of ataxia. The homeobox (HOX) gene cluster is involved in the development of both the axial and appendicular skeleton. Hoxd3-null mice demonstrate a strikingly similar phenotype to Arabian foals with OAAM. Whole-genome sequencing was performed in an OAAM-affected horse (OAAM1) and seven unaffected Arabian horses. Visual inspection of the raw reads within the region of HOXD3 identified a 2.7-kb deletion located 4.4 kb downstream of the end of HOXD4 and 8.2 kb upstream of the start of HOXD3. A genotyping assay revealed that both parents of OAAM1 were heterozygous for the deletion. Additional genotyping identified two of 162 heterozygote Arabians, and the deletion was not present in 371 horses of other breeds. Comparative genomics studies have revealed that this region is highly conserved across species and that the entire genomic region between Hoxd4 and Hoxd3 is transcribed in mice. Two additional Arabian foals diagnosed with OAAM (OAAM 2 and 3) were genotyped and did not have the 2.7-kb deletion. Closer examination of the phenotype in these cases revealed notable variation. OAAM3 also had facial malformations and a patent ductus arteriosus, and the actual malformation at the craniocervical junction differed. Genetic heterogeneity may exist across the HOXD locus in Arabian foals with OAAM.

Equine cerebellar abiotrophy (CA) is a hereditary neurodegenerative disease that affects the Purkinje neurons of the cerebellum and causes ataxia in Arabian foals. Signs of CA are typically first recognized either at birth to any time up to 6 months of age. CA is inherited as an autosomal recessive trait and is associated with a single nucleotide polymorphism (SNP) on equine chromosome 2 (13074277G>A), located in the fourth exon of TOE1 and in proximity to MUTYH on the antisense strand. We hypothesize that unraveling the functional consequences of the CA SNP using RNA-seq will elucidate the molecular pathways underlying the CA phenotype. RNA-seq (100 bp PE strand-specific) was performed in cerebellar tissue from four CA-affected and five age-matched unaffected horses. Three pipelines for differential gene expression (DE) analysis were used (Tophat2/Cuffdiff2, Kallisto/EdgeR, and Kallisto/Sleuth) with 151 significant DE genes identified by all three pipelines in CA-affected horses. TOE1 (Log2(foldchange) = 0.92, p = 0.66) and MUTYH (Log2(foldchange) = 1.13, p = 0.66) were not differentially expressed. Among the major pathways that were differentially expressed, genes associated with calcium homeostasis and specifically expressed in Purkinje neurons, CALB1 (Log2(foldchange) = -1.7, p

Introdução: Estudos apontam relação entre grupos sanguíneos e diversas condições clínicas como, por exemplo, eventos trombóticos, doença de von Willebrande doenças infecciosas como SARS-CoV-1, H. pylori entre outros. Associação entre maior susceptibilidade à COVID-19 e pior evolução em indivíduos do grupo sanguíneo A vem sendo estudada por diversos grupos. Objetivo: Neste estudo, analisamos a correlação entre os grupos sanguíneos ABO e resultado do teste para o vírus SARS-CoV-2 por RT-PCR em um laboratório de análises clínicas com grande fluxo de amostras representativas das cinco regiões do Brasil. Material e métodos: Os dados foram obtidos do banco de dados do laboratório referente a 20 anos de registro, analisados de forma anonimizada e de acordo com as regras que regem a lei geral de proteção de dados (LGPD). Os registros possuem um identificador numérico único que leva em conta CPF e data de nascimento e todas as análises foram feitas considerando-se esta identificação. Foram obtidas as tipagem sanguínea ABO/Rh e os resultados de RT-PCR para SARS-CoV-2. Para este último, os indivíduos foram classificados “covid-positivo”quando ao menos um exame resultou positivo. Os demais foram considerados “covid-negativo”. As análises foram realizadas no banco de dados obtido do cruzamento do banco de indivíduos únicos com tipagem sanguínea e ao menos um teste para COVID-19. Análise estatística foi realizada do teste chi-quadrado de Pearson e V-quadrado de Cramér. Resultados e discussão: Foram identificados 66.181 indivíduos que realizaram tipagem sanguínea e ao menos um teste para SARS-CoV-2. A distribuição global dos grupos ABO é a que segue: grupo O 44%, grupo A 41%, grupo B 11% e grupo AB 4%, compatível com a distribuição dos grupos no Brasil (O 45%, A 42%, B 10% e AB 3%).Do total de indivíduos estudado, 21% (13.617) apresentou ao menos um resultado positivo para SARS-CoV-2, distribuídos da seguinte forma por grupo sanguíneo: tipo O 42%, A 42%, B 12% e AB 4%. A distribuição dos grupos sanguíneos entre os indivíduos negativos para SARS-CoV-2 foi: tipo O 44%, A 41%, B 11% e AB 4%. As análises consideraram grupo ABO e Rh. Foi realizado um teste chi-quadrado de independência de variáveis e verificou-se associação positiva entre o tipo sanguíneo e a infecção por COVID-19 (χ2 = 27,273, df = 7, p = 0,0002975).O teste pós-hoc de comparação entre status de COVID-19 e tipo sanguíneo sugere associação entre o tipo B- e infecção por COVID-19 (p = 0.0407700).Entretanto, este dado não foi confirmado por análise adicional pelo teste V de Cramér, sugerindo que o efeito observado está provavelmente associado ao grande número de amostras do que uma associação real entre as variáveis.Sabe-se que a testagem para COVID-19 pode resultar em falso negativo quando realizada fora da janela de maior sensibilidade para detecção do vírus. Deve-se considerar que, na presente análise, a informação sobre início dos sintomas e data de realização do teste não está disponível. Entretanto, o grande número de casos analisados diminui o impacto da ausência desta informação. Outro ponto importante a ser considerado é que não foram avaliados parâmetros de evolução clínica dos pacientes, sendo os dados restritos à presença ou não de diagnóstico positivo para COVID-19. Conclusão: Não foi demonstrada associação entre o tipo sanguíneo e a suscetibilidade a infecções por COVID-19 no grupo analisado.

Coat colours and patterns are highly variable in cats and are determined mainly by several genes with Mendelian inheritance. A 2-bp deletion in agouti signalling protein (ASIP) is associated with melanism in domestic cats. Bengal cats are hybrids between domestic cats and Asian leopard cats (Prionailurus bengalensis), and the charcoal coat colouration/pattern in Bengals presents as a possible incomplete melanism. The complete coding region of ASIP was directly sequenced in Asian leopard, domestic and Bengal cats. Twenty-seven variants were identified between domestic and leopard cats and were investigated in Bengals and Savannahs, a hybrid with servals (Leptailurus serval). The leopard cat ASIP haplotype was distinguished from domestic cat by four synonymous and four non-synonymous exonic SNPs, as well as 19 intronic variants, including a 42-bp deletion in intron 4. Fifty-six of 64 reported charcoal cats were compound heterozygotes at ASIP, with leopard cat agouti (A(P) (be) ) and domestic cat non-agouti (a) haplotypes. Twenty-four Bengals had an additional unique haplotype (A2) for exon 2 that was not identified in leopard cats, servals or jungle cats (Felis chaus). The compound heterozygote state suggests the leopard cat allele, in combination with the recessive non-agouti allele, influences Bengal markings, producing a darker, yet not completely melanistic coat. This is the first validation of a leopard cat allele segregating in the Bengal breed and likely affecting their overall pelage phenotype. Genetic testing services need to be aware of the possible segregation of wild felid alleles in all assays performed on hybrid cats.

Anorexia nervosa (AN) is a complex and heritable eating disorder characterized by dangerously low body weight. Neither candidate gene studies nor an initial genome-wide association study (GWAS) have yielded significant and replicated results. We performed a GWAS in 2907 cases with AN from 14 countries (15 sites) and 14 860 ancestrally matched controls as part of the Genetic Consortium for AN (GCAN) and the Wellcome Trust Case Control Consortium 3 (WTCCC3). Individual association analyses were conducted in each stratum and meta-analyzed across all 15 discovery data sets. Seventy-six (72 independent) single nucleotide polymorphisms were taken forward for in silico (two data sets) or de novo (13 data sets) replication genotyping in 2677 independent AN cases and 8629 European ancestry controls along with 458 AN cases and 421 controls from Japan. The final global meta-analysis across discovery and replication data sets comprised 5551 AN cases and 21 080 controls. AN subtype analyses (1606 AN restricting; 1445 AN binge-purge) were performed. No findings reached genome-wide significance. Two intronic variants were suggestively associated: rs9839776 (P=3.01 × 10(-7)) in SOX2OT and rs17030795 (P=5.84 × 10(-6)) in PPP3CA. Two additional signals were specific to Europeans: rs1523921 (P=5.76 × 10(-)(6)) between CUL3 and FAM124B and rs1886797 (P=8.05 × 10(-)(6)) near SPATA13. Comparing discovery with replication results, 76% of the effects were in the same direction, an observation highly unlikely to be due to chance (P=4 × 10(-6)), strongly suggesting that true findings exist but our sample, the largest yet reported, was underpowered for their detection. The accrual of large genotyped AN case-control samples should be an immediate priority for the field.

Mike Taylor,1 George Ousler,2 Gail Torkildsen,3 Claire Walshe,1 Matthew C T Fyfe,1 Adele Rowley,1 Steve Webber,1 John D Sheppard,4 Ajay Duggal1 1TopiVert Pharma Limited, London, UK; 2Ora Inc., Andover, MA, USA; 3Andover Eye Associates, Andover, MA, USA; 4Virginia Eye Consultants, Norfolk, VA, USA Purpose: To evaluate the safety and efficacy of topical TOP1630, a novel nonsystemic kinase inhibitor, in dry eye disease (DED).Patients and methods: A randomized, double-masked, parallel-group trial of 0.1% TOP1630 ophthalmic solution TID or placebo (vehicle without active drug) was conducted in DED subjects (n=61). Key eligibility criteria consistent with enrolling a moderate to severe DED population included >6 months DED history; OSDI© score ≥18; Schirmer’s test score ≤10 and ≥1 mm/5 minutes; tear film break-up time >1 and

Background: A key challenge for conservation biologists is to determine the most appropriate demographic and genetic management strategies for wildlife populations threatened by disease. We explored this topic by examining whether genetic background and previous pathogen exposure influenced survival of translocated animals when captive-bred and free-ranging bighorn sheep (Ovis canadensis) were used to re-establish a population that had been extirpated in the San Andres Mountains in New Mexico, USA.Results: Although the free-ranging source population had significantly higher multi-locus heterozygosity at 30 microsatellite loci than the captive bred animals, neither source population nor genetic background significantly influenced survival or cause of death. The presence of antibodies to a respiratory virus known to cause pneumonia was associated with increased survival, but there was no correlation between genetic heterozygosity and the presence of antibodies to this virus.Conclusions: Although genetic theory predicts otherwise, increased heterozygosity was not associated with increased fitness (survival) among translocated animals. While heterosis or genetic rescue effects may occur in F1 and later generations as the two source populations interbreed, we conclude that previous pathogen exposure was a more important marker than genetic heterozygosity for predicting survival of translocated animals. Every wildlife translocation is an experiment, and whenever possible, translocations should be designed and evaluated to test hypotheses that will further improve our understanding of how pathogen exposure and genetic variability influence fitness. © 2011 Boyce et al; licensee BioMed Central Ltd.

Stenotrophomonas maltophilia is a Gram-negative bacillus found as a free-living organism in most aquatic and humid environments including hospital drinking water, and often associated with nosocomial infections. It is an uncommon cause of infective endocarditis. In Sri Lanka there are no reported cases in literature.Here we report a 46 years old patient who presented with fever following Percutaneous Trans Mitral Commissurotomy (PTMC). He was diagnosed as an acute mitral valve endocarditis based on echocardiograph findings and 2 blood cultures taken 6 hours apart which grew Stenotrophomonas maltophilia. The patient responded rapidly to targeted antibiotic treatment with piperacillin tazobactam and oral cotrimoxazole for 4 weeks and a further 2 weeks of cotrimoxazole. He remained well at the 3 month follow up.There is limited information on the best choice of antibiotics and the ideal duration of treatment. Early diagnosis and identification of the organism, prompt treatment with appropriate antibiotics and close collaboration between the clinical and laboratory teams contributed towards the successful management of this case.