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Disertación de maestría presentada en el Programa de Posgrado en Biodiversidad Neotropical, del Instituto Latinoamericano de Ciencias de la Vida y la Naturaleza, en la Universidad Federal de Integración Latinoamericana (UNILA), como requisito para la obtención del título de Máster en Biodiversidad Neotropical. Se realizó el levantamiento de la ictiofauna de la Cuenca del Paraná 3 (BP3, abreviatura en portugués), para evaluar las variables ambientales en diferentes categorías espaciales que estarían determinando la diversidad de peces en la cuenca, ya que los factores ambientales y espaciales se conocen como los principales determinantes de la variación en los ensamblajes en los organismos acuáticos, además de los factores de uso y ocupación del suelo, que pueden interactuar con los procesos locales y regionales para regular los patrones de estructura comunitaria. Así, los objetivos de este trabajo fueron: Caracterizar la riqueza y abundancia (absoluta y relativa) de la ictiofauna de la BP3; y, determinar, cual o cuales variables ambientales de diferentes categorías espaciales afectan el ensamblaje de peces. Para lo cual se seleccionó 17 locales de colecta a lo largo de la BP3 con diferentes porcentajes de uso y ocupación de suelo. Fueron colectados 17 variables ambientales que representaban tres categorías espaciales determinadas como: Paisaje, estructura del riachuelo y físico químico del agua, junto con predictores espaciales como covariable (valores obtenidos de autovectores espaciales, del analizando los dbMEMs). Se registró 5474 individuos pertenecientes a 39 especies. Con apenas 7 especies más abundantes dentro de la cuenca, siendo estas: Heptapterus mustelinus, Ancistrus sp, Bryconamericus aff. iheringii, Trichomycterus davisi, Psalidodon aff. paranae, Characidium aff. zebra,y Knodus moenkhausii, y 32 especies con menos de 165 individuos. Considerando el conjunto de variables ambientales utilizadas para evaluar que categoría espacial (paisaje, estructura del riachuelo, físico-químico) determina la ictiofauna de la cuenca, no fue alcanzado, al parecer siendo una configuración de estructuración espacial por algún factor ambiental, según el análisis de Partición Jerárquica. Sin embargo, la variable área de agricultura (AGRI), es la que tiene mayor influencia en determinar la composición de la ictiofauna de la cuenca que es bastante modificada para el uso agropecuario en el último siglo, según los resultados encontrados con el Análisis de Redundancia Canónica (RDA) con Pr(>F) = 0.04 de significancia estadística.