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[ES] La industria porcina tiene un papel relevante para la economía española. Es la principal actividad ganadera y supone alrededor del 15% de la Producción final agraria. Este nivel de producción demanda, por un lado, grandes cantidades de piensos compuestos para la alimentación de la cabaña y, genera, por otro lado, grandes volúmenes de purín que pueden impactar en el medio ambiente, si no son correctamente gestionados. La alimentación en las explotaciones ganaderas supone entre un 60-80% de los costes de producción, e influye directamente en el rendimiento productivo y la calidad del producto final. La adquisición de materias primas convencionales para la fabricación de piensos, que incluye el cultivo, procesado y transporte, contribuye a diversos impactos ambientales como la deforestación, la extracción de fósforo del suelo, así como un aumento de las emisiones de gases de efecto invernadero y amoníaco, con lo que se acrecienta el impacto medioambiental de los piensos. La implementación de estrategias de alimentación que introduzcan subproductos agroindustriales de origen local puede contribuir a mitigar el impacto ambiental mejorando la sostenibilidad económica, social y medioambiental de la producción porcina. Los objetivos de este estudio son dos; por un lado, estudiar los parámetros productivos, tales como, la ganancia de peso, el crecimiento diario, la eficiencia de transformación y el engorde; y, por otro, estudiar la composición del purín, la cantidad generada y las emisiones de amoníaco durante el almacenamiento del purín producido a partir de las dietas con orujo de aceituna y bagazo de cerveza. Para ello, se formularon 3 dietas (T1=control; T2=15% de orujo de aceituna; T3=20% de bagazo de cerveza) para la alimentación de cerdos de cebo desde los 70 a los 120 kilogramos de peso. Se incluyeron en el estudio 120 animales, 40 por tratamiento. En ellos se midieron los parámetros productivos de peso medio inicial y final, la ganancia media diaria, consumo medio diario, índice de conversión, grasa dorsal inicial y final, profundidad de lomo, ganancia media de grasa y de lomo. Para el ensayo de emisiones del purín, se determinó los parámetros de volumen, pH, materia seca, materia orgánica y emisión de amoníaco. En los resultados obtenidos se muestra que la inclusión de subproductos no afectó a los rendimientos productivos y no se hallaron diferencias significativas en la ganancia de peso, en el crecimiento diario, en la eficiencia de transformación ni en el engorde. Por otra parte, el potencial de emisión del NH3 se vio reducido en dietas con subproductos respecto al control durante el almacenamiento del purín. Estos subproductos suponen una alternativa interesante que puede ser utilizada como estrategia de reducción del impacto ambiental sin repercutir negativamente en el rendimiento de crecimiento de los cerdos. Además, estos resultados demuestran que es posible el uso materias primas alternativas locales, como son los subproductos agroindustriales estudiados en la formulación de dietas para cerdos de engorde, pudiéndose reducir el uso de cereales y soja convencionales. Esto promueve la economía circular de la zona y puede tener un efecto positivo en la sostenibilidad de los piensos., [EN] The pork industry plays an important role in the Spanish economy. It is the main livestock activity and accounts for about 15% of the Final Agricultural Production. This level of production requires, on the one hand, large quantities of compound feeds and, on the other hand, generates large volumes of slurry that can have an impact on the environment if not correctly managed. Feeding on livestock farms accounts for 60-80% of production costs, directly influencing production performance and the quality of the final product. The procurement of conventional raw materials for feed manufacturing including cultivation, processing and transportation contributes to various environmental impacts such as deforestation, phosphorus extraction from the soil, as well as an increase in greenhouse gases and ammonia emissions, increasing the environmental impact animal production. Implementing feeding strategies that include locally sourced agro-industrial by-products can contribute to mitigate the environmental impact by improving the economic, social and environmental sustainability of swine production. The objectives of this study are, on the one hand, to study productive parameters such as weight gain, daily growth, processing efficiency and fattening and; and on the other hand, to study the composition of slurry, the amount generated and ammonia emissions during storage of slurry produced from diets with olive cake and brewer¿s by-products. For this purpose, 3 diets (T1=control; T2=15% olive cake; T3=20% brewer¿s spent grains) were formulated for feeding fattening pigs from 70 to 120 kilograms of weight. A total of 120 animals were included in the study, 40 per treatment. The productive parameters of average initial and final weight, average daily gain, average daily intake, feed conversion rate, initial and final backfat, loin depth, average fat and loin gain were measured. And for slurry, the parameters of volume, pH, dry matter, organic matter and ammonia emissions were determined. The results obtained show that the inclusion of by-products did not affect production yields, as no significant differences were found in weight gain, daily growth, processing efficiency and fat gain. On the other hand, the NH3 emission potential was reduced in diets with by-products compared to the control during slurry storage. As a conclusion we could state that these by-products represent an interesting alternative as a strategy to reduce environmental impact without negatively impacting pig growth performance. In addition, these results suggest that it is possible to use alternative local raw materials, such as agro-industrial by-products studied in the formulation of diets for fattening pigs, thus reducing the use of conventional cereals and soybean meals. This promotes local circular economy and can have a positive impact in feed sustainability.

Es de conocimiento mundial el daño que puede causar la Salmonella spp. en humanos y animales, una problemática muy común es la infección que puede ocasionar, con sólo llevarse las manos contaminadas con Salmonella spp. a la boca. Comercialmente existe una variedad de piensos para animales domésticos (Canis lupus familiaris & Felis catus) que son expuestos a diversos factores ambientales, que una vez abierto el empaque, se genera contaminación directa en la fábrica, obteniendo errores de control sanitario en el proceso de producción. La alimentación con croquetas a las mascotas y las costumbres a consumir nuestra comida no siempre es apta para los animales. Es regular, el consumo de carne de pollo (Gallus gallus domesticus), proceso de envasado y comercialización de este producto, llevando a condiciones de presencia de salmonella spp. En la comida, causando daño no solo a los humanos, sino, también, a sus mascotas. El objetivo fue constatar la presencia de salmonella spp. en piensos comerciales para gatos y perros mediante el uso de un kit petrifilm, donde, se determinó, porcentajes de humedad y presencia de salmonella spp, también, se presentó, una tabla de frecuencias acerca de los promedios obtenidos del patógeno con la carne de pollo, mediante el uso de un kit GDS, para presencia de salmonella spp. en pollo fresco y de cadena fría.

Universidad Nacional Agraria La Molina. Escuela de Posgrado. Doctorado en Ciencia Animal Aflatoxina M1 (AFM1) es una micotoxina carcinógena y hepatotóxica, mientras que Zearalenona (ZEA) es un disruptor endócrino por su capacidad de adoptar una configuración similar al 17-beta-estradiol. El objetivo de la investigación fue determinar la presencia de estas micotoxinas, y sus factores de riesgo, en leche cruda del centro-norte de Ecuador. Se recolectaron 209 muestras durante la época seca (junio y agosto) y lluviosa (abril y noviembre) de 2019. Las concentraciones de AFM1 se midieron con ensayos inmunocromatográficos de flujo lateral, mientras que ZEA por ELISA. El 100 por ciento de las muestras contenían AFM1, con una media de 0.0774 μg/kg (0.023 - 0.751 μg/kg), excediendo el límite regulatorio europeo (0.05 μg/kg) en el 59.3 por ciento (124/209) de las muestras, mientras que el 1.9 por ciento (4/209) excedió el límite legal ecuatoriano (0.5 μg/kg). ZEA se encontró en el 99.5 por ciento de las muestras (208/209), con una media de 1.5 μg/kg (0 – 10.2 μg/kg), en niveles muy por debajo de los límites máximos permitidos por la legislación internacional (30 a 1000 μg/kg). Se usaron pruebas no paramétricas, donde los resultados de ZEA no variaron significativamente (p0.05) por cantones, provincias, clima, región climática, tipos de productores, sistemas de producción. Para AFM1, existieron diferencias significativas (p≤0.05) entre provincias (mayor Manabí), meses de estudio (junio), época climática (época seca) y región climática (región costera). Para determinar factores de riesgo en relación a la aparición de AFM1 en leche, se utilizó un ajuste de modelo lineal por mínimos cuadrados ponderados, encontrándose que el consumo de leguminosas, uso de ensilaje, sistema de producción intensivo y los grandes productores presentaron niveles más altos de AFM1. Si bien la contaminación por ZEA y AFM1 en la leche cruda no rebasa los límites permitidos por la legislación ecuatoriana, pero debido a su presencia, es necesario desarrollar un programa de vigilancia continua de estas micotoxinas. Aflatoxin M1 (AFM1) is a carcinogen and hepatoxic mycotoxin, whereas Zearalenone (ZEA) is an endocrine disruptor due to its capacity to adopt a similar configuration to 17-betaestradiol. The objective of the research was to determine the presence of these mycotoxins, and their risk factors, in raw milk in North-center Ecuador. 209 samples were collected during the dry season (June and August) and rainy season (April and November) in 2019. The concentrations of AFM1 were measured through immunochromatographic lateral flow assays, while ZEA through ELISA. 100 percent of the samples contained AFM1, with a median of 0.0774 μg/kg (0.023 – 0.751 μg/kg), exceeding the European regulatory limit (0.05 μg/kg) in 59.3 percent (124/209) of the samples. While 1.9 percent (4/209) exceeded the Ecuadorian legal limit (0.5 μg/kg). ZEA was found in 99.5 percent of the samples (208/209), with a median of 1.5 μg/kg (0 – 10.2 μg/kg), in levels far below the maximum limits allowed by international legislation (30 to 1000 μg/kg). Non-parametric tests were used, where the results of ZEA did not vary significantly (p0.05) by cantons, provinces, climate, climatic region, types of producers, production systems. For AFM1, there were significant differences (p≤0.05) within provinces (highest in Manabí), months of study (June), climatic season (dry season) and climatic region (coastal region). In order to determine risk factors regarding the appearance of AFM1 in milk, an adjustment was made through the weighted least squares model, it was found that the consumption of legumes, use of ensilage, intensive production system and the major producers presented higher levels of AFM1. Although the contamination by ZEA and AFM1 in raw milk does not exceed the limits allowed by Ecuadorian legislation, but due to their presence, a continuous vigilance program for these mycotoxins should be developed.

The objective of this research was to determine the effect of the carbohydrate source and the legume species on fiber quality, gas production and methane concentration in silage. The experiment was carried out between August 2015 and February 2016. A 4x4 factorial design was used, with four legumes (Vigna unguiculata, Arachis pintoi, Cratylia argentea, Erythrina poeppigiana) and 4 sources of carbohydrates (sugar cane molasses, dried citrus pulp, ground corn and Square banana [GC]). Microsilos were used, which were stored for 50 days and indicators of interest were measured at the opening. The information analysis was made using linear and mixed models. It was determined that, the mixtures ensiled with shrub legumes generated higher fiber content, although of lower quality, due to a higher content of lignin compared to the silage of herbaceous legumes. On the other hand, the CG was the source of carbohydrates that altered the quantity and quality of the fiber in the silage, due to the higher content of NDF and lignin of the fruit. These variations in the quality and quantity of the fiber influenced PGas production (ml/gDM) while, methane production (L/kgDM) in the gas was affected by the quality of the fiber and the content of condensed tannins in the forage. In conclusion, the species and the source of carbohydrates generate differences in the quantity and quality of the fiber, which affects the gas production and methane concentration of the legume silage. This is how the silage of Arachis or Erythrina combined with ground corn was the one with the lowest production and concentration of methane. El objetivo de esta investigación fue determinar el efecto de la fuente de carbohidratos y la especie de leguminosa sobre la calidad de la fibra, producción de gas y la concentración de metano en ensilados. El experimento se realizó entre agosto 2015 y febrero 2016. Se utilizó un diseño factorial 4x4, con cuatro leguminosas (Vigna unguiculata, Arachis pintoi, Cratylia argentea, Erythrina poeppigiana) y 4 fuentes de carbohidratos (melaza de caña de azúcar, pulpa de cítricos deshidratada, maíz molido y guineo cuadrado [GC]). Se utilizaron microsilos, que fueron almacenados por 50 días y en la apertura se midieron los indicadores de interés. El análisis de la información se realizó por medio de modelos lineales y mixtos. Se determinó que en promedio las mezclas ensiladas con leguminosas arbustivas generaron mayor contenido de fibra, aunque de menor calidad, debido a un mayor contenido de lignina en comparación con los ensilados de leguminosas herbáceas. Por otra parte, el GC fue la fuente de carbohidratos que alteró la cantidad y calidad de la fibra en los ensilados, debido al mayor contenido de FDN y lignina del fruto. Estas variaciones en la calidad y cantidad de la fibra influenciaron la producción de gas (ml/gMS), mientras que la producción de metano (L/kgMS) en el gas fue afectada por la calidad de la fibra y el contenido de taninos condensados en el forraje. En conclusión, la especie y la fuente de carbohidratos generan diferencias en la cantidad y calidad de la fibra, lo que a su vez repercute sobre la producción de gas y concentración de metano de los ensilados de leguminosas. Es así como los ensilados de Arachis oErythrina combinados con maíz fueron los de menor producción y concentración de metano.

Para ajustar las dietas a las necesidades de los animales es necesario conocer el valor nutritivo de los alimentos a través del coeficiente de digestibilidad. La digestibilidad de la proteína bruta (PB) se determina a nivel ileal, generalmente con experimentos in vivo, que implican un elevado coste económico y de tiempo, así como la utilización de animales. El objetivo de este trabajo fue validar una metodología para la caracterización proteica de materias primas y subproductos para la fabricación de piensos, alternativa a la determinación in vivo para ganado porcino.

En el presente trabajo se plantea el interés de incrementar el valor nutricional de una Clorofita (Ulva ohnoi) como ingrediente potencialmente utilizable en piensos para acuicultura mediante un pretratamiento enzimático con carbohidrasas. Dicho tratamiento sería equivalente a los que se llevan a cabo con objeto de hidrolizar los polisacáridos no amiláceos en materias primas vegetales utilizadas en piensos para animales terrestres. Para ello, se evaluó tanto un preparado enzimático comercial como un extracto procedente de la glándula digestiva del gasterópodo Patella vulgata, rico en distintas carbohidrasas (xilanasa, β-1,3-glucanasa y β-1,4-glucanasa). La optimización de las condiciones de hidrólisis se llevó a cabo mediante un diseño factorial que consideró el efecto de distintos factores (dosis, tiempo de incubación y humedad) tanto sobre la hidrólisis de carbohidratos como sobre la actividad de compuestos con capacidad antioxidante presentes en Ulva. Se encontró que ambos preparados enzimáticos hidrolizaban parcialmente los polisacáridos presentes en la macroalga, aunque los factores con efecto significativo en cada caso fueron diferentes; dosis y tiempo de incubación para la enzima comercial y tiempo de incubación y humedad para el extracto de Patella. No obstante, en ambos casos el tratamiento enzimático afectó de manera negativa a la capacidad antioxidante inicialmente presente en la harina de Ulva. Por último, se evaluaron los cambios en la biodisponibilidad digestiva de los antioxidantes y los carbohidratos resultantes del tratamiento con el preparado comercial, al incluir la harina de alga como ingrediente en piensos para dos peces marinos, Sparus aurata y Mugil cephalus, empleando para ello un sistema de modelización in vitro de la digestión en ambas especies.

[spa] La correcta formulación de piensos es esencial para conseguir dietas que aporten al animal niveles equilibrados de nutrientes, a la vez que se consiga una eficiencia en la producción animal mediante piensos con palatabilidad adecuada, y todo ello, a un precio competitivo. La grasa se considera uno de los ingredientes más relevantes en los piensos, cuyo valor esencial viene dado por el aporte de energía en la dieta a la vez que es una fuente importante de vitaminas liposolubles y ácidos grasos esenciales. En el mercado pueden encontrarse distintos ingredientes grasos de precios diferentes que varían en composición y calidad, lo que acaba repercutiendo en su valor energético. De forma convencional, las grasas y aceites crudos son los que han sido utilizados en la formulación de piensos. Pero en la actualidad, el interés por la sostenibilidad ha promovido la utilización de subproductos de la industria alimentaria en alimentación animal, de forma que se valoricen y se consiga un beneficio ambiental y económico. Es aquí donde se centra el primer objetivo de esta Tesis Doctoral, en la necesidad de caracterizar algunos de los subproductos obtenidos en la refinación de aceites y grasas comestibles de origen vegetal, los aceites ácidos (AA) y ácidos grasos destilados (AGD), estableciendo los parámetros de control críticos para su uso en alimentación animal. Se ha observado tanto una alta variabilidad en su composición, como una relación entre la composición y calidad de los AA y AGD con el proceso de obtención (refinación química o física) de estos, así como, con el origen botánico del aceite crudo del que proceden. Además de su caracterización, para avanzar en el estudio de estos subproductos y su potencial como ingredientes de las dietas animales, es de gran relevancia conocer cómo afecta la inclusión de estos subproductos en los piensos en cuanto a composición y estabilidad hidrolítica y oxidativa de los mismos. Estos aspectos se han abordado mediante un estudio que compara piensos formulados con AA y AGD (de diferente origen botánico) y sus respectivos aceites crudos y refinados, fabricados según tres procesos tecnológicos distintos y almacenados a diferentes tiempos y temperaturas. Los principales resultados mostraron que la formulación de piensos con subproductos ricos en ácidos grasos libres (AA y AGD) no supone un problema relevante en la hidrólisis lipídica ni en la estabilidad oxidativa, sin embargo, la formulación con aceites crudos y refinados de piensos en forma de harina podría resultar en un contenido de ácidos grasos libres (AGL) mucho mayor de lo esperado. Finalmente, se ha estudiado cómo se ve afectada la composición y estabilidad oxidativa de la fracción grasa de la carne de pollo mediante un estudio in vivo donde se alimentaron animales con subproductos ricos en AGL de diferente origen botánico (soja y palma) y con sus correspondientes grasas crudas o refinadas. La carne obtenida no presentó diferencias significativas entre un subproducto y sus correspondientes grasas crudas y refinadas, pero si en función del origen botánico de estos ingredientes grasos., [eng] In general, to achieve a greater efficiency in animal production, the correct formulation is essential to get diets that provide the animal with balanced levels of nutrients, as well as palatable diets to ensure efficient growth performance, and all at a competitive price. Fat is considered one of the most relevant ingredients in animal feeds, whose essential value is given by its energetic value, at the same time that it is an important source of fat-soluble vitamins and essential fatty acids. Different fatty ingredients at different prices can be found on the market, varying in composition and quality, and thus, in their energy value. Traditionally, crude fats and oils have been used in feed formulation. However, at present, interest in sustainability has promoted the use of by-products from the food industry, to valorize them and to achieve environmental and economic benefits. It is here where the first objective of this thesis focuses, on the need to characterize some by-products obtained from refining of edible vegetable oils and fats, the acid oils (AO) and fatty acid distillates (FAD). A high variability in their composition and a relationship between the refining process (chemical or physical refining) as well as the botanical origin and the final composition and quality of the AO and FAD has been observed. In addition to their characterization, to progress in the study of these by-products and their potential as feed ingredients, it is of great relevance to know how the inclusion of these by-products in feed affects their composition and hydrolytic and oxidative stability. All these aspects have been addressed in another study which compared feeds formulated with AO and FAD (of different botanical origin) and their corresponding crude and refined oils, produced by three different technological manufacturing processes and stored at different times and temperatures. The main results have shown that the formulation of feeds with by-products rich in free fatty acids (AO and FAD) did not pose a relevant problem of lipid hydrolysis or oxidative stability, whereas the formulation with crude and refined oils could result in a higher than expected free fatty acid (FFA) content in mash feeds. Finally, broilers were fed with feeds formulated with by-products rich in FFA of different botanical origin (soybean or palm) or their corresponding crude and refined oils, to study how the composition and oxidative stability of the lipid fraction of chicken meat was affected. The meat obtained did not show significant differences between a by-product and its corresponding raw and refined oils, but rather depending on the botanical origin of these fat ingredients.

La historia de la gestión del agua de riego en esta región está marcada por conflictos que en la actualidad parecieran seguir sin resolverse. Este devenir histórico, el entramado biofísico complejo y sistemas productivos y socio-ecológicos dinámicos hacen necesarios estudios que aborden al territorio desde múltiples perspectivas. En el caso del presente trabajo, se reconoce la necesidad de recuperar y reconocer las experiencias, opiniones y percepciones de usuarios y usuarias del sistema de riego del VIRCH, con la intención de que sea el puntapié para que la gestión del agua de riego en este valle se acerque hacia un modelo multiactoral, en el cual el reconocimiento y análisis de los problemas y la manera de abordarlos sean definidos en conjunto por la sociedad civil, el sector privado e instituciones del Estado (Moreyra, 2015), entendiendo que el uso del agua es un tema que afecta a todos y todas. Específicamente, con este trabajo se busca contribuir a la comprensión del funcionamiento del sistema de riego del VIRCH desde las percepciones de las y los regantes, conocer sus opiniones sobre las instituciones presentes en el territorio y, por último, aportar al diseño de una estrategia de trabajo institucional a corto y largo plazo que sea capaz de comprender las demandas y necesidades del sector agropecuario. EEA Chubut Fil: Diaz, Lucas Damian. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Chubut; Argentina. Fil: Raguileo, Daniela Ayelen. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Chubut; Argentina. Fil: Hernández, Marcos. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Chubut; Argentina. Fil: Salvadores, Franco José. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Chubut; Argentina. Fil: Salvadores, Franco José. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina.

Introducción. La resistencia de los microorganismos a los antibióticos es un problema creciente de salud pública, que puede afectar a los productores pecuarios al contar con menos opciones para tratar a los animales ante una posible infección. Los extractos de algunas plantas con actividad antimicrobiana podrían representar una alternativa al uso de antibióticos en producción pecuaria. Objetivo. El objetivo de este trabajo fue analizar la composición química y la actividad antimicrobiana de los aceites esenciales de las hojas de guayaba (Psidium guajava L.) y de zacate de limón (Cymbopogon citratus (DC.) Stapf), cultivadas en Costa Rica, y evaluar la actividad antimicrobiana de P. guajava L. en harina de carne y hueso. Materiales y métodos. Esta investigación se desarrolló en el Centro de Investigación en Nutrición Animal (CINA) de la Universidad de Costa Rica entre marzo y octubre del 2016. Las hojas de P. guajava se recolectaron en las localidades de San Pedro y Escazú y las de C. citratus en Sarapiquí y Escazú, Costa Rica. La extracción de los aceites se realizó mediante hidrodestilación. La composición química se analizó mediante cromatografía de gases acoplado a un detector de espectrometría de masas. La capacidad antimicrobiana de los aceites esenciales se evaluó mediante la prueba de difusión en disco y el procedimiento de microdilución en placa de 96 pozos. Resultados. Los aceites esenciales de C. citratus y P. guajava presentaron actividad antimicrobiana contra las diez cepas bacterianas probadas, las bacterias gram positivas fueron las más sensibles a los mismos. El aceite de P. guajava procedente de Escazú, presentó mayor actividad antimicrobiana in vitro con respecto al proveniente de San Pedro y al aceite de C. citratus. El aceite de P. guajava eliminó Escherichia coli, que había sido previamente agregada a una matriz de harina de carne y hueso, pero no controló la colonización de la misma. Conclusión. Según los resultados obtenidos en esta investigación los aceites esenciales de zacate de Limón y de hoja de guayaba cultivadas en Costa Rica, presentan un efecto antimicrobiano contra bacterias relevantes para la inocuidad y la vida útil de alimentos para consumo animal, se requieren futuras investigaciones para evaluar su aplicabilidad en alimentación animal. Introduction. The resistance of microorganisms to antibiotics is a public health problem that can affect livestock producers by having fewer options to treat animals in the event of a infection. Extracts of some plants with antimicrobial activity may represent an alternative to the use of antibiotics in livestock production. Objective. The objective of this work was to analyze the chemical composition and antimicrobial activity of the essential oils of guava leaves (Psidium guajava L.) and lemon grass (Cymbopogon citratus (DC.) Stapf) grown in Costa Rica and evaluate antimicrobial activity of P. guajava L. in meat and bone meal. Materials and methods. This research was developed at the Animal Nutrition Research Center (CINA) of the University of Costa Rica between March and October 2016. P. guajava leaves were collected from two different locations (San Pedro and Escazú) and those from C. citratus from the areas of Sarapiquí and Escazú. The extraction of the oils was done by hydrodistillation. The chemical composition was analyzed by gas chromatography and mass spectrometry. The antimicrobial capacity of the essential oils was evaluated by the disk diffusion test and the 96-well plate microdilution procedure. Results. The essential oils of C. citratus and P. guajava presented antimicrobial activity against the ten bacterial strains tested, being the gram positive bacteria the most sensitive to them. P. guajava oil from Escazú showed higher antimicrobial activity in vitro with respect to P. guajava oil from San Pedro and C. citratus oil. The oil of P. guajava had the ability to eliminate Escherichia coli that had previously been added to a matrix of meat and bone meal, but not to prevent colonization of it. Conclusion. According to the results of this research, the essential oils of lemon grass and guava leaf grown in Costa Rica, have an antimicrobial effect against bacteria relevant for feed safety and feed shelf life, future research is required to evaluate its applicability in animal feed. Universidad de Costa Rica/[739-B6-257]/UCR/Costa Rica UCR::Vicerrectoría de Investigación::Unidades de Investigación::Ciencias Agroalimentarias::Centro de Investigación en Nutrición Animal (CINA) UCR::Vicerrectoría de Docencia::Ciencias Agroalimentarias::Facultad de Ciencias Agroalimentarias::Escuela de Zootecnia

La adición de sustancias farmacológicas a los piensos con fines terapéuticos es una práctica común en la Unión Europea. Los grupos de sustancias utilizados más frecuentemente son los coccidiostáticos y los antimicrobianos y su uso en la fabricación de piensos puede ser causa de una transferencia inevitable a piensos a los que no están destinadas dichas sustancias. Efectos adversos tales como influencia sobre la microbiota del tubo digestivo, desarrollo de bacterias con genes de resistencia e ineficacia de tratamientos en los animales, además de problemas de seguridad alimentaria, pueden ser consecuencias del consumo prolongado de este tipo de piensos. Dado que la legislación europea dicta límites máximos residuales y prevé hacerlo para los antimicrobianos en 2023, esta investigación se ha centrado en evaluar la existencia de contaminación cruzada de estas sustancias en muestras de piensos procedentes de granjas y de fábricas mediante el desarrollo de métodos de análisis basados en HPLC-MS/MS.

Universidad Nacional Agraria La Molina. Escuela de Posgrado. Maestría en Producción Animal Un estudio se realizó para evaluar el impacto de la fertilización NPK en la asociación de pastos cultivados Dactilys (Dactylis glomerata) y trébol rojo (Trifolium pratense). Se evaluaron 12 tratamientos experimentales a 4350 m.s.n.m. con 2 dosis de nitrógeno 0 y 50 Kg/ha, 3 dosis de fosforo 0, 80 y 160 Kg/ha y 2 dosis de potasio 0 y 30 Kg/ha, bajo un diseño estadístico bloque completo al azar con arreglo factorial. Los parámetros evaluados fueron composición florística, tasa de crecimiento y producción de forraje. Los resultados revelaron que la fertilización con nitrógeno y fosforo mejoró (P < 0.05) la tasa de crecimiento y la producción del forraje. No hubo efecto de la fertilización potásica sobre las variables evaluadas, no detectándose diferencias (P≥ 0.05) de los efectos principales sobre la composición florística del forraje. La prueba de medias revelo efectos significativos con la dosis de fósforo 80 y nitrógeno 50; es decir, dosis medias de nitrógeno y fósforo favorecieron el crecimiento y producción de forraje. El análisis de las interacciones mostro que con la combinación de N 50, P 80 y K 0 obtuvieron los mejores resultados en la producción del forraje siendo superior a los demás tratamientos. Se recomienda evaluar las dosis recomendables en interacción con S y micro elementos claves como el Bo y Mo, en el desarrollo de nódulos y síntesis de nitrógeno. También estimar el incremento en la capacidad de carga como resultado del aumento en la tasa de crecimiento y producción de forraje por efecto de la aplicación de N y P en las dosis recomendadas. An experiment was conducted to evaluate the impact of NPK fertilization on the association of cultivated grasses Dactilys (Dactylis glomerata) and red clover (Trifolium pratense). Twelve experimental treatments were evaluated at 4350 m of elevation with 2 doses of nitrogen 0 to 50 Kg / ha, 3 doses of phosphorus 0, 80 to 160 Kg / ha and 2 doses of potassium 0 to 30 Kg / ha, under a randomized complete block statistical design. Parameters evaluated were floristic composition, growth rate and pasture production. The results revealed that nitrogen and phosphorus fertilization improved (P

Universidad Nacional Agraria La Molina. Escuela de Posgrado. Maestría en Producción Animal El objetivo de la investigación fue evaluar la eficiencia productiva y económica de cuyes (Cavia porcellus) durante la etapa de crecimiento, mediante el uso de tres tipos de comederos (pocillo de arcilla, tolva plástica tipo ave y tolva metálica tipo conejo) en interacción con dos tipos de alojamiento (jaulas y pozas). Se utilizaron 72 cuyes mejorados machos recién destetados (14 ± 3 días), pertenecientes al genotipo Cieneguilla - UNALM, durante siete semanas. Se utilizó un diseño completo al azar con arreglo factorial de seis tratamientos y tres repeticiones de cuatro animales en cada una; siendo: poza con pocillo de arcilla (T1), poza con tolva plástica tipo ave (T2), poza con comedero metálico tipo conejo (T3), jaula con pocillo de arcilla (T4), jaula con tolva tipo ave (T5) y jaula con comedero metálico tipo conejo (T6). El alimento balanceado, que fue integral en harina, y el agua se suministraron ad libitum. Se evaluó ganancia de peso, consumo de alimento, conversión alimenticia, mermas, mortalidad y retribución económico. Los resultados indican que, el mayor consumo (P

Introduction. In the livestock production for commercial purposes, additives are frequently used to increase the effectiveness of nutrients present in the food, its availability, and absorption in the gastrointestinal tract, as well as modulate the intestinal flora of animals and promote their growth and productivity. Antibiotics have been among the most used additives in recent decades animal production worldwide. Objective. The aim of this literature review was to describe the use of probiotics as additives in animal nutrition, as an alternative to the use of antibiotics as growth promoters in commercial livestock production. Development. This compilation analyzes the current definition of probiotics accepted by the Food and Agriculture Organization of the United Nations (FAO) and the World Health Organization (WHO) it also describres the microorganisms allowed as probiotics in animal nutrition in Costa Rica and the United States. Additionally,the main mechanisms of action in productive animals are explained. Probiotics are living organisms that when administered in adequate amounts confer a benefit to the health of the host, this effect must be proven and overcome the effect given by the placebo. The microorganisms used as probiotics in animal nutrition should not be pathogenic for animals, and should be resistant to the processes of food and feed elaboration. It has been reported that the benefit of probiotics in productive animals is mainly due to the fact that these promote the microbial balance in the digestive tract and the modulation of the immune system, resulting in an increase in the digestion and absorption of nutrients and decreasing the incidence of infectious diseases. Conclusion. The use of different probiotics in productive animals to increase productivity and animal health, has been proven in different commercial livestock species and its use is promising as a growth promoter instead of antibiotics. Introducción. En la producción pecuaria con fines comerciales, es frecuente usar aditivos para aumentar la efectividad de los nutrientes presentes en el alimento, su disponibilidad y absorción en el tracto gastrointestinal,además, de modular la flora intestinal de los animales y promover su crecimiento y productividad. Los antibióticos han sido los aditivos más utilizados en las últimas décadas en producción animal en el mundo. Objetivo. El objetivo de esta revisión bibliográfica fue describir y analizar el uso de probióticos como aditivos en nutrición animal y como alternativa al uso de antibióticos como promotores de crecimiento en la producción pecuaria comercial. Desarrollo. En esta recopilación se analiza la definición actual de probióticos aceptada por la Organización de las Naciones Unidas para la Alimentación y la Agricultura (FAO) y la Organización Mundial de la Salud (OMS), se describen losmicroorganismos permitidos como probióticos en nutrición animal en Costa Rica y Estados Unidos, y se explican sus principales mecanismos de acción en animales productivos. Los probióticos son organismos vivos que cuando son administrados en cantidades adecuadas confieren un beneficio para la salud del hospedero, este efecto debe estar probado y superar al efecto del placebo. Los microorganismos usados como probióticos en nutriciónanimal no deben ser patógenos para los animales y deben ser resistentes a los procesos de elaboración de alimentosy piensos. Se ha reportado que el beneficio de los probióticos en animales productivos, se debe principalmente a que estos fomentan el balance microbiano en el tubo digestivo y la modulación del sistema inmune, resultando en un aumento en la digestión y absorción de nutrientes, y disminuyen la incidencia de enfermedades infecciosas.Conclusión. El uso de diferentes probióticos en animales productivos para aumentar el rendimiento y la salud animal,ha sido comprobado en diferentes especies productivas y su uso es promisorio como promotor de crecimiento en lugarde antibióticos.

Las micotoxinas en general son metabolitos secundarios los cuales cuentan con bajo peso molecular, los cuales son producidos por hongos que infectan las cosechas en el campo y se desarrollan durante el almacenamiento en condiciones favorables de temperatura y humedad. Estos compuestos químicos son considerados seriamente como uno de los mayores contaminantes en la comida, tanto para humanos como para animales; por ende, se les han atribuido algunos desórdenes y síndromes tóxicos; los signos de intoxicación en animales son tan variados como las especies de hongos que las producen, aunque el nivel de toxicidad depende de la cantidad de toxina ingerida, el tiempo de ingestión, el tipo de animal, su edad, sexo, entre otras. Algunas micotoxinas se les asocian con el riesgo de sufrir diversos cánceres, razón por la cual se ha creado la necesidad a nivel mundial de proteger y asegurar las fuentes de alimentación de los animales. Las aflatoxinas son metabolitos secundarios tóxicos producidos principalmente por el hongo Aspergillus flavus. Estas toxinas han crecido en los últimos años y a su vez la necesidad de conocer cada vez más acerca de ellas, debido a su alta incidencia en los alimentos de consumo masivo y a su toxicidad. Con el fin de profundizar en el conocimiento de las aflatoxinas en las aves de corral, en esta monografía se realiza una revisión bibliográfica donde se plasma la incidencia de la aflatoxina en los piensos de las aves de corral, las cuales son las más susceptibles a los efectos de esta micotoxina en particular, su impacto sobre la salud animal, la legislación nacional e internacional de aflatoxinas totales o individual, procesos de control, prevención, descontaminación y detoxificación. La investigación en esta área ha contribuido al desarrollado de métodos físicos, químicos y biológicos de descontaminación y detoxificación de aflatoxinas. Teniendo en cuenta lo anterior, es imperativo implementar medidas que puedan evitar el crecimiento de hongos productores de aflatoxinas, en procesos de cultivo, cosecha, recolección, almacenamiento y transporte, permitiendo así la disminución de su presencia en alimentos. Finalmente, el impacto negativo en la salud aviar, muestra la necesidad de seguir en la investigación sistemática en ZOOTECNIA 2 Colombia, donde se pueda entender todos aquellos procesos tanto de producción como de afección de las aflatoxinas, permitiendo tener fundamentos sólidos, en donde se pueda crear mecanismos más efectivos para su prevención y control, dando la oportunidad de resarcir el daño que se viene ocasionando por este tipo de toxinas; de igual manera apoyarse en la normativas que regulen su concentración en diferentes matrices alimentarias y dando la pauta, de la necesidad de instaurar una obligatoriedad en cuanto a los niveles admisibles. Mycotoxins in general are secondary metabolites which have low molecular weight, which are produced by fungi that infect crops in the field and develop during storage under favorable conditions of temperature and humidity. These chemical compounds are considered seriously as one of the biggest contaminants in food, both for humans and animals. Therefore, some disorders and toxic syndromes have been attributed to them; the signs of intoxication in animals are as varied as the species of fungi that produce them, although the level of toxicity depends on the amount of toxin ingested, the time of ingestion, the type of animal, its age, sex, among others. Some mycotoxins are associated with the risk of various cancers, which is why the worldwide need to protect and secure the animal's food sources has been created. Aflatoxins considered toxic secondary metabolites produced mainly by Aspergillus flavus. These toxins have grown in recent years and in turn the need to know more and more about them, due to its high incidence in food for mass consumption and its toxicity. In order to deepen the knowledge of aflatoxins in poultry, in this monograph a bibliographic review is made where the incidence of aflatoxin in feed of poultry is determined, which are the most susceptible to the effects of this mycotoxin in particular, its impact on animal health, national and international legislation on total or individual aflatoxins, control processes, prevention, decontamination and detoxification. Research in this area has contributed to the development of physical, chemical and biological methods of decontamination and detoxification of aflatoxins. Taking into account the above, it is imperative to implement measures that can prevent the growth of aflatoxin-producing fungi, in processes of cultivation, harvesting, harvesting, storage and transport, thus allowing the reduction of their presence in food. Finally, the negative impact on avian health, shows the need to continue in systematic research in Colombia, where you can understand all those processes both production and aflatoxin affection, allowing to have solid foundations, where you can create mechanisms more effective for its prevention and control, giving the opportunity to compensate the damage that is being caused by this type of toxins; likewise, rely on regulations that regulate their concentration in different dietary matrices; and giving the pattern of the need to establish a mandatory in terms of admissible levels.

Las aflatoxinas son micotoxinas producidas principalmente por el hongo Aspergillus flavus y la especie estrechamente relacionada A. parasiticus, que contaminan una gran variedad de materias primas, piensos y alimentos. Estas dos especies de Aspergillus son especialmente abundante en zonas tropicales y subtropicales de clima cálido, aunque su distribución se puede extender a otros lugares a consecuencia del cambio climático. Las aflatoxinas principales son B1, B2, G1 y G2, así como la aflatoxina M1 que aparece en la leche de animales alimentados con productos contaminados. Las aflatoxinas están considerados agentes genotóxicos y cancerígenos, clasificados en el Grupo 1 (carcinógenos para seres humanos) por el IARC.En el presente estudio se ha investigado la presencia de aflatoxinas (AFB1 y AFM1) en productos destinados a la alimentación de ganado vacuno lechero (140 muestras) y en leche cruda de vaca (80 muestras), con métodos validados basados en inmunoafinidad, derivatización fotoquímica y determinación por HPLC con detector de fluorescencia. Se ha detectado aflatoxina B1 en el 55% de las muestras de raciones completas para el ganado, con una mayor incidencia en pienso completo que en raciones unifeed. La concentración media de aflatoxina B1 en las raciones alimenticias fue 0,61 µg/kg, siendo significativamente superior en pienso completo que en raciones unifeed. Estas diferencias podrían ser debidas a la distinta proporción de concentrados y a la presencia de ingredientes como la semilla de algodón. Respecto de las materias primas analizadas, se detectó aflatoxina B1 en maíz grano y en ensilado de maíz. Dos lotes de raciones alimenticias completas sobrepasaron el contenido máximo de AFB1 de la Unión Europea. La incidencia global de aflatoxina M1 en leche cruda de vaca fue del 33,8%, con un rango de 11 a 67 ng/kg. El patrón de contaminación reveló una mayor presencia de AFM1 en leche de vacas alimentadas con pienso completo frente a las raciones unifeed, así como en leche de primavera respecto a la producida en invierno. En total, 7,5% de las muestras superaron el contenido máximo de AFM1 de la UE, lo que indica un riesgo de salud pública, por lo que se calculó la exposición dietética de la población. La tasa global de transferencia de aflatoxinas desde las raciones alimenticias a la leche fue de 3,2%, siendo mayor en las vacas alimentadas con pienso completo y en los ordeños de primavera. En una selección de lotes positivos, la transferencia de aflatoxinas superó el umbral del 6% estimado EFSA para vacas estabuladas de alta producción. Este estudio es el primero realizado en España para analizar la transferencia de aflatoxinas en ganado vacuno lechero.Finalmente se han investigado estrategias de prevención y reducción del riesgo por aflatoxinas en la alimentación animal, basadas en antifúngicos naturales (ácidos fenólicos) y adsorbentes de micotoxinas. En general, los ácidos fenólicos fueron eficaces in vitro como fungistáticos, aunque mostraron menos capacidad para inhibir la síntesis de aflatoxinas. Por otro lado, los adsorbentes ensayados han mostrado buena capacidad in vitro para la fijación de aflatoxina B1, por lo que serían candidatos adecuados como aditivos tecnológicos para su aplicación en la reducción de aflatoxinas en los piensos.En su conjunto, los resultados obtenidos indican la necesidad de establecer un plan integral de vigilancia y control de aflatoxinas en toda la cadena de producción, máxime teniendo en cuenta las predicciones de aumento del riesgo en Europa por el cambio climático.

Los autores agradecen al Ministerio de Economía y Empresa (MINECO) del Gobierno de España la financiación recibida (proyectos AGL2014-55379, AGL2017-87755-R y RTC-2015-3508-2 Una forma de hacer Europa).

Introduction. The resistance of microorganisms to antibiotics is a public health problem that can affect livestock producers by having fewer options to treat animals in the event of a infection. Extracts of some plants with antimicrobial activity may represent an alternative to the use of antibiotics in livestock production. Objective. The objective of this work was to analyze the chemical composition and antimicrobial activity of the essential oils of guava leaves (Psidium guajava L.) and lemon grass (Cymbopogon citratus (DC.) Stapf) grown in Costa Rica and evaluate antimicrobial activity of P. guajava L. in meat and bone meal. Materials and methods. This research was developed at the Animal Nutrition Research Center (CINA) of the University of Costa Rica between March and October 2016. P. guajava leaves were collected from two different locations (San Pedro and Escazú) and those from C. citratus from the areas of Sarapiquí and Escazú. The extraction of the oils was done by hydrodistillation. The chemical composition was analyzed by gas chromatography and mass spectrometry. The antimicrobial capacity of the essential oils was evaluated by the disk diffusion test and the 96-well plate microdilution procedure. Results. The essential oils of C. citratus and P. guajava presented antimicrobial activity against the ten bacterial strains tested, being the gram positive bacteria the most sensitive to them. P. guajava oil from Escazú showed higher antimicrobial activity in vitro with respect to P. guajava oil from San Pedro and C. citratus oil. The oil of P. guajava had the ability to eliminate Escherichia coli that had previously been added to a matrix of meat and bone meal, but not to prevent colonization of it. Conclusion. According to the results of this research, the essential oils of lemon grass and guava leaf grown in Costa Rica, have an antimicrobial effect against bacteria relevant for feed safety and feed shelf life, future research is required to evaluate its applicability in animal feed. Introducción. La resistencia de los microorganismos a los antibióticos es un problema creciente de salud pública, que puede afectar a los productores pecuarios al contar con menos opciones para tratar a los animales ante una posible infección. Los extractos de algunas plantas con actividad antimicrobiana podrían representar una alternativa al uso de antibióticos en producción pecuaria. Objetivo. El objetivo de este trabajo fue analizar la composición química y la actividad antimicrobiana de los aceites esenciales de las hojas de guayaba (Psidium guajava L.) y de zacate de limón (Cymbopogon citratus (DC.) Stapf), cultivadas en Costa Rica, y evaluar la actividad antimicrobiana de P. guajava L. en harina de carne y hueso. Materiales y métodos. Esta investigación se desarrolló en el Centro de Investigación en Nutrición Animal (CINA) de la Universidad de Costa Rica entre marzo y octubre del 2016. Las hojas de P. guajava se recolectaron en las localidades de San Pedro y Escazú y las de C. citratus en Sarapiquí y Escazú, Costa Rica. La extracción de los aceites se realizó mediante hidrodestilación. La composición química se analizó mediante cromatografía de gases y espectrometría de masas. La capacidad antimicrobiana de los aceites esenciales se evaluó mediante la prueba de difusión en disco y el procedimiento de microdilución en placa de 96 pozos. Resultados. Los aceites esenciales de C. citratus y P. guajava presentaron actividad antimicrobiana contra las diez cepas bacterianas probadas, las bacterias gram positivas fueron las más sensibles a los mismos. El aceite de P. guajava procedente de Escazú, presentó mayor actividad antimicrobiana in vitro con respecto al proveniente de San Pedro y al aceite de C. citratus. El aceite de P. guajava eliminó Escherichia coli, que había sido previamente agregada a una matriz de harina de carne y hueso, pero no controló la colonización de la misma. Conclusión. Según los resultados obtenidos en esta investigación los aceites esenciales de zacate de Limón y de hoja de guayaba cultivadas en Costa Rica, presentan un efecto antimicrobiano contra bacterias relevantes para la inocuidad y la vida útil de alimentos para consumo animal, se requieren futuras investigaciones para evaluar su aplicabilidad en alimentación animal.

Universidad Nacional Agraria La Molina. Escuela de Posgrado. Maestría en Nutrición El objetivo de la presente investigación fue comparar tres perfiles de proteína ideal en Pacos (Piaractus brachypomus) en la etapa de crecimiento, utilizando dietas prácticas. Se emplearon 27 juveniles de Paco (P. brachypomus) con un peso promedio de 191.55 ± 0.25 que fueron distribuidos aleatoriamente en 9 acuarios de crecimiento a razón de 3 peces por acuario y alimentados con 3 diferentes dietas experimentales; perfil 1: dieta basada en el perfil de proteína ideal del requerimiento de aminoácidos de Tilapia (Oreochromis niloticus), perfil 2: dieta basada en el perfil de proteína ideal del tejido del cuerpo entero de Paco (P. brachypomus) y perfil 3: dieta basada en el perfil de proteína ideal de peces Teleósteos, propuesto por el NRC; durante un periodo de 42 días. Los parámetros de performance se evaluaron cada 14 días estableciendo así tres bloques experimentales acumulativos que fueron analizados con un DBCA. El análisis de comparación de medias se realizó empleando la prueba de Tukey. Al final del experimento se beneficiaron tres peces por cada dieta experimental para determinar el perfil de aminoácidos del tejido del cuerpo entero con NIRS. El perfil 2 fue significativamente superior que los perfiles 1 y 3 para los parámetros peso vivo y ganancia de peso; mientras que, para consumo de alimento, CA, ganancia de biomasa, PER y TCE, el perfil 2 fue superior al perfil 1 y similar al perfil 3. El perfil de aminoácidos de los peces beneficiados expresados en base a lisina fue parecido al perfil de proteína ideal basada en el perfil de proteína ideal del tejido del cuerpo entero de Paco. The objective of the present research work was to compare three ideal protein profiles in Pacos (Piaractus brachypomus) in the grower stage, using practical diets. Twenty seven juveniles of Paco (P. brachypomus) with an average weight of 191.55 ± 0.25 were randomly distributed in 9 growth aquariums at a rate of 3 fish per aquarium and fed with 3 different experimental diets; Profile 1: diet based on the ideal protein profile of the amino acid requirement of Tilapia (Oreochromis niloticus), Profile 2: diet based on the ideal protein profile of the whole body tissue of Paco (P. brachypomus) and Profile 3: diet based on the ideal protein profile of Teleost fish, proposed by the NRC; during a period of 42 days. Performance parameters were evaluated every 14 days establishing three cumulative experimental blocks that were analyzed with a DBCA. Mean comparisons were performed using the Tukey test. At the end of the experiment, three fish were killed in each experimental diet to determine the amino acid profile of the whole body tissue with NIRS. Profile 2 was significantly higher than profiles 1 and 3 for the parameters live weight and weight gain; while, for feed consumption, CA, biomass gain, PER and TCE, profile 2 was superior to profile 1 and similar to profile 3. The amino acid profile of the killed fish expressed on the basis of lysine was similar to the dietary ideal protein profile based on the ideal protein profile of Paco's entire body tissue. Tesis

La calidad de los alimentos consumidos por el ser humano y por los animales está determinada, entre otros, por dos factores que tienen lugar al inicio de la cadena de producción. Por un lado, la expansión agrícola influye como consecuencia del gran número de plaguicidas que se utilizan en la agricultura como herramientas para el control de plagas y para incrementar los rendimientos de los cultivos. Por otro lado, los procesos de intensificación de la producción animal requieren de disponer gran cantidad de alimentos conservados que se almacenan en condiciones muy variables y son propensos al desarrollo fúngico y la producción de un gran número de micotoxinas. La combinación de ambos, los plaguicidas y las micotoxinas, puede afectar no solamente la salud y la producción de los animales que son los primeros expuestos, sino eventualmente también a las personas que consumen alimentos producidos por esos animales, como la leche. El control de materias primas y productos en la etapa inicial de la cadena de producción es, por lo tanto, de importancia fundamental.Las actividades desarrolladas para la concreción de la presente tesis estuvieron enmarcadas en dos proyectos de investigación interdisciplinares. Uno denominado ?Residuos y contaminantes en cadenas de agroalimentos prioritarias de la región central santafesina? (Proyecto ANPCyT-PICT) cuyo objetivo principal era generar y perfeccionar métodos avanzados para la determinación de plaguicidas y contaminantes fúngicos, y aplicarlos en estudios de residualidad en muestras de leche cruda y alimentos vegetales para ganado. El otro fue un proyecto de cooperación binacional Argentina-República Checa denominado ?Técnicas analíticas innovadoras para la evaluación de inocuidad de alimentos y piensos? (Proyecto MINCyT-MEYS) uno de cuyos objetivos era la aplicación de metodologías multi-residuo multi-clase de amplio espectro para efectuar estudios de campo sobre la transferencia de micotoxinas y plaguicidas desde los alimentos consumidos por el ganado hacia la leche.En ese contexto, luego de una introducción general el presente manuscrito se organizó en 4 capítulos principales. Los Capítulos 2 y 3 tienen una componente principal de índole químico-analítica centrada en la matriz leche destinada a la obtención de métodos multi-residuo multi-clase para la determinación de micotoxinas y plaguicidas en ese alimento y su aplicación en un estudio de campo (Proyecto ANPCyT-PICT). Los Capítulos 4 y 5, centrados en piensos como matrices de estudio, no focalizan en el desarrollo de metodologías analíticas sino en la aplicación de métodos de amplio espectro para evaluar la incidencia de la residualidad de dichos contaminantes en una diversidad de alimentos que componen la dieta del ganado lechero en la zona central de Argentina (Proyecto MINCyT-MEYS).El Capítulo 2 describe, en una primera parte, la optimización y validación de una metodología basada en columnas de inmunoafinidad con cromatografía líquida acoplada a espectrometría de masa (IAC-UHPLC-MS/MS) para la determinación de aflatoxina M1 en leche y su aplicación para el análisis de 160 muestras de leche tomadas de 40 establecimientos productores de la zona central de la Provincia de Santa Fe durante 4 estaciones climáticas a lo largo de un año. Se encontró una prevalencia de AFM1 en las muestras analizadas cercana al 50% con niveles medios de concentración de 0,038 y un máximo de 0,293 µg/L. Aunque no se registraron excesos en el límite máximo establecido en Argentina (0,5 µg/L) se verificaron violaciones al LM de la Unión Europea (0,05 µg/kg) en el 8% de las muestras. En la segunda parte del Capítulo se describe la optimización de una metodología alternativa al método IAC basada en el enfoque QuEChERS para integrar la determinación de AFM1 con la de residuos de plaguicidas en un mismo método de extracción. Tras varias etapas de optimización, el método propuesto mostró un desempeño analítico con cifras de mérito compatibles con las normativas de Mercosur y la Unión Europea.El Capítulo 3 describe la optimización y validación de una metodología QuEChERS-UHPLC-MS/MS para la determinación multi-residuo multi-clase de residuos de plaguicidas y micotoxinas en leche, y su posterior aplicación en al análisis de 80 muestras de leche tomadas de los mismos establecimientos referidos anteriormente durante dos períodos climáticos. El método optimizado demostró parámetros de desempeño que satisfacen los requerimientos de las normativas de Argentina y de otros países. En el análisis de muestras de leche se encontró mayor prevalencia de insecticidas organofosforados como clorpirifos y diazinon, y en menor medida otros como atrazina, acetamiprid, carbendazim, pirimifos-metilo, entre otros. Adicionalmente, la posterior incorporación de un instrumento GC-MS/MS en las instalaciones del PRINARC permitió analizar los extractos de las mismas muestras ampliando así el conjunto de compuestos determinados. De esa forma, se encontraron también residuos de plaguicidas organoclorados como heptacloro o isómeros de DDT, prohibidos hace más de dos décadas, y una alta ocurrencia de endosulfán-sulfato, de prohibición más reciente en Argentina.En el Capítulo 4 se describe la determinación de residuos de plaguicidas en una amplia variedad de piensos que componen las dietas del ganado lechero. La estrategia analítica orientada a enfoques de amplio espectro consistió en la determinación de 350 compuestos mediante una metodología analítica QuEChERS-UHPLC-MS/MS (análisis realizado en República Checa) y la posterior determinación de 160 plaguicidas en las mismas muestras replicando el procedimiento de extracción pero con determinación por GC-MS/MS (análisis realizado en Argentina). De los 420 plaguicidas estudiados en total 50 se encontraron en las muestras analizadas, siendo el 62% insecticidas, el 20% herbicidas y el 18% restante fungicidas. Clorpirifos, metolacloro y difenilamina fueron los plaguicidas de mayor ocurrencia entre los insecticidas, herbicidas y fungicidas, respectivamente. Respecto al análisis de muestras, en el 72% de las mismas se encontraron residuos de plaguicidas (n=54), siendo los alimentos balanceados y las semillas de algodón las matrices con mayor cantidad de compuestos detectados. La concentración más alta de un plaguicida hallado fue para el insecticida piretroide deltametrina en un alimento balanceado (532 µg/kg).En el Capítulo 5 se describe la determinación de micotoxinas en el mismo set de muestras de alimentos vegetales analizadas en el Capítulo 4 y a partir del mismo procedimiento de extracción, integrando así la determinación simultánea de gran cantidad de compuestos (multi-residuo) de diferente origen (multi-clase). A partir del mismo extracto QuEChERS utilizado en el análisis de residuos de plaguicidas, se determinó un conjunto de 56 metabolitos fúngicos incluyendo micotoxinas tradicionales, conjugadas o enmascaradas, y micotoxinas emergentes. Se encontró que el 100% de las muestras analizadas contenía al menos 1 micotoxina, y del total de compuestos incluidos en el alcance del método se identificaron 38 (68%). Además de las micotoxinas con incidencia histórica en este tipo de alimentos en la región (aflatoxinas, fumonisinas, zearalenona, deoxinivalenol), se hallaron micotoxinas emergentes como eniantinas, toxinas de Alternaria y beauvericina que no habían sido previamente estudiadas. En algunos casos de verificaron excesos a los límites máximos establecidos por la UE para micotoxinas en piensos, como AFB1 en granos de maíz (LM=5 µg/kg), FB1 en gluten de trigo (LM=6000 µg/kg) y ZEA en silaje de maíz (LM=3000 µg/kg). Los resultados obtenidos en este trabajo constituyen un aporte importante para un mayor conocimiento sobre la residualidad de plaguicidas y micotoxinas en la primer etapa de la cadena de producción, y pueden ayudar a asistir a los productores respecto al mejoramiento del manejo de sus cultivos y productos almacenados destinados a la alimentación animal, para perfeccionar los programas de monitoreo y control necesarios para la evaluación de riesgo, y para asegurar las medidas de protección de la salud tanto animal como humana relacionadas con la inocuidad de los alimentos. Among several factors, food and feed quality for human and livestock consumption is determined by two main circumstances occurring at the beginning of the food chain. On one hand, agricultural expansion demands a high number of pesticides to be used for crop protection and to improve crops yields and this might impact on food and feed quality. On the other hand, farm feeding intensification in livestock production demands higher amounts of conserved forages and concentrated feeds which may be exposed to fungal development and mycotoxin contamination as a consequence of inappropriate storage conditions. Combination of both pesticide residues and mycotoxins could affect not only animal health and production, but eventually human health also, due to consumption of contaminated products of animal origin. The control of commodities and raw primary foods at the beginning of the food supply chain is, hence, of priority importance. The activities involved in the realization of this thesis where framed under two interdisciplinary research projects. One of them, named “Residues and contaminants in priority agrifood supply chains from Santa Fe central region” (ANPCyT-PICT Project) was aimed to develop and perfect advanced analytical methods for the determination of pesticides and fungal contaminants, and to apply them in residuality studies on raw milk and feedstuff samples for dairy cattle. The second project named “Novel analytical techniques for food and feed safety assessment” was a binational cooperation project between Argentina and the Czech Republic and was aimed to the application of wide-scoped multi-residue multi-class methodologies for field studies assessments regarding mycotoxin and pesticide transfer from feed consumed by dairy cattle to milk. In this context, this manuscript was organized in 4 main chapters after a general introduction about the different addressed topics. Chapters 2 and 3 have a main chemical-analytical component focused on milk as the studied matrix and are aimed to the development of multi-residue multi-class methods for the determination of mycotoxins and pesticide residues with further application to field studies (ANPCyT-PICT Project). Centered in vegetal origin feedstuffs analysis, Chapters 4 and 5 are not focused on analytical methodologies developments but on their application of wide-scoped approaches to assess mycotoxin and pesticide residuality on a great variety of typical feed that constitute dairy cattle diets in Argentinean central regions (MINCyT-MEYS Project). Chapter 2 describes, at a first stage, the optimization and validation of an immunoaffinity-based extraction method with liquid chromatography-tandem mass spectrometry determination (IAC-UHPLC-MS/MS) for aflatoxin M1 determination in raw milk and its application for the analysis of 160 milk samples obtained from 40 different milk farms located in Santa Fe province central region throughout four climate season in a one-year field study. AFM1 prevalence in the analyzed samples was close to 50% with mean and maximum concentration levels of 0.038 and 0.293µg/L, respectively. Although no maximum limits violations to Argentinean legislation (0.5µg/L) were observed, European Union ML (0.05µg/L) exceedances were observed in 8% of the cases. Chapter 2 second part describes the optimization of a QuEChERS-based approach as an alternative to the IAC method to integrate AFM1 and pesticide residues determination in a single extraction method. After several optimization steps, the proposed method was validated demonstrating appropriate analytical performance to fulfill Mercosur and European Union legislations. Chapter 3 describes the optimization and validation process of a QuEChERS-UHPLC-MS/MS for the multiresidue multi-class determination of pesticides and mycotoxins in milk, and its later application to the analysis of 80 milk samples obtained from the same above mentioned dairy farms. The optimized method demonstrated good performance characteristics to fulfill analytical requirements set by legislation from Argentina and other countries. The analysis of milk samples revealed a higher prevalence of organophosphate insecticides (mainly chlorpyrifos and diazinon) and to a less extent other compounds such as atrazine, acetamiprid, carbendazim and pirimifos-methyl were also found. In addition, the later incorporation of a GC-MS/MS system to the PRINARC analytical platforms allowed the analysis of the same sample extracts to enhance the determined compounds scope. Thus, residues of some organochlorine pesticide that have been banned for over 2 decades were found such as heptachlor and DDT isomers, and also high occurrence of endosulfan-sulfate which has been more recently banned. Chapter 4 describes the pesticide residues determination in a wide variety of feed samples used in dairy cattle diets. In this case the analytical strategy was focused on wide-scoped approaches and it implied the determination of 350 compounds my means of a QuEChERS-UHPLC-MS/MS analytical methodology (analysis performed in the Czech Republic) together with the further determination of 160 pesticides in the same samples by replicating the extraction procedure but with final determination by GC-MS/MS (analysis performed in Argentina). From the total 420 different pesticides studied 50 of them were found in the analyzed samples, being 62% of them insecticides, 20% herbicides and 18% fungicides. Chlorpyrifos, metholachlor and diphenylamine were the pesticides with major occurrence from the insecticide, herbicide and fungicide families, respectively. Regarding sample analysis, pesticide residues were found in 72% of them (n=54), being compound feeds and cotton seeds the feed types with higher amount of detected compounds. The highest concentration of a single pesticide in an individual sample was due to the pyrethroid insecticide deltamethrin in a compound feed sample (532µg/kg). Chapter 5 describes the mycotoxin determination in the same set of feed samples analyzed in Chapter 4, using the same extraction procedure thus integrating simultaneous determination of a great amount of compounds (multi-residue) from different classes and origin (multi-class). From the same sample extracts used for pesticide residues analysis, 56 fungal origin metabolites were determined, including traditional mycotoxins, conjugated or masked mycotoxins and emerging mycotoxins. All of the analyzed samples (100%) evidenced contamination with at least one mycotoxin, and from the total compound included in the analytical scope 38 different mycotoxins were identified (68%). Besides mycotoxins with historical incidence in this types of feed from the studied region (like aflatoxins, fumonisins, zearalenone and deoxynivalenol), other emerging mycotoxins that had not previously been studied were found, such as enniatins, Alternaria toxins and beauvericin. In some cases violations to EU maximum levels for mycotoxins in feeds were observed, as the case of AFB1 in maize grains (ML=5 µg/kg), FB1 in wheat gluten (ML=6000 µg/kg) and ZEA in maize silage (ML=3000 µg/kg). The results obtained from this work constitute an important contribution for a better knowledge about mycotoxin and pesticide residuality in the first stage of the food production chain, and can help to assist producers on the improvement of crops and feed managements, to improve monitoring and control programs for risk assessment and to guarantee safe food and feeds for human and animal health protection. Fil: Michlig, Nicolás. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ingeniería Química. Programa de Investigación y Análisis de Residuos y Contaminantes Químicos; Argentina

[spa] Actualmente, uno de los principales objetivos en la acuicultura está dirigido a minimizar la cantidad de proteína en la dieta suministrada a los peces carnívoros en cultivo y reemplazarla, parcialmente, por carbohidratos y nutrientes más económicos de origen no marino, los cuales cubrirían las necesidades energéticas. La finalidad de estos estudios es determinar si es posible realizar una intervención biotecnológica sobre GDH para reducir parte de la proteína de la dieta que los peces destinan a fines energéticos, teniendo en cuenta que GDH desempeña un papel fundamental en el metabolismo de los aminoácidos para obtener energía y proveer sustratos gluconeogénicos. Esta intervención podría contribuir, por una parte, a reducir el coste de la producción de peces en cultivo, y por otro, a la disminución de la eutrofización de las aguas causada por el incremento en la excreción de compuestos nitrogenados procedentes de la utilización de los aminoácidos como fuente de energía. De esta manera, se intenta forzar a que estos organismos utilicen fuentes alternativas de energía, como los carbohidratos, y por lo tanto reducir la cantidad de proteínas que es necesario suministrar a los peces en cultivo. Asimismo, nos planteamos estudiar la regulación transcripcional del promotor de gen gdh, así como, analizar la distribución tisular y estudiar el control nutricional a que está sujeta la expresión de GDH. Adicionalmente, nos planteamos avanzar en el conocimiento de la función celular que desempeña GDH, así como los efectos metabólicos que podría ejercer una inhibición transitoria de la expresión del ARNm que codifica para la enzima GDH en el hígado de S. aurata utilizando la técnica de silenciación génica a través del diseño de shARNs (short-hairpin ARNs). Ensayos de retardación en gel y de transfección transitoria de células HepG2 con constructos reporteros delecionados y mutados indican que USF2 transactiva el promotor del gen gdh de S. aurata a través de la unión a la secuencia E-box localizada entre las posiciones -10 a -5 en sentido ascendente desde el inicio de la transcripción. El análisis de la expresión del ARNm hepático de GDH y USF2 disminuye significativamente en peces sometidos a ayuno prolongado con respecto a los valores observados en peces alimentados. Además, siguieron el mismo patrón de expresión después de una realimentación a corto y largo plazo. La silenciación génica de GDH en hígado de S. aurata disminuye la expresión de la actividad FBPasa-1 sin afectar a la de PFK-1, favoreciendo por lo tanto el flujo glucolítico respecto al gluconeogénico a nivel del ciclo de sustrato fructosa-6- fosfato/fructosa-1,6-bisfosfato. También promueve el aumento de la concentración de α- cetoglutarato, sustrato de GDH en su actividad reductora, así como de la actividad del complejo OGDH, clave en el control del flujo del ciclo de Krebs. Además, los niveles de glutamato y glutamina, altamente dependientes de glutamato, también descendieron en el hígado de doradas sometidas a silenciación génica de GDH. Los resultados obtenidos permiten concluir que la silenciación de la expresión de GDH en hígado de S. aurata podría ser una diana de interés para favorecer la utilización de los carbohidratos de la dieta como sustrato energético y promover así un efecto de ahorro de proteínas, que permitiría reducir los costos de producción y reducir el impacto ambiental de la acuicultura., [eng] A main goal in aquaculture is aimed at minimizing the amount of protein in the diet supplied to carnivorous fish in culture and to replace it, at least partially, with cheaper nutrients, such as carbohydrates and nutrients from non-marine sources, to cover energy needs. The purpose of these studies is to determine whether it is possible to carry out a biotechnological action on GDH expression, which play a fundamental role in amino acid catabolism and provision of gluconeogenic substrates, to facilitate reduction of dietary protein allocated for energy production and favor the use of alternative nutrients. This could contribute, on the one hand, to reduce the cost of fish production in aquaculture, and on the other hand, to decrease excretion of nitrogen compounds and contamination of local waters. We cloned and charactized transcriptional regulation of the GDH gene promoter, as well as analyzed tissue distribution and nutritional regulation of GDH expression. These studies allowed us to identify USF2 as a key transcription factor involved in control of GDH expression. Additionally, we progressed in the knowledge of the molecular function exerted by GDH by performing transient inhibition of the expression of GDH mRNA in the liver of S. aurata by means of promoting a gene silencing through the design of a specific short hairpin RNA (shRNA). GDH silencing favored glycolysis over gluconeogenesis in the piscine liver. The results obtained allowed us to conclude that silencing of the expression of GDH in the liver of S. aurata could be a biotechnological target of interest to favor the use of dietary carbohydrates to produce energy and promote a protein sparing effect, which would allow reduction of the production cost and the environmental impact of aquaculture.

Universidad Nacional Agraria La Molina. Escuela de Posgrado. Maestría en Administración El estudio evaluó los parámetros productivos Peso corporal, Conversión alimenticia, Índice de eficiencia productiva, Uniformidad, Mortalidad y Pigmentación de tarsos de pollos de carne de la línea Cobb-Vantress 500, suplementadas en la ración con cuatro diferentes programas: T1: Ácidos Orgánicos (AO) desde el día 1 de edad hasta los 46, T2: AO hasta el día 21 de edad y Halquinol (H) hasta los 40 días de edad., T3: H desde el día 1 hasta los 40 días de edad, y un grupo control sin promotor de crecimiento en la ración. Se pudo observar que T1 (AO) obtuvo mejores parámetros productivos, con diferencias estadísticas significativas (p