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Submitted by Cristiane Figueiredo Pinho (cristiane.f.pinho@unesp.br) on 2019-04-25T12:15:18Z No. of bitstreams: 1 Tese Cristiane Figueiredo Pinho.pdf: 3934231 bytes, checksum: 86c7065aaa638241192db65e333d8750 (MD5) Approved for entry into archive by Luciana Pizzani null (luciana@btu.unesp.br) on 2019-04-25T12:38:09Z (GMT) No. of bitstreams: 1 pinho_cf_dr_bot.pdf: 3934231 bytes, checksum: 86c7065aaa638241192db65e333d8750 (MD5) Made available in DSpace on 2019-04-25T12:38:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 pinho_cf_dr_bot.pdf: 3934231 bytes, checksum: 86c7065aaa638241192db65e333d8750 (MD5) Previous issue date: 2019-03-01 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) A capacidade de progressão do câncer de próstata para uma fase não-responsiva às terapias de privação androgênica traz à luz a importância do estudo de tratamentos adjuvantes. Pesquisas recentes apontam receptores estrogênicos como possíveis alvos terapêuticos em neoplasias, podendo ser modulados por fármacos como o Raloxifeno, atualmente utilizado na prevenção do câncer de mama e tratamento da osteoporose. Nesse contexto, o objetivo deste estudo foi avaliar os potenciais efeitos histoprotetores e antiproliferativos da terapia com Raloxifeno, durante a carcinogênese prostática. Para isso, 34 ratos Fisher 344 machos foram inoculados com o carcinógeno MNU (15 mg/kg) na cápsula dos lobos ventral e dorsolateral e receberam doses subcutâneas de cipionato de testosterona, duas vezes por semana, durante 220 dias, processo aqui denominado de Indução de Carcinogênese. Posteriormente, foram divididos em dois grupos experimentais para o período de Tratamento: grupo Raloxifeno, recebendo 10 mg/kg de peso corpóreo/dia de Raloxifeno diluído em 0,2 ml de óleo de milho durante 30 dias consecutivos; grupo Induzido, recebendo somente 0,2 ml de óleo de milho (veículo) durante 30 dias consecutivos. Outros 10 animais pertencentes ao grupo Controle receberam veículo duas vezes por semana por 220 dias para simular o processo de Indução e, posteriormente, durante 30 dias consecutivos para simular o período de Tratamento. Após a eutanásia, o sangue e as próstatas ventral e dorsolateral foram coletados para dosagem hormonal, análise histopatológica das lesões, quantificação de mastócitos, picrossirius (fibras colágenas) e imunomarcação para AR (receptor de andrógenos), α-actina e Ki67 (índice de proliferação). O protocolo de Indução foi capaz de aumentar a proliferação celular, induzir o aparecimento de lesões pré-malignas e malignas, comprometendo a camada muscular lisa periacinar e a distribuição estromal de fibras colágenas em animais Induzidos, enquanto o tratamento com Raloxifeno foi responsável pela redução desses padrões. A imunorreatividade ao AR mostrou-se mais homogênea nos grupos Controle e Raloxifeno nos dois lobos prostáticos, com maior discrepância no grupo Induzido, devido à presença dos diferentes tipos de lesões. O grupo Raloxifeno apresentou os menores níveis de testosterona sérica. Esses resultados mostraram um papel protetor do Raloxifeno sobre o microambiente prostático, atenuando as alterações que se acumulam durante o processo carcinogênico. Prostate cancer ability to progress to a non-responsive phase to androgen deprivation therapy emphasizes the importance of study on adjuvant treatments. Recent research suggests estrogen receptors as possible therapeutic targets in neoplasias and they can be modulated by drugs such as Raloxifene, currently used in the prevention of breast cancer and treatment of osteoporosis. In this context, this study aimed to evaluate the histoprotective and antiproliferative potential effects of Raloxifene therapy during prostatic carcinogenesis. Thereunto, 34 male Fisher 344 rats were inoculated with the MNU carcinogen (15 mg / kg) in the ventral and dorsolateral lobe capsule and received subcutaneous doses of testosterone cypionate twice a week for 220 days. Subsequently, they were divided into two experimental groups: Raloxifene group, receiving 10 mg/kg of body weight/day of Raloxifene diluted in 0.2 ml of corn oil for 30 consecutive days; Induced group, receiving only 0.2 ml corn oil (vehicle) for 30 consecutive days. Another 10 animals belonging to the Control group received vehicle twice a week for 220 days to simulate the induction process and subsequently for 30 consecutive days to simulate the treatment period. After euthanasia, blood and the ventral and dorsolateral prostate lobes were collected for hormonal dosage, histopathological analysis of the lesions, quantification of mast cells, picrosirius (collagen fibers) and immunostaining for AR (androgen receptor), α-actin and Ki67 (proliferation index). Tumor induction protocol was able to increase cell proliferation, induce the appearance of premalignant and malignant lesions, compromising periacinar smooth muscle layer and stromal distribution of collagen fibers in Induced animals, whereas treatment with Raloxifene was responsible for reducing these patterns. AR immunoreactivity was more homogeneous in Control and Raloxifene groups for all prostate lobes, with greater discrepancy in the Induced group due to the presence of lesions. Raloxifene group had the lowest levels of serum testosterone. These results showed a protective role of Raloxifene on the prostatic microenvironment, attenuating the alterations that accumulate during the carcinogenic process.

Made available in DSpace on 2015-08-20T17:09:46Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-24. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-20T17:26:26Z : No. of bitstreams: 1 000841338.pdf: 1301891 bytes, checksum: 81aff4aec334ee1a6c709fad576a9218 (MD5) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) A Iniciação e Progressão das neoplasias prostáticas apresentam base hormonal, onde se destacam as alterações envolvendo estrógenos e andrógenos inerentes ao processo de envelhecimento, com incremento dos níveis estrogênicos em relação aos androgênicos. O Bisfenol A (BPA) é o xenoestrógeno mais estudado na atualidade e sua atividade estrogênica tem despertado interesse devido à ampla dispersão do composto no meio ambiente. Assim sendo, o BPA poderia contribuir para o aumento da incidência, agressividade e capacidade metastática dos tumores prostáticos. Por outro lado, a quimioproteção com os fitoquímicos dietéticos está associada à redução na incidência e na progressão de diferentes neoplasias, diminuição de processos inflamatórios e estresse oxidativo ocasionados por substâncias potencialmente nocivas. Desta forma, este estudo objetivou avaliar os efeitos dos fitoquímicos 3,3'-Di-indolil-metano (DIM) e Genisteína (Gen) isolados e/ou associados em células tumorais prostáticas humanas expostas ao BPA. Para tanto, as linhagens LNCaP e PC-3 foram cultivadas e submetidas, por 96h, aos tratamentos C (controle), B (BPA 10nM/L), BD (BPA 10nM/L + DIM 25μM/L), BG (BPA 10nM/L + Gen 25μM/L) e BDG (BPA 10nM/L + DIM 25μM/L + Gen 25μM/L); cujas doses foram estabelecidas pelo ensaio de viabilidade celular. Posteriormente, foi realizado Western Blotting para estudo das proteínas envolvidas com processos de sobrevivência, proliferação, morte celular, modulação hormonal e estresse oxidativo. A análise dos resultados mostrou que os tratamentos BD, BG e BDG, na linhagem LNCaP, apresentaram capacidade de sub-regular a expressão de AR. Acerca das proteínas ERK1/2 em PC-3, B provocou um aumento de expressão, enquanto BDG ocasionou uma diminuição. Já na linhagem LNCaP, a redução da expressão desta MAPK ficou por conta do tratamento BG. Para as proteínas JNK1/2, verificou-se a capacidade de B sub-regular a... The prostate cancer initiation and progression present hormonal basis and this is mainly related to changes involving estrogens and androgens inherent aging process, where there is an increment of estrogens levels relative to androgens. Nowadays, Bisphenol A (BPA) is the most studied xenoestrogen and its estrogenic activity has attracted attention for its wide dispersion in the environment. Thus, this compound could contribute to the increased incidence, aggressiveness and metastatic ability of prostate tumors. Moreover, the chemoprotection with dietary phytochemicals is associated with a reduction in the incidence and progression of different cancers, decrease inflammatory processes and oxidative stress caused by potentially harmful substances. Therefore, this study aimed to evaluate the effects of phytochemicals 3,3 '-Di-indolyl-methane (DIM) and Genistein (Gen) isolated and/or associated to prostatic tumor cells exposed to BPA. For this purpose, LNCaP and PC-3 cells were cultured and exposed, for 96 hours, to the treatments C (control), B (BPA10nM/L), BD (BPA 10nM/L + DIM 25μM/L), BG (BPA 10nM/L + Gen 25μM/L) e BDG (BPA 10nM/L + DIM 25μM/L + Gen 25μM/L); which doses were established by cell viability assay. Subsequently, the cells were subjected to protein extraction for Western Blotting in order to analyze proteins involved in survival, proliferation, cell death, hormonal modulation and oxidative stress processes. The results showed that BD, BG and BDG treatments, in LNCaP cells, were able to down-regulate AR expression. About the ERK1/2 proteins in PC-3 lineage, B caused an increase of expression, while BDG was responsible for a decrease. However, in LNCaP, reducing the expression of MAPK was due to BG treatment. For the JNK1/2 protein, B had ability to down-regulate its expression and, on the other hand, phytochemicals from 3 treatments (BD, BG and BDG), increasing its expression in LNCaP. For the same cell lineage, the ERα ... FAPESP: 2013/05038-6