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The present study aimed to evaluate basal frequency of micronuclei (MN) and hematological values in adult Phrynops hilarii in order to propose this aquatic turtle, broadly distributed in our region, as a biological monitor for future studies of environmental pollution assessment. Thirty-two adult turtles from a semi-natural environment located at the Zoological Experimental Station (Santa Fe, Argentina) were used. Blood samples were taken and the following parameters were determined: basal frequency of MN (BFMN), total red blood cells (RBC) count, hematocrit (Ht), hemoglobin (Hb), total and differential white blood cells (WBC). The BFMN determined for the species was 3.56 ± 1.39, while hematological parameters showed the following reference values: 0.937 ± 0.12 x106 RBC/µl, 27062.50 ± 4565.43 WBC/mm3, hematocrit 18 ± 1.81% and Hb concentration 4.80 ± 0.45 g/dl. Differential WBC counts were: 76 ± 2.90% for lymphocytes, 20.12 ± 2.56% for heterophils, 1.5 ± 0.19% for monocytes, and 2.12 ± 0.61% for eosinophils, while no basophils were observed in any of the samples analyzed. No differences were observed between males and females in any of the variables analyzed. Data provided in this work could be useful as reference values for future studies of natural regions where P. hilarii occurs, employing this species as a sentinel organism for genotoxic and immunotoxic evaluation of environmental pollutants., Acta Herpetologica, Vol 10 No 1 (2015)

La radiación ultravioleta interviene en la síntesis de vitamina D3 , indispensable para metabolizar calcio y fósforo. Naturalmente, la cantidad y calidad de radiación recibida por los individuos depende de numerosos factores. En condiciones artificiales es posible manipular la radiación e inferir los efectos producidos por dicha exposición sobre el crecimiento y la concentración plasmática de calcio y fósforo en diferentes organismos. En este trabajo se utilizaron 96 crías de C. latirostris de 4 meses de edad, provenientes de nidos cosechados en la naturaleza. Los tratamientos fueron: oscuridad total, 8 y 16 h de radiación ultravioleta artificial (A-B), y fotoperíodo natural (FN), durante 90 días. Se evaluó crecimiento (peso, longitud total y hocico-cloaca) y concentración de calcio y fósforo en plasma. No se observó efecto de los tratamientos sobre las concentraciones de calcio pero si sobre las de fósforo, manifestándose un descenso significativo en el tratamiento de 16 h (p< 0,05). Podemos suponer que la exposición a la que se sometió a las crías no fue suficiente para producir un comportamiento generalizado del metabolismo fosfocálcico. Aquellos animales expuestos al FN presentaron el mayor crecimiento (p< 0,05). Estos resultados indicarían que la exposición natural seria la óptima para el crecimiento de crías de C. latirostris. Fil: Fernández, L.. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Humanidades y Ciencias. Departamento de Ciencias Naturales. Laboratorio de Zoología Aplicada: Anexo Vertebrados (FHUC-UNL/MASPyMA); Argentina Fil: Poletta, Gisela Laura. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Humanidades y Ciencias. Departamento de Ciencias Naturales. Laboratorio de Zoología Aplicada: Anexo Vertebrados (FHUC-UNL/MASPyMA); Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe; Argentina Fil: Imhof, Alba. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Humanidades y Ciencias. Departamento de Ciencias Naturales. Laboratorio de Zoología Aplicada: Anexo Vertebrados (FHUC-UNL/MASPyMA); Argentina Fil: Siroski, Pablo Ariel. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Humanidades y Ciencias. Departamento de Ciencias Naturales. Laboratorio de Zoología Aplicada: Anexo Vertebrados (FHUC-UNL/MASPyMA); Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe; Argentina

Historically, animals used as experimental models have contributed to the knowledgeof multiple aspects of organisms? biology and wildlife, providing valuable informationabout physiological processes, events, environmental situations, and even humaninteractions. Alternatives to animal testing are primarily based on biochemical assays orexperiments with cells/organs cultures, typically far more sophisticated and specific thanin vivo approaches. However, the whole organism allows for inferences about particularspecies and its situation in natural habitats. Sometimes, it is not possible to study directlythe species of interest, making it necessary to identify the closest related species that canbe used as a model organism. Reptiles may be good and interesting models as theyrespond both behaviorally and physiologically to environmental or experimentalconditions. This chapter specifically describes the utility of crocodiles, lizards, and turtlesas animal models in studies of genetics, immunology, and toxicology. The increasedinterest in reptile genomics is evident by newly sequenced genomes, by the establishmentof significant genomic resources for some reptile groups, and by the awareness thatgenomic diversity in Reptiles is substantially greater than that of mammals. Reptiles alsodemonstrate immune components with an apparently higher activity than othervertebrates. Their ability to resist serious injuries makes them interesting models toelucidate mechanisms within the defense system. In the same way, interesting studieswere performed to propose immune components to be used as indicators of toxicsexposure. Environmental contaminants can significantly affect many reptiles. However,these species are often excluded from toxicology studies and ecological risk assessments,even though they are important elements of ecosystems and show similar sensitivity tothat reported for birds and mammals. Genotoxicity, immunotoxicity and oxidative stresscompounds in reptile species, serving as early-warning signals of populationsenvironmentally exposed. Fil: Poletta, Gisela Laura. Universidad Nacional del Litoral; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina Fil: Siroski, Pablo Ariel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; Argentina Fil: Amavet, Patricia Susana. Universidad Nacional del Litoral; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina Fil: Ortega, Hugo Hector. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; Argentina Fil: Mudry, Marta Dolores. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Ecología, Genética y Evolución de Buenos Aires. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Ecología, Genética y Evolución de Buenos Aires; Argentina

Caiman latirostris (yacaré overo) es una de las dos especies de cocodrilianos que habitan en Argentina. Como resultado de la expansión agrícola en Argentina en los últimos 15 años, asociada casi exclusivamente al cultivo de soja, muchas áreas de la distribución geográfica de esta especie quedaron como relictos de ambientes naturales inmersos en zonas con actividad agrícola intensa, donde innumerables plaguicidas se utilizan para el control de las plagas. En este trabajo de Tesis Doctoral se realizaron ensayos controlados de laboratorio y en condiciones semi-naturales para evaluar el efecto de la formulación Roundup® (RU), su principio activo (p.a.) glifosato (GFT), y la mezcla de formulaciones de GFT, endosulfán (ES) y cipermetrina (CIP), en embriones y neonatos de C. latirostris. Los resultados obtenidos indicaron que tanto RU como el p.a. GFT y la mezcla de GFT, ES y CIP, indujeron genotoxicidad, alteraciones enzimáticas y metabólicas y retardo en el crecimiento en embriones de C. latirostris luego de exposición in ovo y en neonatos, por exposición in vivo, incluso en concentraciones utilizadas en las prácticas agrícolas de rutina. De estos hallazgos se infiere que el uso masivo de dichos plaguicidas pondría en serio peligro a los organismos ambientalmente expuestos a ellos. Caiman latirostris (broad snouted-caiman) is one of the two species of crocodilians that occur in Argentina. As a consequence of agriculture frontiers expansion in the last 15 years, associated almost exclusively to soybean crop, many areas of the geographic distribution of the broad snouted caiman remain as fragments of natural environments immersed in areas of intense agricultural activity, where several pesticides are used for pest control. In the framework of the present Thesis, different assays were conducted in laboratory controlled conditions and field-like conditions in order to evaluate the effect produced by the pesticide formulation Roundup® (RU), its active principle (a.p.) glyphosate (GPT), and the mixture of the pesticides GPT, endosulfan (ES) and cypermethrin (CYP) in C. latirostris embryos and neonates. Results showed that RU, its a.p. GPT and the mixture of GPT, ES and CYP, induced genotoxicity, enzymatic and metabolic alterations as well as growth delay in C. latirostris embryos exposed in ovo and neonates exposed in vivo, even at concentration commonly used in routine agricultural practices. These results demostrated that the massive used of the pesticidas studied could imply a serious danger for the organisms environmentally exposed. Fil: Poletta, Gisela Laura. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

Fil: Colussi, Carlina Leila. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentina. La investigación epidemiológica de las anomalías congénitas representa un desafío debido a la multiplicidad de factores de riesgo asociados, entre ellos los ambientales. El monitoreo de los efectos genotóxicos en diferentes poblaciones es una herramienta útil en el biomonitoreo humano y tiene gran importancia biológica para estimar los riesgos de exposición a mezclas químicas complejas. El objetivo del presente estudio fue describir la prevalencia de anomalías congénitas relacionada con factores de exposición materna y ambiental mediante la determinación de biomarcadores de exposición y genotoxicidad en muestras maternas. Para ello, se desarrolló un estudio descriptivo transversal de casos y controles, en mujeres puérperas de Santa Fe, Argentina. Como resultado, 290 madres participaron en el estudio. Se observaron diferencias significativas entre ambos grupos, para lugares de residencia y variables ginecológicas. Se detectaron metabolitos de plaguicidas organoclorados (OC), organofosforados (OP) y piretroides (PYR), cuantificándose más frecuentemente atrazina (ATZ) (57,14%), carbendazim (CBZ) (46,42%) y metilparabeno (46,42%). Se encontró una correlación positiva entre el número de plaguicidas en sangre y las variables genotóxicas. Las madres de niños con anomalías genitourinarias fueron las que presentaron las mayores concentraciones de ATZ y OF. Estos resultados mostraron una realidad sanitaria, que podría impactar en gran medida en la salud de los futuros adultos, nacidos prematuros. Por otro lado, la mezcla de pesticidas detectada confirma las condiciones ambientales de vida de las mujeres y la exposición transplacentaria a estos compuestos en cada embarazo. Los efectos potenciales sobre la salud de los descendientes a largo plazo son desconocidos e impredecibles. The epidemiological investigation of congenital anomalies represents a challenge due to the multiplicity of associated risk factors, environmental among them. The monitoring of genotoxic effects in different populations is a useful tool in human biomonitoring and has great biological importance to estimate the exposure risks to complex mixtures of chemical substances. This study aimed to describe the prevalence of birth defects related to maternal and environmental exposure factors by determining exposure and genotoxicity biomarkers in maternal samples. A descriptive case and control cross-sectional study was developed in Santa Fe, Argentina postpartum women. As result, 290 women participated in the study. Significant differences were observed between both groups, for places of residence and gynecological variables. Metabolites of organochlorine (OC), organophosphate (OP), and pyrethroid (PYR) pesticides were detected. The most frequently quantified compounds were atrazine (ATZ) (57.14%), carbendazim (CBZ) (46.42%), and methylparaben (46.42%), among others. A positive correlation was found between the number of pesticides in blood and genotoxic variables. On the other hand, mothers of children with genitourinary anomalies were the ones with the highest concentrations of ATZ and OF. These results showed a deep background in the health reality of Santa Fe, which could greatly impact the health of future adults, who have been born preterm. On the other hand, the mixture of pesticides detected confirms the environmental living conditions of women and the transplacental exposure to these compounds in each pregnancy. The potential effects on long-term descendent health are unknown and unpredictable. Universidad Nacional del Litoral Ministerio de Producción, Ciencia y Tecnología de la Provincia de Santa Fe

Fil: Odetti, Lucía Magdalena. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentina. El objetivo de este trabajo fue identificar respuestas de daño oxidativo, genotóxico y moleculares de expresión génica específicas como biomarcadores sensibles de exposición a plaguicidas en C. latirostris. Se evaluaron los efectos de las formulaciones de glifosato (GLI), cipermetrina (CIP) y clorpirifos (CPF) por separado y en forma de mezclas durante el período embrionario al igual que en juveniles y neonatos en condiciones semi-naturales. Las concentraciones utilizadas fueron las recomendadas para su aplicación en cultivos de soja con los siguientes grupos experimentales: GLI (Roundup® Full II): 2% y 1%; CIP (Atanor®): 0.12% y 0.06%; CPF (Lorsban®): 0.8% y 0.4%; 3 grupos expuestos a mezclas binarias, un grupo expuesto a la mezcla de las tres formulaciones, un control negativo y un control de vehículo. Se tomaron muestras de sangre para analizar el daño en el ADN y el daño oxidativo en el ADN, los niveles de peroxidación lipídica, las actividades de las enzimas CAT y SOD y la expresión de sus genes correspondientes. Además, se analizó el posible efecto sobre el desarrollo de los individuos. Los resultados indicaron daño en el ADN, con una fuerte incidencia en la oxidación de purinas y pirimidinas en el caso de exposición a formulaciones de GLI, CIP y CPF, así como en todas las mezclas. No se observó efecto sobre la LPO ni modificación de las enzimas antioxidantes. Sin embargo, encontramos variaciones significativas en los patrones de expresión de los genes cat y sod. Este es el primer análisis de expresión de genes asociados al estrés oxidativo y a defensas antioxidantes en C. latirostris y el primer reporte de su utilización como biomarcadores en respuesta a condiciones de estrés en este caso, ejercida por la exposición a plaguicidas. The objective of this work was to identify specific oxidative, genotoxic and molecular gene expression damage responses as sensitive biomarkers of pesticide exposure in C. latirostris. The effects of glyphosate (GLY), cypermethrin (CYP) and chlorpyrifos (CPF) formulations were evaluated separately and as mixtures during the embryonic period as well as in juveniles and neonates under semi-natural conditions. The concentrations used were those recommended for application in soybean crops with the following experimental groups: GLY (Roundup® Full II): 2% and 1%; CYP (Atanor®): 0.12% and 0.06%; CPF (Lorsban®): 0.8% and 0.4%; 3 groups exposed to binary mixtures, one group exposed to the mixture of the three formulations, a negative control and a vehicle control. Blood samples were taken to analyze DNA and oxidative DNA damage, lipid peroxidation levels, CAT and SOD enzyme activities and the expression of their corresponding genes. In addition, the possible effect on the development of individuals was analyzed. The results indicated DNA damage, with a strong impact on purine and pyrimidine oxidation in the case of exposure to GLY, CYP and CPF formulations, as well as in all mixtures. No effect on LPO or modification of antioxidant enzymes was observed. However, we found significant variations in the expression patterns of cat and sod genes. This is the first analysis of gene expression associated with oxidative stress and antioxidant defenses in C. latirostris and the first report of their use as biomarkers in response to stress conditions, in this case, exerted by exposure to pesticides. Agencia Nacional de Promoción Científica y Tecnológica Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas Ministerio de Ambiente y Cambio Climático Mutual del Personal Civil de la Nación