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Orientador: Cid Aimbiré de Moraes Santos Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde , Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa : Curitiba, 29/06/2018 Inclui referências: p. 110-120 Área de concentração: Farmacologia Resumo: Lafoensia pacari é uma espécie nativa do Cerrado brasileiro conhecida popularmente como dedaleira e mangava-brava. Suas cascas são utilizadas como tônico e no tratamento de inflamações, úlceras gástricas, feridas, febre e vários tipos de câncer. Estudos anteriores demonstraram que o extrato metanólico desta espécie apresenta atividade promissora, induzindo a morte de células de diferentes linhagens tumorais. O objetivo deste trabalho foi realizar o estudo químico e biomonitorado de extratos e frações de L. pacari, sobre células leucêmicas U-937 e de câncer colorretal HRT-18. O extrato metanólico foi fracionado por Cromatografia de Partição Centrífuga e suas frações foram submetidas ao ensaio de citotoxicidade e clonogênico, assim como os extratos. Os mesmos também foram analisados por LC-DAD-MS, nos quais foram identificados a presença de ácido elágico e seus derivados glicosilados, catequinas, bem como isômeros de punicalina, punicalagina e pedunculagina I. As cascas de L. pacari demonstraram serem ricas em taninos hidrolisáveis, ácido elágico e seus derivados, a maioria delas descritas pela primeira vez nesta espécie. A mistura destas substâncias presentes nas frações foi capaz de induzir a morte de células tumorais em proliferação e impedir a duplicação de células clonogênicas, semelhante ao observado para o extrato metanólico. Os resultados apresentados neste trabalho sugerem que as atividades biológicas das cascas usadas pela população do Cerrado para o tratamento do câncer é devido aos efeitos indutores de apoptose promovidos pela mistura de elagitaninos. Palavras-chave: Taninos hidrolisáveis. Câncer colorretal. Plantas medicinais. Apoptose. Abstract: Lafoensia pacari is a native species of the Brazilian Cerrado popularly known as "dedaleira" and "mangava-brava". The barks have been used as a tonic and to treat inflammation conditions, gastric ulcers, wounds, fevers, and various types of cancer. Studies previously reported demonstrated that the methanolic extract of this species shows promising activity, inducing the death of cells from different tumor lines. The aim of this work was to perform a chemical and biomonitoring study of L. pacari extracts and fractions on U-937 leukemic and HRT-18 colorectal cancer cells. The methanolic extract was fractionated by Centrifuge Partition Chromatography and its fractions were submitted to the cytotoxicity and clonogenic assay, as well as the extracts. They were also analyzed by LC-DAD-MS and were identified as ellagic acid and its glycosylated derivatives, catechins, as well as punicalin, punicalagin, and pedunculagin I isomers. The barks of L. pacari are rich in hydrolysable tannins, ellagic acid and their derivatives, most of them reported for the first time in this species. The mixture of these compounds present in the fractions was able to induce the death of proliferating tumor cells and abrogate the growth of clonogenic cells, similar fashion showed by the methanolic extract. The results presented in this work suggest that the biological activities of the barks used by Cerrado's population to treat cancer conditions are due to the apoptogenic effects promoted by a mix content of ellagitannins. Key-words: Hydrolysable tannins. Colorectal cancer. Medicinal plants. Apoptosis.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2011 A busca por novos agentes terapêuticos inovadores, derivados de produtos naturais, aumentou significativamente na última década, principalmente as pesquisas destinadas para o tratamento de doenças psiquiátricas, dentre elas, a ansiedade e a depressão. O presente trabalho teve por objetivo avaliar a possível atividade ansiolítica e antidepressiva do ex-trato aquoso bruto de Tynanthus micranthus, em camundongos Swiss. A análise dos custos financeiros de todas as atividades envolvidas foi também realizada para verificar se a implantação desses modelos comportamentais na indústria farmacêutica é factível na busca por plantas promissoras para esta atividade. O material vegetal foi coletado, processado e submetido a reações colorimétricas e de precipitação, para a caracterização da fitoquímica preliminar. Em seguida, preparou-se o extrato bruto liofilizado, o qual foi administrado, pela via oral, em camundongos Swiss machos. Realizou-se o teste de triagem hipocrática (30 min - 10 dias) após a administração do extrato. Os animais tratados agudamente foram submetidos ao teste de labirinto em cruz elevado, campo aberto, teste da chaminé, sono induzido por éter etílico, teste de esconder esferas, convulsão induzida por PTZ e por eletrochoque máximo corneal e suspensão pela cauda. A análise fitoquímica preliminar mostrou a presença de cumarinas voláteis, polifenóis, taninos, catequinas, flavonóides e saponinas, sendo alguns destes constituintes já relatados na literatura para esta espécie vegetal. O tratamento agudo com altas doses de EA, por via i.p. e v.o., no teste de triagem hipocrática, mostrou que a T. micranthus não é uma planta tóxica nas doses testadas. Além disso, foi possível observar um efeito analgésico em todas as concentrações e vias administradas. Nos testes de labirinto em cruz elevado, campo aberto e sono induzido por éter etílico foi possível observar uma tendência de efeito ansiolítico, sem efeito hipno-sedativo, para a dose de 100 mg/kg. Nos testes de convulsão induzida por pentilenotetrazol e por eletrochoque corneal foi possível observar uma tendência a um efeito anticonvulsivante para as doses de 300 e 600 mg/Kg, respectivamente. O teste da chaminé parece não ser um teste adequado para a avaliação do prejuízo motor, pois os animais apresentaram dificuldade em executar o teste por fatores fisiológicos. No teste de esconder esferas houve uma tendência a um efeito positivo na concentração de 300 mg/Kg, indicando uma possível utilização para pesquisas de TOC, o mesmo ocorrendo para o teste de suspensão pela cauda (atividade antidepressiva). Quanto aos custos, o teste de triagem hipocrática apresentou um custo de R$ 160,82, mostrando resultados importantes para a decisão das pesquisas a serem realizadas. O custo total foi de R$ 4.233,73, demonstrando que a realização de testes comportamentais para a investigação de possíveis plantas promissoras para novos produtos representam uma ferramenta importante, mas que deve ser utilizada de forma consciente, para evitar desperdícios quanto à mão-de-obra, material aplicado e depreciação de equipamentos. As parcerias entre universidades e empresas podem ser uma medida alternativa viável para o desenvolvimento, a médio e longo prazo, de novos medicamentos fitoterápicos.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) A Mikania glomerata (guaco) é uma planta medicinal utilizada em medicamentos para tosse e problemas respiratórios. A principal substância ativa do guaco é a cumarina que pertence à família das benzopironas, porém há outros metabólitos secundários presentes na planta como o ácido o-cumárico. O objetivo deste trabalho foi apresentar meios para melhorar o processo extrativo e consequentemente melhorar a concentração de cumarina em extratos de guaco. Assim, realizou-se três métodos de extração (maceração, turbólise e utilizou-se enzima celulase) para extrair a cumarina e o ácido o-cumárico na amostra de M. glomerata. Após o processo de extração analisou-se por cromatografia líquida de alta eficiência os extratos utilizando um cromatógrafo (Thermo Scientific, Ultimate 3000 UHPLC+ focused), coluna C18 (250 mm x 4,6 mm x 5 [microlitro]), com fase móvel composta por metanol e água acidificada (ácido fosfórico 0,1%, v/v), acompando os seguintes comprimentos de onda: 220 nm, 254 nm, 280 nm e 340 nm, em seguida efetuou-se análise estatística dos dados utilizando o programa Statistica versão 10. Portanto, ao comparar os três métodos de extração realizados, o método utilizando enzima celulase foi o mais eficiente, no qual apresentou 97% de recuperação de cumarina na amostra, seguido do método por turbólise sendo a porcentagem de recuperação de 74,4%, com isso a extração da cumarina presente na M. glomerata pode ser otimizado com a utilização de enzimas por ser mais rápido e eficiente. Mikania glomerata (guaco) is a medicinal plant used in medications for cough and respiratory illnesses. The main active substance present in guaco is coumarin, which belongs to the benzopyrone group, although there are other secondary metabolites present in the plant, such as o-Coumaric acid. The objective of this study was to present means to improve the extraction process and, consequently, to improve the concentration of coumarin in guaco extracts. Thus, three extraction methods (maceration, turbolysis and through cellulase enzyme) were used to extract coumarin and o-Coumaric acid of M. glomerata samples. After the extraction process, the extracts were analyzed by high-performance liquid chromatography analyzed a chromatograph (Thermo Scientific, Ultimate 3000 UHPLC + focused), column C18 (250 mm x 4.6 mm x 5 [microliter]), with a mobile phase composed of methanol and acidified water (0.1% phosphoric acid, v / v), with the following wavelengths: 220 nm, 254 nm, 280 nm and 340 nm, and the data statistical analysis was performed using the Statistica program, version 10. Therefore, when comparing the three extraction methods employed, the method using cellulase enzyme was the most efficient, in which it presented 97% of coumarin recovery in the sample, followed by the turbolysis process, the recovery percentage being 74.4%, thus the extraction of coumarin present in M. glomerata can be optimized with the use of enzymes, as it is a faster and more efficient process.