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Die Arbeitsgruppe, in der diese Dissertation entstand, hat bereits gezeigt, dass Interleukin- 1 (IL-1) eine ausgeprägte, langanhaltende und insulin-unabhängige Hypoglykämie verursacht. Diese IL-1-induzierte Hypoglykämie wird durch Mechanismen erzeugt, welche sowohl auf peripherer, als auch zentraler Ebene wirken. Erst kürzlich haben wir berichtet, dass IL-1 trotz der gleichzeitigen Hypoglykämie in vivo die energetische Aktivität im Gehirn steigert und in vitro die Glukose-Aufnahme von Neuronen und Astrozyten erhöht. Das Ziel dieser Arbeit ist es zu erforschen, ob IL-1 die Glukose-Aufnahme durch Immunzellen ebenfalls beeinflussen kann. Für diesen Zweck wurden murine Splenozyten mit Lipopolysaccharid (LPS) stimuliert und das während 4 oder 24 Stunden produzierte IL-1 mit IL-1 Rezeptor-Antagonist (IL-1Ra) neutralisiert. Die Glukoseaufnahme wurde mit dem fluoreszierenden Glukose-Analog 2-(N-(7-Nitrobenz-2-oxa-1,3-diazol-4-yl)- Amino)-2-Deoxyglukose (2-NBDG) und Durchflusszytometrie bestimmt. Die Resultate zeigen, dass IL-1Ra die 2-NBDG-Aufnahme in LPS-stimulierten Zellen zu einem Grad verringert, der vergleichbar mit der Blockade von Glukose-Transportern durch Phloretin ist. Prozentual war die Verringerung der 2-NBDG-Aufnahme infolge der IL-1 Blockade in LPS-stimulierten B-Zellen nach 24 h in vitro höher als in nicht stimulierten B-Zellen, was auf eine aktivationsabhängige Zunahme der Glukoseaufnahme durch IL-1 schließen lässt. Der Agonist IL-1b erhöhte die 2-NBDG-Aufnahme in B-Zellen innerhalb einer Stunde. Allerdings war die prozentuale Erhöhung der 2-NBDG-Aufnahme vergleichsweise gering, da die IL-1 Rezeptoren unter den in vitro Bedingungen dieser Arbeit vermutlich fast alle bereits durch IL-1 gebunden waren. Weder Myeloid Differentiation Primary Response 88 (MyD88), ein Signal-Adapter Protein des angeborenen Immunsystems, noch der einwärts gleichrichtende Kaliumkanal 6.2 (Kir6.2) scheinen eine relevante Rolle im Signalweg zu haben, der die Glukoseaufnahme durch IL-1 beeinflusst. Eine pharmakologische Inhibition von AKT/PKB konnte die Effekte von IL-1 auf die Glukoseaufnahme von B-Zellen nicht verhindern, während die Ergebnisse in T-Zellen nicht eindeutig waren. Die Effekte von endogen produziertem IL-1 auf den energetischen Metabolismus von Splenozyten wurden ebenfalls untersucht. Durch die Verwendung von live cell real-time metabolic flux Analysen wurde beobachtet, dass die Blockade von endogenem IL-1 in einer verringerten oxygen consumption rate (OCR) resultierte, die sich sukzessiv innerhalb einer Stunde wieder auf den Ausgangswert normalisierte. Die Verringerung der OCR war von vergleichbarem Ausmaß wie die Inhibition der mitochondriellen ATP-Erzeugung durch Oligomycin. In der initialen Phase der IL-1Ra-Inhibition in nicht stimulierten Splenozyten wurde die Verringerung der oxidativen Phosphorylierung von einem Anstieg der extracellular acidification rate (ECAR) begleitet, welche ein Marker für die Laktatproduktion durch Glykolyse ist. In LPS-stimulierten Splenozyten wurde die ECAR nach IL-1Ra-Injektion nicht weiter erhöht, da die Glykolyse wahrscheinlich nicht weiter beschleunigt werden kann. Die metabolischen Effekte der IL-1-Blockade sind nicht MyD88-abhängig. Die Resultate deuten darauf hin, dass endogen produziertes IL-1 die Glukoseaufnahme und den energetischen Metabolismus von Immunzellen erhöhen kann und möglicherweise damit zur Relokation von Energie zum Immunsystem beiträgt., The research group in which this work was performed has shown that interleukin-1 (IL-1) induces a profound, long-lasting, and insulin-independent hypoglycemia, by mechanisms acting at peripheral and central levels. More recently, we reported that despite the concomitant hypoglycemia, IL-1 increases energetic activity in the brain in vivo and glucose uptake by neurons and astrocytes in vitro. The aim of this work was to study whether IL-1 can also affect glucose uptake by immune cells. For this purpose, murine spleen cells were stimulated with lipopolysaccharide (LPS) during 4 or 24 hours and endogenously produced IL-1 was neutralized with IL-1 receptor antagonist (IL-1Ra). Glucose incorporation was evaluated by uptake of the fluorescent glucose analog 2-(N-(7-Nitrobenz-2-oxa-1,3- diazol-4-yl)Amino)-2-Deoxyglucose (2-NBDG) and flow cytometry. The results showed that IL-1Ra decreases 2-NBDG uptake by LPS-stimulated cells to a degree comparable to that observed when glucose transporters are blocked with phloretin. Percentually, the decrease of 2-NBDG uptake in response to IL-1 blockade was larger in LPS-stimulated B cells than in unstimulated B cells after 24 h in vitro, suggesting an activation-dependent enhancement of glucose uptake by IL-1. Application of the agonist IL-1b during one hour increased 2-NBDG uptake by B cells, however, only to a comparably small extent, presumably because IL-1 receptors are already almost saturated under the in vitro conditions used in these studies. Neither Myeloid differentiation primary response 88 (MyD88), an innate immune signal adapter protein, nor the inward-rectifier potassium channel 6.2 (Kir6.2) seem to play a relevant role in the intracellular signaling pathway involved in the effect of IL-1 on glucose uptake. Pharmacological inhibition of AKT/PKB did not prevent the effect of IL-1 on glucose uptake in B cells, while the results in T cells were not clear. The effect of endogenously produced IL-1 on spleen cell energetic metabolism was also investigated. Using live cell real-time metabolic flux analysis, it was found that blockade of endogenous IL-1 resulted in a reduction of the oxygen consumption rate (OCR) that gradually recovered to the basal value after one hour. The decrease in OCR was of a magnitude comparable to the inhibition of mitochondrial ATP generation elicited by oligomycin. In the initial phase of IL-1Ra inhibition in non-stimulated spleen cells, the reduction of oxidative phosphorylation was paralleled by an increase in the extracellular acidification rate (ECAR), which is considered a marker of lactate production by glycolysis. The increase in ECAR induced by LPS stimulation could not be further augmented after IL-1Ra injection, probably because glycolysis could not be additionally accelerated. After the immediate effects of endogenous IL-1 blockade, which lasted for approximately 2 h, ECAR decreased below control values in both unstimulated and LPS-stimulated cells. The metabolic effects of IL-1 blockade were not MyD88-dependent. The results indicate that endogenously produced IL-1 can increase glucose uptake and energetic metabolism in immune cells and possibly contributes to the relocation of energy to the immune system.

Introducción y objetivos: La enteroscopia de doble balón es un método endoscópico recientemente introducido que permite la completa visualización, toma de biopsias e instauración de medidas terapéuticas del intestino delgado. Mediante este estudio, se busca describir la experiencia adquirida en nuestra institución con el fin de determinar las características de los pacientes que fueron llevados a esta intervención.Materiales y métodos: Se realizó un estudio descriptivo de corte transversal donde se incluyeron todos los pacientes mayores de 18 ̃años que ingresaron al Hospital Universitario de la Fundación Santa Fe de Bogotá para la realización de enteroscopia de doble balón desde el 01 de enero de 2013 hasta el 31 de diciembre de 2017.Resultados: La muestra recolectada fue de 93 procedimientos en 73 pacientes, la media de edad fue de 57.91 a ̃nos, la proporción de varones y mujeres fue muy similar, y no se presentaron complicaciones graves. Con respecto a la indicación para la realización de la enteroscopia, la más frecuente fue el sangrado digestivo (manifiesto y oculto) en el 49.46% seguida por la diarrea crónica en el 16.13%. La videocápsula endoscópica fue el estudio previo más frecuente (53.76%).Cuarenta y nueve procedimientos fueron realizados por vía anterógrada y 44 fueron realizados por vía retrógrada. El 86.02% de las enteroscopias fueron realizadas con fines diagnósticos y el 13.98% con fines terapéuticos. La enteroscopia normal fue el hallazgo más frecuente (59.68%),seguido por la presencia de úlceras (15.05%).Conclusiones: Nuestros resultados son similares a los mundiales con respecto a las indicaciones,vía de inserción y profundidad, sin presentarse complicaciones graves Introduction and aims: Double-balloon enteroscopy is a recently introduced endoscopic methodthat enables complete visualization of the small bowel, as well as biopsy sampling and thera-peutic interventions in that part of the intestine. The aim of the present study was to describethe experience acquired at our hospital to determine the characteristics of the patients thatunderwent the procedure.Materials and methods:A descriptive, cross-sectional study was conducted on all patientsabove 18 years of age admitted to the Hospital Universitario de la Fundación Santa Fe deBogotá for double-balloon enteroscopy, within the time frame of January 2013 to December2017.Results: The study sample included 93 procedures in 73 patients. Mean patient age was 57.91years, with a similar number of men and women. There were no severe complications. Themost frequent indication for the enteroscopy was gastrointestinal bleeding (overt or occult),presenting in 49.46% of the patients, followed by chronic diarrhea (16.13%). Video capsuleendoscopy was the previous study most frequently performed (53.76%). Anterograde double-balloon enteroscopy was carried out in 49 patients and 44 patients underwent the retrogradeprocedure. A total of 86.02% of the enteroscopies were diagnostic procedures and 13.98% were therapeutic. Normal enteroscopy was the most frequent finding (59.68%), followed bythe presence of ulcers (15.05%). Conclusions: Our results were similar to those reported worldwide, with respect to indications,insertion route, and insertion depth, and there were no severe complications.