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Einleitung: MCM6 ist eines von sechs Proteinen der MCM Familie und spielt eine Rolle in der DNA Replikation und ist ein Marker von proliferierenden Zellen. Proliferationsmarker und deren Expressionsstärke als Prognosefaktoren werden kontrovers diskutiert beim kolorektalen Karzinom. Material[for full text, please go to the a.m. URL], 129. Kongress der Deutschen Gesellschaft für Chirurgie

Das MCL hat mit einer medianen Gesamtüberlebenszeit von drei bis vier Jahren unter den Non-Hodgkin-Lymphomen eher einen aggressiven klinischen Verlauf. Es gibt nur wenige anerkannte Prognosefaktoren wie Alter, Stadium, MIPI und eine hohe Expression von Proliferationsassoziierten Proteinen. Für die Therapiestratifizierung werden weitere Prognosefaktoren benötigt. Bei vielen Krebserkrankungen spielen reaktive Tumor infiltrierende Immunzellen eine Rolle für den klinischen Verlauf. Es existieren nur wenige Studien zu TAM und Histiozyten und deren Bedeutung für das Gesamtüberleben in Lymphomen und es findet sich keine Untersuchung speziell zum MCL. In der vorliegenden Arbeit wurden Lymphknoten von 93 Patienten (71 Männer, 22 Frauen) mit einem MCL vor Therapiebeginn auf die Anzahl der TAM, Mastzellen und IDC immunhistochemisch untersucht. Dies erfolgte mit Hilfe von monoklonalen Antikörpern gegen CD68, S100 und CD117. Es wurden in jedem Präparat in zehn HPF die markierten, positiven Zellen bestimmt und deren Mittelwert ermittelt. Anschließend wurden die Ergebnisse mit den klinischen Daten korreliert. In der Untersuchung von CD68 positiven Makrophagen konnten wir zeigen, dass Patienten mit MCL und wenigen Makrophagen (unter 10/HPF) ein deutlich und statistisch signifikant (p=0.0267) längeres Überleben mit 37.7 Monaten aufwiesen als die Gruppe mit einer hohen Anzahl an Makrophagen (über 10/HPF). Dies galt auch für die Analyse der Hotspots mit Werten über und unter 20/HPF (p=0.0059). Bisherige Studienergebnisse wie beim Follikulär Lymphom stimmen mit denen unserer Arbeit überein. In der Untersuchung der tumorinfiltrierenden Mastzellen fand sich sowohl bei der Giemsa-Färbung (p=0.3004 und 0.9348) als auch bei der CD117-Untersuchung (p=0.8370 und p=0.9229) kein signifikanter Unterschied beim Gesamtüberleben. Ähnlich verhält es sich bei den Ergebnissen der IDC, welche mit der S100 Färbung dargestellt wurden. Auch hier bestand kein signifikanter Unterschied im Gesamtüberleben in Bezug auf die Anzahl der tumorinfiltrierenden IDC (p=0.6120 und p=0.2937). Abschließend ist festzuhalten, dass Patienten mit einer hohen Dichte an TAM ein signifikant schlechteres Gesamtüberleben aufweisen als diejenigen mit einer kleineren Dichte. Somit konnten wir zum ersten Mal beim MCL zeigen, dass TAM einen prognostischen Wert für das Gesamtüberleben bei dieser Erkrankung haben. In zukünftigen Studien sollten diese Erkenntnisse an einem größeren Kollektiv untersucht werden, die auch mit Immun-Chemotherapien wie mit Rituximab (Anti-CD20 Antikörper) behandelt wurden.

Das Mantelzell- Lymphom ist ein malignes Non- Hodgkin- Lymphom der B- Zellreihe mit einem medianen Überleben von 3 - 4 Jahren. Neben einer klinisch aggressiven Form gibt es auch Patienten mit Überlebensraten über 10 Jahre. Es gibt nur wenige anerkannte Prognosefaktoren, die eine Differenzierung zwischen der aggressiven und der langsam fortschreitenden Form ermöglichen. Hierzu zählen beispielsweise der Mitose- Index, der Ki- 67- Index sowie die proliferationsassoziierten Proteine. Es wurde gezeigt, dass tumorinfiltrierende Immunzellen eine besondere Rolle für den klinischen Verlauf bei diversen Krebserkrankungen spielen, so auch bei Lymphomen. Jedoch existieren nur wenige Studien die speziell die Bedeutung von Tumor infiltrierenden CD3-, CD8- sowie FoxP3- positiven T- Zellen für das Gesamtüberleben beim Mantelzell- Lymphom analysieren. In der vorliegenden Arbeit wurden Lymphknotenbiopsate von 94 Patienten (72 Männer, 22 Frauen) mit einem Mantelzell- Lymphom vor Therapiebeginn untersucht. Es wurde die Anzahl von tumorinfiltrierenden CD3-, CD8- sowie FoxP3- positiven T-Zellen immunhistochemisch bestimmt. Hierzu wurden in jedem Präparat die mit monoklonalen Antikörpern dargestellten Zellen in zehn High- Powerfields (HPF) gezählt sowie ein Mittelwert erstellt. Die Ergebnisse wurden anschließend unter Einbeziehung der klinischen Daten ausgewertet. Wir konnten zeigen, dass Patienten mit MCL und vielen (über 20 Zellen/HPF) CD8-positiven T- Zellen im Tumor ein statistisch signifikant längeres Überleben mit 42 Monaten haben als Patienten mit einer niedrigeren Anzahl an CD8- positiven T-Zellen (p= 0.0335). Bei der Untersuchung der tumorinfiltrierenden FoxP3- positiven T-Zellen zeigte sich ebenfalls ein statistisch signifikant längeres Überleben mit 38.2 Monaten bei Patienten mit einer hohen Anzahl (über 25 /HPF), im Gegensatz zu solchen mit einer niedrigen Anzahl (unter 25/HPF) an positiv markierten Zellen (p=0.177). Auch die Hotspot- Analysen für CD8- und FoxP3- positive Zellen deckten sich mit den Analysen der Durchschnittswerte. Allerdings sah man bei den CD3-positiven Zellen ein gegensinniges Ergebnis. Denn die Auswertung ergab, dass Patienten mit einer hohen Anzahl (über 55/HPF) an CD3- positiven T- Zellen ein schlechteres Gesamtüberleben, als diejenigen mit einer niedrigen Anzahl (unter 55/HPF) hatten (p=0.0215). Da CD3 jedoch auf allen reifen T- Zellen exprimiert wird und somit auch auf CD8- und FoxP3- positiven T- Zellen, scheint diese Beobachtung zunächst widersprüchlich zu den zuvor dargestellten Ergebnissen zu sein. Jedoch fehlt zur genauen Interpretation des Ergebnisses eine zusätzliche Untersuchung der Lymphknotenpräparate auf CD4- positive T- Zellen, da diese einen Großteil der T-Lymphozyten darstellen. Diese wurden aus der Differenz der CD3- und CD8- Zellen pro Schnitt ermittelt. Hierbei fanden sich in Korrelation zu den Überlebensdaten keine signifikanten Unterschiede. Zusammenfassend konnte folglich gezeigt werden, dass tumorinfiltrierende T- Zellen (CD8 und FoxP3) einen wichtigen Prognosefaktor beim MCL darstellen. Patienten mit einer hohen Anzahl an CD8- bzw. FoxP3- positiven T- Zellen haben ein signifikant besseres Gesamtüberleben als diejenigen mit einer niedrigeren Anzahl. Weiterhin konnte gezeigt werden, dass eine hohe Anzahl an CD3- positiven T- Zellen ein signifikant schlechteres Gesamtüberleben bei Patienten mit MCL bedeutet.

Das Kolorektale Karzinom ist einer der häufigsten Krebserkrankungen in Deutschland. Die Inzidenzrate und Mortalität steigen stetig an. Neben klinischen Prognosefaktoren gibt es wenige anerkannte Risikofaktoren. Die Zellteilung und Proliferation spielt bei vielen Tumoren eine zentrale Rolle. Die Bedeutung der Expression von proliferationsassozierten Proteinen im Kolorektalen Karzinom wird in unterschiedlichen Studien sehr kontrovers diskutiert. Ziel dieser Untersuchung war es die Expression der Proliferationsmarker Topoisomerase (Topo) II α und Minichromosome Maintenance 6 (MCM6) bei Patienten mit Kolorektalen Karzinom zu untersuchen. Die Ergebnisse sollten dann mit den klinisch-pathologischen Befunden korreliert werden. Insbesondere sollte überprüft werden, ob eine unterschiedlich hohe Expression von Topo II α und MCM6 mit einem unterschiedlichen progressionsfreien und Gesamtüberleben assoziiert ist. Formalinfixiertes in Paraffin eingebettetes Tumorgewebe von 619 Patienten wurde immunhistochemisch mit den Antikörper Ki-S4 gegen Topoisomerase II α und Ki-MCM6 gegen MCM6 untersucht. 500 Tumorzellen wurden ausgezählt, wobei auch Areale mit hoher Proliferation berücksichtigt wurden. Es wurde ein prozentualer Mittelwert bestimmt und mit den klinischen Daten korreliert. MCM6 hat insgesamt eine signifikant (p50%) zeigen eine bessere Prognose (medianes Gesamtüberleben nicht erreicht, 5 Jahresüberlebensrate 69.2%) als Patienten mit niedriger Expression (

Follicular dendritic cells represent a unique population of specialized antigen-presenting cells found in the primary and secondary lymphoid follicles under reactive conditions and in certain non-Hodgkin lymphomas among the reactive bystander cells of tumor. Follicular dendritic cells form a three-dimensional network to sustain the architecture of germinal center and play a pivotal role in the selection of antigen-specific B cells and their clonal expansion in the germinal center. Recently, several gene expression profiling studies and immunohistochemical analyses in lymphoma biopsy samples have revealed that follicular dendritic cell networks might be associated with the clinical outcome in certain non-Hodgkin lymphomas. We therefore determined semiquantitatively the extent and the immunophenotype of follicular dendritic cells in both reactive germinal centers and non-Hodgkin lymphomas, namely follicular lymphoma, angioimmunoblastic T cell lymphoma and mantle cell lymphoma, using fluorescent double staining followed by digital image analysis. In all tested non-Hodgkin lymphomas, proteins that are involved in the antigen-dependent interaction of follicular dendritic cells and B cells, such as CD23 and CD35, and in adhesion, such as CD54, were expressed at relatively low levels on follicular dendritic cells, comparable to follicular dendritic cells found in the dark zone of the germinal center, suggesting functional and phenotypical heterogeneity of follicular dendritic cells in germinal centers and non-Hodgkin lymphomas. However, there was no association between the extent of follicular dendritic cell networks with the clinical outcome of 102 patients with follicular lymphoma treated within a prospectively randomized trial as measured by time to treatment failure or overall survival. In summary, follicular dendritic cells found in different types of non-Hodgkin lymphomas show quantitatively reduced expression of several proteins, suggesting that there are functional differences between follicular dendritic cells in normal germinal centers and non-Hodgkin lymphomas. The extent of the follicular dendritic cell networks in follicular lymphoma, however, is not useful as a prognostic mar Follikuläre dendritische Zellen (FDC) sind spezialisierte Antigen-präsentierende Zellen in reaktiven Lymphfollikeln und in bestimmten Non-Hodgkin Lymphomen. Sie bilden dreidimensionale Netzwerke um die Architektur der Keimzentren aufrechtzuerhalten und spielen eine entscheidende Rolle in der Selektion und der klonalen Proliferation der Antigen-spezifischen B-Zellen in den Keimzentren. Im Rahmen von Genexpressionsstudien und immunhistochemischen Analysen von Lymphombiopsaten wurde in den letzten Jahren gezeigt, dass FDC mit der Prognose von Lymphompatienten assoziiert sein könnten. Diese Erkenntnisse inspirierten uns, die Immunphänotypen und die Ausdehnung der FDC in reaktiven Keimzentren und in bestimmten Non-Hodgkin Lymphomen, insbesondere follikulären Lymphomen, Mantelzell-Lymphomen und Angioimmunoblastischen T-Zell Lymphomen, mittels Fluoreszenzmehrfachfärbungen und digitaler Bildanalyse semiquantitativ zu bestimmen. In allen getesteten Non-Hodgkin Lymphomen kamen die Proteine, die an den Antigen-abhängigen Interaktionen der FDC mit B-Zellen, zum Beispiel CD23 und CD35, oder an der Adhänsion, zum Beispiel CD54, beteiligt sind, in niedrigem Expressionsniveau zur Darstellung, vergleichbar mit dem Expressionsniveau der FDC in den dunklen Zonen der Keimzentren. Diese Ergebnisse weisen auf eine funktionelle und phänotypische Heterogenität der FDC in reaktiven Keimzentren und Non-Hodgkin Lymphomen hin. Ein Zusammenhang zwischen der Ausdehnung von FDC-Netzwerken und der Zeit bis zum Therapieversagen sowie dem Gesamtüberleben konnte jedoch an 102 Patienten mit follikulären Lymphomen, die im Rahmen einer prospektiven, randomisierten Studie behandelt wurden, nicht gezeigt werden. Zusammenfassend exprimierten die FDC in unterschiedlichen Typen von Non-Hodgkin Lymphomen einige funktionelle Proteine in reduziertem Niveau. Dies deutet auf funktionelle Unterschiede zwischen den FDC in normalen Keimzentren und in Non-Hodgkin Lymphomen hin. Die Ausdehnung der FDC-Netwerke in follikulären Lymphomen ist nicht als Prognosemarker geeignet.

Die Arbeit soll hinsichtlich der diagnostischen Vorgehensweise bei Patienten mit V.a. TVT oder LE in der Notaufnahme der 1. Medizinischen Klinik des UK-S-H, Campus Kiel, nach Gegenüberstellung verschiedener Diagnostiken unter Einbezug derer Prädiktivität für eine VTE, eine angepasste interne Leitlinie etablieren. Hierzu wurde eine Kohortenstudie mit 30 konsekutiv erfassten Patienten durchgeführt, die mit dem V.a. TVT oder LE ambulant in der Notaufnahme eintrafen. Sie wurden unter den Gesichtspunkten der klinischen Untersuchung nach dem Score von Wells, einer apparativen Diagnostik und der Ermittlung der D-Dimere betrachtet. Ziel war es, diese verschiedenen Möglichkeiten der Diagnostik zum einen einzeln auf ihre Sensitivität und Spezifität hin zu untersuchen, als auch einen Vergleich untereinander zu erarbeiten. Es sollte so eine Leitlinie entwickelt werden, um nicht letztendlich durch gezielteren Einsatz und Verbesserung des Verständnisses bezüglich der Aussagekraft der diagnostischen Maßnahmen die Patientenversorgung zu verbessern, sowie einen patientengerechteren und kosteneffizienteren Einsatz der apparativen Diagnostik zu erreichen.

Immunhistochemische Studie über die prognostische Aussagekraft von fünf verschiedenen apoptose-assoziierten Proteine bei 93 Patienten mit einem Mantelzell-Lymphom.