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Membranoproliferative glomerulonephritis (MPGN) is the most typical Hepatitis C virus (HCV)-associated glomerulopathy, and the available data about the utilization of direct-acting antivirals (DAA) in HCV-associated glomerulonephritis is inadequate. We evaluated the renal and viral response in two cases of HCV-related MPGN; the first caused by cryoglobulinemia while the second was cryoglobulin-negative. Both patients received immunosuppression besides DAA in different regimens. They achieved partial remission but remained immunosuppression-dependent for more than 6 months after DAA despite sustained virological response, which enabled safer but incomplete immunosuppression withdrawal. Both patients were tested for occult HCV in peripheral blood mononuclear cells and found to be negative. Hence, the treatment of HCV-related MPGN ought to be according to the clinical condition and the effects of drug therapy. It is important to consider that renal response can lag behind the virological response. Resumo A glomerulonefrite membranoproliferativa (GNMP) é a glomerulopatia associada ao vírus mais típico da hepatite C (HCV), e os dados disponíveis sobre a utilização de antivirais de ação direta (AAD) na glomerulonefrite associada ao HCV são inadequados. Avaliamos a resposta renal e viral em dois casos de GNMP relacionados ao HCV; o primeiro causado por crioglobulinemia, enquanto o segundo era negativo para crioglobulina. Ambos os pacientes receberam imunossupressão além de AAD em diferentes esquemas terapêuticos. Eles alcançaram remissão parcial, mas permaneceram dependentes da imunossupressão por mais de 6 meses após os AAD, apesar da resposta virológica sustentada, que permitiu a retirada da imunossupressão mais segura, mas incompleta. Ambos os pacientes foram testados para HCV oculto em células mononucleares do sangue periférico e deram resultados negativos. Portanto, o tratamento do GNMP relacionado ao VHC deve ser de acordo com a condição clínica e os efeitos da terapia medicamentosa. É importante considerar que a resposta renal pode ficar aquém da resposta virológica.

Desde que foi declarada pandemia em março de 2020 pela Organização Mundial de Saúde, a COVID‑19 tem sido responsável por um impacto disruptivo na saúde, economia e relacionamentos interpessoais, com impacto negativo ao nível da saúde mental, com repercussão nos hábitos alimentares na população. Foi realizada pesquisa bibliográfica, através da base de dados PubMed, que pretendeu estudar implicações da COVID‑19 na saúde mental e hábitos alimentares dos indivíduos. A associação entre o aumento dos sintomas psicopatológicos e as pandemias tem sido estabelecida ao longo da história da humanidade. Estudos realizados durante a pandemia COVID‑19, em indivíduos que tinham sido infetados por SARS‑CoV‑2 e/ou em quarentena, encontraram um aumento significativo, da prevalência de sintomas psicopatológicos como a ansiedade, tristeza ou medo. A duração da quarentena, problemas socioeconómicos, informações falsas e/ou inadequadas e o neurotropismo do vírus, são alguns dos fatores de risco apontados como responsáveis pelo surgimento destes sintomas. Da mesma maneira, a comunidade científica têm também encontrado uma relação entre o período de quarentena e dos sintomas angodepressivos com o aumento do consumo de alimentos conforto, de elevada densidade energética e pobre em nutrientes. Este facto, não só aumenta o risco de desenvolvimento de doenças crónicas não transmissíveis, como a obesidade e a diabetes mellitus tipo 2, como também parece influenciar o eixo hipotálamo‑hipófise‑suprarrenal, com comprometimento do sistema imunitário e aumento das doenças mentais como a depressão. A resposta imunitária é, em última instância, a única maneira que temos para ultrapassar esta pandemia. O SARS‑CoV‑2, tem tido um importante impacto negativo quer na saúde mental da população quer nas suas escolhas alimentares o que, condiciona a nossa resposta imunitária. Deste modo, para além das medidas de prevenção da contaminação, também a promoção de um estilo de vida saudável, parecem ser as melhores estratégias contra a COVID‑19, com vista a aumentar a nossa “psiconeuroimunidade” para melhor ultrapassarmos esta pandemia.

Contexto: Pelargonium sidoides é uma importante planta com propriedades medicinais originária da região da África do Sul e Lesoto, amplamente utilizada no tratamento de infecções respiratórias por meio do seu extrato comercializado EPs®7630. Atualmente, os resultados de investigações pré-clínicas indicam que a atividade farmacológica de P. sidoides inclui moderados efeitos antimicrobianos, marcante modulação da resposta imune não-específica, especialmente com propriedades imunomoduladoras por meio do estímulo sobre a atividade de células natural killer (NK). Poucos são os estudos que avaliam a atividade das células NK e sua citotoxicidade na presença do EPs® 7630. Objetivo: avaliar os efeitos a curto prazo causados pelo EPs®7630 sobre linfócitos citotóxicos na proliferação, ativação e degranulação celular, na produção de proteínas contidas em seus grânulos citolíticos e na expressão do gene da perforina (PRF1). Método: Foram utilizadas células mononucleares de sangue periférico de indivíduos com idade igual ou superior a 18 anos, saudáveis, sem histórico de neoplasias, doenças autoimunes e doenças infecciosas crônicas ou ativas no momento da inclusão do estudo. As células foram subdivididas entre três grupos (sem tratamento, tratadas com EPs® 7630 a 10μg/mL e controle veículo) e incubadas em estufa CO2 a 5% a 37ºC por 4 horas. Posteriormente, foi realizada imunofenotipagem dessas células por citometria de fluxo a fim de se quantificar os linfócitos T e suas subpopulações, as células NK, o marcador CD38 para ativação celular, o marcador CD107a para degranulação celular, além da proteína perforina em sua forma inativa (BD48) e em sua forma ativada (DG9) em linfócitos TCD8 e células NK. Já a análise da expressão do gene da perforina PRF1 foi realizada pela da técnica RTq-PCR (PCR em tempo real). Os testes estatísticos foram realizados por meio do programa GraphPad Prism e as análises foram consideradas estatisticamente significantes para p < 0,05. Resultados: houve um pequeno aumento na proliferação de linfócitos T após o tratamento com o EPs® 7630 a 10μg/mL por 4 horas, no entanto sem diferença estatisticamente significativa entre as médias (41,14 ± 10,41 vs. 43,25 ± 10,83; p=0,199). Observou-se quantidades semelhantes entre as médias dos grupos sem tratamento e com tratamento de linfócitos TCD8 (66,38 ± 12,11 vs. 66,28 ± 11,42 respectivamente; p=0,997), de linfócitos TCD4 (24,74 ± 14,33 vs. 24,65 ± 14,23, respectivamente; p=0,998) e de células NK (8,70 ± 3,62 vs. 8,18 ± 3,02, respectivamente; p=0,432). O número de linfócitos com marcação de ativação CD38+ também foi semelhante entre tratados e não tratados. A quantificação de perforina em sua forma inativa (BD48) e ativada (DG9) nos linfócitos TCD8 não diferiu entre tratados e não tratados. Em relação às células NK, a média de perforina em sua forma inativa (BD48) nos grânulos citolíticos se mostrou maior no grupo tratado em comparação às células sem tratamento, porém sem diferença estatisticamente significativa (29,20 ± 11,10 vs. 24,29 ± 11,00, respectivamente; p=0,346). Pôde-se evidenciar que houve aumento significativo na quantidade de perforina ativa (DG9) em função do tratamento com EPs®7630 a 10μg/mL por 4 horas quando realizada comparação ao grupo de células sem tratamento (11,87 vs. 8,6, respectivamente; p=0,048). Quanto à degranulação, não foram observadas diferenças quanto ao tratamento, tanto em linfócitos T CD8 quanto em células NK. Na avaliação da expressão gênica de PRF1, observou-se maior número de transcritos do gene, cerca de 6 vezes mais, no grupo de células tratadas com o EPs®7630 a 10μg/mL em comparação ao grupo sem tratamento, (0,02 vs. 0,003, respectivamente; p=0,0079). Conclusão: Foi observado que o extrato comercial à base de P. sidoides é capaz de modular o sistema imune inato por meio da ativação de perforinas presentes nos grânulos citolíticos das células NK. Esses resultados apontam o extrato EPs®7630 como uma substância com propriedades adjuvantes promissoras no tratamento de doenças causadas por células infectadas por vírus ou neoplásicas. Context: Pelargonium sidoides is an important herbal medicine from South Africa and Lesotho, largely used on the treatment of respiratory tract infections through its commercialized extract EPs®7630. Currently, the results of pre-clinical investigations indicate which pharmacological activity of P. sidoides includes moderate antimicrobial effects, significant modulation of non-specific immune response, mainly with immunomodulatory properties by stimulating the activity of natural killer cells (NK). There are few studies that evaluate the activity of NK cells and their toxicity in the presence of EPs®7630. Objective: evaluate the effects of EPs®7630 on cytotoxic lymphocytes in proliferation, activation and, cell degranulation, on the production of proteins inside their cytolytic granules and, perforin (PRF1) gene expression. Methods: Peripheral blood mononuclear cells from healthy individuals aged 18 years or older, with no history of neoplasms, autoimmune diseases, and chronic or active infectious diseases at the time of study inclusion were used. Cells were divided into three groups (no treatment, treated with 10μg/mL EPs® 7630 and, vehicle control) and incubated in a 5% CO2 oven at 37ºC for 4 hours. Subsequently, immunophenotyping of these cells was performed by flow cytometry in order to quantify T lymphocytes and their subpopulations, NK cells, the CD38 marker as an indication of cell activation, the CD107a marker as an indication of cell degranulation, in addition to the perforin protein in its inactive form (BD48) and in its activated form (DG9) in TCD8 lymphocytes and NK cells. The analysis of the expression of the perforin PRF1 gene was performed using the RTq-PCR (real-time PCR) technique. Statistical tests were performed using the GraphPad Prism program and the analyzes were considered statistically significant for p

Notothenioids are the most abundant group of teleost fish found in the Southern Ocean. These fish evolved relatively recently from a single benthic ancestor and radiated and expanded in the extreme cold of Antarctica waters and their physiology was adapted accordingly. Surprisingly, little is known about their immune system and how immune defences were modulated during adaptation to the cold environment and to its water specific microbiome. The main objective of this thesis was to characterise the immune cellular and humoral responses to bacterial and viral-like challenges in immune tissues and plasma of two phylogenetically related notothenioids, Notothenia coriiceps and Notothenia rossii. The methodologies applied were based on DNA sequencing technologies and biochemical assays to measure functional plasma enzyme activity using a comparative approach. This study a) characterised and uncovered a role of iron-metabolism and of the pattern recognition receptors family toll-like receptors (TLRs) after a LPS immune challenge, b) characterised for the first time the transcriptomes of important immune tissues (head-kidney, skin, duodenum, liver and spleen) and their response to bacterial and viral challenges and in response to temperature, c) described the microbiome communities associated to important immune tissue barriers in recently caught and immune challenged notothenioids. The results contribute substantially to the understanding of the main immune and non-immune pathways in the defence against external agents in Antarctic notothenioids. Os Nototenióides são o grupo de peixes teleósteos mais abundantes no Oceano Antártico. Estes peixes evoluíram recentemente de um ancestral bentónico comum e a sua fisiologia adaptou-se aquando da irradiação e expansão nas águas frias e extremas da Antártida. Surpreendentemente pouca informação é conhecida acerca do seu sistema imunológico e como as suas defesas imunológicas foram moduladas pela adaptação ao ambiente frio e ao microbioma único do oceano Antártico. O principal objetivo da tese foi caracterizar as respostas imunológicas ao nível celular e humoral contra patógenos agonistas bacterianos e virais em vários tecidos ligado ao sistema imune, bem como plasma sanguíneo em dois nototenióides. As metodologias aplicadas foram baseadas em tecnologias de sequenciação de ADN e em ensaios bioquímicos para quantificar a atividade de enzimas plasmáticas funcionais, através de uma abordagem comparativa. Neste estudo foram a) caracterizados e desvendados o papel de genes candidatos relacionados com o metabolismo do ferro e dos recetores de reconhecimento de padrões da família de recetores toll-like (TLRs) após exposição ao LPS, b) caracterizados pela primeira vez os transcriptomas de vários tecidos com função imunológica (rim, pele, duodeno, baço e fígado) e a sua resposta ao LPS, c) descritas as comunidades microbianas associadas aos principais tecidos imunológicos de barreira em recém capturados e após estimulação por agonistas bacterianos, virais e em resposta a aumento da temperatura. Estes resultados contribuem substancialmente para a compreensão dos principais componentes do sistema imune, bem como outras vias não imunes envolvidas na defesa contra agentes externos nos nototenióides antárticos.

Introduction: Immunotherapies are developed to overcome limitations of conventional cancer therapy through stimulating innate immune response against tumor antigen. Objective: Elaborate a review on CAR-T Immunotherapy (Chimeric T Cell Antigen Receptor) in cancer treatment. Methods: Bibliographic survey of systematic reviews published in PubMed in the last 5 years. Results: 21 studies were selected. Antitumor effect occurs through cell lysis, due to CAR-T lymphocytes release of cytokines. Tumor escape is related to tumor's ability to not expose its Major Histocompatibility Complex (MHC) and/or inability of the adaptive immune system to recognize tumor antigens. These molecular targets may be proteins, carbohydrates, or glycolipids, with CD19 standing out as target of this therapy and in neoplasms as leukemia and lymphoma. Four generations of CARs have been described, which differ in terms of co-stimulatory domains and consequent functional efficiency. The therapy is indicated for cases of recurrence/refractoriness of hematological neoplasms, however applicability in solid tumors has been studied. Adverse events of CAR-T immunotherapy described were: cytokine release syndrome, neurotoxicity, anaphylactic shock, autoimmune reactions, B cell aplasia, tumor lysis syndrome and graft-versus-host disease. Conclusions: CAR-T immunotherapy is a promising therapy against relapsed/refractory cancer. It’s mainly used in leukemias and lymphomas. Choice of dose and generation of CARs should be cautious, considering specific molecular targets of each neoplasm and its presence in healthy tissues, avoiding adverse events. Introducción: Inmunoterapias están diseñadas para superar limitaciones de la terapia convencional contra el cáncer mediante estimulación de la respuesta inmunitaria innata al antígeno tumoral. Objetivo: Elaborar una revisión sobre inmunoterapia CAR-T (receptor de antígeno quimérico en células T) en el tratamiento oncológico. Métodos: Levantamiento bibliográfico de revisiones sistemáticas publicadas en PubMed en los últimos 5 años. Resultados: Se seleccionaron 21 estudios. El efecto antitumoral se produce a través de la lisis celular, con la liberación de citoquinas por los linfocitos CAR-T. El escape del tumor está relacionado con la capacidad a no exponer su complejo principal de histocompatibilidad y/o la incapacidad del sistema inmunitario adaptativo para reconocer los antígenos tumorales. Estas dianas moleculares pueden ser proteínas, carbohidratos, o glicolípidos, destacándose el CD19 como diana de esta terapia y en neoplasias como leucemias y linfomas. Se describieron cuatro generaciones de CARs que presentan diferencias en los dominios coestimuladores y eficiencia funcional. La terapia está indicada para casos de recurrencia o refractariedad de neoplasias hematológicas, pero se ha estudiado su aplicabilidad en tumores sólidos. Los eventos adversos de la inmunoterapia CAR-T descritos fueron: síndrome de liberación de citoquinas, neurotoxicidad, shock anafiláctico, reacciones autoinmunes, aplasia de células B, síndrome de lisis tumoral y enfermedad de injerto contra huésped. Conclusiones: Inmunoterapia CAR-T es una terapia prometedora contra el cáncer en recaída o refractario. Actualmente se utiliza principalmente en leucemias y linfomas. La elección de la dosis y generación de CARs debe ser juiciosa, considerando las dianas moleculares específicas de cada neoplasia y su presencia en tejidos sanos, evitando eventos adversos. Introdução: Imunoterapias são desenvolvidas para superar limitações da terapia convencional contra o câncer através do estímulo da resposta imune inata ao antígeno tumoral. Objetivo: Elaborar revisão sobre a Imunoterapia CAR-T (receptor quimérico de antígeno em células T) no tratamento oncológico. Métodos: Levantamento bibliográfico de revisões sistemáticas publicadas no PubMed nos últimos 5 anos. Resultados: Foram selecionados 21 estudos. O efeito antitumoral ocorre através da lise de células, a partir da liberação de citocinas pelos linfócitos CAR-T. O escape tumoral está relacionado à capacidade do tumor em não expor seu complexo principal de histocompatibilidade (MHC) e/ou incapacidade do sistema imune adaptativo em reconhecer antígenos tumorais. Esses alvos moleculares podem ser proteínas, carboidratos, ou glicolipídeos, sendo que o CD19 se destaca como alvo dessa terapia e em neoplasias como leucemias e linfoma. Foram descritas quatro gerações de CARs que apresentam diferenças quanto aos domínios co-estimulatórios e consequente eficiência funcional. A terapia é indicada para casos de recidivas ou refratariedade de neoplasias hematológicas, porém a aplicabilidade em tumores sólidos vem sendo estudada. Os eventos adversos da imunoterapia CAR-T descritos foram: síndrome de liberação de citocinas, neurotoxicidade, choque anafilático, reações autoimunes, aplasia de células B, síndrome de lise tumoral e doença do enxerto contra o hospedeiro. Conclusões: A imunoterapia CAR-T é uma terapia promissora contra o câncer recidivado ou refratário. Atualmente é utilizada principalmente em leucemias e linfomas. A escolha da dose e geração dos CARs deve ser criteriosa, considerando os alvos moleculares específicos de cada neoplasia e sua presença em tecidos saudáveis, evitando eventos adversos.

Dissertação para obtenção do grau de Mestre no Instituto Universitário Egas Moniz Enquadramento teórico: O maior desafio para o sistema imunitário consiste em manter a homeostasia perante mudanças constantes de natureza interna e externa. Este pode ser moldado por eventos stressantes e estados psicológicos do indivíduo. Sendo o stress uma característica bastante vigente na sociedade atual é pertinente perceber se este poderá ou não influenciar o sistema imunitário. Objetivos: Primário: perceber como o stress poderá ter impacto no sistema imunitário, de forma a compreender o funcionamento deste e o modo como o stress interfere. Secundário: perceber a interação entre o sistema imunitário e o sistema nervoso, funcionando como base para a compreensão do stress na resposta imunitária. Materiais e métodos: Foi efetuada uma revisão da narrativa com base numa recolha e pesquisa bibliográfica científica, com recurso a base de dados como: Medline, Pubmed e Cochrane Library e revistas científicas como: Nature. Resultados: O sistema imunitário e o sistema nervoso interagem de forma bidirecional, existindo, quer em condições homeostáticas e patológicas, células e componentes do sistema imunitário permanentemente no sistema nervoso. A resposta ao stress, é mediada por duas vias, resultando na libertação de glucocorticoides e catecolaminas. Dos estudos consultados, depreende-se que o sistema imunitário funcione como intermediário entre o stress e o desenvolvimento de doenças, por mecanismos desregulados de inflamação e imunossupressão. O stress está envolvido na/o: (i) ativação da imunidade materna, (ii) indução de alterações na microglia no período pós-natal, (iii) doenças cardíacas, (iv) asma e (v) cancro. Conclusão: Sendo o stress frequente na sociedade atual e considerado um fator de risco para o desenvolvimento de patologias, é essencial que se façam estudos adicionais de forma a melhorar a compreensão de como este interfere com o sistema imunitário e o sistema nervoso, podendo providenciar conhecimento para a compreensão da patogenicidade das doenças e novas abordagens terapêuticas. Background: The greatest challenge for the immune system is to maintain homeostasis in the face of constant internal and external changes. This can be shaped by stressful events and psychological states of the individual. Since stress is a very common feature in today's society, it is pertinent to understand whether or not it can influence the immune system. Objectives: Primary: to understand how stress may impact the immune system, in order to understand how it works and how stress interferes. Secondary: to understand the interaction between the immune system and the nervous system, acting as a basis for understanding stress on the immune response. Materials and methods: A narrative review was carried out based on a scientific literature search using databases such as Medline, Pubmed and Cochrane Library, and scientific journals such as Nature. Results: The immune system and the nervous system interact in a bidirectional way, existing, both in homeostatic and pathological conditions, cells and components of the immune system permanently in the nervous system. The stress response is mediated by two pathways, resulting in the release of glucocorticoids and catecholamines. From the studies consulted, it appears that the immune system functions as an intermediary between stress and the development of disease through dysregulated mechanisms of inflammation and immunosuppression. Stress is involved in: (i) activation of maternal immunity, (ii) induction of changes in microglia in the postnatal period, (iii) heart diseases, (iv) asthma and (v) cancer. Conclusion: Since stress is common in today's society and is considered a risk factor for the development of diseases, it is essential that further studies be conducted to improve the understanding of how stress interferes with the immune system and nervous system and may provide knowledge for understanding the pathogenicity of diseases and new therapeutic approaches.

Submitted by Biblioteca Escola Superior de Saúde (biblioteca@ess.ipp.pt) on 2022-02-08T09:37:16Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO_MFA_SARA SOUSA_V.Final.pdf: 10575293 bytes, checksum: a430bb689212711a3bf9bf4cc4f16f29 (MD5) Made available in DSpace on 2022-02-08T09:37:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO_MFA_SARA SOUSA_V.Final.pdf: 10575293 bytes, checksum: a430bb689212711a3bf9bf4cc4f16f29 (MD5) Previous issue date: 2021-12-03

Dissertação de mestrado em Ciências da Saúde, A função cognitiva refere-se aos processos mentais internos críticos para as atividades quotidianas, como a memória. A imunovigilância do cérebro é crucial para a cognição. A ausência de células T e níveis aumentados de citocinas pró-inflamatórias têm sido associados a comprometimentos cognitivos. No entanto, o papel das citocinas anti-inflamatórias, como a interleucina-10 (IL-10), tem sido pouco estudado. Aqui, o efeito da ausência de IL-10 na função cognitiva foi investigado em murganhos fêmeas BALB/c jovens-adultas IL-10 knockout (KO) e irmãs de tipo selvagem (WT). A ausência de IL-10 prejudicou a memória de referência espacial dependente do hipocampo no Barnes-maze test. Curiosamemente, neste teste, os murganhos IL-10 KO mostraram uma redução nas estratégias dependentes do hipocampo principalmente durante as fases de metestro e diestro do ciclo estríco. Não foram observados problemas locomotores nos murganhos IL-10 KO, no entanto, a deficiência de IL-10 comprometeu a exploração no open-field test. Embora a ausência de IL-10 tivesse aumentado os níveis basais de corticosterona e de expressão genética de marcadores pró-inflamatórios no cólon, estes parâmetros não se correlacionaram com o desempenho comportamental. Usando as variáveis comportamentais analisadas, o genótipo (WT vs IL-10 KO) foi classificado por support vector machine models com uma precisão de até 89,3%. Adicionalmente, a ausência de IL-10 diminui o número de neurónios e volume do hipocampo dorsal, mas não do ventral. Além disso, no hipocampo, a deficiênciade IL-10 modulou negativamente a dinâmica das espinhas dendríticas e diminuiu a arborização dendrítica dos neurónios granulares do giro dentado dorsal e ventral e piramidais do cornu ammonis-1 e -3, que são conhecidos por suportar a aprendizagem e memória. Ademais, análises por citometria de fluxo mostraram que a ausência de IL-10 influenciou o perfil leucocitário no sangue pelo aumento do número total de neutrófilos e da sua percentagem dentro dos leucócitos e diminuição da percentagem dentro dos leucócitos de eosinófilos, células natural-killer, células B e células T. Além disso, no sangue, a deficiência de IL-10 aumentou a percentagem de células T CD4+ efetoras de memória, que foram previamente associadas a uma pior função cognitiva em idosos saudáveis. A ausência de IL-10 também aumentou o número total de leucócitos nos nódulos linfáticos cervicais profundos, sugerindo um aumento do recrutamento de células para o sistema linfático do cérebro. Por fim, através de um tratamento antibiótico, um protocolo para a depleção do microbioma intestinal de murganhos IL-10 KO foi otimizado. Após 3 dias de tratamento, os antibióticos reduziram os níveis de expressão genética de16s nas fezessem proliferação fúngica, proporcionando uma etapa inicial para explorar o papel do microbioma intestinal na função cognitiva de murganhos IL-10 KO. No geral, estes resultados não só suportaram que a ausência de IL-10 impactou as habilidades cognitivas, mas também destacaram potenciais mecanismos subjacentes à ação dessa citocina anti-inflamatória, que podem ser contribuintes importantes para o desenvolvimento de novas terapias para comprometimentos cognitivas baseadas em IL-10., Cognitive function refers to internal mental processes critical for daily life activities, such as memory. Brain immune surveillance has proven to be crucial for cognitive function. T cell absence and increased levels of pro-inflammatory cytokines have been associated with impaired cognition. However, the role of anti-inflammatory cytokines, such as interleukin-10 (IL-10), has been poorly studied. Here, the effect of IL-10 absence in cognitive function was investigated in young-adult female BALB/c IL-10 knockout (KO) and wild-type (WT) littermate mice. IL-10 absence impaired the hippocampal-dependent spatial reference memory in the Barnes-maze test. Interestingly, in this test, IL-10 KO mice showed a reduction in hippocampal-dependent strategies mainly during the metestrus and diestrus phases of the estrous cycle. No locomotor disabilities were observed in IL-10 KO mice however IL-10 deficiency impaired exploration in the open-field test. Although IL-10 absence has led to higher basal levels of corticosterone and increased gene expression levels of pro-inflammatory markers in the colon, these parameters did not correlate with the behavioral performance. Using the behavioral variables analyzed, the genotype (WT vsIL-10 KO) was classified by support vector machine models with an accuracy of up to 89.3%. Moreover, IL-10 absence led to a decreased number of neurons and volumetric atrophy of the dorsal, but not of the ventral hippocampus. Additionally, in the hippocampus, IL-10 deficiency negatively modulated the dendritic spine dynamics and decreased the dendritic arborization of dorsal and ventral dentate gyrus granule neurons and cornu ammonis-1 and -3 pyramidal neurons, which are known to support learning and memory. Furthermore, flow cytometry analysis showed that IL-10 absence impacted the leukocyte profile in the blood by increasing the total number of neutrophils and its percentage within leukocytes and decreasing the percentage of eosinophils, natural-killer cells, B cells, and T cells within leukocytes. Also, in the blood, IL-10 deficiency increased the percentage of effector memory CD4+ T cells, which were previously associated with a worst cognitive function of healthy aged individuals. IL-10 absence also increased the total number of leukocytes in the deep cervical lymph nodes, suggesting an increased cell recruitment to the lymphatic system of the brain. Lastly, through an antibiotic treatment, a protocol for gut microbiome depletion of IL-10 KO mice was optimized. After 3 days of treatment, antibiotics reduced the gene expression levels of 16s in the feces without fungal overgrowth, providing an initial step to explore the role of the gut microbiome in the cognitive function of IL-10 KO mice. Overall, these results not only supported that IL-10 absence impacted cognitive abilities but also highlighted the potential mechanisms underlying the action of this anti-inflammatory cytokine, which may be important contributors to the development of new IL-10-based therapies for cognitive impairments., E, por fim, ao Programa Operacional Regional do Norte de Portugal – NORTE 2020 no âmbito dos projetos NORTE-01-0145-FEDER-000013 e NORTE-01-0145-FEDER-000023; à Plataforma de Microscopia Científica do ICVS, membro da infraestrutura nacional da Plataforma Portuguesa de Bioimagem – PPBI no contexto do projeto PPBI-POCI-01-0145-FEDER-022122, ambos ao abrigo do Acordo de Parceria – Portugal 2020, através do Fundo Europeu de Desenvolvimento Regional; e à Fundação para a Ciência e Tecnologia mediante fundos nacionais vinculados aos projetos UIDB/50026/2020 e UIDP/50026/2020 pelo suporte financeiro.

Relatório de Estágio do Mestrado Integrado em Ciências Farmacêuticas apresentado à Faculdade de Farmácia O presente documento encontra-se dividido em duas partes. A primeira parte é constituída por dois relatórios referentes a dois estágios curriculares, elaborados na forma de uma análise SWOT (Strengths, Weaknesses, Opportunities, Threats). O primeiro estágio curricular realizou-se em Farmácia Comunitária, na Farmácia do Parque, enquanto o segundo se realizou em Farmácia Hospitalar, no Hospital Senhora da Oliveira. A segunda parte do documento apresenta a monografia, intitulada “Suplementos Alimentares no contexto da COVID-19”. A COVID-19 surgiu em dezembro de 2019 num mercado em Wuhan, China e a 11 de março de 2020 foi declarada uma pandemia pela OMS, termo este que se utiliza quando uma doença se espalha por vários continentes, com transmissão sustentada de pessoa para pessoa. Até ao dia 6 de julho de 2021 vitimou mais de 4 milhões de pessoas, sendo um dos maiores desafios para a saúde publica dos últimos anos. A doença, na sua forma grave, caracteriza-se por um quadro de infeção respiratória aguda, com perda de função pulmonar, perturbações da coagulação e eventual morte. Níveis desadequados de nutrientes têm sido associados a um aumento da suscetibilidade a infeções assim como a um maior risco de prognósticos negativos derivados destas. Com o surgimento e rápida evolução da pandemia causada pela COVID-19, investigadores de todo o mundo têm trabalhado exaustivamente com o objetivo de controlar a sua propagação e limitar os estragos causados à saúde publica e à economia. Assim, estudos recentes têm apontado para uma abordagem com vitaminas e minerais para a prevenção e tratamento da infeção. Esta monografia surge no sentido de avaliar o papel de micronutrientes, nomeadamente da vitamina C, vitamina D, zinco e selénio como imunomoduladores e a sua potencial relação com a COVID-19, quer isoladamente quer como terapêutica adjuvante. The following document is divided into two parts. The first part includes two reports concerning two curricular internships, examined through a SWOT (Strengths, Weaknesses, Opportunities, Threats) analysis. The first curricular internship was carried out in Community Pharmacy, at “Farmácia do Parque” while the second in Hospital Pharmacy, at “Hospital Senhora da Oliveira”. The second part of the document presents the monograph, entitled "Food Supplements in the context of COVID-19". COVID-19 appeared in December 2019 in a market in Wuhan, China and on March 11, 2020, it was declared a pandemic by the WHO, a term that is used when a disease spreads across several continents, with sustained person-to-person transmission. Until July 6, 2021, it had killed more than 4 million people, making it one of the biggest challenges for public health in recent years. The disease, in its severe form, is characterized by an acute respiratory infection, with loss of lung function, coagulation disorders and eventual death. Inadequate nutrient levels have been associated with an increased susceptibility to infections as well as a higher risk of negative outcomes derived from them. With the emergence and rapid evolution of COVID-19 pandemic, researchers around the world have been working tirelessly to control its spread and limit the damage that it caused to public health and economy. Thus, recent studies have pointed towards a vitamin and mineral approach for the prevention and treatment of the infection. This monograph arises to assess the role of micronutrients, namely Vitamin C, Vitamin D, zinc and selenium as immunomodulators and their potential relationship with COVID-19, either alone or as adjuvant therapy.

Made available in DSpace on 2022-01-12T16:35:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 8563_18370.pdf: 3240093 bytes, checksum: c6fb439c72d3ff3d13f5f99b3534fb05 (MD5) Previous issue date: 2021-11-15

RESUMO A nutrição tem a aptidão de contribuir para o bom desempenho dos atletas, e é neste aspeto que os suplementos nutricionais requerem uma consideração especial como estratégia nutricional. O exercício representa um importante desafio para a homeostase corporal global, com respostas imediatas e adaptativas a nível celular e sistémico. Desta forma, os nutrientes desempenham um papel importante na regulação de processos que vão desde a produção de energia até à criação de novas células e proteínas. A disponibilidade de nutrientes contribui para diferenças marcadas em funções como apoio ao sistema imunitário e a redução do stress oxidativo e inflamação, e em alguns casos pode melhorar o desempenho desportivo. O objetivo deste artigo é realizar uma revisão sistemática sobre o impacto da nutrição na imunidade do atleta. Evidências sugerem que a dieta do atleta é um modulador da sua imunidade, porém, os mecanismos de ação ainda não estão bem definidos na literatura.

RESUMO Objetivo: identificar as evidências científicas existentes na literatura sobre o impacto da microbiota adquirida pelo recém-nascido na saúde infantil, conforme a via de nascimento. Métodos: trata-se de uma revisão integrativa. Utilizaram-se as bases de dados PubMed, LILACS, IBECS e CUMED. Para uma indexação mais eficiente das publicações, os filtros foram desenvolvidos para a busca em PubMed de acordo com o Medical Subject Headings. Para pesquisa na BVS, foram usados os Descritores em Ciência da Saúde. Os artigos foram analisados utilizando-se um instrumento de coleta de dados. Resultados: A amostra deste estudo constituiu-se de 21 trabalhos cujas publicações variaram de 2011 a 2018. Verificou-se que os Estados Unidos e a Dinamarca foram os locais com maior número de trabalhos publicados. Conclusão: Foram evidenciados fatores que podem interferir no desenvolvimento de doenças, na infância, em crianças nascidas por cesariana, como asma, dermatite, obesidade, doença intestinal, metabólica e até mesmo alguns tipos de cânceres.

An inflammatory process aims to restore the homeostasis of the injured tissue through the activation of innate and acquired immunity. As the inflammation process proceeds, several cells are stimulated and recruited resulting in an immune response with the participation of inflammation mediators. Another important group of cells participating in the inflammatory process is formed by suppressor cells derived from the myeloid lineage (MDSC's). Knowledge about the role of MDSC’s in hematological diseases is still poorly understood. The pathogenesis of myelodysplastic syndrome (MDS) is complex and multifactorial and depends on the interaction between hematopoietic cells and their microenvironment. Objective: To evaluate cell expression (MDSC's) and correlate them with serum levels of IL-10, IL-13, IFN-γ and VEGF in adult MDS patients, correlate them with clinical variables. Methods: 93 patients with MDS de novo were included (2 MDS with del 5q; 2 Unclassifiable MDS, 11 MDS-DU, 18 MDS AS; 23 MDS-EB and 37 MDS-DM) according to WHO classification and IPSS-R. 50 healthy volunteers were included as a control group. Interleukin analyzes were quantified by ELISA. The phenotyping of MDSC's cells was performed by labeling with monoclonal antibodies and evaluated by flow cytometer-FACSVerse. Results: There was a predominance of 55.9% females among the patients. The mean age in this group was 72.4 years. Patients with MDS showed significantly higher serum levels of IL-10, IL-13, IFN-γ and VEGF than the control group. (p

Objetivo: analizar las evidencias científicas existentes en la literatura sobre la relación de la vía de nacimiento con la microbiota adquirida por el recién nacido. Método: se trata de una revisión integradora sobre la influencia de la vía de nacimiento en la colonización de la microbiota en el recién nacido. Fue realizada una búsqueda en la literatura en las bases de datosMedical Literature Analysis and Retrieval System Online/PubMed y Biblioteca Virtual en Salud, teniendo como estrategia de búsqueda la selección de artículos basados en los descriptores desarrollados en elMedical Subject Headings(términos MeSH) o Descriptores en Ciencia de la Salud (DeCS). Resultados: los recién nacidos por vía vaginal presentan, en los primeros días de vida, mayor concentración deBacteroides, Bifidobacterias y Lactobacillus; y, con el pasar de las semanas muestran mayor variabilidad de la microbiota. Los recién nacidos por cesárea presentan microbioma semejante a la piel materna y al ambiente hospitalario, poseyendo menor diversidad y siendo principalmente constituida deStaphylococcus, Streptococcus y Clostridium. Conclusión: la microbiota vaginal materna proporciona al neonato una mayor variedad de microorganismos colonizadores que son responsables por auxiliar en la capacitación y mejor adecuación de su sistema inmunológico. Se evidencia que el parto vaginal es la vía ideal y que la cesárea debe ser realizada apenas cuando existen indicaciones reales. Objetivo: analisar as evidências científicas existentes na literatura sobre a relação da via de nascimento com a microbiota adquirida pelo recém-nascido. Método: trata-se de uma revisão integrativa sobre a influência da via de nascimento na colonização microbiótica no recém-nascido. Foi realizada uma busca na literatura por meio das bases de dadosMedical Literature Analysis and Retrieval System Online/ PubMed e Biblioteca Virtual em Saúde, tendo como estratégia de busca a seleção de artigos baseados nos descritores desenvolvidos comMedical Subject Headings(termos MeSH) ou Descritores em Ciência da Saúde (DeCS). Resultados: os recém-nascidos por via vaginal apresentam nos primeiros dias de vida maior concentração deBacteroides, Bifidobacterias e Lactobacilluse, com o passar das semanas, mostram maior variabilidade microbiótica. Os recém-nascidos por cesárea apresentam microbioma semelhante ao da pele materna e do ambiente hospitalar e possuem menor diversidade, sendo, principalmente, constituído deStaphylococcus, Streptococcus e Clostridium. Conclusão: a microbiota vaginal materna dispõe de uma maior variedade de microrganismos colonizadores, os quais são responsáveis por auxiliar na capacitação e melhor adequação ao sistema imunológico do recém-nato. Evidencia-se que o parto vaginal é a via ideal, ou seja, a cesariana deve ser realizada apenas quando existem indicações reais. Objective: to analyze scientific evidence regarding the relationship between the type of birth and the microbiota acquired by newborns. Method: this integrative review addresses the role of the type of delivery on newborns’ microbial colonization. A search was conducted in the Medical Literature Analysis and Retrieval System Online/PubMed and Virtual Health Library databases using the descriptors provided by Medical Subject Headings (MeSH) and Health Science Descriptors (DeCS). Results: infants born vaginally presented a greater concentration ofBacteroides,Bifidobacteria, andLactobacillusin the first days of life and more significant microbial variability in the following weeks. The microbiome of infants born via C-section is similar to the maternal skin and the hospital setting and less diverse, mainly composed ofStaphylococcus,Streptococcus, andClostridium. Conclusion: the maternal vaginal microbiota provides newborns with a greater variety of colonizing microorganisms responsible for boosting and preparing the immune system. Vaginal birth is the ideal birth route, and C-sections should only be performed when there are medical indications.

Introdução: O leite materno é considerado um alimento completo e fundamental para o recém-nascido (RN). Até os primeiros 7 dias após o parto aproximadamente, o leite excretado da mama é conhecido como colostro, um fluído de menor volume e rico em compostos imunológicos. Esse leite é responsável por fornecer nutrição ideal para o crescimento e desenvolvimento saudável dos bebês, bem como garantir a proteção e o desenvolvimento adequado do sistema imune do recém-nascido. Entretanto, alguns fatores maternos como a Diabetes Mellitus Gestacional (DMG), pode vir a alterar a concentração de citocinas e quimiocinas presentes no colostro. Nesse contexto, torna-se importante avaliar as alterações nas concentrações desses biomarcadores na presença da doença, uma vez que essas mudanças podem afetar o desenvolvimento do sistema imune do recém-nascido. Objetivo: O presente trabalho tem por objetivo avaliar se a ocorrência de DMG modifica a concentração de citocinas e quimiocinas presentes no colostro. Métodos: Estudo transversal, realizado com dois grupos de mulheres internadas no pós-parto imediato em uma Maternidade referência em Belo Horizonte. Os grupos foram separados de forma que em um deles todas as participantes apresentaram gestação saudável, e o outro grupo apresentou DMG. Foram coletados dados socioeconômicos, de saúde e antropométricos através da caderneta da gestante e avaliação no pós-parto. Também no pós-parto, foi coletado em ambos os grupos uma média de 2mL de colostro para análise da concentração das citocinas/quimiocinas por imunoensaio multiplex. Resultados: Foram incluídas no estudo 25 mulheres, sendo que 56% delas apresentaram uma gestação de risco habitual e 44% DMG. A média e desvio padrão da idade entre elas foi calculada para o grupo risco habitual e DMG respectivamente (24,86±5,26) e (30,09±6,25). No grupo DMG, observou-se aumento na concentração de IL-10, IFN- e IL-15 no colostro. Numa avaliação global, percebeu-se que o colostro das mulheres com DMG apresentam uma concentração mais alta de agentes inflamatórios, e também dos anti-inflamatórios e que há uma correlação positiva entre as citocinas e quimiocinas nesse grupo. Conclusão: Nessa perspectiva, os dados obtidos no trabalho suportam a idéia de que a doença leva a alterações imunes no colostro, sugerindo que no grupo DMG há um aumento global de citocinas e quimiocinas. Introduction: Breast milk is considered a complete and essential food for the newborn (NB). Until approximately the first 7 days after delivery, the milk excreted from the breast is known as colostrum, a fluid with less volume and rich in immunological compounds. This kind of milk is responsible for providing optimal nutrition for the healthy growth and development of babies, as well as ensuring the protection and proper development of the newborn's immune system. However, some maternal factors, such as Gestational Diabetes Mellitus (GDM), may change the concentration of cytokines and chemokines present in colostrum. In this context, it is important to evaluate changes variations in the concentrations of these biomarkers in the presence of this disease, since these variations can affect the development of the newborn's immune system. Objective: The present study aims to evaluate whether the occurrence of GDM changes the concentration of cytokines and chemokines present in colostrum. Methods: Cross-sectional study, carried out with two groups of women hospitalized in the immediate postpartum period at a reference maternity hospital in Belo Horizonte. The groups were separated so that in one of them all the participants had a healthy pregnancy, and the other group had GDM. Socioeconomic, health and anthropometric data were collected through the pregnant woman's handbook and postpartum assessment. Also in the postpartum period, an average of 2mL of colostrum was collected in both groups for analysis of cytokine / chemokine concentration by multiplex immunoassay. Results: 25 women were included in the study, 56% of whom had a normal risk pregnancy and 44% GDM. The mean and standard deviation of age between them were calculated for the usual risk and GDM groups, respectively (24.86 ± 5.26) and (30.09 ± 6.25). In the DMG group, an increase in the concentration of IL-10, IFN- and IL-15 was observed. In a global assessment, it was noticed that the colostrum of women with GDM has a higher concentration of inflammatory agents, as well as anti-inflammatory agents and that there is a positive correlation between cytokines and chemokines in this group. Conclusion: In this perspective, the data obtained in the study supports the idea that this disease leads to immune changes in colostrum, suggesting that there is an overall increase in cytokines and chemokines in the GDM group.

Dissertação para obtenção do grau de Mestre no Instituto Universitário Egas Moniz O sistema imunitário tem como função proteger o organismo contra agentes patogénicos e a sua resposta é influenciada por diversos fatores, como por exemplo a dieta alimentar. A carência de micronutrientes e macronutrientes pode reduzir a eficácia da ação deste sistema. A classe dos carotenoides é umas das principais classes de micronutrientes presentes nos alimentos que podem influenciar a atividade do sistema imunitário. Destes, e dada a sua relevância, utilizou-se um conjunto de estudos que relacionam a influência do β-caroteno e licopeno com a atividade neste sistema. De acordo com a pesquisa realizada, os resultados obtidos nos estudos utilizados nesta monografia, sugerem que o β-caroteno e o licopeno apresentam uma atividade antioxidante, anti-inflamatória e anticancerígena. Em virtude destas atividades, tudo indica que estes micronutrientes contribuem para aumentar a atividade do sistema imunitário. The function of the immune system is to protect the body against pathogens, and its response is influence by a number of factors, namely dietary choices. The lack of micro and macronutrients can reduce the efficiency of action of this system. The class of carotenoids is one of the main classes of micronutrients present in food products that can influence the activity of the immune system. Of these, and given their relevance, a set of studies relating the influence of β-carotene and lycopene with the activity of the immune system was used. After extensive research, the results obtained in the studies used for the writing of this monograph observe that β-carotene and lycopene possess a number of benign activities, namely antioxidant, anti-inflammatory, and anticancer. In light of these activities, there is strong evidence that these micronutrients contribute for the increase of the activity of the immune system.

Tese de doutoramento em Ciências da Saúde, O envelhecimento é um processo complexo que envolve acumulação progressiva de danos celulares em diversos sistemas de órgãos, influenciando a sua função. Este processo decorre de forma variável, como se pode constatar pelo efeito da idade na detioração da função cognitiva de diferentes indivíduos. Compreender as diversas trajetórias de envelhecimento e as variáveis associadas torna-se crucial para se poder projetar estratégias que permitam melhorar a qualidade de vida ao longo do envelhecimento. Sabendo que o cérebro requer constante vigilância imunitária, e que o envelhecimento também está associado a alterações no sistema imunitário, propusemos dissecar a relação entre as alterações no sistema imunitário associadas à idade e a cognição. Para tal avaliámos, transversalmente, uma coorte de indivíduos seniores saudáveis e fizemos uma análise longitudinal em murganhos. Analisando os mesmos animas desde os 3 aos 18 meses de idade, caracterizámos a progressão da frequência relativa das principais células do sangue, tanto do sistema imunitário adaptativo como do inato. Verificámos que o envelhecimento é acompanhado por um aumento da frequência de células do sistema imunitário inato e diminuição das do adquirido, num efeito que é moderado pelo sexo. Também explorámos o papel das alterações do sistema imunitário associadas à idade na heterogeneidade cognitiva. Através de uma caracterização comportamental multi-paramétrica, dividimos os animais velhos em 2 grupos, referentes a bom e mau desempenho cognitivo. Observámos que machos com desempenhos cognitivos distintos apresentam diferenças moderadas na progressão de algumas células imunitárias ao longo do envelhecimento. Adicionalmente, observámos que a percentagem de células T CD4+ e CD8+ e as células NK Ly6C aos 18 meses também está associada ao desempenho cognitivo de murganhos, mesmo controlando para o sexo. Dada a ligação já conhecida entre os componentes solúveis do sangue e o envelhecimento cognitivo, quantificámos 30 moléculas relacionadas com o sistema imunitário em indivíduos seniores saudáveis. Não só confirmámos associações entre moléculas imunitárias periféricas e heterogeneidade cognitiva já previamente descritas, como a IL-6; como fortalecemos outras associações, como a IL-1b, IL-8, IP-10 (CXCL10) e o TNF; e revelámos novos mediadores, como a IL-13. Em suma, os presentes estudos enriquecem o conhecimento sobre as alterações do sistema imunitário periférico durante o envelhecimento e a sua associação com a cognição. Os resultados apresentados corroboram uma interação próxima entre o sistema imunitário e a cognição que merece uma investigação mais detalhada., Aging is a complex phenomenon that encompasses a progressive accumulation of cellular damage impacting in multiple systems and affecting individuals differently. For instance, the cognitive function, which commonly deteriorates with age, presents inter-individual variability. Understanding such diverse trajectories in aging, and the associated variables, is crucial to design strategies to overcome the natural effect of aging and improve quality of life. Knowing that throughout aging the brain requires constant immune surveillance to maintain its normal functioning and that aging is also associated with alterations in the immune system, we proposed to further dissect the relation between age-associated alterations in the immune system and cognition. For that purpose, we took advantage of a cohort of healthy senior individuals using a cross-sectional approach, and launch a longitudinal evaluation of mice. By following the same mice from 3 to 18 months of age we characterized the progression of the relative frequency of the main blood immune cells, both from adaptive and innate immune system. We observed that aging promotes an imbalance towards the innate immune system and that sex moderates the relation between the frequency of cells and age. We also explored the role of age associated alterations of the immune system as a potential contributor for cognitive heterogeneity. By performing a multiparametric behavioral characterization we segregated old mice as good and poor cognitive performers. We found that males with distinct cognitive performances at old age present moderate differences on specific immune cells progression over time. The percentage of CD4+ and CD8+ T cells among T cells and of NK Ly6C- cells, is also associated with mice cognitive performance, even controlling for sex at 18 months. Given the known link between the soluble components of the blood and cognitive aging, 30 immune-related molecules were quantified in healthy senior individuals. We not only confirmed already well described associations between peripheral immune molecules and cognitive heterogeneity, such as IL-6, but also strengthen others, like IL-1b, IL-8, IP-10 (CXCL10) and TNF, and revealed new players, such as IL-13. Altogether, the present studies enrich the knowledge on the peripheral immune system changes with aging and their association with cognition. These findings are supportive of a close interplay that deserve to be further investigated., Financial support was provided by grants from the European Commission (FP7) “SwitchBox—Maintaining health in old age through homeostasis” (Seventh Framework Programme; Contract HEALTH-F2-2010-259772); by Fundação Calouste Gulbenkian (Portugal) with the project “Better mental health during ageing based on temporal prediction of individual brain ageing trajectories” (TEMPO Contract P-139977); by Portuguese Foundation of Science and Technology - Doctoral Fellowship to C. Serre-Miranda (SFRH/BD/112494/2015); by National funds, through the Foundation for Science and Technology (FCT) - project UIDB/50026/2020, UIDP/50026/2020 and POCI-01-0145-FEDER-016428; and by the projects NORTE-01-0145- FEDER-000013 and NORTE-01-0145-FEDER-000023, supported by Norte Portugal Regional Operational Programme (NORTE 2020), under the PORTUGAL 2020 Partnership Agreement, through the European Regional Development Fund (ERDF).

CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior O transtorno por uso de álcool é uma doença crônica e progressiva, debilitante e multifatorial. É caracterizado pela busca compulsiva por etanol e perda de controle em relação ao seu consumo. O consumo de etanol na população mundial é enorme e tem sido relacionado com uma maior susceptibilidade a infecções pulmonares, embora os mecanismos associados não são conhecidos. Além disso, dados sobre a relação entre o consumo de etanol e infecções fúngicas são escassos. O objetivo desse trabalho foi estudar os mecanismos envolvidos na interação patógeno-hospedeiro durante infecção pulmonar por Aspergillus fumigatus em hospedeiro consumista crônico de etanol. Camundongos C57BL/6 foram tratados com uma solução de etanol (20% v/v) ou receberam apenas água (controles) por 12 semanas e depois infectados, via intranasal, com o fungo. O lavado broncoalveolar, sangue e pulmões foram coletados. A infecção por A. fumigatus em animais sem nenhum tratamento, induziu uma resposta inflamatória robusta, caracterizada por produção de TNF-α, IL-1β, CXCL1, CCL2 e IL-17 e pelo recrutamento de neutrófilos, macrófagos e linfócitos na fase inicial da infecção. Essa infecção tem caráter auto limitante, já que na sua fase tardia apresentou resolução espontânea, com a produção de IL-10 e TGF-β, redução do infiltrado inflamatório e aumento de apoptose e eferocitose. Após infecção por A. fumigatus, os camundongos consumistas de etanol apresentaram maior mortalidade associada à maior carga fúngica. O consumo de etanol causou falha na ativação, rolamento, adesão e migração de neutrófilos para o foco inflamatório. Os neutrófilos circulantes de animais que consumiram cronicamente etanol apresentaram menor expressão do receptor de quimiocinas CXCR2, o que explica a falha na migração dessa célula. Os neutrófilos de animais expostos cronicamente ao etanol também apresentam defeitos nas funções de fagocitose, produção de ROS e depuração fúngica. O consumo crônico de etanol causou diminuição do recrutamento de células e de citocinas e quimiocinas como TNF-α, IL-1β, CXCL1, CXCL2, CCL2, IL-17, IL-10 e TGF-β, importantes para coordenar a resposta inflamatória em fases mais tardias da infecção por A. fumigatus, o que culminou no aumento no tempo de resolução da resposta inflamatória. In vitro, neutrófilos expostos ao etanol apresentaram fenótipos semelhantes ao modelo in vivo, com menor quimiotaxia, menor capacidade fagocítica e menor internalização do receptor CXCR2. Além disso, resultados preliminares demonstraram maior expressão de pERK após estímulo com CXCL1 nos neutrófilos expostas ao etanol. O consumo de etanol foi também um fator crucial para a perturbação de populações bacterianas intestinais importantes, como o aumento do número de enterobactérias e diminuição da quantidade bactérias ácido lácticas. Tomados em conjunto, os resultados mostraram que consumo crônico e a exposição ao etanol altera a resposta inflamatória e é prejudicial a importantes funções dos neutrófilos, causando maior susceptibilidade à infecção por A. fumigatus.

High-intensity functional training (HIFT) programs have become increasingly popular, with a significant increase in the number of practitioners, being designed to improve body composition, anaerobic capacity and cardiovascular fitness. However, the scientific literature lacks information about changes in acute physiological and immunological responses to HIFT and how they can occur, and whether these responses are different according to level of experience and sex. Therefore, the objective of this thesis was to analyze the acute responses of the “Cindy” protocol, as part of a CrossFit® training session, on the immune system, muscle damage, stress markers and the redox status of its practitioners. Specifically, the hypotheses tested were as follows: a single ‘Cindy’ workout session would induce perturbations in immune parameters after a training session, and and less experienced practitioners would be more susceptible to these changes when compared to more experienced practitioners, in the same way women when compared to men. In the current study, twenty-three adult practitioners (31.0 ± 1.0 years) of CrossFit® underwent a single training session (“Cindy” protocol). Subgroup analysis was carried out, being: novices (n = 10) x experienced (n = 13); men (n = 12) x women (n = 11). All protocols used in the present study were approved by the Research Ethics Committee of Federal University of Sergipe and the study was registered with ReBEC. Blood samples were evaluated for lactate, cortisol, creatine kinase (CK), total and differential leukocyte count, thiobarbituric acid reactive substances (TBARS); ferric reducing antioxidant power (FRAP), glutathione peroxidase (GPX); superoxide dismutase (SOD). These variables were assessed before (pre-ex), immediately after (post-ex), 30 minutes (post-30min) and 24 hours after (post-24h) exercise. The number of rounds differed only in the comparison between levels of experience, being similar between sexes. The physiological and perceptual responses to the “Cindy” training did not differ statistically between the groups. For the 23 subjects, the leukocyte count was higher in the post-ex (6.8 to 11.8x103/μL) and returned to baseline values after 30 minutes (p

Tese de mestrado, Bioquímica (Bioquímica Médica), Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2021 Submitted by Teresa Boa (tdboa@fc.ul.pt) on 2021-12-29T12:52:44Z No. of bitstreams: 1 TM_Margarida_Pedro.pdf: 3079533 bytes, checksum: 394c39105851a85afa70d1d8d1dc7da2 (MD5) Made available in DSpace on 2021-12-29T12:52:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TM_Margarida_Pedro.pdf: 3079533 bytes, checksum: 394c39105851a85afa70d1d8d1dc7da2 (MD5) Previous issue date: 2021

Dissertação para obtenção do grau de Mestre no Instituto Universitário Egas Moniz Através deste estudo realizado, iremos analisar como certas lesões orais são importantes na infeção pelo HIV (virus da imunodeficiência humana). Podemos observar sete lesões fortemente associadas ao HIV tais como : Candidíase oral, Leucoplasia pilosa, Sarcoma de Kaposi, Linfoma não Hodgikin, Eritema gengival linear, Gengivite ulcerative necrosante e Periodontite ulcerativa necrosante. Na verdade, o HIV é uma doença mortal que apresenta grandes problemas a nível mundial e desde o seu surgimento que se tornou um problema de saúde global. Este vírus destrói certas células (CD4) que coordenam a imunidade, assim, o sistema imunológico torna-se deficiente. As manifestações orais estão entre os primeiros e mais importantes indicadores do HIV. A colaboração internacional é necessária para garantir que os aspectos orais da infecção pelo HIV sejam levados em consideração nos programas médicos e para integrar os cuidados de saúde oral aos cuidados gerais do paciente. É importante que todos os profissionais de saúde recebam uma formaçao sobre a relevância das necessidades da saúde oral. Through this study, we will analyze how certain oral lesions are important in infection with HIV (human immunodeficiency virus). We can observe seven lesions strongly associated with HIV, such as : Oral candidiasis, Hair leukoplakia, Kaposi's sarcoma, Non-Hodgikin lymphoma, Linear gingival erythema, Ulcerative necrotizing gingivitis and Ulcerative necrotizing periodontitis. In fact, HIV is a deadly disease that presents major problems worldwide and since its emergence it has become a global health problem. This virus destroys certain cells (CD4) that coordinate immunity, thus, the immune system becomes deficient. Oral manifestations are among the first and most important indicators of HIV. International collaboration is needed to ensure that oral aspects of HIV infection are taken into account in medical programs and to integrate oral health care with general patient care. It is important that all health professionals receive literacy about the relevance of oral health needs. A travers cette étude, nous analyserons l'importance de certaines lésions buccales dans l'infection par le VIH (virus de l'immunodéficience humaine). On peut observer sept lésions fortement associées au VIH, telles que la candidose buccale, la leucoplasie capillaire, le sarcome de Kaposi, le lymphome non hodgikin, l'érythème gingival linéaire, la gingivite ulcéreuse nécrosante et la parodontite ulcéreuse nécrosante. En fait, le VIH est une maladie mortelle qui pose des problèmes majeurs dans le monde entier et depuis son émergence, il est devenu un problème de santé mondial. Ce virus détruit certaines cellules (CD4) qui coordonnent l'immunité, ainsi, le système immunitaire devient déficient. Les manifestations orales sont parmi les premiers et les plus importants indicateurs du VIH. Une collaboration internationale est nécessaire pour garantir que les aspects bucco-dentaires de l'infection à VIH sont pris en compte dans les programmes médicaux et pour intégrer les soins de santé buccodentaire aux soins généraux des patients. Il est important que tous les professionnels de la santé soient alphabétisés sur la pertinence des besoins en santé bucco-dentaire.

Relatório de Estágio do Mestrado Integrado em Ciências Farmacêuticas apresentado à Faculdade de Farmácia No âmbito da Unidade Curricular "Estágio Curricular" do Mestrado Integrado em Ciências Farmacêuticas, foi redigido o seguinte documento, que engloba os relatórios dos estágios referentes a Farmácia Comunitária e a Indústria Farmacêutica. Em cada um deles, é feita e descrita uma análise SWOT, analisando pontos internos - Forças (S) e Fraquezas (W) - e pontos externos - Oportunidades (O) e Ameças (T). Atualmente, os probióticos são definidos pela Food and Agriculture Organization e pela World Health Organization, como sendo “microrganismos vivos que, quando administrados em quantidades adequadas, conferem um benefício para a saúde do hospedeiro”. Os benefícios aliados ao seu consumo estão directamente dependentes da espécie e estirpe em questão, mas também do indivíduo. Sendo o sistema imunitário um dos principais mecanismos de defesa contra agentes patogénicos, uma correta manutenção das respostas aliadas a este sistema traz vantagens no tratamento e prevenção de diversas doenças e na manutenção de uma boa qualidade de vida. Assim, as aplicações destes microrganismos são vastas, indo desde o controlo e tratamento de infecções associadas a Clostridium difficile, até à prevenção do desenvolvimento de reacções alérgicas. Esta monografia teve como objectivos, através de uma revisão bibliográfica, transmitir uma perspectiva global sobre o benefício da utilização de probióticos para a saúde, assim como analisar os possíveis mecanismos de acção, particularmente, no que respeita à modulação do sistema imunitário, através do reforço das respostas inata e adaptativa. Pretendeu-se ainda abordar os critérios de eficácia e segurança dos microrganismos utilizados como probióticos. The following document was written as part of the curricular unit "Curricular Internship" of the Integrated Master in Pharmaceutical Science, which includes the reports of the internships referring to the Community Pharmacy and the Pharmaceutical Industry. In each of them, a SWOT analysis is made and described, analyzing internal points - Forces (S) and Weaknesses (W) - and external points - Opportunities (O) and Threats (T). Probiotics are currently defined by the Food and Agriculture Organization and the World Health Organization as "living microrganisms which, when administered in appropriate quantities, confer a benefit to the health of the host. The benefits allied to their consumption are directly dependent on the species and strains in question, but also on the individual. Since the immune system is one of the main mechanisms of defense against pathogens, a correct maintenance of the responses allied to this system brings advantages in the treatment and prevention of various diseases and in maintaining a good quality of life. Thus, the applications of these microorganisms are vast, ranging from the control and treatment of infections associated with Clostridium difficile, to the prevention of the development of allergic reactions.This monograph aimed, through a literature review, to provide a global perspective on the health benefit of probiotics, as well as to analyze the possible mechanisms of action, particularly regarding the modulation of the immune system, by strengthening the innate and adaptive responses. It was also intended to address the efficacy and safety criteria of microorganisms used as probiotics.

Relatório de Estágio do Mestrado Integrado em Ciências Farmacêuticas apresentado à Faculdade de Farmácia A imunoterapia é uma área em constante evolução, que pode ser aplicada como estratégia terapêutica para diferentes tipos de cancro, seja como adjuvante de terapias convencionais, como a radioterapia ou a quimioterapia, seja em monoterapia, maioritariamente na forma de vacinas. Estas vacinas têm como objetivo a sensibilização do sistema imunitário para antigénios específicos da superfície celular de células tumorais, promovendo assim uma resposta dirigida para o tumor.Algumas áreas de destaque no desenvolvimento de vacinas anti-tumorais são as vacinas baseadas nos lisados de célula tumoral inteira, na utilização de células dendríticas sensibilizadas para os antigénios tumorais, na utilização de DNA e RNA para expressão de antigénios suscetíveis de desencadear processos de morte celular e ainda a utilização de péptidos para o recrutamento de células do sistema imune através de interação com diferentes recetores. Nas duas últimas décadas, muitos foram os estudos e ensaios clínicos que exploraram soluções terapêuticas para diferentes tipos de cancro e o progresso atingido foi significativo. Nesta monografia, são sumarizados os diferentes tipos de vacinas anti-tumorais, bem como as características-chave do ambiente tumoral que induzem processos de imunoedição e de escape a mecanismos de imunidade inata e adquirida. Estas peculiaridades do ambiente tumoral condicionam a aplicação destas vacinas, bem como estratégias alternativas no campo da imunoterapia, com potencial para substituir ou coadjuvar a aplicação de vacinas anti-tumorais. Adicionalmente, são apresentados diferentes estudos e ensaios clínicos indicativos de possíveis aplicações destas vacinas e ainda alternativas inovadoras, que se concentram em estratégias de terapia personalizada, e que possivelmente desvendam o próximo capítulo da terapêutica anti-tumoral. Immunotherapy is an evolving field, that can be applied as a therapeutic strategy to different types of cancer, either as an adjuvant to conventional therapies, such as radiotherapy or chemotherapy, or as a monotherapy solution, mainly in the form of vaccines. These vaccines aim to sensitize the human immune system to antigens that are specific to the tumoral cell surface, therefore, promoting a targeted response to the tumor.Some prominent areas in the development of these vaccines are vaccines based on whole tumoral cell lysate, on dendritic cells sensitized for tumoral antigens, on DNA and RNA, coding antigens that can promote cellular death processes and based on peptides that present specificity for key receptors that enable recruitment of different types of immune cells.In the past two decades the amount of studies and clinical trials that explored immunotherapeutic solutions to different types of cancer is vast, and the progress achieved is significant. In this work, an overview of the different types of vaccines is given, as well as key characteristics of the tumoral microenvironment that enable mechanisms of immune-editing and escape from innate and adaptive immunity systems. These characteristics of the tumoral environment limit the application of these vaccines, as well as alternative strategies in the field of immunotherapy, with potential to replace or be administere in association with the aplication of antitumoral vaccines. Additionally, promising clinical trials and studies are presented as possible applications of these vaccines and innovative alternatives, that focus on personalized cancer therapy, unveiling a possible future in antitumoral therapy.

Parra, F. L. (2020). Ingeniería de NaMu (Nanovesículas Multiefectoras). Preparación y caracterización estructural y funcional. (Tesis de posgrado). Bernal, Argentina: Universidad Nacional de Quilmes. El objetivo general de esta tesis doctoral fue diseñar racionalmente, preparar y caracterizar estructuralmente nanovesículas multiefectoras (NaMu), para luego testear su efecto modulador del sistema inmune, como vacunas profilácticas y/o agentes inmunoterapéuticos. Esto significa que puedan modificar las respuestas inmunitarias tras su aplicación, ya sea innatas (inespecíficas) o adaptativas (antígeno específicas: humoral, celular y de memoria). NaMu es el nombre particular con el que nosotros decidimos referirnos a un tipo de vesículas de tamaño nanométrico que contienen en su estructura dos ligandos de receptores de reconocimiento de patrones (PRRs). Estas NaMu son, específicamente, nanoarqueosomas que contienen imiquimod (nanoARC-IMQ). Los nanoarqueosomas (nanoARC) son vesículas lipídicas (o liposomas) que se fabrican con lípidos extraídos de las arquebacterias hiperhalófilas Halorubrum tebenquichense. El imiquimod (IMQ) es una molécula sintética con capacidad de modular la respuesta inmunitaria. Tanto los nanoARC como el IMQ son ligandos de (es decir, se unen selectivamente a) receptores específicos encontrados en células del sistema inmunitario (los PRRs). Los nanoARC son ligandos del Receptor Scavenger A1 y el IMQ del receptor tipo Toll (TLR) 7. Hipotetizamos que, al combinar los dos ligandos en una sola plataforma (nanoARC-IMQ) lograríamos generar una respuesta inmune más potente que con los ligandos por separado e incluso mayor que la generada por otros compuestos comerciales.

Trabalho Final do Curso de Mestrado Integrado em Medicina, Faculdade de Medicina, Universidade de Lisboa, 2020 Submitted by Sofia Amador (sofiamador@fm.ul.pt) on 2021-02-25T13:02:24Z No. of bitstreams: 1 BeatrizFAndrade.pdf: 2502509 bytes, checksum: 625dc284063a3c60a411da05f8ea989d (MD5) Made available in DSpace on 2021-02-25T17:25:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 BeatrizFAndrade.pdf: 2502509 bytes, checksum: 625dc284063a3c60a411da05f8ea989d (MD5) Previous issue date: 2020-06-19

Submitted by Darcy Fernandes (darcy.fernandes@unesp.br) on 2020-04-20T18:49:19Z No. of bitstreams: 1 TESES DARCY FERNANDES.pdf: 8930553 bytes, checksum: 45678882d85e6bc5617ed548cf8766bd (MD5) Submitted by Darcy Fernandes (darcy.fernandes@unesp.br) on 2020-04-20T18:49:19Z No. of bitstreams: 1 TESES DARCY FERNANDES.pdf: 8930553 bytes, checksum: 45678882d85e6bc5617ed548cf8766bd (MD5) Rejected by Marley Cristina Chiusoli Montagnoli (marley@foar.unesp.br), reason: Antes de submeter novamente faça as seguintes correções: a) Na folha de autorização de reprodução você colocou que autoriza a reprodução do trabalho à partir de 06/08/2020, mas ao preencher o metadados você colocou que não autoriza a reprodução 24 meses após a publicação. Essas datas tem que ser iguais. b) Na tese, no agradecimentos da Capes, pela portaria você tem que escrever assim: O presente trabalho foi realizado com apoio da Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Brasil (CAPES) - Código de Financiamento 001. (Você colocou o número do processo) d) No preenchimento do Metadados, no financiador você assinalou a CAPES, mas o código de financiamento tem que ser preenchido: 001 ( e não o número do processo que você colocou) on 2020-04-23T01:16:27Z (GMT) Submitted by Darcy Fernandes (darcy.fernandes@unesp.br) on 2020-04-23T17:09:29Z No. of bitstreams: 1 TESES DARCY FERNANDES.pdf: 8930544 bytes, checksum: 6f45489b1ec353f1f6fe1f28be2d8f04 (MD5) Submitted by Darcy Fernandes (darcy.fernandes@unesp.br) on 2020-04-23T17:09:29Z No. of bitstreams: 1 TESES DARCY FERNANDES.pdf: 8930544 bytes, checksum: 6f45489b1ec353f1f6fe1f28be2d8f04 (MD5) Rejected by Marley Cristina Chiusoli Montagnoli (marley@foar.unesp.br), reason: Antes de submeter novamente faça a seguinte alteração: Na página de autorização tem que ser assim: Não autorizo a reprodução deste trabalho até 13 de março de 2022. (Direitos de publicação reservado ao autor) Araraquara, 13 de março de 2020. (Observe que você trocou as datas na página, 2022 tem que estar na primeira linha e 2020 na última, se tiver dúvida consulte o Guia de Normalização da sua Biblioteca) on 2020-04-24T13:50:26Z (GMT) Submitted by Darcy Fernandes (darcy.fernandes@unesp.br) on 2020-04-24T17:53:01Z No. of bitstreams: 1 TESE DARCY FERNANDES.pdf: 8903417 bytes, checksum: d39a23b16b6bef9885da4e35a7690280 (MD5) Submitted by Darcy Fernandes (darcy.fernandes@unesp.br) on 2020-04-24T17:53:01Z No. of bitstreams: 1 TESE DARCY FERNANDES.pdf: 8903417 bytes, checksum: d39a23b16b6bef9885da4e35a7690280 (MD5) Rejected by Marley Cristina Chiusoli Montagnoli (marley@foar.unesp.br), reason: Antes de submeter novamente faça a correção: Na folha de autorização de reprodução (a última folha) não pode conter assinatura, somente seu nome. on 2020-04-28T19:28:36Z (GMT) Submitted by Darcy Fernandes (darcy.fernandes@unesp.br) on 2020-04-28T20:55:07Z No. of bitstreams: 1 TESE DARCY FERNANDES.pdf: 8880580 bytes, checksum: fbbe84f1dac71fe89313e1ec57d397df (MD5) Submitted by Darcy Fernandes (darcy.fernandes@unesp.br) on 2020-04-28T20:55:07Z No. of bitstreams: 1 TESE DARCY FERNANDES.pdf: 8880580 bytes, checksum: fbbe84f1dac71fe89313e1ec57d397df (MD5) Approved for entry into archive by Marley Cristina Chiusoli Montagnoli (marley@foar.unesp.br) on 2020-05-01T13:27:55Z (GMT) No. of bitstreams: 1 fernandes_d_dr_arafor_par.pdf: 462326 bytes, checksum: 7fb1949559ebb31cdcf238eca7521900 (MD5) Approved for entry into archive by Marley Cristina Chiusoli Montagnoli (marley@foar.unesp.br) on 2020-05-01T13:27:55Z (GMT) No. of bitstreams: 1 fernandes_d_dr_arafor_par.pdf: 462326 bytes, checksum: 7fb1949559ebb31cdcf238eca7521900 (MD5) Made available in DSpace on 2020-05-01T13:27:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 fernandes_d_dr_arafor_par.pdf: 462326 bytes, checksum: 7fb1949559ebb31cdcf238eca7521900 (MD5) Previous issue date: 2020-03-13 Made available in DSpace on 2020-05-01T13:27:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 fernandes_d_dr_arafor_par.pdf: 462326 bytes, checksum: 7fb1949559ebb31cdcf238eca7521900 (MD5) Previous issue date: 2020-03-13 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) O carcinoma espinocelular (CEC) representa mais de 95% de todas as neoplasias malignas que acometem a cavidade oral e muitas vezes estes tumores são precedidos por alterações clínicas que apresentam um evidente potencial de transformação maligna, as quais são chamadas de desordens potencialmente malignas orais (DPMOs). Dentre estas, a leucoplasia oral (LO) possui taxa de transformação maligna que varia de 0,2% até 17,5%; contudo, uma outra DPMO conhecida como leucoplasia verrucosa proliferativa (LVP) apresenta um comportamento persistente e progressivo para malignidade, com taxa de transformação maligna maior que 70%. Diferente da LO, fator de risco como tabaco, álcool e noz de areca não parecem estar associados com o desenvolvimento da LVP. Adicionalmente, a LVP frequentemente apresenta resposta inadequada a todas as modalidades de tratamento, sofre rápida disseminação pelos sítios orais e muitas vezes demonstra recorrência. Estudos recentes sugerem que o infiltrado inflamatório associado às lesões leucoplásicas de paciente com LVP pode estar relacionado a etiologia e/ou comportamento clínico agressivo desta DPMO. Assim, foi realizada uma análise comparativa entre amostras de LO e LVP que consistiu em: (1) avaliar a porcentagem e identificar os subtipos de linfócitos T auxiliares e estado de ativação de linfócitos T citotóxicos, (2) avaliar a densidade e estado de ativação das células dendríticas, e (3) determinar o efeito de produtos solúveis de células displásicas na modulação da imunidade inata e/ou adaptativa e se tal modulação confere uma vantagem para a progressão do tumor. Para alcançar estes objetivos, a expressão imuno-histoquímica de marcadores linfócitos T e B, para células dendríticas (CD) de Langerhans, CD submucosas imaturas e maturas, CD plasmocitóides, foram utilizados. Adicionalmente, ensaios com cultura de células foram realizados para acessar o potencial modelador de fatores solúveis produzidos por culturas celulares derivadas de PVL sobre células mononucleares do sangue periférico (PBMCs). Estes ensaios incluíram a avaliação das taxas de apoptose e imunofenotipagem dos PBMCs após contato com meios de cultura condicionados de diferentes culturas celulares, incluindo queratinócitos normais (HOK), displásicos (DOK e DOK-PVL) e tumorais (SCC-25). Os resultados da análise imuno-histoquímica mostraram uma redução global de células T e B acompanhada de uma inibição da ativação de células Th17 e consequente indução de uma resposta imune mediada por células Treg na LVP, parece favorecer o comportamento mais agressivo desta DPMO em relação a LO. Adicionalmente, CD de Langerhans, maturas e plasmocitóides estão reduzidas nos compartimentos epitelial e subepiteliais na LO e LVP em relação ao controle. Por outro lado, CD imaturas encontram-se aumentadas nos compartimentos epitelial e subepiteliais destas duas DPMOs. Juntos, estes achados favorecem uma apresentação inadequada dos antígenos pré-tumorais facilitando a tolerância imunológica. Os experimentos com cultura de células revelaram ainda, que os produtos solúveis de queratinócitos displásicos tem capacidade de alterar o fenótipo dos PBMCs favorecendo a transformação maligna de DPMOs. Assim, os resultados deste estudo indicam que os produtos solúveis dos queratinócitos derivados de LVP são capazes de modular de forma distinta a resposta imunológica desta DPMO em relação à LO, sendo esta modulação acompanhada do ganho de vantagens que favorecem o processo de tumorigênese. Oral squamous cell carcinoma (SCC) represents more than 95% of all malignant neoplasms that affect the oral cavity and these tumors are often preceded by clinical changes that have an evident potential for malignant transformation, which are called potentially malignant oral disorders (OPMDs). Among these, oral leukoplakia (OL) has a malignant transformation rate that varies from 0.2% to 17.5%; however, another OPMD known as proliferative verrucous leukoplakia (PVL) has a persistent and progressive behavior for malignancy, with a malignant transformation rate greater than 70%. Unlike OL, a risk factor such as tobacco, alcohol and areca nut does not seem to be associated with the development of PVL. Additionally, PVL often presents an inadequate response to all treatment modalities, suffers rapid dissemination through oral sites and often shows recurrence. Recent studies suggest that the inflammatory infiltrate associated with leukoplastic lesions in a patient with PVL may be related to the etiology and / or aggressive clinical behavior of this OPMD. Thus, a comparative analysis was performed between OL and PVL samples that consisted of: (1) evaluating the percentage and identify subtypes of auxiliary T lymphocytes and activation status of cytotoxic T lymphocytes, (2) evaluating the density and activation status of dendritic cells, and (3) determine the effect of soluble products of dysplastic cells on the modulation of innate and / or adaptive immunity and whether such modulation confers an advantage for progression of the tumor. To achieve these goals, immunohistochemical expression of markers for Langerhans dendritic cells (DC), immature and mature submucous DC, plasmacytoid DC, T and B lymphocytes were used. In addition, cell culture assays were performed to access the potential modeling of soluble factors produced by PVL-derived cell cultures on peripheral blood mononuclear cells (PBMCs). These trials included the assessment of apoptosis and immunophenotyping rates of PBMCs after contact with conditioned culture media from different cell cultures, including normal keratinocytes (HOK), dysplastic (DOK and DOK-PVL) and tumor (SCC-25). The results of the immunohistochemical analysis showed a global reduction in T and B cells accompanied by an inhibition of Th17 cell activation and the consequent induction of an immune response mediated by Treg cells in PVL, seems to favor the more aggressive behavior of this OPMD in relation to OL. In addition, Langerhans DC, matures and plasmacytoids are reduced in the epithelial and subepithelial compartments in the OL and PVL in relation to the control. In contrast, immature DCs are increased in the epithelial and subepithelial compartments of these two OPMD. Together, these findings favor an inadequate presentation of pre-tumor antigens, facilitating immunological tolerance. The experiments with cell culture also revealed that the soluble products from dysplastic keratinocytes may to change the PBMCs phenotype favoring the malignant transformation of OPMD. Thus, the results of this study indicate that soluble product from PVL-derived keratinocytes are capable of differently modulating the immune response of this DPMO in relation to OL, and this modulation is accompanied by the gain of advantages that favor the tumorigenesis process. FAPESP 2017/01798-0 FAPESP 2017/01438-0 CAPES 001

Objective To analyze and compare the expression of Toll-like receptors by regulatory T cells present in the peritoneal fluid of patients with and without endometriosis. Methods Regulatory T cells were isolated from peritoneal fluid of women with and without endometriosis, collected during surgery, and mRNA was extracted for analysis of Toll-like receptors expression by reverse-transcriptase polymerase chain reaction. Results Patients with endometriosis presented regulatory T cells expressing a larger number and variety of Toll-like receptors when compared to regulatory T cells from patients in the Control Group. Toll-like receptor-1 and Toll-like receptor-2 in regulatory T cells were expressed in both groups. All other expressed Toll-like receptors types were only found in regulatory T cells from the Endometriosis Group. Conclusion Patients with endometriosis had peritoneal regulatory T cells expressing various Toll-like receptors types.

Introdução: A patogênese de doenças neurodegenerativas, como a doença de Alzheimer (DA), têm sido cada vez mais objeto de estudo em inúmeras pesquisas científicas. Objetivo: A presente revisão narrativa teve por objetivo descrever a contribuição de fatores como o estresse oxidativo e o processo de netose para a patogênese de doenças neurodegenerativas, como a DA. Material e métodos: Realizou-se revisão de literatura de forma não sistemática nos bancos de dados das plataformas PubMed e Scielo com os seguintes descritores: Alzheimer + oxidative stress, Alzheimer + netosis e Alzheimer + inflammation, em periódicos nacionais e internacionais de 2000 a 2018. Ao final da seleção foram utilizados 26 artigos nesta revisão. Resultados: Diversos estudos demostraram importantes componentes ligados à neuroinflamação como peças-chave para o entendimento do acometimento neurológico causado pela DA, tais como, o estresse oxidativo, respostas inflamatórias por parte de neutrófilos e da micróglia, alterações vasculares e da barreira hematoencefálica. Conclusão: Em função de tais descobertas, faz-se necessário a continuidade e o avanço no entendimento da fisiopatologia da DA bem como da busca por eficazes abordagens terapêuticas para esta doença.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Introdução: Poucos são os estudos que apontam as evidencias dos efeitos agudos e crônicos dos exercícios aeróbios nos marcadores imunológicos. Objetivo: investigar o efeito do exercício aeróbio agudo e crônico nos marcadores imunológicos. Métodos: Foi realizada uma revisão sistemática em relação aos efeitos dos exercícios aeróbios agudos e crônicos nas células imunes, dentro da literatura cientifica existente sem restrição ao idioma ou ano de publicação dos estudos até a atualidade. Os artigos selecionados para a revisão passaram por uma análise investigativa quantitativa e qualitativa determinando as suas características. Um estudo seccional com uma avaliação cardiorrespiratória ergoespirométrica, ou seja, teste incremental máximo, assim como uma investigação imunologia antes e após a mesma através da coleta sanguínea nos participantes do estudo seccional também foram desenvolvidas. Nas amostras sanguíneas foram realizada uma análise descritiva caracterizando um perfil imunológicos, seguida do teste t pareado, verificando alterações nas células imunes. Além disso, o tamanho do efeito (TE) foi avaliado com o objetivo de comparar a magnitude pré e pós do efeito agudo do esforço físico nestes marcadores. Resultados: Foram incluídos 15 estudos na presente revisão sistemática sendo 13 de intervenções agudas e 2 crônicas, onde foi observado que a intervenção aguda promove alterações em grande parte dos marcadores imunológicos enquanto que a crônica interfere em uma menor proporção nos mesmos, sendo nas subpopulações linfocitárias. A maioria desses estudos não apresentaram alto riscos de vieses, porem riscos incertos de viés. Com o teste incremental máximo foram observados aumentos significativos após o mesmo nos valores séricos dos leucócitos, linfócitos, CD3-CD16- 56, CD16-56, CD56, CD3, CD3-CD4, CD3-CD8 e valores do TE para os mesmos, sendo de moderado a muito alto. Conclusão: Contudo, conclui-se que as intervenções agudas e crônicas modificam a maioria dos marcadores imunes, porém aspectos como, o sexo, uso de pílula anticoncepcional nas mulheres, a capacidade física dos investigados, o ambiente, o tipo e a intensidade destes exercícios aeróbios podem interferir nestes marcadores. O teste incremental máximo promove alterações em determinados marcadores imunológicos analisados, sendo o tamanho do efeito desse classificado de moderado a muito alto.

CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior A doença hepática gordurosa não alcoólica (NAFLD) é uma das doenças crônicas mais frequentes no mundo. As limitações na compreensão de sua patogênese, especialmente nos estágios iniciais, impedem o desenvolvimento de ferramentas de diagnóstico mais eficazes e de novos tratamentos. No presente trabalho, mapeamos as alterações imunológicas no fígado durante os estágios iniciais da NAFLD em camundongos e em seres humanos, e propusemos um novo modelo animal de esteatose hepática inicial, que pode servir como uma plataforma para impulsionar os avanços no diagnóstico rápido e precoce auxiliando também nos métodos terapêuticos. Para tal, biópsias hepáticas de pacientes diagnosticados com NAFLD branda, foram coletadas para desenvolvimento de um perfil de expressão gênica, e camundongos foram alimentados com dieta high fat por curtos períodos para mimetizar a esteatose inicial. A resposta imune do fígado em camundongos foi investigada detalhadamente usando uma combinação de imagem intravital confocal, expressão gênica, isolamento celular, citometria de fluxo e ensaios de transplante de medula óssea. Sendo assim, foi possível observar grandes alterações imunológicas em humanos e camundongos nas fases iniciais da esteatose hepática. Em camundongos, essas alterações aumentaram significativamente a taxa de mortalidade por lesão hepática aguda induzida por drogas e também predispuseram os animais a infecções bacterianas. Além disso, a deleção de TLR4 tanto nas células imunológicas do fígado quanto nos hepatócitos reduziu a tolerância hepática, especialmente nas células de Kupffer, nos momentos iniciais de ingestão da dieta high fat. Dessa forma, concluímos que o sistema imunológico do fígado é capaz de sentir de maneira precoce o acúmulo de gordura hepático, gerando uma resposta bifásica ao consumo de dieta rica em gordura. Observamos ainda que as células do fígado parecem estar sendo primadas por ligantes de TLR4, o que confere ao fígado uma tolerância imunológica nas fases iniciais mas que a manutenção do insulto dietético pode levar a uma hiper-responsividade a lesões hepáticas agudas e a uma inabilidade em controlar infecções bacterianas. Non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) is one of the most frequent chronic disease in the world, and limitations in our understanding of its pathogenesis, especially in initial stages, are precluding the development of diagnosis tools and new treatments. Here we mapped the immunological changes in liver during the early stages of fatty liver disease in mice and humans, and proposed a novel mouse model of initial liver steatosis, which may serve as a platform to drive advances in rapid diagnosis and therapeutic fields. For that, liver biopsies from patients in early stages of NAFLD were collected to further profiling of gene expression, and mice received high fat diet for short periods to mimic initial steatosis. Liver immune response in mice was detailed investigated using a combination of confocal intravital imaging, gene expression, cell isolation, flow cytometry and bone marrow transplantation assays. We observed major immunologic changes in both humans and mice in the early phases of liver steatosis. In mice, these changes significantly enhanced mortality rate upon drug-induced liver injury and also predisposed mice to bacterial infections. Also, deletion of TLR4 in liver cells dampened liver tolerogenesis, especially in Kupffer cells, in the initial time points of dietary insult. In conclusion, liver immune system acts as a sentinel for early and minor changes in hepatic lipid content, mounting a biphasic response upon high fat diet insult. Priming of liver immune cells by gut-derived TLR4 ligands may add to liver tolerogenesis in initial phases, but continuous insults may drive hyper-responsiveness to damage and reduced ability to control infections.

Relatório de Estágio do Mestrado Integrado em Ciências Farmacêuticas apresentado à Faculdade de Farmácia A pesquisa e investigação em torno do microbioma humano, especialmente o microbiota intestinal, tem sofrido um drástico aumento nos últimos anos e diversos cientistas espalhados por todo o mundo exploram este tópico. O microbiota intestinal é composto por todos os microrganismos que habitam esta parte do corpo humano e tem um papel crucial na modulação de diversas funções biológicas como na resposta imunológica, inflamação,hematopoiese, metabolismo, entre outras. O microbiota pode ser constituído por diferentes microrganismos tendo em consideração as diferentes partes do corpo que habitam. Para além disso, os microrganismos comensais podem variar de pessoa para pessoa considerando algumas características do hospedeiro como a idade, o tipo de nascimento, o estilo de vida(por exemplo a dieta), as patologias e respetivos tratamentos, entre outros. O microbiota intestinal tem sido igualmente associado a diversas patologias incluindo a doença inflamatória intestinal, gastrite, obesidade e todos os tipos de cancro. Em diversos casos, uma certa situação patológica está associada a uma alteração na composição do microbiota, disbiose, quer ao nível da sua composição quer da frequência relativa das espécies. Sendo o cancro considerado uma das doenças mais mortais atualmente, o aprofundamento deste tópico é crucial e obrigatório. Sabe-se que o microbiota está envolvido no início,progressão e disseminação do cancro, mas que, para além disso, desempenha um papel crucial no controlo dos efeitos adversos e no aumento da eficácia da terapêutica. Esta monografia pretende abordar definições e conceitos cruciais relativos ao microbioma humano e pretende também explorar a sua influência na modulação da terapêuticado cancro, incluindo quimioterapia, radioterapia e imunoterapia. Os inibidores do checkpointimunológico, como os anticorpos anti-CTLA4 e anti-PDL1, um tema relevante do momento que deu origem ao Prémio Nobel da Fisiologia ou Medicina 2018, também vão ser explorados neste trabalho. Além disso, esta monografia visa especificar as espécies envolvidas em cada processo e os seus mecanismos de ação e pretende ainda explorar a possibilidade de ter como alvo o microbiota, para ser possível aumentar o efeito antitumoral e para se poder prevenir a toxicidade de fármacos. Por último, o presente trabalho pretende descrever e explorar uma abordagem recente relativa ao microbiota intestinal, o transplante fecal de microbiota (FMT). Research regarding human microbiome, especially the gut microbiota, has increased in the last years and several scientists around the world are exploring this topic. The gut microbiota is composed of all the microorganisms that inhabit this part of the human body and has a crucial role in modulating several biological functions as the immunity response,inflammation, hematopoiesis, metabolism, among others. Additionally, it is known that the microbiota can be constituted by different microorganisms taking into consideration the part of the body that inhabits. Moreover, the commensal microorganisms can also vary from person to person considering some characteristics of the host such as the moment of life, the birthing process, the lifestyle (diet as an example), the pathology and treatments, among others.The gut microbiota has also been associated with several pathologies including inflammatory bowel disease, gastritis, obesity and all types of cancer. In several cases, a certain pathological situation is associated with an alteration of the microbiota’s composition, dysbiosis, regarding either the species or the relative frequency of them. Being cancer considered as one of the deadliest diseases worldwide, the exploration and deepening of the influence of microbiota on this disease is crucial and mandatory. Microbiota is known to be involved in cancer initiation, progression and dissemination. Moreover, it can play a crucial role in controlling the adverse effects and improving the efficacy of the therapy.This monography intends to approach crucial definitions and concepts regarding human microbiome and proposes also to explore its influence in modulating the therapeutics of cancer, including chemotherapy, radiotherapy and immunotherapy. The immune checkpointinhibitors, as anti-CTLA4 and anti-PDL1 antibodies, a relevant topic at the moment that gave rise to the Nobel Prize in Physiology or Medicine 2018, will also be explored in the present work. Additionally, this monography aims to specify the species involved in each process and their mechanism of action and intends to explore the possibility of targeting the microbiota to improve the antitumoral effect and prevent drug-associated toxicity. Lastly, the present work proposes to describe and explore a recent approach regarding gut microbiota, the fecal microbiota transfer (FMT).