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Abstract Background Tumor necrosis factor-alpha (TNFɑ) is a cytokine that manages the host defense mechanism, which may play a role in the pathogenesis of COVID-19 patients. Several single-nucleotide polymorphisms, described in the promoter region of the TNFα gene, have a significant role on its transcriptional activity. These include the − 308A > G polymorphism which increases the TNFα levels with the expression of the A allele. The aim of this study was to explore whether the TNFα.− 308A > G polymorphism affects the clinical state of COVID-19 patients. The study included a total of 1028 individuals infected with severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2), which were distributed in 3 groups: asymptomatic, mild symptomatic and severe symptomatic patients. The amplification-refractory mutation system was used to determine the genotype of the TNFα.− 308A > G polymorphism. Results Results show a higher tendency of being asymptomatic in individuals carrying the GG genotype (336 of 411; OR 1.24, 95% CI 0.91–1.70). The development of a severe form of SARS-CoV-2 infection was not found in subjects with the A allele compared to those with the G allele (OR 0.96, 95% CI 0.51–1.79), except in the eastern region of the country where the risk increased (OR 4.41, 95% CI 1.14–17.05). However, the subjects carrying the A allele had a higher chance of developing symptoms (OR 1.24, 95% CI 0.91–1.70) compared to those with the G allele. Conclusion The TNFα.− 308A allele has an influence on developing symptoms of COVID-19 in Cuban patients, and that it particularly increases the risk of presenting severe forms of the disease in the eastern region of the country.

La concentración de los anticuerpos contra el polisacárido capsular polirribosilribitol fosfato del Haemophilus influenzae tipo b se considera un buen indicador serológico para evaluar protección contra la enfermedad invasiva. Existen pocos reportes que estudien la inmunidad serológica en Cuba. El objetivo general de este estudio fue determinar los niveles de protección séricos contra Haemophilus influenzae tipo b en niños, adolescentes y adultos cubanos, en una muestra de 575 individuos. Se cuantificó la concentración de IgG anti-polirribosilribitol fosfato de Haemophilus influenzae tipo b mediante un inmunoensayo enzimático estandarizado y validado en el laboratorio de inmunología del Centro Nacional de Genética Médica, La Habana, Cuba. Se determinaron las concentraciones medias geométricas de anticuerpos y los niveles de protección frente a la enfermedad invasiva por Haemophilus influenzae tipo b. La concentración media geométrica de IgG anti-polirribosilribitol fosfato fue de 1,94 μg/mL (IC95% 1,80; 2,08) y fue mayor en el grupo de 16 a 22 años. El porcentaje con protección de larga duración fue mayor para el sexo femenino que para el masculino (82,2% vs 71,4%; p=0,0339) entre los que poseían inmunidad natural. El grupo de sujetos nacidos en el periodo en que se vacunó con la vacuna conjugada cubana QUIMI-HIB® presentó concentraciones medias geométricas superiores (2,75 μg/mL, IC95% 2,00; 3,79). El 99,1% de los participantes presentó protección frente a la enfermedad invasiva por Haemophilus influenzae tipo b, el 19,8% a corto plazo y el 79,3% protección de larga duración. El inmunoensayo validado para la cuantificación de IgG anti-polirribosilribitol fosfato podría emplearse en estudios de seroprevalencia. En los sujetos estudiados, se encontró un predominio de elevadas concentraciones de IgG anti- polirribosilribitol fosfato del Haemophilus influenzae tipo b que confieren protección de larga duración.

La uveítis anterior no infecciosa es una enfermedad inflamatoria del ojo que afecta al tracto uveal y que puede causar ceguera total y otras discapacidades visuales. Esta enfermedad se ubica en el espectro de enfermedades autoinmunes y autoinflamatorias. Se han descrito respuestas no adecuadas a la vacunación en enfermedades mediadas por el sistema inmune, por lo que se evaluaron los niveles de antitoxina tetánica y diftérica en pacientes cubanos con uveítis anterior no infecciosa, relacionada con el alelo HLA-B27. Se determinaron los niveles de antitoxina tetánica y diftérica mediante ELISA en 190 pacientes con uveítis anterior no infecciosa y controles supuestamente sanos. El 97,37% de los pacientes con uveítis mostraron niveles de protección de antitoxina tetánica mayor o igual a 0,1 UI/mL, similar a lo observado en los controles sanos (98,95%) (p=0,4385). Las proporciones de pacientes con uveítis anterior no infecciosa y sus controles en los diferentes niveles de protección de antitoxina tetánica fueron similares (p>0,05), al igual que los títulos medios geométricos (p=0,2907). En los pacientes con uveítis, de 65 años o más, se detectó una mayor proporción de individuos con títulos protectores de larga duración (>1,0 UI/mL) de antitoxina diftérica (p=0,0065). En los pacientes con uveítis no se observó asociación entre la presencia del alelo HLA-B27 y la respuesta de anticuerpos frente al toxoide tetánico (p=0,6196) y diftérico (p=0,1917). El 37,9% de los pacientes con uveítis y el 42% de los controles, presentaron títulos no protectores (

Background: As a first step towards a vaccine protecting COVID-19 convalescents from reinfection, we evaluated FINLAY-FR-1A vaccine in a clinical trial. Methods: Thirty COVID-19 convalescents aged 22-57 years were studied: convalescents of mild COVID-19, asymptomatic convalescents, both with PCR-positive at the moment of diagnosis; and individuals with subclinical infection detected by viral-specific IgG. They received a single intramuscular injection of the FINLAY-FR-1A vaccine (50 µg of the recombinant dimeric receptor binding domain). The primary outcomes were safety and reactogenicity, assessed over 28 days after vaccination. The secondary outcome was vaccine immunogenicity. Humoral response at baseline and following vaccination was evaluated by ELISA and live-virus neutralization test. The effector T cellular response was also assessed. Cuban Public Registry of Clinical Trials, WHO-ICTRP: https://rpcec.sld.cu/en/trials/RPCEC00000349-En. Findings: No serious adverse events were reported. Minor adverse events were found, the most common, local pain: 3 (10%) and redness: 2 (6·7%). The vaccine elicited a >21 fold increase in IgG anti-RBD antibodies 28 days after vaccination. The median of inhibitory antibody titres (94·0%) was three times greater than that of the COVID-19 convalescent panel. Virus neutralization titres higher than 1:160 were found in 24 (80%) participants. There was also an increase in RBD-specific T cells producing IFN-γ and TNF-α. Interpretation: A single dose of the FINLAY-FR-1A vaccine against SARS-CoV-2 was an efficient booster of pre-existing natural immunity, with excellent safety profile. Funding: Partial funding for this study was received from the Project-2020-20, Fondo de Ciencia e Innovación (FONCI), Ministry of Science, Technology and the Environment, Cuba.

Introducción: Durante la etapa aguda de la infección por el virus de la hepatitis B y el período inicial de una infección crónica, el DNA está en forma episomal (libre o extracromosomal) y replica en el hepatocito produciendo entre otros viriones infectivos, DNA polimerasa y antígeno de superficie del virus (HBsAg). Objetivo: Validar un inmunoensayo tipo ELISA para cuantificar los niveles de HBsAg en pacientes con hepatitis B crónica. Método: Se realizó un estudio experimental de desarrollo tecnológico. Se llevó a cabo la normalización y validación de un inmunoensayo enzimático heterogéneo de doble anticuerpo para la cuantificación de HBsAg en sueros humanos. 115 muestras de sueros de pacientes con hepatitis B crónica con resultados de carga viral se correlacionaron con las concentraciones de HBsAg. Resultados y discusión: El método presentó coeficientes de variación intra e interensayo de 9,8 y 13,2% respectivamente. El rango de trabajo se estimó entre 0.15 y 60ng/mL. El porcentaje de recuperación estuvo entre el 90 y 110% y el ajuste lineal de la curva estándar presentó un coeficiente de determinación superior a 0,99. La correlación alcanzada entre los niveles de DNA y la concentración de HBsAg fue de 62.5%. Conclusiones: La evaluación del ELISA para la cuantificación de HBsAg desarrollado en el laboratorio mostró que cumple los parámetros de validación para su uso clínico.

Abstract Background Recurrent infections in childhood are the main cause of remission to the immunology service. T lymphocytes generated in the thymus are essential for fighting infection, making the thymus area an important predictor of the immune system’s competence. This study aimed to identify the possible relationship of the thymic area with clinical-epidemiological variables and values of subpopulations of T lymphocytes in the peripheral blood of children with recurrent infections. Methods We conducted applied research using a transversal analytical design at the National Medical Genetics Center (Havana, Cuba), from January to August 2022. The study covered 73 children of which we analyzed clinical-epidemiological variables and the size of the thymus through ultrasound. Furthermore, we determined the relative and absolute values of the subpopulations of T cells using flow cytometry. Results Of the children studied, 65.8% had thymic hypoplasia. The children who breastfed for less than 6 months showed four times the risk of developing moderate-severe thymus hypoplasia (OR = 3.90, 95% CI: 1.21–12.61). A direct relationship was found between the area of the thymus and the child’s size (r = 0.238, p = 0.043) and weight (r = 0.233, p = 0.047). The relative values of CD3+ T lymphocytes decreased in the cases of mild hypoplasia (p = 0.018) and moderate-severe hypoplasia (p = 0.049). The thymus area was associated with the absolute cell count of CD8+ effector memory T cells (rs = −0.263, p = 0.024) and of the central memory T cells (r = −0.283, p = 0.015). Conclusions Breastfeeding for less than 6 months, as well as the weight and size of the child, are related to their thymus area. The subpopulation values of T lymphocytes detected suggest that patients with thymic hypoplasia develop a contraction of CD3+ T cells, which can make them more vulnerable to infectious processes. This finding was combined with an expansion of the memory compartments of the subpopulations of CD8+ T cells, suggesting a greater susceptibility to intracellular viral and bacterial infections in these cases.

Introducción: la cuantificación de antitoxina tetánica es útil para la evaluación de la respuesta inmune humoral frente a antígenos vacunales. Objetivo: desarrollar la estandarización y validación técnica de un ensayo de inmunoabsorción ligado a enzima (ELISA) de tipo indirecto para cuantificar antitoxina tetánica en suero humano. Material y Método: el estándar preparado para la curva del ensayo se calibró frente al preparado en el Instituto Finlay. Se normalizaron los indicadores óptimos para el desarrollo de cada paso de la técnica. Resultados y Discusión: durante la validación se alcanzó una buena precisión intraensayo e interensayo en todos los casos. Al evaluar el paralelismo el coeficiente de variación fue menor de 10%. El ensayo mostró una excelente exactitud, con valores de recuperación entre 90% y 110%. El límite de detección fue 0,002 UI/mL. La sensibilidad analítica alcanzada fue de 0,01 UI/mL. Conclusiones: el ensayo puede ser utilizado para la cuantificación de antitoxina tetánica en suero humano. Palabras clave: antitoxina tetánica, ensayo inmunoenzimático, ELISA, validación.

Abstract Purpose To determine the relationship between the genotypes of the TaqI polymorphism of VDR gene and the clinical forms of COVID-19 in Cuban patients. Methods TaqI polymorphism was determined by the PCR in 104 Cuban patients, who suffered different clinical forms of COVID-19. Results There was a greater possibility of presenting symptomatic forms [OR = 2.081, 95% CI: 0.243–17.842], even severe [OR = 1.200, 95% CI: 0.217–6.638], related to the tt genotype. Conclusion There are signs of association between the risk of developing COVID-19 and the genotypes of the TaqI polymorphism of the VDR gene in the studied Cuban patients.

Introducción: la cuantificación de antitoxina tetánica es útil para la evaluación de la respuesta inmune humoral frente a antígenos vacunales. Objetivo: desarrollar la estandarización y validación técnica de un ensayo de inmunoabsorción ligado a enzima (ELISA) de tipo indirecto para cuantificar antitoxina tetánica en suero humano. Material y Método: el estándar preparado para la curva del ensayo se calibró frente al preparado en el Instituto Finlay. Se normalizaron los indicadores óptimos para el desarrollo de cada paso de la técnica. Resultados y Discusión: durante la validación se alcanzó una buena precisión intraensayo e interensayo en todos los casos. Al evaluar el paralelismo el coeficiente de variación fue menor de 10%. El ensayo mostró una excelente exactitud, con valores de recuperación entre 90% y 110%. El límite de detección fue 0,002 UI/mL. La sensibilidad analítica alcanzada fue de 0,01 UI/mL. Conclusiones: el ensayo puede ser utilizado para la cuantificación de antitoxina tetánica en suero humano.