Search

Conventional research facilities for small animals are complex for planning and designing. That is why when designing a new unit, it is valuable to collect the information that is available on similar units already built, in order to be able to analyze the different conceptual models and workflows that could serve as a reference for the design. In this work, through standardized architectural plans, we study the organizational model and the conceptual design of three different conventional research facilities for small animals belonging to Health Research Institutes accredited by the Carlos III Health Institute. The conclusions drawn from the analysis of several cases may be useful in the design of future facilities, both for researchers and professionals responsible for the functional program, design, construction and start-up of new conventional research units for small animals., Las unidades de experimentación convencional de animal pequeño son instalaciones complejas de planificar y diseñar. Es por ello que a la hora de diseñar una nueva unidad puede resultar muy valioso recopilar la información que se encuentra disponible sobre unidades similares ya construidas para así poder analizar los diferentes modelos conceptuales y los flujos de trabajo que puedan servir de referencia para su diseño. En este trabajo, a través de expresiones gráficas estandarizadas, se estudia el modelo organizativo y el diseño conceptual de la unidad de experimentación convencional de animal pequeño de tres Institutos de Investigación Sanitaria acreditados por el Instituto de Salud Carlos III. A partir de la puesta en común de los resultados obtenidos del análisis de varios casos, se pueden sacar conclusiones que pueden ser de utilidad en el diseño de fututos centros, tanto para los investigadores como para los profesionales responsables de la programación funcional, diseño, construcción y puesta en funcionamiento de nuevos centros de experimentación convencional de animal pequeño.

Resumen: Animales de laboratorio criados en diferentes Bioterios muestran variaciones en sus características fisiológicas debido a la dieta, manejo, estado de salud, edad, vías de toma de muestras y otros factores. Por ello la importancia de determinar el perfil bioquímico de ratones y ratas convencionales del Bioterio de la Facultad de Ciencias Químicas de la Universidad Nacional de Asunción (FCQ-UNA). En el estudio experimental se utilizaron 60 ratones Swiss y 60 ratas Wistar, machos y hembras, de 11 semanas de edad. Se determinaron distintos parámetros bioquímicos como los perfiles renal, hepático, lipídico y proteico, electrolitos, glicemia y hemoglobina glicosilada. Los animales no fueron expuestos a tratamientos químicos o farmacológicos que pudieran cambiar su estado fisiológico natural. El análisis comparativo de los resultados con los presentados en la literatura, demostraron claramente la existencia de variaciones intra-especie. Las diferencias más notorias se observaron en el perfil hepático; ya que, los niveles de transaminasas séricas de los animales presentaron valores por debajo de la establecida en la bibliografía consultada. Además, claramente se evidenció valores inferiores de glicemia en los animales del Bioterio de la FCQ-UNA comparados con Bioterios de la región. Este estudio estandarizó el perfil bioquímico de ratas y ratones convencionales del Bioterio de la Facultad de Ciencias Químicas de la UNA, ofreciendo una herramienta valiosa a los investigadores para el análisis de sus resultados experimentales. Abstract: Laboratory animals reared in different Animal Facilities show variations in their physiological characteristics due to diet, management, health status, age, sampling routes, and other factors. For this reason, the importance of determining the biochemical profile of conventional mice and rats from the Animal Facility of the Facultad de Ciencias Químicas of the Universidad Nacional de Asunción (FCQ-UNA). In the experimental study, were used 60 Swiss mice and 60 Wistar rats, males and females, 11 weeks old. Were determined different biochemical parameters such as renal, liver, lipid, and protein profiles, electrolytes, glycemia and glycosylated hemoglobin. The animals were not exposed to chemical or pharmacological treatments that could change their natural physiological state. The comparative analysis of the results with those presented in the literature clearly demonstrated the existence of intra-species variations. The most noticeable differences were observed in the liver profile; since the serum transaminase levels of the animals presented values below that established in the consulted bibliography. In addition, lower glycemia values were clearly evidenced in the animals of the Animal Facility of FCQ-UNA compared to others Animal Facilities of the region. This study standardized the biochemical profile of conventional rats and mice from the Animal Facility of the Facultad de Ciencias Químicas of UNA, offering a valuable tool to researchers for the analysis of their experimental results.

Tesis (Doctora en Ciencias Químicas) - - Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas, 2022 La proteína específica de leucocitos 1, LSP1, es una fosfoproteína intracitoplasmática de 52 kDa que se une a F-actina y es expresada en todos los leucocitos humanos y murinos, como así también en células endoteliales. Múltiples estudios indican que polimorfismos o disminuciones en los niveles de expresión de LSP1 constituyen factores de riesgo para el desarrollo de distintos tipos de cáncer, como cáncer de mama y hepatocarcinoma. A pesar de su bajo número tanto en tumores como en órganos linfoides, las células dendríticas son esenciales para la inducción de la respuesta inmune antitumoral. Las células dendríticas capturan antígenos asociados a tumor, los procesan transformándolos en péptidos inmunogénicos que son cargados en las moléculas del MHC, y los presentan a los linfocitos T proveyendo además coestimulación y citoquinas, permitiendo de esta manera la generación de linfocitos T citotóxicos, células fundamentales en la inmunidad antitumoral. Estudios previos llevados a cabo por nuestro grupo de investigación revelaron que la ausencia de LSP1 en células dendríticas, afecta la inducción de una respuesta citotóxica in vivo en animales WT y la activación de linfocitos T CD8+ vírgenes in vitro. Además, las células dendríticas LSP1 KO exponen menor proporción de péptidos antigénicos asociados a MHC-I en su superficie debido a un defecto en la traslocación del antígeno desde los endosomas al citosol, proceso fundamental para una eficiente presentación cruzada de antígenos. Para determinar el rol de LSP1 en la generación de una respuesta inmune antitumoral utilizamos la línea de melanoma murino B16-OVA. Observamos que luego de implantar de manera subcutánea 1.105 células, ratones carentes de LSP1 desarrollan tumores de manera más temprana, los mismos crecen a una velocidad superior y alcanzan tamaños mayores que los respectivos tumores implantados en animales WT. Dichos tumores presentan una menor área de necrosis, fenómeno que se ve acompañado de un menor infiltrado por parte de las células del sistema inmune. Sin embargo, la composición del infiltrado inflamatorio es similar en ambos grupos de animales, siendo las células dendríticas CD103+ la población minoritaria en tumores extraídos tanto de ratones WT como de ratones LSP1 KO. La ausencia de LSP1 a nivel leucocitario condiciona su capacidad para acceder al microambiente tumoral, lo que podría explicar, al menos en parte, la menor frecuencia leucocitaria hallada en tumores extraídos de ratones carentes de LSP1. Por otro lado, el análisis del microambiente tumoral reveló que los tumores que se desarrollan en ratones LSP1 KO presentan una mayor concentración de múltiples citoquinas inflamatorias, incluyendo IL-23, TNF-α, IL-12p70, IL-1β, IL-10, IL-27, IL-17A, IFN-β, y GM-CSF, que presentes en altas concentraciones de manera crónica pueden favorecer el desarrollo del tumor. La caracterización de las poblaciones leucocitarias en ganglio linfático indicó que no existen diferencias a nivel basal entre los animales WT y LSP1 KO. Sin embargo, el análisis de los ganglios drenantes de tumor muestra varias diferencias al comparar los grupos experimentales. En ratones LSP1 KO, los ganglios drenantes de tumor presentan una menor frecuencia de neutrófilos y linfocitos B, sumado a una mayor proporción de monocitos y linfocitos T. Además, existe una mayor frecuencia de células dendríticas totales, pero de mayor relevancia para el desarrollo de una respuesta inmune antitumoral es la remodelación que existe en este compartimento celular, ya que hay una menor frecuencia de células dendríticas CD103+ y CD8α+ capaces de efectuar la presentación cruzada de antígenos. La funcionalidad de las células dendríticas también se ve comprometida por la ausencia de LSP1. Las mismas, capturan antígenos tumorales de manera deficiente y consecuentemente, las células dendríticas CD103+, principales responsables de transportar antígenos al ganglio drenante de tumor, lo hacen en una menor proporción, lo cual no se encuentra condicionado por los niveles de expresión de CCR7. Además, las células dendríticas LSP1 KO presentes en ganglio drenante a tumor inducen una menor activación y proliferación de linfocitos T CD8+, afectando la generación de la respuesta inmune antitumoral. Dichas células dendríticas, expresan mayores niveles de la molécula inhibitoria PD-L1, sin embargo, esta vía de señalización no es la principal responsable del deficiente control tumoral observado en los ratones LSP1 KO ya que el bloqueo de la interacción PD-L1/PD-1 mediante la utilización de un anticuerpo monoclonal dirigido contra PD-1 no modifica el tamaño tumoral en estos animales. La evaluación de linfocitos T específicos en sangre periférica indica que los niveles son comparables entre ratones WT y LSP1 KO. Lamentablemente, dichas células no pudieron ser halladas a nivel tumoral ni el ganglio drenante, posiblemente por su bajo número y por problemas de sensibilidad y especificidad de la técnica. Sin embargo, la producción de moléculas efectoras como perforinas y granzima B, como así también la producción simultánea de IFN-γ y el marcador de degranulación Lamp1, es significativamente menor en linfocitos T CD8+ intratumorales en ratones LSP1 KO, lo que indica que dichos linfocitos poseen alteraciones a nivel funcional. Al evaluar la capacidad citotóxica in vivo en ratones con tumor no se detectó lisis específica en ninguno de los dos grupos de animales estudiados. Por ello, con el objetivo de potenciar la respuesta inmune, los animales fueron inmunizados con OVA/CpG-ODN/Coa-ASC16, lo cual evidenció un menor porcentaje de lisis en los ratones LSP1 KO, reflejando su menor capacidad citotóxica a pesar del fuerte estímulo brindado para desarrollar este tipo de respuesta. Finalmente, los resultados indican que una única inmunización con OVA/CpG-ODN/Coa-ASC16 protege parcialmente a los ratones tanto WT como LSP1 KO frente al desarrollo tumoral e incrementa su sobrevida. Sin embargo, la respuesta generada en los animales LSP1 KO continúa siendo inferior a la que se desencadena en los animales WT, lo que indica que la menor citotoxicidad desarrollada en los animales LSP1 KO condiciona su respuesta frente a tumores e impide un adecuado control de los mismos. A partir de los resultados obtenidos podemos concluir que la ausencia de LSP1 afecta la generación de la respuesta inmune antitumoral en varios niveles. Los leucocitos presentan limitaciones en su capacidad migratoria o de extravasación lo que dificulta su acceso al microambiente tumoral y genera la menor proporción de infiltrado observado en los animales LSP1 KO, limitando de esta manera la eliminación de las células transformadas. Además, se afecta tanto la captura de antígenos tumorales por parte de las células dendríticas como su transporte al ganglio drenante a tumor, sitio donde se inicia la respuesta inmune específica. Así, sumado a los defectos en la traslocación antigénica previamente observados en nuestro grupo, las DCs presentan dificultades para activar e inducir la proliferación de linfocitos T CD8+ vírgenes, células fundamentales en la eliminación de tumores. Adicionalmente los linfocitos T CD8+ generados poseen una alteración en su funcionalidad, lo cual reduce su capacidad citotóxica y limita aún más el control del tumor. La falta de control del desarrollo tumoral podría ser responsable de la generación de un microambiente inflamatorio que se sostiene de manera crónica a nivel intratumoral, lo que favorecería a un mayor desbalance en la respuesta inmune, dificultando aún más el control del desarrollo tumoral. Por lo tanto, podemos concluir que el mayor tamaño tumoral observado en animales LSP1 KO es el resultado de múltiples factores que condicionan el desarrollo de la respuesta inmune antitumoral, con las células dendríticas como un claro factor central. LSP1 is an intracellular phosphoprotein expressed in leukocytes and endothelial cells from humans and mice. LSP1 polymorphisms or reduced expression are risk factors for some cancer types. We demonstrated that B16-OVA tumors implanted in LSP1 KO mice reach bigger sizes and grow faster than tumors inoculated in WT mice. Our results indicate that LSP1 lack modifies antitumor immune response. Leukocytes have a reduced extravasation ability, resulting in a diminished access to the tumor microenvironment and in a lower frequency of total leukocytes in tumors harvested from LSP1 KO mice. Dendritic cells antigen capture and draining lymph node migration is also influenced by LSP1 absence. In addition, LSP1 KO dendritic cells cannot activate and induce CD8+ T cells proliferation in an appropriate way. CD8+ T cells functionality is affected too. CD8+ lymphocytes have a reduced cytotoxic activity demonstrated by perforin, granzyme B and IFN-γ lower production, contributing to the deficient control of tumor growth. The uncontrolled tumor development observed in LSP1 KO mice contributes to a chronic proinflammatory microenvironment generation, favoring the unbalanced immune response and hindering the tumor growth control. Therefore, we conclude that the bigger tumor size observed in LSP1 KO mice is the result of multiple factors that influence the development of antitumor immune response, having dendritic cells a key role. 2024-09-30 Fil: Pascual, María Mercedes. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina.

Tesis (Doctor en Neurociencias) - - Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas, 2022. RESUMEN El envejecimiento es un proceso multifactorial determinado por factores genéticos y epigenéticos que lleva a un deterioro funcional general, incluyendo la disminución de las capacidades cognitivas. La restricción calórica (RC), es decir, la reducción de la ingesta de calorías sin ocasionar desnutrición es un modelo que ha logrado incrementar la vida media de numerosas especies. A pesar de la creciente evidencia, las bases moleculares de la eficacia de la RC aún no están completamente dilucidadas, así como tampoco se ha estudiado la influencia de este contexto metabólico en la expresión temporal, circadiana, de factores relacionados con la cognición, los sistemas de defensa antioxidante y la regulación epigenética. La Hipótesis de nuestro trabajo fue que el envejecimiento deteriora el desempeño cognitivo y modifica los ritmos circadianos de BDNF y TrkB en hipocampo al promover un estado oxidativo que altera negativamente el funcionamiento del reloj endógeno y/o la expresión de genes relacionados con la regulación epigenética. La RC revierte dichas modificaciones asociadas al envejecimiento mediante el restablecimiento de la organización temporal de las defensas antioxidantes y la regulación circadiana y epigenética. Nuestros Objetivos Específicos fueron: 1) Investigar los patrones temporales de modificaciones epigenéticas en las regiones promotoras de los genes de bdnf y trkB y su impacto potencial en la expresión de dichos factores involucrados en las funciones cognitivas, durante un ciclo de 24 h, en hipocampo, 2) Analizar la expresión circadiana de factores involucrados en el control de las modificaciones epigenéticas, como son las metiltransferasas de ADN (dnmt1, dnmt3a y dnmt3b); la acetiltransferasa de histonas y componente central del reloj circadiano, clock, y la desacetilasa de histonas, sirt1, en dicha área cerebral, 3) Evaluar en qué medida el envejecimiento afecta la expresión circadiana de los factores relacionados con el control epigenético previamente mencionados (dnmts, clock y sirt1) y su impacto final en la modulación epigenética de BDNF y TrkB en hipocampo, 4) Investigar las consecuencias de la restricción calórica sobre: el estado redox celular y la organización temporal de los sistemas de defensa antioxidante, la expresión de los factores cognitivos BDNF y TrkB, y los modificadores epigenéticos sirt1, dnmts y clock, en el hipocampo de ratas de 3 y 22 meses de edad y 5) Estudiar el efecto del envejecimiento y la RC sobre los procesos de memoria y aprendizaje [utilizando el laberinto de Barnes (BM) y la prueba de reconocimiento del objeto novedoso (RON)], evaluar la neofobia o el miedo a la novedad [utilizando el Test de las esquinas (TE)], y evaluar la reacción de los sujetos a un acontecimiento estresante/ansiedad [utilizando el Test del campo abierto (TCA)]. Para cumplir con estos objetivos se utilizaron ratas macho de la cepa Holtzman separadas en tres grupos experimentales: 1) grupo de ratas jóvenes adultas alimentadas ad-libitum (3 meses de edad, J-AL), 2) grupo de ratas viejas alimentadas ad-libitum (22 meses de edad, V-AL) y 3) grupo de ratas viejas en RC (se les administró una dieta de idéntica composición a la administrada a los grupos 1 y 2, pero reducida en un 40 % en calorías, durante los 3 meses previos a cumplirse los 22 meses de edad, V-RC). Quince días antes de cumplirse las edades correspondientes, los animales de los tres grupos experimentales se mantuvieron en condiciones de oscuridad constante. Se realizaron pruebas para evaluar la memoria y el aprendizaje (BM y RON) y el comportamiento (TE y TCA), evaluación de los niveles de ARNm por RT-PCR y proteína por Western Blot, actividad enzimática por métodos espectrofotométricos y pirosecuenciacion con bisulfito. Nuestros resultados evidenciaron la existencia de una organización 10 temporal altamente coordinada de Bmal1, Clock, Bdnf, TrkB, sirt1, pgc-1α, dnmts, nrf2, catalasa y glutatión peroxidasa en el hipocampo de los animales J-AL. Observamos que el envejecimiento provocó un déficit cognitivo en los animales V-AL y una pérdida de las oscilaciones circadianas de todas las variables mencionadas. Interesantemente, la RC restauró la ritmicidad circadiana en todos los casos y, además, logró una mejora en la performance cognitiva de los animales bajo esta intervención. En conjunto, nuestros resultados sugieren que la pérdida de la organización temporal de las moléculas relacionadas con las funciones cognitivas ya sea por la alteración en el funcionamiento del reloj endógeno, su regulación epigenética y/o el sistema de defensa antioxidante podría desempeñar un papel fundamental en el deterioro de la memoria y el aprendizaje en el envejecimiento. Intervenciones dietarias como la RC, podrían ser una alternativa no farmacológica para mantener la salud mental y cognitiva durante el envejecimiento, siendo el restablecimiento de la coordinación temporal una de las bases de la eficiencia de dicha intervención. 2024-07-31 Fil: Altamirano, Fernando Gabriel. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina.

Introduction. The use of Artemisia absinthium (wormwood) in labour is widely used in countries in the region; however, there is no enough scientific evidence of its efficacy and safety, which represents a high maternal-fetal risk. Objective. The purpose was to assess the contractile effect of Artemisia absinthium (wormwood) compared to oxytocin in utero isolated from rats. Methods. Eight Holtzman rats were separated into i) Experimental group: Artemisia dose 5, 10, 20, 30, 40, and 50 mg and ii) Control group: oxytocin 10-6 M. The uteruses were mounted in an isolated organ bath, and contractions were recorded for 5 minutes. Results. The frequency of contractions with wormwood 40 and 50 mg were comparable with oxytocin (p>0.05). Likewise, doses of 20 and 30 mg of Artemisia caused significantly longer-lasting contractions than oxytocin. The intensity was found to be comparable with oxytocin at doses of 20, 40, and 50 mg of Artemisia. Conclusion. The aqueous extract of Artemisia absinthium has a contractile effect similar to oxytocin and is dose-dependent in utero isolated from rats., Introducción. El uso de Artemisia absinthium (ajenjo) en el trabajo de parto es ampliamente empleado en países de la región; sin embargo, no hay evidencia científica suficiente de su eficacia y seguridad, lo que representa un alto riesgo maternofetal. Objetivo. El propósito fue evaluar el efecto contractil de la Artemisia absinthium (ajenjo) en comparación a la oxitocina en útero aislado de ratas. Métodos. Se separaron 8 ratas Holtzman en i) Grupo experimental: Artemisia dosis 5, 10, 20, 30, 40 y 50 mg y ii) Grupo control: oxitocina 10-6 M. Se montaron los úteros en un baño de órganos aislados y se registraron contracciones por 5 minutos. Resultados. La frecuencia de contracciones con ajenjo 40 y 50 mg fueron comparables con oxitocina (p>0,05). Asimismo, dosis de 20 y 30 mg de Artemisia provocaron contracciones significativamente más duraderas que la oxitocina. La intensidad resultó ser comparable con oxitocina con dosis de 20, 40 y 50 mg de Artemisia. Conclusión. El extracto acuoso de Artemisia absinthium presentó efecto contráctil similar a la oxitocina y dependiente de la dosis en útero aislado de ratas.

The aim if this study was to characterize strains of E. coli isolated from Rattus norvegicus belonging to a level 1 animal facility. Faecal samples were taken from 13 rats. Five colonies were randomly selected from the primary growth of the culture of each sampled individual. Biochemical tests were performed and the pathotype and phylogroup were established in the strains that were identified as E. coli by means of the PCR technique. In addition, tests for biofilm formation and antimicrobial susceptibility were performed. Results showed that 65% (26/40) of the isolated strains corresponded to E. coli and all clustered in phylogroup B2. Six of the E. coli strains were resistant to nitrofurantoin (23%), four were resistant to ampicillin (15%), and three strains were resistant to cefozolin (11%). None showed the formation of biofilms, nor the amplification of genes related to any pathotype. The results denote that E. coli belonging to the biota of laboratory rats presents resistance to antibiotics and the presence of the chuA and yjaA genes associated with the B2 phylogroup strains related to extraintestinal diseases., El objetivo del trabajo fue caracterizar cepas de E. coli aisladas de Rattus norvegicus pertenecientes a un bioterio de nivel 1. Se tomaron muestras de heces a 13 ratas. Se seleccionaron cinco colonias al azar del crecimiento primario del cultivo de cada individuo muestreado. Se realizaron pruebas bioquímicas y en las cepas que fueron identificadas como E. coli se estableció el patotipo y el filogrupo por medio de la técnica de PCR. Además, se realizaron pruebas para la formación de biopelículas y la susceptibilidad antimicrobiana. El 65% (26/40) de las cepas aisladas correspondieron a E. coli. El análisis mediante PCR mostró que todas se agruparon en el filogrupo B2. Seis de las cepas de E. coli presentaban resistencia a nitrofurantoina (23%), cuatro fueron resistentes a ampicilina (15%) y en tres cepas se observó resistencia a cefozolina (11%). Ninguna mostró la formación de biopelículas, ni la amplificación de genes relacionados a algún patotipo. Los resultados denotan que E. coli perteneciente a la biota de ratas de bioterio presenta resistencia a antibióticos y la presencia de los genes chuA y yjaA que incluyen a las cepas en el filogrupo B2 relacionado a enfermedades extraintestinales.

Tesis (Doctora en Neurociencias) - - Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas, 2022 Resumen: Capítulo 1 - Introducción General, apartado aclaratorio en el que se describe el marco conceptual de la investigación realizada y la motivación que llevo a la realización n de los estudios y experimentos que dan cuerpo a esta Tesis Doctoral. El objetivo de esta parte es facilitar a los evaluadores y lectores del manuscrito de la Tesis, una adecuada ubicación teórica. Seguidamente, realizamos una versión resumida de la investigación bibliográfica y de los conocimientos alcanzados hasta la fecha, acerca del sistema de reparación por escisión de bases del ADN (BER), su relación con el reloj biológico, como se ve afectado durante el envejecimiento y los efectos de la restricción calórica durante ese estado fisiológico, particularmente, en el cerebelo de rata. Esta recopilación bibliográfica, da una visión global de los tópicos a los que actualmente se está prestando una mayor atención en el campo, y que, se cree, deberían abrir otras líneas de investigación durante los próximos años. Capítulo 2 – Hipótesis y Objetivos, aquí se enuncian la hipótesis y los objetivos que nos propusimos en la presente Tesis Doctoral, poniendo de relieve los aspectos innovadores de esta investigación. Capítulo 3 – Materiales y métodos, se describe la metodología empleada en los experimentos realizados. Incluye una descripción detallada del modelo animal, materiales, técnicas empleadas, análisis estadístico, programas informa ticos usados. Capítulos 4- Evaluación fisiológica y comportamental del modelo experimental, describimos los resultados de las experiencias realizadas a fin de cumplimentar los objetivos propuestos y comprobar la hipótesis planteada. Capítulos 5- Análisis de los patrones temporales de los niveles de expresión del factor neurotrófico derivado del cerebro, Bdnf, y de su receptor TrkB, en cerebelo y su posible regulación circadiana y epigenética, describimos los resultados de las experiencias realizadas a fin de cumplimentar los objetivos propuestos y comprobar la hipótesis planteada. Capítulos 6- Análisis de la expresión circadiana de enzimas que participan en la reparación del ADN por escisión de base y estudio de su regulación temporal, en cerebelo de rata, describimos los resultados de las experiencias realizadas a fin de cumplimentar los objetivos propuestos y comprobar la hipo tesis planteada. Parte IV: Conclusión y Discusión, comprende el capítulo 7. Capítulo 7 – Conclusión. En la conclusión hacemos una recopilación general de todas aquellas observaciones y hallazgos generales, que obtuvimos a lo largo del desarrollo de este trabajo. Discusión. Aquí realizamos el análisis e interpretación de los resultados, confrontándolos con los de otros autores y discutimos su impacto y aporte al conocimiento. 2024-02-28 Fil: Castro Pascual, Ivanna Carla. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina. Fil: Anzulovich Miranda, Ana Cecilia. Universidad Nacional de San Luis, Argentina. Fil: Chiesa, Juan José. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Cronobiología; Argentina. Fil: Degano, Alicia Laura. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Química Biológica; Argentina. Fil: Degano, Alicia Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba; Argentina. Fil: Duero, Dante Gabriel. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Psicología; Argentina. Fil: Martín, Mauricio Gerardo. Universidades Nacional de Córdoba; Argentina. Fil: Martín, Mauricio Gerardo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra; Argentina.

Universidad Nacional Agraria La Molina. Escuela de Posgrado. Maestría en Nutrición El objetivo de la investigación fue evaluar la modificación del comportamiento alimentario en ratas Holtzman al consumir aceite de linaza. Adicionalmente, se realizaron observaciones preliminares de la variación de la CCK plasmática postprandial. Considerando que el efecto del aceite de coco sobre el consumo alimentario no está relacionado con la regulación de la saciedad mediada por la CCK, se lo empleó como tratamiento control isocalórico. Para la evaluación del comportamiento alimentario se utilizaron tres tratamientos (n=10), cada uno suplementado durante seis días con 2 g/kg PV de aceite de linaza, aceite de coco y agua respectivamente. Se realizó un ANOVA bajo un DBCA del consumo total diario (g /100g PV) y la prueba de Friedman del consumo (g /100g PV) para cinco períodos durante los 150 minutos iniciales de alimentación. Para la descripción de la concentración de CCK plasmática postprandial se estudiaron cuatro grupos: tres suplementados con 2 g/kg PV de aceite de linaza, aceite de coco y agua respectivamente y uno con ácido α-linolénico como control positivo. Luego se realizaron mediciones de la CCK plasmática a lo largo de los 240 minutos postprandiales. Solo el aceite de linaza tuvo un efecto sobre la saciedad a largo plazo al disminuir el consumo total diario respecto al control (p

Tesis (Doctora en Neurociencias) - - Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas, 2021 La evidencia epidemiológica sugiere una alta comorbilidad entre los eventos estresantes de la vida y trastornos de estrés post traumático con aquellos trastornos inducidos por el consumo de drogas de abuso (Boden et al., 2012; Clark et al., 2001; P. C. Ouimette et al., 1998; Sinha, 2001). Las experiencias estresantes juegan un papel clave a lo largo del ciclo de la adicción, incrementando el riesgo de desarrollar trastornos adictivos, incluyendo el mantenimiento de la conducta de consumo y la recaída, inclusive luego de largos periodos libres de droga, lo que sugiere que los circuitos cerebrales que regulan la recompensa y el refuerzo son un centro crítico para los efectos del estrés en el comportamiento (Boyson et al., 2012; Garcia-Keller et al., 2016; Miczek et al., 2008; Moal & Piazza, 1998). En modelos animales de adicción que utilizan roedores, algunos autores reportaron que la exposición a estrés promueve la capacidad de los psicoestimulantes para incrementar los niveles extracelulares de dopamina (DA) en núcleo accumbens (NA) (Kalivas & Stewart, 1991; Pierce & Kalivas, 1997) potenciando las propiedades estimulantes motoras y reforzantes de los psicoestimulantes, fenómeno conocido como sensibilización cruzada (Marinelli & Piazza, 2002; Pacchioni et al., 2007; Sorg & Kalivas, 1991). En este sentido, reportes de nuestro laboratorio en modelos animales de estrés y abuso de sustancias revelaron que las adaptaciones neurobiológicas duraderas originadas en las sinapsis glutamatérgicas en el NA, subyacen al desarrollo de sensibilización conductual (Esparza et al., 2012; Garcia-Keller et al., 2013), y además facilitan la adquisición de la conducta de autoadministración (AA) de cocaína, alcohol y heroína (Carter et al., 2020; Garcia-Keller et al., 2016; Garcia-Keller, Smiley, et al., 2019). Las alteraciones del comportamiento asociadas con la sensibilización conductual están mediadas por modificaciones estructurales duraderas en las neuronas del NA. La exposición prolongada a la cocaína aumenta la complejidad y la densidad dendrítica e induce cambios en la morfología de las neuronas medias espinosas GABAérgicas (MSNs en inglés “medium spiny neurons”) que conforman el NA (Russo et al., 2010), las cuales son responsables, en parte, del incremento en las propiedades reforzantes de la cocaína y por consiguiente promueven las respuestas conductuales inducidas por la droga (Dietz et al., 2012; H. Shen et al., 2009; Toda et al., 2006; Verma et al., 2019). 2023-11-30 Fil: Rigoni, Daiana. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina. Fil: Bollati, Flavia Andrea. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Farmacología; Argentina. Fil: Bollati, Flavia Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; Argentina. Fil: Reínes, Analía Gabriela. Universidad Nacional de Buenos Aires; Argentina. Fil: Reínes, Analía Gabriela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología Celular y Neurociencia Profesor Eduardo De Robertis; Argentina. Fil: Kunda, Patricia. Instituto Universitario Ciencias Biomédicas Córdoba. Centro de Investigación en Medicina Traslacional “Severo Amuchástegui” ; Argentina. Fil: Arias Grandío, Carlos. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Psicología; Argentina. Fil: Arias Grandío, Carlos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones Psicológicas; Argentina.

Tesis (Doctor en Neurociencias) - - Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas, 2021 RESUMEN La enfermedad de Parkinson (EP) es un trastorno neurodegenerativo causado por la degeneración de las neuronas dopaminérgicas nigroestriatales. Por su desconocida etiología, las opciones terapéuticas apuntan a restaurar la estimulación de los receptores para dopamina en el estriado. La administración de L-DOPA es la terapia más utilizada dado que tiene importantes beneficios sintomáticos en etapas tempranas de la enfermedad. Sin embargo, con grados avanzados de neurodegeneración, comienzan a aparecer complicaciones motoras adicionales como discinesias inducidas por L-DOPA y fluctuaciones motoras. En este contexto, la identificación de nuevos blancos terapéuticos constituye un campo activo de investigación. Ademas de la dopamina, la acetilcolina es otro importante neuromodulador de la actividad estriatal, cuya disponibilidad se ve afectada por la degeneración dopaminérgica y el tratamiento con L-DOPA. De hecho, la administración de anticolinérgicos (antagonistas de receptores muscarínicos), era la opción terapéutica preferida antes del descubrimiento de la L-DOPA, aunque su utilidad clínica se ve limitada por su acción sobre receptores colinérgicos extraestriatales que resulta en efectos secundarios adversos. Así, las nuevas terapias antiparkinsonianas basadas en sitios colinérgicos deberían dirigirse específicamente al estriado. La principal fuente de acetilcolina estriatal son las interneuronas colinérgicas estriatales (ICE), que exhiben actividad tónica intrínseca. Trabajos previos del laboratorio reportaron que las ICE se encuentran hiperexcitables en un modelo de roedor de la EP y estudios recientes encontraron que controlar selectivamente su actividad tiene efectos antiparkinsonianos y antidiscinéticos. Sin embargo, los mecanismos que subyacen a la actividad aberrante de las ICE en etapas avanzadas de la EP luego de un tratamiento con L-DOPA continúan desconocidos. En esta tesis se utilizaron herramientas de electrofisiología in vitro para caracterizar los cambios en excitabilidad y actividad espontánea intrínseca de las ICE en ratones con parkinsonismo experimental tratados con L-DOPA, con el objetivo último de identificar blancos moleculares para modular su actividad. Se encontró que las ICE muestran aumentos de excitabilidad y actividad espontánea con patrones oscilatorios de tipo salva-pausa luego del tratamiento crónico con L-DOPA que son causados por cambios en la señalización del receptor para dopamina D5 que persisten durante el período “off” L-DOPA (cuando los niveles de L-DOPA en plasma y de dopamina estriatal son bajos). Las oscilaciones son mediadas por un aumento de la corriente de potasio inward-rectifier (Kir) y una disminución de una corriente de leak, que resulta en la aparición de una zona de pendiente negativa en la curva corriente-voltaje (I-V) que desestabiliza el potencial de membrana y causa la 4 oscilación. Por otro lado, se describió el rol de los canales de potasio delayed-rectifier Kv7 en la excitabilidad y actividad tónica de las ICE, dado que estos canales son un blanco atractivo para controlar la actividad de las ICE por ser modulados con farmacología aprobada clínicamente. Los resultados de esta tesis permiten entender mejor los efectos de la señalización colinérgica estriatal en la EP luego del tratamiento crónico con L-DOPA y sugieren que terapias dirigidas a reestablecer su actividad normal podrían tener importantes beneficios terapéuticos. Así, los receptores D5, los canales Kir y canales de leak aparecen como potenciales blancos terapéuticos para el tratamiento de la EP, mientras que los canales Kv7 surgen como blancos moleculares alternativos para controlar la actividad de las ICE. 2023-07-31 Fil: Paz, Rodrigo Manuel. Universidad Nacional de Buenos Aires. Facultad de Medicina; Argentina. Fil: Paz, Rodrigo Manuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Fisiología y Biofísica Bernardo Houssay; Argentina. Fil: Murer, Gustavo. Universidad Nacional de Buenos Aires; Argentina. Fil: Murer, Gustavo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Fisiología y Biofísica Bernardo Houssay; Argentina. Fil: Anastasia González, Agustín. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra; Argentina. Fil: Rela, Lorena. Universidad Nacional de Buenos Aires; Argentina. Fil: Rela, Lorena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Fisiología y Biofísica Bernardo Hoyssay; Argentina.

Tesis (Doctora en Neurociencias) - - Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas, 2021 Resumen La conducta agresiva es un comportamiento abierto y complejo con la intención de infligir daño y/o realizarlo, o la amenaza de daño a otro individuo. Surge de la interacción social entre los miembros de una misma especie o entre diferentes especies y sus expresiones son diversas, de acuerdo a las necesidades vitales de los individuos. Para los roedores, la estructura con mayor relevancia al momento de establecer las interacciones sociales es el bulbo olfatorio (BO), una estructura que, curiosamente, ha sido dejada de lado al momento de estudiar la conducta agresiva. Describir los circuitos neuronales específicos y los procesos neurobiológicos responsables de generar las respuestas agresivas, no es tarea fácil. El sistema de neurotransmisión clásicamente asociado a la agresión es el serotonérgico y da origen a la hipótesis de deficiencia serotonérgica de la agresión. Este sistema inerva gran parte del encéfalo. La serotonina (5-HT) se produce mayoritariamente a nivel de los núcleos del rafe. Otro de los sistemas implicados en la conducta agresiva, es el sistema GABAérgico. A su vez, los esteroides neuroactivos modulan una amplia variedad de funciones fisiológicas y comportamentales. Allopregnenolona (Allo) se encuentra dentro de los esteroides neuroactivos más estudiados en la actualidad. Éste es un metabolito activo de progesterona que actúa como modulador alostérico del receptor GABAA e influye en una amplia gama de fenómenos cognitivos, en respuesta al estrés y diferentes variantes comportamentales. En este trabajo de tesis doctoral, se evaluaron los efectos de Allo i.c.v. en un modelo de ratas macho con rasgos de agresión territorial ofensiva; inducida por la depleción del sistema serotonérgico, por para-Clorofenilalanina (pCPA) i.p.. Para establecer la validez del modelo, en primera instancia, se ordenaron de menor a mayor grado cualitativo, las conductas agresivas presentes en la especie y cepa y se evaluaron en una prueba residente-intruso (RI), tres y seis días posteriores a la administración i.p. de pCPA. Estos resultados permitieron establecer que seis días pos-pCPA, presentan el mayor grado de conducta agresiva, por lo que se lo seleccionó para la ejecución de la totalidad de las evaluaciones comportamentales; pruebas neuroquímicas y genéticas desarrolladas en el bulto olfatorio. Teniendo en cuenta la importancia del BO en las conductas de interacción social en ratas y la inervación serotonérgica desde el rafe hacia dicha estructura, se evaluó tanto la concentración de 5-HT y su principal metabolito 5-HIAA, como la expresión de ARNm de la enzima de paso de síntesis cerebral de 5-HT, TPH2. Con el objetivo de evaluar el rol modulador de Allo sobre esta conducta, se procedió al desarrollo de un protocolo quirúrgico estereotáxico para implantar una cánula fija en el tercer ventrículo cerebral, seis días previos a la administración de pCPA. Con este protocolo se evaluaron las conductas agresivas de los animales, seis días pos-pCPA en una prueba RI, y 30 min previos a la prueba se administró Allo (6 μM) i.c.v. Posteriormente, se evaluaron en el BO las concentraciones de 5- HT y 5-HIAA. Como Allo modula alostéricamente al receptor GABAA y el BO posee una rica inervación GABAérgica, se evaluó las expresión de ARNm de las subunidades GABAAα1, GABAAδ, en paralelo con TPH2. Se evaluó también la participación de los sistemas de neurotransmisión serotonérgicos y GABAérgicos. Para ello, se utilizó el protocolo de intervención quirúrgica para la implantación de una cánula en el tercer ventrículo cerebral. Se administraron un antagonista GABAA y un agonista serotonérgico en (el mismo protocolo de administración pCPA) realizando evaluaciones de la conducta agresiva en el paradigma de residente intruso. Al analizar los resultados se observaron diferencias significativas en las conductas agresivas posteriores a la administración i.p. de pCPA y, a partir de las conductas cualitativamente más agresivas, se estableció el día para los estudios neuroquímicos y genéticos. Se observó disminución de la concentración de 5-HT y aumento del catabolismo serotonérgico, sin modificación de la concentración del metabolito 5-HIAA, simultáneamente a un aumento de la expresión del ARNm de TPH2 en el BO. Por otra parte, la administración de Allo i.c.v. produjo una disminución de la conducta agresiva en los animales con depleción, junto con un aumento de la concentración de 5-HT, 5-HIAA y del catabolismo serotonérgico. Además, disminuyó la expresión del ARNm de GABAAα1, sin modificación de la expresión del ARNm de GABAAδ en el BO. El antagonismo del sistema GABAérgico y agonismo serotonérgico nos permitió observar un aumento de la conducta agresiva en su expresión cuantitativa absoluta, pero una disminución de las conductas cualitativamente más agresivas. Los resultados obtenidos nos ponen en evidencia la importancia adaptativa de la conducta agresiva en el contexto de territorialidad y nos permiten concluir que Allo posee un efecto modulatorio positivo sobre dicha conducta. Los mecanismos neurofisiológicos rápidos involucrados en esta conducta guardan una estrecha relación con el BO, la estructura de mayor importancia en el ingreso sensorial, reconocimiento del contexto y condición natural de individuo gregario. Finalmente, nuestros resultados evidencian fuertemente, que Allo podría ser beneficiosa para el tratamiento de diversas enfermedades psiquiátricas que poseen en sus signos más relevantes la agresión desadaptativa o patológica. 2023-07-31 Fil: Mulle Bernedo, María Belén. Universidad Nacional de Cuyo. Instituto de Investigaciones Biomédicas (INBIOMED); Argentina. Fil: Mulle Bernedo, María Belén. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina y Biología Experimental de Cuyo; Argentina. Fil: Cabrera, Ricardo Jorge. Universidad Nacional de Cuyo; Argentina. Fil: Cabrera, Ricardo Jorge. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Fil: Bregonzio, Claudia. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Farmacología; Argentina. Fil: Bregonzio, Claudia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; Argentina.

Tesis (Doctora en Neurociencias) - - Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas, 2021 RESUMEN La enfermedad de Parkinson (EP) es un trastorno neurológico degenerativo y progresivo secundario a una degeneración de las neuronas dopaminérgicas de la vía nigroestriada. En las últimas décadas se ha convertido en uno de los desórdenes neurodegenerativos más comunes. Paralelamente al aumento de la expectativa de vida, la EP se ha incrementado significativamente, por lo que se prevé que se transforme en un serio problema de salud pública a nivel mundial. La degeneración progresiva de neuronas dopaminérgicas en la pars compacta de la sustancia nigra (SN) y el déficit dopaminérgico en el cuerpo estriado (CPu), genera modificaciones funcionales de los ganglios basales con las consecuentes disfunciones motoras características en el ser humano (temblores, rigidez, bradicinesia, trastornos en la marcha). Aunque actualmente se conoce bastante acerca de los síntomas, poco se sabe sobre su exacta etiología. El diagnóstico suele ser tardío, cuando más del 80% de las neuronas dopaminérgicas se han degenerado. A pesar de los avances científicos, no existe aún un tratamiento efectivo para frenar su progresión y la búsqueda de marcadores biológicos hasta el momento ha sido poco fructífera. Muchos grupos de investigación se han abocado a identificar marcadores tempranos que permitan un abordaje más efectivo en el estudio de esta enfermedad; por lo que se proponen múltiples teorías que podrían explicar el fenómeno neurodegenerativo. Particularmente, el modelo de hemiparkinsonismo (HP) de ratas inyectadas con la neurotoxina 6-OHDA (6-hidroxidopamina) en CPu, ha demostrado ser una excelente herramienta para estudiar los efectos de los neuroesteroides y otras moléculas sobre los procesos fisiopatológicos involucrados en esta enfermedad. El cambio en la vista tradicional de que la función del cerebro está modulada por hormonas de origen periférico surgió mediante el hallazgo de que ciertos esteroides (incluidos los sexuales) se producen de novo en el Sistema Nervioso Central (SNC), por lo que han sido llamados “Neuroesteroides” y los secretados por glándulas periféricas “Esteroides Neuroactivos”. Esto ha permitido identificar propiedades benéficas de algunas de estas moléculas en el SNC tanto en humanos como en modelos animales de la enfermedad, tales como protección frente a noxas, potenciación de capacidades cognitivas y neurogénesis. Sumado a esto, se ha descripto que estas moléculas se unen a sitios específicos de la membrana en células nerviosas en regiones del SNC que regulan funciones diferentes a aquellas implicadas en las funciones reproductivas. En relación a que esta patología afecta mayormente a hombres que a mujeres; se cree que los esteroides sexuales femeninos podrían proteger a las mujeres de la EP. Existen numerosos reportes que demuestran la influencia de los esteroides sexuales femeninos en los mecanismos neuroprotectores en la EP. Trabajos previos realizados en nuestro laboratorio indican que el tratamiento subcutáneo con P4 en un modelo de ratas macho hemiparkisnonianas (HP), mejora la disfunción motora e induce efectos neuromoduladores sobre los sistemas de neurotransmisión estriatal. También, hemos demostrado que P4 y Allo modulan la actividad del sistema dopaminérgico nigroestriatal y que esta modulación es diferencial dependiendo de la dosis de esteroide administrada o el estado del ciclo reproductivo de la rata. Otros estudios experimentales demuestran la existencia de una amplia gama de acciones del 17β-estradiol (E2) sobre el SNC de los mamíferos (que exceden a su clásica función reguladora sobre el eje hipotálamo-hiposario-gonadal), tales como: promotoras de la supervivencia celular, moduladoras la sinaptogénesis y de la arborización axonal y dendrítica y reguladoras de la expresión de receptores y segundos mensajeros. Por lo tanto, por tener capacidades tanto tróficas como moduladoras dentro del SNC, se cree que E2 tiene funciones cruciales en la protección del cerebro lesionado y participa en la reparación/ limitación de daños diseñados para reducir la muerte celular. Basados en la hipótesis de que los esteroides neuroactivos y los neuroesteroides modulan la funcionalidad de sistemas neurogliales íntimamente relacionados con patologías neurodegenerativas; propusimos estudiar, utilizando un modelo experimental de ratas macho adutas HP inducido por 6-OHDA, la participación del esteroide neuroactivo 17β-estradiol (E2) como un factor neuroprotector y/o neurorregenerador sobre las redes neuronales asociadas al control de la funcionalidad dopaminérgica del sistema nigroestriatal. Dentro del amplio espectro de acción conocido del E2, nuestra propuesta se enfocó en el estudio de la actividad dopaminérgica en la vía dopaminérgica nigroestriatal, asociado con el comportamiento y la actividad motora. En particular, para la evaluación de la natación forzada, de la acinesia del miembro anterior y para la determinación de neuronas reactivas a tirosina hidroxilasa (TH+) en sustancia nigra, desarrollamos sistemas informáticos en relación a la adquisición, el cálculo y el análisis datos. Así detectamos de manera precoz y con alta sensibilidad las modificaciones motoras, locomotoras e inmunohistoquímicas; eliminando la subjetividad y la cuantificación directa o manual de las observaciones. Las técnicas automatizadas están desarrolladas con software libre y pueden ser compartidas con los usuarios a través de un sistema de actualización integrado. Con una batería de evaluaciones comportamentales a lo largo de ocho semanas, observamos un deterioro de la actividad locomotora y exploratoria en los animales HP. También pudimos examinar el efecto del tratamiento en la disminución de los signos neurodegenerativos y en la restauración del movimiento, a corto y largo plazo. Los resultados revelaron que los signos motores de neurodegeneración propios de la EP pueden estar influenciados por la administración del 17β-estradiol; sugiriendo un rol neuroprotector del esteroide neuroactivo en este modelo in vivo de la EP. Gran cantidad de estudios relacionan los resultados de los test comportamentales y la pérdida de neuronas TH+ y de dopamina (DA) en la vía dopaminérgica nigroestriatal. Investigamos los efectos del 17β-estradiol a nivel celular y encontramos que permite activar mecanismos compensatorios sobre la síntesis y liberación de DA en SN pars compacta (SNpc) y CPu en animales lesionados.Vimos además que se produce un cambio en la dinámica de funcionalidad dopaminérgica donde los valores de la actividad metabólica tienden a restaurarse a niveles fisiológicos. Estos resultados evidencian que las deficiencias comportamentales observadas fueron consistentes y sugieren que el 17β-estradiol está actuando a nivel de las neuronas en relación a la síntesis de DA, mejorando las anormalidades que se presentan en los animales lesionados. En relación a los astocitos, pudimos observar que, tanto la neurotoxina como la lesión mecánica aumentan la reactividad de la astroglia. Asimismo, el tratamiento con 17β-estradiol disminuye el número de astrocitos reactivos en los animales lesionados. Además, aminora el cambio en la astroglia reactiva en relación al daño mecánico, disminuyendo el tamaño de la cicatriz glial y la proliferación de los astrocitos. Pudimos también establecer una relación entre las neuronas y astrocitos en la SNpc que permite analizar variables como el comportamiento de la lesión, la respuesta al daño y la evolución de cada proceso para cada grupo en particular. En general, la evidencia disponible apoya la opinión de que los astrocitos son objetivos importantes para los estrógenos circulantes, lo que podría contribuir a las diferencias de sexo en la EP. En particular, observamos que el 17β-estradiol participa en la regulación de activación de las vías dopaminérgicas a través de los receptores D1 y D2 en cultivos de astrocitos; por lo que (al modular la expresión de los receptores) está influyendo en la síntesis, liberación y metabolismo de la DA. Los resultados sugieren que las células responden a fenómenos plásticos compensatorios que actúan bidireccionalmente por interacciones neurona-glía; y que el tratamiento con 17β-estradiol está promoviendo la supervivencia celular, la recuperación y la reparación. Aunque las implicaciones funcionales requieren mayor estudio, los datos sugieren que en los machos los astrocitos pueden generar una mayor respuesta neuroinflamatoria potencialmente dañina, mientras que en las hembras los astrocitos contribuyen a compensar y promover la supervivencia. Sumado a esto, nuestros resultados muestran que el tratamiento participa en la modulación de factores pro y anti inflamatorios en cultivos de microglia. Observamos que las células de la microglia de los animales macho que no habían recibido tratamiento con 17β-estradiol aumentaron la expresión de marcadores pro inflamatorios y disminuyeron significativamente la expresión de factores antiinflamatorios. Sugiriendo que el tratamiento es un poderoso regulador de la actividad de las células microgliales. En conjunto, todas estas aproximaciones nos brindaron una amplia variedad de resultados los cuales nos permitieron clarificar el entendimiento sobre la función neuroprotectora del 17β-estradiol en las las células neurogliales de la vía dopaminérgica nigroestriatal en estados fisiológicos y patológicos. Los datos presentes muestran la potencialidad terapéutica del tratamiento con 17β-estradiol tras la lesión con 6-OHDA; en el que este esteroide neuroactivo podría desempeñar un papel importante en el restablecimiento de las propiedades fisiológicas y morfológicas de las neuronas dopaminérgicas y células de la glía lesionadas, así como mejorar las sinapsis y la liberación a través de los receptores específicos de DA. Por lo expuesto, se estima que el tratamiento con 17β-estradiol podría ser una terapia beneficiosa para patologías donde se vea afectada la síntesis, el transporte y la liberación de dopamina en el SNC. 2023-07-31 Fil: Bonaccorso Marinelli, María Paula. Universidad Nacional de Cuyo; Argentina. Fil: Bonaccorso Marinelli, María Paula. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina. Fil: Cabrera, Ricardo Jorge. Universidad Nacional de Cuyo; Argentina. Fil: Cabrera, Ricardo Jorge. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Fil: Baiardi, Gustavo. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Exactas, Físicas y Naturales. Instituto de Investigaciones Biológicas y Tecnológicas; Argentina. Fil: Baiardi, Gustavo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Fil: De Paul, Ana Lucía. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud; Argentina. Fil: De Paul, Ana Lucía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Fil: Mascó, Daniel Hugo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones Biológicas y Tecnológicas; Argentina.

En los años como docente en la cátedra “Introducción a la Ciencia de los Animales de Laboratorio” en varias ocasiones escuché por parte de los estudiantes frases como “yo no voy a investigar con animales”, “no estoy de acuerdo con la investigación animal porque los hace sufrir”. Sumado a esto la Facultad de Ciencias Veterinarias de la Universidad Nacional de La Plata (FCV-UNLP) padeció dos atentados por parte de activistas de la agrupación “ALF” (animal liberation front- frente de liberación animal) en el bioterio. Como consecuencia de estas observaciones y hechos se realizó una encuesta por mail a los alumnos de la carrera de veterinaria sobre un tema de debate actual: “La experimentación animal”. Algunos datos relevantes para la presente propuesta fueron que el 30% de los 67 alumnos encuestados no está de acuerdo con la investigación con animales, el 37% ha tenido la posibilidad de participar en proyectos de investigación que involucran animales, el 90% entiende que los animales sufren dolor y miedo en un proceso experimental y el 92% responde que ese dolor y miedo puede verse disminuido con la aplicación de procedimientos de bienestar animal. Entendido al bienestar como el estado del animal en sus intentos de lidiar con su ambiente (Broom, 1986 en 2014), donde posea cubiertas sus necesidades específicas y cuente con salud física y mental. Por lo expuesto previamente, el objetivo general de este trabajo integrador es incorporar una nueva unidad curricular de bienestar animal a la materia ‘Introducción a la Ciencia de los Animales de Laboratorio’ de la carrera de Ciencias Veterinarias de la UNLP para promover el debate y, a través de este, la resignificación del conocimiento acerca de la experimentación con animales. Esta incorporación innovadora tendrá como objetivos particulares diagramar e introducir la presentación de la unidad temática en tres encuentros, diseñar y moderar una jornada interdisciplinaria de debate sobre el uso de animales en procedimientos experimentales y a partir de actividades prácticas promover instancias de reflexión sobre la experimentación animal. Para cumplir estos objetivos se diagramaron los siguientes momentos de la unidad temática: Encuentro I: Introducción al bienestar animal. Encuentro II: La perspectiva del bienestar animal en la experimentación con animales. Encuentro III: Aplicación del bienestar en la experimentación con animales. Se espera que, mediante la implementación de esta nueva unidad en el programa de la materia, se obtenga una mirada amplia, profunda y reflexiva sobre la capacidad que tienen los animales de sentir, de aprender y de vivenciar diferentes estados emocionales., Facultad de Ciencias Veterinarias

"La prolactina es una de las hormonas que presenta variaciones en su concentración sérica en ambos periodos reproductivos. Esta hormona actúa en múltiples regiones del sistema nervioso central, incluyendo las áreas relacionadas con las crisis de ausencia como el tálamo y la corteza cerebral. En diversos modelos animales se ha demostrado que la prolactina actúa como un factor neuroprotector ante lesiones cerebrales y además es capaz de disminuir la presentación e intensidad de ciertos tipos de epilepsia de presentación motora. La rata taiep es un modelo animal de tubulinopatías que presenta una leucodistrofia caracterizada por hipomielinización inicial seguida de una desmielinización progresiva. Se ha mostrado que este animal exhibe una conducta similar al de las crisis de ausencia y el patrón característico de descargas espiga-onda en el EEG, siendo un modelo animal genéticamente determinado de crisis de ausencia. El objetivo de este estudio consistió en determinar el efecto de la administración central de prolactina sobre las descargas espiga-onda en las ratas taiep hembras adultas."

La obra abarca los conceptos generales sobre la cría, el cuidado, manejo y uso de los animales de experimentación, desde sus antecedentes históricos hasta las especies que más se utilizan en la actualidad. Hace hincapié en los aspectos éticos y morales relacionados con el bienestar de los animales y en la observancia de los estándares internacionales., Facultad de Ciencias Veterinarias

Los procedimientos experimentales y de producción de animales de laboratorio requieren de personal responsable e idóneo en el manejo de las especies utilizadas. El uso de técnicas anestésicas seguras y efectivas puede tener una gran influencia sobre el bienestar de los animales del laboratorio. La mejora de estas técnicas debería considerarse un aspecto esencial del perfeccionamiento de los métodos experimentales recomendados por Russell y Burch (Flecknell, 1998). En esta línea resulta esencial el reconocimiento del dolor del animal de experimentación, que en casos de presentarse deberá ser abolido, reducido al mínimo (Flecknell, 1998) incluso optar por el sacrificio de los animales no exista tratamiento adecuado para evitar el sufrimiento. En el presente capítulo, revisaremos los principales métodos de anestesia, analgesia y eutanasia en animales de experimentación, Estos métodos son objeto de estudio y evaluación constante, y en ese sentido van evolucionando a través de los años y presentan alternativas para adecuarse a las particularidades cada especie y del protocolo experimental., Facultad de Ciencias Veterinarias

Este trabajo se focaliza en la evaluación del proceso de gestión de procedimientos experimentales/educativos/de servicio que involucran el uso de animales que los agentes de INTA deben presentar ante el Comité Institucional para el Cuidado y Uso de Animales de Experimentación (CICUAE). El objetivo de esta evaluación es comparar una propuesta alternativa con la actualmente en vigencia y definir si se logra una mejora en su dinámica y se facilita el seguimiento de la documentación. Dentro de INTA existen ocho CICUAEs distribuidos regionalmente. Este trabajo toma como protagonista al CICUAE INTA CNIA. CICVYA Fil: Berinstein, Analia. . Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas; Argentina Fil: Montanari, Ana Luisa . Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas; Argentina Fil: Calamante, Gabriela. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Biotecnología; Argentina

La Ciencia de los Animales de Laboratorio es una especialidad dentro de la Medicina Veterinaria que se enfoca en desarrollar modelos experimentales para mejorar la calidad de vida tanto del ser humano como de otros animales. En este sentido, la forma en que alojamos a dichos animales corresponde a un aspecto fundamental de este proceso. Esto se debe a que las perturbaciones ambientales pueden alterar la fisiología de los individuos y, como consecuencia, modificar las variables experimentales (Balcombe y col., 2004). Sin embargo, no solo es importante considerar la calidad de la experimentación biomédica sino también las obligaciones morales que poseemos hacia aquellos organismos que están bajo nuestro cuidado. Es por esta razón que el Bienestar Animal se asocia ineludiblemente con la Ciencia de los Animales de Laboratorio, como forma de evaluar científicamente cómo los procedimientos experimentales y las condiciones de alojamiento impactan sobre la calidad de vida de los animales (Baumans, 2005). Facultad de Ciencias Veterinarias