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A técnica de cultura de tecidos de plantas pode ser uma ferramenta eficaz de propagação da pitaieira, visto que, por meio dela as mudas são multiplicadas em grande quantidade, produzindo clones idênticas à planta mãe, livres de patógenos e em curto período de tempo. O trabalho foi realizado com objetivo avaliar os efeitos do selênio na forma de selenato de sódio (Na2SeO4) via meio de cultura na germinação, enraizamento, crescimento dos cladódios e no acúmulo de nutrientes em pitaias (Hylocereus costaricensis) cultivadas in vitro. Foram utilizadas sementes pitais (Hylocereus costaricensis) inoculadas em meio MS adicionado de selenato de sódio (Na2SeO4) nas concentrações 0,0; 28,0; 34,0; 40,0; 46,0 e 52,0 μmol L-1, com 25 repetições. Além disso, foram adicionados 10 mg L-1 de BAP e 0,1 mg L-1 de ANA nos tratamentos com selênio. O experimento foi disposto em delineamento inteiramente casualizado e os tubos foram mantidos em sala de crescimento durante 60 dias. Os parâmetros avaliados foram: taxa de germinações, comprimento da plântula, número de cladódios, número de raízes e comprimento dos cladódios comprimento (cm). A quantificação dos elementos foi realizada com plasma acoplado indutivamente (ICPMS). Os dados foram avaliados através de curvas de regressão polinomial. Todas as analises estatísticas foram realizadas no software R Studio. A inclusão de selenato de sódio ao meio de cultura proporcionou melhora na taxa de germinação, número de cladódios, comprimento de cladódios e comprimento das plântulas de H. costaricensis. Contudo, com exceção do número de cladódios, todos os demais parâmetros filotécnicos avaliados aparentaram melhor desenvolvimento com centrações estimadas menores que a 28 µmol L-1 (menor concentração utilizada), indicando que em doses menores as plantas teriam um melhor desenvolvimento. Além disso, a disponibilidade de selênio no meio de cultura foi proporcional a sua absorção em plântulas de H. costaricensis e a adição de Se no meio MS afetou a absorção de nutrientes pela H. costaricensis.

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Métodos in vitro de produção de plantas haplóides podem revolucionar as pesquisas no melhoramento de leguminosas forrageiras. Avanços nas metodologias de cultivo de microesporos isolados e obtenção de androgênese devem, eventualmente, ser utilizados para produção de haplóides. Cultura de anteras e óvulos são alternativas a serem melhor estudadas dentro desta categoria de plantas.

Visando reduzir os custos de produção e aumentar a eficiência do sistema de micropropagação, este trabalho objetivou avaliar o enraizamento e a aclimatização do porta--enxerto de macieira M.9 em condições ex vitro.

O objetivo do presente trabalho foi avaliar o efeito de concentrações de ácido indolbutírico (AIB) no enraizamento in vitro de brotações juvenis de Corymbia citriodora, e formas de vedação na aclimatização de plântulas micropropagadas. Para o enraizamento, foram colocadas brotações em meio de cultura com quatro concentrações de AIB (0; 1,0; 2,0 e 4,0 mg L-1). Na pré-aclimatização, plântulas germinadas in vitro e isentas de contaminação foram transplantadas para copos de polietileno contendo substrato. Os copos foram embalados em sacos plásticos por 10 dias e mantidos em sala de cultura. Posteriormente, foram aplicados três tratamentos: ausência de cobertura; saco plástico intacto e saco plástico perfurado. Na aclimatização, manteve-se o histórico dos tratamentos da pré-aclimatização. As plântulas foram transplantadas para tubetes contendo substrato e mantidas inicialmente em casa de vegetação e depois em casa de sombra. Os resultados demonstram que as concentrações de 1,0; 2,0 e 4,0 mg L-1 de AIB foram eficientes no enraizamento de explantes juvenis de C. citriodora, sendo que a maior concentração utilizada proporcionou o maior número médio de raízes. Recomenda-se a ausência de cobertura na pré-aclimatização para maior taxa de sobrevivência, altura e massa seca das mudas na etapa de aclimatização.

The objective of this study was to evaluate the effect of indolbutyric acid (IBA) concentrations on in vitro rooting of Corymbia citriodora juvenile shoots, and sealing forms on the acclimatization of micropropagated seedlings. For rooting, shoots were placed in a culture medium with four concentrations of IBA (0, 1.0, 2.0, and 4.0 mg L-1). In pre-acclimatization, seedlings germinated in vitro and without contamination were transplanted into polyethylene cups containing substrate. The cups were packed in plastic bags for 10 days and kept in a culture room. Subsequently, three treatments were applied: no coverage; intact plastic bag, and perforated plastic bag. In acclimatization, the history of pre-acclimatization treatments was maintained. The seedlings were transplanted into tubes containing substrate and kept initially in a greenhouse and then in a shade house. The results demonstrate that concentrations of 1.0; 2.0 and 4.0 mg L-1 of IBA were efficient in the rooting of juvenile explants of C. citriodora, and the highest concentration used provided the highest average number of roots. The absence of cover in pre-acclimatization is recommended for greater survival rate, height, and dry mass of seedlings in the acclimatization stage. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

A descontaminação dos explantes é requisito para a eficiência da micropropagação. O trabalho teve como objetivo avaliar o modo de utilização do antibiótico sulfato de estreptomicina (SE) no controle de bactérias endógenas em segmentos nodais micropropagados de Eugenia involucrata. Os tratamentos foram: T1 (explantes sem contaminação prévia); T2 (explantes com contaminação prévia); T3 (explantes sem contaminação e imersos em solução de SE a 100 mg L-1 durante 5 min); T4 (explantes com contaminação e imersos em solução de SE a 100 mg L-1 durante 5 min); T5 (explantes sem contaminação e inoculados em meio contendo 100 mg L-1 de SE); e T6 (explantes com contaminação e inoculados em meio contendo 100 mg L-1 de SE). Decorridos 30 dias de cultivo in vitro não houve efeito significativo sobre as variáveis sobrevivência (média de 94,44%) e contaminação fúngica (média 6,94%). As maiores contaminações bacterianas foram observadas em T3 e T4 (100%), já em T5 (16,67%) observou-se a menor média. Ocorreu maior número de folhas em T5 (3,83), que diferiu estatisticamente de T2 e T4, os quais apresentaram a menor média. A imersão não controla a proliferação de bactérias. A inoculação na ausência de contaminação prévia controla a proliferação, mas não reduz as bactérias quando há contaminação. O desenvolvimento das folhas é prejudicado pela presença de bactérias.

Couroupita guianensis Aubl. is an Amazonian forest species with important medicinal and ornamental value. This study evaluated the effect of different culture media and light spectra on the in vitro germination and development of the zygotic embryos of C. guianensis. The culture media, MS and WPM, were evaluated without the addition of plant growth regulators and were associated with four LED light spectra: white (CW), 70% red + 30% blue (R2B), 100% red (R), and 100% blue (B). One hundred percent of the seeds successfully underwent in vitro germination, and the culture media did not interfere with embryo development. In addition to this, the different light spectra induced in vitro morphogenesis and R2B treatment significantly promoted the production of secondary roots. This effect may aid in the rooting and acclimatization of seedlings of this species. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

The objective of this work was the vegetative rescue of Cedrela odorata L. adult trees from forest areas by micropropagation using shoot regeneration from axillary buds in vitro. Nodal segments (0.5 and 1.0 cm) of shoots formed from cuttings taken from canopy sprouts were used. The explants were successfully established in vitro on MS medium supplemented with 2.22 µM BAP, 0.49 µM AIB, 0.28 µM GA3 and PPM (0 and 8.6 µM). Shoot multiplication on MS with combinations of GA3 (0.28 and 1.12 µM) and BAP (2.2, 3.3, 4.4, 6.6, and 8.8 µM) and shoot rooting on medium with 4.9 µM AIB, 5.7 µM AIA or 5.37 µM ANA were evaluated. The MS medium supplemented with 0.28 µM GA3 and 8.8 µM BAP generated 4.16 shoots per explant. The best rooting induction was observed on medium containing 4.9 µM IBA, resulting in 60% of shoot rooting. The plantlets rooted were acclimatized and showed normal development with 97% survival rate. The use of canopy sprouts as explants is feasible in the rescue of C. odorata and the combination of BAP and GA3 favors in vitro multiplication. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

O objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito do sorbitol e do período de cultivo in vitro sobre o crescimento mínimo e a subsequente retomada do crescimento de brotações de Luehea divaricata. Foram realizados dois ensaios, um de crescimento mínimo e o outro de retomada de crescimento. No crescimento mínimo, observou-se redução nas médias de sobrevivência, estabelecimento, número de folhas e de raízes primárias e secundárias na presença de sorbitol. Quando se considerou o período, observou-se redução aos 30 dias seguida de aumento e estabilização nas médias de raízes primárias e secundárias e do número de folhas e de brotos. Na retomada de crescimento, a presença de sorbitol promoveu uma redução significativa nas médias de sobrevivência, estabelecimento, número de folhas e de brotos. Somente a partir dos 120 dias observou-se um decréscimo das médias na sobrevivência e estabelecimento. A presença de sorbitol é importante para realizar a conservação in vitro de L. divaricata via crescimento mínimo, o qual pode ser realizado por um período de até 120 dias. A subsequente retomada de crescimento das brotações conservadas na presença de sorbitol é limitada a 90 dias.

Esse trabalho objetivou avaliar o efeito do tipo de luz no cultivo in vitro de Eugenia involucrata. Os tratamentos consistiram do cultivo sob diodos emissores de luz (LEDs) de cor vermelho, azul, verde ou branco e lâmpadas fluorescentes. Nos cultivos sob LEDs branco e azul foram observadas as maiores médias de estabelecimento; sob o azul e lâmpadas fluorescentes, o maior número de folhas; sob o azul, o maior número de brotos; sob o branco, menor contaminação bacteriana; e sob o verde os piores resultados. LEDs azul, vermelho, branco e lâmpadas fluorescentes influenciam favoravelmente a propagação in vitro de E. involucrata.

The objective of this work was to evaluate the effect of sorbitol and on the growth period on minimum growth and subsequent resumed growth of Luehea divaricata shoots. Two tests were performed, one of minimal growth and the other of resumed growth. In the presence of sorbitol at minimum growth there was a reduction in averages of survival, establishment, number of leaves and primary and secondary roots. When the period was considered, it was observed a reduction at 30 days followed by increase and stabilization in averages of primary and secondary roots, and number of leaves and of shoots. The presence of sorbitol promoted a significant reduction in averages, in the resumed growth, for survival, establishment, number of leaves and of shoots. A decrease of averages in survival and establishment was observed only after 120 days. The presence of sorbitol is important for in vitro conservation of L. divaricata by minimum growth, which can be carried out for up to 120 days. The subsequent resumed growth of the shoots preserved in the presence of sorbitol is limited to 90 days. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

The objective of this work was to evaluate the effect of sorbitol and on the growth period on minimum growth and subsequent resumed growth of Luehea divaricata shoots. Two tests were performed, one of minimal growth and the other of resumed growth. In the presence of sorbitol at minimum growth there was a reduction in averages of survival, establishment, number of leaves and primary and secondary roots. When the period was considered, it was observed a reduction at 30 days followed by increase and stabilization in averages of primary and secondary roots, and number of leaves and of shoots. The presence of sorbitol promoted a significant reduction in averages, in the resumed growth, for survival, establishment, number of leaves and of shoots. A decrease of averages in survival and establishment was observed only after 120 days. The presence of sorbitol is important for in vitro conservation of L. divaricata by minimum growth, which can be carried out for up to 120 days. The subsequent resumed growth of the shoots preserved in the presence of sorbitol is limited to 90 days. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

In vitro cultivation is a technique with wide application for micropropagation. However, each species has specific mineral needs for this type of cultivation. The objective was to assess the impacts of the saline solution culture medium on the performance of the photosynthetic apparatus and growth of Bromelia antiacantha during in vitro cultivation, and thus to elucidate the mitigation of the nutritional imbalance that can interfere in the electron transport in the plants. Plants were cultivated in a salt concentration gradient of MS medium (0%, 25%, 50%, 75% or 100%). The growth traits and fluorescence a chlorophyll were analyzed. Intermediate concentrations of MS medium resulted in plants with a larger number of leaves and longer root length. The OJIP curves and results of the JIP test showed that the plants grown without MS salts presented less efficient photosystem II (PSII), as indicated by the performance index [Pi(TOTAL)]. In contrast, the intermediate concentrations (MS 25% and 50%) had a positive effect on the performance of the photosynthetic apparatus. The MS 25% medium can be used for in vitro cultivation of B. antiacantha, enabling the development of plants with suitable physiological qualities for planting in the field. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

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Resumo A cultura de tecidos vegetais é imprescindível à propagação e multiplicação uniforme de plantas, à conservação de germoplasma, a programas de melhoramento e à transformação genética. Essa técnica tem exigido, cada vez mais, estudos que colaborem com o entendimento dos mecanismos envolvidos no crescimento dos microrganismos nos meios de cultivo, bem como as relações que eles estabelecem com a planta hospedeira. Dessa maneira, a presente revisão pretende esclarecer esses questionamentos e promover a distinção entre contaminação e manifestação endofítica que ocorrem no cultivo in vitro por diferentes causas. Tal distinção permite diminuir o pânico que se instala quando do seu aparecimento, além de auxiliar na adoção de medidas de prevenção e/ou controle desses eventos sem que haja descartes desnecessários de material de alto valor comercial e genético.

Plantas de banana foram regeneradas através da cultura de tecidos a partir de gemas apicais de bananeira Cavendish, cultivar Grande Naine, e mantidas por dez subcultivos em diferentes meios de cultura. O DNA genômico foi extraído a partir de rizomas das plantas matrizes originais, das plantas mutantes anãs e variegadas oriundas do cultivo in vitro e das plantas provindas de cinco e dez subcultivos. A análise, Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) foi realizada utilizando-se 20 “primers” (iniciadores – sequência conhecida de nucleotídeos3), dois dos quais (10%) revelaram polimorfismo entre as plantas anãs e variegadas em relação às plantas normais. Com a utilização do “primer” OPJ-04, foram amplificados, nas plantas normais, dois fragmentos de aproximadamente 1,5 e 2,0kb (quilobase, mil pares de bases) os quais estavam ausentes nas plantas anãs. Já o “primer” OPH-09 apresentou a amplificação de uma banda de aproximadamente 1,7kb presente tanto nas plantas anãs quanto nas variegadas, mas ausente nas plantas normais. Neste estudo, mostrou-se que através do uso de marcador molecular RAPD é possível detectar variação somaclonal surgida durante o processo de micropropagação nos mutantes.

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The objective of the research was to evaluate cytokinin concentrations and agricultural residues as physical structuring agents of the culture medium in the in vitro propagation of highbush blueberry (Vaccinium corymbosum 'Duke'). To that end, three different concentrations of 2-isopentenyladenine (2iP) (0, 5, and 10 mg L-1)in woody plant medium (WPM) and five structuring agents (in natura rice husks, carbonized rice husks, coconut fiber, S-10 Beifort®, and agar)were tested. After 60days of culture, the following parameters were evaluated: survival (%),sprout and shoot lengths (cm),propagation rate, number of sprouts, and shoot dry mass (g). The substrates used as structuring agents were analyzed in terms of pH and electrical conductivity. The in natura rice husk, S-10 Beifort®, and carbonized rice husk did not differ from the agar in terms of the sprout length. The shoots were longer (1.64 cm) in cultures within natura rice husk than in other treatments. In the absence of 2iP, S-10 Beifort® resulted in the highest propagation rate (2.97). Concerning the number of sprouts, S-10 Beifort®, in natura rice husks, and carbonized rice husks did not differ from agar. However, when the regulator was added, the agar performed better in comparison to the other residues. Thus, in natura rice husks, carbonized rice husks, and S-10 Beifort®are potential physical structuring agents of the culture medium that can be used without 2iP. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

We aimed to evaluate the effect of light type in vitro culture of Eugenia involucrata. The treatments consisted of growing the species under light emitting diodes (LEDs) of different color spectra and fluorescent lamps. The highest average of plants establishment in the cultures under white and blue LEDs; under blue and fluorescent lamps, we registered the largest number of leaves; under blue, the largest number of shoots and under white, less bacteria contamination. When plants were under green LEDs, we obtained the worst results. Blue, red and white LEDs and fluorescent lamps influence positively in vitro propagation of E. involucrata. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

ABSTRACT: Hyptis marrubioides (Lamiaceae) is a medicinal plant that is native from Brazilian Cerrado. In vitro propagation techniques make use of elicitors to alter metabolic pathways, affecting how molecules are produced both qualitatively and quantitatively. This research aimed to evaluate how abiotic elicitors salicylic acid (SA) and silver nitrate (SN) at concentrations of 30µM or 60µM influence Hyptis marrubioides seedling growth by two different in vitro culture methods. The rutin content was quantified by HPLC-DAD. Compared to an untreated culture, the H. marrubioides methanolic extracts cultured in MS medium for 10 days followed by culture in MS medium containing SN (30µM) for 20 days had 1.28 times higher rutin content. In a second experiment, seedlings were cultured in MS medium for 20 days, and then the desired elicitor was added to the culture and allowed to remain in contact with the medium for three and six days. SA (30µM) gave the best results: rutin production was 16.56-foldhigher than the control after six days. SN (30µM) increased the rutin content by 1.17-fold. At the two concentrations evaluated during the elicitation experiments, neither SA nor SN altered the growth parameters shoot length, leaf number, and fresh and dry weight of H. marrubioides seedlings grown in vitro as compared to the control. Based on these results, the abiotic elicitors SA and SN successfully provide Hyptis marrubioides with increased rutin content in vitro.

A fonte de luz na cultura de tecidos muitas vezes é um dos fatores pontuais para a adequação da produção de plantas, para isso, vêm se utilizando os diodos emissores de luz (LEDs) no intuito de aumentar o crescimento e desenvolvimento das plantas propagadas in vitro. O objetivo do trabalho foi avaliar a propagação in vitro de cultivares de Alpinia purpurata ‘Red Ginger’ e ‘Pink Ginger’ em duas diferentes fontes de luz (lâmpadas tubulares fluorescentes ou LED Branco). O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado, esquema fatorial (2x2), totalizando quatro tratamentos com dez repetições, e a unidade experimental composta por um frasco contendo cinco explantes. Após 55 dias, foi possível observar que lâmpadas LED branco e a cultivar Red Ginger proporcionaram o maior número de brotos. Já para o número de folhas, a cultivar Red Ginger e lâmpadas LED branco proporcionaram resultados superiores. Para comprimento da parte aérea, a cultivar Red Ginger mantida sob lâmpadas fluorescentes foi superior, e a Pink Ginger apresentou superioridade quando cultivada sob luzes LED. Assim, mesmo com respostas diferenciadas entre genótipos, sugere-se o uso de lâmpadas LED branco na propagação in vitro das cultivares de Alpinia purpurata ‘Red Ginger’ e ‘Pink Ginger’.

Lavender is an aromatic ornamental plant that is used widely in the perfume, pharmaceutical, cosmetical and food industries. That is why it is important to study ways to promote a production of lavender raw material. For this, four experiments were carried out in order to study the germination and initial in vitro development of lavender. In the first part the efficiency of the use of hydrogen peroxide in the pre-treatment of seeds inoculated in culture media with different concentrations of gibberellic acid was evaluated. Besides that, the influence of the use of Growlux lamps and white fluorescent lamps on plantlets cultivated in MS and LS media at salts concentrations of 50 and 100% was evaluated. Finally, the effect of the gibberellic acid, putrescine, spermine and spermidine in different concentrations was evaluated. Better results were estimated when hydrogen peroxide pretreatment was applied to the seeds with subsequent inoculation in a medium containing 2,5 mg L-1 of gibberellic acid. The use of Growlux lamps did not influence the characteristics observed when compared to the use of white fluorescent lamps, however it was concluded that the species develops more in a LS medium. Concerning the use of polyamines was found that germination, aerial part and number of leaves of the seedlings were generally favored at the concentration of 0,5 mg L-1 except when spermine was applied, which resulted in a lower number of leaves under this condition. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

The rationale for the present study is explained by a high risk of the development of side effects, including nephrotoxic, in patients that receive the treatment with cytostatics bleocin, lastet, and cisplatin for oncologic diseases. The present article focuses on the evaluation of the toxicity of the mentioned drugs. The method of plasma-free renal tissue cultures in mice on the perforated millipore filters was used. The identification of the toxicity of different doses of the drugs was performed by the comparison of the areas of the grown colonies. The authors presented the data that the inhibition of the growth of renal tissue cultures (by 50%) required a 4.3-fold increase in the dose of lastet in comparison with bleocin. The inhibition of the tissue culture colony growth with cisplatin by 85% was registered in the dose of the drug that corresponded to a 3% solution. The materials of the article have significant practical value because a rational indication of cytostatics bleocin, lastet, and cisplatin with regard to their nephrotoxic effect will allow the specialists to improve the treatment outcome and will contribute to the improvement of the quality of life of patients. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Hyptis marrubioides (Lamiaceae) is a medicinal plant that is native from Brazilian Cerrado. In vitro propagation techniques make use of elicitors to alter metabolic pathways, affecting how molecules are produced both qualitatively and quantitatively. This research aimed to evaluate how abiotic elicitors salicylic acid (SA) and silver nitrate (SN) at concentrations of 30μM or 60μM influence Hyptis marrubioides seedling growth by two different in vitro culture methods. The rutin content was quantified by HPLC-DAD. Compared to an untreated culture, the H. marrubioides methanolic extracts cultured in MS medium for 10 days followed by culture in MS medium containing SN (30μM) for 20 days had 1.28 times higher rutin content. In a second experiment, seedlings were cultured in MS medium for 20 days, and then the desired elicitor was added to the culture and allowed to remain in contact with the medium for three and six days. SA (30μM) gave the best results: rutin production was 16.56-foldhigher than the control after six days. SN (30μM) increased the rutin content by 1.17-fold. At the two concentrations evaluated during the elicitation experiments, neither SA nor SN altered the growth parameters shoot length, leaf number, and fresh and dry weight of H. marrubioides seedlings grown in vitro as compared to the control. Based on these results, the abiotic elicitors SA and SN successfully provide Hyptis marrubioides with increased rutin content in vitro. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

In this study, we performed BSA to identify genetic markers linked to salt tolerance. We tested the genetic diversity among four bulked DNA samples of EMS induced mutant clones and one bulked DNA sample of non-mutated clone of Petunia for salt tolerance in in vitro callus cultures using RAPD and ISSR markers. Out of the 36 RAPD and 16 ISSR primers identified, 25 and 13 were effectively used to amplify genomic DNA of all the five bulked samples, respectively. In total, 114 RAPD amplifications products were obtained, of which 28% were polymorphic and 2% were genotype-specific bands. Out of the 64 ISSR amplification products obtained, 51% were polymorphic and 1% was genotype-specific bands. Results of this study indicated the existence of two patterns of distorted segregation among the studied markers. The first one indicates the differences between non-mutated clones of Petunia and its putative mutants. The second one was observed only between putative mutants and putative mutants tested for salt tolerance in in vitro culture. Both RAPD and ISSR analysis successfully detected the association with changes induced by chemical mutagenesis and salinity. Furthermore, our results indicate that BSA method can be useful in the rapid detection of molecular markers for further marker-assisted selection. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

ABSTRACT: The goal of the present study was to evaluate the germination, initial growth, and in vitro co-cultivation of Comanthera curralensis Moldenke, a "sempre viva" native of the Chapada Diamantina state of Bahia. Full strength (MS) and half-strength MS (MS1/2) growth media supplemented with two different sucrose concentrations (15 and 30g L-1) were tested for germination and initial plant growth. Three different plant densities were tested by in vitro culture (8, 10 and 12 plants per container). MS1/2 medium with 15g L-1 sucrose resulted in a higher percentage of germination and plant growth for the in vitro establishment of C. curralensis. The use of 12 plants per container is indicated for cost reduction in C. curralensis in vitro production.

Os objetivos neste estudo foram avaliar os efeitos da radiação γ sobre a sobrevivência e desenvolvimento de gemas de segmentos caulinares e germinação de sementes de maracujazeiro-amarelo (Passiflora edulis f. flavicarpa) in vitro. Os explantes de segmentos caulinares (2cm) contendo uma gema axilar, obtidos a partir de plântulas provenientes da germinação in vitro de sementes de maracujá, foram tratados com raios γ em dosagens variando de 10 a 60Gy e subsequentemente transferidos para meio Murashige e Skoog (MS), suplementado com 4,0mg L-1BAP. Para a irradiação das sementes, foram testadas doses que variaram de 75-200Gy e a germinação e sobrevivência das plântulas foram avaliadas após 30 e 60 dias da inoculação em meio MS, respectivamente. Após 30 dias da irradiação de segmentos caulinares, observou-se redução de 50% na sobrevivência dos explantes e no número de brotações formadas in vitro nas doses de 21,31 e 12,20Gy, respectivamente. A DL50 para a germinação de sementes é 160Gy, enquanto que, para sobrevivência das plântulas, é de 125Gy.

ABSTRACT Oil palm is a woody monocot of economic importance due to high oil production from its fruits. Currently, the conventional method most used to propagate oil palm is seed germination, but success is limited by long time requirements and low germination percentage. An alternative for large-scale propagation of oil palm is the biotechnological technique of somatic embryogenesis. The rooting of plants germinated from somatic embryos is a difficult step, yet it is of great importance for later acclimatization and success in propagation. The aim of this study was to evaluate the effect of the auxins indole acetic acid (IAA) and indole butyric acid (IBA) on the rooting of somatic embryos of Tenera hybrid oil palm. Plants obtained by somatic embryogenesis were inoculated in modified MS medium with 10% sucrose and 0.6% agar and supplemented with IAA or IBA at concentrations of 5 µM, 10 µM, and 15 µM, and the absence of growth regulators. After 120 days, the presence of roots, root type, length of the longest root, number of roots, number of leaves, and shoot length were analyzed. Growth regulators were favorable to rooting; plants cultivated with IBA growth regulator at 15 µM showed higher rooting percentage (87%) and better results for the parameters of number of roots (1.33) and shoot length (9.83).

ABSTRACT Nursery trees of stone fruits (Prunus spp.) are traditionally produced by union of two distinct genotypes - the rootstock and the scion - which, by grafting, form a composite plant that will be maintained throughout of all plant life. In Brazil, the rootstocks are predominantly seed propagated and therefore usually results in heterogeneous trees for vigor and edaphic adaptation. However, with advances in rootstock breeding programs that released cultivars and certification in several countries (notably in Europe), the system will come gradually evolving for vegetative propagation (cuttings and tissue culture) and use of seeds of selected rootstocks with specific characteristics and potted nursery trees production. For scion cultivar propagation, the budding system (with its many variations) has predominantly been adopted in major producing countries. This review had as objective to comment main propagation methods adopted for rootstocks and scion in peach, nectarine and plum, and recent technical progress obtained as well as the needs of improvement for nursery tree production.

Byrsonima intermedia A. Juss. é uma planta medicinal e frutífera do Cerrado, cuja propagação convencional é difícil, devido à presença do endocarpo extremamente lignificado. Embora o hipoclorito de sódio (NaOCl) seja amplamente utilizado para a desinfestação superficial, existem poucos relatos de seus efeitos sobre o crescimento do explante. Neste trabalho, o objetivo foi estudar o efeito de diferentes pHs e períodos de exposição de sementes de B. intermedia em uma solução de NaOCl. As sementes foram submetidas a diferentes tempos de exposição (1, 5 e 10 minutos) numa solução de NaOCl com diferentes pHs (5, 7, 10 e 12) e, após o tratamento com hipoclorito de sódio, os embriões foram inoculados em meio WPM com a concentração de 50% de sais sem sacarose, ágar a 0,5% e pH 5,8 e, depois de 75 dias de cultivo, o crescimento das plântulas foi avaliado. A utilização de NaOCl é eficaz na desinfestação de sementes de B. intermedia, independente da variação do pH ou dos períodos de exposição. A porcentagem de plântulas normais, o comprimento da parte aérea e o número de folhas são positivamente afetados pela utilização de solução de NaOCl a pH de 8,5-8,9 ou pelo aumento do período de exposição, enquanto o número de raízes é afetado apenas pelo aumento do período de exposição na solução NaOCl

Natural ventilation system facilitates gaseous exchanges in in vitro plants promoting changes in the leaf tissue, which can be evaluated through the leaf anatomy, and it allows a cultivation closer to the photoautrophic micropropagation. The objective of this work was to evaluate the effects on in vitro growth and on the leaf anatomy of Cattleya walkeriana grown in natural and conventional ventilation system with different concentrations of sucrose (0; 15; 30 and 45 L-1) combined with different cultivation systems (conventional micropropagation and natural ventilation system). The culture medium was composed of MS salts, solidified with 7 g L-1 of agar and pH adjusted to 5.8. Forty milliliters of culture medium were distributed in 250 mL flasks, autoclaved at 120 ºC for 20 minutes. The greater plant growth, as well as the greater thickness of the mesophyll was observed with the use of 20 g L-1 sucrose in natural ventilation system. Plants grown in natural ventilation system showed a thicker leaf mesophyll, which is directly related to photoautotrophic crops. The natural ventilation system induced more elliptical stomata and probably more functional formats.

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The objective of this study was to evaluate the in vitro multiplication of Eremanthus incanus axillary buds in the presence of PVP additives and activated charcoal under the interaction of different sucrose and agar concentrations. Explants containing axillary buds were inoculated in MS culture medium to evaluate the effect of 0.8 g L-1 of PVP and 1.0, 2.0 and 4.0 g L-1 of activated charcoal. The results of the addition of 0, 15, 30, and 60 g L-1 of sucrose combined with concentrations of 6 and 10 g L-1 of agar in MS medium were also evaluated. The number and quality of emitted shoots were evaluated after 30 and 60 days. The addition of PVP to the culture medium was more efficient than the use of activated charcoal in the multiplication of the species. The presence of sucrose is indispensable for developing the shoots well, and the use of a lower concentration of agar favors the development of quality shoots. The best results for shoot multiplication were obtained using 30 g L-1 sucrose and 6 g L-1 agar. PVP, activated charcoal, agar and sucrose are important components in the culture medium and alter the in vitro multiplication of Eremanthus incanus. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

The aims of this study were to analyze the in vitro germination, seed germination processes and determine the best conditions of the vegetative propagation of sacha inchi (Plukenetia volubilis L.). The morphobiometric traits of the seed were measured. Different sucrose concentrations during in vitro germination were analyzed. The effects of using indole-butyric acid (AIB) on the adventitious rooting of three types of sacha inchi cutting were also assessed. The percentages of foliar retention, rooted cuttings, cuttings with sprouting and mortality, number of roots per cutting, length of the largest root and dry mass of aerial part and roots were evaluated. Sacha inchi was found to exhibit phanerocotylar epigeal germination, taking from 20 to 25 days. For in vitro cultivation, MS culture medium without the addition of sucrose was used to obtain higher germination rates (70%). The types of cutting used in vegetative propagation produced satisfactory adventitious roots (> 50%), but apical cuttings were more efficient. They were also capable of rooting without the application of AIB, but concentrations of between 0.10 and 0.20 mg L-1 AIB are recommended in the vegetative propagation of this species. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Because the seeds of orchids present absence of endosperm and low rate of germination in nature and their propagation by division of clumps be slow, the in vitro cultivation has become a technique of spreading routine. Meanwhile, a large number of factors influence the germination and growth in vitro, and despite being a very popular technique, knowledge about the best means for cultivation are still insufficient. In this work, to study the effect of different levels of macronutrients and sucrose on the in vitro growth of Cattleya bowringiana O'Brien. The experimental design was a completely randomized design with five repetitions, a factorial arrangement of two types of formulations of macronutrients in Murashige and Skoog (1962), being a standard concentration complete and another with half of macroelements, and five levels of sucrose (0 ; 15; 30; 45 and 60 g L-1). The data were subjected to analysis of variance and posterior Scott-Knott test, multivariate analysis by Tocher and correlation between the variables. The characteristics assessed six months after the beginning of the experiment were: shoot length; number of shoots per plantlet; number of roots per plantlet, length of the largest root and; fresh matter of seedlings. It was found that the treatment containing concentration complete pattern of the macronutrients of the MS was more efficient for all variables evaluated, with the levels of sucrose that allowed for a better growth of the variables studied was the 30 and 45 g L-1. Thus, it is recommended the use of MS with 100% of the salts and sucrose to 30 g L-1 for the in vitro propagation of Cattleya bowringiana. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

A micropropagação vem sendo desenvolvida e aperfeiçoada para elevar a taxa de multiplicação de plantas em curto espaço de tempo e melhorar a qualidade da produção de mudas. Contudo, a contaminação microbiana é um dos maiores problemas desta técnica. Este trabalho teve por objetivo avaliar a eficiência da descontaminação de explantes de bananeira durante o estabelecimento in vitro, com o uso dos antibióticos ampicilina sódica e cloranfenicol adicionados ao meio de cultura. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado constituído de cinco tratamentos e cinco repetições, sendo cada repetição representada por cinco explantes em diferentes concentrações de ampicilina sódica e cloranfenicol por vinte minutos. Os antibióticos foram adicionados separadamente ao meio de cultura em concentrações de 0, 5, 10, 15 e 20 mg L-1. Os dados foram submetidos à análise de variância e as médias comparadas pelo teste F e análise de regressão. Foram avaliadas as porcentagens de contaminação por bactérias, fungos e oxidação dos explantes. Os resultados permitiram concluir que os antibióticos apresentaram controle sobre contaminantes endógenos nos explantes de banana 'Thap maeo'. A concentração de 20 mg L-1 dos antibióticos ampicilina sódica e cloranfenicol proporcionou redução de 70% na infecção por bactérias e fungos.

A murcha de Fusarium ou fusariose ocorre em diversas regiões produtoras de maracujá amarelo e tem ocasionado grandes danos devido à morte das plantas. A mutagênese associada à seleção in vitro utilizando fitotoxinas possibilita a aplicação de uma pressão de seleção sobre um grande número de propágulos e, assim, pode direcionar a seleção dos mutantes específicos. Neste trabalho, foi analisado o efeito de raios gama sobre a sobrevivência de plantas de maracujazeiro amarelo inoculados com F. oxysporum f. sp. passiflorae. Brotações foliares provenientes de segmentos caulinares de P. edulis irradiados a 20Gy foram submetidas a dois ciclos de seleção em meio de cultura suplementado com o filtrado da cultura fúngica (40% e 50% de filtrado). As plantas selecionadas foram inoculadas com a suspensão de conídio em casa de vegetação e após, transferidas para o campo em local com histórico da doença. Ao final da etapa de seleção in vitro, sobreviveram 17,05% das plantas irradiadas e nenhuma planta do tratamento testemunha. A inoculação com a suspensão de conídio não resultou em diferenças significativas na sobrevivência das plantas irradiadas e não irradiadas. No entanto, em condições de campo, foi confirmado o efeito da radiação no aumento da sobrevivência das plantas, sendo verificada a sobrevivência de 77,78% das plantas irradiadas e a morte de todas as plantas do tratamento testemunha.

O presente estudo teve por objetivo avaliar o efeito de BAP, na presença e ausência de ANA, sobre a multiplicação in vitro de segmentos apicais caulinares de Satureja hortensis. Os explantes foram isolados de plântulas germinadas in vitro e cultivados em meio nutritivo MS. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado, em esquema fatorial 2x5, correspondendo às concentrações de ANA (0 e 1 µM) e de BAP (0; 5; 10; 15 e 20 µM), com seis repetições, cada uma composta por três explantes. Para a porcentagem de explantes com brotações houve efeito significativo para o fator BAP, aumentando à medida que cresce a concentração da citocinina. A variável "número de brotos por explante" apresentou interação entre os fatores, havendo a maior formação de brotos na presença de ANA na faixa de 10 - 15 µM de BAP. Na presença da auxina, o maior valor ocorreu com 15 µM de BAP tendendo a diminuir independente da presença de ANA. O enraizamento dos segmentos apicais foi maior na presença de ANA e ausência de BAP, diminuindo com o aumento da citocinina. O número de folhas foi influenciado pela maior concentração de BAP sendo que a 15 µM foi observado o maior número, tendendo à queda com aumento da concentração. A concentração de 15 µM de BAP, independente de ANA, proporcionou os melhores resultados na multiplicação da espécie produzindo aumento de brotações e número de folhas, à exceção do enraizamento que foi influenciado pela auxina.

A canafístula [Peltophorum dubium (Spreng.) Taub.] é uma espécie florestal nativa do Brasil, dotada de características silviculturais promissoras para fins de (re)florestamento. No entanto, a produção de mudas de alta qualidade por meio da micropropagação é limitada pela reduzida formação de raízes. Em virtude disso, o presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito de substratos alternativos ao ágar e do período de cultivo na formação in vitro de raízes de canafístula. Para tanto, foram testados, aos 30 e 60 dias de cultivo in vitro, meios de cultivo compostos por combinações dos substratos vermiculita (V), Plantmax®(P) ou areia fina (AF) ao meio nutritivo MS, contendo 10 µM de ácido 3-indol butírico (AIB), acrescido ou não de ágar (A). Obteve-se elevada sobrevivência das brotações, tanto aos 30 (92,3%) quanto aos 60 (82,6%) dias de cultivo. Em relação aos meios de cultivo, a maioria deles proporcionou uma elevada sobrevivência (91,1 a 100,0%) das brotações; constituíram exceções àqueles que continham (P). Intensa formação calogênica foi observada apenas após 60 dias de cultivo, na testemunha, que incluiu MS e (A), e naqueles outros dois tratamentos contendo (V). O melhor resultado de formação de raízes, tanto quantitativamente (36,78%) como pela qualidade das raízes, foi obtido no tratamento que incluiu (V) e (A), além de MS, aos 60 dias de cultivo. Com a utilização de (V) no meio de cultivo, há intensa formação de calos, aos 60 dias de cultivo, porém, também há maior formação de raízes e melhoria na qualidade do sistema radicular, quando este substrato é combinado ao meio nutritivo MS.

O objetivo deste trabalho foi determinar a concentração de manitol para a germinação e crescimento mínimo in vitro do coqueiro (Cocos nucifera). Os seguintes acessos foram utilizados: Anão-vermelho-do brasil-de-gramame (BRDG), Anão-amarelo-da-malásia (MYD), Gigante-do-brasil-praia-do-forte (BRA), Gigante-da-polinésia (PYT) e Gigante-de-rennel (RIT). Os embriões foram colocados em meio de cultura Y3 a diferentes concentrações de manitol (0, 0,1, 0,2, 0,3 e 0,4 mol L-1). Verificou-se inibição do crescimento da parte aérea na presença de 0,1, 0,2 e 0,3 mol L-1, para MYD e BRDG, e de 0,1 e 0,2 mol L-1, para PYT, BRA e RIT. O uso do manitol é uma estratégia promissora para a conservação por crescimento mínimo.

A micropropagação é uma técnica muitas vezes indicada para a multiplicação em larga escala de plantas com propriedades medicinais. Dentre elas, destaca-se a hortelã-pimenta (Mentha x Piperita L.), cujo óleo essencial é utilizado no tratamento de transtornos digestivos e respiratórios. Para otimizar o protocolo de micropropagação dessa espécie são necessários estudos, principalmente quanto à suplementação do meio de cultura para garantir a produção massal in vitro e posterior extração do óleo essencial. Nesse contexto, objetivou-se avaliar o efeito de concentrações e combinações de reguladores de crescimento vegetal na morfogênese in vitro de hortelã-pimenta. Segmentos nodais provenientes de plântulas estabelecidas in vitro foram utilizados como fonte de explante e inoculados em meio de cultura MS suplementado com 0; 2,0 e 4,0 mg L-1 de BAP (6-benzilaminopurina), 0; 0,5 e 1,5 mg L-1 de ANA (ácido naftaleno-acético) e 0; 0,5 e 1,0 mg L-1 de GA3 (ácido giberélico). O delineamento experimental adotado foi inteiramente casualizado, com os tratamentos distribuídos em esquema fatorial 3x3x3 com oito repetições. Concluiu-se que o BAP favoreceu a sobrevivência de segmentos nodais de M. x Piperita inoculados in vitro e, quando combinado ao GA3, promoveu a brotação dos explantes. Essas características, no entanto, não foram estimuladas pela adição de ANA ao meio de cultura. Conclui-se que após a multiplicação dos brotos in vitro estes devem ser transferidos para meio sem reguladores para seu desenvolvimento. Apesar dos efeitos benéficos do BAP na organogênese de M. x Piperita, elevadas concentrações deste regulador de crescimento vegetal promoveram a formação de calos.

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ABSTRACT Oil palm is one of the most economically valuable oil seed plants, but the expansion of plantations has been limited by availability of seedlings, as the conventional propagation is through seeds, which have low germination rates. One possible solution for the large-scale production is the use of somatic embryogenesis. The aim of this study was evaluate the effects auxins 2,4-D and picloram on the induction of pro-embryogenic masses in E.guineenesis hybrid leaf explants and characterize, regarding embryogenic characteristics, with cytochemical and ultrastructural analisys. Specifically, in vitro plantlets leaves fragments were inoculated in Y3 culture medium supplemented by 2.4-D or picloram at different concentrations (0.0, 1.0, 3.0, 6.0 and 9.0 mg l–1). After 90 days the presence/ absence of cell masses were evaluated. Both growth regulators efficiently induced cellular masses regardless of the concentrations applied. As the cell masses were not homogeneously formed, they were classified according to color and shape into four types: TYPE 1 - elongated and translucent, TYPE 2 – uneven and translucent, TYPE 3 - globular and beige TYPE 4 – globular and white. Based on the anatomical and ultrastructural features, TYPE 2, 3 and 4 cell masses were considered to have the highest embryogenic potential and therefore may be most suited to large-scale vegetative propagation of oil palm.

The economic use of Butia eriospatha is justified by its potential but is limited by its slow germination. The in vitro culture of zygotic embryos can solve this problem as well as contribute to the conservation and to insert this species in the productive context. The objectives of this study were to evaluate the procedures for surface disinfestation, the effect of gibberellic acid (GA3) on in vitro germination, and the effect of 3 culture media on the increase in fresh mass of zygotic embryos of Butia eriospatha. In the first assay, disinfestation was tested by immersing only the seeds, by immersing the seeds followed by isolation of the embryos, and by immersing only the embryos in sodium hypochlorite (NaOCl). After 30 days of in vitro culture, microorganism contamination was evaluated. In the second assay, in vitro germination was tested using different concentrations (0, 2, 4, 6, and 8 mg·L-1) of GA3. In the third assay, 3 culture media (Murashige and Skoog [MS], woody plant medium [WPM], and Y3) were evaluated. Soaking embryos in NaOCl, with or without seed immersion, produced satisfactory control of microorganisms, unlike the disinfestations tests conducted only on the seed, which were not efficient. In vitro germination of embryos increased with the GA3 concentration. Embryos cultured in Y3 and MS culture media showed a higher increase in fresh mass than those cultured in WPM. To control microorganisms, disinfestation consisted of immersing the seed in 2% NaOCl for 15 min followed by immersing the embryo directly in 1% NaOCl for 10 min. A GA3 concentration of 8 mg·L-1 was required to optimize the germination. After 4 weeks of the in vitro culture, 80% of the embryos germinated. Thus, the use of MS or Y3 culture media is recommended to promote the in vitro growth of Butia eriospatha zygotic embryos. A exploração econômica do butiazeiro (Butia eriospatha) é justificada por suas potencialidades, porém apresenta uma germinação lenta, problema que o cultivo in vitro de embriões zigóticos pode eliminar, além de poder contribuir para a sua conservação e para inserir a espécie no contexto produtivo. Os objetivos foram avaliar metodologias de desinfestação superficial, o efeito do Ácido Giberélico (GA3) sobre a germinação in vitro e do meio de cultura sobre o ganho de massa fresca de embriões zigóticos de Butia eriospatha. No primeiro ensaio foram aplicadas metodologias de desinfestação que incluíram imersão apenas das sementes, ou das sementes e, depois, dos embriões isolados ou, ainda, apenas dos embriões em hipoclorito de sódio (NaOCl), sendo avaliada, após 30 dias de cultivo in vitro, a contaminação por microrganismos. No segundo ensaio, diferentes concentrações (0, 2, 4, 6 e 8 mg·L-1) de GA3 foram testadas em relação à germinação in vitro. Três meios de cultura (MS, WMP e Y3) foram avaliados no terceiro ensaio. A imersão dos embriões em NaOCl associada ou não à imersão das sementes promoveu um controle satisfatório dos microrganismos; ao contrário, desinfestações efetuadas apenas nas sementes não foram eficientes. A germinação dos embriões aumentou com a concentração de GA3. Embriões cultivados nos meios de cultura Y3 e MS apresentaram maiores ganhos de massa fresca que aqueles cultivados em WPM. Para efetuar o controle de microrganismos deve-se realizar a desinfestação em NaOCl a 1% por 10 minutos, diretamente no embrião, após a imersão da semente a 2% durante 15 minutos. A concentração 8 mg·L-1 de GA3 é necessária para otimizar a germinação in vitro de Butia eriospatha, sendo obtidos 80% de germinação após quatro semanas de cultivo. Recomenda-se o emprego dos meios de cultura MS ou Y3 para promover o crescimento in vitro de embriões zigóticos de Butia eriospatha.

Objetivando analisar o número de subcultivos que permita a multiplicação do morangueiro, sem que ocorram alterações nas características fenotípicas dos clones submetidos a esse processo, explantes dos genótipos 'Aromas', 'Camarosa' e 'Camino Real' foram submetidos, em uma primeira etapa, a 12 ciclos de subcultivos in vitro e, no ano seguinte, explantes dos mesmos genótipos, das mesmas plantas matrizes, foram subcultivados por três ciclos. Após a fase de aclimatização, as mudas foram transplantadas para canteiros, e o experimento conduzido segundo delineamento em blocos casualizados em esquema fatorial 3x2 (genótipos e níveis de subcultivos). As características avaliadas foram: altura da planta e comprimento da raiz (cm), massas fresca e seca da parte aérea e da raiz (g) e número de estolões por planta. Na avaliação a campo das características fenotípicas, não foram observadas diferenças significativas entre os dois níveis de subcultivos. As cultivares 'Camarosa' e 'Camino Real' apresentaram maior variação entre os dois níveis de subcultivos, sendo as maiores variações observadas em plantas submetidas a três subcultivos. Com 12 subcultivos in vitro de plantas de morangueiro, das cultivares 'Aromas', 'Camarosa' e 'Camino Real', é possível obter maior número de mudas micropropagadas sem alterações nas características fenotípicas. A cultivar 'Aromas' apresentou uma maior estabilidade nas características fenotípicas estudadas em relação aos diferentes ciclos de subcultivo in vitro.