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A criopreservação do sêmen bovino contribui para as cadeias produtivas do leite e da carne, melhorando a eficiência dos rebanhos e, consequentemente, sua lucratividade. Neste contexto, diferentes métodos e aditivos são utilizados para melhorar a resistência espermática à criopreservação. O objetivo deste trabalho foi avaliar o uso de ácido ascórbico (vitamina C) e Trolox (vitamina E sintética) como antioxidantes no meio diluidor de sêmen para preservar a viabilidade do sêmen no processo de congelamento-descongelamento. Oito touros, cinco Bos taurus indicus e três Bos taurus taurus, foram selecionados e submetidos a três coletas de sêmen em intervalos de 48 horas. Os ejaculados foram submetidos a uma análise prévia de motilidade, vigor e concentração, a seguir colocados em palhetas de 0,25 mL na proporção de 25×106 de espermatozoides viáveis, e distribuídos em quatro grupos: GI (sêmen diluído sem adição de vitaminas), GII (sêmen diluído com 250 μmoL mL-1 de Trolox), GIII (sêmen diluído com 0,60 mg mL-1 de vitamina C) e GIV (sêmen diluído com 0,60 mg mL-1 de vitamina C + 250 μmoL mL-1 de Trolox); posteriormente, foram submetidos à criopreservação. Os movimentos e a cinética dos espermatozoides descongelados foram analisados por Computer-Assisted Semen Analysis (CASA), não havendo diferença (p0,05). A interação entre Trolox e vitamina C gerou resultados significativos para a motilidade espermática após o descongelamento quando avaliada pelo TRT, e a viabilidade espermática quando avaliada pelo HOST, sendo superiores aos encontrados no grupo controle e no grupo com adição de vitamina C.

Objective. To assess the oxidative stress on alpaca epididimal sperm frozen with different concentration of seminal plasma. Materials and methods. 29 post mortem alpaca epididymis were used. Epididymal sperm were obteined thought cuts and suspended in a diluent based on skim milk, egg yolk and fructose and dimethylacetamine. Samples were separated into four aliquots which were supplied with seminal plasma (v/v) in concentrations of 0, 10, 25 and 50% respectively; then, sperm motility was assessed before freezing; then, motility was assessed before freezing with an automatic freezer machine. After thawing, mitochondrial membrane activity, sperm viability, lipid peroxidation and sperm apoptosis were assessed using flow cytometry with images. Results. Sperm exposed to 50% seminal plasma showed the lowest post-thaw motility (3.5±3.7%) and the highest percentages of apoptotic cells (71.43±20.6%). No significant differences were found in the rest of parameters. Conclusions. This study constitutes non-conclusive evidence that presence of seminal plasma does not affect viability, mitochondrial activity, or lipid peroxidation of alpaca epididymal sperm during cryopreservation processes; however, when it is absent or added up to 25% in the cryopreservation process, it may be possible to obtain better results in terms of sperm motility and sperm apoptosis. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Objetivo. Evaluar el estrés oxidativo en el espermatozoide epididimario de alpaca criopreservado con diferentes concentraciones de plasma seminal. Materiales y métodos. Se emplearon 29 epidídimos de alpaca obtenidos post mortem. Los espermatozoides epididimarios fueron recuperados mediante cortes en un dilutor a base de leche descremada, yema de huevo, fructosa y dimetilacetamina. A continuación, se procedió a separar las muestras en cuatro alícuotas y se agregó plasma seminal (v/v) en diferentes concentraciones (0, 10, 25 y 50%). Luego se evaluó la motilidad espermática y se congelaron mediante una congeladora automática. Al descongelamiento se evaluó motilidad progresiva, potencial de membrana mitocondrial, viabilidad espermática, peroxidación de lípidos y apoptosis espermática mediante citometría de flujo con imágenes. Resultados. Los espermatozoides expuestos a 50% de plasma seminal mostraron la motilidad post descongelamiento estadísticamente más baja (3.5±3.7%) y el porcentaje de células apoptóticas estadísticamente más alto (71.43±20.6%). En todas las demás variables, no se hallaron diferencias estadísticas significativas (p≤0.05). Conclusiones. Se obtiene evidencia no cocluyente de que la presencia del plasma seminal no afecta la viabilidad, la actividad mitocondrial, ni la peroxidación lipídica de los espermatozoides epididimarios de alpaca durante el proceso de criopreservación; sin embargo, en ausencia de este o cuando es agregado hasta en un 25% en el proceso de criopreservación, es posible obtener mejores resultados en cuanto a motilidad espermática y apoptosis espermática.

A importância do jumento Pêga na produção de asininos e muares é notório. No entanto, apesar da sua relevância, não há um padrão de parâmetros do exame andrológico definido para a espécie, além do alto custo e difícil acesso das vaginas artificiais comerciais, que são utilizadas para a coleta de sêmen. Dessa forma, o objetivo desse trabalho foi confeccionar uma vagina artificial artesanal e coletar dados sobre os parâmetros espermáticos de um jumento. No presente trabalho, foi utilizado um jumento da raça Pêga, de 11 anos, submetido a um exame físico geral, no qual se coletou dados dos parâmetros vitais do animal e, posteriormente, foi realizada uma avaliação do aparelho reprodutor do animal, aferindo consistência, diâmetro, comprimento, largura, volume e índice testiculares, além da avaliação da integridade do epidídimo. Para a coleta do sêmen, foi utilizada uma vagina artificial artesanal, confeccionada utilizando um cano de PVC de 50 cm de comprimento, revestido de uma câmara de ar, com a inserção de um registro na sua porção superficial, permitindo a colocação de água e ar, para conferir temperatura e pressão semelhantes à vagina de uma fêmea. O sêmen foi coletado e foi avaliado quanto aos aspectos macroscópicos e microscópicos. Em suma, a vagina artificial confeccionada obteve êxito na coleta de sêmen, permitindo assim, a obtenção de resultados acerca dos parâmetros espermáticos asininos, contribuindo com os baixos dados registrados na literatura sobre a espécie.

In this study we describe the functional morphology of Cornu aspersum (Helix aspersa), spermatozoa using light, scanning (SEM) and transmission electron (TEM) microscopies. The studies were performed with sperm located in the frozen hermaphroditic duct. Our results showed that the head presents an elongated conical shape slightly coiled in a corkscrew, with the nucleus partially covered by an acrosome, where an apical vesicle is located at the lateralized apex. This peculiar shape suggests the helical displacement movement of the spermatozoa. The head and the nucleus are slightly larger size compared to those of other gastropod species. The intermediate tract is surrounded by a mitochondrial complex and a glycogen helix. The glycogen helix is coiled helically along the intermediate tract, presenting at least five twists of glycogen helices. The complexity of both the mitochondrial complex and the glycogen helix suggests a high metabolic consumption considering the long period of time until fertilization occurs. Our findings on the detailed characterization of Cornu aspersum spermatozoa, obtained from a frozen hermaphroditic duct can contribute to a better understanding of the functional morphology of sperm and serve as a reference for future studies. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

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Piaractus orinoquensis is a native species from the Colombian Orinoquia and several studies have contributed to the standardization of protocols for seminal cryopreservation of this species. The main goal of this study was to evaluate the sperm motility, duration of sperm motility (DM), pH, sperm membrane integrity (SMI) and fertility of semen cryopreserved for seven years and subjected to different post-thaw storage times (PST). Semen from five males (3.04 ± 0.3 kg) was diluted 1:4 (semen:diluent) with 10 % dimethylsulfoxide, 5.5 % glucose and 12 % egg yolk in 4 mL macrotubes and frozen in liquid nitrogen. Four PST were evaluated: 0, 15, 45 and 60 min. The sperm cells were activated with 1 % NaHCO3 (SB) and 0.9 % NaCl (SC) to determine sperm motility, DM, fertility rate, SMI and pH through PST. Significative motility reduction (p < .05) was observed through the PST and between the PST of 0 and 60 min for DM, both for treatments activated with SB and with SC. The SMI had a significant reduction (p < .05) after 60 min of post-thaw storage and the pH did not vary during PST. The fertility rate decreased significantly (p < .05) between time 0 and 60 min of PST. PST affects the seminal quality and fertility of P. orinoquensis, the best fertilization results were obtained by activating post-thawing sperm motility with 1 % SB. The long-term cryopreserved semen (seven years) of the species maintains its fertilization capacity with values like those obtained with fresh sperm. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

La suplementación vitamínica es importante para optimizar el potencial reproductivo del verraco. El objetivo de este estudio fue evaluar la calidad seminal del eyaculado de verracos suplementados con vitaminas liposolubles y el efecto de la durabilidad de las muestras de semen a través del tiempo. Se utilizaron cuatro verracos de una línea comercial terminal (Duroc*Pietrain) con edades promedio de 25,3±8,8 meses y de fertilidad conocida. Las muestras de semen se recogieron por la mañana, una vez por semana. Los animales se asignaron aleatoriamente a dos grupos y se alimentaron con cualquiera de los dos tratamientos durante 16 semanas: (1) tratamiento de control (TC, sin suplementos de vitaminas liposolubles), (2) tratamiento que contenía un 100 % de suplementos de vitaminas liposolubles (TS) a base de vitaminas liposolubles (A, D3, E). Se encontraron diferencias (P0,05) en los valores de movilidad total y progresiva a las 24 y 48 horas, pero si hubo una disminución significativa (P

El proceso de congelación-descongelación causa estrés oxidativo, estrés osmótico, shock térmico, formación de hielo intracelular, alteraciones en la composición de los lípidos y de las proteínas de la membrana plasmática, disminución de la viabilidad y motilidad espermática, daño a la mitocondria, al acrosoma, a la cola y promueve la fragmentación del ADN. La mitocondria es fuente de energía de la respiración y también el sitio principal de la generación de especies reactivas de oxigeno (EROs). Los antioxidantes deben estar presentes dentro de la mitocondria en grandes cantidades para que sean efectivos en la reducción de EROs. Sin embargo, la membrana interna mitocondrial no es permeable a la mayoría de las moléculas. Diversos estudios indican que la suplementación de antioxidantes durante el proceso de congelación del semen mejora la calidad del espermatozoide congelado-descongelado en diversos grados, pero aún existe una falta de un antioxidante eficaz reconocido. Existen pocos estudios sobre los efectos de la suplementación de un antioxidante dirigido a las mitocondrias en la criopreservación del semen, por lo que el objetivo del presente trabajo es evaluar el efecto de la adición de MitoTEMPO sobre la actividad mitocondrial y motilidad de los espermatozoides de bovino criopreservados en un diluyente comercial. La suplementación del antioxidante en el diluyente comercial, a diferentes concentraciones mejoró la motilidad espermática en un 13% y 17% con respecto al grupo control; disminuyo en un 29% y 18% las EROs y aumento el porcentaje de producción de ATP 257% y 161% en los espermatozoides de bovino congelados-descongelados. Estos resultados apoyan la importancia del uso de antioxidantes durante la criopreservación de los espermatozoides, concluyendo que el empleo de MitoTEMPO en concentraciones relativamente bajas en el diluyente mejora la calidad del semen después de la descongelación del semen.

BACKGROUND: Biotin is a vitamin that is currently marketed in pharmacological concentrations as an adjuvant in the treatment of diabetes, metabolic syndrome, and hyperlipemia, in addition to being widely used for cosmetic purposes. In previous studies, we found that pharmacological concentrations of biotin modify the morphology of various tissues, such as the pancreas, liver, and testes, which could modify their functions. Objective. To study the effect of different concentrations of biotin on sperm morphology and capacitance function. MATERIAL AND METHODS: Spermatozoa from Balb/c mice were incubated in a capacitating medium with different concentrations of biotin (10, 100, 590, and 5000 nanomolar). Morphology was performed by light microscopy and ultrastructure by Transmission Electron Microscopy (TEM). Motility was evaluated by the CASA (Computer Assisted Sperm Analysis System) method and the abundance of structural proteins by western blot and immunofluorescence. RESULTS AND DISCUSSION: Morphological analysis revealed a gradual deterioration of spermatozoa in the midpiece, depending on the dose and incubation time. By TEM, alterations in the plasma membrane, vacuolization of the mitochondria, and less dense and swollen fibers were visualized when compared to the control. Western-blot and immunofluorescence assays showed a decrease in the proteins of the dense fibers. Biotin decreased the progressive motility of the spermatozoa after 30 min of capacitation, being significant at 120 min with respect to the control. These effects could be due to the loss of proteins that form the axoneme and dense fibers, the two most important components of sperm motility. CONCLUSION: Taken together, the data show that biotin significantly damages flagellum structures, which affects sperm motility. These results warn about the possible harmful effects of ingesting supplements containing high amounts of biotin. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

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Prochilodus mariae es una especie endémica del río Orinoco, de gran importancia ecológica, cultural y económica, cuyo protocolo de crioconservación seminal aún no ha sido establecido. El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto del uso y la exclusión de la yema de huevo en el diluyente de crioconservación, sobre la calidad seminal de P. mariae. Para ello, el semen fresco de cinco machos sanos y sexualmente maduros fue diluido (1:6), empacado en pajillas (0,5 mL), congelado y almacenado en nitrógeno líquido. Se emplearon dos tratamientos: diluyente con yema de huevo (YH) y sin yema de huevo (SYH). Se evaluó motilidad, duración de la motilidad, morfología, integridad de membrana plasmática y fertilidad del semen descongelado, usando como control semen fresco. Los datos fueron tratados con estadística descriptiva y paramétrica, con un nivel de confianza del 95%. Los resultados demostraron que la exclusión de la yema de huevo mejoró significativamente la motilidad y la duración de la motilidad, aunque no presentó una influencia estadísticamente significativa sobre la integridad de membrana plasmática, la anormalidad morfológica y la fertilidad. La adición de la yema de huevo al diluyente de crioconservación no presentó el efecto crioprotector esperado, siendo necesario evaluar diferentes concentraciones e interacciones con otros componentes del diluyente.

RESUMO Objetivou-se avaliar o efeito do ácido docosa-hexaenoico (DHA), associado ou não ao Trolox®, na refrigeração de sêmen de garanhões da raça Mangalarga Marchador. Foram refrigerados 10 ejaculados nos diluidores: D1) BotuSêmen® (BS; controle); D2) BS + 30ngmL-1 de DHA (BS30DHA); D3) BS30DHA + 40µM de Trolox® (BS30DHA40T); D4) BS + 50ngmL-1 de DHA (BS50DHA); D5) BS50DHA + 40µM de Trolox® (BS50DHA40T). Após 48 horas de refrigeração, foram avaliados os parâmetros de movimento espermático, a integridade estrutural e funcional da membrana plasmática e a longevidade espermática. Todos os diluidores testados preservaram, de forma semelhante, a motilidade, a linearidade, a retilinearidade, a amplitude do deslocamento lateral da cabeça, a frequência do batimento flagelar cruzado, o percentual de hiperativos e a integridade estrutural e funcional da membrana espermática (P>0,05). O diluidor BS50DHA foi superior ao BS30DHA40T em preservar a VCL e a VSL e foi superior ao BS30DHA40T e ao BS50DHA40T em preservar a VAP e o índice de oscilação (P

RESUMO Os objetivos do presente estudo foram analisar a ultraestrutura do espermatozoide do jundiá amazônico e avaliar a sua criopreservação com três agentes crioprotetores (metanol 10%, DMSO 10% e etilenoglicol 10%) e duas soluções ativadoras (NaCl 0,29% e NaHCO3 1%). Como diluente, foi utilizada uma solução de glicose a 5%, sendo o sêmen envasado em palhetas de 0,25mL e congelado em vapor de nitrogênio (botijão dry shipper). No sêmen fresco, o espermatozoide apresentou comprimento de 25,46±2,54μm, cabeça esférica (1,51±0,18μm), ausência de acrossoma, peça intermediária com formato cônico (0,93±0,17μm), ligeiramente assimétrica, com presença de vesículas, e flagelo único (21,48±2,45μm). O sêmen descongelado apresentou valores mais altos (P

RESUMO A utilização da gema de ovo dificulta a padronização de meios diluidores e apresenta riscos biológicos. Assim, este estudo avaliou diferentes concentrações da lipoproteína de baixa densidade (LDL), em substituição à gema de ovo, para a confecção de diluentes para criopreservação espermática em ovinos. Foram utilizados um diluidor controle (CTR= 20% de gema de ovo) e cinco tratamentos, substituindo-se a gema pelas diferentes proporções de LDL (T1=6%; T2=8%; T3=12%; T4=16%; T5=20%), todos à base de TRIS-glicerol. Para o estudo, utilizaram-se dois ejaculados, de seis reprodutores da raça Santa Inês. Sessenta dias após a criopreservação, as amostras foram descongeladas e avaliadas subjetivamente quanto à motilidade total (MT, %) e progressiva (MP, %), ao vigor (1-5) e à integridade funcional (choque hisposmótico com água destilada, %) e estrutural (corante supravital eosina, %) das membranas espermáticas. As avaliações de vigor e funcionalidade de membrana não diferiram (P>0,05) entre os grupos. Entretanto, os grupos T4 (P

Introducción. Las condiciones óptimas de análisis seminal permiten estandarizar los protocolos de evaluación. Objetivo. Evaluar el efecto de factores externos relacionados con el seminograma sobre las subpoblaciones espermáticas de bovinos de la raza Brahman. Materiales y métodos. El estudio se realizó con animales de dos fincas ganaderas de Alajuela, Costa Rica, de septiembre a diciembre de 2019. Se utilizaron diez toros Brahman que fueron electroeyaculados y el semen se diluyó con tres diluyentes comerciales: Andromed®, Androstar® y BTS, a dos temperaturas (37 y 29 °C). Las muestras se analizaron mediante un sistema CASA-Mot ISAS®v1 y se utilizaron cámaras de recuento ISAS®D4C (10, 16 y 20 μm) y Spermtrack® en diferentes tiempos de análisis (0, 3, 6 y 12 h). Resultados. La Spermtrack® presentó mayor velocidad curvilínea pero menor linealidad respecto de las otras cámaras de recuento (p

Antecedentes: la criopreservación de semen causa un gran daño físico y químico a la estructura de los espermatozoides, el cual les trae como consecuencia envejecimiento prematuro, reducción de la viabilidad y disminución de la fertilidad. Las adiciones de antioxidantes a los diluyentes de congelación pueden reducir el daño oxidativo causado por la generación excesiva de especies reactivas de oxígeno, y también el envejecimiento prematuro se puede reducir adicionando un inhibidor enzimático que prevenga una capacitación espermática anticipada. Objetivo: el objetivo de este estudio fue evaluar el efecto in vitro sobre la cinemática espermática, de la adición de quercetina (Q), L-ergotioneína (E) y H89 al diluyente de congelación de espermatozoides equinos sujetos a criopreservación. Métodos: se establecieron seis grupos experimentales: control, Q (100 µM), E (150 µM), H89 (20 µM‚) H89 + Q y H89 + E. Se analizó la movilidad y cinética espermática mediante un sistema de análisis espermático asistido por computador (CASA). Resultados: la Q incrementó la BCF con respecto al control (2,29 vs 2,18 µm/s), mientras H89 + Q redujo la motilidad total (24,43 vs 35,77 µm/s), motilidad progresiva (17,39 vs 25,27 µm/s), y espermatozoides con signos de hiperactivación (2,12 vs 2,42 µm/s). Por otro lado, H89, H89 + Q y H89 + E disminuyeron la VCL (77,76, 79,95 y 78,93 vs 83,44 µm/s) y ALH (2,78, 2,84 y 2,79 vs 2,95 µm) (p < 0‚05). No se observaron diferencias estadísticas significativas entre tratamientos para otros patrones cinemáticos. Conclusiones: los resultados muestran que H89 disminuye signos de capacitación prematura en espermatozoides equinos criopreservados, y que Q, E y la combinación de ambas moléculas con H89 reducen los patrones cinemáticos importantes para la fertilización. Probablemente haya un efecto nocivo de las concentraciones de las moléculas evaluadas. Se necesitarán evaluaciones posteriores de rangos de dosis para corroborar esta hipótesis. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Antecedentes: el uso de antioxidantes para la conservación del semen permite prevenir el daño oxidativo causado por las especies reactivas de oxígeno (EROs). Uno de los antioxidantes naturales más prometedores es el resveratrol (R), una fitoalexina derivada de plantas, uvas, bayas, cacahuetes y vino tinto, que posee mayor actividad antioxidante que las vitaminas E y C. Objetivo: evaluar el efecto del resveratrol sobre la calidad y el estado oxidativo / antioxidante del semen bovino criopreservado. Métodos: cinco toros entre 3 y 7 años, fueron sometidos tres veces a electroeyaculación para obtener 15 eyaculados. Cada eyaculado fue diluido con un medio a base de tris - yema de huevo - glicerol a 60 x 106 espermatozoides/mL, y fue fraccionado en seis alícuotas suplementadas con 0 (control), 10, 20, 30, 40 y 50 µM de R. El semen se congeló con vapores de nitrógeno líquido. Posdescongelación, se evaluó la movilidad y cinética espermática por un sistema CASA, la integridad de membrana por la prueba hiposmótica, la morfología por tinción con eosina - nigrosina, y la vitalidad y actividad mitocondrial por microscopía de fluorescencia con las sondas SYBR14/IP y JC1, respectivamente. Además, se evaluó la capacidad antioxidante total (CAT) por el método ABTS•+ y la producción de EROs por espectrofluorimetría con la sonda H2DCFDA. Para el análisis estadístico se ajustaron modelos lineales y se compararon las medias por Tukey. Resultados: en todas las concentraciones evaluadas, R redujo la movilidad total y progresiva del semen descongelado (p < 0,05). La suplementación con 40 y 50 µM de R, redujo (p < 0,05) la velocidad espermática, y entre 30 y 50 µM de R se observaron alteraciones en la membrana y morfología espermática. Sin embargo, el uso de R a 50 µM aumentó la CAT, y a 20 µM redujo la producción de EROs del semen bovino criopreservado. Conclusión: el resveratrol puede incrementar la capacidad antioxidante total y reducir la producción de EROs del semen bovino congelado, sin embargo, su uso en un rango entre 10 y 50 µM, reduce la calidad del semen posdescongelación. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

O processo de criopreservação acarreta estresse oxidativo à célula espermática e a adição de antioxidantes aos meios de refrigeração e congelação de sêmen pode auxiliar na proteção dos espermatozoides contra o dano induzido pelas espécies reativas de oxigênio (ROS), incluindo perda da motilidade de forma irreversível, peroxidação lipídica e fragmentação do DNA, interferindo na capacidade de fertilização do espermatozoide. Objetivou-se com este trabalho avaliar o efeito da adição dos antioxidantes Hidroxi butiltolueno (BHT) e extrato etanólico da casca do caule do mufumbo (Cumbretum leprosum) ao diluidor Botucrio® para criopreservação de sêmen equino. Foram coletados quatro ejaculados de quatro garanhões da raça Quarto de Milha, por meio de vagina artificial. Após a descongelação das amostras em banho maria a 37ºC foi estimada a taxa de peroxidação lipídica dos espermatozoides pela medida do nível de malonaldeído. O delineamento experimental foi em bloco ao acaso. As variáveis de volume seminal, motilidade espermática, vigor espermático e HOST foram submetidas a análise de variância (ANOVA) utilizando-se o procedimento modelos lineares gerais (Proc GLM) e para comparação de média foi utilizado o teste Tukey, na probabilidade de 5%. A quantificação malonaldeído foi submetida a Análise de Variância (ANOVA), seguido de Tukey como post hoc teste, na probabilidade de 5%. Não houve diferença, pois o acréscimo de BHT nas concentrações 5, 1,0 e 2,0 mM de BHT e de extrato de mufumbo nas doses de 30, 60 e 120 mg ao diluidor Botucrio não melhorou a na qualidade espermática. Desta formas os antioxidantes não foram determinantes em promover a diminuição formação de radicais livres e, consequentemente, não melhoraram a qualidade do sêmen após a crioinjúria provocando danos à membrana dos espermatozoides. A suplementação nas doses 0,5, 1,0 e 2,0 mM de BHT e de extrato de mufumbo nas doses de 30, 60 e 120 mg ao diluidor botucrio® não influenciou na qualidade seminal pós criopreservação.

O testículo é um órgão com função exócrina, relacionada com a produção, armazenamento e transporte de espermatozóides, e função endócrina relacionada com a produção de hormônios andrógenos como a testosterona. É subdividido em dois compartimentos – tubular e intertubular – compostos por tipos celulares que desempenham funções distintas. Dentre as células que compõem a gônada masculina, destacam-se as células germinativas, que originarão os espermatozóides; as células de Sertoli e as células de Leydig. O objetivo desta revisão é descrever as características estruturais dos testículos, dos tipos celulares que o compõe e as suas respectivas funções.

Introducción. La comprensión de la variabilidad en los valores de la cinética de los espermatozoides, por medio de diferentes profundidades de cámaras, demuestra la importancia de crear un estándar para los métodos de control de calidad en la industria de la inseminación artificial (IA). Objetivo. El objetivo del presente trabajo fue evaluar los parámetros de cinética de los espermatozoides con base en diferentes profundidades de cámara de visualización mediante un sistema comercial de análisis de esperma asistidos por computadora, CASA-Mot. Materiales y Métodos. Se utilizaron veinte dosis seminales de diez verracos pietrain. El periodo experimental fue de febrero a julio del año 2017. Se utilizó el sistema integrado de análisis de semen (ISAS®v1) con una frecuencia de captura de 50 Hz. Se utilizaron cámaras de recuento ISAS®D4C16 e ISAS®D4C20 con una altura de 16 y 20 μm, respectivamente y precalentadas a 37 °C. Resultados. Se encontraron valores superiores (p

Na região Nordeste, o efeito climatológico bem característico da seca afeta a temperatura e a disponibilidade de alimentos, podendo influenciar a atividade sexual do macho caprino. Apesar de serem considerados animais adaptados ao clima semiárido, os caprinos também podem sofrer estresse térmico. As características seminais e a biometria testicular (BT) apresentam grande variação entre raças e até mesmo entre indivíduos da mesma raça, afetando o desempenho desses animais. Contudo, apesar do expressivo número de caprinos criados no Nordeste brasileiro, ainda há uma escassez de dados sobre o potencial reprodutivo desses animais. Assim, este trabalho tem por objetivo avaliar os parâmetros andrológicos de bodes Anglonubiano, submetidos às condições semiáridas. O estudo foi realizado no período de janeiro a abril de 2016, em propriedades localizadas no município de Crateús, estado do Ceará, inserido na região semiárida nordestina. Foram utilizados seis machos caprinos Anglonubiano, com idade entre 12 e 36 meses, os quais foram alimentados com pastagem nativa, além de água e sal mineral, ad libitum. Semanalmente, foram avaliados os parâmetros: BT, libido, volume e parâmetros seminais. Essas variáveis foram submetidas à análise de variância pelo Teste de Mann Whitney Wilcoxon, utilizando o programa Assistat 7.7. Os dados foram expressos como média ± desvio padrão. As médias para BT, libido e volume seminal foram 24,9 ± 2,2 cm, 17,9 ±7,6 s e 1,5 ± 0,6 mL, respectivamente. A cor do sêmen foi amarela em 96,9% e o aspecto foi leitoso em 71,9% das coletas. Os valores médios obtidos para motilidade massal, percentual de espermatozoides móveis, vigor e concentração espermática foram 3,8 ± 0,8, 72,8 ± 23,2%, 3,4 ± 1,0 e 2,2 ± 1,0 bilhões/mL, respectivamente. Tais parâmetros apresentaram-se normais para a espécie caprina. Conclui-se que os parâmetros andrológicos dos animais avaliados apresentaram valores aceitáveis para a utilização destes como reprodutores. O clima semiárido não afetou a eficiência reprodutiva dos bodes utilizados, demonstrando a adaptabilidade dos mesmos.

El análisis de la concentración espermá- tica en los eyaculados de verraco constituye una estimación de calidad en granjas dedicadas a la venta de dosis seminales e inseminación artifi- cial. El objetivo del presente estudio fue determi- nar las diferencias en precisión entre métodos de estimación de la concentración espermática. Se analizaron 174 eyaculados de verracos Duroc y Pietrain, pertenecientes a la granja del Programa de Producción Agropecuaria (PPA) de la Escuela de Agronomía del Instituto Tecnológico de Costa Rica. La concentración fue estimada por 3 méto- dos: espermadensímetro (ED), espectrofotómetro (EF) y sistema automatizado de análisis de semen (casa). La concentración más baja (p

El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto de los cambios de temperatura durante el proceso de criopreservación sobre las dimensiones y la forma de la cabeza espermática en semen de caprinos. Se evaluaron 56 eyaculados de 7 machos cabríos de reconocida fertilidad utilizando el sistema de Análisis Computarizado de la Morfometría Espermática (ASMA), determinando: Longitud (L), Ancho (W), Área (A), Perímetro (P), Elipticidad (E), Rugosidad (R), Elongación (El), Regularidad (RE) y el factor de forma de la cabeza espermática (P2A). Los parámetros obtenidos se analizaron mediante el procedimiento FASTCLUS para obtener las subpoblaciones espermáticas (SP) y su porcentaje en cada fase del proceso. En semen recién colectado, la SP1 estuvo representada por los espermatozoides (SPZ) de mayor longitud (35,12%), la SP2 con espermios de mayor anchura y menor elipticidad (36,81%), la SP3 obtuvo medidas promedio (9,58%), mientras que SP4 contenía los espermios más pequeños (18,48%). Durante el proceso de refrigeración, la SP1 (32,93%) mostró SPZ de mayor longitud, la SP4 (18,54%) pequeños, no obstante, la SP3 (12,88%) es más parecida a la SP1, y la SP2 (35,66%) presenta espermios no hidrodinámicos (muy anchos). Al descongelar, la SP2 (33,12%) presentó espermios de mayor anchura, la SP1 (30,92%) espermios de mayor longitud y elípticos (hidrodinámicos), la SP3 (14,43%) es parecida a la SP1 y la SP4 (21,53%) se caracteriza por presentar células pequeñas. Se observaron efectos mínimos del proceso de criopreservación sobre la morfometría espermática en el semen caprino, hecho comprobado al observar la frecuencia de distribución de espermios y las características de sus formas para cada SP. La estructura de la SP se mantuvo relativamente constante después del periodo de refrigeración y del almacenamiento en nitrógeno líquido. En conclusión, la criopreservación no modificó sustancialmente los parámetros específicos como la distribución de los SPZ dentro de las SP (menos del 5% de cambios).

Prochilodus mariae is an endemic species from Orinoco River, of great ecological, cultural and economic importance, whose seminal cryopreservation protocol has not yet been established. The aim of this work was to evaluate the effect of use and exclusion of egg yolk in the cryopreservation diluent, on the seminal quality of P. mariae. Thus, fresh semen of five healthy and sexually mature males was diluted (1:6), packed in 0,5 mL straws, frozen and stored in liquid nitrogen. Two treatments were used: diluent with egg yolk (YH) and diluent without egg yolk (SYH). Motility, motility duration, morphology, plasma membrane integrity and fertility of thawed semen were evaluated, using fresh semen as control. The data were treated with descriptive and parametric statistics, with a confidence level of 95%. The results showed that exclusion of egg yolk significantly improved motility and motility duration, although it did not have a statistically significant influence on plasma membrane integrity, morphological abnormality and fertility. The addition of the egg yolk to the cryopreservation diluent did not present the expected cryoprotective effect. It's necessary to evaluate different concentrations of egg yolk and its interactions with other components of the diluent. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

In cryopreserved semen, the freezing/thawing process following of manipulation, damage the sperm cell, decreasing the fertilizing capacity of the thawed sperm; being one of the main factors of this damage the oxidative stress. The sperm once thawed can be protected from this damage, with the addition of antioxidants to the incubation medium. The Calafate fruit (Berberis microphylla G. Forst.) has a high antioxidant capacity, making it an interesting resource for investigating the effect of its antioxidant components on biotechnological processes. The objective of this study was to determine the effect of supplementation of Calafate fruit lyophilized extract (ELC) on sperm quality. The lyophilized extract of the Calafate fruit was characterized, determining the antioxidant activity and metabolites such as phenols and anthocyanins; subsequently, thawed bovine sperm were incubated in a medium supplemented with different concentrations of ELC. Post-incubation, progressive motility was evaluated. By flow cytometry, the viability and integrity of the plasma (SYBR14-PI), and acrosomal (FITC-PNA / PI), as well as lipid peroxidation (BODIPY), was determined. The characterization of Calafate fruits lyophilized extract indicated that antioxidant activity, phenols and anthocyanins increased concomitantly with the increase of dose extract used. The addition of ELC to the incubation medium, depending on the concentration and incubation time, would be effective to protect motility, viability and integrity of the plasma membrane and decreased lipid peroxidation in thawed bovine sperm. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

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El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto de la semilla de linaza (Linum usitatissimum) en la calidad física y morfológica del semen fresco y refrigerado de conejos. Se emplearon 20 machos Nueva Zelandia distribuidos en grupos según niveles de inclusión de semilla en su dieta durante 100 días: 0 %, 3 %, 6 % y 9 %. 15 días después de iniciar el suministro de la dieta se realizaron colectas seminales una vez por semana con vagina artificial y una hembra como maniquí. Para la evaluación física y morfológica se diluyó en medio Tris-yema y refrigerado a 5 °C; se valoró la motilidad espermática progresiva, el vigor espermático y la morfología espermática a las 0, 2, 12, 24, 48 y 72 horas post-refrigeración. La información fue analizada mediante análisis de varianza y de regresión al 5 % de significancia. Para la morfología, volumen, color y aspecto seminal del semen fresco (p > 0,05) no hubo diferencia. Para volumen, turbidez, motilidad, vigor y concentración, hubo valores medios de 0,92 ± 0,24 mL; 0,86 ± 0,35; 76,58 ± 7,13 %; 3,37 ± 0,28 y 205,75 ± 20,77 × 106 sptz, respectivamente. Hubo diferencia para motilidad y vigor espermático a las 0, 2, 12, 24, 48 y 72 horas post-refrigeración (p

A criopreservação dos espermatozoides epididimários é uma ferramenta útil para preservar o potencial genético de um animal valioso. Além disso, o gato doméstico é modelo eleito para o estudo e desenvolvimento da criogenia para os demais felinos. Contudo, para o sucesso dessa biotécnica é essencial o controle de todo o processo de criopreservação. Assim, objetivou-se avaliar o efeito do tempo de equilíbrio da glicerolização e das etapas da congelação-descongelação sobre a qualidade dos espermatozoides epididimários de gato doméstico. Para tanto, espermatozoides epididimários foram recuperados com TRIS e imediatamente avaliados quanto à motilidade total (MT), vigor, viabilidade, funcionalidade de membrana (HOST) e morfologia. Em seguida, as amostras foram adicionadas de TRIS-gema a 20%, fracionadas igualmente em dois tubos de 1,5 mL, refrigeradas a 4 ºC por 1 hora e, posteriormente, adicionadas de glicerol na concentração final de 5%. As amostras foram incubadas com glicerol (tempo de equilíbrio) por 5 ou 10 minutos (grupos G5 e G10, respectivamente) e depois congeladas. A descongelação ocorreu a 37 ºC por 30 segundos. As amostras foram avaliadas em todas as etapas. Uma redução na MT foi observada apenas na pós-descongelação, no entanto G5 (39,00 ± 4,07%) foi superior ao G10 (18,50 ± 4,54%). O vigor declinou pós-descongelação em ambos os grupos; contudo, não diferiram entre si. A viabilidade espermática foi mantida no G5 pós-glicerolização (53,60 ± 2,59%), diferentemente do observado em G10, em que a amostra glicerolizada (48,80 ± 2,93%) reduziu em relação à fresca (59,90 ± 1,74%). A viabilidade pós-descongelação de G5 (33,80 ± 1,89%) foi superior à de G10 (18,80 ± 3,01%). No HOST, uma redução da viabilidade só foi observada pós-descongelação, não havendo diferença entre os grupos (41,50 ± 2,84% para G5 e 40,20 ± 3,49% para G10). Em relação à morfologia espermática, os espermatozoides normais diminuíram, enquanto os espermatozoides com defeitos secundários pós-descongelação aumentaram em ambos os grupos. Conclui-se que um menor tempo de equilíbrio para a glicerolização preserva melhor a qualidade dos espermatozoides epididimários e a etapa mais crítica do processo de congelação-descongelação é a descongelação.

'Este trabalho tem como objetivo avaliar o efeito do horário de aplicação da gonadotrofina coriônica humana (hCG), sobre os parâmetros reprodutivos de 40 machos das variedades de tilápias do Nilo GIFT e UFLA. O experimento foi conduzido no Laboratório de Recirculação de Água da Estação de Piscicultura, do Departamento de Zootecnia da Universidade Federal de Lavras - MG. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, em esquema fatorial 2 x 4 (duas variedades e quatro horários de aplicação do hCG) com cinco repetições. Foram utilizados 20 machos da variedade GIFT e 20 machos da variedade UFLA, microchipados e alojados em um sistema de recirculação de água. Os horários foram 6, 12, 18 e 24 horas. A dosagem de hCG foi realizada em dose única. Foram analisadas as variáveis: taxa e duração da motilidade espermática, morfologia espermática, volume de sêmen e a concentração de espermatozoides do sêmen. Os dados obtidos foram submetidos à análise da variância e as médias foram comparadas pelo teste SNK a 5% de significância. O horário de aplicação e a variedade utilizada nao influenciaram as variáveis analisadas, porém a variedade UFLA apresentou um maior número de animais que espermiaram. A concentração apresentou uma media de 5,73 x 105 espermatozoide/mL para a variedade UFLA e 4,71 x 105 espermatozoide/ mL para a variedade GIFT. O volume de sêmen encontrado para a GIFT foi de 0,9 mL enquanto para a UFLA foi de 0,6 mL. A motilidade espermática encontrada foi de 96,5% com duração de 4,33 minutos para a variedade UFLA e 88,4% com duração de 4,8 minutos para variedade GIFT. A quantidade de células espermáticas normais apresentou uma média de 86,35% para a variedade UFLA e 86,46% para a variedade GIFT. A indução com hCG em diferentes horários de aplicação não apresentou diferença significativa sobre os parâmetros de qualidade espermática dos machos de tilápia.

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La integridad del ADN de los espermatozoides, es un indicador importante de la fertilidad, se utiliza como una variable adicional para evaluar, junto al espermograma, la calidad de una muestra seminal. En el presente trabajo se describen algunos aspectos de interés relacionados con la fragmentación del ADN espermático, cuya etiología es multifactorial y está relacionada con factores intrínsicos, como el empaquetamiento anormal de la cromatina durante la espermiogénesis, la apoptosis defectuosa antes de la eyaculación y la producción excesiva de especies reactivas del oxígeno; y con factores extrínsecos, como son los cambios en los hábitos de vida, la exposición a agentes tóxicos, así como la edad avanzada. La fragmentación está asociada al deterioro de las variables seminales, además afecta la fertilidad natural y la realizada por tratamientos de reproducción asistida, por lo que la implementación en los laboratorios de Andrología, de la tecnología para detectar si el ADN de los espermatozoides está íntegro o fragmentado, incorpora un nuevo conocimiento en el estudio de los hombres con trastornos de fertilidad, lo que contribuye a mejorar el diagnóstico y pronóstico de la infertilidad masculina. Para realizar este trabajo se revisaron 122 artículos, de los cuales 84 cumplieron con los criterios de calidad esperados. La búsqueda se realizó a través de los buscadores habituales.

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O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da adição de mio-inositol ao sêmen caprino pós-descongelação. Amostras seminais de diferentes reprodutores caprinos da raça Boer (n=3) foram descongeladas (37 °C/30s) e homogeneizadas para formação do pool. Quatro grupos experimentais foram formados: GC=grupo controle, sem adição de antioxidante; G1=sêmen + 5 mM de mio-inositol; G2=sêmen + 15 mM de mio-inositol; G3=sêmen + 30 mM de mio-inositol, sendo submetidos às avaliações de motilidade subjetiva, integridade e funcionalidade da membrana plasmática nos períodos 0h, 2h a 25 °C e 2h a 37 °C pós-descongelação. Os dados foram submetidos à análise de variância (ANOVA) e teste de Tukey, com nível de significância de 5%. Não houve diferença (P>0,05) entre os grupos controle e os suplementados com mio-inositol para o parâmetro de motilidade total nos momentos pós-descongelação e 2h de incubação a 25 ºC. No momento 2h a 37 °C houve redução de 30% (P0,05) para os parâmetros de integridade e funcionalidade da membrana plasmática entre os grupos tratados e o grupo controle. A adição de mio-inositol, na concentração de 30 mM, reduz a motilidade de espermatozoides caprinos após duas horas de incubação a 37 °C.

Objective: To investigate the effect of icariin on the transformation efficiency of germ cell-like cells from mouse induced pluripotent stem cells into sperm cells in vitro., Methods: Firstly, mouse induced pluripotent stem cells were induced and cultured to transform into germ cell-like cells, and the primordial germ cell-like cells were identified by Western blot and RT-PCR. Then, different concentrations of icariin (0.1μg/mL, 1μg/mL, 10μg/mL and 100μg/mL) were added into the culture medium, and the obtained primitive germ cell-like cells were cultured, Western blot and RT-PCR were used to identify the obtained sperm cells, the transformation efficiency was compared., Results: The primordium germ cell-like cells obtained from mouse induced pluripotent stem cells in vitro specially expressed Oct-4 protein, C-kit protein, Mvh mRNA, Fragilis mRNA and Stella mRNA. The sperm cells were specially expressed VASA, SCP3 and γH2AX proteins. RT-PCR showed that the sperm cells were specially expressed Ddx4, Tp2 and Prm1 mRNA. Compared with the control group, the expression level of VASA protein (1.744±0.283, 2.882±0.373, 6.489±0.460), SCP3 protein (2.250±0.306, 7.058±0.521, 8.654±0.804), γH2AX protein (4.304±0.433, 5.713±0.339, 9.268±0.545), Ddx4 mRNA (1.374±0.145, 2.846±0.194, 4.021±0.154), Tp2 mRNA (1.358±0.130, 3.623±0.326, 5.811±0.390) and Prm1 mRNA (1.326±0.162, 3.487±0.237, 4.666±0.307) in 0.1μg/mL, 1μg/mL, 10μg/mL icariin experimental groups were all lower than that of VASA protein (10.560±0.413), SCP3 protein (13.804±0.642), γH2AX protein (11.874±0.464), Ddx4 mRNA (6.4005±0.361), Tp2 mRNA (7.314±0.256) and Prm1 mRNA (7.334±0.390) in 100μg/mL icariin experimental group., Conclusions: Icariin can promote the transformation of mouse induced pluripotent stem cells into sperm cells in vitro, and it is concentration-dependent manner in a certain concentration range., (Copyright © 2023 Asociación Española de Andrología, Medicina Sexual y Reproductiva. Publicado por Elsevier España, S.L.U. All rights reserved.)

Objetivou-se com o presente trabalho caracterizar qualitativamente e quantitativamente o sêmen de tambaqui durante o período reprodutivo. Foram realizadas três coletas, com intervalos regulares de aproximadamente 30 dias no período reprodutivo de 2012/2013. Foram utilizados dez reprodutores de no mínimo três anos de idade. Para a coleta de sêmen foi realizada indução hormonal com extrato de hipófise de carpa, e a extração do sêmen ocorreu por massagem abdominal. Após coleta, o sêmen foi submetido a avaliações de motilidade, vigor, tempo de vida, volume do ejaculado e concentração espermática. As variáveis quantitativas foram submetidas à análise de variância (ANOVA) e teste de Tukey, e as variáveis qualitativas ao teste de Friedman, com significância de 0,05. Não foram observadas diferenças significativas (p>0,05) para a maioria dos parâmetros avaliados. A concentração espermática variou significativamente entre as coletas (14,5, 3,7, e 8,3x109 espermatozoides/mL) e o tempo de vida diminuiu significativamente entre a segunda e terceira coletas (267,8 e 98,5 segundos, respectivamente).

Chromatographic profile of seminal plasma from '9 young Guzerat bulls, and their associations with andrologic traits and testosterone were evaluated. Total seminal plasma protein concentrations ranged from 2.86 to 78.82 mg/ml, average of '7.18 ± 20.49 mg/ ml. The seminal plasma protein profile by gel filtration showed eight different fractions, being some of them correlated to age, body weight, scrotal circumference, physical (sperm motility and concentration) and morphologic (mojar sperm defects) of the semen. These concentrations were correlated (p<0.05) with body weight and testosterone serum levels, showing the influence of the nutritional condition, and the dependence for testosterone, in the secretion of those proteins; as well as with the sperm concentration and seminal volume suggesting that most of the proteins present in the seminal plasma has as origin the testicles and the accessory sex glands. One's can conclude that the evaluations of seminal proteins concentrations of Guzerat young bulls shows favorably association with some seminal traits in the moment of the ejaculation, acting as biochemical markers for selection of bulls aiming at high fertility. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

This study aims to qualitatively and quantitatively characterize the semen of tambaqui (Colossoma macropomum) during the breeding season. Three samplings were made at regular intervals of approximately 30 days in the 2012/2013 breeding season. Ten adult males of at least three years old age were selected. To collect the semen, hormonal induction was performed with carp pituitary extract, and extraction occurred by abdominal massage. After collection, the semen was subjected to evaluation of motility, vigor, lifetime, ejaculate volume, and sperm concentration. Analysis of variance (ANOVA) and Tukey test were applied on quantitative variables, while the Freedman test was used with 0.05 significance on qualitative variables. No significant differences (p>0.05) were observed for most parameters evaluated. Sperm concentration significantly varied between samples (14.5, 3.7, and 8.3x109 sperm/mL) and lifetime decreased significantly between the second and third samples (267.8 e 98.5 seconds, respectively). [ABSTRACT FROM AUTHOR]