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RESUMEN: El aguacate (Persea americana Mill.) se ha convertido en uno de los frutos más importantes en el mundo, donde México es el principal productor y exportador a nivel mundial, esto ha provocado un acelerado crecimiento en el establecimiento de plantaciones de monocultivo de aguacate, favoreciendo el incremento de plagas de insectos y ácaros, lo que ha dirigido la búsqueda de estrategias de control biológico para un manejo integrado de plagas. El objetivo de este estudio fue aislar hongos entomopatógenos del suelo, e identificar mediante el factor de elongación de la traducción 1-α (5’TEF), las especies presentes en un huerto convencional de aguacate. Durante el muestreo se obtuvo un total de 34 aislados, pertenecientes al género Metarhizium, 23 aislados identificados como Metarhizium robertsii y 11 como Metarhizium guizhouense. Estos resultados muestran la escasa diversidad de especies de hongos entomopatógenos asociados a la rizosfera del cultivo del aguacate, y sugieren que, su presencia podría estar asociada a su capacidad para resistir las prácticas agronómicas, las cuales inducen su actividad endófita. Es necesario comprender el papel que desempeña Metarhizium en la rizosfera, esto permitirá desarrollar programas de control biológico específicos para cada cultivo, y así garantizar su éxito en el control de plagas. ABSTRACT: Avocado (Persea americana Mill.) has become one of the most important fruits in the world, being Mexico the main producer and exporter worldwide, it has led to an accelerated growth in the establishment of monoculture avocado plantations, promoting the increase of insect and mite pests, which has led to the need for biological control strategies for integrated pest management. The objective of this study was to isolate entomopathogenic fungi from the soil of a conventional avocado orchard and identify them by translation elongation factor 1-α (5’TEF). During the sampling, a total of 34 isolates were obtained, belonging to the genus Metarhizium, 23 isolates identified as Metarhizium robertsii and 11 as Metarhizium guizhouense. These results show the low diversity of entomopathogenic fungi species associated with the rhizosphere of the avocado crop and suggest that their occurrence could be associated with their ability to survive agronomic practices that induce their endophytic activity. It is necessary to understand the role of Metarhizium in the rhizosphere, this will allow the development of biological control programs specific for each crop, and thus guarantee its success in pest control.

Resumen Introducción. El incremento en la producción de piña (Ananas comosus (L.) Merr.) exige al mercado frutas de buena calidad, con menor impacto ambiental y mínimo uso de productos químicos. Objetivo. Determinar la dosis efectiva del hongo Bauveria bassiana y la formulación adecuada como bioinsecticida para el control de tecla (Strymon megarus Godart) en el cultivo de piña. Materiales y métodos. La investigación se realizó de febrero a abril de 2019 en una finca en Río Jiménez, Guácimo, Limón, Costa Rica. Se estableció un diseño de parcelas irrestricto al azar con medias repetidas en el tiempo con siete tratamientos y cinco réplicas por tratamiento. Para cada réplica se tomaron semanalmente datos de veinticinco frutos de piña, desde los 50 hasta los 92 días después de la inducción floral (ddf). Los tratamientos fueron: B. bassiana WP en dosis de 1,0, 2,0 y 3,0 kg ha-1, dos tratamientos de B. bassiana a 3 kg ha-1, coadyuvante Carrier y formulación miscible en aceite (OL); además, se tuvo un testigo absoluto sin aplicación de insecticida y un insecticida biológico Turex 3,8 WP (Bacillus thuringiensis) a 1,0 kg ha-1. Se realizaron cinco aspersiones por tratamiento, la primera a los 50 ddf y el resto con intervalos de siete días hasta llegar a los 78 días. Resultados. Todos los tratamientos mostraron una menor incidencia de daño viejo (gomosis) comparado con el testigo absoluto. Solo el T7 (testigo comercial B. thurigiensis 1 kg ha-1) y el T2 (B. bassiana a 1 kg ha-1) mostraron una incidencia de daño menor al 5 %, durante todo el periodo de evaluación sin diferencias significativas entre ellos, pero sí con el resto de los tratamientos. Conclusión. Los tratamientos T7 (testigo comercial B. thurigiensis 1 kg ha-1) y T2 (B. bassiana a 1 kg ha-1), fueron los más efectivos para el control de Strymon megarus Godart en el cultivo de piña. Abstract Introduction. The increase in pineapple (Ananas comosus (L.) Merr.) production demands good quality fruits from the market, with less environmental impact and minimal use of chemical products. Objective. To determine the effective dose of the fungus Beauveria bassiana and the appropriate formulation as a bioinsecticide for the control of key (Strymon megarus Godart) in pineapple crop. Materials and methods. This research was developed from February to April 2019 on a farm at Río Jiménez, Guácimo, Limón, Costa Rica. An unrestricted randomized plot design with repeated means over time was established with seven treatments and five replicates per treatment. For each replicate, data from twenty-five pineapple fruits were collected weekly, from 50 to 92 days after floral induction (ddf). The treatments were: B. bassiana WP at doses of 1.0, 2.0, and 3.0 kg ha-1, two treatments of B. bassiana at 3 kg ha-1, Carrier adjuvant, and oil-miscible formulation (OL), there were also an absolute control without insecticide application, and a biological insecticide Turex 3.8 WP (Bacillus thuringiensis) at 1.0 kg ha-1. Five sprays were made per treatment, the first at 50 ddf, and the rest at seven-day intervals until reaching 78 days. Results. All treatments showed a lower incidence of old damage (gummosis) compared to the absolute control. Only the T7 (comercial control B. thurigiensis 1 kg ha-1) and T2 (B. bassiana a 1 kg ha-1) treatments showed a damage incidence lower than 5 % during the whole evaluation period without significant differences between them, but with the rest of the treatments. Conclusion. The T7 (commercial control B. thurigiensis 1 kg ha-1) and T2 (B. bassiana 1 kg ha-1), treatments were the most effective for the control of Strymon megarus Godart in pineapple crops.

El uso excesivo de fitosanitarios químicos para control de trips y del virus del bronceado del tomate (TSWV), no solo resulta nocivo para la salud humana, el ambiente y la biodiversidad, sino que al generar resistencia por parte de las plagas se vuelve ineficiente. En consecuencia, para lograr una producción sustentable y libre de residuos químicos, se deben explorar alternativas de control. Este trabajo plantea utilizar al hongo Beauveria bassiana (BB) en combinación con cobertura de entresurcos (CES) para disminuir la población de trips y la incidencia de TSWV. Para tal fin se realizó un ensayo en pimiento dulce de invernadero ubicado en Florencio Varela. El diseño experimental constó de cuatro tratamientos distribuidos al azar con cuatro repeticiones de 66 plantas cada una. Los tratamientos se identificaron como: T (sin inoculación de BB y sin CES), TC (con CES), B (coninoculación de BB) y BC (con inoculación de BB y CES). Se utilizó la cepa B. bassiana CEP147, por resultar efectiva en ensayos previos de laboratorio. Luego de detectar un trips por flor se realizaron cinco aplicaciones por pulverización foliar con un intervalo semanal. El ensayo duró cuatro meses, tiempo en el que se registró semanalmente la cantidad de trips en las tres plantas centrales de cada repetición, la presencia de enemigos naturales y TSWV y el rendimiento del cultivo, registrando cantidad de frutos, peso, largo, ancho y sanidad de los mismos. Los resultados arrojaron diferencias significativas entre los tratamientos, registrándose la menor cantidad de ninfas en el tratamiento B y de adultos en el tratamiento BC. Luego de la última aplicación la población de trips se mantuvo en niveles medios de abundancia, la incidencia de TSWV fue muy escasa y se incrementó la presencia del ácaro depredador Euseius fructicolus, que pudo haber contribuido al control de la plaga. Los frutos presentaron diferencias significativas, obteniéndose los más largos y más pesados en el tratamiento BC. Los resultados demostraron que es posible la producción sustentable de pimiento combinando simplemente el control biológico y el cultural, sin la aplicación de plaguicidas químicos., Facultad de Ciencias Agrarias y Forestales

Introduction.The increase in pineapple (Ananas comosus(L.) Merr.) production demands good quality fruits from the market, with less environmental impact and minimal use of chemical products.Objective.To determine the effective dose of the fungusBeauveria bassianaand the appropriate formulation as a bioinsecticide for the control of key (Strymon megarusGodart) in pineapple crop.Materials and methods.This research was developed from February to April 2019 on a farm at Río Jiménez, Guácimo, Limón, Costa Rica. An unrestricted randomized plot design with repeated means over time was established with seven treatments and five replicates per treatment. For each replicate, data from twenty-five pineapple fruits were collected weekly, from 50 to 92 days after floral induction (ddf). The treatments were:B. bassianaWP at doses of 1.0, 2.0, and 3.0 kg ha-1, two treatments ofB. bassianaat 3 kg ha-1, Carrier adjuvant, and oil-miscible formulation (OL), there were also an absolute control without insecticide application, and a biological insecticide Turex 3.8 WP (Bacillus thuringiensis) at 1.0 kg ha-1. Five sprays were made per treatment, the first at 50 ddf, and the rest at seven-day intervals until reaching 78 days.Results.All treatments showed a lower incidence of old damage (gummosis) compared to the absolute control. Only the T7 (comercial controlB. thurigiensis1 kg ha-1) and T2 (B. bassianaa 1 kg ha-1) treatments showed a damage incidence lower than 5 % during the whole evaluation period without significant differences between them, but with the rest of the treatments.Conclusion.The T7 (commercial controlB. thurigiensis1 kg ha-1) and T2 (B. bassiana1 kg ha-1), treatments were the most effective for the control ofStrymon megarusGodart in pineapple crops. Introducción.El incremento en la producción de piña (Ananas comosus(L.) Merr.) exige al mercado frutas de buena calidad, con menor impacto ambiental y mínimo uso de productos químicos.Objetivo.Determinar la dosis efectiva del hongoBauveria bassianay la formulación adecuada como bioinsecticida para el control de tecla (Strymon megarusGodart) en el cultivo de piña.Materiales y métodos.La investigación se realizó de febrero a abril de 2019 en una finca en Río Jiménez, Guácimo, Limón, Costa Rica. Se estableció un diseño de parcelas irrestricto al azar con medias repetidas en el tiempo con siete tratamientos y cinco réplicas por tratamiento. Para cada réplica se tomaron semanalmente datos de veinticinco frutos de piña, desde los 50 hasta los 92 días después de la inducción floral (ddf). Los tratamientos fueron:B. bassianaWP en dosis de 1,0, 2,0 y 3,0 kg ha-1, dos tratamientos deB. bassianaa 3 kg ha-1, coadyuvante Carrier y formulación miscible en aceite (OL); además, se tuvo un testigo absoluto sin aplicación de insecticida y un insecticida biológico Turex 3,8 WP (Bacillus thuringiensis) a 1,0 kg ha-1. Se realizaron cinco aspersiones por tratamiento, la primera a los 50 ddf y el resto con intervalos de siete días hasta llegar a los 78 días.Resultados.Todos los tratamientos mostraron una menor incidencia de daño viejo (gomosis) comparado con el testigo absoluto. Solo el T7 (testigo comercialB. thurigiensis1 kg ha-1) y el T2 (B. bassianaa 1 kg ha-1) mostraron una incidencia de daño menor al 5 %, durante todo el periodo de evaluación sin diferencias significativas entre ellos, pero sí con el resto de los tratamientos.Conclusión.Los tratamientos T7 (testigo comercialB. thurigiensis1 kg ha-1) y T2 (B. bassianaa 1 kg ha-1),fueron los más efectivos para el control deStrymon megarusGodart en el cultivo de piña.

The symphylids, also known as garden centipedes or pseudocentipedes, are soil-dwelling arthropods of the class Symphyla. They affect diverse crops worldwide due to the consumption of young roots and seedlings. This study presents the effectiveness of the fungus Purpureocillium lilacinum (strain UdeA0106) to reduce the symphylid population under commercial greenhouse conditions. The results showed that this fungus strain could reduce symphylid density by 70.6%. It also demonstrated that a high concentration of strain UdeA0106 helped to recover chrysanthemum (Dendranthema grandifIora) crops infested with symphylid. The results shown in this paper are the first evidence of effective biological control of symphylids pest in a commercial fIower plantation, representing the potential of P. lilacinum strain UdeA0106 as a biological control agent. RESUMEN Los sinfilidos, también conocidos como ciempiés de jardín o pseudociempiés, son artrópodos habitantes del suelo de la clase Symphyla. Afectan diversos cultivos alrededor del mundo debido a que consumen raíces jóvenes y plantas de semillero. Este estudio presenta la efectividad del hongo Purpureocillium lilacinum UdeA0106 para reducir poblaciones de sinfilidos bajo condiciones de invernaderos comerciales. Los resultados muestran que esta cepa de hongo pudo reducir la densidad de sinfilidos en un 70.6%. También se demostró que una alta concentración de la cepa UdeA0106 ayuda a recuperar cultivos de crisantemo (Dendranthema grandifIora), cuando estos han sido infestados por sinfilidos. Los resultados mostrados son la primera evidencia de un control biológico efectivo de una plaga de sinfilidos en una plantación comercial de fIores, representando el potencial de P. lilacinum UdeA0106 como agente de control biológico.

The entomopathogenic fungus Metarhizium rileyi is known as a biological control agent for several lepidopterans, among which the Noctuidae family stands out. The objective of this work was to evaluate the effect of fungicides on the development of two isolates of M. rileyi under laboratory conditions. The in vitro effect of five fungicides on the UFMS 06 and UFMS 07 isolates of the fungus M. rileyi was studied. The products were placed in Petri dishes containing the Potato-Dextrose-Agar (BDA) culture medium, in the concentrations recommended for the application of the product in the field. After incubating the fungus in the culture medium, the plates were sealed with PVC film and placed in an air-conditioned chamber (type BOD) at 25 ± 1 °C, relative humidity of 70 ± 10% and a photoperiod of 12 hours for a period of 7 days, mycelial growth and spore concentration were evaluated. To quantify the germination percentage, a suspension of 1.0 × 106 con.mL-1 was used, being kept at rest for two hours in the different fungicides. Right after this period, 1.0 mL of the suspension was plated with the aid of a graduated pipette (1mL) in Petri dishes and spread with a Drigalsky loop in the nutrient medium, after inoculation the plates were identified and sealed with PVC film, and incubated for 20 hours in an air-conditioned BOD chamber at 25 ± 1 °C, relative humidity of 70 ± 10% and photoperiod of 12 hours. The fungicides tested in this work all interfered in the vegetative growth, in the production of conidia and in the germination of the two isolates of the fungus, in the biological index test all products were classified as toxic. El hongo entomopatógeno Metarhizium rileyi es conocido como agente de control biológico de varios lepidópteros, entre los que destaca la familia Noctuidae. El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto de los fungicidas en el desarrollo de dos aislamientos de M. rileyi en condiciones de laboratorio. Se estudió el efecto in vitro de cinco fungicidas sobre los aislados UFMS 06 y UFMS 07 del hongo M. rileyi. Los productos se colocaron en placas Petri que contenían el medio de cultivo Papa-Dextrosa-Agar (BDA), en las concentraciones recomendadas para la aplicación del producto en campo. Después de incubar el hongo en el medio de cultivo, las placas se sellaron con film de PVC y se colocaron en una cámara climatizada (tipo DBO) a 25 ± 1 °C, humedad relativa de 70 ± 10% y un fotoperiodo de 12 horas por período de 7 días, se evaluó el crecimiento micelial y la concentración de esporas. Para cuantificar el porcentaje de germinación se utilizó una suspensión de 1.0 × 106 con.mL-1, manteniéndose en reposo durante dos horas en los diferentes fungicidas. Inmediatamente después de este período, se sembró 1.0 mL de la suspensión con la ayuda de una pipeta graduada (1mL) en placas de Petri y se extendió con un asa Drigalsky en el medio nutritivo, luego de la inoculación las placas se identificaron y sellaron con película de PVC, y se incubaron. durante 20 horas en cámara DBO climatizada a 25 ± 1 °C, humedad relativa de 70 ± 10% y fotoperiodo de 12 horas. Los fungicidas probados en este trabajo interfirieron todos en el crecimiento vegetativo, en la producción de conidios y en la germinación de los dos aislados del hongo, en la prueba de índice biológico todos los productos fueron clasificados como tóxicos. O fungo entomopatogênico Metarhizium rileyi é conhecido como agente de controle biológico de vários lepidópteros entre eles destaca-se a família Noctuidae. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito dos fungicidas sobre o desenvolvimento de dois isolados de M. rileyi em condições de laboratório. Foi estudado o efeito in vitro de cinco fungicidas sobre os isolados UFMS 06 e UFMS 07 do fungo M. rileyi. Os produtos foram colocados em placas de Petri contendo o meio de cultura Batata-Dextrose-Ágar (BDA), nas concentrações recomendadas para a aplicação do produto em campo. Após ter incubado o fungo no meio de cultura as placas foram vedadas com filme de PVC e colocadas em câmara climatizada (tipo B.O.D.) a 25 ± 1 °C, umidade relativa de 70 ± 10 % e fotoperíodo de 12 horas por um período de 7 dias, foram avaliados o crescimento micelial e concentração de esporos. Para quantificar a porcentagem de germinação foi utilizada uma suspensão de 1,0 × 106 con.mL-1, sendo mantida em repouso por duas horas nos diferentes fungicidas. Logo após este período foi plaqueado 1,0 mL da suspensão com o auxílio de uma pipeta graduada (1mL) em placas de Petri e espalhada com alça de Drigalsky no meio nutritivo, após a inoculação as placas foram identificadas e vedadas com filme PVC, e incubadas por 20 horas em câmara climatizadas tipo B.O.D. a 25 ± 1 °C, umidade relativa de 70 ± 10 % e fotoperíodo de 12 horas. Os fungicidas testados neste trabalho todos eles interferiram no crescimento vegetativo, na produção de conídios e na germinação dos dois isolados do fungo, no teste de índice biológico todos os produtos foram classificados como tóxicos.

espanolResumen I. La hormiga arriera esta asociada a perdidas en el sector agricola, debido a su actividad defoliadora. El control de la especie se ha venido realizado artesanal, quimica y biologicamente, esta ultima con beneficios ambientales y de bajo riesgo para la salud humana. El objetivo de esta investigacion fue desarrollar una formulacion biologica para el control de la hormiga arriera (Atta cephalotes) utilizando una mezcla de esporas de dos hongos filamentosos (Beauveria bassiana y Trichoderma lignorum). M. Se desarrollaron 5 formulaciones empleando las relaciones: 1:1,6:4,4:6,3:7,2:8, de cepas de B. bassiana (ATCC MYA-4886) y T. lignorum (ATCC 8751), realizandoles prueba de viabilidad, patogenicidad y pureza. La colonizacion de las esporas en tejidos, se evaluo mediante la exposicion de ratas Wistar a la formulacion y sus componentes, realizando diagnostico veterinario (diseccion) y cultivo microbiologico. R. Las formulaciones presentaron viabilidad a 24 h del 95+2 %, el 100% de las formulaciones no se contaminaron despues de 10 dias, las formulaciones 6.4, 1:1, 2:8 infectaron la totalidad de los individuos en 6 dias, las formulaciones 4:6 y 3:7 a los 8 dias, no se observo colonizacion de las cepas en la formulacion, ni en tejidos de los biomodelos. C. Las formulaciones 6.4, 1:1, 2:8 de Beauveria bassiana y Trichoderma lignorum, poseen mayor actividad infecciosa sobre la hormiga arriera (Atta cephalotes). EnglishAbstract I. The Leaf cutting Ant is associated with losses in the agricultural sector for the most part in the cultivation of citrus fruit sector due to its activity defoliator Control of the species has been handmade, chemical and biologically, the latter with environmental benefits and low risk to human health. This research had as objective develop a formulation biological for the control of the Leaf cutting Ant (Atta cephalotess using a mixture of spores of two fungi filamentous (Beauveria bassiana and Trichoderma lignorum), M. He was the isolation of Beauveria bassiana (ATCC MYA-4886) and Trichoderma lignorum (ATCC 8751), through cultivation YPDA and was conducted identifying fungal imprint and biochemical tests. Developing five formulations with ratios of 1:1, 6:4, 4:6, 3:7, 2:8 of Beauveria bassiana and Trichoderma lignorum respectively they underwent the test of viability in nutrient agar pathogenicity by immersion test and proof of purity; the tests were performed in triplicate. R. The formulations presented viability to 24 h 95% 2, I00% of the formulations were pure after 10 days, formulations 6.4, 2:8 infected all of the individuals in 6 days, formulations 4:6 and 3:7-8 days of exposure. C. Formulations 6.4, 2:8 of Beauveria bassiana and Trichoderma lignorium, present infectious activity on the Leaf cutting Ant (Atta cephalotess in laboratory. portuguesResumo I. O formigueiro esta associado a perdas no setor agricola, devido a sua atividade desfolhadora. O controle das especies tem sido realizado artesanalmente, quimicamente e biologicamente, este ultimo com beneficios ambientais e baixo risco para a saude humana. O objetivo desta pesquisa foi desenvolver uma formulacao biologica para o controle de formigas (Atta cephalotess usando uma mistura de esporos de dois fungos filamentosos (Beauveria bassiana e Trichoderma lignorum), M. 5 As formulacoes foram desenvolvidas usando a relacao: 1 : 1,6: 4,4: 6,3: 7,2: 8 estirpes de B, bassiana (ATCC MAA-4886) e T. lignorum (ATCC 875I), realizandoles Teste de viabilidade, patogenicidade e pureza. A colonizacao dos esporos nos tecidos foi avaliada pela exposicao de ratos Wistar a formulacao e seus componentes, realizando diagnostico veterinario (disseccao) e cultura microbiologica. R. As formulacoes mostraram viabilidade em 24 h de 95 + 2%, 100% das formulacoes nao foram contaminadas apos I0 dias, as formulacoes 6,4, 1: 1, 2: 8 infectaram todos os individuos em 6 dias, as formulacoes 4: 6 e 3: 7 aos 8 dias, nenhuma colonizacao das cepas foi observada na formulacao, nem nos tecidos dos biomodelos. C. As formulacoes 6.4, 1: 1, 2: 8 de Beauveria bassiana e Trichoderma lignorum, apresentam maior atividade infecciosa sobre os antirretera (Atta cephalotess).

Resumen El análisis de los datos provenientes del recuento de eventos debe tener en cuenta las herramientas apropiadas para tratar este tipo de variables. Un enfoque válido para hacer frente a esta tarea consiste en el uso del Modelo Lineal Generalizado (MLG). Esto permite trabajar con funciones de densidad como Poisson o binomial negativa. Este trabajo presenta los resultados del análisis de los datos de un experimento realizado en el campo experimental de investigación de Cenipalma ubicada en el municipio de Barrancabermeja (Colombia). El experimento se estableció para evaluar, a nivel de campo, el hongo entomopatógeno Purpureocillium lilacinum como una estrategia para controlar la población de la chinche de encaje, Leptopharsa gibbicarina. El experimento se realizó en dos parcelas, en una de ellas se implementó el control de L. gibbicarina con P. lilacinum como sugería el programa de investigación de Entomología de Cenipalma y en la otra parcela no se tuvo ninguna estrategia de control. Los datos se analizaron mediante el uso de MLG y dos funciones de densidad diferentes (Poisson y binomial negativa). Los resultados mostraron diferencias estadísticamente significativas entre los tratamientos. El estimador de máxima verosimilitud asociado al tratamiento P. lilacinum indicó que la aplicación del hongo entomopatógeno reduce la población de L. gibbicarina con una tasa de incidencia de 0,28 veces más que el testigo. Abstract The analysis of data coming from the counting of events must consider tools that are appropriate to deal with this type of variable. A valid approach to cope with this task consists of using the Generalized Linear Model (GLM). The use of GLM allows working with density functions such as Poisson or Negative Binomial. This work presents the results of analyzing the data from an experiment carried out at the Research Station of Cenipalma located in the municipality of Barrancabermeja (Colombia). The experiment was established to evaluate, at the field level, the entomopathogenic fungus Purpureocillium lilacinum as a strategy to control the population of the lace bug, Leptopharsa gibbicarina. The experiment was carried out in two plots, in one of them, the control of L. gibbicarina with P. lilacinum was implemented as suggested by the Entomology research program of Cenipalma and, in the other plot there was no control strategy. The data were analyzed by using GLM and two different density functions (Poisson and the negative binomial). Results showed statistically significant differences between the treatments. The estimator of the maximum likelihood associated with the P. lilacinum treatment indicated that the application of the entomopathogenic fungus reduced the populations of L. gibbicarina with a rate of incidence of 0.28 times more than the control

Anticarsia gemmatalis is one of the most important pests in world soybean crop. The most common intervention is the application of agrochemicals, such as novaluron and glyphosate. Among biological control agents, much attention has been drawn to entomopathogenic fungi, as Metarhizium rileyi. Here, we examined the changes that occur in the immune system (total and differential hemocyte count), secondary effects (caterpillar morphology), and oxidative metabolism after the caterpillars were exposed to M. rileyi, novaluron or glyphosate. M. rileyi was able to induce changes in the width, length, and weight of A. gemmatalis pupae, along with an increased in the number of defense cells. Novaluron prompt changes the insect’s immunity, and glyphosate caused milder immunological effects. However, it caused significant secondary effects including malformations in pupae and adults, and an increase in nitric oxide (NO) levels. Mortality observed when treating insects with novaluron and malformations due to glyphosate treatments did not occur due to oxidative stress. However, when insects were exposed to M. rileyi, we verified significantly increased levels of NO and concluded that these insects died due to oxidative stress. Our data provide evidence that contributes to better understanding the mechanism of herbicide-fungus interaction in the management of Anticarsia gemmatalis. Anticarsia gemmatalis es una de las plagas más importantes del cultivo mundial de la soya. La intervención más común es la aplicación de agroquímicos, tales como novaluron y glifosato. Entre los agentes de control biológico, se ha prestado mucha atención a los hongos entomopatógenos, como Metarhizium rileyi. Aquí, examinamos los cambios que ocurren en el sistema inmunológico (recuento de hemocitos total y diferencial), los efectos secundarios (morfología de la oruga) y el metabolismo oxidativo después de que las orugas fueron expuestas a M. rileyi, novaluron o glifosato. M. rileyi pudo inducir cambios en el ancho, largo y peso de las pupas de A. gemmatalis, junto con un aumento en el número de células de defensa. Novaluron cambia rápidamente la inmunidad del insecto y el glifosato provoca efectos inmunológicos más leves. Sin embargo, causó efectos secundarios importantes, incluidas malformaciones en pupas y adultos, y un aumento en los niveles de óxido nítrico (NO). La mortalidad observada al tratar insectos con novaluron y las malformaciones debidas a los tratamientos con glifosato no ocurrió por estrés oxidativo. Sin embargo, cuando los insectos estuvieron expuestos a M. rileyi, verificamos niveles significativamente mayores y concluimos que estos insectos murieron debido al estrés oxidativo. Nuestros datos proporcionan evidencia que contribuye a comprender mejor el mecanismo de interacción herbicida-hongo en el manejo de Anticarsia gemmatalis. Anticarsia gemmatalis é uma das principais pragas da cultura da soja. A intervenção mais comum é a aplicação de agroquímicos, como novaluron e glifosato. Dentre os agentes de controle biológico, muita atenção tem sido dada aos fungos entomopatogênicos, como Metarhizium rileyi. Neste trabalho, avaliamos as mudanças que ocorrem no sistema imunológico (contagem total e diferencial de hemócitos), efeitos secundários (morfologia da lagarta) e metabolismo redox após as lagartas serem expostas a M. rileyi, novaluron ou glifosato. M. rileyi foi capaz de induzir mudanças na largura, comprimento e peso das pupas de A. gemmatalis, juntamente com um aumento no número de células de defesa. Novaluron altera a imunidade do inseto e o glifosato causou efeitos imunológicos mais suaves. No entanto, causou efeitos secundários significativos, incluindo malformações em pupas e adultos, e um aumento nos níveis de óxido nítrico (NO). A mortalidade observada no tratamento de insetos com novaluron e malformações devido ao tratamento com glifosato não ocorreu devido ao estresse oxidativo. No entanto, quando os insetos foram expostos a M. rileyi, verificamos níveis significativamente aumentados de NO e concluímos que esses insetos morreram devido ao estresse oxidativo. Nossos dados fornecem evidências que contribuem para o melhor entendimento do mecanismo de interação herbicida-fungo no manejo de Anticarsia gemmatalis.

Hoja divulgativa El melón, Cucumis melo L., es una planta de la familia Cucurbitaceae, originaria de África tropical. Una de las plagas importantes de este cultivo es la mosca blanca, Bemisia tabaci Gennadius (Hemiptera: Aleyrodidae). Existen varios hongos entomopatógenos que sirven como biocontroladores de esta especie, entre los que se encuentran Aschersonia aleyrodis, Verticillium lecanii, Paecilomyces fumosoroseus, Beauveria bassiana y Metarrhizium anisopliae. Universidad de Costa Rica/[736-B2-604]/UCR/Costa Rica UCR::Vicerrectoría de Investigación::Unidades de Investigación::Ciencias Agroalimentarias::Estación Experimental Agrícola Fabio Baudrit Moreno (EEAFBM) UCR::Sedes Regionales::Sede del Atlántico::Recinto de Paraíso::Finca Experimental Interdisciplinaria de Modelos Agroecológicos (FEIMA)

El triatomino Triatoma maculata (Hemiptera: Reduviidae, Triatominae) es un vector importante de Trypanosoma cruzi, agente etiológico de la enfermedad de Chagas en Venezuela. En el presente trabajo, se evaluó el efecto del aislamiento nativo LF14 del hongo entomopatógeno Beauveria bassiana sensu lato (s.l.) (Ascomycota) en ninfas de estadio IV de T. maculata. Adicionalmente, se estudiaron aspectos histopatológicos y ultraestructurales por medio de Microscopía Electrónica de Transmisión (MET), de la interacción entre el hongo y las ninfas. Se utilizaron suspensiones acuosas a una concentración de 1x107 conidios/mL bajo condiciones de laboratorio (26°C, HR > 90%), que se aplicaron por inmersión. La mortalidad y la conidiación se evaluaron diariamente durante 24 días. Los resultados revelaron que el aislamiento LF14 ocasionó una tasa de mortalidad acumulada elevada (97,5%), con 100% de esporulación en los cadáveres de las ninfas, y TL50 de 6 días y eficacia de 97,5%. Los cortes histopatotológicos permitieron observar los conidios adheridos y penetrando con su tubo germinal a la cutícula, así como también las hifas invadiendo masivamente el hemocele y todos los tejidos y órganos, con el subsiguiente fallecimiento y esporulación sobre los cadáveres de las ninfas. La MET reveló una invasión masiva de hifas y micelios fúngicos en todo el hemocele, con respuesta defensiva de hemocitos contra el hongo. Se observaron frecuentemente áreas electrotransparentes, lo que sugiere la secreción de enzimas por las hifas que debilitan la cutícula y los tejidos al penetrarlos. El aislamiento LF14 de B. bassiana s.l. se propone como un potencial patotipo para ser probado a nivel de campo en futuros programas de manejo biorracional de poblaciones de T. maculata. PALABRAS CLAVE: Control biológico, hongo entomopatógeno, histopatología, microscopía electrónica, triatominos. ABSTRACT The triatomine insect Triatoma maculata (Hemiptera: Reduviidae) is an important vector of Trypanosoma cruzi, etiological agent of Chagas disease in Venezuela. The present article aimed to evaluate the effect of native isolate LF14 of entomopathogenic fungus Beauveria bassiana sensu lato (s.l.) (Ascomycota) on fourth instar nymphs of T. maculata. In addition, histopathological and ultrastructural aspects were evaluated by means of Electronic Transmission Microscopy (ETM), of the interaction between fungus and nymphs. Aqueous suspensions were used at concentration of 1x107 conidia/ml under laboratory conditions (26°C, RH > 90%), which were applied on the triatomine insects by immersion. Mortality and conidiation were evaluated daily for 24 days. The results revealed that LF14 isolate caused a highly accumulated mortality rate (97.5%) with 100% of sporulation on fungus-killed cadavers of nymphs, and LT50 of 6 days and 97.5% of efficacy. Histopathological sections allowed us to observe attached conidia, penetrating the cuticle surface by its germinal tube, as well as the massive invation of the haemocele and all tissues and organs, leading to triatomine death and sporulation on fungus-killed cadavers of nymphs. ETM studies revealed abundant growth of fungal hyphae and micelar into haemocele, with defense response of haemocytes against fungal structures. Areas of low electron-density were frequently observed, suggesting the secretion of enzymes by penetrating hyphae to weaken cuticle and tissues. The isolate LF14 of B. bassiana s.l. is proposed as a potential biocontrol agent to be tested under field conditions in biorational control programs against T. maculata populations. KEY WORDS: Biological control, entomopathogenic fungus, histopathology, electron microscopy, triatomine bugs.

Beauveria bassiana sensu lato (Bálsamo) Vuillemin (Ascomycota-Hypocreales, Cordycipitaceae) es un hongo entomopatógeno ampliamente utilizado como agente de control biológico. Se estudió in vitro en medio sólido (Sabouraud) el efecto y compatibilidad de dos surfactantes no iónicos (Tween® 20 y Tween® 80) a nueve concentraciones (v/v) ([%]: 0,1; 0,5; 1; 2,5; 5; 10;15; 20 y 25) sobre la germinación de conidios de 13 aislamientos nativos de B. bassiana s.l. (LF01, LF02, LF03, LF04, LF06, LF07, LF08, LF09, LF10, LF11, LF12, LF13, LF14), que han mostrado ser patógenos hacia Rhodnius prolixus, principal vector de la enfermedad de Chagas en Venezuela. Los aislamientos fúngicos se ensayaron a 1x107 conidias/mL. La evaluación de la compatibilidad se hizo mediante prueba de germinación conidial a las 24h (26°C y HR > 90%). Se observó un efecto altamente significativo (P < 0,001) de los surfactantes (F = 207,86), su concentración (F = 35,12) y de los diferentes aislamientos (F = 77,1) sobre los porcentajes promedios de germinación. El efecto inhibitorio se observó más pronunciadamente con Tween® 20 a partir de 10%, en los aislamientos LF02 y LF03 obteniéndose porcentajes promedios de germinación de 15,1 - 46,5% y 12,6 - 19,9%, respectivamente, siendo mayor la acción inhibitoria a 25%. A las concentraciones que usualmente se usan ambos surfactantes (≤ 1%), las tasas promedio de germinación de los conidios de todos los aislamientos fueron de 100%. Por ello, probablemente tanto el Tween® 20 como el Tween® 80 posean una compatibilidad similar con los 13 aislamientos de B. bassiana s.l. a nivel de campo en programas integrales de control biorracional de triatominos.

Se evaluó el efecto de tres extractos de origen vegetal (ajo-ají, Sophora-1, Sophora-2), un aceite agrícola (complejo mineral de ácidos grasos), un hongo entomopatógeno (Isaria fumosorosea Wize) y acaricidas sintéticos (abamectina, spiromesifen, fenazaquin), para el manejo de Tetranychus urticae Koch (Acari: Tetranychidae) en el cultivo de papaya (Carica papaya L.), además del impacto sobre los agentes benéficos Phytoseiulus persimilis Athias-Henriot (Acari: Phytoseiidae) y Chrysoperla carnea Stephens (Neuroptera: Chrysopidae); así como su efecto en la formación de las flores y frutos. Para T. urticae y P. persimilis se evaluó el porcentaje de eclosión de huevos y el porcentaje de mortalidad y oviposición en los adultos; en el caso de C. carnea se evaluó el porcentaje de mortalidad de las larvas; estos bio-ensayos se realizaron en el laboratorio de Acarología de la Universidad Nacional de Colombia-Sede Palmira bajo un diseño completo al azar (DCA) con nueve tratamientos y 30 repeticiones: T1: extracto ajo-ají, T2: complejo mineral, T3: I. fumosorosea, T4: spiromesifen, T5: abamectina, T6: fenazaquin, T7: Sophora-1, T8: Sophora-2 y T9: testigo (agua). Para complementar la información se estableció un ensayo en Roldanillo (Valle del Cauca) en la finca “La Pola”, por medio de un diseño de bloques completos al azar (DBCA) con tres repeticiones en el cual se evaluaron seis tratamientos: T1 (extracto ajo-ají), T2 (complejo mineral), T3 (I. fumosorosea), T4 Químico (spiromesifen, abamectina, fenazaquin) T5: control (testigo absoluto) y T6: testigo agricultor. En este experimento las variables evaluadas fueron reducción de la población de T. urticae, número de hojas/planta, diámetro del tallo, número de flores/planta, número de frutos/planta y rendimiento. Para el análisis de varianza en los dos experimentos se utilizó el programa estadístico SAS y las pruebas de medias LSD de Fisher y Tukey al 5% de significancia. Los acaricidas sintéticos en laboratorio (spiromesifen, abamectina, fenazaquin), causaron el menor porcentaje de eclosión de huevos (27%, 36%, 35% respectivamente) y mayor mortalidad de adultos (63%, 70%, 67% respectivamente) de T. urticae y una reducción en la oviposición (7 huevos, 3 huevos, 9 huevos), así como también mostraron un alto impacto en P. persimilis (≥ 47% para huevos y ≥ 73% para adultos, respectivamente) y C. carnea (≥73%). De las alternativas no químicas, I. fumosorosea presentó los porcentajes más altos de mortalidad de huevos y adultos de T. urticae (85% y 81% respectivamente) y el daño en los agentes benéficos fue menor (≤ 50% de mortalidad para P. persimilis y C. carnea) que la generada por los acaricidas sintéticos. La mortalidad causada por el extracto de ajo-ají y el complejo mineral sobre T. urticae fue baja (21% y 36% para huevos y 33% y 39% para adultos respectivamente), no encontrándose diferencias significativas con el testigo agua (15% para huevos y 16% para adultos respectivamente). En campo se presentó una diferencia significativa entre tratamientos en la variable número de T. urticae/hoja y rendimiento. Para la variable infestación todos los tratamientos presentaron una diferencia significativa con respecto al testigo agricultor. El resto de variables evaluadas no presentaron diferencias significativas entre tratamientos. Ninguna de las alternativas evaluadas influyó en el número de flores y frutos de papaya. El hongo entomopatógeno (I. fumosorosea) resultó ser la mejor alternativa para un programa de manejo de T. urticae en papaya en el departamento del Valle del Cauca. Abstract: The effect of three extracts of vegetal origin (ajo-ají, Shophora-1, Shophora-2), an agricultural oil (mineral complex of fatty acids), an entomopathogenic fungus (Isaria fumosorosea Wize) and synthetic acaricides (abamectin, spiromesifen) was evaluated. , fenazaquin), for the management of Tetranychus urticae Koch (Acari: Tetranychidae) in the cultivation of papaya (Carica papaya L.), in addition to the impact on the beneficial agents Phytoseiulus persimilis Athias-Henriot (Acari: Phytoseiidae) and Chrysoperla carnea Stephens ( Neuroptera: Chrysopidae); as well as its effect on the formation of flowers and fruits. For T. urticae and P. persimilis, the percentage of egg hatching and the percentage of mortality and oviposition in adults were evaluated; in the case of C. carnea the mortality percentage of the larvae was evaluated; These bio-assays were carried out in the Acarology laboratory of the Universidad Nacional de Colombia-Palmira headquarters under a randomized complete design (RCD) with nine treatments and 30 repetitions: T1: garlic-chili extract, T2: mineral complex, T3: I. fumosorosea, T4: spiromesifen, T5: abamectin, T6: fenazaquin, T7: Shophora-1, T8: Shophora-2 and T9: control (water). To complement the information, an assay was established in Roldanillo (Valle del Cauca) on the "La Pola" farm, by means of a randomized complete block design (RCBD) with three replications in which six treatments were evaluated: T1 (extract ajo-ají), T2 (mineral complex), T3 (I. fumosorosea), T4 Chemical (spiromesifen, abamectina, fenazaquin) T5: control (absolute control) and T6: control farmer. In this experiment the evaluated variables were population reduction of T. urticae, number of leaves / plant, stem diameter, number of flowers / plant, number of fruits / plant and yield. For the analysis of variance in the two experiments the SAS statistical program and the LSD means tests of Fisher and Tukey at 5% significance were used. Synthetic acaricides in the laboratory (spiromesifen, abamectin, fenazaquin), caused the lowest percentage of egg hatching (27%, 36%, 35% respectively) and higher adult mortality (63%, 70%, 67% respectively) of T urticae and a reduction in oviposition (7 eggs, 3 eggs, 9 eggs), as well as a high impact on P. persimilis (≥ 47% for eggs and ≥ 73% for adults, respectively) and C. carnea ( ≥73%). Of the non-chemical alternatives, I. fumosorosea presented the highest percentages of mortality of eggs and adults of T. urticae (85% and 81% respectively) and the damage in the beneficial agents was lower (≤ 50% mortality for P. persimilis and C. carnea) than that generated by synthetic acaricides. The mortality caused by garlic-chili extract and the mineral complex on T. urticae was low (21% and 36% for eggs and 33% and 39% for adults respectively), no significant differences being found with the water control (15% for eggs and 16% for adults respectively). In the field there was a significant difference between treatments in the variable number of T. urticae / leaf and yield. For the infestation variable, all treatments showed a significant difference with respect to the farmer control. The rest of the evaluated variables did not present significant differences between treatments. None of the alternatives evaluated influenced the number of papaya flowers and fruits. The entomopathogenic fungus (I. fumosorosea) was the best alternative for a management program of T. urticae in papaya in the department of Valle del Cauca. Línea de Investigación: Protección de Cultivos Solicito que esta tesis no sea visible en texto completo hasta el año 2022 debido a que tengo varios artículos en proceso de publicación. Maestría

RESUMEN En el presente estudio se evaluó in vitro el efecto que posee la composición de varios medios de cultivo sólido (Agar-Sabouraud: AS, Agar-Agua: AW, Medio Mínimo: MM, MM-Sacarosa: MM-S, MM-glucosa: MM-G, MM-peptona: MM-P, Agar-Levadura de Cerveza: ALE, Agar-Lactrimel: AL, Agar-Lactrimela: ALM, Agar-Lactrisomil: ALI, Agar-Isomil: AI, Agar-Tras-Tras: ATT, Agar-Papa: AP, Agar-Auyama: AA, Agar-Ocumo: AOB, Agar-Yuca: AY, Agar-Apio: AAP, Agar-Maíz: AM, Agar-Arroz: AAR, Agar-Avena: AAV) sobre la germinación de conidios de 13 aislamientos de Beauveria bassiana s.l. (LF01, LF02, LF03, LF04, LF06, LF07, LF08, LF09, LF10, LF11, LF12, LF13, LF14), patógenos para Rhodnius prolixus. La evaluación se hizo mediante prueba de germinación conidial a las 24 h (26°C y HR >90%). Se observó un efecto altamente significativo (p < 0,001) de la composición del medio de cultivo y de los aislamientos sobre los porcentajes promedio de germinación. En los medios AS, AL y AA (100%) y ALI, AI, AOB, AAR (90-100%) se obtuvieron los mayores valores de germinación para todos los aislamientos, y en MM los más bajos (3,8-38,5%). En los restantes medios se observa que la germinación entre los aislamientos fue variable. Así, en MM-P los aislamientos LF03, LF04 y LF10 presentaron valores de germinación de 3,5, 4,1 y 4,3%, respectivamente, mientras que en los restantes aislamientos se obtuvieron tasas >90%. Resalta que en un medio pobre en nutrientes como AW se reportó tasas de germinación de 100% en algunos aislamientos. Se concluye que la composición del medio de cultivo influye sobre la capacidad de germinación de los 13 aislamientos de B. bassiana. ABSTRACT The aim of the present study was to evaluate the in vitro effect of composition of 20 different types of solid culture media (Agar-Sabouraud: AS, Agar-Water: AW, Minimal Medio: MM, MM-Saccharose: MM-S, MM-Glucose: MM-G, MM-Peptone: MM-P, Agar-Beer Yeast: ALE, Agar-Lactrimel: AL, Agar-Lactrimela: ALM, Agar-Lactrisomil: ALI, Agar-Isomil: AI, Agar-Tras-Tras: ATT, Agar-Potato: AP, Agar-Squash: AA, Agar-Arrowleaf: AO, Agar-Cassava: AY, Agar-Celery: AAP, Agar-Corn: AM, Agar-Rice: AAR, Agar-Oatmeal: AAV) on conidial germination of 13 native isolates of Beauveria bassiana s.l. (LF01, LF02, LF03, LF04, LF06, LF07, LF08, LF09, LF10, LF11, LF12, LF13, LF14), pathogenic to Rhodnius prolixus (Triatominae). Evaluation was based on conidial germination test (1x107 conidias/mL) at 24 h (26°C; RH >90%). A highly significant effect (p < 0.001) was detected between the composition of culture media and different fungal isolates on average germination rates. The most pronounced germination rate was observed for AS, AL y AA (100%) and ALI, AI, AOB, AAR (90-100%) media, and for MM medium the lowest one (3.8-38.5%). In the rest of culture media, the germination rate varied according to the isolate tested. Thus, with regard to MM-P medium, the isolates LF03, LF04 and LF10 showed germination rates of 3.5, 4.1 and 4.3%, respectively, while all the other isolates presented >90% germination. Nevertheless, on a nutrient poor medium as AW some isolates showed high germination rates up to 100%.Therefore, it is concluded that culture media have an influence on the germination capacity of B. bassiana. &nbsp

The mite Tetranychus urticae is a key pest in papaya crop in Valle del Cauca (Colombia), and it has been generally controlled with chemical products; other management alternatives have not been used. Therefore, this study aimed to evaluate the effects of alternatives: plant extract (garlic-chili vegetable extract, Alisin®), mineral oil (vegetable fatty acid complex, Adimel®), entomopathogenic fungus (Successor®), chemical control (spiromesifen, abamectin, fenazaquin), untreated (control treatment) and farmer's practices (14 applications of pesticides) in a randomized complete block design with three replications/treatment in a Hybrid Tainung-1 papaya crop in the municipality of Roldanillo. The sampling was done every 8 days by measuring the variables: number of leaves/plant, number of infested leaves/plant, number of floral structures/plant, number of fruits/plant, diameter of stem/plant (every 30 days), population of T. urticae/leaf and yield. It was found that the populations of T. urticae/leaf were low in entomopathogenic fungus (11.978) and chemical control (10.548), with no significant differences (P>0.05) from farmer's practices (3.339). In contrast, the mite populations were very high in plant extract (22.086), mineral oil (20.411) and untreated (35.746), as compared to farmer's practices. There was a significant difference in all treatments for the variable infestation from farmer's practices, and the number of leaves/plant in mineral oil and untreated treatment was significantly different from farmer's practices. No significant differences were found between the treatments in the rest of the evaluated variables. The entomopathogenic fungus turned out to be the best alternative for a management program of T. urticae in papaya in this region. RESUMEN El ácaro Tetranychus urticae es considerada una plaga clave en el cultivo de papaya del Valle del Cauca (Colombia) y su control ha sido generalmente con productos químicos sin probar otras alternativas de manejo. Por lo anterior, el objetivo de este estudio fue evaluar en un cultivo de papaya Hibrido Tainung-1, en el municipio de Roldanillo, el efecto de las alternativas: extracto de planta (extracto vegetal de ajo-chile, Alisin®), aceite mineral (complejo de ácidos grasos vegetales, Adimel®), hongo entomopatógeno (Successor®), control químico (spiromesifen, abamectina, fenazaquin), sin manejo (tratamiento control) y prácticas del agricultor (14 aplicaciones de plaguicidas), utilizando un diseño de bloques al azar con tres repeticiones/tratamiento. Se hicieron muestreos cada 8 días midiendo las variables número de hojas/planta, número de hojas infestadas/planta, número de estructuras florales/planta, número de frutos/planta, diámetro del tallo/planta (cada 30 días), población de T. urticae/hoja y rendimiento. Se encontró que las poblaciones de T. urticae /hoja fueron bajas en los tratamientos hongo entomopatógeno (11,978) y control químico (10,548), donde no presentaron diferencias significativas (F>0,05) con respecto a las prácticas del agricultor (3,339); en contraste, las poblaciones del ácaro fueron muy elevadas en los tratamientos extracto de planta (22,086), aceite mineral (20,411) y sin manejo (35,746) con respecto a las prácticas del agricultor. Se presentó una diferencia significativa en todos los tratamientos y prácticas del agricultor para la variable infestación y entre los tratamientos aceite mineral y sin control vs. prácticas del agricultor para número de hojas/planta. Del resto de variables evaluadas no se encontró diferencias significativas entre tratamientos. El hongo entomopatógeno resultó ser la mejor alternativa para un programa de manejo de T. urticae en papaya en el departamento.

The increased pest actions of the red cashew beetle Crimissa cruralis (Coleoptera: Chrysomelidae in Brazilian populations of cashew Anacardium occidentale (Anarcardiaceae) is a cause for concern. The entomopathogenic fungus, Beauveria bassiana, was evaluated as a biocontrol of larvae. The percent mortalities of second and third instar larvae produced by in vivo application of a commercial formulation containing the fungal spores were evaluated. Treatment of larvae at concentrations of 1.2 x 106, 2.5 x 106, 3.7 x 107 e 5.0 x 107 conidia/mL resulted in 49, 56, 66 and 72 % mortality within eight days, respectively. Based on the finding, it is recommended that the B. bassiana formulation should be employed at the lowest concentrations (1.2 x 106 and 2.5 x 106 conidia/mL) with repeat application to avoid possible inactivation of the fungus by abiotic environmental factors. Cost-benefit assessments of the use of this biological agent will be important for determining the economic feasibility of its application in the field. Resumen El aumento de la frecuencia de lo escarabajo rojo de la anacardiácea Crimissa cruralis (Coleoptera: Chrysomelidae) en poblaciones de Anacardium occidentale (Anarcardiaceae) del Brasil es motivo de preocupación. Se evaluó la mortalidad (en larvas de segundo y tercer instar) producida por la aplicación in vivo de una formulación comercial con esporas del hongo entomopatógeno, Beauveria bassiana. El tratamiento de larvas con concentraciones de 1,2 x 106, 2,5 x 106, 3,7 x 107 e 5,0 x 107 conidia/Ml resultó en 49, 56, 66 y 72 % de mortalidad dentro de ocho días, respectivamente. Se recomienda emplear la formulación de B. bassiana en las concentraciones más bajas (1,2 x 106 y 2,5 x 106 conidia/mL) con aplicación repetida para evitar la posible inactivación de lo hongo por factores abióticos ambientales. Las evaluaciones de costo-beneficio del uso de este agente biológico serán importantes para determinar la viabilidad económica de su aplicación en el campo.

Resumen El hongo entomopatógeno Nomuraea rileyi (aislamiento Nm006) ha demostrado un alto potencial para ser utilizado en el control biológico de gusano cogollero del maíz Spodoptera frugiperda. Sin embargo, este microorganismo es altamente susceptible a condiciones abióticas de estrés, lo que dificulta el desarrollo tecnológico de un bioplaguicida. Teniendo en cuenta lo anterior, el objetivo del trabajo fue evaluar el efecto individual de temperatura y luz ultravioleta mediante choques de estrés implementados en el proceso de fermentación sólida. Los conidios obtenidos de los diferentes tratamientos se caracterizaron microbiológicamente (rendimiento y germinación), enzimática (β-esterasa, N-acetilglucosaminidasa y quimoelastasa proteasa Pr1) y biológicamente mediante un bioensayo. Los choques de temperatura no afectaron el rendimiento, germinación y actividad biológica del aislamiento, pero si potenciaron la actividad β-esterasa y la actividad N-acetilglucosaminidasa en comparación con los conidios no expuestos. Con respecto a los choques con luz UV, éstos no mejoraron las características de los conidios de N. rileyi. Con base en los resultados, los choques térmicos a 5 °C y 45 °C, se seleccionaron para la fermentación del hongo, porque no afectaron negativamente ninguna característica y aumentaron las actividades enzimáticas β-esterasa y N-acetilglucosaminidasa de los conidios, lo que podría mejorar la actividad insecticida sobre S. frugiperda. Abstract The entomopathogenic fungus Nomuraea rileyi (isolate Nm006) is a possible microbial control agent against "fall armyworm" Spodoptera frugiperda. However, this fungus is affected by abiotic stress conditions that cause a slow development of the biopesticide. The objective of this study was to assess the individual effect of abiotic stress (temperature and UV light) during solid fermentation of Nomuraea rileyi Nm006. Conidia were produced under different stress conditions and then characterized microbiologically (yield and germination), enzymatically (β-esterese, N-acetylglucosaminidase and subtilin-like protease Pr1) and biologically against Spodoptera frugiperda. All the treatments were compare with conidia produced without stress. Yield and N-acetylglucosaminidase activity did not improve in conidia produced under temperature stress. Germination, efficacy and β-esterase activity were significantly higher in conidia exposed to thermal shock compared to unexposed conidia. UV light shocks did not improve any characteristics of Nm006. Thermal stress at 5 °C and 45 °C were select for fungus fermentation because conidia had higher enzymatic activity (β-esterase y N-acetilglucosaminidase) and any characteristic was negatively affect. This thermal stress could be a strategy to improve the insecticidal activity against S. frugiperda.

El psílido asiático de los cítricos Diaphorina citri (Kuwayama) (Hemiptera: Liviidae) es una plaga distribuida ampliamente en Colombia y es el vector de la bacteria Candidatus Liberibacter spp., agente causante del Huanglongbing (HLB); La enfermedad está presente en Colombia, reportada por el ICA en el 2015, en los municipios de Distracción y Fonseca (Guajira). El uso de enemigos naturales como hongos entomopatógenos, es una alternativa viable para la disminución de las poblaciones de esta plaga. El objetivo de la investigación consistió en identificar hongos entomopatógenos de D. citri, en cultivos de cítricos y plantas de Murraya paniculata (L.) Jacq, en los departamentos de Quindío y Valle del Cauca. Se colectaron insectos micosados, se aislaron, purificaron e identificaron molecularmente los hongos mediante el análisis de la región ITS del ADNr. El trabajo se realizó en el Laboratorio de Diagnóstico fitosanitario de ICA Palmira. Se aislaron ocho cepas de hongos entomopatógenos, correspondientes a las especies Metarhizium anisopliae y Beauveria bassiana. En las pruebas de patogenicidad en condiciones de laboratorio se obtuvo una mortalidad en ninfa y adultos de D. citri del 80 y 56%, respectivamente y una mortalidad de adultos de D. citri sobre plántulas de M. paniculata de 15%. Los hongos aislados representan un gran potencial como nueva alternativa de manejo del insecto. //Abstract: The Asian citrus psyllid Diaphorina citri (Kuwayama) (Hemiptera: Liviidae) is a pest that is widely distributed in Colombia and is the vector of transmission of the bacterium Candidatus Liberibacter spp, which causes Huanglongbing (HLB), The disease present in Colombia, reported by the ICA in 2015, in the municipalities of Distracción and Fonseca (Guajira). The use of natural enemies such as entomopathogenic fungi is a viable alternative for the reduction of pest population. The aim of the research was to identify entomopathogenic fungi D. citri, in the departments of Quindio and Valle del Cauca. Fungi infested insects were collected and isolated, purified and identified molecularly fungi by analyzing the ITS region ADNr. The work was performed at the Laboratory of Plant Health Diagnostic Palmira ICA. Eight strains of entomopathogenic, corresponding to the genera Metarhizium and Beauveria fungi were isolated. Pathogenicity in nymphs and adults, in laboratory conditions with average mortality of 80 and 56% respectively and adult mortality in mirto seedling with an average of 15% was evaluated. Fungal isolotes represent great potential as new insect management alternative. Maestría

Obscure mealybug, Pseudococcus viburni (Signoret), is a cosmopolitan pest that causes damage by suction of vascular juices and the production of honeydew, as well as for being a quarantine insect. Within control options, entomopathogenic fungi are a good alternative, nevertheless, more research is needed. In this research, the Metarhizium anisopliae var. anisopliae (Metschnikoff) isolate Qu-M984 was evaluated on P. viburni under laboratory conditions. Virulence was evaluated by lethal dose 50 (LD50) and lethal time 50 (LT50), for each of the four life stages of the female. The doses tested were 10(5), 10(6), 10(7) and 10(8) conidia mL-1. Also fecundity, egg size, fertility, and longevity of adult females were evaluated at doses of 10(5) and 10(6) conidia mL-1, the evaluations were made every 2 d throughout the insect life time. The LD50 and LT50 obtained were variable for each life stage, although without statistical differences among life stages (P > 0.05), ranging from LD50 = 7.3 x 10(5) to 4.9 x 10(9) conidia mL-1 and LT50 = 7.74 to 9.97 d at 10(8) conidia mL-1. Significant differences (P < 0.05) were observed on longevity at 10(6) conidia mL-1. Longevity was 29% less compared to the control. This result on longevity at relatively low dose is relevant due to the fact that decrease possibilities to find live quarantine insects at the moment of harvest. Fertility, fecundity and egg size showed no differences (P > 0.05).Chanchito blanco de la vid, Pseudococcus viburni (Signoret), es una plaga cosmopolita que causa daños tanto por succión de jugos vasculares como por su producción de mielecilla, así como también por ser un insecto cuarentenario. Dentro de las opciones de control, hongos entomopatógenos son una buena alternativa, sin embargo, más investigación es necesaria. En esta investigación fue evaluado Metarhizium anisopliae var. anisopliae (Metschnikoff) aislamiento Qu-M984 en P. viburni bajo condiciones de laboratorio. Fue evaluada virulencia según dosis letal 50 (LD50) y tiempo letal 50 (LT50) para cada uno de los cuatro estados de desarrollo de la hembra. Las dosis evaluadas fueron 10(5), 10(6), 10(7) y 10(8) conidias mL-1. Fecundidad, tamaño de huevos, fertilidad y longevidad de hembras adultas fueron evaluados con dosis 10(5) y 10(6) conidias mL-1, las evaluaciones fueron realizadas cada 2 d durante todo el período de vida de los insectos. Las LD50 y LT50 obtenidas fueron variables para cada estado de desarrollo, sin mostrar diferencias significativas (P > 0.05) entre estados de desarrollo, fluctuando entre LD50 = 7.3 x 10(5) - 4.9 x 10(9) conidias mL-1 y LT50 =7.74 - 9.97 d con 10(8) conidias mL-1. Diferencias significativas (P < 0.05) fueron observadas en longevidad a 10(6) conidias mL-1. Longevidad fue 29% menor comparado con el testigo. Esta disminución en longevidad a una dosis relativamente baja es relevante debido a que disminuyen las posibilidades de encontrar insectos cuarentenarios vivos al momento de cosecha. Fertilidad, fecundidad y tamano de huevos no mostraron diferencias (P > 0.05).

The aim of this work was select entomopathogenic fungi tolerant to temperatures inside the brood area of honey bees (Apis mellifera) for to control Varroa destructor. For this purpose, 50 Beauveria bassiana (Balsamo) Vuillemin and 48 Metarhizium anisopliae (Metschn.) Sorokin isolates were evaluated at 30 and 35 ºC. For each isolate, colony discs of 5 mm with mycelium were placed in the center of a Petri dish with Sabouraud dextrose agar (SDA) medium. The dishes were incubated at 30 and 35 °C, without light. Radial growth of each colony was measured daily. All the B. bassiana and M. anisopliae isolates presented a lineal growth rate at a temperature of 30 ºC. However, at 35 ºC, most of the isolates did not grow, except three B. bassiana and 14 M. anisopliae isolates (P < 0.001). These isolates were selected to evaluate the pathogenicity on V. destructor by applying a suspension of 10(7) conidia mL-1. The most effective isolate was M. anisopliae Qu-M845 (P = 0.0033) which produced 85% mortality. The pathogenic capacity of this isolate on V. destructor and its tolerance to hive conditions allows us to consider this strain as an alternative to control this pest.El objetivo de este trabajo fue seleccionar hongos entomopatógenos tolerantes a las temperaturas del nido de cría de las abejas (Apis mellifera), para ser utilizados en el control de Varroa destructor. Se evaluaron 50 aislamientos de Beauveria bassiana (Balsamo) Vuillemin y 48 de Metarhizium anisopliae (Metschn.) Sorokin a temperaturas de 30 y 35 ºC. Discos de agar de 5 mm de diámetro con micelio de colonias de cada aislamiento, se depositaron en el centro de placas Petri con medio agar Sabouraud dextrosa (ASD). Las placas fueron incubadas a 30 y 35 °C y oscuridad y diariamente se midió el radio de cada colonia. Todos los aislamientos de B. bassiana y M. anisopliae var. anisopliae presentaron una tendencia lineal a través del tiempo a temperaturas de incubación de 30 °C. A 35 °C la mayoría de los aislamientos no crecieron, excepto tres aislamientos de B. bassiana y 14 de M. anisopliae (p < 0,001). Estos aislamientos fueron seleccionados para realizar pruebas de patogenicidad sobre V. destructor, aplicando una suspensión de 10(7) conidias mL-1. El aislamiento más efectivo fue Qu-M845 de M. anisopliae (p = 0,0033), produjo una mortalidad de 85%. La capacidad patogénica de este aislamiento en V. destructor y su tolerancia a las condiciones ambientales a las que sería expuesto, permite considerar esta cepa como una alternativa de control para esta plaga.

The effectiveness of the Metarhizium anisopliae (Metschinkoff) Qu-M845 isolate was evaluated in laboratory and field trials. It was previously selected for thermal resistance (at 30 and 35 ºC) and pathogenicity on Varroa destructor (Anderson and Trueman). In the laboratory, the first evaluations were carried out by spraying and increasing the concentration from zero to 10(8) conidia mL-1 on varroa adults. Lethal concentrations required for 50 and 90% mite mortality (LC50 and LC90) were 3.8 x 10(5) and 8 x 10(7) conidia mL-1, respectively (χ2 = 2.03). In the autumn field trials, three application methods (doses of 5 x 10(10) conidia per hive) were evaluated. The treatments were: a) conidia stamped on filter paper, located on every second frame inside the hive; b) dry conidia sprinkled on and between frames; and c) dry conidia in a dispenser path at the entrance of the hive. Furthermore, untreated hives were included as controls. After 21 days of treatment, the dry conidia sprinkled on and between frames showed 67% less bees infested by the mite than the control (p < 0.05). Average bee mortality observed was significantly different between treatments (p < 0.05). The sprinkled dry conidia caused the highest mortality of bees. In spring, this treatment produced increased mite mortality and without bee mortality. These results demonstrated that it is possible to develop a biological insecticide based on this isolate to generate an alternative to control V. destructor.La efectividad del aislamiento Qu-M845 de Metarhizium anisopliae (Metschinkoff), seleccionado previamente por su resistencia a temperaturas de 30 y 35 ºC, y patogenicidad sobre Varroa destructor Anderson y Trueman fue evaluada en laboratorio y en ensayos de terreno. Las primeras pruebas consistieron en pulverizar concentraciones crecientes de 0 a 10(8) conidias mL-1 sobre varroas adultas. La concentración letal para matar el 50 y 90% de la población (CL50 y CL90) fueron de 3,8 x 10(5) y 8 x 10(7) conidias mL-1, respectivamente (χ² = 2,03). En otoño se evaluaron en terreno tres métodos de aplicación de una dosis de 5 x 10(10) conidias por colmena. Los tratamientos fueron: a) conidias estampadas en papel filtro ubicado cada dos panales móviles al interior de la colmena; b) conidias espolvoreadas sobre y entre los panales; y c) dispensador de conidias ubicado en la piquera de las colmenas. Además se incluyeron colmenas sin tratar (testigo). Después de 21 días de la aplicación, el tratamiento de conidias espolvoreadas sobre y entre los panales presentó una disminución de 67% en el porcentaje de abejas infestadas, en relación al testigo (p < 0,05). Al evaluar la mortalidad de abejas se observaron diferencias entre tratamientos, siendo el espolvoreo de conidias el que causó mayor caída de abejas (p < 0,05). En primavera, este tratamiento produjo un aumento en la caída de ácaros sin registrar mortalidad de abejas. Estos resultados indican que es factible desarrollar un acaricida biológico en base a este aislamiento, generando, con ello, una alternativa de control para V. destructor.

The mortality of Triatoma infestans (Klug) treated with Beauvaria bassiana (Bals.) Vuill. under several temperature regimes was analyzed. Mortality rates were highest at 26ºC and 22ºC and lowest at constant 34ºC. The combinations 26/34ºC or 34/26ºC (12:12h cycles) were significantly different from the combinations 18/26ºC and 26/18ºC, showing that high temperatures (34ºC) affect mortality most significantly. The combinations also indicate that when an extreme high temperature is associated with an optimal temperature of 26ºC, the susceptibility of T. infestans to B. bassiana infection decreases. Exposure to extreme temperature (18ºC or 34ºC) associated with an optimal temperature of 26ºC in 8:8:8h cycles, reduces the mortality of T. infestans. In cycles of 6:6:6:6h, only the mortality associated with the 34/30/26/22ºC combination was similar to the combinations at constant 22ºC and 26ºC. Extreme temperatures during the first stage affect mortality less than when this period is not longer than 6h. Mortality decreases significantly when an extreme high initial temperature is followed by an abrupt fall (34/22/26/30ºC). Our results indicate that Beauvaria bassiana should be applied to the field in the late afternoon to avoid the negative impact of abrupt changes in temperature, or of high temperatures during the critical first stages of the infectious cycle of this entomopathogenic fungi. En el presente trabajo se analizó la mortalidad de Triatoma infestans (Klug) tratada con Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. bajo diferentes régimenes de temperatura. Los porcentajes de mortalidad a 26ºC y a 22ºC fueron más altos mientras que los más bajos se registraron a 34ºC constantes. Las combinaciones 26/34ºC o 34/26ºC (12:12h) fueron significativamente diferentes a las de 18/26ºC o 26/18ºC mostrando que es mayor el efecto de altas temperaturas (34ºC) sobre la mortalidad e indicando también que con una temperatura extrema alta unida a una óptima de 26ºC, decrece la susceptibilidad de T. infestans a la infección por parte de B. bassiana. Se observó que la exposición a temperaturas extremas (18ºC o 34ºC) junto a la óptima de 26ºC en ciclos de 8:8:8h reduce la mortalidad de T. infestans. Con alternancia de 6h (6:6:6:6h) se observó que sólo la mortalidad de la combinación 34/30/26/22°C fue similar a las de 22ºC y 26ºC constantes. La ocurrencia de temperaturas extremas durante el primer tramo afectan menos la mortalidad si el período en que ocurren no es tan largo (p.ej. 6h). Sin embargo, si a una temperatura extrema inicial le sigue una caída abrupta (34/22/26/30ºC), la mortalidad se ve significativamente reducida. Los resultados indicarían que es preferible realizar las aplicaciones en el campo al atardecer, para evitar la influencia negativa de cambios bruscos de temperaturas o temperaturas elevadas durante las primeras etapas críticas del ciclo infeccioso de los hongos entomopatógenos.

Blattella germanica (Dictyoptera: Blattellidae) es la especie más importante de las cucarachas sinantrópicas en el mundo. En este trabajo se evaluó la patogenicidad de aislamientos de Metarhizium anisopliae, M. pingshaense y Beauveria bassiana en ninfas y adultos de B. germanica. Para ofrecer una alternativa al uso de insecticidas en el manejo de B germanica, se desarrolló una formulación de cebo en polvo y pellet. Se determinó la preferencia de adultos de esta cucaracha, a diferentes dosis de azúcar glas (0.125, 0.25, 0.5, 0.75M) como fagoestimulante y se evaluó la compatibilidad del ácido bórico con los hongos M anisopliae y B bassiana en estos cebos. Finalmente, se evaluó vía oral, la virulencia de cebos formulados con azúcar glas 0.5 M, ácido bórico (0.5, 1, 2, 4%) y esporas de aislamientos de M. anisopliae (Ma2, Ma3, Ma7) y M. pingshaense (Ma5) contra ninfas de quinto ínstar de B. germanica. Se confirmó la diferencia de susceptibilidad de ninfas y adultos de la cucaracha alemana a estos hongos y se demostró que las ninfas de quinto instar de B. germanica son menos susceptibles a la infección por estos entomopatógenos. El valor de CL50 para los aislamientos fue de 1 - 3 x 107 esporas / mL. La concentración de azúcar glas más atractiva fue 0.5 M. La combinación de 2% de ácido bórico (AB) con esporas de M. anisopliae y B. bassiana no afectó la viabilidad de estos hongos. Los resultados de la evaluación oral de los cebos con ácido bórico y Metarhizium sobre ninfas de la cucaracha alemana causó mortalidades de 100% y el mejor TL50 fue 10 d para los cebos con 2% de ácido bórico. La mejor formulación fue, pellet con 2% AB y 2 x 108 esporas / g de cebo. Estos resultados demuestran un efecto sinérgico entre el AB y Metarhizium y ofrecen una alternativa potencial para el manejo de B. germanica. _______________ BAIT FOR CONTROL OF THE GERMAN COCKROACH Blattella germanica (DICTYOPTERA: BLATTELLIDAE) MADE WITH ENTOMOPATHOGENIC FUNGI AND BORIC ACID. ABSTRACT: Blattella germanica (Dictyoptera: Blattellidae) is the most important specie of synanthropic cockroaches in the world. In this study we evaluated the pathogenicity of isolates of Metarhizium anisopliae, M. pingshaense and Beauveria bassiana in nymphs and adults of B. germanica. To offer an alternative to the use of insecticides in the control of B germanica, developed a bait formulation in powder and pellet. We determined the preference of adults of this cockroach, at different doses of sugar (0.125, 0.25, 0.5, 0.75M) as phagostimulant and assessed the compatibility of boric acid with the fungus M anisopliae and B bassiana on these baits. Finally, we evaluated orally baits virulence 0.5M formulated with sugar, boric acid (0.5, 1, 2, 4%) and spore of M. anisopliae (Ma2, Ma3, MA7) and M. pingshaense (MA5) against fifth-instar nymphs of B. germanica. Differences in susceptibility of nymphs and adults of the German cockroach to these entomopathogenic fungi were confirmed and shown that fifth instar nymphs of B. germanica are less susceptible to infection. The LC50 value for the isolates was 1 to 3 x 107 spores / mL. Sugar concentration was 0.5 M more attractive. The combination of 2% boric acid (AB) with spores of M. anisopliae and B. bassiana did not affect the viability of these fungi. The oral evaluation results of boric acid baits and Metarhizium on German cockroach nymphs caused 100% mortality and LT50 was 10 d for baits with 2% boric acid. The best formulation was, pellet with 2% AB and 2 x 108 spores / g of bait. These results demonstrate a synergistic effect between the AB and Metarhizium and offer a potential alternative for the management of B. germanica.

En la Amazonía colombiana las termitas atacan los tocones a raíz desnuda de caucho natural Hevea brasiliensis. El presente estudio tuvo como objetivo evaluar en condiciones de laboratorio la patogenicidad del hongo Metarhizium anisopliae sobre termitas Heterotermes tenuis. Se emplearon las concentraciones 1x10¹, 1x10³, 3x10(5), 1x10(7) y 3x10(8) conidios/ml y el testigo (agua destilada estéril). Los insectos muertos se aclararon con KOH 10% y se montaron en placas microscópicas. La mortalidad se comparó mediante las curvas de sobrevivencia de Kaplan-Meier y se determinaron la CL50 y el TL50. La concentración 3x10(8)conidios/ml demostró ser la más efectiva (100% de los individuos eliminados en 6 días). Se encontraron diferencias entre las seis concentraciones empleadas en el porcentaje de supervivencia de H. tenuis (H5,81=19,4; p < 0,05) y en el tiempo (días) de supervivencia (H4,60=14,0; p < 0,05). La CL50 fue de 9,64 x 10³ conidios/ml en un tiempo de seis días. El TL50 fue de tres días para la concentración 3 x 10(8) conidios/ml. En condiciones de laboratorio M. anisopliae resulta ser muy efectivo sobre H. tenuis, razón por la cual su uso en condiciones naturales debería ser considerado en el manejo integrado de las termitas que afectan el cultivo de caucho natural en la región amazónica. Este estudio constituye el primer registro de biocontrol in vitro sobre H. tenuis en H. brasiliensis. In the Colombian Amazon termites attack bare root stumps of the rubber tree Hevea brasiliensis. The objective of the study was to evaluate the pathogenicity of the fungus Metarhizium anisopliae on Heterotermes tenuis termites under laboratory conditions. The concentrations used were 1x10¹, 1x10³, 3x10(5), 1x10(7) and 3x10(8) conidia/ml and the control (distilled sterile water). The dead insects were cleared with KOH at 10% and mounted on glass slides. Mortality was compared using Kaplan-Meier survival curves and the CL50 and TL50 were determined. The concentration of 3x10(8) conidia/ml was the most effective (100% of insects eliminated in six days). There were differences found among the six concentrations used in percent survival of H. tenuis (H5,81=19.4; p < 0.05) and in the time (days) of survival (H4,60=14.0; p < 0.05). The CL50 was 9.64 x 10³ conidia/ml after a time of six days. The TL50 was three days for the concentration of 3 x 10(8) conidia/ml. Under laboratory conditions M. anisopliae is very effective on H. tenuis, and for this reason its use under natural conditions should be considered in the integrated management of the termites that affect the cultivation of rubber trees in the Amazonian region. This study is the first report on the in vitro biocontrol of H. tenuis in H. brasiliensis.