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RESUMEN : Introducción: La hidradenitis supurativa (HS) es una enfermedad inflamatoria crónica que se asocia a una mayor prevalencia de aterosclerosis subclínica y eventos cardiovasculares isquémicos. Las moléculas angiopoyetina 2 (Ang-2), dimetilarginina asimétrica (ADMA) y osteoprotegerina OPG se han visto implicadas en la disfunción endotelial y en la aterosclerosis en pacientes con enfermedades inflamatorias crónicas. Objetivos: (1) Determinar las concentraciones séricas de Ang-2, ADMA y OPG en un grupo de pacientes con HS en comparación con un grupo de sujetos control emparejados por edad y sexo. (2) Investigar la existencia de asociación entre la gravedad de la enfermedad y los niveles de estos biomarcadores. Metodología: Se llevó a cabo un estudio de casos y controles emparejados por edad y sexo en el que se incluyeron 75 pacientes con HS y 60 controles. Se midieron, entre otras variables, los niveles de los biomarcadores Ang-2, OPG y ADMA. Asimismo, se estratificó la HS en función de su gravedad mediante la escala HS-PGA, comparando los niveles séricos de las tres moléculas en los dos grupos de pacientes con HS, según la gravedad de la enfermedad. Resultados: Se observó un incremento en los niveles de Ang-2 y ADMA en pacientes con HS respecto al grupo control: Ang-2: 1122.8 (804.2-1411.4) vs 623.9 (480.9-919.8), ADMA: 0.65 (0.55-0.76) vs 0.48 (0.39-0.62). Los niveles séricos de OPG fueron más altos en los controles, aunque esta diferencia no alcanzó la significación estadística. Los pacientes con formas más graves de HS presentaron niveles significativamente más altos que los pacientes con formas más leves de Ang-2 y de OPG: Ang-2 765.7 (542.3-1010.1) vs 1306.4 (1016.2- 1541.6), OPG 253.0 (202.4-441.1) vs 371.3 (291.0-607.9). Los niveles de ADMA fueron mayores en pacientes con HS grave, pero no fueron estadísticamente significativos. Conclusiones: Los pacientes con HS presentan niveles séricos de Ang-2 y ADMA significativamente más altos que los sujetos del grupo control. Los niveles séricos de Ang-2 y de OPG se correlacionan con la gravedad de la HS. Este hecho sugiere que ambas moléculas podrían ser biomarcadores de gravedad en los pacientes con esta enfermedad. ABSTRACT : Introduction: Hidradenitis suppurativa (HS) is a chronic inflammatory disease associated with an increased prevalence of subclinical atherosclerosis and ischaemic cardiovascular events. The molecules angiopoietin 2 (Ang-2), asymmetric dimethylarginine (ADMA) and osteoprotegerin OPG have been implicated in endothelial dysfunction and atherosclerosis in patients with chronic inflammatory diseases. Aims: (1) To determine the serum concentrations of Ang-2, ADMA and OPG in a group of patients with HS compared to a group of age- and sex- matched control subjects. (2) To investigate whether there is an association between disease severity and the serum levels of those biomarkers. Methodology: An age- and sex-matched case-control study was performed. Seventy-five patients with HS and 60 controls were included. Serum Ang-2, ADMA and OPG levels were measured in all participants. In addition, HS was stratified according to severity using the HS-PGA scale, comparing the serum levels of the three molecules between the two groups of HS patients according to disease severity. Results: Serum levels of Ang-2 and ADMA were significantly higher in patients with HS compared to the control group: Ang-2: 1122.8 (804.2-1411.4) vs 623.9 (480.9-919.8), ADMA: 0.65 (0.55-0.76) vs 0.48 (0.39-0.62). Serum OPG levels were also higher in controls, although this difference did not reach statistical significance. Patients with more severe forms of HS had significantly higher levels than patients with milder forms of Ang-2 and OPG: Ang-2: 765.7 (542.3-1010.1) vs 1306.4 (1016.2-1541.6), OPG 253.0 (202.4-441.1) vs 371.3 (291.0-607.9). ADMA levels were higher in patients with severe HS, but the differences not statistically significant. Conclusions: Patients with HS have significantly higher serum levels of Ang-2 and ADMA than the controls. Serum levels of Ang-2 and OPG correlate with the disease severity in patients with HS. This may suggest that both molecules could be biomarkers of severity in patients with this disease. Grado en Medicina

RESUMEN : Introducción: La hidradenitis supurativa (HS) es una enfermedad inflamatoria crónica que se asocia a una mayor prevalencia de aterosclerosis subclínica y eventos cardiovasculares isquémicos. Las moléculas angiopoyetina 2 (Ang-2), dimetilarginina asimétrica (ADMA) y osteoprotegerina OPG se han visto implicadas en la disfunción endotelial y en la aterosclerosis en pacientes con enfermedades inflamatorias crónicas. Objetivos: (1) Determinar las concentraciones séricas de Ang-2, ADMA y OPG en un grupo de pacientes con HS en comparación con un grupo de sujetos control emparejados por edad y sexo. (2) Investigar la existencia de asociación entre la gravedad de la enfermedad y los niveles de estos biomarcadores. Metodología: Se llevó a cabo un estudio de casos y controles emparejados por edad y sexo en el que se incluyeron 75 pacientes con HS y 60 controles. Se midieron, entre otras variables, los niveles de los biomarcadores Ang-2, OPG y ADMA. Asimismo, se estratificó la HS en función de su gravedad mediante la escala HS-PGA, comparando los niveles séricos de las tres moléculas en los dos grupos de pacientes con HS, según la gravedad de la enfermedad. Resultados: Se observó un incremento en los niveles de Ang-2 y ADMA en pacientes con HS respecto al grupo control: Ang-2: 1122.8 (804.2-1411.4) vs 623.9 (480.9-919.8), ADMA: 0.65 (0.55-0.76) vs 0.48 (0.39-0.62). Los niveles séricos de OPG fueron más altos en los controles, aunque esta diferencia no alcanzó la significación estadística. Los pacientes con formas más graves de HS presentaron niveles significativamente más altos que los pacientes con formas más leves de Ang-2 y de OPG: Ang-2 765.7 (542.3-1010.1) vs 1306.4 (1016.2- 1541.6), OPG 253.0 (202.4-441.1) vs 371.3 (291.0-607.9). Los niveles de ADMA fueron mayores en pacientes con HS grave, pero no fueron estadísticamente significativos. Conclusiones: Los pacientes con HS presentan niveles séricos de Ang-2 y ADMA significativamente más altos que los sujetos del grupo control. Los niveles séricos de Ang-2 y de OPG se correlacionan con la gravedad de la HS. Este hecho sugiere que ambas moléculas podrían ser biomarcadores de gravedad en los pacientes con esta enfermedad. ABSTRACT : Introduction: Hidradenitis suppurativa (HS) is a chronic inflammatory disease associated with an increased prevalence of subclinical atherosclerosis and ischaemic cardiovascular events. The molecules angiopoietin 2 (Ang-2), asymmetric dimethylarginine (ADMA) and osteoprotegerin OPG have been implicated in endothelial dysfunction and atherosclerosis in patients with chronic inflammatory diseases. Aims: (1) To determine the serum concentrations of Ang-2, ADMA and OPG in a group of patients with HS compared to a group of age- and sex- matched control subjects. (2) To investigate whether there is an association between disease severity and the serum levels of those biomarkers. Methodology: An age- and sex-matched case-control study was performed. Seventy-five patients with HS and 60 controls were included. Serum Ang-2, ADMA and OPG levels were measured in all participants. In addition, HS was stratified according to severity using the HS-PGA scale, comparing the serum levels of the three molecules between the two groups of HS patients according to disease severity. Results: Serum levels of Ang-2 and ADMA were significantly higher in patients with HS compared to the control group: Ang-2: 1122.8 (804.2-1411.4) vs 623.9 (480.9-919.8), ADMA: 0.65 (0.55-0.76) vs 0.48 (0.39-0.62). Serum OPG levels were also higher in controls, although this difference did not reach statistical significance. Patients with more severe forms of HS had significantly higher levels than patients with milder forms of Ang-2 and OPG: Ang-2: 765.7 (542.3-1010.1) vs 1306.4 (1016.2-1541.6), OPG 253.0 (202.4-441.1) vs 371.3 (291.0-607.9). ADMA levels were higher in patients with severe HS, but the differences not statistically significant. Conclusions: Patients with HS have significantly higher serum levels of Ang-2 and ADMA than the controls. Serum levels of Ang-2 and OPG correlate with the disease severity in patients with HS. This may suggest that both molecules could be biomarkers of severity in patients with this disease. Grado en Medicina

Orientador: Dagmar Ruth Stach Machado Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: A doença periodontal (DP) é uma doença inflamatória crônica que acomete os tecidos que suportam o dente, podendo resultar na perda dentária. O agente etiológico da DP é a placa bacteriana que se forma junto ao dente, no entanto, é a resposta imune do hospedeiro que vai determinar a suscetibilidade ao desenvolvimento e a progressão da DP. Uma resposta imune com perfil pró inflamatório, representado por linfócitos T helper (Th) 1 e Th17, leva à progressão da DP, enquanto que com perfil antiinflamatório, representado por linfócitos Th2 e T regulatórios, não há desenvolvimento da doença. Citocinas pró-inflamatórias induzem a expressão de metaloproteinases de matriz (MMP) e inibem a expressão de seus inibidores, os inibidores teciduais de metaloproteinases de matriz (TIMP). O desequilíbrio dos níveis de MMPs/TIMPs é responsável pela degradação da matriz extracelular, presente na DP. Essa resposta pró-inflamatória também leva os desbalanço da expressão do ligante do receptor ativador do fator nuclear kappa B (RANKL) e seu inibidor, a osteoprotegerina (OPG), resultando na reabsorção do osso alveolar, o ponto chave da lesão tecidual na DP. Indivíduos obesos apresentam maior predisposição ao desenvolvimento da DP e apresentam uma maior severidade da doença. Desse modo, o presente trabalho teve como objetivo analisar a influência da obesidade nas alterações gênicas e protéicas associadas à resposta inflamatória e à destruição tecidual durante o desenvolvimento e progressão da DP induzida por ligadura em ratos. A obesidade induzida por dieta hiperlipídica (DHL) foi caracterizada por intolerância à glicose, glicemia elevada, elevado índice de Lee, alterações hepáticas, aumento do peso das gorduras viscerais, hiperinsulinemia e alterações nos níveis plasmáticos de colesterol. Animais do grupo DHL apresentaram uma maior expressão gênica e protéica de citocinas pró-inflamatórias no tecido gengival acometido pela DP. Em especial, a expressão da interleucina (IL) 17, da IL6 e do interferon gama (IFNG) foi significativamente maior em relação ao grupo alimentado com ração normolipídica. Não foram observadas diferenças muito significativas entre os dois grupos na expressão das citocinas antiinflamatórias IL4, IL10 e fator de transformação do crescimento beta (Tgfb). O grupo DHL apresentou um aumento da expressão gênica de MMPs, em especial da Mmp13, e uma diminuição na expressão de Timp1, Timp2 e Reversion Inducing Cysteine-rich Protein with Kazal Motifs (Reck). Ademais, foi observado um aumento significativo da razão Rankl/Opg no grupo DHL, acompanhado de maior reabsorção do osso alveolar. A alimentação com a dieta hiperlipídica induziu alterações metabólicas características da obesidade, que resultaram na exacerbação da resposta inflamatória no tecido gengival com DP. Essa resposta pró-inflamatória, polarizada para os perfis Th1 e Th17, levou ao desbalanço da expressão gênica das razões MMPs/TIMPs e Rankl/Opg. Por fim, a desregulação dos mediadores da destruição tecidual e de seus inibidores resultou no agravamento da DP, com aumento da reabsorção do osso alveolar. Desse modo, esse trabalho possibilitou relacionar o estado obeso à progressão da DP Abstract: Periodontal disease (PD) is a chronic inflammatory disease that affects the tissues that support the teeth and can result in tooth loss. The etiological agent of PD is the dental plaque, which can be formed on the surface of the tooth. However, the host immune response is determinant for the susceptibility to development and progression of PD. Immune responses with a pro-inflammatory profile, represented by T helper (Th) 1 and Th17 cells, leads to PD progression, whereas an anti-inflammatory profile, represented by Th2 and T regulatory cells, is associated with no disease development. Proinflammatory cytokines induce expression of matrix metalloproteinases (MMP) and inhibit expression of their inhibitors, called tissue inhibitors of metalloproteinases (TIMP). The imbalance of MMPs/TIMPs levels is responsible for the characteristic degradation of the extracellular matrix in PD. The proinflammatory response also leads to expression imbalance of the receptor activator of nuclear factor kappa B ligand (RANKL) and its inhibitor, osteoprotegerin (OPG), resulting in alveolar bone resorption, which is the key event in tissue damage in PD. It is known that obese individuals have a higher predisposition to PD development and present a greater disease severity. Thus, the present study aimed to evaluate the influence of obesity on gene and protein changes associated with the inflammatory response and tissue destruction during the development and progression ligature-induced PD in rats. The high fat diet-induced obesity (HFD) was characterized by impaired glucose tolerance, increased blood glucose level, increased Lee index, liver alterations, increased weight of visceral fat, hyperinsulinemia and changes in plasma levels of cholesterol. Animals from HFD group showed a higher protein and gene expression of pro-inflammatory cytokines in gingival tissue affected by PD. In particular, the expression of interleukin (IL) 17, of IL6 and interferon gamma (IFNG) was significantly higher compared to the group fed a normolipidic diet. There were not much significant differences between both groups in the expression of anti-inflammatory cytokines IL4, IL10 and transforming growth factor beta (Tgfb). HFD group showed an increased MMPs gene expression, especially Mmp13, and a decrease in the expression of Timp1, Timp2 and Reversion Inducing Cysteine-rich Protein with Kazal Motifs (Reck). Moreover, we observed a significant increase in Rankl/Opg ratio in group HFD, followed by greater alveolar bone resorption. HFD induced metabolic changes that are characteristic of obesity, which resulted in exacerbation of inflammatory response in gingival tissue with PD. This pro-inflammatory response, which was polarized to Th1 and Th17 profiles, led to an imbalance in MMPs/TIMPs and Rankl/Opg gene expression ratios. Finally, the deregulation of the mediators of tissue destruction and their inhibitors resulted in worsening of PD with increased alveolar bone resorption. Therefore, this study allowed a correlation between obesity and PD progression Mestrado Imunologia Mestre em Genética e Biologia Molecular

Este estudo teve como objetivo investigar as variações genéticas no gene osteoprotegerina (TNFRSF11B) em pacientes com Anquilose da Articulação Temporomandibular (AATM), a fim de compreender a etiologia genética desta condição. A amostra foi composta por 17 pacientes com diagnóstico de AATM, de ambos os sexos, com idade variando de 6 a 57 anos. A análise mutacional do TNFRSF11B foi realizada pelo método de sequenciamento Sanger usando DNA extraído de células epiteliais orais e a previsão do impacto funcional das variantes identificadas foi avaliada por análises da bioinformática. A análise de sequenciamento identificou 15 (88,23%) indivíduos que apresentavam pelo menos uma variante genética do TNFRSF11B. A mutação rs202090603 (p.E33K) foi encontrada em 6 indivíduos, e rs140782326 (p.V281M), rs11573942 (p.L295) e rs1375250340 (p.I389T) foram identificados em 1 sujeito cada. Os polimorfismos de nucleotídeo único (SNPs) rs2073618 (p.N3K) e rs2228568 (p.L256) foram encontrados em 10 e 6 pacientes, respectivamente. De acordo com o potencial de patogenicidade das mutações, 3 variantes foram consideradas de baixo impacto (rs2073618, rs202090603 e rs2228568) e 3 como causadoras da doença (rs140782326, rs11573942 e rs1375250340). A variante rs202090603 (p.E33K) foi encontrada no primeiro domínio da cisteína e a análise in sílico mostrou diferenças nas posições do loop da estrutura 3D mutada de p.E33K da osteprotegerina. Nossos achados sugerem que dois polimorfismos (rs2073618 e rs2228568) e as mutações rs202090603 (p.E33K), rs140782326 (p.V281M), rs11573942 (p.L295) e rs1375250340 (p.I389T) no gene TNFRSF11B podem associadas com a AATM. This study was aimed to investigate genetic variations in the osteoprotegerin-encoding gene (TNFRSF11B) in patients with Temporomandibular Joint Ankylosis (TMJA) in order to understand the genetic etiology of this condition. The sample was comprised of 17 patients diagnosed with TMJA, of both sexes with age ranging from 6 to 57 years old. TNFRSF11B mutational analysis was performed by Sanger sequencing using DNA extracted from oral epithelial cells, and the functional impact prediction of the identified variants was assessed by bioinformatic analysis. Sequencing analysis identified 15 (88.23%) patients that presented at least one genetic variant in TNFRSF11B. The mutation rs202090603 (p.E33K) was found in 6 individuals, and rs140782326 (p.V281M), rs11573942 (p.L295) and rs1375250340 (p.I389T) were identified in 1 subject each. The common singlenucleotide polymorphisms (SNPs) rs2073618 (p.N3K) and rs2228568 (p.L256) were found in 10 and 6 patients, respectively. According to the pathogenicity potential of mutations, 3 variants were considered of low impact (rs2073618, rs202090603 and rs2228568) and 3 as disease-causing (rs140782326, rs11573942 and rs1375250340). The variant rs202090603 (p.E33K) was found in the first cysteine domain and the in silico analysis showed differences in the loop positions of p.E33K mutated 3-D structure of the osteprotegerin. Our findings suggest that two polymorphisms (rs2073618 and rs2228568) and the mutations rs202090603 (p.E33K), rs140782326 (p.V281M), rs11573942 (p.L295) and rs1375250340 (p.I389T) in TNFRSF11B gene are associated with TMJA.

126 p. Los mecanismos celulares involucrados en el movimiento dentario todavía no han sido esclarecidos en su totalidad, aunque se acepta con carácter general que son los mismos que regulan la remodelación ósea que se observa tras la aplicación de fuerzas mecánicas (Yokoya y Cols., 1997). En la práctica asistencial ortodóncica, se producen situaciones en las cuales, por la complejidad del caso o a las características del paciente, se requieren unas condiciones especiales de anclaje, difíciles de conseguir a pesar de la eficacia de las nuevas técnicas ortodóncicas disponibles. En estos casos la posibilidad de actuar directamente sobre la actividad de los osteoclastos alterando el turn-over del hueso podría ser una estrategia de actuación altamente beneficiosa, reduciendo el tiempo de tratamiento, aumentando su efectividad, mejorando el confort del paciente y optimizando los resultados conseguidos (Rody y Cols., 2001). A este respecto existen diferentes fármacos capaces de alterar el ciclo de remodelación ósea y que, por tanto, podrían ser utilizadas para modificar la repuesta del movimiento dentario tal y como se ha demostrado en diferentes modelos experimentales (Liu y Cols., 2004; de Carlos y Cols., 2006, 2007; Karras y Cols., 2009; Ortega y Cols., 2012; Yabumoto y Cols., 2013; Fernández-González y Cols., 2015). Entre las sustancias susceptibles de modificar la función de los osteoclastos se encuentran los bisfosfonatos (BFs), los antiinflamatorios y otro tipo de moléculas (Oms), que ya han sido empleadas para prevenir la pérdida de anclaje en el campo de la ortodoncia (de Carlos y Cols., 2006, 2007; Karras y Cols., 2009; Ortega y Cols., 2012; Yabumoto y Cols., 2013). Por otra parte, recientes investigaciones sugieren que algunos moduladores biológicos capaces de producir la inhibición de la actividad del osteoclasto, también se podrían utilizar para solucionar este tipo de problemas. Las moléculas utilizadas en el ámbito ortodóncico para interferir en el proceso de remodelación ósea y, consecuentemente, intervenir sobre el movimiento dentario comprenden los BFs, fármacos antiinflamatorios o la osteoprotegerina (OPG), entre otras. Tanto los BFs como la OPG se emplean actualmente en el tratamiento de diversas patologías como la osteoporosis, la enfermedad de Paget o las metástasis óseas; su mecanismo de actuación es la inhibición de la actividad osteoclástica, lo que lleva a una disminución de la reabsorción ósea (Simonet y Cols., 1997; Keles y Cols., 2007). En el ámbito odontológico se ha evaluado la posible utilización de este tipo de sustancias debido a sus propiedades biológicas. Así, se han usado en varios modelos experimentales con el fin de tratar la periodontitis en ratas (Killeen y Cols., 2012), mejorar la estabilidad de los microtornillos (Wermelin y Cols., 2008), evitar la recidiva post-tratamiento ortodóncico (Oztürk y Cols., 2011, 2012), disminuir las reabsorciones radiculares (Sirisoontorn y Cols., 2012) o prevenir la pérdida de anclaje en ortodoncia (Ortega y Cols., 2012; Dunn y Cols., 2007). La aplicación local de estas moléculas en la zona adyacente a los dientes previstos para el anclaje, puede dotar al profesional de la odontología de nuevos tratamientos farmacológicos para prevenir el movimiento dentario indeseado dando lugar a actuaciones ortodóncicas menos complicadas y más saludables (Schneider y Cols., 2015; Li y Tang, 2009). El presente trabajo de tesis doctoral se diseñó para analizar los efectos de la aplicación local de zoledronato (un BP ampliamente utilizado en medicina) y de la OPG en la prevención de los movimientos dentarios en un modelo de movimiento dentario en rata, utilizando criterios radiológicos, odontológicos y estructurales. La memoria que se presenta es el compendio de tres publicaciones en revistas internacionales en las que se realiza una amplia revisión sobre el anclaje en ortodoncia (Artículo 1), el efecto sobre la reabsorción ósea de la OPG (Artículo 2) y el análisis comparativo de los efectos sobre el movimiento dentario inducido del zoledronato y la OPG. La memoria recoge, igualmente, los resultados de esta línea de investigación presentados en diversos congresos nacionales

Submitted by Juliana Zorzi Colete (julyzorzi@hotmail.com) on 2018-06-19T18:16:47Z No. of bitstreams: 1 Tese Doutorado definitiva.pdf: 4321386 bytes, checksum: 3a2fa9f824554157582a69fd369a6bce (MD5) Approved for entry into archive by Ana Paula Rimoli de Oliveira null (anapaula@foa.unesp.br) on 2018-06-19T19:42:54Z (GMT) No. of bitstreams: 1 colete_jz_dr_araca_int.pdf: 4321386 bytes, checksum: 3a2fa9f824554157582a69fd369a6bce (MD5) Made available in DSpace on 2018-06-19T19:42:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 colete_jz_dr_araca_int.pdf: 4321386 bytes, checksum: 3a2fa9f824554157582a69fd369a6bce (MD5) Previous issue date: 2018-05-23 Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) Financiadora de Estudos e Projetos (FINEP) Avaliar o reparo ósseo periimplantar em ratas submetidas à ovariectomia e tratadas com Ranelato de Estrôncio (625mg/kg/dia) ou OPG-Fc (10mg/Kg/2 vezes por semana). Material e Método: Sessenta e quatro ratas, com peso aproximado de 300 gramas, divididas em 4 grupos experimentais conforme tratamento medicamentoso e análises: SHAM; OVX; OVX/RE; OVX/OPG-Fc. Cada animal recebeu 2 implantes sendo 1 em cada metáfise tibial. A eutanásia foi realizada aos 42 e 60 dias após a instalação dos implantes. Foram realizadas as análises de microtomografia computadorizada (micro CT), biomecânica (torque reverso) histométrica, por microscopia confocal a laser, análise da expressão gênica por PCR em tempo real, histológica e imunoistoquímica. Os resultados histológicos evidenciaram para o grupo OVX-RE aspecto de neoformação óssea melhorada, com trabéculas mais espessas e baixa presença de tecido conjuntivo, comparado ao grupo OVX. Os resultados imunoistoquímicos demonstraram intensa marcação de OPG para o grupo OVX-RE e intensa marcação de RANKL para o grupo OVX. Já a análise por microscopia confocal evidenciou que o grupo OVX-RE obteve marcação superior para vermelho de alizarina comparado aos outros dois grupos (Tukey test – P < 0,05). Para os parâmetros BV/TV, Tb.Th, o grupo OVX/RE apresentou os maiores valores em relação aos demais grupos. Para Tb.Sp o grupo OVX/OPG-Fc apresentou o melhor resultado (OVX: p0,05), e Tb.N, houve diferença estatisticamente significante na comparação dos resultados entre os grupos OVX e OVX/OPG-Fc (p 0.05), and the Tb.N exhibited a statistical significant difference in the combination of results between the OVX and OVX / OPG - Fc groups (p

Introducción: diversos estudios demuestran que los pacientes con insuficiencia cardíaca (IC) presentan mayor riesgo de sufrir osteoporosis y fracturas por fragilidad, contribuyendo a un empeoramiento funcional de estos pacientes. Aunque se desconocen con certeza los mecanismos fisiopatogénicos encargados de producir ambas patologías, se cree que puede estar relacionado con el aumento de RANKL en ambas entidades. Objetivo: Estudiar la prevalencia de alteraciones tanto en la densidad como en la microarquitectura ósea mediante la utilización del TBS en pacientes con IC con FEVI reducida y conocer sus características demográficas, clínicas, analíticas, radiológicas y terapéuticas. Diseño: Estudio observacional transversal de pacientes con IC crónica con FEVI disminuida seguidos en la consulta monográfica de IC procedentes del servicio de Cardiología de un hospital terciario comparados con grupo control sin IC. Ámbito: gen de la Arrixaca con la participación del servicio de Cardiología, Reumatología, Análisis Clínicos y Radiología. Sujetos: se incluirán pacientes con IC crónica con FEVI disminuida (FEVI

Periodontitis is an inflammatory disease characterized by dysbiosis and alveolar bone resorption (ABR). Strontium ranelate (SrR), a drug used to treat osteoporosis, has been notable for its bone anabolic and antiresorptive effects. The anti-inflammatory and antiresorptive effects of SrR on ligature-induced alveolar bone resorption were evaluated. For this, female Wistar rats (170±20 g; n= 6/group), submitted to 28 days of ligature (3/0 nylon thread) of the second upper molars, received per os daily water for injection (vehicle) or SrR (70, 210 and 630 mg/kg). After euthanasia, its jaws were removed, and the ABR was analyzed by macroscopy, microscopy and immunohistochemistry for TNF-α, IL-1β, RANKL, OPG and TRAP. Neutrophil influx was analyzed by myeloperoxidase (MPO) activity in the gingiva. Systemicaly, it were evaluated: serum levels of bone-specific alkaline phosphatase (BALP) and AST and ALT transaminases, hepatic index, leukogram and animal weight. Ligature for 28 days significantly increased ABR, as seen by macroscopy and microscopy, and MPO, as well as immunostaining for TNF-α, IL-1β, RANKL and TRAP, increased the RANKL/OPG ratio, reduced BALP, caused leukocytosis, and weight reduction in the first days after ligature, without liver changes. SrR (210 and 630 mg/kg) significantly reduced ABR by 22% and 45%, respectively, as well (SrR 630 mg/kg) reduced the furcation lesion by 64% compared to the vehicle group. Histology showed significant reduction of leukocyte infiltrate and bone and cement resorption [vehicle: Md=2 (2-2), Mg=1 (1-1)], as well as of the immunostaining for TNF-α, IL-1β, RANKL and TRAP by 51%, 54%, 63% and 66%, respectively, and of the RANKL/OPG ratio, without change of MPO. In addition, SrR (630 mg/kg) prevented the reduction of BALP (60%, p=0.01), reduced leukocytosis, and did not alter transaminases and the time course of animal weight variation. In summary, SrR presented bone antiresorptive effect by both reduction of inflammatory response and support bone anabolism, without systemic alterations in animals. A periodontite é uma doença inflamatória caracterizada por disbiose e reabsorção óssea alveolar (ROA). O ranelato de estrôncio (SrR), um fármaco utilizado no tratamento da osteoporose, tem se destacado por seus efeitos antirreabsortivo e anabólico ósseos. Avaliou-se os efeitos anti-inflamatório e antirreabsortivo ósseos do SrR na reabsorção óssea alveolar induzida por ligadura. Para tanto, ratas Wistar (170±20 g; n=6/grupo), submetidas a 28 dias de ligadura (fio de náilon 3.0) dos segundos molares superiores, receberam por via oral diariamente água para injeção (veículo) ou SrR (70, 210 e 630 mg/kg). Após a eutanásia, suas maxilas foram removidas, e a ROA foi analisada por macroscopia, microscopia e imuno-histoquímica para TNF-α, IL-1β, RANKL, OPG e TRAP. O influxo de neutrófilos foi analisado pela atividade da mieloperoxidase (MPO) na gengiva. Sistemicamente, foram avaliados: níveis séricos de fosfatase alcalina óssea (FAO) e transaminases AST e ALT, índice hepático, leucograma e peso dos animais. A ligadura durante 28 dias aumentou significantemente a ROA, vista por macroscopia e microscopia, e a MPO, bem como a imunomarcação para TNF-α, IL-1β, RANKL e TRAP, aumentou a razão RANKL/OPG, reduziu FAO, causou leucocitose e redução de peso nos primeiros dias após a ligadura, sem alterações hepáticas. O SrR (210 e 630 mg/kg) reduziu significantemente a ROA em 22% e 45%, respectivamente, como também (SrR 630 mg/kg) reduziu a lesão de furca em 64%, comparado ao grupo veículo. A histologia evidenciou redução significante do infiltrado leucocitário e reabsorções óssea e cementária [veículo: Md=2 (2-2); SrR 630 mg/kg: Md=1 (1-1)], bem como da imunomarcação para TNF-α, IL-1β, RANKL e TRAP em 51%, 54%, 63% e 66%, respectivamente, e da razão RANKL/OPG, sem alteração da MPO. Além disso, SrR (630 mg/kg) preveniu a redução da FAO (60%; p=0,01), reduziu a leucocitose, e não alterou as transaminases nem o curso da variação de peso dos animais. Em suma, o SrR apresentou efeito antirreabsortivo ósseo tanto por reduzir a resposta inflamatória, como por favorecer o anabolismo ósseo, sem alterações sistêmicas nos animais.

La osteoporosis se define como un trastorno esquelético sistémico. El individuo presenta una masa ósea baja con deterioro de la microarquitectura del tejido óseo, tanto trabecular como cortical, derivando en fragilidad ósea susceptible de fracturas. A nivel del metabolismo óseo, presenta una actividad osteoblástica y osteoclástica alterada. Esta patología se ve influenciada por factores como la edad, el tabaco, la alimentación, alteraciones hormonales, el uso de ciertos medicamentos, o exceso de ejercicio físico. Se estima que una de cada tres mujeres y uno de cada cinco hombres de más de 50 años padecerá una fractura por osteoporosis. Según estudios publicados, el 95% de los pacientes que presentan una fractura por fragilidad, no había sido diagnosticado previamente de osteoporosis, demostrando que la enfermedad no presenta signos de alerta previos a la aparición de fracturas. La prevalencia de la enfermedad aumenta un 15% entre edades comprendidas entre los 50 y 59 años y hasta un 80% en edades superiores a los 80 años. Objetivo: El objetivo del estudio es relacionar las unidades de densidad radiológica obtenidas a partir de la tomografía computerizada de haz cónico (CBCT) de los maxilares y el metabolismo óseo mediante la cuantificación de factores del metabolismo óseo obtenidos de dichos maxilares. Material y método: Se analizó en un total de 28 mujeres postmenopausicas la densidad en maxilar posterior según CBCT, y los valores del metabolismo óseo (RANKL, OPG, Ca2+ y ALP). Los grupo de estudio fueron: Grupo 1: grupo control (pacientes con ausencia de osteoporosis), Grupo 2: grupo test 1 (pacientes con osteoporosis sin tratamiento), Grupo 3: grupo test 2 (pacientes con osteoporosis bajo tratamiento farmacológico). Resultados: Según los resultados obtenidos, no hemos encontrado relación entre los indicadores del metabolismo óseo y la densidad ósea del maxilar determinada a partir del CBCT en pacientes sin o con osteoporosis. Los pacientes con osteoporosis presentan una densidad ósea maxilar significativamente más baja a nivel de la tuberosidad que el grupo de pacientes sin osteoporosis y una marcada tendencia a menor densidad en la zona perimplantaria analizada. En relación a los valores del metabolismo óseo, el grupo sin osteoporosis presentó valores mayores de ion calcio, no habiendo diferencias para el resto de valores. Sin embargo si hubieron diferencias entre el grupo con osteoporosis tratado del no tratado, presentando mayor concentración de RANKL, y menor concentración de ALP el grupo tratado. El grupo sin osteoporosis presentó concentraciones mayores de Ca2+ y ALP que el grupo con osteoporosis. Conclusión: Se han determinado diferencias entre el grupo sano y el grupo con osteoporosis tanto a nivel de densidad de maxilar evaluado con el CBCT como a nivel de ciertos valores del metabolismo óseo como el Ca2+ y la ALP. Sin embargo no se ha podido establecer ninguna correlación entre la densidad ósea de los maxilares y los valores del metabolismo óseo., L'osteoporosi es defineix com un trastorn esquelètic sistèmic, per el que l 'individu presenta una massa òssia baixa amb deteriorament de la microarquitectura del teixit ossi, tant trabecular com cortical, derivant en fragilitat òssia susceptible de fractures. A nivell del metabolisme ossi, presenta una activitat osteoblàstica i osteoclàstica alterada. Aquesta patologia es veu influenciada per factors com l'edat, el tabac, l'alimentació, alteracions hormonals, l'ús de certs medicaments, o excés d'exercici físic. S'estima que una de cada tres dones i un de cada cinc homes de més de 50 anys patirà una fractura per osteoporosi. Segons estudis publicats, el 95% dels pacients que presenten una fractura per fragilitat, no havia estat diagnosticat prèviament d'osteoporosi, demostrant que la malaltia no presenta signes d'alerta previs a l'aparició de fractures. La prevalença de la malaltia augmenta un 15% entre edats compreses entre els 50 i 59 anys i fins a un 80% en edats superiors als 80 anys. Objectiu: L'objectiu de l'estudi és relacionar les unitats de densitat radiològica obtingudes a partir de la tomografia computeritzada de feix cònic (CBCT) dels maxil·lars i el metabolisme ossi mitjançant la quantificació de factors del metabolisme ossi obtinguts d'aquests maxil·lars. Material i mètode: Es va analitzar en un total de 28 dones postmenopàusiques la densitat en maxil·lar posterior segons CBCT, i els valors del metabolisme ossi (RANKL, OPG, Ca2 + i ALP). Els grup d'estudi van ser: Grup 1: grup control (pacients amb absència d'osteoporosi), Grup 2: grup test 1 (pacients amb osteoporosi sense tractament), Grup 3: grup test 2 (pacients amb osteoporosi sota tractament farmacològic). Resultats: Segons els resultats obtinguts, no hem trobat relació entre els indicadors del metabolisme ossi i la densitat òssia del maxil·lar determinada a partir de l'CBCT en pacients sense o amb osteoporosi. Els pacients amb osteoporosi presenten una densitat òssia maxil·lar significativament més baixa a nivell de la tuberositat que el grup de pacients sense osteoporosi i una marcada tendència a menor densitat a la zona perimplantaria analitzada. En relació als valors del metabolisme ossi, el grup sense osteoporosi presentar valors més grans de ió calci, no hi ha diferències per a la resta de valors. No obstant això si van haver diferències entre el grup amb osteoporosi tractat del no tractat, presentant major concentració de RANKL, i menor concentració d'ALP el grup tractat. El grup sense osteoporosi presentar concentracions més grans de Ca2 + i ALP que el grup amb osteoporosi. Conclusió: S'han determinat diferències entre el grup sa i el grup amb osteoporosi tant a nivell de densitat de maxil·lar avaluat amb el CBCT com a nivell de certs valors del metabolisme ossi com el Ca2 + i la ALP. No obstant això no s'ha pogut establir cap correlació entre la densitat òssia dels maxil·lars i els valors del metabolisme ossi.

En condiciones fisiológicas, el órgano dentinopulpar no se encuentra asociado a procesos de remodelación y resorción. La Osteoprotegerina (OPG) es una molécula del Factor de Necrosis Tumoral (TNF) que participa en la diferenciación y activación de osteoclastos, por lo que su papel en el control del proceso de reabsorción radicular interna debe ser determinado. Se tomaron secciones histológicas de 5 µm tomadas de primeros molares de 8 hemimandíbulas de ratón y fueron sometidas a proceso de inmunohistoquímica con la técnica de complejo avidina-biotina peroxidasa para la detección de OPG. Se identificó la presencia de OPG en las regiones central y periférica de la pulpa de ratones de 4 y 12 semanas. La pulpa de ratones albino suizo mostró presencia diferencial de OPG en las zonas central y periférica.

All Author: Renée T. Fortner, Danja Sarink, Helena Schock, Theron Johnson, Anne Tjønneland, Anja Olsen, Kim Overvad, Aurélie Affret, Mathilde His, Marie-Christine Boutron-Ruault, Heiner Boeing, Antonia Trichopoulou, Androniki Naska, Philippos Orfanos, Domenico Palli, Sabina Sieri, Amalia Mattiello, Rosario Tumino, Fulvio Ricceri, H. Bas Bueno-de-Mesquita, Petra H. M. Peeters, Carla H. Van Gils, Elisabete Weiderpass, Eiliv Lund, J. Ramón Quirós, Antonio Agudo, Maria-José Sánchez, María-Dolores Chirlaque, Eva Ardanaz, Miren Dorronsoro, Tim Key, Kay-Tee Khaw, Sabina Rinaldi, Laure Dossus, Marc Gunter, Melissa A. Merritt, Elio Riboli and Rudolf Kaaks, Background: Circulating osteoprotegerin (OPG), a member of the receptor activator of nuclear factor kappa-B (RANK) axis, may influence breast cancer risk via its role as the decoy receptor for both the RANK ligand (RANKL) and tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand (TRAIL). Circulating OPG and breast cancer risk has been examined in only one prior study. Methods: A case-control study was nested in the European Prospective Investigation into Cancer and Nutrition (EPIC) cohort. A total of 2008 incident invasive breast cancer cases (estrogen receptor (ER)+, n = 1622; ER–, n = 386), matched 1:1 to controls, were included in the analysis. Women were predominantly postmenopausal at blood collection (77%); postmenopausal women included users and non-users of postmenopausal hormone therapy (HT). Serum OPG was quantified with an electrochemiluminescence assay. Relative risks (RRs) and 95% confidence intervals (CIs) were calculated using conditional logistic regression. Results: The associations between OPG and ER+ and ER– breast cancer differed significantly. Higher concentrations of OPG were associated with increased risk of ER– breast cancer (top vs. bottom tertile RR = 1.93 [95% CI 1.24–3.02]; ptrend = 0.03). We observed a suggestive inverse association for ER+ disease overall and among women premenopausal at blood collection. Results for ER– disease did not differ by menopausal status at blood collection (phet = 0.97), and we observed no heterogeneity by HT use at blood collection (phet ≥ 0.43) or age at breast cancer diagnosis (phet ≥ 0.30). Conclusions: This study provides the first prospective data on OPG and breast cancer risk by hormone receptor subtype. High circulating OPG may represent a novel risk factor for ER– breast cancer., This project was funded by research grant 111454 from the Deutsche Kresbshilfe. RT Fortner was supported by a Marie Curie International Incoming Fellowship of the European Commission’s Seventh Framework Programme (MC-IIF-623984). The coordination of EPIC is financially supported by the European Commission (DG-SANCO) and the International Agency for Research on Cancer. The national cohorts are supported by the Danish Cancer Society (Denmark); Ligue Contre le Cancer, Institut Gustave Roussy, Mutuelle Générale de l’Education Nationale, and Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM) (France); German Cancer Aid, German Cancer Research Center (DKFZ), Federal Ministry of Education and Research (BMBF), Deutsche Krebshilfe, Deutsches Krebsforschungszentrum, and Federal Ministry of Education and Research (Germany); the Hellenic Health Foundation (Greece); Associazione Italiana per la Ricerca sul Cancro-AIRC-Italy and the National Research Council (Italy); the Dutch Ministry of Public Health, Welfare and Sports (VWS), Netherlands Cancer Registry (NKR), LK Research Funds, Dutch Prevention Funds, Dutch ZON (Zorg Onderzoek Nederland), World Cancer Research Fund (WCRF), and Statistics Netherlands (The Netherlands); ERC-2009-AdG 232997 and Nordforsk, Nordic Centre of Excellence programme on Food, Nutrition and Health (Norway); Health Research Fund (FIS), PI13/00061 to Granada, PI13/01162 to EPIC-Murcia, Regional Governments of Andalucía, Asturias, Basque Country, Murcia, and Navarra, and ISCIII RETIC (RD06/0020) (Spain); the Swedish Cancer Society, Swedish Research Council, and County Councils of Skåne and Västerbotten (Sweden); and Cancer Research UK (14136 to EPIC-Norfolk; C570/A16491 and C8221/A19170 to EPIC-Oxford), and the Medical Research Council (1000143 to EPIC-Norfolk, MR/M012190/1 to EPIC-Oxford) (UK).

Antecedentes: La cuantificación y caracterización del calcio (Ca) mineral (hidroxiapatita) en la bifurcación carotídea con AngioTC, y su relación con la sintomatología neurológica, en un estudio preliminar de casos y controles (Miralles y cols. Eur J Vasc Endovasc Surg 2006), constituye la base conceptual del presente estudio. Sus resultados, al igual que los de otras publicaciones, sugerían un posible papel protector del calcio en el desarrollo de eventos neurológicos. Sin embargo, su relación con la progresión de la ateromatosis carotídea ha sido escasamente analizado. Objetivos: Principales: 1. Diseñar un método de medición volumétrica de la ateromatosis (AE) carotídea y contenido de Ca mediante AngioTC. 2. Analizar el grado de calcificación arterial y su relación con la progresión de la ateromatosis carotídea. Secundarios: 3. Evaluar la relación entre calcificación arterial carotídea y descalcificación ósea, así como su posible conexión a través de los factores humorales implicados en la regulación del metabolismo Ca-P. 4. Estudiar un posible mecanismo genético común: relación entre los polimorfismos del gen de la OPG y la progresión de la calcificación en la placa de ateroma. Pacientes y método: Diseño: Cohortes, medidas repetidas. Pacientes: 54 pacientes, neurológicamente asintomáticos con estenosis de la arteria carótida interna (ECI) >50% (eco-Doppler). Determinaciones: Medición del grado de ECI mediante eco-Doppler y proyecciones MIP 2D de AngioTC. Medición del Volumen del molde de contraste y contenido de Ca (AngioTC cuantitativa: Agatston score modificado: volumen de Ca (mm3) x densidad radiológica (unidades Hounsfield, UH) en reconstrucción volumétrica (volume rendering) de la bifurcación carotídea (volumen de contraste entre 2 cm por debajo y 1 cm por encima de la bifurcación [VBif] y su cociente con un segmento de 1 cm en carótida primitiva [VCP]) (n=45). En todos los pacientes se repitió la exploración a los 122 meses para valorar la variación en el contenido de Ca y en el grado de estenosis volumétrica de la bifurcación, como medición indirecta de la progresión/regresión de la AE carotídea. Densitometría ósea de columna y fémur (n=32), (basal y a los 122 meses). Bioquímica y metabolismo Ca-P (Ca, P, vit D, PTH). Determinación de osteopontina (OPN) y osteoprotegerina (OPG) sérica y distribución de 7 SNPs del gen de la OPG seleccionados sobre bases bibiliométricas (n=48). Análisis estadístico: descriptivo (media [DE]); concordancia intra e interobservador (gráficos de Bland-Altman) y coeficiente de correlación intraclase (CCI), precisión eco-Doppler/AngioTC y Volumetría 3D/MIP 2D: sensibilidad (Sens), especificidad (Esp), índice kappa, curvas operador receptor (COR), comparación de medias (prueba T), análisis de regresión uni y multivariable. Resultados: 1. La medición volumétrica de la bifurcación carotídea mostró una concordancia intra e interobservador con un CCI de 0,96 (IC 95%: 0,904-0,985) y 0,94 (IC 95%: 0,822-0,977), respectivamente. El VBif/VCP del grupo de ECI50% (p=0,001). El punto de corte óptimo de la relación VBif/VCP se identificó a partir de la curva COR en 4,1 (Sens=0,75; Esp=0,75, kappa=0,46). 2. La medición mediante AngioTC demostró, a los 12 meses, un aumento del volumen promedio de pared arterial (disminución del volumen de la columna de contraste), respecto al valor basal (475,45 [155,6] mm3xUH vs 501,3 [171,9] mm3xUH, p=0,04), así como un aumento del Ca intraplaca (56,8 [52,3] vs 64,58 [57,8] mm3xUH, p=0,002). El análisis univariable demostró una correlación inversa entre el contenido basal de Ca y progresión de estenosis volumétrica de la bifurcación (r=-0,481; p50% (duplex scanning). Determinations: Measurement of CAS grade with duplex scanning and MIP 2D projections of AngioCT. Volume measurement of contrast medium and Ca content (quantitative AngioCT: Agatston score: Ca volume (mm3) x radiological density (Hounsfield units, HU) in volume reconstruction of the carotid bifurcation [contrast volume between 2 cm below and 1 cm above the bifurcation (BifV) and its ratio with that from 1 cm segment in common carotid artery (CCV)] (n=45). In all patients, the scans was repeated at 12±2 months to assess the variation in Ca content and the degree of bifurcation volumetric stenosis as an indirect measure of carotid AE progression / regression. Bone and spine densitometry (n=32), where obtained at baseline and after 12±2 months, as well as Biochemistry and Ca-P metabolism parameters (Ca, P, vit D, PTH). Determination of plasma levels of osteopontin (OPN) and osteoprotegerin (OPG) where compared with the distribution of 7 SNPs of the OPG gene selected on bibiliometrics bases (n=48). Statistical analysis: descriptive [mean (SD)]; Intra and interobserver agreement (Bland-Altman plots and intraclass correlation coefficient (ICC), duplex scanning / AngioCT precision and 3D Volumetry / MIP 2D: Sensitivity (S), specificity (E), kappa index, ROC curves, means comparison (T test), univariate and multivariate regression analysis. Results: 1.The volumetric measurement of the carotid bifurcation showed intra and interobserver agreement with a ICC of 0.96 (95% CI: 0.904-0.985) and 0.94 (95% CI: 0.822-0.977), respectively. The BifV/CCV of the CAS > 50% group was 5.2±1.8 vs 3.8 ±1.3 in the CAS >50% group (p=0.001). The optimum cutoff point for the BifV/CCV relation was identified from the ROC curve at 4,1 (S=0.75, E=0.75, kappa=0.46). 2. AngioCT measurement showed, at 12 months, an increase in mean arterial wall volume (decrease in contrast column volume), compared to baseline (475.45 [155.6] mm3xHU vs 501.3 [171.9] mm3xHU, p=0.04), as well as an increase in intraplaque Ca (56.8 [52.3] vs 64.58 [57.8] mm3xHU, p=0.002). Univariate analysis showed an inverse correlation between basal Ca content and progression of bifurcation volumetric stenosis (r=-0.481; p

Trabalho Final do Curso de Mestrado Integrado em Medicina, Faculdade de Medicina, Universidade de Lisboa, 2016 Submitted by Biblioteca da Faculdade de Medicina da Universidade de Lisboa (repositorio@medicina.ulisboa.pt) on 2017-03-03T15:27:44Z No. of bitstreams: 1 GuilhermeMSapinho.pdf: 1343945 bytes, checksum: e644cb398cb16fd733ae8e8994fdc964 (MD5) Made available in DSpace on 2017-03-03T16:56:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 GuilhermeMSapinho.pdf: 1343945 bytes, checksum: e644cb398cb16fd733ae8e8994fdc964 (MD5) Previous issue date: 2016 Financiado por uma bolsa Gulbenkian/FMUL, no âmbito do Programa “Educação pela Ciência” (projecto nº 20130042/PEC).

Osteoporosis is a degenerative disease associated with excessive bone resorption, a natural process performed by osteoclasts. In turn, osteoclast maturation is critically regulated by the receptor activator of nuclear factor kB ligand (RANKL), its signalling receptor (RANK), and its decoy receptor osteoprotegerin (OPG). The critical role of the protein triad, RANK–RANKL–OPG, in osteoclastogenesis has made their binding an important target for the rational development of drugs against osteoporosis. Based on this, we have performed a quantum biochemistry investigation of the binding between RANKL and its decoy receptor, OPG, in order to analyse the individual contributions of all amino acid residues involved in the complex formation, providing a deeper understanding of the inhibition process. The role of specific residues in the RANKL–OPG binding was evaluated through quantum biochemistry computations performed within the molecular fractionation with conjugate caps (MFCC) methodology, and inter-residue binding energies were calculated within the framework of density functional theory (DFT). Our simulations, considering water effects (implicit and explicit) and the role of the dielectric constant background, attested the major importance of site II, when compared to site I, over OPG binding and functionality, mainly through interactions performed by the tripeptide OPG core, I94–E95– F96. The obtained results also explain (i) the impact of a specific OPG mutation (F96L) on Paget's disease development; (ii) how some pioneers proposed that peptides efficiently inhibit the RANKL–OPG complex, acting as promising drugs for the treatment of osteoporosis. In conclusion, our quantum biochemistry approach provides a solid base that allows important insights into peptide and drug design for the treatment of osteoporosis based on RANKL–OPG binding inhibition.

SUMMARY Introduction: osteoprotegerin has emerged as a new candidate for the treatment of osteoporosis. However, high levels of osteoprotegerin have been linked to vascular calcification, an independent and well-defined risk factor for cardiovascular disease (CVD) and mortality. Thus, the action of osteoprotegerin in these situations has been questioned. Objective: to evaluate the effect of osteoprotegerin (OPG) on the human body, especially in bone tissue and in vascular diseases. Methods: the scientific databases consulted were PubMed-Medline and Cochrane, using keywords (MeSH terms) grouped into the following syntaxes: (Osteoprotegerin OR Osteoclastogenesis Inhibitory Factor OR Receptors, Tumor Necrosis Factor, Member 11b OR Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily, Member 11b OR FDCR-1 Protein OR FDCR 1 Protein OR OCIF Protein OR Follicular Dendritic Cell-Derived Receptor-1) AND (Bones AND Bone OR Bones AND Bone Tissue OR Bones OR Bone Tissue OR Cardiovascular Diseases). Results: Osteoprotegerin is present in various organs and binds to two ligands: nuclear factor kB (RANKL) related to the differentiation of osteoclasts, and tumor necrosis factor related to the apoptosis-inducing ligand (TRAIL). OPG inhibits the regulation effects of nuclear factor kB on inflammation and on the skeletal and vascular systems, preventing the apoptosis induced by TRAIL, being related to the preservation of bone tissue. Conclusion: a deeper knowledge of the mechanisms involved in the association between OPG serum levels, bone integrity and cardiovascular disease can provide important data for future therapeutic interventions.

SUMMARY Introduction: osteoprotegerin has emerged as a new candidate for the treatment of osteoporosis. However, high levels of osteoprotegerin have been linked to vascular calcification, an independent and well-defined risk factor for cardiovascular disease (CVD) and mortality. Thus, the action of osteoprotegerin in these situations has been questioned. Objective: to evaluate the effect of osteoprotegerin (OPG) on the human body, especially in bone tissue and in vascular diseases. Methods: the scientific databases consulted were PubMed-Medline and Cochrane, using keywords (MeSH terms) grouped into the following syntaxes: (Osteoprotegerin OR Osteoclastogenesis Inhibitory Factor OR Receptors, Tumor Necrosis Factor, Member 11b OR Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily, Member 11b OR FDCR-1 Protein OR FDCR 1 Protein OR OCIF Protein OR Follicular Dendritic Cell-Derived Receptor-1) AND (Bones AND Bone OR Bones AND Bone Tissue OR Bones OR Bone Tissue OR Cardiovascular Diseases). Results: Osteoprotegerin is present in various organs and binds to two ligands: nuclear factor kB (RANKL) related to the differentiation of osteoclasts, and tumor necrosis factor related to the apoptosis-inducing ligand (TRAIL). OPG inhibits the regulation effects of nuclear factor kB on inflammation and on the skeletal and vascular systems, preventing the apoptosis induced by TRAIL, being related to the preservation of bone tissue. Conclusion: a deeper knowledge of the mechanisms involved in the association between OPG serum levels, bone integrity and cardiovascular disease can provide important data for future therapeutic interventions. RESUMO Introdução: a osteoprotegerina (OPG) tem surgido como uma nova candidata para o tratamento da osteoporose; no entanto, níveis elevados de OPG têm sido relacionados à calcificação vascular, um fator de risco independente e bem definido para doença cardiovascular (DCV) e mortalidade. Assim, a ação da OPG nessas situações tem sido questionada. Objetivo: avaliar a ação da OPG no corpo humano, em especial no tecido ósseo e nas doenças vasculares. Métodos: as bases de informação científica consultadas foram PubMed-Medline e Cochrane, utilizando-se palavras-chave (MeSH terms) agrupadas nas seguintes sintaxes: (Osteoprotegerin OR Osteoclastogenesis Inhibitory Factor OR Receptors, Tumor Necrosis Factor, Member 11b OR Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily, Member 11b OR FDCR-1 Protein OR FDCR 1 Protein OR OCIF Protein OR Follicular Dendritic Cell-Derived Receptor-1) AND (Bones AND Bone OR Bones AND Bone Tissue OR Bones OR Bone Tissue OR Cardiovascular Diseases). Resultados: a OPG está presente em vários órgãos e une-se a dois ligantes: o fator nuclear kB (RANKL), relacionado com a diferenciação dos osteoclastos, e o fator de necrose tumoral, relacionado ao ligante indutor de apoptose (TRAIL). Assim, a OPG inibe os efeitos da regulação do fator nuclear kB na inflamação e nos sistemas esquelético e vascular, prevenindo a apoptose induzida pelo TRAIL, estando relacionada com a preservação do tecido ósseo. Conclusão: um conhecimento mais aprofundado sobre os mecanismos envolvidos na associação entre os níveis séricos da OPG, integridade óssea e doenças cardiovasculares podem proporcionar dados importantes para futuras intervenções terapêuticas.

La artritis reumatoide (AR) es una enfermedad inflamatoria sistémica crónica, caracterizada por la formación de pannus, destrucción articular, deformidad, discapacidad y disminución de la calidad y de la expectativa de vida. La vía de señalización Wnt juega un papel importante en un sinnúmero de procesos fisiológicos. Desde hace algunos anos ha sido implicada en la regulación de células fundamentales para la homeostasis del hueso. Estudios recientes sugieren que esta vía juega un rol en la patogénesis de la AR, mediante la sobreexpresión de inhibidores de esta vía como la proteína Dickkopfl (DKK1), la cual afecta de manera negativa la diferenciación y la actividad de los osteoblastos. Niveles elevados de esta proteína se han asociado a mayor progresión radiológica y a actividad de la enfermedad. Sin embargo, aún no está claro el papel de esta vía y del DKK1 en la AR. Más estudios al respecto podrían ayudarnos a comprender las diferencias en la presentación clínica y en el pronóstico de esta enfermedad. Adicionalmente, podrían sugerir nuevos blancos terapéuticos. Rheumatoid arthritis (RA) is a chronic systemic inflammatory joint disease characterized by the formation of a pannus and joint bone destruction. This leads to deformity, discapacity and a diminished quality of life and life expectancy. The Wnt signaling pathway plays an important role in a great number of physiological processes, and recently has been implicated in the regulation of key cells in bone homeostasis. Recent studies suggest that this pathway plays a role in the pathophysiology of RA by the overexpression of inhibitors like the Dickkopf 1 protein (DKK1) that negatively affects the differentiation and activity of osteoblasts. High circulating levels of this protein have been associated with higher rates of radiological progression and greater disease activity in RA. Not much has been published about this subject in patients with RA, so the role of this pathway and DKK1 in RA it is not entirely clear. More studies in this area could improve our understanding about the differences in RA clinical presentation and prognosis, and even more they could provide new possible therapeutic targets for RA.

La enfermedad periodontal es una afección inflamatoria de causa multifactorial donde el factor de riesgo ambiental más significativo lo constituyen las bacterias que residen en el biofilm. Sin embargo, en la manifestación y la progresión de dicha enfermedad periodontal influyen una amplia variedad de determinantes y factores de riesgo. Entre ellos la osteoporosis / osteopenia y la deficiencia de estrógeno. El estudio del sistema RANK-RANKL-OPG ha favorecido la comprensión de los mecanismos intervinientes en el proceso de remodelación ósea y especialmente en la osteoporosis posmenopáusica y la enfermedad periodontal. Por lo tanto, el objetivo de este estudio transversal fue investigar los niveles de RANKL y OPG, así como su relación en fluido gingival de pacientes mujeres post-menopáusicas que padecen simultáneamente osteoporosis/osteopenia y periodontitis crónica y evaluar el efecto que ejerce el consumo de bifosfonatos en la patología periodontal. Se estudiaron 81 sitios periodontalmente activos procedentes de 31 pacientes mujeres post-menopáusicas con edades comprendidas entre 45-70 años de edad con periodontitis crónica. Las muestras de fluido gingival se recogieron mediante tiras de papel y el test de ELISA fue realizado para determinar la concentración total de RANKL y OPG y posteriormente obtener los valores de la relación RANKL/OPG. Se analizaron: 66 muestras de fluido gingival de sitios periodontalmente activos obtenidas de 17 pacientes con osteopenia/osteoporosis y 15 muestras de fluido gingival de sitios periodontalmente activos obtenidas a partir de 14 pacientes controles con condición ósea normal. Los análisis estadísticos fueron computarizados y analizados con el programa GraphPad Software. Para determinar si los datos correspondían a una distribución normal se utilizó el Test D'Agostino-Pearson. Los valores obtenidos de las citoquinas (RANKL y OPG) y su relación (RANKL/OPG) fueron comparados usando t Test Mann-Whitney U. También se realizó el Análisis de correlación de Spearman y el estadístico de Regresión lineal para determinar si existía alguna relación entre las variables analizadas. Se consideró como valor estadísticamente significativo p ≤ 0.05. Los resultados obtenidos demostraron que los niveles de RANKL y la relación RANKL/OPG fueron superiores en el grupo de estudio Od. María Eugenia Verde 12 (osteopenia/osteoporosis) respecto del grupo control, contrariamente a lo sucedido con los niveles de OPG. Por otro lado, se concluyó que el consumo de bifosfonatos no afecta los niveles de concentración de RANKL, OPG y su relación RANKL/OPG. Y se demostró que la profundidad de sondaje (PS), registro de hemorragia (RH), registro de placa bacteriana (RPB) y la edad no se correlacionaron con los niveles de las citoquinas estudiadas. Mientras que los niveles de RANKL y los valores de la relación RANKL/OPG se correlacionaron positivamente con el nivel de inserción clínica (NIC). Los resultados de este trabajo de tesis sugieren una correlación entre la pérdida de masa ósea sistémica y la pérdida de hueso alveolar. De manera tal que la osteoporosis osteoporosis/osteopenia postmenopáusica podría ser considerada como un indicador de riesgo de progresión de la enfermedad periodontal.

Made available in DSpace on 2016-06-07T17:12:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-19. Added 1 bitstream(s) on 2016-06-07T17:16:36Z : No. of bitstreams: 1 000863888.pdf: 1762312 bytes, checksum: 33f6a96aaa02314d08de10f973bdf6e4 (MD5) Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) Introdução: apesar do sucesso quanto à perda de peso e controle das comorbidades, as cirurgias bariátricas, como o Bypass Gástrico em Y de Roux (BGYR), promovem alterações no metabolismo hormonal e do tecido adiposo, as quais podem se associar a maior remodelação e perda ósseas. Entre os possíveis mecanismos envolvidos estão a influência de adipocinas sobre a modulação da expressão do ligante do receptor ativador do fator nuclear kappa β (RANKL) e da osteoprotegerina (OPG) e o aumento da expressão de esclerostina, em resposta à redução da carga mecânica. Objetivos: avaliar o efeito da perda de peso e das alterações hormonais, após o BGYR, sobre o metabolismo ósseo. Casuística e métodos: foram avaliadas mulheres com obesidade graus II e III, no menacme, submetidas ao BGYR no Hospital das Clínicas de Botucatu, antes e após três, 12 e 24 meses de cirurgia, quanto aos dados antropométricos e laboratoriais [paratormônio (PTH), fosfatase alcalina total (FA total) e fração óssea (BSAP), Interligadores C-Terminais do colágeno Tipo I (CTX), 25 hidroxi-vitamina D (25-OH-Vit D), leptina, adiponectina, RANKL, OPG e esclerostina]. Resultados: observou-se redução de leptina [34,4 (14,7; 51,9) para 22,5 (1,9; 52,7) ng/mL] e OPG [3,6 (1,1; 11,5) para 3,4 (1,5; 6) pmol/L] após o procedimento, com aumento de adiponectina [7,4 (1,7; 18,4) para 13,8 (3,0; 34,6) μg/mL], CTX [0,2 (0,1; 2,2) para 0,6 (0,4; 6,0) ng/mL], RANKL [0,1 (0,0; 0,5) para 0,3 (0,0; 2,0)pmol/L] e esclerostina [21,7 (3,2; 75,1) para 34,8 (6,4; 80,5) pmol/L], após três meses de acompanhamento. A BSAP também aumentou, após 12 meses de procedimento [10,1 (5,4; 18,9) para 13,9 (6,9; 30,2) μg/mL] (p

Trabalho Final do Curso de Mestrado Integrado em Medicina, Faculdade de Medicina, Universidade de Lisboa, 2015 Submitted by Biblioteca da Faculdade de Medicina da Universidade de Lisboa (repositorio@medicina.ulisboa.pt) on 2016-11-09T11:21:39Z No. of bitstreams: 1 AntonioNMFernandes.pdf: 2049135 bytes, checksum: 49e6c9bb74cdfc65b50319e192081d6f (MD5) Made available in DSpace on 2016-11-09T16:25:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AntonioNMFernandes.pdf: 2049135 bytes, checksum: 49e6c9bb74cdfc65b50319e192081d6f (MD5) Previous issue date: 2015

Introdução: A formação da massa óssea ocorre principalmente durante a infância e adolescência. A doença celíaca (DC) pode prejudicar esse processo. A ingestão de alimentos sem glúten previne e/ou atenua esta morbidade nestes pacientes. Objetivo: Comparar, por meio da osteossografia das interfalanges, a densidade óssea de crianças e adolescentes com DC em dieta isenta de glúten e controles. Métodos: Foram selecionados 31 participantes com diagnóstico de DC em dieta isenta de glúten há pelo menos um ano e 31 controles. Foram excluídos pacientes em uso de medicamentos, vitaminas e suplementos alimentares. Todos os participantes foram submetidos ao exame clínico, avaliação do estado nutricional, testes laboratoriais e osteossonografia. Resultados: Devido à positividade do anticorpo antitransglutaminase em sete pacientes com DC, foi criado um terceiro grupo denominado DC sem tratamento. Não houve diferença entre os grupos em relação ao gênero, ingestão de cálcio, exposição solar, atividade física e dados antropométricos. A ingestão de cálcio foi baixa para todos os grupos. Não houve diferença na avaliação laboratorial (cálcio, fósforo e paratormônio), assim como nas variáveis avaliadas na osteossonografia (Amplitude Dependent Speed of Sound e Bone Transmission Time). Conclusão: Crianças e adolescentes com DC, em dieta de restrição de glúten há pelo menos um ano, apresentam densidade mineral adequada à osteossonografia. Introduction: The most gain in bone mass occurs during childhood and adolescence. Celiac disease (CD) may impair bone mineralization. The gluten-free diet prevents and / or reduces this morbidity in these patients. Objective: Compare, through quantitative ultrasound of phalanxes, bone density of children and adolescents with CD on a gluten-free diet and controls. Methods: 31 participants with a diagnosis of CD on a gluten-free diet for at least one year and 31 controls were selected. Patients using drugs, vitamins and dietary supplements were excluded. All participants underwent medical, nutritional, biochemical avaliation and quantitative ultrasound. Results: Due to positive transglutaminase antibody in seven patients with CD, a third group was created - CD without treatment. There were no difference between all groups in relation to gender, calcium intake, sun exposure, physical activity and anthropometric data. Calcium intake was low for all groups. There were no statistical differences between all groups in laboratory tests (calcium, phosphorus and parathyroid hormone), as well as data such as amplitude dependent speed of sound and bone transmission time by quantitative ultrasound. Conclusion: Children and adolescents with CD, on a gluten-free diet for at least one year, have normal bone mineral density assessed by quantitative ultrasound.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES O sistema RANK/RANKL/OPG contribui para a compreensão do processo e regulação da formação e reabsorção do osso, tendo sido o maior avanço na biologia óssea com relação a osteoclastogênese. RANKL e OPG inibem RANK regulando a formação, ativação e sobrevivência de osteoclastos na remodelação óssea. O objetivo desse estudo foi investigar a expressão dos marcadores RANKL/RANK/OPG em dentes de ratos reimplantados, bem como observar a relação entre a expressão desses marcadores com o processo de reabsorção dentária e óssea. Foram utilizados 30 incisivos superiores direitos de 30 ratos machos, adultos, da linhagem Wistar (Rattus norvegicus albinus). Os dentes foram avulsionados e divididos em dois grupos que permaneceram extra-alveolar em ar seco: G1 (n=15) - 5 minutos e G2 (n=15) - 60 minutos, e em seguida foram reimplantados e analisados nos intervalos de 1, 3 e 7 dias. Finalizado os períodos experimentais, ocorreu a eutanásia dos animais. Cortes longitudinais com 5μm de espessura foram obtidos e corados pela técnica H/E para a análise histológica e cortes com 3μm de espessura foram submetidos à reação imuno-histoquímica mediante a utilização de anticorpos primários para ratos como OPG, RANK e RANKL. Os resultados demonstraram que o sistema RANK/RANKL/OPG participa ativamente, tanto do processo de reparo de dentes de ratos reimplantados, quanto das reabsorções dentárias e ósseas; que RANKL apresentou maior imunomarcação em ambos os grupos, participando em todas as fases da reabsorção óssea e dentária; e o aumento da expressão de RANKL foi observada em ambos os grupos em todos os intervalos de tempo, comprovando que a resposta inflamatória no ligamento periodontal ocorre no início do processo de reparo; e que a fraca expressão de RANK e OPG e o aumento da expressão de RANKL sugere uma diminuição da reabsorção ativa e aumento da reabsorção reparada no osso e no cemento, sendo maior no osso. The RANK / RANKL / OPG sy stem plays an important role in bone formation and resorption . This finding has been regarded as one of the m ost important advances in the understanding of bone biology with respect to osteoclastogenesis. The aim of this study was to investigate the expression of RANKL / RANK / OPG markers in reimplanted t eeth of rats, and to observe the relationship between the expression of these markers and to oth and bone resorption. Thirty male Wistar rats (Rattus norvegicus albinos) had their maxillary right incisors extrac ted , and were divided into 2 groups according to the period that the extracted teeth were kept in dry air before reimplantation : G1 (n = 15) - 5 minutes , and G2 (n = 15) - 60 minutes . After reimplantation, teeth were analyzed at intervals of 1, 3 and 7 da ys. After these experimental periods, the animals were euthanized. Longitudinal sections with 5μm thick were obtained and stained with Hematoxylin and Eosin for histological analysis , while 3μm thick sections were subjected to immunohistochemical analysis of OPG , RANK and RANKL. The results showed that the RANK / RANKL / OPG system actively participates in both the repair process, as well as tooth and bone resorption . Extr a - alveolar time of 60 minutes before replantation caused minor expressions of RANKL a nd OPG, not influencing the expression of RANK; RANKL immunostaining showed higher in both groups when compared to other biomarkers, participating in all phases of bone and tooth resorption; RANKL was associated to both osteoclastogenesis and c ell ular proliferation , and was expressed in both groups.

Embora a terapia fotodinâmica venha sendo utilizada como uma ferramenta útil nos últimos 30 anos em oncologia, poucos estudos clínicos em odontologia têm sido conduzidos. A terapia fotodinâmica (TFD) utiliza fotossensibilizantes atóxicos e seletivos que são administrados nas células alvo seguida de aplicação local de luz visível, produzindo espécies reativas de oxigênio capazes de ocasionar morte celular por apoptose ou necrose, de afetar a vascularidade local, além de exercer importantes efeitos no sistema imune. Novas gerações de fármacos fotossensibilizantes, como as ftalocianinas nanoparticuladas tem apresentado excelentes resultados na atividade antitumoral e antibacteriana. Neste contexto, o presente trabalho realizou o primeiro protocolo clínico de aplicação local da nanoemulsão de cloro-alumínio ftalocianina (AlClFc) seguida de irradiação em gengiva de humanos, e analisou descritiva e comparativamente, por meio de imunoistoquímica, a expressão de RANK, RANKL, OPG e VEGF em um modelo split-mouth. Oito voluntários saudáveis com indicação clínica de exodontia foram incluídos no estudo. Sete dias antes da exodontia, foi aplicado na gengiva dos participantes, 5µM de nanoemulsão de AlClFc seguida de irradiação com laser diodo (660nm, 100J/cm2), o lado contralateral foi utilizado como controle. Os espécimes teciduais foram removidos sete dias após a TFD e subdivididos em dois grupos (grupo teste e grupo controle) para análise histológica e imunoistoquímica. Os pacientes foram monitorados no dia aplicação, 7, 14 e 30 dias após a terapia para avaliação de efeitos adversos da terapia. Alterações vasculares foram observadas nas amostras gengivais que receberam a TFD. Áreas de edema e congestão vascular, além de intensa vascularização foram visualizadas. Adicionalmente, focos de calcificação distrófica em região subepitelial foram visualizados nos espécimes do grupo teste. Os resultados demonstraram um padrão similar dos escores de imunomarcação de RANK, RANKL e VEGF entre os grupos teste e controle, não havendo diferença estatística significante (p=0.317, p=0.777, p=.814, respectivamente). RANK e RANKL exibiram imunomarcação fraca ou ausente em todos os espécimes analisados. Não houve imunomarcação para a OPG. O VEGF mostrou imunomarcação moderada a forte nos espécimes do grupo teste. Adicionalmente, o estudo clínico mostrou que a terapia foi bem tolerada por todos os pacientes. Os efeitos adversos foram de curta duração e totalmente reversíveis. Tomados em conjunto, os resultados apresentados neste estudo mostraram que o protocolo da TFD mediada por nanoemulsão contendo AlClFc é segura para aplicação clínica em tecido gengival e, sugerem uma forte imunomarcação para o VEGF após a terapia. Although photodynamic therapy have been used as a useful tool over the past 30 years in oncology, few clinical trials have been conducted in dentistry. Photodynamic therapy (PDT) uses non - toxic photosensitizers and selective which are administered in target cells followed by local application of visible light, producing reactive oxygen species capable of causing cell death by apoptosis or necrosis, injured the local vasculature, and exert important effects on the im mune system. New generations of photosensitizing agents, such as nanoparticulate phthalocyanines, has shown excellent results in antitumor and antibacterial activity . In this context, the present work constitutes the first clinical protocol of local appli cation of nanoemulsion chloro - aluminum phthalocyanine (AlClFc) followed by irradiation in human gingiva, and analyzed descriptively and comparatively , by means of immunohistochemistry , the expression of RANK , RANKL , OPG and VEGF in a split - mouth model . Eight healthy volunteers with clinical indication for extraction were included in the study . Seven days before the extraction, was injected in the gingiva of participants, 5 μ M of nanoemulsion AlClFc followed by irra diation with diode laser (660nm , 7 J/cm2 ), the contralateral side was used as control. Tissue specimens were removed seven days after the TFD is performed. Tissues sample were divided into two groups (test and con trol groups) for histological and immunohistochemical analysis. Patients were monitored at days, 0, 7, 14 and 30 to assess adverse effects of the therapy. Vascular alterations were seen in gingival samples that received PDT. Areas of edema and vascular con gestion, and intense vascularization were viewed . Additionally, dystrophic calcification in subepithelial region were observed in the test group. The results showed a similar pattern of immunostaining scores of RANK, RANKL and VEGF between the test and co ntrol groups, with no statistically significant difference (p = 0.317, p = 0.777, p = 0 .814, respectively). RANK and RANKL exhibited weak or absent immunostaining in most specimens analyzed. There was n o immunostaining for OPG. VEGF showed moderate to stro ng immunostaining in specimens from the test group. In addition, the clinical study showed that therapy was well tolerated by all patients. Adverse effects were short - time and completely reversible. Taken together, the results presented in this study showe d that PDT mediated by nanoemulsion containing AlClPc is safe for clinical application in gingival tissue and suggests that a strong immunostaining for VEGF after therapy .

Submitted by Fabiano Malheiro (fabianomalheiro22@hotmail.com) on 2017-05-18T14:29:41Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Avaliação da expressão de proteínas reguladoras do metabolismo ósseo na periodontite crônica em fumantes e não fumantes.pdf: 3990055 bytes, checksum: 9a391dd3c2e0c3333e7b27ff29d0a184 (MD5) Made available in DSpace on 2017-05-18T14:29:41Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Avaliação da expressão de proteínas reguladoras do metabolismo ósseo na periodontite crônica em fumantes e não fumantes.pdf: 3990055 bytes, checksum: 9a391dd3c2e0c3333e7b27ff29d0a184 (MD5) Previous issue date: 2014-04-10 Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio Grande do Sul - FAPERGS A periodontite é uma doença crônica que induz resposta imune inata e adaptativa nos tecidos periodontais e pode ser modulada pelo consumo de cigarros. Para avaliar possíveis diferenças na resposta imune foi determinada a expressão dos domínios de oligomerização de ligação de nucleotídeos (Nod1 e Nod2), do ligante do receptor-ativador do fator nuclear kappa B (RANKL), de osteoprotegerina (OPG), de CD20 (marcador de células B), de CD68 (marcador de monócitos/macrófagos), de CD45RO (marcador para células T) e de metaloproteinases de matriz (MMP)-8 e -9 nos tecidos periodontais de fumantes e não fumantes. Os tecidos gengivais foram coletados de pacientes saudáveis (n = 10) e pacientes com periodontite crônica - fumantes (n = 15) e não fumantes (n = 16). As expressões de Nod1, Nod2, RANKL, OPG, CD20, CD68 e CD45RO foram determinadas por reação de imunohistoquímica. A atividade das MMP-2 e MMP-9 foi verificada por zimografia. Sítios com periodontite apresentaram níveis mais elevados de todas as proteínas estudadas, quando comparado aos saudáveis (P < 0,001). No entanto, não foram observadas diferenças entre fumantes e não-fumantes (P > 0,05). Todas as proteínas foram mais expressas na porção apical da bolsa periodontal em comparação com a porção coronária. Considerando a periodontite como uma doença infecciosa, a sua progressão induz a migração de linfócitos T e B e monócitos/macrófagos para o local inflamado, principalmente regiões mais apicais da bolsa perioodntal. Além disso, os receptores de reconhecimento e reguladores de remodelação óssea mostraram-se com expressão aumentada. Não foram observadas diferenças entre fumantes e não fumantes. Periodontitis is a chronic disease modulated by cigarette consumption inducing innate and adaptive immune responses within the periodontal tissues. To assess these immune responses, we evaluated the expression of nucleotide-binding oligomerization domains (Nod)-1 and -2, receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand (RANKL), osteoprotegerin (OPG), CD20 (B-cells), CD68 (monocytes/macrophages), CD45RO (T-cells) and matrix metalloproteinases (MMP)-8 and -9 in periodontal tissues of smokers and nonsmokers in order to identify possible differences. Gingival tissues were obtained from periodontally health subjects (n=10), and patients with chronic periodontitis smokers (n=15) and nonsmokers (n=16). Nod1, Nod2, RANKL, OPG, CD20, CD68 and CD45RO expression was determined by immunohistochemistry (IHC). MMP-2 and -9 activity were verified by zymography. Periodontitis-affected patients presented higher levels of all studied proteins when compared with healthy sites (P < 0.001). However, no differences were observed between smokers and non-smokers (P > 0.05). All proteins were more expressed at the apical portion of periodontal pocket compared with the coronal portion. Considering periodontitis as an infectious disease, its progression induce the migration of B- and T-cells and monocytes/macrophages to inflamed site. In addition, pattern recognition receptors and bone turnover regulators are overexpressed. No differences were observed between smokers and nonsmokers.

En condiciones fisiológicas, el órgano dentinopulpar no se encuentra asociado a procesos de remodelación y resorción. La Osteoprotegerina (OPG) es una molécula del Factor de Necrosis Tumoral (TNF) que participa en la diferenciación y activación de osteoclastos, por lo que su papel en el control del proceso de reabsorción radicular interna debe ser determinado. Se tomaron secciones histológicas de 5 µm tomadas de primeros molares de 8 hemimandíbulas de ratón y fueron sometidas a proceso de inmunohistoquímica con la técnica de complejo avidina-biotina peroxidasa para la detección de OPG. Se identificó la presencia de OPG en las regiones central y periférica de la pulpa de ratones de 4 y 12 semanas. La pulpa de ratones albino suizo mostró presencia diferencial de OPG en las zonas central y periférica. Under physiological conditions, the dentinopulpar complex is not associated with remodeling and resorption. Osteoprotegerin (OPG) is a TNF molecule associated with osteoclast activation and differentiation. Therefore, OPG role in internal root resorption must be determined. We obtained histological sections of 5 µm in first molars from 8 hemimandibles of mice, which were subjected to the avidin-biotin peroxidase complex immunohistochemical procedure for detection of OPG. Differential OPG presence was identified in central and peripheral pulp in dental pulp of 4 and 12 week-old mice.