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Obesity is now considered as a disease by WHO with a Global threat. Responsible for a decrease in life expectancy due to increased cardiovascular and carcinologic mortality, obesity has endocrine metabolic consequences with the onset of type 2 diabetes and hepatic consequences with non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD). NAFLD and in particular its severe form, non-alcoholic steatohepatitis (NASH), cause an increase in the number of cirrhosis and hepatocellular carcinoma. Management of NASH involves considering treatment for obesity. Bariatric surgery is emerging as the best treatment for obesity today. In patients with steatohepatitis, bariatric surgery resolves NASH in nearly 80% of cases. The disappearance of the inflammatory process initiates the decrease in fibrosis. The magnitude of the histological response is associated with weight loss and improvement in insulin resistance. After 5 years of follow-up, there is no recurrence of the disease, and the fibrosis continues to improve. For example, fibrosis resolves completely in nearly 45% of patients with advanced baseline fibrosis. For patients suffering from hepatocellular carcinoma and / or hepatocellular insufficiency, the liver transplantation appears to be the best therapeutic option. Nonetheless, analysis of the pre-transplant waiting list outcome of patients reveals that morbidly obese patients have a higher risk of on-list mortality, and less access to transplantation. This effect is not due to a lower allocation of grafts, but to a higher refusal rate due to morphological incompatibilities between the donor and the recipient. Ideally, it should be possible to offer grafts from obese donors to these recipients, but the formers disclose frequently steatosis and thus more susceptible to ischemia reperfusion. The modulation of ischemia reperfusion appears to be a major issue in improving access to grafts, using so-called marginal grafts. The NOD1 protein appears to be an ideal target for reducing the ischemia reperfusion injury process. At the hepatic level, the NOD1 pathway influences the expression of ICAM-1 and VCAM-1 adhesion molecules on the surface of endothelial cells and hepatocytes. The NOD1 antagonists thus reduce the expression of ICAM-1 and VCAM-1, the interaction between hepatocytes and polymorphonuclear neutrophils and as well as the areas of hepatic necrosis secondary to ischemia reperfusion. NOD1 is positioned as an interesting target deserving to be evaluated on fatty livers in order to protect them from the injury process of ischemia reperfusion., L’obésité est dorénavant considérée comme une maladie par l’OMS et touche l’ensemble du globe. Responsable d’une diminution de l’espérance de vie en raison de l’augmentation de la mortalité cardiovasculaire et carcinologique, l’obésité a des conséquences métaboliques endocrines avec la survenue du diabète de type 2 et hépatiques avec la stéatopathie métabolique. La stéatopathie métabolique et notamment sa forme sévère, la NASH, provoquent l’accroissement du nombre de cirrhose et du carcinome hépatocellulaire. La prise en charge de la stéatopathie métabolique implique de considérer le traitement de l’obésité. La chirurgie bariatrique apparait aujourd’hui comme le meilleur traitement de l’obésité. Chez le patient atteint de stéatohépatite, la chirurgie bariatrique permet la résolution de la NASH dans près 80% des cas. La disparition du processus inflammatoire initie la diminution de la fibrose. L’importance de la réponse histologie est associée à la perte de poids et à l’amélioration de l’insulinorésistance. Après 5 ans de suivi, il n’y a pas de récidive de la maladie, et la fibrose continue de s’améliorer. A titre d’exemple, la fibrose disparait totalement chez près de 45% des patients atteints de fibrose avancée à baseline. Pour les patients souffrants de carcinome hépatocellulaire et/ou d’insuffisance hepatocellulaire, la greffe apparait comme le traitement de référence. Néanmoins, l’analyse du devenir sur liste d’attente prétransplantation des patients révèle que les patients obèses morbides ont plus de risque de mortalité sur liste, et moins d’accès à la greffe. Cet effet n’est pas dû à une plus faible attribution des greffons, mais à un taux de refus plus important en raison d’incompatibilités morphologiques entre le donneur et le receveur. Idéalement, il faudrait pouvoir proposer des greffons provenant de donneurs obèses à ces receveurs, mais ces premiers sont stéatosiques et plus sensibles à l’ischémie reperfusion. La modulation de l’ischémie reperfusion apparait comme un enjeu majeur pour améliorer l’accès à la greffe, en utilisation des greffons dit marginaux. La protéine NOD1 semble être une cible idéale pour réduire le processus lésions de l’ischémie reperfusion. A l’échelle hépatique, la voie NOD1 influence l’expression des molécules d’adhérences ICAM-1 et VCAM-1 à la surface des cellules endothéliales et des hépatocytes. Les antagonistes NOD1 réduisent ainsi l’expression de ICAM-1 et VCAM-1, l’interaction entre hépatocytes et polynucléaires neutrophiles et ainsi que les aires de nécrose hépatique secondaire à la l’ischémie reperfusion. NOD1 se positionne comme une cible intéressante méritant d’être évaluer sur des foies stéatosiques afin de les protéger du processus lésionnel de l’ischémie reperfusion.

The liver is the privileged site of metabolic regulations that must be tightly coordinated to prevent metabolic imbalance to preserve homeostasis. Alteration of these processes can promote steatosis, an essential feature of Non-Alcoholic Fatty Liver Diseases (NAFLD), representing the new global epidemic threat. During this thesis work, we demonstrated that LECT2, a liver secreted factor, is increased in both Human and mice harboring fatty liver. In a physiological context, we demonstrated that LECT2 controls liver lipogenesis through the LXR signalling pathway. At the molecular level, the absence of LECT2 induces a specific accumulation of 25-OHC oxysterol which leads to a significant increase in the activity of LXR and its target genes. From a mechanistic point of view, hepatospecific re-expression of LECT2 in Lect2-deficient mice is sufficient to specifically decrease the activity of LXR and the expression of its target genes. These results demonstrate that Lect2 behaves as a regulator of LXR signaling in the liver and illustrate that LECT2 is a key player in hepatic lipogenesis. Taken together, our results suggest that LECT2 is a key player in NAFLD, and open up new diagnostic and therapeutic perspectives for these diseases., Le foie est le site privilégié de régulations métaboliques qui doivent être impérativement coordonnées pour empêcher le déséquilibre métabolique et préserver l’homéostasie. L’altération de ces processus peut favoriser la stéatose, une caractéristique essentielle des maladies stéatosiques non alcooliques du foie (NAFLD) qui représentent la nouvelle menace épidémique mondiale. Dans cette thèse, nous avons démontré que LECT2, un facteur sécrété par le foie, est augmenté dans les foies stéatosiques chez l’Homme et la souris. Dans un contexte physiologique, nous avons montré que LECT2 contrôle la lipogenèse hépatique par la voie de signalisation LXR. Au niveau moléculaire, l’absence de LECT2 induit une accumulation spécifique de l’oxystérol 25-OHC qui conduit à une augmentation importante de l’activité de LXR et de ses gènes cibles. D’un point de vue mécanistique, la ré-expression hépatospécifique de LECT2 à des souris Lect2-déficientes est suffisante pour diminuer spécifiquement l’activité de LXR et l’expression de ses gènes cibles. Ces résultats démontrent que LECT2 se comporte comme un régulateur de la signalisation LXR dans le foie et illustrent que LECT2 est un acteur clé de la lipogenèse hépatique. Ensemble, nos résultats suggèrent que LECT2 est un acteur essentiel des NAFLD, et ouvrent à de nouvelles perspectives de diagnostic et thérapeutiques de ces maladies.

Non-Alcoholic Fatty Liver Diseases (NAFLD) is a major public health concern with global prevalence of 25%. NAFLD is increasingly recognized as the most common chronic liver disease. The spectrum of the hepatic diseases ranges from steatosis (fatty liver) to nonalcoholic steatohepatitis (NASH) (steatosis, inflammation, liver injury) and subsequently to the activation of fibrogenic pathways, which correlates with a high risk of developing cirrhosis and hepatocellular carcinoma. The treatment of NASH is still limited because of the lack of effective pharmacological treatment as well as lack of effective and practical diagnostic tools. NAFLD is associated with obesity and metabolic syndrome and the presence of type 2 diabetes can increase the risk of liver diseases. Inversely, NAFLD is also a risk factor for many metabolic diseases, including type 2 diabetes and cardiovascular disease. The mechanisms underlying the progression of NAFLD are multifactorial and not well understood. Better understand the pathogenesis of NASH will lead to identify new potential therapeutic targets. One part of my work focused on clinical aspects in a large cohort of obese patients regarding factors that potentially regulate the development of NAFLD. We here reported that: 1) binge eating disorders were associated as expected with obesity but independently of NAFLD severity and 2) the circulating level of vitamin D, well-known to display anti-oxidant and anti-fibrotic properties, was not diminished with NAFLD severity.In parallel, we investigated the expression level and the role of a new "hepatokine", Fibronectin type III domain containing 5 (FNDC5) and its soluble form irisin in NAFLD. We reported that hepatic expression of FNDC5 increased in the presence of hepatic steatosis and liver injury without impacting the systemic level of irisin in mouse models of NAFLD and in obese patients. This local production of FNDC5 was mainly influenced by genotoxic stress and behaved as local protective factor against NAFLD by preventing hepatocyte steatosis and injury. Finally, the single nucleotide polymorphism (SNP) FNDC5 rs3480 was protective of severe steatosis independently of PNPLA3 SNP rs738409, age, female, BMI and type 2 diabetes in a cohort of 613 patients. In conclusion, our human and experimental data strongly suggest that hepatic expression of FNDC5 could dampen the development of NAFL by negatively regulating steatogenesis and hepatocyte death.; Les maladies du foie gras non alcooliques (NAFLD) constituent un problème majeur de santé publique avec une prévalence mondiale d’environ 25 %. La NAFLD est de plus en plus reconnue comme la maladie hépatique chronique la plus répandue. Le spectre des maladies hépatiques va de la stéatose (stéatose hépatique) à la stéato-hépatite non alcoolique (NASH) (stéatose, inflammation, lésion hépatique) et par la suite à l'activation des voies de la fibrogenèse, qui sont associées à un risque élevé de développer une cirrhose et un carcinome hépatocellulaire. Le traitement de la NASH est encore limité en raison de l’absence de traitement pharmacologique efficace ainsi que du manque d’outils de diagnostic efficaces et pratiques. La NAFLD est associée à l'obésité et au syndrome métabolique et la présence d'un diabète de type 2 peut augmenter le risque de maladies du foie. Inversement, la NAFLD est également un facteur de risque pour de nombreuses maladies métaboliques, notamment le diabète de type 2 et les maladies cardiovasculaires. Les mécanismes sous-jacents à la progression de la NAFLD sont multifactoriels et mal compris. Mieux comprendre la pathogenèse de la NASH amènera à identifier de nouvelles cibles thérapeutiques potentielles.La première partie de mon travail, portant sur des aspects cliniques, a évalué des facteurs pouvant être associés au développement de la NAFLD : 1) les troubles du comportement alimentaire de type boulimie, étaient associés, comme on pouvait s'y attendre, à l'obésité, mais indépendamment de la gravité de la NAFLD et 2) la concentration sérique de la vitamine D, qui présente des effets antioxydants et anti-fibrosants, n’était pas diminuée avec la sévérité des NAFLD.En parallèle, nous avons étudié le niveau d’expression et le rôle d’une nouvelle « hépatokine », Fibronectin type III domain containing 5 (FNDC5) et sa forme soluble, l’irisine, dans le développement de la NAFLD. Chez l’Homme et dans des modèles murins de NAFLD, l’expression hépatique de FNDC5 était augmentée avec la stéatose et la souffrance hépatocytaire tandis que la concentration circulante d’irisine n’était pas modifiée. Cette production locale de FNDC5 était principalement influencée par un stress génotoxique et se comportait comme un facteur de protection local contre la NAFLD en empêchant la stéatose et les lésions des hépatocytes. Enfin, le polymorphisme rs3480 de FNDC5 était protecteur de la stéatose sévère indépendamment du SNP rs738409 de PNPLA3, de l’âge, du sexe féminin, de l’indice de masse corporelle et de la présence d’un diabète de type 2 dans une cohorte de 613 patients. En conclusion, nos données humaines et expérimentales suggèrent fortement que l’expression hépatique de FNDC5 pourrait ralentir le développement des NAFLD en régulant négativement la stéatogénèse et la mort hépatocytaire.

The rate of obesity and NAFLD prevalence is growing proportionately. Considering other etiological factors of NAFLD, exposure to environmental contaminants has been described, in recent years, as an essential cause of NAFLD development and progression. Among these toxicants, benzo[a]pyrene (B[a]P), a widely distributed environmental pollutant, is believed to contribute in NAFLD pathogenesis. Another well-known hepatotoxicant and contributor of fatty liver disease is ethanol. It has already been described by our team that B[a]P and ethanol, even at low doses, exert hepatotoxicity notably upon co-exposure, and can lead to NAFLD progression, if liver is already compromised with steatosis in both in vitro (HepaRG and WIF-B9) and in vivo (zebrafish larva) models. Furthermore, several mechanisms, responsible for this pathological progression to steatohepatitis-like state have also been described by the team using two in vitro models. However, in vivo mechanisms underlying steatosis progression in response to B[a]P/ethanol co-exposure are yet not elucidated. In this context, we have used high fat diet (HFD)-fed zebrafish larva model to assess NAFLD pathogenesis. Our team has recently demonstrated that, in this zebrafish larva model, prior steatosis can progress to steatohepatitis-like state following co-exposure to 43 mM ethanol with 25 nM B[a]P for 7 days. With this in vivo model, we observed two important key mechanisms involved in NAFLD progression i.e. membrane remodeling and mitochondrial iron accumulation, likely associated with AhR activation. In conclusion, we proposed that membrane remodeling could act as an initial signaling element to induce this mitochondrial iron accumulation, hence mitochondrial dysfunction leading to cell death. Taking into account our results, one might propose that an iron-associated cell death, possibly ferroptosis, would be principally responsible for the NAFLD progression following B[a]P/ethanol co-exposure., La prévalence des maladies non-alcooliques du foie (NAFLD) est en constante augmentation. Au-delà de l’obésité, d’autres facteurs de risques pour ces maladies ont été identifiés. Parmi eux, l'exposition aux contaminants environnementaux a récemment été décrite. L’un d’entre eux est le benzo[a]pyrène (B[a]P), un polluant environnemental largement répandu et considéré comme le chef de file des Hydrocarbures Aromatiques Polycycliques (HAP). Notre équipe a déjà décrit, in vitro (HepaRG, WIF-B9) et in vivo (larve de poisson-zèbre), qu’une co-exposition au B[a]P et à l'éthanol, un autre agent hépatotoxique bien connu, même à de faibles doses, pouvait conduire à la progression pathologique d’une stéatose préalable vers la stéatohéaptite. En outre, ces études in vitro ont permis de proposer plusieurs mécanismes physiopathologiques pour expliquer ces effets. Cependant, les mécanismes in vivo n’ont pas encore été élucidés. Dans ce contexte, nous avons utilisé un modèle de larve de poisson-zèbre nourri avec un régime alimentaire riche en graisses pour lequel notre équipe a déjà démontré la transition de la stéatose vers la stéatohépatite suite à une exposition simultanée à 43 mM d'éthanol et à 25 nM de B[a]P pendant 7 jours. Dans ce modèle, nous avons montré l’implication de deux mécanismes-clés dans la progression de la NAFLD, à savoir le remodelage de la membrane et l’accumulation de fer mitochondrial, deux processus étroitement liés à l’activation du récepteur AhR. En conclusion, nous proposons que le remodelage de la membrane puisse agir comme élément de signalisation initial pour induire cette accumulation de fer mitochondriale et donc un dysfonctionnement mitochondrial conduisant à la mort cellulaire. Enfin, cette mort cellulaire associée au fer, possiblement de la ferroptose, serait principalement responsable de la progression des NAFLD après la co-exposition B[a]P/éthanol.

Sigma 1 receptor (SigR1) is a transmembrane protein of the RE, enriched in the MAMs, which would act like a chaperone. Although ubiquitous, SigR1 is especially expressed in the central nervous system (CNS) and the liver. In the CNS, SigR1 has been linked to neurodegenerative diseases and also pain and depression. SigR1 is also involved in cancer. SigR1 is overexpressed in many cancer tumors and especially in hormone dependent tumors where its expression is correlated to the hormonal status of the tumor. Although SigR1 is highly expressed in the liver, its role in this organ is unknown. Aiming at finding the role of this protein in the liver we analyze its expression in several liver tumors. SigR1 is significantly overexpressed in hepatocellular adenomas mutated for HNF1α gene, H-HCA. H-HCA are benign liver tumors with marked steatosis. They are mostly found in women taking oral contraceptives (estrogens). Why is SigR1 overexpressed in H-HCA ans what are the consequences of this overexpression? Using hepatocyte cellular models (HepG2 and Huh7) and mice that are KO for HNF1α gene, we found the following results. Estrogens induce the expression of SigR1 through its nuclear receptor ERα. HNF1α inhibition also induces its expression. This overexpression leads to an increase of the cell proliferation rate and steatosis. These effects resume H-HCA patients’ phenotype., Le récepteur Sigma 1 (SigR1) est une protéine transmembranaire du RE, enrichie dans les MAMs, qui agirait comme une chaperonne. Ubiquitaire, SigR1 est très exprimé dans le système nerveux central (SNC) et le foie. Dans le SNC, SigR1 est impliqué dans un grand nombre de maladies neurodégénératives mais aussi dans le mécanisme de la douleur et dans la dépression. SigR1 est aussi impliqué dans les cancers. Il est surexprimé dans de nombreuses tumeurs cancéreuses et particulièrement dans les tumeurs hormonodépendantes dans lesquelles son expression est corrélée au statut hormonal de la tumeur. Malgré sa très forte expression dans le foie, son rôle y est inconnu. Dans l’objectif de déterminer le rôle de SigR1 dans le foie nous étudions son expression dans les différents types de tumeurs hépatiques. SigR1 est significativement surexprimé dans les adénomes hépatocellulaires (HCA) et particulièrement le sous-type muté pour le gène HNF1α, les H-HCA. Les H-HCA sont des tumeurs hépatiques bénignes stéatosées majoritairement observées chez des femmes jeunes prenant des contraceptifs oraux (œstrogènes). Quelles sont les causes et les conséquences de cette surexpression dans les hépatocytes ? En utilisant des modèles cellulaires hépatocytaires (HepG2 et Huh7) et des souris KO pour le gène HNF1α nous mettons en évidence les résultats suivants. Les œstrogènes induisent l’expression de SigR1 via son récepteur nucléaire ERα. De même, l’inhibition d’HNF1α induit une surexpression de SigR1. Cette surexpression entraine une prolifération et une stéatose des hépatocytes, correspondant au phénotype des patientes atteintes de H-HCAs.

Le diabète est en croissance à un rythme alarmant. Sa fatalité la plus importante provient de ses effets sur le système cardiovasculaire. Effectivement, le diabète est un facteur de risque majeur pour la maladie coronarienne et l’hypertension artérielle. En plus, les diabétiques courent le risque de développer une cardiomyopathie diabétique (DCM) qui est présente indépendamment de l’athérosclérose et de l’hypertension. Les causes exactes de cette maladie cardiaque ne sont pas encore définies complètement mais une anomalie du métabolisme lipidique a émergé comme étant un facteur contributeur clé. Il est intéressant de noter qu’une caractéristique commune de la DCM est l’accumulation des lipides intracellulaires ce qui est connu comme la stéatose cardiaque. Cette dernière est probablement causée par un déséquilibre entre l’absorption et la clairance cellulaires des lipides. En tant que tel, nous nous sommes concentré nos études sur l’élucidation des mécanismes de lipotoxicité dans le contexte de la DCM. Nous avons donc investigué le rôle du métabolisme lipidique sur des voies de signalisation reliées à la DCM telles que le stress du réticulum endoplasmique (ERS), l’activité du Récepteur activé par les proliférateurs de peroxysomes (PPAR), l’inflammation et la dysfonction mitochondriale avec un intérêt spécifique sur l’oxydation des acides gras. Nous avons caractérisé l’ERS et l’apoptose induits par les lipides; nous avons confirmé que le palmitate, un acide gras lipotoxique, induit l’ERS et la mort des cardiomyocytes primaires. Ensuite, on a démontré que la lipotoxicité médiée par cet acide gras est associée à un degré d’inflammation significatif qui peut être dû à une régulation à la baisse des récepteurs de PPAR. La stéatose cardiaque et la lipotoxicité peuvent altérer des voies de signalisation ce qui conduit à la dysfonction mitochondriale. On a découvert que la toxicité du palmitate est associée à une déficience de l’oxydation complète des acides gras (FAO). Spécifiquement, le palmitate atténue la β-oxydation et le cycle de l’acide citrique sans toucher à l’activité de Cpt1b qui est l’étape cinétiquement déterminante dans la FAO. Il est intéressant de noter que l’augmentation de la FAO atténue les effets toxiques du palmitate, alors que l’atténuation de la FAO de l’oléate, qui est normalement un acide gras non toxique, induit la mort cellulaire. Ces résultats suggèrent que l’augmentation de la FAO peut avoir des effets cliniques utiles comme être une cible pour le traitement de la DCM. Nous avons également cherché à savoir si la déficience en FAO contribue à la DCM in vivo. Des études précédentes ont démontré que la FAO augmente chez les souris diabétiques. Cependant, les souris diabétiques montrent une absorption élevée des acides gras ce qui pourrait contribuer significativement à l’augmentation de la FAO dans leurs tissus cardiaques. Par la suite, nous avons tenté d’évaluer la FAO directement des mitochondries au lieu des tissus cardiaques complets afin d’éviter le facteur de confusion, qui est l’augmentation de l’absorption des acides gras. Nous avons démontré alors que les souris atteintes de diabète chronique présentent une déficience en FAO accompagnée d’une dysfonction cardiaque. En revanche, les souris atteintes de diabète aigu possédaient des fonctions cardiaques normales associées de taux normaux de FAO. Ensemble, ces études ont amélioré notre compréhension des mécanismes de lipotoxicité associée à la DCM et ils soulignent l’importance de l’ERS, de l’inflammation et de la dysfonction mitochondriale comme des facteurs clefs dans la promotion de la lipotoxicité dans la DCM., Diabetes is growing at an alarming rate in North America. The biggest killer of patients with diabetes is heart disease. Indeed, diabetes is a major risk factor for both coronary artery disease and hypertension. However, patients with diabetes are also at risk for developing diabetic cardiomyopathy (DCM), which is characterized as heart disease in the absence of atherosclerosis and hypertension. The exact causes of this diabetic heart disease has not been completely elucidated but abnormal lipid metabolism has emerged as a key contributing factor. Interestingly, a common characteristic of DCM is the accumulation of intra cellular lipids otherwise known as cardiac steatosis. Cardiac steatosis is likely caused by a mismatch between lipid uptake and lipid clearance from the cells. As such, we focused on elucidating the mechanisms of lipotoxicity in the context of diabetic cardiomyopathy. To this end, we investigated the role of lipid metabolism on key pathways related to diabetic cardiomyopathy including Endoplasmic Reticulum (ER) stress, Peroxisome proliferator-activated receptors (PPARs) activity, inflammation, and mitochondrial dysfunction with a specific focus on fatty acid oxidation. We characterized lipid induced ER stress and apoptosis in vitro, using primary neonatal cardiomyocytes. We were able to confirm that palmitate, a lipotoxic fatty acid, induces ER stress and cell death in primary cardiomyocytes. We also demonstrated that palmitate mediated lipotoxicity is associated with a significant degree of inflammation which may be due to down-regulation of PPAR receptors. Cardiac steatosis and lipotoxicity can alter metabolic signaling pathways leading to mitochondrial dysfunction. We discovered that palmitate toxicity is associated with an impairment of complete fatty acid oxidation (FAO). Specifically, palmitate impairs β-oxidation and citric acid cycle simultaneously with no effect on Cpt1b activity, the rate limiting step in FAO. Interestingly enhancing FAO attenuated the toxic effects of palmitate while inhibiting FAO caused oleate, which is normally non-toxic, to induce cell death. These results suggest that enhancing FAO might have some clinical utility as a therapeutic target for the treatment of diabetic cardiomyopathy. As such, we have investigated whether impaired fatty acid oxidation might contribute to DCM pathology in vivo. Previous studies have shown that FAO is actually increased in diabetic mice. However, diabetic mice also exhibit elevated fatty acid uptake which could significantly contribute to the elevated FAO rates in these hearts. Therefore, we aimed to assess FAO rates directly from isolated mitochondria instead of whole hearts to exclude the potentially confounding factor of enhanced fatty acid uptake. We found that older (chronic) diabetic mice exhibited impaired fatty acid oxidation rates and this was associated with ER stress and impaired cardiac function. In contrast, acutely diabetic mice had normal cardiac functions which was associated with normal FAO rates. Taken together, these studies have furthered our understanding of lipotoxic mechanisms in the context of diabetic cardiomyopathy and they accentuated the importance of ER stress, inflammation, and impaired mitochondrial function as key factors promoting lipotoxicity in diabetic cardiomyopathy.

Le tractus digestif et le foie interagissent continuellement, non seulement à travers les connexions anatomiques, mais également par des liens physiologiques/fonctionnels. Le déséquilibre de l’axe intestin-foie apparait de plus en plus comme un facteur primordial dans les désordres cardiométaboliques, à savoir l’obésité, le syndrome métabolique, le diabète de type 2 et la stéatose hépatique non alcoolique (NAFLD), pour lesquels la prévalence demeure alarmante, les mécanismes moléculaires encore méconnus, et les traitements peu efficaces. L’hypothèse centrale du présent projet de recherche est que la combinaison d’anomalies génétiques et nutritionnelles affecte la sensibilité de l’insuline intestinale, ce qui conduit à une surproduction des chylomicrons, à une dyslipidémie, une insulinorésistance systémique et des répercussions sur le foie. Dans cet agencement, le foie développe une NAFLD progressive, impliquant plusieurs sentiers métaboliques intrinsèques et des mécanismes comprenant le stress oxydatif, l’inflammation et l’insulinorésistance. En revanche, des nutriments, comme les acides gras polyinsaturés (AGPI) n-3, peuvent présenter des effets bénéfiques en ciblant plusieurs circuits pathogéniques. L’objectif central de cette thèse consiste à : (i) Démontrer que des gènes codant pour les protéines intestinales clés associées au transport des lipides, comme c’est le cas du Sar1b GTPase, peuvent interagir avec l’environnement nutritionnel pour produire l’obésité et des dérangements cardiométaboliques, incluant la NAFLD ; (ii) Explorer les mécanismes hépatiques sous-jacents à la NAFLD; et (iii) Identifier les effets et les cibles thérapeutiques des AGPI n-3 sur la NAFLD. Ces objectifs seront soutenus par une prospection de la littérature scientifique disponible dans les champs du syndrome métabolique et de la NAFLD afin d’en disséquer les forces et les faiblesses au bénéfice de la communauté scientifique. À ces fins, nous avons utilisé des modèles animaux et cellulaires manipulés génétiquement, des animaux exposés de façon chronique à des diètes riches en lipides, des spécimens de tissus hépatiques obtenus durant la chirurgie bariatrique d’obèses morbides, et une cohorte d’adolescents obèses souffrant de NAFLD et qui seront traités avec les AGPI n-3. L’ensemble de nos expériences ont soutenu nos hypothèses et ont mis en évidence les concepts et mécanismes suivants : (i) L’abondance d’un gène crucial (notamment Sar1b GTPase) au niveau de l’intestin, en synergie avec une alimentation obésogène, perturbe l’homéostasie locale et mène à des dérangements cardiométaboliques, défiant même l’axe intestin-foie ; (ii) Les causes développementales de la NAFLD comprennent les dérangements du métabolisme des acides gras, du statut redox et inflammatoire, de la sensibilité à l’insuline, des sentiers métaboliques (lipogenèse, β-oxydation, gluconéogenèse) et de l’expression des facteurs de transcription; et (iii) Les AGPI n-3 représentent un robuste arsenal thérapeutique des dérangements cardiométaboliques, notamment la NAFLD, en agissant sur plusieurs cibles pathogéniques. Globalement, nos résultats montrent le rôle indéniable de l’intestin comme organe insulino-sensible interagissant de près avec les aliments et capable de déclencher des troubles métaboliques. Plusieurs mécanismes gouvernant les désordres métaboliques ont été dévoilés par nos travaux. En outre, nos études cliniques ont pointé la force thérapeutique des AGPI n-3 qui interviennent dans de nombreux processus de régulation métaboliques et notamment dans le stress oxydatif et l’inflammation., The digestive tract and liver interact continuously, not only through anatomical connections, but also through physiological / functional links. The imbalance of the intestine-liver axis is increasingly emerging as a key factor in cardiometabolic disorders (CMD), namely obesity, metabolic syndrome, type 2 diabetes, and non alcoholic fatty liver disease (NAFLD), for which prevalence remains alarmingly high, molecular mechanisms are poorly understood, and treatments are largely inefficient. The central hypothesis of this research project is that the combination of genetic and nutritional abnormalities affect intestinal insulin sensitivity, leading to overproduction of chylomicrons, dyslipidemia, systemic insulin resistance and dysregulated intestine-liver axis. In this situation, the liver develops progressive NAFLD, implicating several intrinsic metabolic pathways and mechanisms, including oxidative stress, inflammation and insulin resistance. In contrast, functional foods, such as omega-3 polyunsaturated fatty acids (n-3 PUFA), may have beneficial effects by targeting several pathogenic pathways. The central objective of this thesis is to: (i) Demonstrate that genes coding for key intestinal proteins associated with lipid transport, as is the case with Sar1b GTPase, can interact with the nutritional environment to produce obesity and CMD, including hepatic steatosis; (ii) explore the mechanisms underlying NAFLD; and (iii) identify the effects and therapeutic targets of n-3 PUFA. These objectives will be supported by a critical review on metabolic syndrome and NAFLD in order to dissect their strengths and weaknesses for the benefit of the scientific community. For these purposes, we used genetically engineered animal and cell models, chronic exposure of animals to high-fat diets, liver tissue specimens obtained during bariatric surgery of morbidly obese patients, and treatment of obese NAFLD adolescents with n-3 PUFA. All of our experiments supported our hypotheses and highlighted the following concepts and mechanisms: (i) The abundance of a crucial gene (notably Sar1b GTPase) in the intestine, in synergy with an obesogenic diet, disrupts local homeostasis and leads to CMD, challenging even the intestine-liver axis; (ii) Developmental causes of NAFLD include disturbances of fatty acid metabolism, redox and inflammatory status, insulin sensitivity, metabolic pathways (lipogenesis, β-oxidation, gluconeogenesis), and expression of transcription factors; and (iii) n-3 PUFA represent a robust therapeutic arsenal of CMD, including NAFLD, by acting on several pathogenic targets. Overall, our results show the undeniable role of the intestine, as an insulin-sensitive organ, interacting closely with obesogenic food, and capable of triggering CMD, including perturbations of the intestine-liver axis. Several mechanisms governing metabolic disorders have been unveiled by our work. In addition, our clinical studies have pointed to the therapeutic potential of n-3 PUFA involved in many regulatory processes, including oxidative stress and inflammation.

Non-Alcoholic Fatty Liver Diseases (NAFLD) is a major public health concern with global prevalence of 25%. NAFLD is increasingly recognized as the most common chronic liver disease. The spectrum of the hepatic diseases ranges from steatosis (fatty liver) to nonalcoholic steatohepatitis (NASH) (steatosis, inflammation, liver injury) and subsequently to the activation of fibrogenic pathways, which correlates with a high risk of developing cirrhosis and hepatocellular carcinoma. The treatment of NASH is still limited because of the lack of effective pharmacological treatment as well as lack of effective and practical diagnostic tools. NAFLD is associated with obesity and metabolic syndrome and the presence of type 2 diabetes can increase the risk of liver diseases. Inversely, NAFLD is also a risk factor for many metabolic diseases, including type 2 diabetes and cardiovascular disease. The mechanisms underlying the progression of NAFLD are multifactorial and not well understood. Better understand the pathogenesis of NASH will lead to identify new potential therapeutic targets. One part of my work focused on clinical aspects in a large cohort of obese patients regarding factors that potentially regulate the development of NAFLD. We here reported that: 1) binge eating disorders were associated as expected with obesity but independently of NAFLD severity and 2) the circulating level of vitamin D, well-known to display anti-oxidant and anti-fibrotic properties, was not diminished with NAFLD severity.In parallel, we investigated the expression level and the role of a new "hepatokine", Fibronectin type III domain containing 5 (FNDC5) and its soluble form irisin in NAFLD. We reported that hepatic expression of FNDC5 increased in the presence of hepatic steatosis and liver injury without impacting the systemic level of irisin in mouse models of NAFLD and in obese patients. This local production of FNDC5 was mainly influenced by genotoxic stress and behaved as local protective factor against NAFLD by preventing hepatocyte steatosis and injury. Finally, the single nucleotide polymorphism (SNP) FNDC5 rs3480 was protective of severe steatosis independently of PNPLA3 SNP rs738409, age, female, BMI and type 2 diabetes in a cohort of 613 patients. In conclusion, our human and experimental data strongly suggest that hepatic expression of FNDC5 could dampen the development of NAFL by negatively regulating steatogenesis and hepatocyte death., Les maladies du foie gras non alcooliques (NAFLD) constituent un problème majeur de santé publique avec une prévalence mondiale d’environ 25 %. La NAFLD est de plus en plus reconnue comme la maladie hépatique chronique la plus répandue. Le spectre des maladies hépatiques va de la stéatose (stéatose hépatique) à la stéato-hépatite non alcoolique (NASH) (stéatose, inflammation, lésion hépatique) et par la suite à l'activation des voies de la fibrogenèse, qui sont associées à un risque élevé de développer une cirrhose et un carcinome hépatocellulaire. Le traitement de la NASH est encore limité en raison de l’absence de traitement pharmacologique efficace ainsi que du manque d’outils de diagnostic efficaces et pratiques. La NAFLD est associée à l'obésité et au syndrome métabolique et la présence d'un diabète de type 2 peut augmenter le risque de maladies du foie. Inversement, la NAFLD est également un facteur de risque pour de nombreuses maladies métaboliques, notamment le diabète de type 2 et les maladies cardiovasculaires. Les mécanismes sous-jacents à la progression de la NAFLD sont multifactoriels et mal compris. Mieux comprendre la pathogenèse de la NASH amènera à identifier de nouvelles cibles thérapeutiques potentielles.La première partie de mon travail, portant sur des aspects cliniques, a évalué des facteurs pouvant être associés au développement de la NAFLD : 1) les troubles du comportement alimentaire de type boulimie, étaient associés, comme on pouvait s'y attendre, à l'obésité, mais indépendamment de la gravité de la NAFLD et 2) la concentration sérique de la vitamine D, qui présente des effets antioxydants et anti-fibrosants, n’était pas diminuée avec la sévérité des NAFLD.En parallèle, nous avons étudié le niveau d’expression et le rôle d’une nouvelle « hépatokine », Fibronectin type III domain containing 5 (FNDC5) et sa forme soluble, l’irisine, dans le développement de la NAFLD. Chez l’Homme et dans des modèles murins de NAFLD, l’expression hépatique de FNDC5 était augmentée avec la stéatose et la souffrance hépatocytaire tandis que la concentration circulante d’irisine n’était pas modifiée. Cette production locale de FNDC5 était principalement influencée par un stress génotoxique et se comportait comme un facteur de protection local contre la NAFLD en empêchant la stéatose et les lésions des hépatocytes. Enfin, le polymorphisme rs3480 de FNDC5 était protecteur de la stéatose sévère indépendamment du SNP rs738409 de PNPLA3, de l’âge, du sexe féminin, de l’indice de masse corporelle et de la présence d’un diabète de type 2 dans une cohorte de 613 patients. En conclusion, nos données humaines et expérimentales suggèrent fortement que l’expression hépatique de FNDC5 pourrait ralentir le développement des NAFLD en régulant négativement la stéatogénèse et la mort hépatocytaire.

Ce numéro est constitué d’articles issus du colloque « Contaminants alimentaires – approches émergentes pour connaître et prévenir le risque » qui s’est tenu à Paris le 19 décembre 2018.; Through our environment, we are continuously exposed to chemical mixtures. Answering the questionof this impact on our health and that of the environment remains a challenge. The risk assessment ofchemicals for regulatory purposes is mainly based on the assessment of individual products. Whilemethodologies and guidance for assessing risks related to combined exposure to multiple chemicalshave been developed for different regulatory sectors, there is no harmonised and consistent approachto assessing and managing these risks.The EuroMix program develops a strategy of, testing, bioassays and models to assess the risks ofchemical mixtures with a focus on: - Reduction of uncertainties through the generation of hazard data through in vitro testing,- Prioritisation according to hazard (in-silico tools) and/or exposure considerations,- Study of the extrapolation of in vitro tests as reliable alternatives for animal testing,- Development of PB-TK models for in vitro/in vivo extrapolation in the risk assessment ofmixtures,- Development of hazard and exposure models for risk assessment and application of thesemodels to newly generated data.; Par notre environnement, nous sommes continuellement exposés à des mélanges de produitschimiques. Répondre à la question de cet impact sur notre santé et celle de l’environnement reste unchallenge, l'évaluation des risques des produits chimiques à des fins réglementaires reposantprincipalement sur l'évaluation des composés pris individuellement. Si des méthodologies et lesdémarches pour évaluer les risques liés à l'exposition combinée à de multiples produits chimiques ontété élaborées pour différents secteurs réglementaires, il n'existe pas d'approche harmonisée etcohérente pour l'évaluation et la gestion de ces risques.Le programme EuroMix1 développe une stratégie de tests, bio-essais et modèles pour évaluer lesrisques des mélanges chimiques en mettant l'accent sur :- La réduction des incertitudes par la production de données sur les dangers par des essais invitro,- L’établissement des priorités en fonction du danger (outils in-silico) et/ou sur des considérationsrelatives à l'exposition,- L’étude de l’extrapolation des essais in vitro comme solutions de rechange fiables pour lesessais sur les animaux,- Le développement de modèles PB-TK d’extrapolation in vitro/in vivo dans l'évaluation desrisques liés aux mélanges,- L’élaboration de modèles de danger et d'exposition pour l'évaluation des risques et appliquerces modèles sur les données nouvellement générées.

Two projects were developed during this CIFRE Thesis within a collaboration between the Institute Necker Enfants Malades (INEM) and the company SANOFI. 1) Lipin1 deficiency in skeletal muscle Lipin1 deficiency is a rare disease that leads to a very severe and early rhabdomyolysis in patients. This pathology is characterized histologically by an important accumulation of lipids in the muscles and in the heart of patients deficient in Lipin1. In order to study and understand the link between Lipin1 deficiency, Rhabdomyolysis and this intramuscular lipid accumulation we have developed a transgenic mouse model deficient in Lipin1 specifically in skeletal muscle. Characterization of this model revealed a severe myopathy in Lipin1-deficient mice, characterized by a decrease in muscle strength, muscle regeneration and centronucleated fibers, and as seen in patients, there is an important accumulation of lipids in the muscle. We have shown that Lipin1 deficiency leads to a significant morphological and functional alteration of the ER in skeletal muscle, which leads to an important ER stress. We have also shown that this stress activates ER residential proteins SREBPs that induce an important lipogenic program in the cell leading to an important synthesis of neutral lipids in these deficient muscles. We also hypothesized that this ER stress could lead to a significant mitochondrial dysfunction. Our analyses revealed that the mitochondrial network is altered and fragmented in the Lipin1 deficient muscles. This mitochondrial dysfunction can also explain the accumulation of lipids, that are less used by dysfunctional mitochondria. In order to consolidate this mechanism, we treated mice with TUDCA in order to relieve the ER stress. TUDCA improved muscle strength in Lipin1-deficient mice and reduced lipid accumulation. 1) Lipin1 deficiency in the heart The aim of the second project was to focus on cardiac steatosis, which affects a proportion of patients with type 2 diabetes. This cardiac steatosis has also been described in animal models of diabetes. Lipin1 deficiency leads also to an accumulation of lipids in the heart of patients. In addition, it has been shown that the enzymatic activity of Lipin1 called PAP1 is decreased in the heart of type 2 diabetic patients and also in the heart of ZDF rats which are diabetic and obese.xFor these two reasons, in order to focus on the development of cardiac steatosis in a diabetic background, we have developed a model of Lipin1 deficiency in the heart, and we characterized it at different ages. We have shown that, as in patients, Lipin1 deficiency in the heart, leads to a significant accumulation of lipids in the myocardium, this accumulation follows a maximal plateau until about 3 months of age. Then this accumulation of lipids tends to decrease. An echocardiographic characterization performed in mice revealed a decrease in the ejection fraction, indicating a systolic dysfunction which aggravates with age. We then performed transcriptomic analyzes, that allowed us to identify some interesting targets, that are currently under investigation in SANOFI. This model of cardiac steatosis also permitted us to test in our model pharmacological molecules developed by SANOFI. The physiological reversion of cardiac steatosis is in itself very interesting, so we decided to also perform transcriptomic analyzes at the age of 6 months to see the evolution of the transcriptomic signature between the age when the steatosis is maximal (3 months) and the age of 6 months when we have a significant physiological decrease in the amount of lipids in the heart of mice deficient in Lipin1. These experiments are currently under analysis in SANOFI.; Deux projets ont été développés au cours de cette thèse CIFRE dans le cadre d'une collaboration entre l'Institut Necker des Enfants Malades (INEM) et la société SANOFI. 1) La déficience en Lipin1 dans le muscle squelettique La déficience en Lipin1 est une maladie rare qui entraîne une rhabdomyolyse très sévère et précoce chez les patients. Cette pathologie est caractérisée par une importante accumulation de lipides dans les muscles des patients déficients en Lipin1. Afin d'étudier et de comprendre le lien entre la déficience en Lipin1, la Rhabdomyolyse et cette accumulation intramusculaire de lipides, nous avons développé un modèle de souris transgéniques déficientes en Lipin1 dans le muscle squelettique. La caractérisation de ce modèle a révélé une myopathie sévère chez les souris, caractérisée par une diminution de la force musculaire, par une régénération musculaire et des fibres centronucléées, et par une accumulation importante de lipides dans le muscle. Nous avons montré que la déficience en Lipin1 entraîne une altération morphologique et fonctionnelle du Reticulum Endoplasmique (RE) dans le muscle squelettique, ce qui conduit à un stress du RE important. Nous avons également montré que ce stress active les protéines SREBPs, qui induisent un important programme lipogénique dans la cellule conduisant à une importante synthèse de lipides neutres dans ces muscles déficients. Nos analyses ont également révélé que le réseau mitochondrial est altéré et fragmenté dans les muscles déficients en Lipin1. Ce dysfonctionnement mitochondrial peut également expliquer l'accumulation de lipides, moins utilisés par les mitochondries dysfonctionnelles. Afin de consolider ce mécanisme, nous avons traité des souris avec le TUDCA afin de soulager le stress du RE. Le TUDCA a amélioré la force musculaire chez les souris déficientes en Lipin1 et a réduit l'accumulation de lipides. 2) La déficience en Lipin1 dans le cœur Le deuxième projet s'intéressait à la stéatose cardiaque, qui affecte une proportion de patients atteints de diabète de type 2. Cette stéatose cardiaque a également été décrite dans des modèles animaux de diabète. La déficience en Lipin1 conduit également à une accumulation de lipides dans le cœur des patients. De plus, il a été montré que l'activité enzymatique de Lipin1 appelée PAP1 est diminuée dans le cœur des patients diabétiques de type 2 ainsi que dans le cœur des rats ZDF diabétiques et obèses. Pour ces deux raisons, afin de se concentrer sur le développement de la stéatose cardiaque dans un contexte diabétique, nous avons développé un modèle de déficience en Lipin1 dans le cœur, et nous l'avons caractérisé à différents âges. Nous avons montré que la déficience en Lipin1 dans le cœur conduit à une accumulation importante de lipides dans le myocarde, cette accumulation suit un plateau maximal jusqu'à environ 3 mois. Ensuite cette accumulation de lipides a tendance à diminuer. Une caractérisation échocardiographique réalisée chez la souris a révélé une diminution de la fraction d'éjection, indiquant un dysfonctionnement systolique qui s'aggrave avec l'âge. Nous avons ensuite effectué des analyses transcriptomiques, ce qui nous a permis d'identifier des cibles intéressantes, actuellement en étude à SANOFI. Ce modèle de stéatose cardiaque nous a également permis de tester dans notre modèle des molécules pharmacologiques développées par SANOFI. La réversion physiologique de la stéatose cardiaque est en soi très intéressante, nous avons donc décidé d'effectuer également des analyses transcriptomiques à l'âge de 6 mois où il ne reste que peu de lipides. Ces expériences sont actuellement en cours d'analyse à SANOFI.

La stéatose hépatique aiguë gravidique est une pathologie grave menaçant le pronostic vitale et maternel. Le diagnostic doit être évoqué chez une femme présentant des nausée et vomissement pendant le 3ème trimestre. Une prise en charge précoce améliore le pronostic fœtal et maternel. Nous rapportons le cas de deux patientes présentant une SHAG, pris en charge à la maternité souissi, rabat, où on admet la voie basse, avec une surveillance clinique et biologique et avec une prise en charge des complications, et rappelons au travers de ce travail, la physiopathologie, les critères diagnostiques et les modalités de prise en charge de cette pathologie., Journal Marocain des Sciences Médicales, Vol. 21, No 3

L’incapacité du foie à répondre aux stress métaboliques comme la suralimentation en gras provoque le développement de la stéatose hépatique non alcoolique (SHNA). C ‘est une maladie du foie qui touche 25% de la population des pays industrialisés. Cette maladie peut progresser à un stade plus sévère : la stéatohépatite, caractérisée par de l’inflammation, du stress oxydatif et de la fibrose. La stéatose hépatique non alcoolique est fortement associée avec le développement de l’insulino-résistance, c’est-à-dire, l’incapacité du corps de répondre à l’insuline, et avec le diabète de type 2. La SHNA est difficile à diagnostiquer de manière précoce et nous manquons d’outils pour élucider les mécanismes moléculaires sous-jacents au développement de la maladie. Peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1-alpha (PGC1A) est un co-activateur transcriptionnel, capable de se lier à des facteurs de transcriptions pour réguler leur fonction en réponse à des stress métaboliques. La perte d’expression de PGC1A dans le foie a été associée avec le développement d’insulino-résistance et de SHNA. De plus, un variant génétique de PGC1A est aussi associé avec le développement du diabète de type et de la SHNA. Cependant, le rôle causal de PGC1A dans le développement de ces maladies, et son rôle dans les mécanismes moléculaires hépatiques de réponse à l’insuline n’est pas clair. Nous avons fait l’hypothèse que le manque d’expression de PGC1A dans le foie aggrave la progression de la SHNA vers la stéatohépatite et affecte la réponse du foie à l’insuline. Dans cette thèse, nous montrons que PGC1A est nécessaire pour la réponse hépatique au stress oxydatif- notamment chez les souris femelles. En effet, PGC1A est capable de se lier au récepteur à l’œstrogène pour induire la réponse antioxydante de la cellule. L’absence de PGC1A provoque d’importantes lésions hépatiques l’apparition de stéatohépatite sévère. Nous montrons également que PGC1A contrôle la réponse hépatique à l’insuline lors du jeûne, en modifiant les protéines adaptatrices Insulin Receptor Substrate 1 et Insulin Receptor Substrate 2. Enfin, par des méthodes de protéomique, nous avons découvert des biomarqueurs potentiels de la SHNA. Cela permettrait le développement d’un diagnostic précoce de la maladie dans une population à risque. En conclusion, cette thèse apporte une nouvelle lumière sur l’activité de PGC1A dans le foie en réponse au stress métabolique et sur son importance pour la santé du foie., The inability of the liver to respond to metabolic stresses such as high fat diets causes the development of non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD). It is a liver disease that affects 25% of the population of industrialized countries. It can progress to a more severe stage: steatohepatitis, characterized by inflammation, oxidative stress and fibrosis. Non-alcoholic fatty liver disease is strongly associated with the development of insulin resistance, that is, the body's inability to respond to insulin, and with type 2 diabetes. NAFLD is difficult to diagnose early and we lack tools to understand molecular mechanisms underlying its progression. Peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1-alpha (PGC1A) is a transcriptional coactivator, able to bind to transcription factors to regulate their function in response to metabolic stresses. Reduction of PGC1A expression in the liver has been associated with the development of insulin resistance and NAFLD. Moreover, genetic variants of PGC1A are also associated with the development of type diabetes and NASH. However, the causal role of PGC1A in the development of these diseases, and its role in molecular mechanisms of hepatic insulin response are unclear. We hypothesized that lack of PGC1A expression in the liver aggravates the progression of NAFLD to steatohepatitis and affects the liver's response to insulin. In this thesis, we show that PGC1A is necessary for the hepatic response to oxidative stress - especially in female mice. Indeed, PGC1A is able to bind to the estrogen receptor to induce the cellular antioxidant response. Lack of PGC1A causes liver damage and the appearance of severe steatohepatitis. We also show that PGC1A controls the hepatic response to insulin during fasting by modifying the adapter proteins Insulin Receptor Substrate 1 and Insulin Receptor Substrate 2. Finally, by proteomic methods, we have discovered potential biomarkers of NAFLD. This would allow the development of an early diagnosis method of the disease. In conclusion, this thesis sheds new light on the activity of PGC1A in the liver in response to metabolic stress and its importance for liver health.

The frequency of hepatic steatosis in the population and its potential complications require knowing how to diagnose and quantify this lesion in clinical practice. Ultrasound allows semi-quantification based on the liver/kidney signal ratio. The CT scanner has a marginal rule, mainly before surgery of resection and before transplantation. MRI is the technique of choice for quantification, using simple multi-echo techniques and manufacturer or free softwares like MRQuantif. The quantification of steatosis in MRI should always be associated with iron quantification to avoid errors. The discovery of steatosis must systematically lead to the search for hepatic fibrosis, at best at the same time using ultrasonore elastometry. Incidental finding of steatosis must be semi-quantified and noted in the report. The indications to look after hepatic steatosis are the existence of liver biological abnormalities, obesity, type 2 diabetes, metabolic syndrome or the existence of cardiovascular risks. In this situation, ultrasound technic is recommended for the evaluation of steatosis. When accurate quantification of steatosis is required, the currently recommended tool is MRI with the multi-echo technique., La fréquence de la stéatose hépatique et ses complications potentielles imposent de savoir diagnostiquer et quantifier cette lésion au quotidien. L’échographie permet une semi-quantification en se basant sur le rapport de signal foie/rein. Le scanner à une place marginale principalement avant chirurgie et avant transplantation dans les bilans des donneurs potentiels. L’IRM est l’examen de quantification, par le biais des techniques simples multiéchos et les logiciels constructeurs ou publics type MRQuantif. La quantification de la stéatose en IRM doit toujours être associée à celle du fer pour éviter les erreurs de quantification. La découverte d’une stéatose doit entraîner systématiquement la recherche d’une fibrose hépatique, au mieux dans le même temps en utilisant les outils d’élastométrie ultrasonore. Outre, la découverte fortuite qui doit être semi-quantifiée et notée dans le compte rendu, les indications de diagnostic de stéatose hépatique sont l’existence de perturbations du bilan biologique hépatique, d’une obésité, d’un diabète de type 2, d’un syndrome métabolique ou de risques cardiovasculaires. Dans cette situation, l’échographie est l’examen recommandé pour l’évaluation de la stéatose. Lorsqu’une quantification précise de la stéatose est nécessaire, l’outil actuellement recommandé est l’IRM avec la technique multiéchos.