Benefits and Limits of Egg Yolk vs. Serum Samples for Avian Influenza Virus Serosurveillance.

Serologic tests are a valuable tool for retrospective surveillance of avian influenza viruses (AIV) and monitoring of postvaccination host immune response. Yet collection of serum samples, particularly in adult breeder chickens, is laborious, intrusive to birds, and may pose a serious risk to the biosecurity of a flock. In this study we compared the level of AIV-specific antibody titers in eggs and serum samples obtained from broiler breeder chickens vaccinated at 6, 12, and 18 wk of age with H5N2-inactivated vaccine. Nucleocapsid protein-specific ELISA and hemagglutination inhibition test (HI) against homologous as well as heterologous antigens were used. The eggs and sera were collected at 22, 30, 45, and 50 wk of age (i.e., 4, 12, 27, and 32 wk after the third and final immunization, respectively). Using ELISA, the number of positive egg yolk samples decreased over time after vaccination, from 97% to 47%, while the seropositivity rate of serum samples was 97%-100% during the whole investigation period. No antibody titers were detected in egg white. By HI, antibody titers in serum samples were higher than in egg yolk samples. Compared to the homologous H5N2 antigen, significantly lower HI titers were obtained by using a heterologous H5N1 virus of clade 2.2.1.2. In addition, no HI titers were detected in egg yolk and/or serum samples tested against the antigen of an Egyptian H5N1 antigenic drift variant of clade 2.2.1.1. This study indicates that egg yolk may be used to monitor the postvaccination immune status of broiler breeder chickens and retrospective serosurveillance-by HI when a matching antigen is available as well as by ELISA-particularly for up to 12 wk postvaccination. Nota de investigación- Ventajas y limitaciones del uso de yema de huevo en comparación con muestras de suero para la serovigilancia para el virus de la influenza aviar. Las pruebas serológicas son una herramienta valiosa para la vigilancia retrospectiva de los virus de la influenza aviar (AIV) y para dar seguimiento a la respuesta inmune del huésped después de la vacunación. Sin embargo, la colección de muestras de suero, especialmente en reproductoras adultas, es laboriosa, causa estrés para las aves y puede representar un grave riesgo para la bioseguridad de una parvada. En este estudio se comparó el nivel de los títulos de anticuerpos específicos contra el virus de influenza aviar en huevos y en muestras de suero obtenidas de pollos de engorde vacunados a las seis, doce y 18 semanas de edad con una vacuna inactivada con el subtipo H5N2. Se utilizó una prueba de ELISA específica para la nucleocápside viral y una prueba de inhibición de la hemaglutinación (HI) contra antígenos homólogos y heterólogos. Las muestras de huevo y suero se recogieron a las 22, 30, 45 y 50 semanas de edad (es decir, a las cuatro, doce, 27, y 32 semanas después de la tercera y última inmunización, respectivamente). Mediante la prueba de ELISA, el número de muestras de yema de huevo positivas disminuyó con el tiempo después de la vacunación, del 97% al 47%, mientras que la tasa de seropositividad de las muestras de suero fue del 97% −100% durante todo el período de investigación. No se detectaron títulos de anticuerpos en la clara de huevo. Por inhibición de la hemoaglutinación, se observó que los títulos de anticuerpos en las muestras de suero fueron más altas que en las muestras de yema de huevo. En comparación con el antígeno H5N2 homólogo, se obtuvieron títulos de inhibición de la hemoaglutinación significativamente más bajos contra un virus H5N1 heterólogo del clado 2.2.1.2. Además, no se detectaron títulos de inhibición de la hemoaglutinación en la yema de huevo y/o en las muestras de suero analizadas contra el antígeno de una variante por deriva antigénica de un virus H5N1 egipcio del clado 2.2.1.1. Este estudio indica que la yema de huevo puede ser usada para determinar el estado inmune después de la vacunación de pollos de engorde y reproductoras para la vigilancia serológica retrospectiva por inhibición de la hemoaglutinación cuando un antígeno homólogo está disponible, así como por ELISA, particularmente para un máximo de doce semanas después de la vacunación. [ABSTRACT FROM AUTHOR]