Utjecaj rekombinantnog humanog koštanog morfogenetskog proteina - 7 na ekspresiju gena u cementoblastima

Do sada u literaturi nema podataka o učinku molekule rhBMP-7 na cementoblaste. Kako je rhBMP-7 izrazito potentna molekula za regeneraciju parodontnih tkiva, po prvi smo put istražili molekularne mehanizme djelovanja rhBMP-7 na cementoblaste i poticanja cementogeneze. Kako bismo ispitali proliferativan učinak rhBMP-7 na cementoblaste, napravljen je MTT test. Rezultati su pokazali proliferativan učinak rhBMP-7 na cementoblaste. Testom mineralizacije ispitali smo sposobnost cementoblasta da mineraliziraju nakon primjene rhBMP-7. Rezultati su pokazali da rhBMP-7 potiče mineralizaciju stanica. Kako bismo ispitali koji su geni uključeni u proces diferencijacije stanica, proveli smo qPCR analizu. Ispitali smo ranu gensku ekspresiju 15 različitih gena uključenih u mineralizaciju tkiva, sintezu kolagena te stvaranje izvanstaničnog matriksa. Rezultati su pokazali aktivaciju gena odgovornih za procesuiranje kolagena tip I, aktivaciju transkripcijskog gena Osterix-a, OPG-a, kao i smanjenu ekspresiju gena za BMP-4 i BMP-6 te Chordin. Kako bismo proširili saznanja o proteinskom profilu promjena nakon primjene rhBMP-7, prvi je put napravljena proteomska analiza staničnih lizata cementoblasta. Analiza rezultata pokazala je identifikaciju brojnih kolagena, nekih po prvi put identificiranih u cementoblastima te proteina izvastaničnog matriksa. Posebno zanimljiv nalaz je da smo po prvi put identificirali PCPE1 protein u cementoblastima, koji je ključan u procesuiranju kolagena tipa I i stvaranju izvanstaničnog matriksa mineraliziranih tkiva. Ovi rezultati pokazuju da rhBMP-7 djeluje na mineralizaciju cementoblasta aktiviranjem sinteze kolagena tip I preko PCPE1 i BMP-1, aktiviranjem transkripcijskog čimbenika Osterix-a, smanjenjem ekspresije drugih BMP-a i inhibitora BMP-a Chordina.