Reprogrammation de la méthylation de l’ADN des cellules germinales au cours du développement testiculaire chez Capra Hircus

Chez les mammifères, lors de leur différenciation, les cellules germinales font l’objet d’une reprogrammation de leur épigénome. Un effacement quasi total de la méthylation de l’ADN est observé dans les cellules germinales, lorsque celles-ci colonisent les futures gonades. Certaines régions du génome conservent néanmoins de la méthylation à des degrés divers en fonction du sexe des cellules germinales (XX ou XY) et de l’espèce considérée [1,2]. Ces régions où la méthylation est « non-effacée » pourraient alors être porteuses d’informations transgénérationnelles. L’apposition d’une nouvelle signature épigénétique spécifique du sexe des cellules germinales se met ensuite en place à des stades différents dans le testicule (vie fœtale) ou l’ovaire (après la naissance) [3]. Ainsi, chez les mâles, la re-méthylation de l’ADN débute pendant la vie in utero et l’environnement maternel peut donc conditionner l’acquisition de l’information épigénétique qui sera transmise, plus tard, par les spermatozoïdes de l’adulte à sa descendance. Afin de mieux connaitre les étapes clés de la re-méthylation du génome chez les espèces d’élevage, nous nous proposons de caractériser la reprogrammation des cellules germinales mâles comparativement chez trois espèces de ruminants : bovin, ovin et caprin. Des analyses globales ont déjà permis de déterminer des stades d’intérêts, notamment dans l’espèce caprine. Afin de pouvoir analyser la méthylation de l’ADN à ces différents stades, une population de cellules germinales la plus pure possible doit être isolée à partir de testicules fœtaux. Différentes techniques ont été testées, notamment la microdissection par capture laser (LCM, Laser Capture Microdissection). Un second challenge consistera ensuite à miniaturiser les procédés d’analyse, notamment ceux concernant l’étude de la méthylation (LCM-RRBS). L’extraction simultanée de l’ADN et de l’ARNm issus des cellules germinales microdisséquées permettra de comparer l’état épigénétique et transcriptomique des cellules germinales XY au cours des différentes étapes de leur différenciation.