Comparaison des techniques de culture et d’immuno-fluorescence dans l’étude de Bacteroides à pigmentation noire

The aim of that study was to compare culture and immunofluorescence (IF) methods to determine whether B.gingivalis and other B.P.B. can be detected in subgingival plaque of children.Samples were collected from the lingual sulcus of mandibular incisors, dispersed and diluted from 1 to 10-5; 15 µl of each dilution were plated on Trypticase soja agar and Todd-Hewitt agar supplemented with blood, Vit K 1 and hemin. The same dilutions were smeared on glass slides for indirect IF using an species-specific polyclonal rabbit whole cell antiserum to B.gingivalis ATCC 33 277. Representative colonies producing brown-to-black pigment were isolated, purified and further characterized.Using culture, BPB were detected in 46% of children (19/41). B.gingivalis was cultured from 6 children.Using immuno-fluorescence test (Fluotec*), 90% of 309 children 3 years old and more harbour detectable B.P.B., but B.gingivalis don’t react with that test. B.gingivalis were detected by immuno-fluorescence in 72% of children (30/41) in the incisor plaque.
L’objectif de cette étude est de comparer les techniques de culture et d’immuno-fluorescence dans leurs capacités à retrouver B.gingivalis et les autres B.P.N. dans la plaque sous gingivale de l’enfant.Les échantillons sont recueillis au niveau du sulcus lingual des incisives mandibulaires, dispersés et diluís de 1 à 10-5; 15 µl de chaque dilution sont étalés sur milieux gélose Trypticase-soja et Todd-Hewitt enrichis de sang, de Vit K 1 et d’hémine. Les mêmes dilutions sont déposées sur lames de verre pour immunofluorescence indirecte en utilisant des antisérum cellules entières polyclonaux spécifiques contre B.gingivalis ATCC 33 277. Les colonies représentatives à coloration brun-noire sont isolées, purifiées et identifiées.Par culture, BPN est retrouvé chez 46% des enfants (19/41). B.gingivalis est cultivé à partir de 6 enfants.Par un test d’immuno-fluorescence (Fluotec*), 90% de 309 enfants de 3 ans et plus présentent des B.P.N., mais B.gingivalis n’est pas retrouvé par ce test. B.gingivalis est retrouvé par immuno-fluorescence chez 72% des enfants (30/41) dans la plaque des incisives.