Conexión de la ruta de proteinquinasa C con la respuesta a estrés genotóxico

El mantenimiento de la integridad genómica es un aspecto crucial para la supervivencia celular. El checkpoint de integridad del DNA es el mecanismo de vigilancia encargado de detectar la presencia de daño en el DNA y poner en marcha una respuesta celular para mantener la estabilidad genómica. Los componentes centrales del checkpoint son las quinasas sensoras ATM y ATR (Tel1 y Mec1 en S. cerevisiae) y CHK1 Y CHK2 (Chk1 y Rad53 en levadura). La correcta activación del checkpoint depende de la actividad de proteína quinasa C (PKC), tanto en células de levadura como de mamíferos. En este trabajo se ha profundizado en la relación entre PKC y la maquinaria del checkpoint de integridad del DNA, así como en la regulación de la propia PKC en condiciones de estrés genotóxico. Se han caracterizado los determinantes estructurales de Pkc1 de levadura y las isoformas de mamíferos PKCδ y PKCθ que les permiten llevar a cabo su función en la activación de la respuesta a daño en el DNA. Asimismo, se ha visto que existe una regulación espacial de Pkc1, PKCδ y PKCθ en respuesta a estrés genotóxico y que se produce una acumulación nuclear tras la inducción de daño en el DNA. Por otra parte, se ha abordado la identificación de mediadores de PKC en su función en la activación del checkpoint de integridad del DNA, concluyendo que en ausencia de Pkc1 se produce una ineficiente activación de Mec1 que afectaría a la activación de Rad53, comprometiendo la respuesta mediada por el checkpoint de integridad del DNA. The maintenance of genomic integrity is a crucial aspect for cell survival. The DNA integrity checkpoint is the surveillance mechanism responsible for detecting the presence of DNA damage and launching a cellular response to maintain genomic stability. The central components of the checkpoint are the ATM and ATR sensor kinases (Tel1 and Mec1 in S. cerevisiae) and CHK1 and CHK2 (Chk1 and Rad53 in yeast). The correct activation of the checkpoint depends on the activity of protein kinase C (PKC), both in yeast and mammalian cells. In this work, the relationship between PKC and the DNA integrity checkpoint machinery has been deepened, as well as the regulation of PKC itself in conditions of genotoxic stress. The structural determinants of yeast Pkc1 and the mammalian PKCδ and PKCθ isoforms that allow them to carry out their function in the activation of the response to DNA damage have been characterized. Likewise, it has been seen that there is a spatial regulation of Pkc1, PKCδ and PKCθ in response to genotoxic stress and that a nuclear accumulation occurs after the induction of DNA damage. On the other hand, the identification of PKC mediators in their function in the activation of the DNA integrity checkpoint has been addressed, concluding that in the absence of Pkc1 there is an inefficient activation of Mec1 that would affect the activation of Rad53, compromising the response mediated by the DNA integrity checkpoint.