Estudio del mecanismo de resistencia transgénica a virus en plantas basado en fenómenos de silenciamiento génico: resistencia en plantas portadoras del gen hc-Pro del virus de la sharka (PPV)

Leída en la Universidad Complutense de Madrid. Facultad de Ciencias Biológicas. Departamento de Genética el 05-17-2005; 143 pp.
La mayoría de virus son capaces de inducir en las plantas a las que infectan una respuesta de silenciamiento génico, que sirve en la planta huésped como mecanismo natural de defensa frente al virus. A la vez, muchos virus con capaces de contraatacar produciendo proteínas que interfieren con el mecanismo de silenciamiento génico. El balance entre la inducción de la defensa antiviral de la planta, basada en silenciamiento génico, y la supresión de esta defensa por parte de los virus, es probablemente uno de los factores que determinan el curso de una infección viral. En la presente tesis se han empleado plantas transgénicas que expresan secuencias correspondientes a la proteína supresora de silenciamiento génico postranscripcional (PTGS) HC-Pro del virus de la sharka o Plum pox virus (PPV), con el fin de estudiar el proceso de silenciamiento génico inducido frente a este transgén y el posible efecto de la proteína HC-Pro, codificada por el propio transgén, sobre el silenciamiento génico y la resistencia a virus. Con nuestro sistema hemos pretendido aportar información sobre el posible balance existente entre la inducción y supresión de silenciamiento génico por parte de los virus. Se transformaron plantas de Nicotiana benthamiana con construcciones derivadas del gen HC-Pro de PPV. Se empleó una versión traducible (HCt), diseñada para producir proteína HC-Pro, y otra versión no traducible (HCn). Se determinaron los niveles de expresión de proteína HC-Pro en varias de las líneas HCt obtenidas, así como la capacidad de la proteína HC-Pro expresada de suprimir silenciamiento génico.La proteína HC-Pro expresada en varias líneas HCt no manifestó capacidad para interferir con el silenciamiento génico ensayado en varios sistemas. Se estudió la resistencia a PPV en las plantas transgénicas HC-Pro. Se identificaron dos líneas HCt y otras dos HCn con una alta proporción de plantas resistentes a PPV y a PVX
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