Orientierung von Helix 9 in membrangebundenem Colicin A untersucht mit ESR Spektroskopie und SDSL

Colicin A ist ein Bakteriocin, das von E.Coli Bakterien in wasserlöslicher Form gebildet wird und andere E.Coli Zellen durch Bildung eines spannungsgeregelten Ionenkanals in der cytoplasmatischen Membran abtötet. Untersucht wurde in vitro die Orientierung von Helix 9 zur Membran nach Bindung an DMPG Vesikel. Dazu wurde ESR Spektroskopie in Kombination mit Site Directed Spinlabeling (SDSL) eingesetzt. Es wurden fünf Positionen in Helix 9 und eine Position im Loop zwischen Helix 8 und 9 mit MTS-Spinlabel markiert. Dort wurde bei Raumtemperatur und 9GHz Meßfrequenz die Linienbreite der mittleren Linie als Mobilitätsparameter und die Zugänglichkeit für paramagnetische Quencher zum Nachweis von Membrankontakten bestimmt. Weiterhin wurde ein Polaritätsprofil bei 170K/120K durch Bestimmung der Tensorelemente Azz bei 9GHz/95GHz Meßfrequenz, so wie gxx bei 95GHz ermittelt. Die Ergebnisse zeigen eine parallele Positionierung von Helix 9 in der Kopfgruppenregion der Membran.